aislamiento e identificación morfológica de microorganismos que ...

QUE VIVEN EN EL HOGAR 1 Nicolás Araya (III° B)
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE MICROORGANISMOS
Agustín Brito (III° A)
INTRODUCCIÓN
La microbiología es el área de la ciencia que estudia a los microorganismos (también
llamados microbios), seres vivos invisibles a simple vista, es decir, los que solo pueden verse con
microscopio. La palabra microbiología se compone de tres partes de origen griego: micro o
“pequeño”, bios o “vida” y logía o “estudio” (estudio de la vida pequeña). Esta ciencia ha sido muy
importante en el desarrollo de la biotecnología, las industrias y la medicina, como por ejemplo el
empleo de levaduras en la fabricación de cerveza y pan de manera masiva o el estudio de
microorganismos patógenos, para desarrollar curas contra las enfermedades que provocan.
Generalmente el campo de estudio de la microbiología está concentrado en seres
compuestos de células que no están asociadas entre sí, estamos hablando de organismos
unicelulares o de pequeños conglomerados de células iguales. En esta clasificación entran las
especies eucariontes pertenecientes a los protistas (como las amebas), algunos hongos (como las
levaduras) y plantas (algas unicelulares).
Como en el estudio de todas las ciencias, la rigurosidad con la que se debe trabajar en
microbiología es muy alta, pues de lo contrario cualquier experimento, estudio o actividad que se
realice en general, arrojará resultados que no son fidedignos. Por ejemplo, cuando se trabaja con
cultivos de una especie, la esterilización (descontaminación) de los materiales e instrumentos del
laboratorio es de vital importancia, ya que un cultivo de algún microbio específico podría
contaminarse con otras especies arruinando toda la muestra. Esto es más importante aun cuando
1 Investigación realizada en la mención Ciencias del Programa Interdisciplinario de Investigación Escolar SS. CC.
Manquehue 2012. Profesora tutora: Pilar Rabanales.
1

los científicos trabajan con organismo patógenos (dañinos para la salud), por razones de
seguridad. Para ello existen procedimientos establecidos que deben ser seguidos al pie de la letra
si se quiere proceder de una manera seria, correcta y profesional.
Es importante resaltar que los microorganismos (generalmente bacterias y hongos) están
presentes en todos lados: en el aire, el piso, la comida, la suela de un zapato, un cepillo de dientes,
en el agua que bebemos, en el intestino humano y, por supuesto, en todas las casas del planeta.
Sin embargo no hay que preocuparse demasiado, pues la mayoría no es de carácter patógeno.
Actualmente en Chile no existen estudios sistemáticos que permitan conocer la diversidad de
cepas bacterianas o de levaduras que se encuentran presentes en la superficie de diversos lugares
del hogar u obtener un conocimiento claro de la gran riqueza o biodiversidad que existe desde un
punto de vista microbiológico. Al ser Chile un país que cubre una gran extensión de territorio, se
generan en éste diversos tipos de climas y microclimas que favorecen el aumento en la
abundancia y diversidad de la microflora, por ende es de gran importancia identificar y
caracterizar morfológicamente parte de esta microflora nativa presente en hogares del sector
oriente de Santiago.
Este trabajo, al considerar lo anterior, pretende dar a conocer las características
morfológicas de bacterias y levaduras presentes en la manilla del refrigerador de diferentes casas
muestreadas, como así también aquella microflora existente en la superficie de controles remotos.
Para ello se realizó un muestreo en 6 casas del sector oriente de Santiago, 3 ubicadas en la calle
San Francisco de Asís, sector San Carlos de Apoquindo, comuna de Las Condes y 3 ubicadas en la
calle Arquímides, comuna de Vitacura.
ANTECEDENTES GENERALES
Las Bacterias son los seres vivos más simples que existen en nuestro planeta y fueron la
primera forma de vida que existió. A lo largo de la historia fueron, y hoy siguen siendo, los seres
vivos más abundantes. Aunque existen muchos tipos de bacterias, todas comparten determinadas
características. Las bacterias constituyen organismos unicelulares procariotas, esto significa que
están formados por una sola célula que además no posee núcleo. Suele medir alrededor de un
2

