TP 12 - modification..

1 ère S, SVT, 05-06 2/2
5. protocole des mesures (commun à toutes les expériences)
- dans une cuve colorimétrique, déposer 1,5 mL de gaïacol et 1,5 mL de solution de peroxydase
- placer la cuve dans le colorimètre, et préparer une seringue avec 1 mL de substrat
- lancer la mesure (qui dure 2 minutes)
- après 20 à 30 secondes, injecter le substrat à travers l’adhésif (il ne faut surtout pas ouvrir l’enceinte, ni faire de
bulles : injecter doucement !)
- une fois l’expérience terminée (120 secondes), arrêter les mesures.
Rincer tout de suite les cuves de colorimétrie, et les placer dans la bassine prévue à cet effet.
6. expériences communes à réaliser
Expérience « conditions témoins » :
Réaliser une expérience avec la solution de peroxydase 1X et l’eau oxygénée à 1%.
Enregistrer le graphe dans le répertoire élève, sous le nom : 3BINOME1.grf (avec « BINOME » = initiales des membres du
binôme)
Ne pas effacer les données avant l’expérience suivante !
Expériences « pH » :
Réaliser deux expériences, avec l’eau oxygénée à 1% et :
- la solution de peroxydase en milieu acide (pH = ……)
- la solution de peroxydase en milieu basique (pH = ……)
Enregistrer le graphe dans le répertoire élève, sous le nom : 3BINOME2.grf
Effacer les données de l’écran : clic droit avec la souris, et « effacer les données ».
7. expériences par demi-groupe
Selon les instructions du professeur, réaliser l’expérience A ou l’expérience B.
Expérience A :
Préparer trois dilutions de l’enzyme : 2 fois (0,5 X), 10 fois (0,1 X) et 100 fois (0,01 X). (prévoir 5 à 10 mL de solution
diluée, pour pouvoir effectuer plusieurs fois les mesures si nécessaire)
Réaliser quatre expériences, avec l’eau oxygénée à 1% et les quatre solutions de peroxydase (1 X ; 0,5 X ; 0,1 X ; 0,01 X).
Enregistrer le graphe dans le répertoire élève, sous le nom : 3BINOMEA.grf
Expérience B :
Préparer 3 dilutions de l’eau oxygénée à partir de la solution à 1% : diluée 200 fois, diluée 500 fois et diluée 1000 fois.
Réaliser quatre expériences, avec la peroxydase 1X et les quatre solutions d’eau oxygénée (1, 1/200, 1/500, 1/1000).
Enregistrer le graphe dans le répertoire élève, sous le nom : 3BINOMEB.grf
Si vous avez assez de temps (à voir selon l’avancement de votre compte-rendu), réaliser l’expérience (A ou B) non
réalisée.
8. Bilan et compte-rendu
Quelles conditions expérimentales semblent influer sur l’activité enzymatique de la peroxydase
Rédiger un compte-rendu, intégrant :
- Une introduction, rappelant en particulier le problème à résoudre
- Les différentes conditions expérimentales réalisées
- Les résultats obtenus
- L’interprétation des résultats obtenus
- Une conclusion, réalisant une synthèse de ces interprétations, et la réponse à la question posée
Avant de partir : ramener les tubes et pipettes sales dans le seau prévu à cet effet, ramener les cuves colorimétriques dans
le seau prévu à cet effet, fermer Visuel Orphy et éteindre l’interface, débrancher le module colorimétrique. Vérifier que
vous laisser une paillasse propre pour le groupe suivant ou la classe suivante !
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