CYTOMETRIE EN FLUX - IPMC - CNRS
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J.Cazareth – <strong>CNRS</strong> - Formation CMF<br />
Perméabilisation<br />
Triton X100 (0.05%): détergent doux, non dénaturant<br />
Saponine (0.1%): perméabilisation douce et non permanente…<br />
l’incubation de l’Ac doit se faire dans la saponine…<br />
Ethanol (70%): surtout utilisé dans pour l’étude du contenu en<br />
ADN; entraine des modifications morphologiques importantes<br />
Cas des cellules GFP+:<br />
Le processus de fixation<br />
puis perméabilisation peut<br />
aboutir à une perte partielle<br />
voire totale du signal GFP<br />
Perméabilisation des bactéries:<br />
éthanol 70% ou acétone 95%<br />
Ultrasons ou chauffage 15min @ +70°C<br />
Voie enzymatique