micrómetro aunque se han encontrado algunas bacterias realmente gigantes, las cuales han
llegado a medir cerca de un milímetro 2 .
Las levaduras son hongos unicelulares anaeróbicas facultativas y pueden comportarse
como saprofitas o parásitas 3 donde la mayoría pertenece a la clase Ascomiceto 4 (Suárez-Lepe,
1997). Sus células son mucho más grandes que las de las bacterias y pueden distinguirse de ellas
no solo por su tamaño, sino que también por poseer sistemas membranosos intracitoplasmáticos
como núcleo, mitocondrias, entre otros. Normalmente poseen una forma celular oval, esférica o
casi cilíndrica. Están presentes en diversos hábitats, ya sea el suelo, el ser humano, el hogar, en
bayas de frutos, en diversos animales y en muchos otros ambientes, por lo que se pueden
considerar organismos inmensamente ubicuos.
1.- Clasificación taxonómica
En 1969, R. H. Whittaker propuso un sistema de clasificación de cinco reinos, donde los
microorganismos procariotas están incluidos en el reino Mónera. En 1978 Carl R. Woese propuso
elevar los tres tipos de células a un nivel por encima del reino llamado dominio y de ahí surgió el
sistema de clasificación de los tres dominios que se conocen en la actualidad donde los procariotas
unicelulares cuya pared contiene peptidoglicano se encuentran en el dominio Bateria 5 .
Para la clasificación de las levaduras se usa principalmente el enfoque clásico, centrado en
la morfología comparada, la fisiología y la genética convencional, con un gran énfasis en pruebas
bioquímicas de asimilación de sustratos carbonados, asimilación de nitratos y de ácidos orgánicos,
los cuales son altamente variables. De acuerdo a lo propuesto por Carl Woese en sus trabajos
taxonómicos, el dominio que alberga a las levaduras es el Eukarya. Este dominio incluye según el
esquema taxonómico tradicional empleado por Whittaker, a los hongos como un quinto reino
llamado Fungi. Estudios más específicos basados en las variaciones existentes en la reproducción
sexual separan al reino Fungi en cuatro divisiones 6 .
2 Madigan, M., Martinko, J. y Parker, J., Biología de los microorganismos, Madrid, Brock, Pearson, 2009.
3 Zúñiga, R., Aislamiento e identificación de Levaduras nativas etanogénicas, Santiago Universidad Metropolitana de
Ciencias de la Educación. Facultad de Ciencias Básicas, 2009.
4 Suárez-Lepe, J. A., “Identificación de levaduras. Seguimiento y control de implantación de las cepas seleccionadas”, en
Levaduras vínicas, vol. 10, Madrid, Ed. Mundi-Prensa. 1997, pp 243-269.
5 Pedrique de Aulacio, M., Reproducción y crecimiento bacteriano. Cátedra de Microbiología, Caracas, Facultad de
Farmacia UCV, 2008.
6 Ídem.
3

