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Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoAGRADECIMIENTOSLos autores de este boletín, desean expresarsus sinceros agradecimientos, en primer términoal Gobierno Regional de Arica y Parinacota,por creer en esta iniciativa y proveer elfinanciamiento necesario para el desarrollo de estainvestigación.Por otra parte, este trabajo no hubiera sido posible,sin la activa participación de los agricultoresde tomate de los Valles de Azapa, Chaca y LLuta,quienes permitieron realizar actividades en sus cultivosy obtener los resultados que se detallan eneste boletín. A su vez, con su presencia realzaronlas actividades divulgativas realizadas durante todoel proyecto.En forma particular deseamos destacar la colaboraciónde las señoras Herminia Aguilar y Felisa Vizay de los señores Bruno Aravena, Eliazar Calle, VíctorCastro, David Ramos y Alberto Yampara.Finalmente, agradecemos a la Facultad de CienciasAgronómicas de la Universidad de Tarapacá,por permitir realizar experimentos en sus campos.Boletín INIA, Nº 2243

7Einigkeit bestand darin, dass ist die Berechnung der Minderung nur dann problematischist, wenn die Parteien monatliche Vorauszahlungen auf die Betriebskostenvereinbart haben. Bei Mietverträgen mit einer Inklusivmiete oder einerfesten monatlichen Betriebskostenpauschale steht der monatlich geschuldeteMietzins fest. Die Minderung kann hieraus ohne Schwierigkeiten berechnetwerden 26 . Unklarheiten darüber, ob der Mieter mit Mietzahlungen in Verzug ist,die z. B. im Rahmen des außerordentlichen Kündigungsrechts nach § 543 Abs.2 Satz 1 Nr. 3 BGB von Bedeutung sein könnten, ergeben sich bei diesen Vertragsgestaltungennicht.Mietverträge mit einer Inklusivmiete oder einer festen Betriebskostenpauschalesind in der Praxis jedoch eher selten. In der weit überwiegenden Anzahl privaterund gewerblicher Mietverhältnisse vereinbaren die Parteien neben einer Nettomieteeine monatliche Vorauszahlung auf die Betriebskosten. In diesem Fall istdie vom Mieter erbrachte monatliche Zahlungen bezüglich der Betriebskostennur vorläufiger Natur. Erst nach Erstellung der jährlichen Betriebskostenabrechnungergibt sich die in dem Abrechnungszeitraum tatsächlich geschuldete Mietemit der Folge, dass auch erst ab diesem Zeitpunkt die unter Berücksichtigungder Minderung geschuldete Jahresbruttomiete berechnet werden kann. Im mietrechtlichenSchrifttum wurde anhand vieler Beispiele versucht, Problemfälleaufzudecken und eine für die Praxis brauchbare Berechnungsmethode zu entwickeln27 .b) Vorschläge im SchrifttumZwei im Ansatz unterschiedliche Auffassungen wurden hierzu vertreten. Nacheiner Ansicht solle sich die Minderung nur auf die monatliche Bruttomiete ohneBerücksichtigung des Betriebskostensaldos beziehen 28 . Als wesentliches Argumenthierfür wurde die Auslegung von § 543 Abs. 2 Satz 1 Nr. 3 BGB zumaußerordentlichen Kündigungsrecht wegen Verzugs mit Mietzahlungen herangezogen29 . Im Anwendungsbereich dieser Vorschrift entspreche es der ganz26 Vgl. Staudinger/Emmerich [2011] § 536 BGB Rn. 54.27 Vgl. Eisenschmid WuM 2005, 491 ff.; Blank FS für Bub 271 ff.; Lützenkirchen NZM 2006, 8ff., Kretzer ZMR 2005, 516 ff.;28 Schach GE 2005, 1462, 1465.29 Vgl. KG WuM 2004, 17.

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo8Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoINTRODUCCIÓNDe acuerdo a la información del VIII Censo Nacional Agropecuarioy Forestal del año 2007, la Región de Arica y Parinacotacuenta con 6.684 hectáreas de suelos cultivados; de éstos, lasuperficie dedicada a hortalizas en la Región asciende a 3.091,6 hectáreas,lo que representa un 46,3% de la superficie total cultivada a nivelregional y a un 3,2% de la superficie nacional cultivada con hortalizas.El Valle de Azapa, ubicado en esta Región, presenta gran importanciaeconómica para la ciudad de Arica y el país, al contribuir como fuentede ingreso a través de la agricultura. El cultivo del tomate en la Regiónposee, de acuerdo a los resultados preliminares VIII Censo NacionalAgropecuario y Forestal, una superficie de 843 hectáreas para consumofresco. Lo que equivale al 13% de la superficie nacional dedicada aeste cultivo, alcanzando una producción de 100.000 toneladas por temporada.Aunque esta superficie sea pequeña comparada con la del restodel país, es de gran importancia, ya que esta zona abastece durantelos meses de invierno el mercado centro-sur.El complejo de plagas y enfermedades que afectan a los cultivos requiereuna alta inversión para lograr su control, lo que representa unimportante porcentaje de los costos de producción. Este último aspectogenera un efecto ambiental negativo debido a la alta carga de pesticidasque se aplican para controlar los insectos plagas, principalmentevectores de virus como mosquitas blancas (Bemisia tabaci y Trialeurodesvaporarorium) y pulgones (Aphis sp.).A partir del año 2006, se detectaron una serie de enfermedades sistémicasque, de acuerdo a estimaciones en terreno, tienen alto impacto en laproducción. Asociado a lo anterior, las fluctuantes condiciones climáticasde los últimos años, han permitido la proliferación de diversos factoresBoletín INIA, Nº 2249

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejobiológicos y ambientales transmisores de enfermedades virales. Esto trajocomo consecuencias que en el año 2007 se perdiera el 50% de la producciónde tomates del Valle de Azapa, producto de infecciones virales.Considerando lo anteriormente señalado, en el año 2009 el GobiernoRegional de Arica y Parinacota financió un proyecto titulado “Validacióndel paquete tecnológico para el manejo de virus transmitidos pormosquitas blancas en el cultivo del tomate en la Región de Arica yParinacota”, cuyo objetivo fue desarrollar estrategias de manejo agronómicoy fitosanitario para la sustentabilidad de la producción de tomatesde la provincia de Arica y así reducir las pérdidas generadas porlas enfermedades virales en el cultivo de tomates, al hacer sustentablela superficie cultivada, la que exige óptima calidad del producto y rigurosocontrol fitosanitario.Esto se realizó integrando la información epidemiológica generada conel diagnóstico de la situación fitosanitaria del cultivo del tomate (relacionadocon plagas y enfermedades presentes en el cultivo) en los vallesde Azapa, LLuta y Chaca. Paralelamente, se desarrollaron actividadesde investigación en módulos demostrativos, en los que se evaluaronalternativas de manejo agronómico y fitosanitario que permitieranaminorar las pérdidas provocadas por estos agentes fitopatógenos. Estasactividades fueron realizadas bajo estrecha relación con los usuariosdel proyecto, de forma que el acceso a la innovación y alternativasde manejo fueran incorporadas rápidamente por los usuarios.Adicionalmente, se realizaron diversas actividades de capacitación enseminarios y demostrativas en campo, como también publicacionesdivulgativas de la información generada por el proyecto, que se incluyenen el presente boletín.Dentro de los hechos destacables de este proyecto se puede señalar:• La identificación de dos nuevos virus afectando al cultivo del tomateen los Valles de Azapa, Lluta y Chaca:• El Virus del mosaico peruano del tomate (PToMV, Potyvirus) cuyoagente vector son los pulgones.10Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo• El Virus del estriado amarillo de las venas del tomate (ToYVSV,Begomovirus), cuyo vector son las mosquitas blancas Bemisiatabaci, biotipo B, determinadas hace poco en Chile y que sólo sepresentan en esta región del país.• El fortalecimiento de las interacciones entre la Universidad deTarapacá y el INIA, a través de coejecucion de actividades realizadasen este proyecto y la trasferencia de nuevas tecnologíasmoleculares de detección de virus a laboratorios de la Región.El presente boletín técnico entrega los resultados del proyecto “Validacióndel paquete tecnológico para el manejo de virus transmitidos pormosquitas blancas en el cultivo del tomate en la Región de Arica yParinacota” y es una contribución para los agricultores, técnicos y profesionalesdel agro sobre los problemas virales trasmitidos por estosinsectos y sus alternativas de manejo en la Región de Arica y Parinacota.Paulina Sepúlveda R.Ingeniera Agrónoma M.SC.Boletín INIA, Nº 22411

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo12Boletín INIA, Nº 224

CAPÍT ULO 1Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoASPECTOS GENERALES DELOS VIRUS DE LAS PLANTASGermán Sepúlveda Ch.Ingeniero Agrónomo Ph.D.Concepto de virusASPECTOS GENERALESLos virus corresponden a entidades biológicas pequeñas y simplesque pueden causar enfermedad en el hospedero. Son núcleo - proteínasque se multiplican sólo en células vivas. Se pueden observarúnicamente por medio de microscopio electrónico y están conformadospor dos elementos básicos: un ácido nucleico (ARN o ADN) y proteínas.Son agentes infecciosos causante de enfermedades en diversos organismosvivos. La palabra virus es de origen latino y significa pus o veneno.No son celulares ni se encuentran constituidos por ellas, pero sepropagan induciendo a la célula hospedera a que los multiplique utilizandosu energía y su maquinaría biosintética. Debido a esto, el metabolismode los organismos infectados se altera a tal grado que enferman.Los virus no matan a sus hospederos de forma directa. Sin embargo,desvían el metabolismo generando sustancias extrañas y alterandodiversas funciones vitales e induciendo el desarrollo de síntomas. Enlas plantas, los síntomas pueden variar desde simples cambios de colorhasta necrosis severa o muerte súbita de las plantas. En algunos otroscasos los síntomas son casi imperceptibles como en el caso de loshospedantes asintomáticos.En su novena versión la nómina oficial del Comité Internacional deTaxonomía de Virus - ICTV - alcanza a 2.285 especies virales, de lascuales 736 afectan plantas vasculares distribuyéndose en 75 géneros y16 familias.Boletín INIA, Nº 22413

