Comité Scientifique et d'organisation Brigitte Autran (Hôpital ...

Comité Scientifique et d'organisation 

Brigitte Autran (Hôpital Pitié-Salpétrière, Paris) 

Françoise Brun-Vézinet (Hôpital Bichat-Claude Bernard, Paris) 

Geneviève Chêne (Université Victor Segalen Bordeaux II) 

Jean-Michel Molina (Hôpital Saint-Louis, Paris) 

Michaela Müller-Trutwin (Institut Pasteur, Paris) 

Jacques Reynes (Hôpital Gui de Chauliac, Montpellier) 

Olivier Schwartz (Institut Pasteur, Paris) 

ANRS 

Geneviève Bétouret 

Sandrine Couffin 

Elizabeth Fischer 

Livia Pedroza 

Marie-Christine Simon

Sommaire 

Programme………………………………………………………………………………………………………7 

Résumés des présentations orales……………………………………………...……………………...…12 

1. INFECTION VIH : QUELS OBJECTIFS POUR LA RECHERCHE CLINIQUE DE DEMAIN ? 

(C.Katlama)............................................................................................................................................ 13 

2. LA RECHERCHE FONDAMENTALE SUR LE VIH ET LE SIDA: OU ALLONS NOUS ? 

(O. Schwartz)......................................................................................................................................... 14 

3 QUAND COMMENCER LES TRAITEMENTS ANTIRETROVIRAUX? 

(G. Chêne)............................................................................................................................................. 15 

4. L’INTERLEUKINE-2 PEUT-ELLE PREVENIR LE DEFICIT IMMUNITAIRE ET RETARDER 

L’INITIATION DU TRAITEMENT ANTIRETROVIRAL CHEZ LES PATIENTS INFECTES PAR 

LE VIH ? RESULTATS DE L’ESSAI ANRS 119 INTERSTART (J- M. Molina), .................................. 16 

5. CONSEQUENCES DU BLOCAGE DE CCR5 DANS LE TRAITEMENT ANTI-VIH 

(P. Corbeau) .......................................................................................................................................... 17 

6. HIV LATENCY AND RESERVOIRS (R. Veazey)......................................................................... 18 

7. L’ETUDE DES RESERVOIRS VIH : UNE AIDE A LA REFLEXION SUR LES 

TRAITEMENTS DE L’INFECTION A VIH ? (C. Rouzioux) ................................................................... 19 

8. MODELES ANIMAUX ET RESERVOIRS : DYNAMIQUE ET DISTRIBUTION TISSULAIRE 

DES FORMES NON INTEGREES A 2-LTR CHEZ LES MACAQUES INFECTES PAR SIV 

(R. Le Grand)......................................................................................................................................... 20 

9. CONTROLE SPONTANE DU VIH DES LA PRIMO-INFECTION : PEUT-ON PREDIRE LE 

STATUT DE «HIV CONTROLLER»? (C. Goujard)............................................................................... 21 

10. ACTIVATION DE LA REPLICATION DU VIH LATENT PAR DES COMPOSES HYBRIDES 

BIPOLAIRES, ROLE DU FACTEUR DE TRANSCRIPTION P-TEFB (X. Contreras),.......................... 22 

11. ETUDE QUANTITATIVE DES RESERVOIRS VIH DANS LE TISSU LYMPHOÏDE RECTAL 

ET CARACTERISATION DES QUASIESPECES VIRALES (V. Avettand-Fenoel) .............................. 23 

12. EVOLUTION DE LA DIVERSITE GENETIQUE ET DES MUTATIONS DE RESISTANCE 

AUX TRAITEMENTS DU VIH-1 PARMI DES PATIENTS NON TRAITES AU MALI ENTRE 2005 

ET 2006 (A. Derache),........................................................................................................................... 24 

13. QUESTIONS CLES DE LA RECHERCHE DANS LES PAYS EN DEVELOPPEMENT EN 

2008 (F. Dabis)...................................................................................................................................... 25 

