NGAL Rapid ELISA Kit

NGAL Rapid ELISA Kit
gebundenen Detektionsantikörper gekoppelte HRP
reagiert mit dem Substrat, wodurch ein farbiges
Produkt entsteht. Die enzymatische Reaktion
wird chemisch gestoppt und die Farbintensität bei
450 nm in einem ELISA-Lesegerät gemessen. Die
Farbintensität (Extinktion) wird durch die Konzentration
des ursprünglich in die einzelnen Vertiefungen
gegebenen NGAL bestimmt. Die Ergebnisse der
Standards werden zur Erstellung einer Standardkurve
genutzt, von der die NGAL-Konzentrationen
in den Testproben abgelesen werden.
BESTANDTEILE DES KITS
Einheit Inhalt Menge
1
12 x 8 beschichtete Mikro -
titervertiefungen + Rahmen
96 Vertfg.
2
5x Probenverdünnungsmittel-
1 x 60 mL
Konzentrat
3a -
Hinweis: Flüssige Reagenzien enthalten Natriumazid,
Thimerosal oder Bronidox L als Konservierungsmittel. Diese
sind bei oraler Einnahme gesundheitsschädlich.
3f
NGAL Rapid standard 1-6
Die genaue Konzentration der
Standards ist auf den Fläschchenetiketten
und dem QC-Zertifikat
angegeben.
6 x 1 mL
4
25x Waschlösungskonzentrat
1 x 30 mL
5
HRP-konjug.
NGAL-Antikörper
1 x 6 mL
6 TMB-Substrat 1 x 12 mL
7 Stopplösung 1 x 16 mL
8
U-Mikrotiterplatte
aus Polypropylen
96 Vertfg.
ZUSÄTZLICH BENÖTIGTE MATERIALIEN
1. Einstellbare Mikropipetten (für einen Bereich
von 1-1000 µL) sowie dazugehörige Einweg-
Pipettenspitzen
2. Polypropylen-Reaktionsgefäße mit einem
zulässigen Füllvolumen von mindestens 1000 µL
14
3. Reaktionsgefäßhalter
4. Eine einstellbare 8- oder 12-Kanal-Mikropipette
(für einen Bereich von 50-250 µL) oder
Multipipette (optional)
5. Saubere 1-L- und 500-mL-Messzylinder
6. Deionisiertes oder destilliertes Wasser
7. Eine Abdeckung für die Mikrotiterplatte
8. Einen sauberen Behälter für die verdünnte
Waschlösung
9. Ein Gerät zur Befüllung der Vertiefungen in den
Waschschritten (optional)
10. Flusenfreie Papierhandtücher oder absorbierendes
Papier
11. Einweg-Pipettierreservoirs
12. Eine Zeitschaltuhr (für eine Zeitspanne bis 60
Minuten)
13. Ein kalibriertes ELISA-Platten-Lesegerät, das
die Platten bei 450 nm messen kann (vorzugsweise
mit der Möglichkeit, Referenzwerte bei
650 oder 620 nm abziehen zu können)
14. Natriumhypochlorit (Haushaltsbleiche, 1:10
Verdünnung) zur Dekontamination der Proben,
Reagenzien und Materialien
VORSICHTSMASSNAHMEN
Nur für die In-vitro-Diagnostik
1. Dieser Kit sollte nur von qualifiziertem
Laborpersonal benutzt werden.
2. Zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen für
jede Probe, jeden Standard und jedes Reagenz
gesonderte Pipettenspitzen benutzen.
3. Für jedes Reagenz gesonderte Reservoirs
benutzen. Dies gilt insbesondere für das TMB-
Substrat.
4. Alle Proben, Reagenzien und Materialien nach
Gebrauch durch mindestens 30-minütiges
Einweichen in Natriumhypochloritlösung
(Haus-haltsbleiche, 1:10 verdünnt) dekontaminieren.
5. Um Tröpfchenbildung während der Waschprozedur
zu vermeiden, sollte die Waschlösung in
eine Bleiche enthaltende Flasche abgesaugt
werden.
6. Freisetzung in die Umwelt vermeiden. Behälter
und unbenutzte Bestandteile müssen unter
Beachtung der nationalen und örtlichen
Vorschriften sicher beseitigt werden.
7. Das 5x Probenverdünnungsmittelkonzentrat
ist mit 0,25% Natriumazid (entspricht 0,05%
in der endverdünnten Lösung) konserviert.