2.- Reproducción de las bacterias y levaduras
Las bacterias se reproducen por fisión binaria, un proceso en el cual de la división de una
célula resultan dos células. Usualmente ambas células hijas tienen el mismo tamaño y forma. Éste
es el proceso más común y sin duda el más importante en el ciclo de crecimiento de las
poblaciones bacterianas 7 .
Las levaduras poseen un ciclo de reproducción asexual por yemación o por fisión binaria.
Cuando la célula hija se separa de la célula madre, deja una cicatriz en esta última. Las yemas se
pueden ubicar en un polo de la célula o a lo largo de toda la superficie de la misma y algunas
presentan yemación unipolar, bipolar o multipolar. Algunas levaduras no se separan al término del
proceso de yemación y originan una estructura llamada pseudomicelio.
Las levaduras también se pueden reproducir de manera sexual, otorgando variabilidad
genética a la especie, para ello dos diferentes tipos de células haploides (“a” y “α”) se fusionan,
originando una célula diploide (2n), la cual entra en meiosis generando células haploides
genéticamente recombinadas.
3.- Metabolismo de las bacterias y levaduras
En el caso de las bacterias, como se encuentran en casi todos los ambientes, intervienen
en varios procesos biológicos. El crecimiento microbiano requiere la formación de estructuras
complejas como proteínas, ácidos nucleicos, polisacáridos y lípidos a partir de elementos
preformados en el medio de crecimiento o sintetizados por la propia célula. A su vez, este
crecimiento necesita de una fuente de energía para ser llevado a efecto, todo este proceso se
designa con el nombre de metabolismo, que se define como todas las transformaciones químicas
que ocurren en una célula 8 .
Las levaduras poseen un metabolismo central en donde la glucosa es la fuente de carbono
y de energía, el cual comienza con la glicólisis, la que corresponde al conjunto de reacciones que
permiten la transformación de glucosa a piruvato (Pyr), permitiendo la obtención de energía en
forma de ATP. El Pyr formado puede seguir dos rutas: ingresar al ciclo de los ácidos tricarboxílicos
(Ciclo TCA), necesitando además oxígeno, o continuar por la fermentación de glucosa produciendo
etanol. El ciclo TCA es el que genera un mayor aporte energético para la célula, mediante el
consumo de los metabolitos que ingresan a dicho ciclo. Una de las etapas intermedias de la
glicólisis la constituye la glucosa- 6-fosfato (G6P). Cuando no se dispone de glucosa en el medio, se
7 Ídem.
8 Madigan, Martinko y Parker, op. cit.
4

consume primeramente el etanol y luego el glicerol, dando paso a un proceso conocido como
gluconeogénesis, proceso de flujo inverso a la glicólisis 9 .
4.- Aislamiento e identificación de los microorganismos
Para el aislamiento de microorganismos específicos han sido utilizadas técnicas selectivas
empleando medios que permiten a dichos organismos crecer suprimiendo el crecimiento de otros
microorganismos que no sean parte del estudio. La composición de tales medios son
determinados por los microorganismos que se pretenden estudiar. En el caso de bacterias y
levaduras, por regla general, son sensibles al crecimiento a distintos niveles de pH y
concentraciones de agua, mecanismos que limitan e inhiben aún más la probabilidad de que otros
microorganismos crezcan en el medio selectivo. También se emplean agentes fungicidas para la
supresión de desarrollo de hongos filamentosos, los cuales deben ser utilizados con precaución, ya
que tales compuestos pueden inhibir algunas levaduras 10 .
Otros mecanismos más específicos para la identificación de los microorganismos
consideran diversas propiedades como:
- Caracterización fisiológica y bioquímica, donde alcanza una importancia significativa la
utilización de compuestos carbonados.
- Fermentación de carbohidratos, ya que los microorganismos pueden utilizar diversas
fuentes carbonadas, tales como, glucosa, arabinosa, rhamnosa, etcétera La capacidad
fermentativa permite diferenciar algunos géneros de éstas, entre los cuales se ubica el género
Saccharomyces y Zygosacharomyces que fermentan altamente la glucosa. Por el contrario otras
como Rhodosporidium no son tan fuertes fermentadoras y por tanto se ubican en otro género.
- Asimilación de compuestos carbonados y compuestos nitrogenados.
5.- Estudios previos de tipos de levaduras.
Las bacterias han sido estudiadas en diversas áreas, como la medicina – para conocer
diversas enfermedades y lograr obtener sus tratamientos – o la industria alimenticia – para lograr
obtener alimentos que ayuden a una mejor digestión de éstos con el apoyo de bacterias –.
9 Mardones, R., Aplicación de optimización lineal multiperíodo en la producción de una proteína recombinante humana,
sod, en levadura, saccharomyces cereviseae, Santiago, Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Físicas y Matemáticas,
2006.
10 Zúñiga, R., op. cit.
5