14. THE NON-PATHOGENIC SIVAGM INFECTION IN AFRICAN GREEN MONKEYS: 

LESSONS ON PROTECTIVE HOST RESPONSES (M. Müller-Trutwin). ............................................ 26 

15. AVIDITE, POLYFONCTIONNALITE ET TURNOVER CLONAL A LA BASE DE L’EFFICACITE 

DE LA REPONSE T CD8+ DANS L’INFECTION VIH (V. Appay)………………………………………...27 

16. REPONSE T CD8+ SPECIFIQUE, HLA CLASSE I ET CONTROLE DU VIH (A. Venet) ............ 28 

2 ème Forum de recherches fondamentales et cliniques sur le VIH Page 1 sur 128

17. A GENOME WIDE ASSOCIATION STUDY IN HIV-1 INFECTED PATIENTS SHOWS THAT 

DIFFERENT LOCI CONTROL SERUM VIRAL LOAD AND RESERVOIR (I. Theodorou)................... 29 

18. L’OBSERVATOIRE NATIONAL ANRS DES « HIV CONTROLLERS » (HIC) : BILAN 

APRÈS DEUX ANNÉES DE RECRUTEMENT (O. Lambotte) ............................................................. 30 

19. FORTES RÉPONSES PROLIFÉRATIVES T CD4 AU VIH CHEZ DES PATIENTS TRAITÉS 

ET CONTROLÉS VIROLOGIQUEMENT DEPUIS 10 ANS (ÉTUDE DECAMUNE) (A. Guihot) .......... 31 

20. ACTIVATED NK CELLS INDUCE THE MATURATION OF INFECTED DC BY AN HMGB1- 

DEPENDENT MECHANISM. IMPLICATION FOR THE ESTABLISHMENT OF HIV-1 

RESERVOIRS (H Saidi) ........................................................................................................................ 32 

21. A RAPID HIV-1 NEUTRALIZATION ASSAY FOR MEASURING THE ANTIVIRAL CAPACITY 

OF CD8 T CELLS (So Youn Shin) ........................................................................................................ 33 

22. VACCINS PRÉVENTIFS VIH/SIDA : VERS DE NOUVELLES APPROCHES VACCINALES ? 

(M. P Girard).......................................................................................................................................... 34 

23. IMMUNISATION THÉRAPEUTIQUE ANTI-VIH : BILAN (B. Autran) ........................................... 35 

24. DENDRITIC CELLS CROSS PRESENT ANTIGENS AND ACTIVATE T CELLS 

(S. Amigorena)....................................................................................................................................... 36 

25. PLACE DES ANTICORPS DANS LES STRATÉGIES VACCINALES (C. Moog)........................ 37 

26. PROGRAMME VACCINAL DE L’ANRS (Y. Lévy) ....................................................................... 38 

27. MHC-II PRESENTATION OF HIV ANTIGENS BY INFECTED APC : INVOLVEMENT OF 

AUTOPHAGY (A. Moris). ...................................................................................................................... 40 

28. A LENTIVIRAL VECTOR PRIME-BOOST VACCINATION CONFERS STRONG 

PROTECTION AGAINST MASSIVE SIVMAC251 CHALLENGE IN MACAQUES (A-S Beignon) ....... 41 

29. UNE NOUVELLE STRATEGIE VACCINALE ANTI-HIV1 : DE LA THEORIE À LA 

PREUVE DE CONCEPT CHEZ LE MACAQUE (V. Vieillard)............................................................... 42 