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoModo de infecciónEl proceso de infección en el hospedero vegetal se inicia cuando elvirus encuentra una herida en la pared celular, la que puede ser provocadapor insectos, por labores culturales propias de cada cultivo, provocadaspor el hombre u otras de distinto origen.Modo de transmisión de los virusLos virus son biotróficos – parásitos obligados – por lo que no se puedendesarrollar en materia orgánica muerta, requieren de tejido vivopara su multiplicación activa o simplemente para estar en reposo. Sinembargo, el Virus del mosaico del tabaco (TMV) corresponde a una delas pocas excepciones de la regla antes mencionada, debido a que puedesobrevivir en restos de tejidos infectados que quedan en el campo, sirviendode inóculo primario en el siguiente ciclo. A continuación seseñalan las principales formas de trasmisión de los virus:• Propagación vegetativa: Siempre que las plantas se propaguenvegetativamente mediante injerto (Figura 1 B), esquejes, tubérculos,bulbos o rizomas, cualquier tipo de virus que se encuentre en laplanta madre, será transmitido a la progenie.• Mecánica: Los virus pueden ser transmitidos a algunas plantas medianteinoculación mecánica, pero no todos pueden infectar y estableceruna infección. En teoría, las partículas virales pueden ser introducidasa células vivas por este método, pero para que el virusllegue a ser funcional depende de una gran variedad de condicionescomo: el grado de susceptibilidad de la célula receptora, funcionamientodel genoma viral dentro de la célula, condiciones necesariaspara la maduración del virus, factores ambientales, etc. Engeneral, la transmisión mecánica puede ocurrir de manera natural(campo) y de forma artificial (laboratorio); en campo, dicha transmisiónpuede efectuarse entre plantas bastantes próximas al rosarsecon el viento, cuando las plantas son dañadas por el hombre en laslabores de cultivo (como el caso del TMV), etc. La transmisión mecánicaartificial es de gran importancia a nivel experimental y sepuede realizar de diferentes formas: frotis; injerto e inyecciones.14Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 1. Algunos agentes responsables de la diseminación de virusen las plantas. A: Nematodos; B: Injerto; C: Polen; D: Semillas.• Semilla: La transmisión por semilla constituye uno de los factoresmás importantes en el desarrollo epidémico de algunos virus. Lassemillas infectadas dan origen a plántulas que representan una fuentede inóculo inicial temprana, que además se encuentra uniformementedistribuido. Las plántulas infectadas constituyen reservoriosa partir de los cuales ocurre la dispersión secundaria del virus, locual sucede por transmisión mecánica o mediante vectores. La granmayoría de los virus que se transmiten por semilla, persisten en elembrión; el porcentaje de transmisión depende de la raza del virus,el hospedante, las condiciones ambientales, entre otros factores, ysu "longevidad" depende del hospedante, inóculo, condiciones dealmacenamiento y el período de almacenaje. Los virus asociadoscon las semillas son acarreados de dos formas: como una infeccióno como una infestación. La infección implica que el virus es llevadointernamente, inmerso en los tejidos de la semilla y cuando el viruses llevado pasivamente se le conoce como infestación o contaminación.Esta forma de transmisión se conoce como transmisión verticalde virus (Figura 1 D);• Polen: Cuando una planta está infectada, el virus tiene la capacidadde llegar a infectar el polen y cuando este es acarreado por el vientoo por insectos el virus se transmite de una planta enferma a unasana por este medio. La transmisión por medio del polen está muyrelacionada con la transmisión de virus por semilla (Figura 1 C)Boletín INIA, Nº 22415

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo• Vectores: La mayoría de los virus vegetales son transmitidos de plantaen planta por agentes vectores: insectos (pulgones, mosquitas blancas,trips), nematodos (Figura 1 A), ácaros y hongos. Estos agentesvectores son capaces de provocar heridas que hacen posible la diseminaciónhorizontal de los virus fitopatógenos.Movilización de los virus dentro de la plantaLos virus inician su replicación en el mismo punto de penetración,posteriormente se mueven de una célula a otra. Esta movilización eslenta debido a que se realiza a través de plasmodesmos (unión entrecélulas adyacentes). Al llegar al sistema vascular (xilema o floema), lamovilización del virus en la planta adquiere mayor rapidez y se distribuyejunto a los fotosintatos.El tiempo que tarda un virus en movilizarse en una planta depende devarios factores, tales como variedad de la planta, tipo de virus, edad dela planta al momento de la inoculación, y temperatura, entre otros factores.Síntomas GeneralesAntes del desarrollo de las técnicas de diagnóstico rápido, los síntomasfueron el único medio para aproximarse a la caracterización de lasenfermedades causadas por virus en las plantas. Gracias a los métodosserológicos, moleculares y genéticos, se incrementó el conocimientosobre las propiedades de los virus, permitiendo distinguir a estosfitopatógenos de otras enfermedades de las plantas.En la actualidad los síntomas tienen considerable interés, ya que permitenevaluar los efectos de las virosis y, en muchos casos, son el únicorecurso para diagnosticar rápidamente las virosis en un cultivo. Además,los síntomas son el criterio básico para nominar al agente causalde las enfermedades causadas por virus.La infección viral usualmente se acompaña de una apariencia normaldel hospedero, generando infecciones asintomáticas. En el año 1925ocurre el primer reporte de plantas asintomáticas al registrar la presen-16Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejocia de virus en plantas de papa aparentemente sanas. El problema delas infecciones asintomáticas tiene particular importancia en la certificaciónde programas de producción de plantas libres de virus. Además,reviste valor en el control de las enfermedades causadas por virus,ya que plantas asintomáticas pueden actuar como fuente de inóculopara cultivos sanos.Los síntomas generales que se puede observar en plantas cultivadas son:• Disminución del tamaño de planta (enanismo).• Disminución del tamaño y número de frutos.• Mosaico, se caracteriza por la alternancia de color verde natural,con el desarrollo de áreas cloróticas o verde claro en hojas o frutos.Dependiendo de la intensidad de la coloración, el mosaico puedeser severo o fuerte (cuando hay una clara diferencia entre el tejidonormal y clorótico) y suaves o moteados (cuando la diferencia esdifusa). Los mosaicos pueden presentarse de forma indistinta en lostejidos o bien pueden estar restringidos a las nervaduras secundariaso terciarias de las hojas.• Amarillez. Se presenta cuando todo el follaje de la planta se tornaclorótico.• Anillos. Manchas anilladas completas o incompletas, producidasprincipalmente por virus transmitidos por nematodos.• Necrosis. Corresponde a la muerte del tejido, las más comunes sonlas estrías en los tallos, en los peciolos y en la nervadura y hojas.• Pétalos variegados.• Mal formaciones en hojas.• Anormalidad del crecimiento. Se trata de distorsiones en las hojas,pérdida del área foliar, inclinación hacia abajo, hojas filiformes y /o hinchamiento en los tallos.Boletín INIA, Nº 22417

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoEstos síntomas (Figura 2) se manifiestan directamente en la reduccióndel rendimiento y por lo tanto, en pérdida económica.Figura 2. Síntomas asociados a tomate registrados enArica. A y D: maduración irregular de frutos;B: Distorsión de hojas y folíolos; C: Mosaico;E: Epinastia (acucharamiento en hojas)y aborto de flores.18Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoREFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASAgrios, G.N. 1997. Plant Pathology.635 p. Fourth edition. AcademicPress. New York, USA.F a uq u e t, C.M., Ma y o, M.A.,Maniloff, J., Desselberger, U. andBall, L.A. 2005. Virus Taxonomy.VIII Report of the InternationalCommittee on Taxonomy of Viruses.1162 p. Elsevier/AcademicPress, London.Kassanis, B. 1955. Some propertiesof fou r viru ses iso la te d fromCarn a tio n pla n ts. Ann a ls o fApplied Biology 43: 3 – 113.Nishimura, M. 1918. A carrier of themosaic disease. Bulletin of theTorrey Botanical Club 45:219 –231.Johnson, J. 1925. Transmission ofviruses from apparently healthypotatoes. p. 1-12. Research BulletinNº 63. Wisconsin AgriculturalExperimental St., USA.Boletín INIA, Nº 22419

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo20Boletín INIA, Nº 224

CAPÍT ULO 2Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoPROSPECCIÓN Y DIAGNÓSTICODE VIRUS EN TOMATEMarlene Rosales V.Bioquímica Ph.D.Claudia Medina V.Bioquímica.Roxana Mora R.Técnica Química.Claudia Rojas B.Ingeniera Agrónoma.El cultivo de tomate se ve afectado por más de 200 enfermedadescausadas por hongos, nematodos y virus, que afectan al cultivoen diferentes estados de su desarrollo produciendo disminucionesimportantes en el rendimiento. En el año 2007, las condicionesclimáticas imperantes permitieron la dispersión y manifestación de enfermedadesde origen viral, las que llegaron a producir considerablespérdidas en la producción de tomates en el Valle de Azapa de la Regiónde Arica y Parinacota. Por ello, durante el desarrollo del proyecto“Validación del paquete tecnológico para el manejo de virus transmitidospor mosquitas blancas en el cultivo del tomate en la Región deArica y Parinacota” financiado por el gobierno regional, se clarificó laetiología o identidad de los agentes causales de estas enfermedadesvirales, así como sus agentes vectores, de forma de diseñar estrategiasde manejo y control para los distintos agentes virales y sus vectores.METODOLOGÍA EMPLEADAPARA EL DIAGNÓSTICO VIRALDos técnicas fueron utilizadas para la detección y diagnostico viral: laprueba inmunoenzimática ligada a enzimas (Enzyme LinkedImmunosorbent Assay, ELISA) y la reacción en cadena de la polimerasa(Polymerase Chain Reaction, PCR).Boletín INIA, Nº 22421

