CYTOMETRIE EN FLUX - IPMC - CNRS
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Les échantillons contrôles<br />
Plusieurs types de contrôles à déterminer selon l ’expérience (type cellulaire,<br />
spécificité des Ac, utilisation d’un Ac secondaire, système d’amplification du signal)<br />
Les incontournables: Les échantillons simple couleur pour faire les réglages<br />
machine<br />
Selon l’expérience:<br />
Contrôle Ac secondaire: permet de vérifier la spécificité de l ’Ac secondaire<br />
fluorescent.<br />
J.Cazareth – <strong>CNRS</strong> - Formation CMF<br />
Contrôle Isotypique: permet d’évaluer le bruit de fond d’un Ac. Ce sont des Ac<br />
appelés irrelevants car capables de se fixer uniquement par leur parties Fc (et<br />
donc de façon non –spécifique). Ils doivent être de la même spécificité (par ex:<br />
IgG2a de souris) que l’Ac d’intérêt, utilisé dans les mêmes conditions (même<br />
rapport Ac/nombre de cellules)…. Attn: un bémol: le rapport<br />
Fluorochrome/protéine est propre à chaque lot d’Ac > intérêt très discuté<br />
Contrôle de viabilité cellulaire
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