PRESENTATIONS AFFICHEES……………………………………………………………………………..43 

1. TENOTHIOVIR ET ADETHIOVIR: NOUVEAUX ANALOGUES PHOSPHONATES 

ACYCLIQUES ACTIFS CONTRE LE VIH ET LE VHB (K. Alvarez) ..................................................... 45 

2. EVOLUTION VIRO-IMMUNOLOIQUE APRES INITIATION D’UNE PREMIERE 

COMBINAISON DE TRAITEMENTS ANTIRETROVIRAUX CONTENANT DU LOPINAVIR- 

RITONAVIR CHEZ DES PATIENTS INFECTES PAR LE VIH-2. COHORTE ANRS CO5 VIH-2, 

2002-2007 (A Bénard) ........................................................................................................................... 46 

3. COMPARAISON DE L’ÉVOLUTION DES CD4 ET DE L’ARN VIH-1 CHEZ DES 

ASYMPTOMATIQUES À LONG TERME (ALT) ET DES « HIV CONTROLLERS » (HIC) À 

PARTIR DES ÉTUDES ANRS SEROCO ET DE L’OBSERVATOIRE NATIONAL DES « HIV 

CONTROLLERS » (F. Boufassa).......................................................................................................... 47 

4. ETUDE DES FACTEURS IMMUNOLOGIQUES ET VIROLOGIQUES ASSOCIES A UN 

DIAGNOSTIC DE CANCER CHEZ LES PATIENTS INFECTES PAR LE VIRUS DE 

L’IMMUNODEFICIENCE HUMAINE (M Bruyand) ................................................................................ 48 

5. EVALUATIONS VIROLOGIQUE ET GÉNOTYPIQUE DES PATIENTS SOUS 

RALTÉGRAVIR, INFECTÉS PAR UN VIRUS VIH MULTI-RÉSISTANT (F. Caby). ............................. 49 


6. EFFICACITÉ DU RALTÉGRAVIR ET DE L’ÉTRAVIRINE CHEZ DES PATIENTS AVEC 

UN VIRUS MULTIRÉSISTANT, EN ÉCHEC VIROLOGIQUE SOUS DARUNAVIR (A. Canestri) ....... 50 

7. CONTRÔLE DE LA RÉPLICATION DU VIH APRÈS INTERRUPTION THÉRAPEUTIQUE 

CHEZ DES PATIENTS TRAITÉS DÈS LA PRIMO-INFECTION : QUELS PATIENTS ? 

(C. Goujard)........................................................................................................................................... 51 

8. PROLONGED VALPROIC ACID TREATMENT DOES NOT REDUCE THE SIZE OF LATENT 

HIV RESERVOIR: THE ANRS EP39 STUDY (O. Lambotte)................................................................ 52 

9. BITHERAPIES D’INHIBITEURS DE LA PROTEASE (IP) POUR LE TRAITEMENT INITIAL 

DE L’INFECTION A VIH-1: UNE ETUDE PILOTE RANDOMISEE (2IP ANRS 127) (R. Landman) .... 53 

10. TOXICITE DE LA STAVUDINE SUR LES ADIPOCYTES EN CULTURE : BENEFICE 

POTENTIEL D’UNE DIMINUTION DE CONCENTRATION (C. Lefevre) ............................................. 54 

11. ASSOCIATION BETWEEN CARDIOLIPIN ACTIVITY, VIRAL REPLICATION AND 

NEUTRALIZING ANTIBODIES IN SLOW PROGRESSORS OF THE HIV INFECTION 

(V Martinez). .......................................................................................................................................... 55 

12. IMPACT DES ANTIRÉTROVIRAUX SUR LE MODÈLE MATHÉMATIQUE (M-J Mhawej). ........ 56 

13. LA MUTATION M184V PERMET AU VIH DE RÉSISTER À LA 3TC, MAIS PAS 

D'ÉCHAPPER À LA RÉPONSE IMMUNE DIRIGÉE CONTRE L'ÉPITOPE RT181-189 

(Y. Pacheco).......................................................................................................................................... 57 

14. PREVALENCE DE LA FIBROSE HEPATIQUE F3/F4 AU SEIN DE LA COHORTE ANRS 

C013- HEPAVIH (I. Poizot-Martin). ....................................................................................................... 58 