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoLa prueba de ELISA es una técnica basada en la utilización deanticuerpos policlonales o monoclonales que permiten detectarantígenos específicos, es una técnica rápida, de sensibilidad intermediay de fácil ejecución, lo que permite analizar un gran número demuestra. Esta técnica se utilizó para analizar ocho virus que usualmenteafectan el cultivo de tomate como son: Virus pertenecientes al géneroPotyvirus, Virus del mosaico del pepino (CMV), Virus del mosaicode la alfalfa (AMV), Virus del mosaico del pepino dulce (PepMV), Virusdel mosaico del tomate (ToMV), el Virus del bronceado del tomate(TSWV), Virus del grabado del tabaco (TEV) y Virus Y de la papa (PVY).Por otro lado, para el análisis de un grupo de virus de gran importanciaen los cultivos de tomate como son los Begomovirus, se utilizó la técnicade PCR, debido a que no existen anticuerpos comerciales que permitanrealizar una identificación confiable y reproducible. Esta técnica se basaen la amplificación de fragmentos de ADN específicos. Para la mayoríade los virus de plantas que tienen como material genético ARN, a diferenciade los Begomovirus que son ADN, es necesario utilizar una variantedel PCR tradicional, correspondiente a la transcripción reversa(RT-PCR) esto es a partir de la hebra de ARN generar un ADN complementario(c ADN) para realizar posteriormente el PCR tradicional.Esta técnica es rápida y económica para hacer un número ilimitado decopias de cualquier fragmento del ADN, es de mayor sensibilidad quela prueba de ELISA. Considerando la gran sensibilidad de esta técnica,se utilizó en este proyecto para la identificación de tres virus en losValles de la Región de Arica y Parinacota: Virus del mosaico peruanodel tomate (PtoMV) (perteneciente al grupo de los Potyvirus), Virus delmosaico del pepino dulce (perteneciente al grupo de los Potexvirus) yvirus del grupo de los Begomovirus (Cuadro 1).SITUACIÓN VIROLÓGICA DEL TOMATEEN LA REGIÓN DE ARICA Y PARINACOTAEn los últimos años, en la Región de Arica y Parinacota se ha observadoen tomates, diferentes síntomas que pueden estar asociados a agentesvirales, ellos son: deformación, disminución del tamaño y manchas22Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoCuadro 1. Partidores utilizados para diagnóstico viralde PtoMV, PepMV y Begomovirus.Virus Partidor Secuencia nucleotidica ReferenciaPtoMV CP-F 5‘ CGG CAA CCA AAA GTG AAT 3‘ Diseñados porCP-R 5‘ CTC TTG CTC GGA CGG ATG T 3‘ Rosales M.PepMV TGB-F 5‘ CAC ACC AGA AGT GCT TAA AGC A 3‘ Mumford yUTR-R 5‘ CTC TGA TTA AGT TTC GAG TG 3‘ Metcalfe, 2001Begomovirus AVcore 5‘ GCC HAT RTA YAG RAA GCC MAG RAT 3‘ Wyatt y Brown,ACcore 5‘ GGR TTD GAR GCA TGH GTA CAN GCC 3‘ 1996.en los frutos, además de reducción del tamaño de las plantas, amarilleointervenal en hojas, amarillez, mosaico y hojas abullonadas o con ampollas(Figura 3).Figura 3. Síntomas observados en frutos (A, B y C) yhojas (D, E, F y G) en la Región de Arica y Parinacota.En los frutos se observa disminución del tamaño (A),manchas (B) y deformación (C), por su parte en lashojas se aprecia amarilleo intervenal (D), hojasabullonadas o con ampollas (E), mosaico y amarillez(F) y reducción del tamaño de la planta (G).Boletín INIA, Nº 22423

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoProspecciones realizadas a más de mil muestras de tomate en los diferentesvalles de la Región (Azapa, Lluta y Chaca), entre los años 2009-2011, han demostrado que un 57,1% de las muestras fueron positivas aBegomovirus, 26,9% de las muestras fueron positivas a PepMV y 26,9%de ellas positivas a Potyvirus (Cuadro 2).Cuadro 2. Resumen de muestras positivas para Begomovirus,Potyvirus y PepMV en los Valles de Azapa, Chaca y Llutade la Región de Arica y Parinacota (2009-2010).Valles de la Región de Arica y ParinacotaNúmero y porcentaje Total Totalde muestras positivas muestras muestrasVirus Azapa Chaca Lluta positivas (%) analizadasBegomovirus 424 (65,4) 31 (38,8) 21 (19,8) 476 (57,1) 834Potyvirus 231 (31,2) 2 (2,5) 11 (12,6) 244 (26,9) 908PepMV 195 (26,3) 26 (32,5) 23 (26,4) 244 (26,9) 908Los Begomovirus son los virusque presentan mayor incidenciaen la Región de Arica y Parinacota.Como se observa en la Figura4, este virus se presentó en los tresvalles; sin embargo, presenta unamayor prevalencia en el Valle deAzapa, donde su incidencia alcanzaal 65,4% y en menor medidaen el Valle de Lluta dondesu incidencia llega solo al 19,8%.Los Begomovirus, también conocidoscomo geminivirus, comprendenuna numerosa y diversafamilia (Geminiviridae) de virusde plantas. Estos han sido consideradovirus emergentes, pues suFigura 4. Distribución de virus encultivos de tomate presentes en losValles de Azapa, Chaca y Lluta enla Región de Arica y Parinacota.24Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoincidencia y distribución mundial ha aumentado considerablementeen la última década. Su vector natural corresponde a la Mosquita blancadel tabaco, Bemisia tabaci, la cual ha sido reportada en los valles dela nortina región de Chile, encontrándose el biotipo B de este insecto,considerado eficiente al igual que otros biotipos de B. tabaci, respectoa su capacidad de actúar como vector de virus. Debido a su polifagia ysus elevadas potencialidades multiplicativas, hacen que se le considerecomo el principal agente de dispersión de Begomovirus.Debido a la importancia que han presentado las infecciones deBegomovirus en la Región de Arica y Parinacota y considerando la grandiversidad de especies virales que pueden infectar tomate (unas 34 especiesde Begomovirus reconocidas y 18 tentativas han sido encontradasinfectando naturalmente al tomate), se realizó la secuenciaciónparcial del genoma de los Begomovirus detectados en esta región. Losresultados revelaron que la especie encontrada en la región presentaun 94% de identidad con el Virus del estriado de las venas amarillasdel tomate (Tomato yellow vein streak virus, TYVSV), el cual ha sidorecientemente descrito por investigadores infectando papas y tomatesen Argentina y Brasil. En tanto, PepMV y Potyvirus han presentado unporcentaje total de muestras positivas correspondientes al 26,9%, teniendocada uno de ellos una distribución característica en los vallesde la Región (Figura 4 y Cuadro 2).PepMV perteneciente al grupo de Potexvirus, es reportado por primeravez en 1974 en el Valle de Cañete, Perú. En Chile se comenzó a observardesde 2001 en cultivos de tomates en invernaderos de distintossectores de la Región de Valparaíso. Estudios realizados por el ServicioAgrícola y Ganadero entre los años 2001-2002 reportaron además lapresencia de este virus en cultivos comerciales de la Región de Tarapacá(actualmente Región de Arica y Parinacota). Estos virus son transmitidosprincipalmente por contacto y posiblemente por semillas. Los resultadosde las prospecciones realizadas en los valles de la Región deArica y Parinacota entre los años 2009-2011 han mostrado una distribuciónsimilar de este virus en los Valles de Azapa, Chaca y Lluta,presentándose levemente superior en el Valle de Chaca con un 32,5%de incidencia (Cuadro 2 y Figura 4).Boletín INIA, Nº 22425

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFinalmente, se han encontrado muestras infectadas con Potyvirus. Estegrupo de virus es transmitido por áfidos o pulgones, los que trasmitenlos virus en forma no persistente. Estos virus se ha encontrado presenteen los tres valles analizados, encontrándose una mayor incidencia enel Valle de Azapa alcanzando un 31,2%, en tanto en el Valle de Chacasolo se registraron dos muestras con este virus (Cuadro 2). Considerandoque el anticuerpo utilizado para la detección de Potyvirus permiterealizar la detección universal de este género viral, se debió realizar laidentificación a nivel de especie a través de la secuenciación del fragmentoobtenido a partir de RT-PCR utilizando partidores universalespara Potyvirus. Los análisisde las secuencias genómicasvirales revelaron una homologíadel 94% con el aislado Cuzqueño-2del Virus del mosaico peruanodel tomate (PtoMV), siendo elprimer reporte de este virus enChile. En la prospección realizadaen los valles de la Región deArica y Parinacota, como se observaen la Figura 5, PtoMV seencontró en los Valles de Azapa(15,2%) y Chaca (10%).Figura 5. Distribución de infeccionescon el Virus del mosaico peruanodel tomate, PtoMV, en los Vallesde Azapa, Chaca y Lluta.Las infecciones virales observadas en las plantas de tomate en los diferentesvalles pueden ser simples o mixtas (Figura 6 y Cuadro 3). Deesta se aprecia que en el Valle de Azapa aproximadamente el 79% delas muestras analizadas presentan infección por uno o más virus, siendolas infecciones solo por Begomovirus (35,8%) las de mayor incidenciaen este valle. En el Valle de Chaca, aproximadamente el 62% de lasmuestras analizadas presentan algún tipo de infección viral, sin embargo,no se presentaron infecciones simples con Potyvirus en este valle yla mayor incidencia viral está concentrada en infecciones simples conBegomovirus (28,8%) seguido de infecciones simples con PepMV(22,5%).26Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 6. Infecciones virales simples y mixtas en cultivosde tomate presentes en los Valles de Azapa, Chaca y Llutaen la Región de Arica y Parinacota, 2009-2010.Cuadro 3. Resumen de infecciones virales simples y mixtas entreBegomovirus, Potyvirus y PepMV en los Valles de Azapa, Chacay Lluta de la Región de Arica y Parinacota, 2009-2010.Valles de la Región de Arica yParinacota, número y porcentajede muestras positivas a infecciónVirus Azapa Chaca LlutaBegomovirus 224 (35,8) 23 (28,8) 6 (6,9)Potyvirus 53 (8,5) 0 (0) 8 (9,2)PepMV 33 (5,3) 18 (22,5) 7 (8,0)Begomovirus + Potyvirus 67 (10,7) 1 (1,3) 1 (1,1)Begomovirus + PepMV 57 (9,1) 7 (8,8) 14 (16,1)Potyvirus + PepMV 24 (3,8) 1 (1,3) 2 (2,3)Begomovirus + Potyvirus + PepMV 39 (6,2) 0 (0) 0 (0)Negativas 128 (20,5) 30(37,5) 49 (56,3)Total muestras analizadas 625 80 87Finalmente, el Valle de Lluta es el que presenta una menor incidenciaviral alcanzando solo al 43% de las muestras, en este valle se observauna mayor incidencia de infecciones mixtas por Begomovirus y PepMV(16,1%).Boletín INIA, Nº 22427

