MICROSCOPIA ELECTRÓNICA

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Microscopia Electrónica (2) Técnica de Tinción Negativa Esta técnica es análoga a la técnica “Tinción de tinta de India” que se usa en la microscopía de luz, para ver espiroquetas y otras bacterias. Un material biológico que no muestra el contraste suficiente por Microscopía Electrónica, puede usarse con el material opaco de electrones. Entonces, será posible observar el perfil del objeto como una sombra en un molde opaco de electrones. La sustancia comúnmente usada como material opaco de electrones es el PTA al 2% (ácido fosfotúngstico en agua neutralizado con KOH). El compuesto de uranio, tal como el acetato de uranilo, es también comúnmente usado. PROCEDIMIENTO DE TINCIÓN NEGATIVA 1. Aplicar una gota de PTA en el mesh. 2. Mezclar poca muestra con PTA. 3. Secar el PTA con un pedazo de papel filtro 4. Secar rápidamente. El método de Tinción Negativa fue reportado por Brenner,S. y Horne, R.W., on B.B.A.,(1.959) 22
EJEMPLOS DE SOMBREADO Y TINCIÓN NEGATIVA Ejemplo: Campylobacter Jejuni Microscopia Electrónica A: Sombreado B: Tinción Negativa 23
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