Las levaduras presentan una gran importancia industrial, participando, por ejemplo, en la
producción de vino, pan y cerveza. Actualmente la taxonomía reconoce la existencia de unas 500
especies de levaduras de las cuales 15 a 20 especies, pertenecientes a unos 8 géneros, son de
interés para la enología. Algunos de estos géneros son: Candida, Pichia, Hansenula,
Brettanomyces, Kloeckera, Zygosaccharomyces, Torulaspora y Saccharomyces 11 (Regodon, 1997).
DISEÑO DE NUESTRO PROYECTO DE INVESTIGACIÓN.
a) Pregunta:
¿Qué tipos de microorganismos existen en la superficie de un control remoto y las
manillas del refrigerador?
b) Hipótesis:
Si existe contacto directo con el control remoto y con las manillas del refrigerador,
entonces existen diversos microorganismos en dichas superficies.
c) Objetivo General:
Aislar cepas de levaduras y bacterias a partir de la superficie de objetos que se encuentran
en el hogar e identificar los aislados mediante caracterización morfológica.
d) Objetivos específicos:
Seleccionar diferentes lugares del hogar que mantengan un permanente contacto con los
integrantes de la familia que allí viven, como es el caso de la superficie de la manilla del
refrigerador y el control remoto de 6 casas del sector oriente de Santiago.
Aislar bacterias y levaduras nativas mediante técnicas de cultivos selectivos.
Identificar morfológicamente las bacterias y las levaduras nativas aisladas.
e) Materiales
1.- Instrumentos de laboratorio
Autoclave Hyrayama
Balanza analítica
Incubadora Memmert
11 Regodón, J., Obtención y caracterización de cepas autóctonas de levaduras para la elaboración estandarizada de vinos
de calidad, España, Universidad de la Extremadura. Departamento de Biología y de la Producción de los Vegetales, 1997.
6

Lupa electrónica
Refrigeradores
2.- Material de laboratorio
Lupas
Mechero
Placas de Petri
Tubos de ensayos
3.- Medios de cultivo
Agar agar
Agua destilada
Glucosa
Peptona
4.- Otros
Bolsas de papel
Cámara fotográfica digital Fujimil
Guantes estériles
Lápices marcadores
Tórulas estériles
f) Métodos.
1.- Recolección de muestra.
Las muestras fueron obtenidas bajo estricta esterilidad del material utilizado, pues con
guantes se tomaron las tórulas estériles que fueron las que tuvieron contacto con la superficie de
cada control remoto de las seis casas muestreadas, siendo guardadas en pequeños tubos de
ensayo igualmente estériles que fueron sellados al introducir la muestra y rotulados para evitar
confusión en las muestras obtenidas. De la misma forma se procedió para tomar las muestras de
las manillas de cada refrigerador, obteniendo así un material libre de contaminación de otros
microorganismos que no sean parte de esta investigación.
2.- Aislamiento de microorganismos bacterianos y levaduriformes.
Con estricto cuidado se tomaron las tórulas estériles que transportaban la muestra
obtenidas de las superficies del control remoto y de las manillas del refrigerador y fueron
7

sembradas de forma separada en las placas con medio de cultivo YM para levaduras y medio de
cultivo AN para bacterias 12 . Ambos medios de cultivo son selectivos, es decir, permiten el
crecimiento sólo de levaduras en el caso del medio YM y sólo de bacterias para el medio AN,
restringiendo el crecimiento de otros microorganismos. Estas placas obtenidas fueron incubadas
por 2 días a una temperatura adecuada para el crecimiento de bacterias y levaduras, siendo estas
placas evaluadas de forma periódica y constante para supervisar el crecimiento de contaminantes
en el medio.
Una vez incubadas las placas de Petri con las siembras hechas a partir de las muestras
obtenidas, descritos en el protocolo anterior, se tiene como producto una microflora diversa, la
cual fue evaluada y analizada bajo lupa manual, y a través de un criterio uniforme se realizó la
caracterización morfológica.
3.- Caracterización morfológica.
Para efectuar una caracterización morfológica en esta investigación se utilizaron los
siguientes criterios de selección que fueron discutidos en el equipo de trabajo una vez observados
los resultados obtenidos del crecimiento tanto de bacterias como de levaduras. Estos criterios se
caracterizaron por estar muy bien definidos e identificables para cada uno de los integrantes de
esta investigación, lo que hace objetivo el análisis de dichos resultados. Estos criterios son:
a. Color de la cepa
b. Tamaño de la cepa
c. Forma de la cepa
d. Contorno de la cepa
RESULTADOS
1. Caracterización morfológica de bacterias y levaduras
La gran similitud observada que presentan algunas colonias de levaduras y bacterias
obtenidas a simple vista, hace imperante la necesidad de realizar un análisis morfológico en el que
se consideren características visibles utilizando lupa electrónica. Las características que se
consideraron para este análisis fueron: color, tamaño, forma y características del contorno de la
cepa. Todos los criterios mencionados se resumen en la tabla N° 1 en donde se pueden apreciar la
diversidad de cepas descritas (25 cepas en total). De ellas, las cepas 2 (blanca brillante), 11
12 Al respecto véase Anexo N° 1.
8