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoOTROS HOSPEDEROS VIRALESLa Región de Arica y Parinacota es la principal proveedora de hortalizasentre los meses de Mayo a Noviembre para el centro y sur del país,los cultivos que siguen en importancia después del tomate correspondena porotos verdes, pimiento morrón, pepino de ensalada y zapalloitaliano. Se analizaron muestras de porotos verdes, pimiento, malezasy Solanum chilense, debido a la capacidad de estas dos últimas comoimportantes reservorios virales. Las Figuras 7 a 9, reflejan los resultadosde la contaminación por los diferentes agentes virales en las especiesanalizadas.Figura 7. Porcentaje de muestras positivas a infeccionespor Begomovirus en distintos hospederos en laRegión de Arica y Parinacota.Figura 8. Porcentaje de muestras positivas a infeccionespor PepMV en distintos hospederos en la Regiónde Arica y Parinacota.28Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 9. Porcentaje de muestras positivas a infeccionespor PtoMV en distintos hospederos en la Regiónde Arica y Parinacota.En cultivos de porotos verdes se encontró un 8,6%de muestras positivas a Begomovirus, a diferenciade lo que ocurre en cultivos de pimiento en losque se encontraron infecciones con tres virus, presentandouna mayor incidencia de infecciones conPepMV (25%), seguidas por PtoMV (22,7%) y finalmenteBegomovirus (8,7%).Por otra parte, en las muestras analizadas de la plantaendémica Solanum chilense, las cuales pueden servircomo importantes reservorios virales a pesar deno presentar síntomas, se encontraron infeccionescon Begomovirus y en mayor medida con PtoMV,en el cual alcanza al 41,9%.Los resultados del análisis a malezas reflejaron queun 15,4% de ellas fueron positivas a Begomovirus.En la Figura 10, se consolidan los resultados paralos distintos agentes virales analizados por cadaespecie vegetal. Se destaca Solanum chilense comoreservorio del Virus del mosaico peruano del tomate.Boletín INIA, Nº 22429

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 10. Distribución de virus en cultivos de tomate,pimiento, porotos verdes, malezas y Solanum chilense,en los Valles de la Región de Arica y Parinacota.CONCLUSIONESEn los cultivos de tomate en los valles de la Región de Arica y Parinacota seha encontrado la presencia de un Potexvirus (PepMV) y de dos virus que nohabían sido reportados con anterioridad en el país correspondientes a unBegomovirus (TYVSV) y Potyvirus (PtoMV), presentando una mayor incidenciaen los valles hortícolas de esta Región las infecciones causadas porBegomovirus. Además, se han observado infecciones virales simples y mixtasen los cultivos de tomate en los Valles de Azapa, Chaca y Lluta.El Valle de Azapa es el que presentó mayor incidencia de infecciones virales,siendo la más prevalente las infecciones causadas por Begomovirus. Porotra parte, en el Valle de Lluta prevalecieron las infecciones mixtas conBegomovirus y PepMV. En el Valle de Chaca las infecciones simples deBegomovirus, seguida por las infecciones por PepMV, siendo escasas eneste valle las infecciones con Potyvirus.También fue importante la presencia de estos virus en otros cultivos comopimiento y porotos verdes, además de malezas y Solanum chilense; los cualespodría ser importantes reservorios virales, por lo que se debe considerarel adecuado control de estas especies, de forma de disminuir la presenciade inóculo primario y secundario a lo largo del período productivo del cultivodel tomate.30Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoREFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASColariccio, A., Eiras, M., Chaves, A.,B ergma nn , J., Z e rb in i, F.,Harakava R.; Chagas, C. 2007.Tomato yellow vein streak virus,a new Begomovirus on tomatofrom Brazil: complete DNA-Asequence and some molecularand biological features. Journal ofPlant Pathology 89: 385-390.Jones, R., Koenig, R., Lesemann, D.1980. Pepino mosaic virus, a newPotexvirus from pepino (Solanummuricatum). Annals of AppliedBiology. 94: 61-68.Morales, F., Anderson, P. 2001. Theemergence and dissemination ofwhitefly-transmitted geminivirusin Latin America. Archives ofVirology 146:415-441.Mumford, R., Metcalfe, E. 2001. Thepartial sequencing of the genomicRNA of a UK isolate of Pepinomosaic virus and the comparisonof the coat protein sequence withother isolates from Europe andPeru. Archives of Virology 146:2455-2460.Ormeño, J., Sepúlveda P. 2005. Presenciade diferentes virus de pimiento(Capsicum annuum L.) enespecies de malezas asociadas alcultivo. Agricultura Téc. [online].2005, vol.65, Nº4 [citado 2011-08-30], pp. 343-355 . Disponibleen: http://www.scielo.cl/scielo.p h p ?sc rip t=sc i_ a rtte x t&p id =S0 36 5-28 072 00 500 040 00 01&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0365-2807. doi: 10.4067/S0365-28072005000400001.Rosales, M., Peña, E., Medina, C.,Mora, R ., Ara ya , C. 20 09 .Fitopatología molecular: Mecanismosy aplicaciones. Tierra AdentroNº 58, p. 24-25.Rosales, M., Sepúlveda, P., Sepúlveda,G., Brown, J. 2009-B. Caracterizaciónmolecular preliminar delc omplejo mosq uita b lan ca -Begomovirus presente en la Regiónde Arica y Parinacota enChile. p. 134-137. In: XV CongresoLatinoamericano y XVIII CongresoChileno de Fitopatología,12-16 Enero, Santiago, Chile. SociedadChilena de Fitopatología,Santiago.Sepúlveda, P., Rosales, M., Madariaga,M., Mora, R., Rojas, C.2009-C. Virus del mosaico peruanodel tomate (PToMV), nuevo virusque afecta a tomates en el Vallede Azapa, Chile. p. 203. In: XVCongreso Latinoamericano y XVIIICongreso Chileno de Fitopatología,12-16 Enero, Santiago, Chile.Sociedad Chilena de Fitopatología,Santiago.Wyatt, S; Brown, J. 1996. Detectiono f su b gro up III ge min iviru sisolates in leaf extracts by degenerateprimers and polymerase chainreacBoletín INIA, Nº 22431

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo32Boletín INIA, Nº 224

CAPÍT ULO 3Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoMOSQUITAS BLANCAS COMOVECTORES DE VIRUS EN TOMATEEN LA REGIÓN DE ARICA Y PARINACOTAMarlene Rosales V.Bioquímica Ph.D.Claudia Medina V.Bioquímica.Judith K. BrownIngeniera Agrónoma Ph.D.Germán Sepúlveda Ch.Ingeniero Agrónomo Ph.D.Paulina Sepúlveda R.Ingeniera Agrónoma M.Sc.En el mundo, uno de los principales vectores de virus del cultivode tomate, corresponden a mosquitas blancas clasificadas en elOrden Hemiptera: Sternorrhyncha: Aleyrodidae. Se han descritocerca de 1.200 especies de mosquita blanca, sin embargo sólo unascuantas especies son plagas de cultivos importantes. Entre éstas encontramosa la especie Bemisia tabaci (Gennadius), también conocida comomosca blanca del tabaco o del algodonero. Esta mosquita es una de lasplagas más ampliamente distribuidas en regiones tropicales ysubtropicales del mundo donde afecta a más de 600 especies de plantascultivadas y silvestres.Los daños directos causados por este insecto se deben a su alimentacióna expensas de los nutrientes de la planta y a desórdenes fisiológicoscausados por el biotipo B. Mientras que los indirectos se deben alcrecimiento de hongos ("fumaginas"), sobre la excreción de melaza porla mosca blanca, lo que provoca una disminución de la superficiefotosintética y dificulta la evapotranspiración y a la habilidad del estadoadulto de transmitir, en forma circulativa y persistente, más de cienespecies virales pertenecientes a cuatro géneros virales: Begomovirus(Geminiviridae), Crinivirus (Closteroviridae), Carlavirus (Betaflexiviridae)Boletín INIA, Nº 22433

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoe Ipomovirus (Potyviridae). Durante las dos últimas décadas losBegomovirus han emergido como patógenos devastadores, causandograndes pérdidas económicas y amenazas a la producción de los cultivoshortícolas y ornamentales que pueden ser infectados.La mosquita Bemisia tabaci se ha considerado en principio una plagade zonas tropicales y subtropicales de Centroamérica y el Caribe, sinembargo poco a poco ha ido afectando cultivos de áreas más templadas.En Chile, en la Región de Arica y Parinacota, se han observadoaltas poblaciones de mosquitas blancas (Figura 11) desde fines de ladécada de los 90´s. Posteriormente, se observaron síntomas característicosde enfermedades virales en el cultivo del tomate, asociados a altaspoblaciones de mosquita blanca en la zona limítrofe del norte deChile. En el año 2009, se realizó la primera identificación de unBegomovirus bipartito infectando tomates en la Región de Arica yParinacota, provocando amarilleces, enrollamiento de hojas y plantasde menor tamaño.Un aspecto relevante de la biología de B. tabaci es el alto grado devariabilidad que existe entre sus poblaciones las que sonmorfológicamente indistinguibles, lo que ha generado el término de“biotipos” de B. tabaci. Esta variabilidad es revelada por la existenciade poblaciones aisladas geográficamente, que difieren en su habilidadpara alimentarse o reproducirse en un hospedero en particular, así comotambién en la eficiencia con que transmiten diversos virus, en la inducciónde reacciones fitotóxicas y en la resistencia a insecticidas.Figura 11. Presencia de altas poblaciones de mosquitas blancas en hojas detomate (A) y malezas (B) en los valles de la Región de Arica y Parinacota.34Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoB. tabaci puede producir un promedio de 15 generaciones por año,donde cada hembra puede depositar aproximadamente 200 huevos enun período que puede ir entre 3 a 6 semanas. Diversos estudios de labiología de B.tabaci han demostrado que los ciclos de vida de esteinsecto varían en función de la temperatura, humedad relativa y plantahospedera donde se desarrolla. Es por esto, que el ciclo de vida desdehuevo a adulto requiere 2 a 3 semanas en climas cálidos, pero puedellegar a extenderse hasta dos meses en climas fríos. Este ciclo incluyelos estados de desarrollo de huevo, 4 estadios ninfales y posteriormentela emergencia del adulto alado.B. tabaci fue tradicionalmente considerada como una plaga menor encultivos extensivos de zonas tropicales y sub-tropicales, pero al finaldel siglo XX se convirtió en una plaga clave de cultivos hortícolas yornamentales en zonas de clima templado en todo el mundo, causandograndes pérdidas económicas.El tomate parece ser una especie particularmente susceptible a losBegomovirus, ya que unas 34 especies de este género han sido reconocidasy otras 18 especies virales tentativas han sido encontradas infectandonaturalmente al tomate. La mayoría de estos virus inducen en el tomatesíntomas característicos de las enfermedades de hoja rizada, inclu-yendo una severa reducciónen el tamañode la hoja, rizadohacia abajo, arrugamientointervenal,clorosis intervenal ymarginal, decoloraciónpúrpura de lassuperficies abaxialesde las hojas, acortamientode entrenudos,desarrollo depequeñas ramas y reducidaformación defruto (Figura 12).Figura 12.Plantas de tomateinfectadas conBegomovirus.Boletín INIA, Nº 22435

