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LCA Catalina Leos RivasTesis Doctoral5.4 Determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) de losextractos que muestren actividad biológica relevante.En una microplaca de 96 pozos se agregaron 100 l de medio líquido C. Rivas yse añadieron 100 l de cada una de los extractos partiendo de la concentración inicial de1600 g/ml y se realizaron microdiluciones seriadas. Una vez efectuadas estas, seadicionaron 100 l de la suspensión bacteriana a una concentración de 1 x 10 6 UFC(tubo uno de la escala de Mc Farland). Posteriormente la microplaca se incubó por 24 ha 37 °C, y se determinó la concentración mínima inhibitoria de cada una de lasfracciones aplicando 40 l de una solución de 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-2Htetranoliumbromuro (MTT) a una concentración de 2.5 mg/ml a cada pozo e incubandopor 4 h a 37 °C, posteriormente se observó la viabilidad microbiana de color púrpura delas diluciones probadas.5.5 Identificación de las fracciones con actividad antibacteriana yantifúngica relevante mediante la técnica de bioautografía.5.5.1 Cromatografía en capa delgada de los extractos conconcentración mínima inhibitoria relevante para separación de sus fracciones.Las placas cromatográficas se prepararon utilizando 10 g de sílica gel 7G en 40ml agua destilada, ésta mezcla se colocó sobre placas de vidrio de 7.5 x 2.5 cm, despuésse secó por un periodo de una hora en la estufa de secado a 110 °C. Una vez preparadas55