15. APPORT DES MODELES MATHEMATIQUES EN RECHERCHE CLINIQUE ET 

FONDAMENTALE SUR LE VIH (R. Thiebaut)...................................................................................... 59 

16. RÉPONSE VIROLOGIQUE À LA PREMIÈRE LIGNE DE TRAITEMENT : COMPARAISON 

ENTRE TRUVADA ET KIVEXA DANS UNE COHORTE OBSERVATIONNELLE (R Thomas)........... 60 

17. ETUDE EX-VIVO DES ANOMALIES METABOLIQUES INDUITES PAR DES ANTI- 

RÉTROVIRAUX UTILISES EN TRITHERAPIE (O. Touzet) ................................................................. 61 

18. EARLY VIROLOGICAL PARAMETERS AND THEIR PREDICTION PERFORMANCE FOR 

INDETECTABILITY OF HIV RNA BY WEEK 26 (L. Wittkop) ............................................................... 62 

19. ETUDE PRELIMINAIRE SUR LA PREVALENCE DE LA RESISTANCE DU VIH-1 AUX 

ANTIRETROVIRAUX DANS LA PARTIE EST ET WEST DE LA REPUBLIQUE DEMOCRATIQUE 

DU CONGO (S. Ahuka)......................................................................................................................... 64 

20. EFFET DE LA TEMPERATURE DE CONSERVATION DU PLASMA SUR LA CHARGE 

VIRALE VIH-1 (B. Amellal).................................................................................................................... 65 

21. SURVEY OF HIV-1 DRUG RESISTANCE MUTATIONS IN RECENTLY INFECTED, 

ANTIRETROVIRAL NAÏVE PATIENTS FROM SUB SAHARAN AFRICA AND SOUTH EAST OF 

ASIA: THE ANRS 12134 STUDY (A. Ayouba)...................................................................................... 66 

22. MEASURE OF VIRAL LOAD BY USING THE ABBOTT REALTIME HIV-1 ASSAY ON DRIED 

SPOT SPECIMENS OF BLOOD OR PLASMA COLLECTED IN TWO RURAL DISPENSARIES IN 

CAMEROON (T. Bourlet.) ..................................................................................................................... 67 

23. LES ENJEUX DE LA PRISE EN CHARGE CROISEE DE LA TUBERCULOSE ET DU VIH 

AU SENEGAL (F. Hané) ....................................................................................................................... 68 


24. CO-MORBIDITE VIH ET LES CANCERS NON-CLASSANT SIDA : CAS DU CENTRE 

HOSPITALIER DE KINSHASA (M. Madiata) ........................................................................................ 69 

25. EVOLUTION VERS LES CRITERES D’ADMINISTRATION DU COTRIMOXAZOLE ET DES 

ANTIRETROVIRAUX CHEZ LES PERSONNES INFECTEES PAR LE VIH DIAGNOSTIQUEES 

AVEC DES CD4 SUPERIEURS A 500/MM3, COHORTE ANRS 1220 PRIMO-CI (A. Minga)............. 70 

26. EVALUATION OF DIFFERENT EXTRACTION PROTOCOLS AND STORAGE CONDITIONS 

OF DRIED PLASMA SPOTS FOR HIV-1 RNA QUANTIFICATION AND PCR AMPLIFICATION 

FOR GENOTYPIC DRUG RESISTANCE TESTING (M. Monleau)...................................................... 71 

27. EPIDEMIOLOGIE DE L’INFECTION A VIH/SIDA DANS LA WILYA DE TIZI-OUZOU - 

ALGERIE (F.Toudeft) ............................................................................................................................ 72 

28. ENQUETE COMPORTEMENTALE CHEZ LES MIGRANTS DE LA COMMUNE DE 

TIZI-OUZOU - ALGERIE (F.Toudeft) .................................................................................................... 74 