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoRELEVANCIA DE BIOTIPOSDE B. tabaci Y MÉTODOSDE IDENTIFICACIÓNB. tabaci se caracteriza por tener una amplia plasticidad en diferenteshospederos, esto ha llevado a utilizar el término “biotipo” para designarlas diferentes poblaciones de B. tabaci, las cuales son consideradasespecies cripticas, por lo que si bien no presentan diferenciasmorfológicas que permitan diferenciarlas claramente en sus estadosninfales y adulto, presentan otras características que permiten identificarlas,como el tipo de hospedero, la adaptación planta-hospedero, lainducción de reacciones fitotóxicas, la resistencia a insecticidas y variacionesgenéticas. A la fecha se han descrito aproximadamente 24biotipos de B. tabaci. El biotipo B de esta mosquita induce desórdenesfisiológicos en tomate (maduración desuniforme de los frutos) y cucurbitáceas(plateado de las hojas).Los diferentes biotipos de B. tabaci son reconocidos usualmente por lapresencia de reacciones fitotóxicas específicas y marcadoresbioquímicos de esterasas. Junto con ello, el uso de marcadoresmoleculares ha contribuido considerablemente al estudio de la variaciónde esta mosquita blanca, ya que permiten obtener resultados másconfiables, precisos, reproducibles y son capaces de detectar pequeñasvariaciones en el genoma.Existen hoy en día varias técnicas utilizadas para la identificación delos distintos biotipos de B. tabaci, las cuales presentan diferentes costosy complejidades. Una de las técnicas empleadas es la amplificaciónde ADN polimórfico al azar (RAPD, Random amplified polymorphicDNA) la que ha sido útil en diferenciación de biotipos y distribucióngeográfica de esta mosquita, este método se caracteriza por ser relativamentesimple, permite analizar un gran número de muestras de formasimultánea, sin embargo su patrón de bandeo a menudo puede generardificultad en la interpretación y puede ser poco reproducible.Recientemente, se comenzó a usar la técnica de Polimorfismo en laLongitud de los Fragmentos Amplificados (AFLP, amplified fragment36Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejolength polymorphism), la cual entrega una mayor resolución de las diferenciasgenéticas que RAPD, sin embargo esta técnica es relativamentecompleja, requiere mayor tiempo de trabajo y es costosa.También se han realizado estudios filogenéticos moleculares basadosen la comparación de secuencias nucleotídicas de la subunidadribosomal 16S y el gen mitocondrial citocromo oxidasa I (mtCOI) lasque han permitido establecer relaciones genéticas entre distintas poblacionesde B. tabaci, sin embargo debido a que esta técnica requiererealizar la secuenciación de los productos de PCR obtenidos se encarecesu ejecución, por lo que para el análisis a gran escala se vuelvepoco práctica. Para casos como éste, la utilización de marcadoresmicrosatélites ha sido de gran utilidad, estos marcadores se caracterizanpor ser altamente polimórficos y codominantes, sin embargo presentanuna tasa de mutación relativamente alta. Para una buena identificaciónde los biotipos de B. tabaci es necesario utilizar hembras, debidoa que una de las características de las mosquitas blancas es quepresentan una reproducción haplo-diploide, en la que los huevos fecundadosdan origen a hembras y en que los machos se producen apartir de óvulos no fertilizados, por lo que las hembras heredan el materialgenético de ambos padres.PROSPECCIÓN E IDENTIFICACIÓNDE MOSQUITAS BLANCAS ENLOS VALLESDE LA REGIÓN DEARICA Y PARINACOTAB. tabaci fue reportada por primera vez en Chile en plantas de alfalfaprovenientes de Estados Unidos en el año 1998, este foco fue tratado yerradicado. Sin embargo, en el año 1999 fue detectado nuevamentesobre especies de Hibiscus y Euphorbia en viveros de las Regiones deArica y Parinacota, Valparaíso y Metropolitana, siendo erradicadas enlas dos últimas regiones. La aparición de B. tabaci en parques públicosde la Región de Arica y Parinacota no permitió su erradicación. Seguimientosrealizados por el Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) hasta elaño 2000, no habían identificado el biotipo de B. tabaci presente en laBoletín INIA, Nº 22437

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoRegión y hasta esa fecha no se habían observado síntomas característicosdel biotipo B en cultivos de tomates, cucurbitáceas, brócoli o lechuga.Hasta abril del año 2002, de acuerdo a información oficial emitidapor el SAG, en sus “Noticias Fitosanitarias”, este insecto habíasido detectado en 27 hospederos distintos de la Región de Arica yParinacota (achiras, albahaca, alfalfa, algodonero, betarraga, coronadel Inca, crisantemos, chañar, hibisco, ilusión polaca, lechuga,lechuguilla, locotos, manzanillón, melón, papa, pepino de ensalada,pimiento morrón, platanero, porotos verdes, repollo, rosa, tomate,zapallo de guarda y zapallo italiano). Existen diversos factores que hanfavorecido la presencia de mosquitas blancas en los valles de la Regiónde Arica y Parinacota, entre los que destacan su amplio rango de hospederos,la escasa o nula rotación de los cultivos, el excesivo uso denitrógeno, la alta densidad de plantación, la escasa eliminación de residuosde cosecha o abandono de los cultivos, sumado a la plantaciónde tomates cercanos a cultivos abandonados, además de la aplicaciónde insecticidas no selectivos o de amplio espectro como son lospiretroides.La presencia de B. tabaci en la Región de Arica y Parinacota adquieremayor relevancia a partir del año 2007, año en el cual se genera unapérdida de hasta el 50% de la producción de tomate en el Valle deAzapa, lo que se atribuyó en gran parte a infecciones virales. Esto llevóa realizar un seguimiento de los distintos vectores que pudiesen estarasociados a los diferentes virus detectados en la Región, siendo de mayorrelevancia la presencia de altas poblaciones de mosquita blanca,específicamente B. tabaci. En el año 2008 se continuó observando lapresencia masiva de B. tabaci en el Valles de Azapa en cultivos detomate, porotos verdes y zapallo italiano, ahora junto a la presencia desíntomas asociados al biotipo B de esta mosquita, lo que motivó a realizarun primer acercamiento para identificar los biotipos presentes enla Región.Seguimientos y estudios de este insecto, realizados en el Valle de Azapade la Región de Arica y Parinacota, han demostrado que coexisten losgéneros de mosquitas blancas B. tabaci y Trialeurodes vaporariorum enlos cultivos de tomate (Figura 13).38Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 13. Presencia de Mosquita blanca del tabaco(Bemisia tabaci ) y Mosquita blanca de los invernaderos(Trialeurodes vaporariorum) en hojas de tomate.Durante los años 2009 y 2010 se realizaron recolecciones de 133 poblacionesde mosquitas blancas en los Valles de LLuta, Azapa y Chacade la Región de Arica y Parinacota (Figura 14), provenientes de cultivosde tomate, porotos verdes, albahaca, pepino, pimiento y malezas,los que presentaban síntomas característicos para infecciones conBegomovirus.Figura 14. Captura de mosquita blanca en los Vallesde la Región de Arica y Parinacota.De estas poblaciones se analizaron más de 300 hembras adultas de B.tabaci, utilizando tres marcadores microsatelites que permiten diferenciarentre los biotipos A y B de estas mosquitas (Cuadro 4 y Figura 15).Los patrones de migración obtenidos de estos análisis permitieron determinarque las mosquitas blancas analizadas corresponden al biotipoB de B. tabaci.Boletín INIA, Nº 22439

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoCuadro 4. Marcadores microsatélites utilizados para la identificaciónde biotipos de B. tabaci en los Valles de Lluta y Azapa.NombreMicrosatélite Repetición Partidor (5' 3') Tamaño ReferenciaBEM25 (CTT)10 AAGTATCAACAAATTAATCGTG 95-188 De BarroTGAAGAATAAGAATAAAGAAGG et al, 200353 (GT)20 TTCGTAACGTCTTTAAATTTTTGC 133-169 DelatteTGGAGCATATAGCCTTTTTGG et al, 2006145 (AC)9 CCTACCCATGAGAGCGGTAA 173-220 DalmonTCAACAAACGCGTTCTTCAC et al, 2008Figura 15. Identificación de biotipo de Bemisia tabaci utilizandomicrosatélites. Gel de agarosa al 1,5% teñido con Bromuro de etidio.Flecha A: control positivo biotipo A. Flecha B: control positivo biotipo B.C-: control negativo. Estándar de peso molecular Bench Top 100bp Promega.Estos resultados fueron confirmados realizando PCR del gen mtCOI (C1-J-2195: 5' TTG ATTTTTTGGTCATCCAGAAGT 3', L2-N-3014: 5'TCCAATGCACTAATCTGCCATATTA 3') y posteriormente, la secuenciaciónde este fragmento, confirmaron la presencia del biotipo B de B.tabaci en los Valles de Lluta, Azapa y Chaca de la Región de Arica yParinacota.COMPLEJO MOSQUITA BLANCA-BEGOMOVIRUSLos Begomovirus (género Begomovirus, familia Geminiviridae) son virusvegetales que poseen como material genético una hebra simple deADN que puede ser mono o bipartita. La mayoría de los Begomovirus40Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoposee un genoma bipartito, esto significa que el genoma viral se encuentradividido en dos segmentos referidos como ADN-A y ADN-B,los que forman parte de dos diferentes partículas virales. Este grupo devirus son considerados como patógenos emergentes, afectando a unagran variedad de cultivos, causando grandes pérdidas a nivel mundial.En 2001, Morales y Anderson han señalado que Latinoamérica ha sidola región más afectada en el surgimiento de nuevos Begomovirus, tantopor el número de cultivos afectados, como por las pérdidas de las cosechasy áreas agrícolas devastadas por estos agentes virales. El vectornatural de los Begomovirus corresponde a B. tabaci, que se caracterizapor encontrarse en cultivos de regiones tropicales y subtropicales debidoa que requieren temperaturas entre 10 y 30 o C para poder desarrollarse.Los Begomovirus, hasta el año 2007, no habían sido reportados en elterritorio chileno. Sin embargo, durante ese año se observósintomatología típicamente asociada a enfermedades virales en los cultivosde tomate de los Valles de la Región de Arica y Parinacota. Estosincluían síntomas de amarillez y enrollamiento de hojas, plantas detamaño reducido, sumado a una alta presencia de mosquita blanca. Lacaracterización de la secuencia genómica parcial de los virus asociadosa la sintomatología recientemente descrita, confirmó la presenciade agentes virales del grupo de los Begomovirus en los cultivos de tomatede esta Región, como se mencionó en el capítulo 2.Los resultados de las prospecciones realizadas reflejaron que losBegomovirus estaban presentes en un 42,1% de las muestras analizadas,donde las muestras de tomate correspondieron a 53% (ver másdetalle en capítulo 2).Estudios posteriores de las secuencias genómica de los Begomovirusaislados en la Región de Arica y Parinacota, han mostrado que en elpaís estaría sólo presente el virus bipartita denominado Virus del estríadoamarillo de la vena del tomate (Tomato yellow vein streak virus,ToYVSV). Este agente viral ha sido descrito previamente en América delSur, en Brasil y Argentina infectando naturalmente tomates (Solanumesculentum) y papas (Solanum tuberosum), respectivamente.Boletín INIA, Nº 22441

