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CYTOMETRIE EN FLUX - IPMC - CNRS

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J.Cazareth – <strong>CNRS</strong> - Formation CMF<br />

Perméabilisation<br />

Triton X100 (0.05%): détergent doux, non dénaturant<br />

Saponine (0.1%): perméabilisation douce et non permanente…<br />

l’incubation de l’Ac doit se faire dans la saponine…<br />

Ethanol (70%): surtout utilisé dans pour l’étude du contenu en<br />

ADN; entraine des modifications morphologiques importantes<br />

Cas des cellules GFP+:<br />

Le processus de fixation<br />

puis perméabilisation peut<br />

aboutir à une perte partielle<br />

voire totale du signal GFP<br />

Perméabilisation des bactéries:<br />

éthanol 70% ou acétone 95%<br />

Ultrasons ou chauffage 15min @ +70°C<br />

Voie enzymatique

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