29. ENQUETE COMPORTEMENTALE CHEZ LES JEUNES DE LA COMMUNE DE 

TIZI-OUZOU – ALGERIE SEPT-DEC 2006 (F.Toudeft) ....................................................................... 76 

30. CHARACTERIZATION OF INFECTIOUS RECOMBINANT VIRUSES EXHIBITING HIV-1 

ENV FROM SEMINAL STRAINS (T. Bourlet)....................................................................................... 79 

31. ROLE OF CHROMATIN REMODELING COMPLEXES IN CONTROLLING HIV-1 

EXPRESSION IN PRIMARY CD4+ T CELLS (Guillemette X. Masse) ................................................. 80 

32. MECANISMES MOLECULAIRES A L'ORIGINE DE LA LATENCE POST-INTEGRATIVE 

DANS LE SYSTEME NERVEUX CENTRAL (O. Rohr) ........................................................................ 81 

33. LES SITES AP-1 LOCALISES DANS LA REGION CIS-REGULATRICE DU GENE POL 

DU HIV-1 SONT IMPORTANTS POUR L’INFECTIVITE VIRALE (N. Vandenhoudt)........................... 82 

34. LONG-TERM PERSISTENCE OF MEMORY B CELLS SPECIFIC FOR HEPATITIS B 

SURFACE ANTIGEN IN HIV-1 INFECTED PATIENTS (J- P. Vendrell)............................................... 83 

35. INHIBITION DE L’EPISSAGE DU PRE-MESSAGER D’HIV-1 PAR DES PETITES 

MOLECULES CHIMIQUES : UNE NOUVELLE STRATEGIE ANTIRETROVIRALE (N. Bakkour). ..... 85 

36. CARACTERISTIQUES DES GENES D’ENVELOPPE DU VIRUS DE L’IMMUNODEFICIENCE 

HUMAINE DE TYPE 1 (VIH-1) DE SOUS-TYPE CRF01_AE TRANSMIS DE LA MERE 

A L’ENFANT (F. Barin). ......................................................................................................................... 86 

37. MECHANISMS INVOLVED IN NEF-DEPENDENT INCREASE OF HIV-1 INFECTIVITY 

(S. Basmaciogullari) .............................................................................................................................. 87 

38. TIP47 PROMOTES THE EFFICIENT RELEASE OF INFECTIOUS HIV-1 FROM THE 

ASSEMBLY COMPARTMENT OF MACROPHAGES (H. Bauby)........................................................ 88 

39. THE 3-O-(3’,3’-DIMETHYLSUCCINYL) DERIVATIVE OF BETULINIC ACID (DSB OR PA-457) 

INHIBITS THE ASSEMBLY OF VIRUS-LIKE PARTICLES (VLP) IN HIV-1 GAG-EXPRESSING 

CELLS (P. Boulanger). .......................................................................................................................... 89 

40. LE GENOTYPAGE DE V3 PEUT-IL REMPLACER LES TESTS PHENOTYPIQUES POUR LA 

DETERMINATION EN ROUTINE DU TROPISME DU HIV-1 ? (P. Delobel).,...................................... 90 

41. LE VIH-1 EST A DEUX DOIGTS DES VIRUS ADN DE TYPE HBV OU SPUMAVIRUS 

(L. Didierlaurent).................................................................................................................................... 91 


42. IDENTIFICATION D’UN FACTEUR CELLULAIRE IMPLIQUÉ DANS LA RÉPLICATION DU VIH- 

1 ET LA RÉSISTANCE AUX INHIBITEURS NUCLÉOSIDIQUES DE LA RÉTRO-TRANSCRIPTION 

(C. Ducloux)........................................................................................................................................... 92 

43. DES LIPOPEPTIDES INHIBENT AU NIVEAU NANOMOLAIRE DES PROTEASES DU VIH-1 EN 

SEQUESTRANT LA FORME MONOMERIQUE DE L'ENZYME CIBLE (L. Dufau).............................. 93 

44. MOLECULAR MECHANISMS INVOLVED IN NEF-INDUCED CD4 DOWN-REGULATION IN 

HIV-1 HOST CELLS (N. Laguette)........................................................................................................ 94 