(blancas en el centro y transparentes en su contorno), 19 (blancas amarillentas) y 24 (naranjas) no
poseen similitudes en cuanto a su color con ninguna de las otras cepas. Por otro lado existen
grupos similares en cuanto a color y forma de la cepa, donde encontramos que las cepas 1, 8, 10,
13 y 25 poseen características morfológicas similares entre sí (blancas redondas), de igual manera
las cepas 14, 18, 20, 22 y 23 (blancas opacas redondas), las cepas 3, 4, 9, 15 y 16 (amarillas
redondas), las cepas 5 y 17 (rosadas redondas) y, por último, las cepas 6, 7, 12 y 21 (transparentes
redondas).
Lo anterior, no significa necesariamente que los resultados arrojen de forma inmediata las
diferentes especies, ya que, células de diferentes especies pueden presentar igual morfología
celular de acuerdo a las condiciones ambientales en que se desarrollen o la etapa de desarrollo en
que se encontrase cuando se hizo la observación 13 .
13 Zúñiga, R., op. cit.
9

Tabla 1: Caracterización morfológica de cada cepa tanto bacteriana como de levadura.
Número de
colonia
Color cepa Tamaño cepa Forma de la cepa
Características del
contorno de la cepa
1 Blanca Pequeña Redonda Regular
2 Blanca brillante Mediana Redonda Regular con volumen
3 Amarilla Pequeña Redonda Regular
4 Amarilla Mediana Redonda Bordes irregulares
5 Rosada Pequeña Redonda Regular
6 Transparente Pequeña Redonda Regular
7 Transparente Grande Redonda
8 Blanca Pequeña Redonda
Centro oscuro y contornos
irregulares
Centro blanco con bordes
irregulares
9 Amarilla fuerte Pequeña Redonda Regular
10 Blanca Grande Redonda
Rugosa con contornos
irregulares
Blanca en el
11
centro,
transparente su
Grande
Redonda
Centro blanco con
contorno irregular peludo
contorno
12 Transparente Grande Redonda Regular
13 Blanca Grande Redonda Regular plana
14 Blanca opaca Mediana Redonda Regular plana
15 Amarilla Mediana Redonda Regular
10

Número de
colonia
Color cepa Tamaño cepa Forma de la cepa
Características del
contorno de la cepa
16 Amarilla Grande Redonda
Mucosa de bordes
irregulares
17 Rosada Mediana Redonda Regular
18 Blanca opaca Muy grande Redonda
Bordes irregulares con
pelos sobre otras colonias
19
Blanca
amarillenta
Mediana Redonda Regular
20 Blancas opaca Pequeña Redonda Plana e irregular
21 Transparente Grande Redonda Bordes irregulares y plana
22 Blanca opaca Mediana Redonda Bordes irregulares y plana
23 Blanca opaca Mediana Redonda Regular peluda
24 Naranja Pequeña Redonda Regular
25 Blanca Mediana Redonda Mucosa regular
11

Muestra casa 5
Control remoto
Medio AN - YM
Imagen N° 1: Cepas presentes en la superficie del control remoto (muestra casa 5)
Muestra casa 2
Refrigerador
Medio AN - YM
Imagen N° 2: Cepas presentes en las manillas del refrigerador (muestra casa 2)
Tabla 2.1: Caracterización morfológica de bacterias en control remoto.
12