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoOTROS ANTECEDENTES EPIDEMIOLÓGICOSDE MOSQUITAS BLANCAS EN EL CULTIVODE TOMATE EN EL VALLE DE AZAPALas pérdidas ocasionadas por plagas en los cultivos pueden ser relevantes,en especial las causadas por Bemisia tabaci (Gennadius) yTrialeurodes vaporariorum (Westwood), (Hemiptera: Aleyrodidae). Estosinsectos causan daño directo en el tejido foliar por su hábitoalimentario, o succionando la savia en hojas y tallos, e indirecto al sereficientes vectores de virus. Secundariamente, la formación de fumaginapuede generar pérdidas al reducir la eficiencia fotosintética. De estaforma, conocer, diagnosticar, monitorear y prevenir la presencia de plagasvectoras de enfermedades es un aspecto esencial en el desarrollode estrategias de manejo integrado de plagas. Se determinó la preferenciade las especies de mosca blanca (B. tabaci (Gennadius) y T.vaporariorum (Westwood)), asociadas a las principales malezas asociadasal cultivo, y se definió la especie predominante en sectores definidosen un transecto mar – cordillera en el Valle de Azapa. Para ello,se realizó un levantamiento de las poblaciones de las dos especies demosquita blanca presentes a lo largo del Valle de Azapa para determinarlas fluctuaciones poblacionales, entre los meses de mayo hastanoviembre monitoreando con una frecuencia de 7 días, tres sectoresrepresentativos del Valle, señalados como:• Sector 1: Kilómetro 2,5 carretera A-1.S 18 o 29.165‘ – WO 70 o 15.912‘. Altura: 73 msnm.• Sector 2: Kilómetro 12 carretera A-1.S 18 o 30.849‘ – WO 70 o 10.947‘. Altura: 247 msnm.• Sector 3: Kilómetro 30 carretera A-1.S 18 o 34.507‘ – WO 70 o 01.794‘. Altura: 601 msnm.En la metodología de colecta, se eligieron al azar 10 plantas de tomatede las cuales se obtuvieron hojas y brotes. Una vez colectadas las muestrasen cada sector, se evaluó el número de ninfas presentes en lashojas. Además, se muestrearon las malezas asociadas al cultivo, evaluándolascon el mismo método usado en tomate. Las malezas colectadas(sector 1, 2 y 3) se indican en el Cuadro 5 y Figura 16.42Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoCuadro 5. Principales malezas asociadasal cultivo de tomate en Arica.Nombre CientíficoAmaranthus deflexus L.Ambrosia spBidens pilosa L.,Euphorbia minuta Phil.,Malva nicaensis H.,Lippia nodiflora Michxk,Pitraea cuneato-ovataNombre ComúnBledoAltamisaAmor SecoLeche – Leche, MariquitaMalvaLipiaPapillaFigura 16. Principales malezas asociadas al cultivo deltomate en Arica. A. Amaranto; B. Ambrosia sp.;C. Amor seco; D. Malva; E. Lippia, F. Papilla.Boletín INIA, Nº 22443

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoLos resultados del monitoreo de mosquitas blancas realizado en el Vallede Azapa, se pueden resumir de la siguiente forma:• En las plantas colectadas, B. tabaci presentó mayor preferencia porla especie Pitraea cuneato – ovata (“Papilla”), con 30,5 %, mientrasque T. vaporariorum presentó mayor preferencia por tomate, con28,4%, este insecto mostró preferencia también por Malva nicaensis,con 26,2%.• De ambas especies de mosca blanca, la que presentó mayor númerode ninfas en los tres sectores estudiados, en las 23 semanas demuestreo, fue B. tabaci, con 30,5%.• Bidens pilosa, fue colonizada progresivamente por B. tabaci en funcióndel sector muestreado. A medida que aumentó la altura (msnm)y se alejó de la influencia marítima, aumentó el número de ninfassobre esta maleza.• Por el contrario, el porcentaje de ninfas de T. vaporariorum presentesen Pitraea cuneato – ovata, decreció hacia el sector 3, presentandoel mayor valor en la población del sector 1.• En los sectores 2 y 3, se incrementó la población de ninfas de T.vaporariorum (Figura 17) en plantas de tomate.• T. vaporariorum presentó menor preferencia por Bidens pilosa.• La población de ninfas de ambas especies de mosquita blanca seincrementó a medida que se avanzó al sector 3 del Valle.• En el sector 1, predominaron poblaciones de B. tabaci (21%) porsobre las de T. vaporariorum (9,5%), mientras que en el sector 2 y 3predominó esta última, con 31 y 59,5%, respectivamente.44Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 17. Monitoreo de poblaciones de ninfas demoscas blancas presentes en el Valle de Azapa.Gráficos construidos con informaciónde Cares y Miranda (2007).Boletín INIA, Nº 22445

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoCONCLUSIONESProspecciones realizadas entre los años 2009-2010han permitido identificar altas poblaciones demosquitas blancas, específicamente Bemisia tabacien cultivos de tomate en los Valles de Azapa, LLutay Chaca de la Región de Arica y Parinacota. Porotra parte, análisis del gen mitocondrial COI ymarcadores microsatélites han confirmado la presenciadel biotipo B de Bemisia tabaci en esta Región,biotipo que es considerado como uno de losvectores virales más eficientes.Concordante con lo anterior, junto con las altaspoblaciones de B. tabaci se ha detectado una granincidencia de enfermedades virales causadas porBegomovirus, principalmente en cultivos de tomatede los Valles de Lluta y Azapa, el cual corresponderíaal Virus del estriado amarillo de la venadel tomate (ToYVSV), siendo hasta la fecha el únicoBegomovirus detectado en el territorio chileno.46Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoREFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASBrown, J., Bird, J. 1992. Whiteflytransmitted geminiviruses anda sso c ia te d d iso rd e rs in th eAmericas an d th e Caribbe anBasin. Plant Disease. 76:220-225.Brown, J., Frohlich, D., Rosell, R.1 99 5 . Th e swe e tpo ta to o rsilverleaf whiteflies: biotypes ofB emisia tab a ci o r a sp e c ie scomplex ?. Annua l Re view ofEntomology. 40:511-534.Cares, C. y Miranda, P. 2007. Prospec c ión de TY L CV (Toma toYellow Leaf Curl Virus), su vectorB emisia ta b a ci (Ge n na d iu s)(Hemíptera: Aleyrodidae) y otrosvirus en el cultivo de tomate(Lycopersicon esculentum Mill.)y malezas asociadas en el Vallede Azapa. 93 pp. Tesis para optaral título profesional de IngenieroAgrónomo. Universidad deTarapacá.Cervera, M.T., Cabezas, J.A., Simón,B ., Ma rtín e z -Z a p a ter, J.M.,B e itia , F., Cenis, J.L . 2 00 0 .Ge netic relation ships amo ngb io typ e s o f B e misia tab a c i(Hemiptera: Aleyrodidae) basedon AFLP ana lysis. Bulletin ofEntomological Research. 90:391–396.Colariccio, A., Eiras, M., Chaves, A.,Bergmann, J., Zerbini, F., Harakava,R. and Chagas, C. 2007.Tomato yellow vein streak virus,a new Begomovirus on tomatofrom Brazil: complete DNA-Asequence and some molecularand biological features. Journal ofPlant Pathology. 89(3): 385-390.De Barro, P.J., Scott, K.D., Graham,G.C., Lange, C.L., Schutze, M.K.2003. Isolation and characterizationof microsatellite loci inBemisia tabaci. Molecular EcologyNotes. 3: 40-43.Delatte, H., David, P., Granier, M.,L e tt, J.M., Gold ba c h , R .,Peterschmitt, M. and Reynaud, B.2006. Microsatellites reveal extensivegeographical, ecologicaland genetic contacts between invasiveand indigenous whiteflyb io typ es in an in su lar e n vironment.Genetic Research. 87:109–124.Drost, Y. C., J. C. van Lenteren, andH. J. W. van Roermund. 1998.Life-history parameters of differentbiotypes of Bemisia tabaci(He mip te ra: Aley ro d id a e) inrelation to temperature and hostplant: a selective review. Bulletino f E n to mo lo gic a l R e se arc h88:219-229.Boletín INIA, Nº 22447

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CAPÍT ULO 4Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoMANEJO DE ENFERMEDADESVIRALES TRASMITIDAS POR INSECTOSEN TOMATES EN LA REGIÓNDE ARICA Y PARINACOTAPaulina Sepúlveda R.Ingeniera Agrónoma M.Sc.Claudia Rojas B.Ingeniera Agrónoma.Marlene Rosales V.Bioquímica Ph.D.Germán Sepúlveda Ch.Ingeniero Agrónomo Ph.D.Boletín INIA, Nº 224EFECTO DE VIRUS EN RENDIMIENTOEl tomate es la principal hortaliza que se cultiva durante todo elaño en el Valle de Azapa, abasteciendo así a los consumidores dela zona central del país. En los últimos años, este cultivo se havisto severamente afectado por enfermedades causadas por virus quedisminuyen la producción y afectan al cultivo en diferentes estados dedesarrollo. Se caracterizan por síntomas de mosaico, hojas enrolladas,frutos deformados, enanismo de las plantas, lo que afecta severamenteel rendimiento, especialmente si son afectadas en los primeros estadosde desarrollo.Estudios realizados por INIA y la Universidad de Tarapacá en el marcodel proyecto “Validación del paquete tecnológico para el manejo devirus transmitidos por mosquitas blancas en el cultivo del tomate en laRegión de Arica y Parinacota” “financiado por el Gobierno Regionalde Arica y Parinacota” han establecido que la principal causa de labaja producción del cultivo de tomate en la Región se debe a enfermedadescausadas por virus, especialmente aquellos trasmitidos pormosquitas blancas y pulgones..49