Natriumazid ist bei Berührung mit der Haut
und beim Verschlucken gesundheitsschädlich.
Natriumazid ist schädlich für Wasserorganismen
und kann in Gewässern längerfristig
schädliche Wirkungen haben. Bei Unfallen oder
Unwohlsein sofort einen Arzt hinzuziehen
(wenn möglich, dieses Etikett vorzeigen). Für
die verdünnte Lösung ist eine Gefahrenkennzeichnung
gemäß den EU-Vorschriften nicht
erforderlich.
8. Die Stopplösung enthält 0,5 mol/L Schwefelsäure
und kann Reizungen und Verätzungen
der Haut und Augen verursachen. Bei
Berührung sofort mit reichlich Wasser spülen
und ärztlichen Rat einholen.
9. Komponenten von Kits mit unterschiedlichen
Chargennummern sollten nicht ausgetauscht
werden. Die Komponenten wurden als Einheit
für eine bestimmte Charge standardisiert.
10. Hämolysierte, hyperlipämische, hitzebehandelte
oder kontaminierte Proben können zu
fehlerhaften Ergebnissen führen.
11. Verdünnungen von klinischen Proben nicht
direkt in den beschichteten Mikrotitervertiefungen
durchführen.
12. Beim Pipettieren oder Absaugen von Flüssigkeit
die Berührung oder das Kratzen am Boden
der Mikrotitervertiefungen vermeiden.
13. Die Verwendung anderer als der angegebenen
Inkubationszeiten und temperaturen kann zu
fehlerhaften Ergebnissen führen.
14. Während des Versuchs dürfen die Vertiefungen
nicht austrocknen.
15. Das TMB-Substrat ist lichtempfindlich. Vor
Licht geschützt aufbewahren.
16. Benutzte Mikrotitervertiefungen und Reagenzien
nicht wieder verwenden oder in ihre
Flaschen zurückschütten.
NGAL Rapid ELISA Kit
STABILITÄT UND LAGERUNG
1. Kit mit allen Reagenzien bei 2-8°C lagern. Nicht
einfrieren.
2. Alle Reagenzien vor dem auf den Fläschchenetiketten
angegebenen Verfallsdatum
verwenden.
3. Die verdünnte Waschlösung ist bei 2-8°C für 4
Wochen haltbar. Falls nicht alle Vertiefungen
benutzt werden, nur den benötigten Anteil des
Waschlösungskonzentrats verdünnen.
4. Das verdünnte Probenverdünnungsmittelkonzentrat
ist bei 2-8°C für 5 Tage haltbar. Falls
nicht alle Vertiefungen benutzt werden, nur den
benötigten Anteil des Probenverdünnungsmittelkonzentrats
verdünnen.
5. Nicht eingesetzte Vertiefungen können für
nachfolgenden Gebrauch zusammen mit dem
Antikondensationsmittel in dem mitgelieferten
Folienbeutel versiegelt und gelagert
werden. Folienbeutel vor dem Öffnen stets auf
Raumtemperatur bringen, um eine Kondensation
in/auf den beschichteten Mikrotitervertiefungen
zu vermeiden.
PROBENENTNAHME
Alle Proben aus Blutprodukten oder Urinproben
wie potenziell infektiöses Material behandeln
und entsorgen. Siehe Vorsichtsmaßnahmen in
den Abschnitten 2, 4 und 5.
Die Bestimmung von NGAL in einer einzelnen Probe
erfordert 10 µL Urin, Plasma oder Serum. Blutproben
sollten von qualifiziertem Personal aseptisch
mittels einer anerkannten Venenpunktionstechnik
in einem unbehandelten oder mit EDTA versetzten
Gefäß gesammelt werden. Plasma oder Serum sollte
mit klinischen Standardlabormethoden hergestellt
werden. Urin sollte zentrifugiert werden. Zubereitete
klinische Proben mit einem Deckel versehen.
Proben bei −20°C oder niedrigeren Temperaturen
einfrieren, falls der Test nicht innerhalb von 24
Stunden durchgeführt werden kann oder falls die
Proben verschickt werden sollen. Zur Langzeitlagerung
klinischer Proben werden Temperaturen
von −70°C oder niedriger empfohlen. Wiederholtes
Auftauen und Einfrieren vermeiden. Keine hämoly-
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