N° de
colonia Casa 1 Casa 2 Casa 3 Casa 4 Casa 5 Casa 6
1 32 108 144 22 134 31
2 8 7 5 - - 4
3 - 2 - - - -
4 - - - - - -
5 - - - - 1 -
6 104 108 144 212 134 10
7 2 1 - - 11 -
8 - - - - - -
9 - - - - 7 -
10 - 6 - - - -
11 - - - - - -
12 - 8 - - - -
13 - 3 - - 10 -
14 - - - - - 4
15 - - - 3 - -
16 - - - - - -
17 - - - - - -
18 - - - - - -
19 - - - 4 - 1
20 - - - - - -
21 - - - - - 2
22 - - - - 1 -
23 - - - - - -
24 - - - - - -
25 - - 1 - - -
13

Tabla 2.2: Caracterización morfológica de bacterias de manillas del refrigerador.
N° de
colonia
Casa 1 Casa 2 Casa 3 Casa 4 Casa 5 Casa 6
1 3 12 22 30 26 -
2 - - - - 1 436
3 - - - - 1 -
4 - - - - - -
5 - - - - - -
6 2 4 8 64 22 -
7 3 - - - - -
8 - - - - - -
9 - - - - 3 -
10 - - - - - 92
11 - - - - - -
12 - - 1 - - -
13 - - - - - -
14 - - - - - -
15 - 60 - 6 - 6
16 - 1 - - - -
17 - - - - - -
18 - - - - - -
19 - - - - 5 -
20 - - - - - -
21 - - - 1 102 2
22 - - - - - 4
23 - - - - - -
24 - - - - 12 -
25 - - - - - -
14

Tabla 3.1: Caracterización morfológica de levaduras en control remoto.
N° de cepa
Casa 1 Casa 2 Casa 3 Casa 4 Casa 5 Casa 6
1 220 206 168 464 64 25
2 3 1 - - 4 1
3 32 - - - - -
4 6 - - - 1 -
5 1 - 12 - 5 -
6 - 7 - - - 6
7 - - - - - -
8 6 - 8 - - -
9 - - - - 16 -
10 - - - 2 - -
11 - - - 4 2 5
12 - - - - - -
13 - - - - 3 1
14 - 2 - - - -
15 - - - - - 6
16 - - - - - -
17 - - - - - -
18 - - - - 3 -
19 - - - 2 3 -
20 - - 3 2 - 5
21 - - - - - -
22 - - - - - -
23 - - - - 9 -
24 - - - - - -
25 - - - - - -
15

Tabla 3.2: Caracterización morfológica de levaduras de manillas del refrigerador
N° de cepa Casa 1 Casa 2 Casa 3 Casa 4 Casa 5 Casa 6
1 6 1 30 29 196 -
2 - - - - - -
3 - - - - 1 -
4 - - - 4 - -
5 1 - - - - -
6 - - - - 134 2
7 - - - - - -
8 - - - - - -
9 2 - 1 9 - -
10 9 2 3 - - -
11 1 - - 2 2 1
12 - - - - - -
13 - - 1 - 3 -
14 - - - - - -
15 - 4 - 17 - -
16 - 13 - - - -
17 - 3 7 - - -
18 - 3 - - - -
19 - 3 - 1 - -
20 - - 3 - - -
21 - - - 3 - -
22 - - - - - -
23 - - - - - -
24 - - - - - -
25 - - - - - -
16

