libro de resúmenes

20 REVISTA URUGUAYA DE PATOLOGÍA CLÍNICA2002 / 35CAPACIDAD ANTIOXIDANTE PLASMÁTICA Y SU VARIACIÓN CONLA EDADCelano, L.1, Vidal, A.1, Olascoaga, A.3, Alallón, W.3, Arago, A.4, Denicola, A.2 y Thomson, L.11 Enzimología y 2 Fisicoquímica Biológica - Facultad de Ciencias 3 Laboratorio Clínico y 4 Unidad deHemoterapia - Hospital de ClínicasUniversidad de la República - Montevideo - UruguayINTRODUCCION La acumulación progresiva de cambios inducidos por especies reactivas deloxígeno (ERO) y del nitrógeno es la base etiológica de las enfermedades degenerativas asociadasal envejecimiento. La capacidad de diferentes moléculas antioxidantes de actuar previniendo laaparición de enfermedades degenerativas es área de intensa investigación. El objetivo de estetrabajo es estudiar la capacidad antioxidante plasmática en adultos sanos, su variación con la edady con diferentes parámetros plasmáticos.MATERIALES Y MÉTODOS La capacidad antioxidante plasmática se determinó en personassanas entre 20 y 60 años, mediante la técnica de FRAP (Ferric Reducing Ability of Plasma). Laoxidación de proteínas plasmáticas medida como el contenido de carbonilos se cuantificó condinitrofenilhidrazina. Se dosifico ácido úrico, bilirrubina y proteínas totales.RESULTADOS La capacidad antioxidante en las muestras osciló entre 1 y 3 mM, presentandorelación con el contenido de ácido úrico, pero no con la concentración de bilirrubina. No seobservaron diferencias significativas en la capacidad antioxidante entre los diferentes gruposetarios. El contenido de carbonilos entre los 18 y 49 años (0.79 nmoles/mg proteínas), aumentandoen el grupo entre 50 y 60 años (1.37 nmoles/mg proteínas).CONCLUSIONES La correlación observada entre capacidad antioxidante y ácido úricoplasmático confirma su contribución mayoritaria (60%) al poder antioxidante plasmático total. Elaumento en la oxidación proteica observada en los adultos mayores, acompañada de una capacidadantioxidante conservada, es indicativo de un efecto acumulativo de ERO asociado a la edad.ROJO DE PYROGALLOL : COLORIMETRIA PARA PROTEINAS EN LCRBernard M , Pose A , Borche L . Repartición Emergencia, Dpto. de Laboratorio Clinico, Hospital de Clinicas,Montevideo .Objetivos: - Sustituir la determinación actual de proteinorraquia con ácido sulfosalicilíco por latécnica colorimétrica utilizando rojo de pyrogallol. Correlacionar los valores obtenidos paraambas técnicas con la finalidad de validar la metodologìa propuesta.Materiales y Metodos : Se analizaron 98 muestras de liquido cefalorraquideo (LCR) en elperiodo comprendido entre el 1/08/2001 y el 1/07/2002. La colorimetría se realizo en unautoanalizador Hitachi 704 (Roche ),con un volumen de muestra de 13 uL, utilizando comoreactivo de trabajo Rojo de Pyrogallol (BioSystem). La turbidimetría se realizó con AcidoSulfosalicílico al 3% de preparación propia ,con un volumen de muestra de 1000 uL, realizandola lectura fotométrica en un espectrofotómetro Perkin Elmer Coleman 295. Ambas técnicasfueron calibradas contra los calibradores correspondientes.Resultados : - En el 25% de los LCR el volumen de muestra fue insuficiente para turbidimetría,mientras que se pudieron realizar el 100% de las proteinorraquias por colorimetría.- En el análisis estadísitico se encontró un coeficiente de correlación de Pearson entre ambosmétodos de r= 0,822.- En el análisis de regresión lineal se obtuvo una pendiente de 1,253 ( PR : SS al 3%).- El Coeficiente de variación interensayo para la técnica de Rojo de Pyrogallol fue de 1%.Conclusiones : El método de Rojo de Pyrogallol mostró valores mas elevados respecto a laturbidimetría con ácido sulfoSalicílico al 3%,aunque dicha diferencia no fue clínicamentesignificativa, observándose un coeficiente de correlacion aceptable .En LCR con sobrenadante hemático o xantocrómico la colorimetría subvaloró la proteinorraquiarespecto a la turbidimetría, hecho que se corrige al eliminar la interferencia de color con la diluciónadecuada de la muestra .Para LCR el uso de Rojo de Pyrogallol respecto al acido sulfosalicilico al 3% es una buenaelección para dosificar las proteinorraquias dado su bajo costo , el escaso volumen de muestraa utilizar , la posibilidad de automatización con la correspondiente economía de reactivo detrabajo, asi como su disponibilidad comercial.