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoLos resultados han indicado lapresencia de dos agentes virales,como los principales responsablesde los síntomas observados(deformación de hojas y frutos,mosaico, moteado, enanismo,entre otros) en plantas de tomate(Figuras 18-20). Ellos son el Virusdel mosaico peruano del tomate(PToMV) perteneciente algrupo Potyvirus, cuyo agentevector corresponde a insectoschupadores, llamados pulgones oáfidos (alados), que lo transmitende modo no persistente, es decirel insecto pica una planta enfermae inmediatamente al picarotra planta puede trasmitir el virus.El otro agente corresponde ael Virus del estriado amarillo delas venas del tomate (ToYVSV),perteneciente al grupo Begomovirus,cuyos vectores son tambiéninsectos chupadores como lasmosquitas blancas, específicamentela mosquita blanca del tabacoBemisia tabaci, determinadarecientemente en Chile, y quesolo se presentan en esta Regióndel país.Estos insectos se caracterizan porser vectores muy eficientes y porello causar los mayores daños enlos cultivos de la Región. Es importantemencionar, que en laRegión también se encuentran enel cultivo de tomate otras mosqui-Figura 18. Síntomas de moteado.Figura 19. Síntomas de deformaciónde hojas.Figura 20.Síntomas de enanismo.50Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejotas blancas llamadas “de los invernaderos, Trialeurodes vaporariorum”,que no son vectores de los virus encontrados en el Valle de Azapa.Diversos estudios realizados en especies hortícolas, han demostradoque los virus afectan severamente el crecimiento y producción de lasplantas. Los daños son mayores cuando las plantas son afectadas en losprimeros estados de desarrollo.Investigaciones realizadas por INIA en el marco del proyecto, en tomatevariedad Naomi, permitieron validar la información sobre el efecto de losvirus en rendimiento, según el momento que ocurre la infección por elagente viral, protegiendo o no las plantas con una barrera física durante20 días post trasplante, de modo que no existiera contacto entre el vectory las plantas. Mediante un monitoreo semanal se identificaron las plantasenfermas y se evaluó incidencia de virus, es decir, porcentaje de plantasenfermas del total de plantas evaluadas, para luego determinar al momentode cosecha, su rendimiento expresado en peso de los frutos por calibre.En la Figura 21, se observa que la incidencia de virus de las plantasque permanecieron sin protección, llegó a 100% a los 20 días posttrasplante; mientras aquellas que permanecieron cubiertas, la incidenciano superó el 20% en ese mismo periodo. Los virus encontrados enlas plantas fueron el Virus del estriado amarillo de las venas del tomate(ToYVSV) y el Virus del mosaico peruano del tomate (PToMV) ambostrasmitidos por insectos vectores.Figura 21. Incidencia de virus en plantas de tomate, sinprotección versus con protección, Valle de Azapa, 2009.Boletín INIA, Nº 22451

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoLos rendimientos fueron severamente afectados (92%) cuando las plantasse contagiaron por virus en los primeros 7 días post trasplante, comparadocon aquellas plantas que se afectaron después de 30 días del trasplante(Figura 22).Figura 22. Rendimiento comercial y por calibre (gr/pl)según momento de infección por virus, plantas con ysin protección de virus. Valle de Azapa, 2009.ConclusionesLos resultados permitieron concluir que:• Los virus afectan significativamente el rendimiento en tomate.• El efecto en rendimiento está directamente relacionado con el momentode la infección.• Mientras más pequeñas están las plantas al momento de la infección,mayor es el efecto en rendimiento.• El uso de protección durante 20 días permitió reducir la incidenciade virus.• Cuando las plantas se afectan por virus antes de los 20 días, la reducciónde rendimiento varió entre 67 a 92%.52Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoMANEJO DE ENFERMEDADES VIRALESLos insectos pueden causar daños directos a las plantas cuando se alimentande ellas y son considerados plagas, mientras otros pueden tambiéntransmitir virus que causan enfermedades de importancia en laagricultura. Estos problemas, se presentan más en zonas agrícolas dondese aplican muchos insecticidas que matan los insectos y otros organismosque controlan a los dañinos.Es importante tener en cuenta, que las medidas de control de insectosque solo causan daños directos a las plantas, por lo general, NO sirvenpara controlar insectos que transmiten virus. La razón es que generalmentese necesitan muchos insectos para causar daño, por lo que elagricultor los puede ver y controlar con insecticidas. Por el contrario,los insectos chupadores que transmiten virus, infectan las plantas tanpronto como se establecen en el campo, antes de que el agricultor losvea, y muchas veces estos insectos no se alimentan de las plantas queenferman, por lo que no se ven.Al no existir medidas de control curativo para las enfermedades de origenviral, la lucha contra estos agentes patógenos se ha basado en medidas preventivasy principalmente en evitar que el patógeno entre en contacto con laplanta, esto se puede lograr utilizando prácticas de manejo cultural como:• Utilización de plantas libres de virus al momento del trasplante, loque se logra con producción de almácigos bajo malla antiafidos.• Eliminación de los rastrojos enfermos, de modo de evitar la fuente de inóculo.• Eliminación de plantas enfermas en el cultivo, teniendo cuidado deevitar el contacto con plantas adyacentes.• Control preventivo de insectos vectores (pulgones y mosquitas blancascon la inmersión de raíces de plántulas previo al trasplante ensolución insecticida como Imidaclorprid o Thiametoxam).• Modificación en las fechas de plantación, de modo de evitar lasmayores poblaciones de insectos vectores.Boletín INIA, Nº 22453

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo• Asegurarse que los trabajadores al ingresar al cultivo lleven ropa limpia.• Protección durante todo el período de cultivo (Exclusión) o al menosdurante los primeros 30 días desde la siembra o hasta el levantedel cultivo (uso de manto térmico).• Uso de variedades con mayor tolerancia o resistencia, desarrolladasa través de programas de mejoramiento tradicional u obtenidosempleando partes del genoma del patógeno en plantas transgénicas.(Evaluaciones preliminares, desarroladas en el marco del proyecto,en el Valle de Azapa señalan un buen comportamiento de Yola yotras líneas experimentales aún en desarrollo).Considerando que la exclusión, es la mejor alternativa de manejo delas enfermedades virales trasmitidas por insectos vectores, durante eldesarrollo del proyecto se realizaron estudios que avalan el uso de cultivoprotegido con malla antiafido y se señala a continuación:ExclusiónEs decir, proteger al cultivo con una malla fina (20/10 mesh) que evitela entrada de los insectos vectores durante todo el periodo de cultivo,es sin lugar a dudas, la mejor forma de manejo de enfermedades virales.Resultados obtenidos en ensayos realizados en el Valle de Azapa, avalanlos beneficios de este sistema de manejo, en comparación con un cultivoal aire libre.A continuación, se señalan los aspectos relevantes del estudio que comparael cultivo bajo malla y al aire libre.Se determinó en ambos cultivos la incidencia de virus (expresado enporcentaje plantas con síntomas de virus) y cuantificaron las poblacionesde insectos, especialmente de mosquitas blancas (Bemisia tabaci yTrialeurodes vaporariorum) a través de un monitoreo semanal. La identificacióndel o los agentes virales presente en las plantas se realizómediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en elLaboratorio de Patología Molecular de INIA La Platina.54Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoLos resultados demostraron que la exclusión, es decir cultivo protegidocon malla, fue una excelente alternativa de manejo de enfermedadesvirales, ya que la incidencia de virus no superó el 20% mientras, elcultivo al aire libre tuvo incidencia cercana al 100% (Figura 23), estopermitió aumentar el rendimiento en forma significativa. Si bien es ciertoque, en el cultivo protegido se encontraron plantas con síntomas devirus, fue debido a que las plántulas utilizadas en la plantación, proveníande un almácigo sin protección de malla antiáfido, situación queno ocurriría si las plantas se producen bajo condiciones protegidas conmalla antiáfido.Figura 23. Incidencia de virus (%) en cultivo detomate al aire libre y bajo malla antiáfido, Valle deAzapa, 2009.Los análisis de laboratorio indicaron mayoritariamente la presencia delVirus del estriado amarillo de las venas del tomate (ToYVSV), pero tambiénse presentaron algunas con presencia del Virus del mosaico peruanodel tomate (PeToMV), tanto al aire libre como en cultivo protegido.Los monitoreos de insectos demostraron la presencia de Bemisiatabaci principalmente en el cultivo al aire libre.Los resultados de la evaluación de rendimiento en tomate bajo malla,indicaron que las plantas con virus redujeron su rendimiento comercialen 27.2% en comparación con las sanas, esto expresado en kg de frutos/ha, mientras que el efecto en número de frutos comerciales fue de 19.7%(Figuras 24 y 25). Al comprar los resultados al aire libre se observa en lasfiguras 24 y 25 que el efecto en rendimiento fue de 35.9% mientras lareducción en el número de frutos comerciales fue solo de 2.5%.Boletín INIA, Nº 22455

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 24.Número de frutoscomerciales de tomatecosechados por hectárea,proveniente de plantassanas y con virus,cultivadas al aire librey bajo malla (20/10 mesh),Valle de Azapa, 2009.Figura 25.Rendimiento comercialde tomate por hectárea,proveniente de plantassanas y con virus,cultivadas al aire libre ybajo malla (20/10 mesh),Valle de Azapa, 2009.Al analizar el efecto de los virus al aire libre y bajo malla, se determinóque estos agentes disminuyeron significativamente el número y rendimientode frutos en los calibres extra, primera y aumentó la cantidadde frutos de segunda, tercera y desecho (Figuras 26 y 27).Figura 26. Número de frutos de tomate por calibre/ha,proveniente de plantas sanas y con virus, cultivadas al airelibre y bajo malla (20/10 mesh), Valle de Azapa, 2009.56Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 27. Rendimiento de frutos de tomate por calibre (kg/ha)proveniente de plantas sanas y con virus, cultivadas al airelibre y bajo malla (20/10 mesh), Valle de Azapa, 2009.Conclusiones• La exclusión, es decir la protección del cultivo con malla antiafidopermite disminuir significativamente la incidencia de infecciones virales.• El cultivo bajo malla permite un aumento de rendimiento sobre37.8%, como también mejorar el calibre de los frutos.• Los virus disminuyen el rendimiento en 35.9% en el cultivo al airelibre.• Los virus aumentan el porcentaje de frutos de desecho, tanto al airelibre como en cultivo protegido.Uso de manto térmico (cubierta de polipropileno)como barrera física en el cultivoEl manto térmico es una tela fabricada con múltiples fibras depolipropileno, orientados en distintas direcciones, para lograr una especiede tejido muy fino y ligero, fabricada con material virgen, notóxico y estabilizado UV para alargar su vida útil.Su principio es formar una especie de microclima entre la planta y elterreno, reteniendo el aire cálido que libera el suelo, especialmente du-Boletín INIA, Nº 22457

