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ESCAMILLA / CRUZ / ANGEL / SERRANO 43
Fig. 1. Cromatogramas de la mezcla de reacción obtenida en la síntesis enzimática para la obtención
de oligosacáridos; A) Síntesis de galactosil-fucosa; B) Síntesis de glucosil-fucosa
El disacárido glucosil-fucosa fue purificado como
se describió previamente (sección 2.5) usando la
columna Resex® para después analizarlo en la
columna Hipercab®, de este modo se eliminaron
monosacáridos y disacáridos (lactosa, isómeros
de la lactosa y disacáridos gal-gal en caso de estar
presentes), a pesar de que el producto sintetizado
también es un disacárido, es posible separarlo de
los demás ya que la fucosa presente en el glucosil-fucosa
posee un grupo metil (CH 3
) en lugar de un
grupo CH 2
OH, por lo tanto tiene un peso molecular
menor que el de los demás disacáridos (16 g/mol),
de este modo se aseguró que la fracción purificada
sólo estuviera compuesta de disacáridos glucosa-fucosa.
Por otro lado, si se analiza la estructura
de la fucosa, se puede ver que posee cuatro grupos
OH libres candidatos para poder aceptar la glucosa
transferida mediante la α-glucosidasa y generar un
disacárido glucosil-fucosa con diferentes enlaces:
(1-1), (1-2), (1-3) y (1-4).
Lo que se observó es que el disacárido purificado
por exclusión molecular, se separó en cuatro fracciones
al hacerlo pasar por la columna Hipercarb®
lo cual sugiere la existencia de cuatro isómeros de
glucosil-fucosa (Fig. 2) que fueron purificados posteriormente.
LICENCIATURA EN GASTRONOMÍA | TESTLAPALLI