DISCUSIÓN
Para poder aislar la diversidad levaduriforme y bacteriana existente en diversos lugares del
hogar seleccionados (superficie del control remoto y superficie de las manillas del refrigerador), se
utilizaron los procedimientos anteriormente descritos en los métodos. Una vez aisladas cada una
de las cepas se procedió a identificar morfológicamente, donde se describieron 25 cepas distintas
entre sí, de acuerdo a los criterios mencionados de color, forma, tamaño y características del
contorno de las cepas obtenidas por observación macroscópica del cultivo y con el apoyo de lupa
electrónica.
Esta caracterización de las 25 cepas también arrojó diversos resultados de semejanzas y
diferencias que permite agrupar a las cepas, formando así 5 grupos basados en la similitud del
color y la forma de la cepa, quedando 4 cepas totalmente distintas a las anteriores.
En cuanto a las bacterias, las cepas que más se repiten en las 6 casas muestreadas son la
cepa 1 y 6. La muestra obtenida de la casa 2 es la que muestra mayor diversidad bacteriana en el
control remoto y la muestra obtenida de la casa 5 es la que muestra mayor diversidad bacteriana
de las manillas del refrigerador.
En cuanto a las levaduras, la cepa 1 es la que más se repite en las 6 casas muestreadas,
donde la mayor diversidad de levaduras ubicadas en el control remoto fue en la muestra obtenida
en la casa 5 y la mayor diversidad de levaduras ubicadas en la superficie de las manillas del
refrigerador fue en las muestras de las casas 2 y 4.
CONCLUSIONES
La flora bacteriana y levaduriforme presente en la superficie del control remoto y en las
manillas del refrigerador de las 6 casas muestreadas se resumen en 25 cepas diferentes descritas
de manera morfológica con la utilización de 4 criterios (color, forma, tamaño y contorno de las
cepas), donde la casa 2 (perteneciente a San Carlos de Apoquindo, comuna de Las Condes) y la
casa 5 (perteneciente a la calle Arquímides, comuna de Vitacura) son las que presentan mayor
diversidad tanto bacteriana como de levaduras en el hogar.
Considerando los objetivos planteados para el desarrollo de esta investigación es posible
identificar, de manera global, que existen resultados concretos después de un riguroso trabajo en
donde se realizaron diversos procedimientos y metodologías experimentales, otorgando una
cierta validez a los resultados obtenidos, los cuales permiten observar el aislamiento de bacterias y
17

levaduras extraídos de la superficie del control remoto y de las manillas del refrigerador de las 6
casas muestreadas, microorganismos que fueron caracterizados morfológicamente.
En relación a la hipótesis que enmarca el presente trabajo investigativo, es posible
validarla, ya que se logra confirmar la existencia de bacterias y levaduras tanto en la superficie del
control remoto como en las manillas del refrigerador, todo esto realizado mediante estrictas
metodologías de aislamiento e identificación de dichos microorganismos.
Por último, cabe mencionar que esta investigación, en términos cuantitativos es
estadísticamente inválida, ya que los muestreos realizados no contaron con las suficientes replicas
como la estadística las requiere. Sin embargo, se debe aclarar que la presente investigación nunca
persiguió objetivos que involucrarán validaciones de tipo estadísticas, si no que sentar las bases
cualitativas – que siempre deben existir – para investigaciones futuras, como una caracterización
más detallada de los microorganismos aislados.
FUENTES Y BIBLIOGRAFÍA
Madigan, M; Martinko, J y Parker, J., Biología de los microorganismos, Madrid, Brock. Pearson.
España, 2009.
Mardones, R., Aplicación de optimización lineal multiperíodo en la producción de una proteína
recombinante humana, sod, en levadura, saccharomyces cereviseae, Santiago Universidad de Chile,
Facultad de Ciencias Físicas y Matemáticas, 2006.
Pedrique de Aulacio, M., Clasificación de los microorganismos. Cátedra de Microbiología, Caracas,
Facultad de Farmacia UCV, 2008.
Pedrique de Aulacio, M., Reproducción y crecimiento bacteriano. Cátedra de Microbiología, Caracas,
Facultad de Farmacia UCV, 2008.
Regodón, J., Obtención y caracterización de cepas autóctonas de levaduras para la elaboración
estandarizada de vinos de calidad, España, Universidad de la Extremadura. Departamento de
Biología y de la Producción de los Vegetales, 1997..
Suárez-Lepe, J.A., “Identificación de levaduras. Seguimiento y control de implantación de las cepas
seleccionadas”, en Levaduras vínicas, vol. 10, Madrid, Ed. Mundi-Prensa, 1997.
Zúñiga, R., Aislamiento e identificación de Levaduras nativas etanogénicas, Santiago, Universidad
Metropolitana de Ciencias de la Educación, Facultad de Ciencias Básicas, 2009.
18

ANEXOS
-ANEXO 1-
Medios de cultivo
Medio YM
Agar – agar 2%
Extracto de levadura 0,3%
Extracto de malta 0.3%
Peptona 0,5%
Glucosa 1%
Agua destilada
Medio AN
Agar agar 2%
Glucosa 2%
Peptona 2%
Agua destilada
19