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejorante la noche, formando un colchón de aire que actúa como escudotérmico logrando un diferencial de temperatura de hasta 3 a 5 grados Cº.Una de sus principales ventajas, es tener un peso muy ligero (17 gr/m 2 )lo que permite colocarla directamente sobre la planta o cultivo, sinproducir daño por roce o peso. Presenta permeabilidad al aire, permitiendoel intercambio gaseoso entre la planta y el medio ambiente.Está comprobado que reducir las bajas temperaturas y el estrés del cultivo,produce plantas más vigorosas, sanas y más resistentes a enfermedades.Representa una barrera física que impide el acceso de pequeños animaleso de insectos (evitando el daño físico o enfermedades transmisibles).Reduciendo significativamente el uso de químicos y pesticidassobre los cultivos.Como se señaló en el inicio de este capítulo, se ha demostrado que lasinfecciones virales producen mayores pérdidas en los cultivos, cuandoellos son afectados durante los primeros estados de desarrollo. El uso deuna barrera física como es el manto térmico, durante los primeros 30 díasdel cultivo después del trasplante, fue evaluado durante 2 temporadas encultivo de tomate al aire libre resultando ser una alternativa viable.Los resultados de los estudios realizados en el Valle de Azapa, concuerdancon varios autores quienes también señalan las ventajas de uso deesta barrera, en varios cultivos hortícolas reduciendo el efecto de enfermedades.A continuación, se señalan los estudios realizados durante dos temporadasque permitieron validar el uso de esta técnica de protección alcultivo. Los estudios se realizaron en el Valle de Azapa en tomate variedadNaomi. El manto fue colocado al momento del trasplante y retiradoa los 20 días (Figura 28) y se comparó con plantas sin protección.Paralelamente, se evaluó la presencia de virus semanalmente en lasplantas. Se determinó el efecto en altura de plantas y rendimiento.Los resultados de ambas temporadas reflejaron que la incidencia de virus(porcentaje de plantas afectadas del total de plantas), disminuyó entre 40-58Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoFigura 28. Izquierda, plantas protegidas con manto yderecha sin protección.50% entre las plantas sin protecciónversus las protegidas (Figura29). Los virus más importantesidentificados fueron: Virus del MosaicoPeruano del tomate (PtoMV)y Virus del estriado de las venasamarillas del tomate (ToYVSV).En la Figura 30 se observa el tamañode las plantas al momento deretirar el manto, se destaca el mayortamaño de las mismas que permanecieroncubiertas, esto ratificala condición de microclima a laque estuvieron sometidas las plantasdurante 20 días post trasplante.Figura 29. Incidencia de virus encultivo de tomate protegido o nocon manto término a los 45 díaspost trasplante, año 2010 y 2011,Valle de Azapa.Figura 30. Vista general de plantas a los 20 días después del trasplante,izquierda con manto y derecha sin manto.Boletín INIA, Nº 22459

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoEl incremento en altura de plantascon protección del manto varióentre los distintos años entre27 y 48% (Figura 31).El rendimiento de las plantas fuesignificativamente superior enaquellas que estuvieron bajomanto térmico y varió entre 28 y53% dependiendo de la temporadade estudio (Figura 32). Ladistribución por calibre fue superioren las plantas protegidas.Cabe señalar que los bajos rendimientosdel año 2011 se debierona un fuer te ataque denematodos en las plantas.Figura 31. Comparación de alturade plantas de tomate a los 20 díasdesde el trasplante, con proteccióny sin protección, 2010-2011.ConclusionesLos resultados de las investigacionesrealizadas por dos temporadaspermitieron concluir que:• El uso de manto térmico durante20 días post trasplante,constituye una alternativa viabley económica de manejo deenfermedades virales en tomatecultivado al aire libre.Figura 32. Comparación derendimiento de tomates (kg/ha)en dos temporadas 2010-2011de plantas con y sin proteccióncon manto térmico.• El manto térmico sobre las plantas retrasa la infestación tempranade virus en el cultivo de tomate, permitiendo reducir la incidenciade virus de un 40 a un 50% el primer mes de cultivo.60Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo• Los virus más importantes identificados fueron: Virus del mosaicoperuano del tomate (PtoMV) y Virus del estriado de las venas amarillasdel tomate (ToYVSV).• El uso de manto térmico aumentó significativamente el rendimientocomercial entre un 28 y 53%, con mayor proporción de frutos decalibres superiores (extra y primera).RECOMENDACIONES GENERALESA la luz de los resultados obtenidos en los estudios realizado en el marcodel proyecto “Validación del paquete tecnológico para el manejo de virustransmitidos por mosquitas blancas en el cultivo del tomate en laRegión de Arica y Parinacota” y como una medida efectiva de disminuirlas pérdidas de rendimiento causados por los agentes virales Virus delmosaico peruano del tomate (PtoMV) y Virus del estriado de las venasamarillas del tomate (ToYVSV), determinados en la Región de Arica yParinacota y cuya principal forma de diseminación son agentes vectores,pulgones y mosquitas blancas (Bemisia tabaci) se recomienda:• Utilización de plantas libres de virus al momento del trasplante, loque se logra con producción de almácigos bajo malla antiafidos.• Eliminación de los rastrojos enfermos, de modo de evitar la fuentede inóculo.• Eliminación de plantas enfermas en el cultivo, teniendo cuidado deevitar el contacto con plantas adyacentes.• Realizar un control preventivo de insectos chupadores (pulgones ymosquitas blancas) con inmersión de raíces en solución con insecticidaImidaclorprid o Thiametoxam antes del trasplante.• En cultivo de tomate al aire libre, proteger las plantas con mantotérmico o malla de polipropileno por 20 días, previo a la conduccióndefinitiva de las plantas.Boletín INIA, Nº 22461

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejo• Establecer el cultivo en invernadero de malla antiafido.• Uso de variedades tolerantes o resistentes a los virus presentados enla Región.Por último, es importante señalar que siempre existen posibilidadesque se presenten nuevas enfermedades virales en los cultivos, por lotanto el monitoreo frecuente es una herramienta indispensable paraidentificar problemas de virus emergentes.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASFuentes, C. Sandoval, C. y Carrasco,G. 1997. Efecto del virus del mosaicodel pepino (CMV) sobre elcrecimiento, desarrollo y producciónde tomate en ambiente controlado.[Fecha de consulta: 13de julio 2011] Disponible en:http://hdl.handle.net/1950/1492Morales, F. 2004. Control físico deenfermedades de plantas causadaspor virus transmitidos por insectos.[Fecha de consulta: 11 dejulio 2011]. Disponible en:h t t p : / / w w w. t r o p i c a l w h i t eflyipmprojec t.cg ia r.org/do cs/doc s/we b-CONTROL-FISICO-ENFERMEDADES-PLANTAS.pdfPinto, T. 2003. Efecto de diferentesperiodos de cobertura con tela depolipropileno sobre la incidenciade virosis y aumento de rendimientodel cultivo del tomate(Licopersicum esculentum L) bajolas condiciones de la estaciónseca de Ipala, Chiquimula, Guatemala.42 p. Tesis Ing. Agr. SanCarlos, Guatemala, Centro Universitariode Oriente. Disponible:[Fecha de Consulta: 13 de Julio2011]. Disponible en:ht t p: / / cunori . ed u. gt / desca rgas/E F E C T O _ D E _ D I F E R E N T E S_PER I O D O S_D E _CO BERT U RA_CON_TELA_ DE_POLIPROPILENO_ S O B R E _ L A _ I N C I D E N C I A_DE_VIROSIS_ Y_AUMENTO.pdf62Boletín INIA, Nº 224

Virus trasmitidos por insectos vectores en tomate en la Región de Arica y Parinacota: situación actual y manejoR o ma y, G., Ge ra ud -P o ue y, F.,Chiro n os, D., Mo ra le s, F.,He rrera, E ., F erná ndez , C. yMartinez, A. 2010. Transmisióndel tomato Venezuela virus porB emisia ta b a ci (Ge n na d iu s)(He miptera: Aleyrod idae), enMaracaibo, Venezuela. Neotrop.entomol. 39(2): 266-274. [Fechade Consulta: 11 de Julio 2011]Disponible en:http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1519-5 6 6 X2 0 1 0 0 0 02 0 0 0 1 9 &ln g =es&nrm=iso>. ISSN 1519-566X.Sepúlveda, P. y Navarrete, J.F. 1996.Empleo del aceite en la reducciónde la transmisión de virus porá fid o s e n fré jo l (P h a se o lu svulgaris L.). Agricultura técnica56(2):99-106.Sepúlveda, R. P., Rojas, B.C., Rosales,V.M. y Sepúlveda, Ch.G.2010. Efecto de virus en el rendimientode tomates en el Vallede Azapa. 4 p. Informativo INIAUruri Nº19. Instituto de InvestigacionesAgropecuarias, Centrode Investigación Especializado enAgricultura del Desierto y Altiplano,Ururi, Chile.Sepúlveda P., Rosales M., Rojas C.,Mora, R. 2011. Control de Enfermedadesvirales en tomates en laRegión de Arica y Parinacota. TierraAdentro Nº92, p. 30-32.Sepúlveda, R.P., Rosales, V. M., Rojas,B.C. y Mora, R.R. 2010. Controlde enfermedades virales detomate en la provincia de Aricay Parinacota: exclusión, la mejoralternativa. 4 p. Informativo INIAUruri Nº13. Instituto de InvestigacionesAgropecuarias, Centrode Investigación Especializado enAgricultura del Desierto y Altiplano,Ururi, Chile.Boletín INIA, Nº 22463

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