45. ETUDE DE L’ORGANISATION MEMBRANAIRE DYNAMIQUE DES RECEPTEURS CD4 ET 

CCR5 SUR CELLULES VIVANTES (P. Mascalchi).............................................................................. 95 

46. DISTRIBUTION GEOGRAPHIQUE DU SIVGOR CHEZ LES GORILLES SAUVAGES AU 

CAMEROUN (C. Néel). ......................................................................................................................... 96 

47. SUPERIOR CONTROL OF HIV-1 REPLICATION BY CD8+ T CELLS IS REFLECTED BY 

THEIR AVIDITY, POLYFUNCTIONALITY, AND CLONAL TURNOVER (J. R Almeida)...................... 98 

48. MULTIDIMENSIONAL SCALING: UNREVEALING RELATIONAL GEOMETRIC PATTERNS IN 

TRANSCRIPTOME BIOLOGY (C. BECAVIN) ...................................................................................... 99 

49. OPTIMAL CENTRAL MEMORY CD4+ T CELL FUNCTIONS IN HIV CONTROLLERS (ANRS 

EP36 STUDY) (L. A. Chakrabarti)....................................................................................................... 100 

50. USE OF THE INNATE IMMUNITY TOWARDS HIV-1 : PRODUCTION OF A SOLUBLE 

MULTIMERIC HETEROCHIMERA PROPERDIN-CD4.D1D2 TO CREATE A PLATFORM FOR 

ACTIVATION OF COMPLEMENT ALTERNATIVE PATHWAY AT THE SURFACE OF HIV-1 OR HIV- 

INFECTED CELLS, TRIGGERING THEIR LYSIS (X. Dervillez) ........................................................ 101 

51. L’INFECTION PAR LE VIH-1 INDUIT L’EXPRESSION DE NKG2C SUR LES CELLULES T 

VD1+ : EFFET DÉLÉRÈRE SUR LES T CD4+ INFECTÉES (H. Fauster Bovendo).......................... 102 

52. MISE AU POINT ET VALORISATION DE TESTS ADAPTES POUR LE DOSAGE DES 

ANTICORPS SECRETOIRES DANS L’INFECTION PAR LE VIH (C. Genin).................................... 103 

53. CARACTERISTIQUES DES LTCD8 SPECIFIQUES DU VIH DES PATIENTS HLA B57 AU 

COURS DE LA PRIMO-INFECTION (I. Girault).................................................................................. 104 

54. UNCOUPLING OF IL-7 SIGNALING RESPONSES IN HIV INFECTION : INCREASED 

JAK/STAT ACTIVATION AND DECREASED BCL-2 INDUCTION (ANRS EP33 STUDY) 

(O. Juffroy)........................................................................................................................................... 105 

55. STUDY OF IMMUNOPREVALENCY AND STABILITY OF THE HR1/HR2 COMPLEX OF THE 

GLYCOPROTEIN 41 (GP41) SUBUNIT OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE 1 (HIV-1) 

(A. Koné).............................................................................................................................................. 106 

56. SUIVI IMMUNO-VIROLOGIQUE DES PATIENTS CO-INFECTES VIH1 ET VIH2 

(R. Landman)....................................................................................................................................... 107 

57. EXISTENCE DE LT CD8+ SPECIFIQUES DU VIH DE TYPE EFFECTEUR CHEZ LES 

PATIENTS CONTROLANT SPONTANEMENT LA REPLICATION VIRALE (C. Lécuroux) .............. 108 

58. IMPACT OF NK-DC CROSSTALK ON THE DESTRUCTION OF DC - INFLUENCE OF HIV 

INFECTION (M-T. Melki)..................................................................................................................... 109 

59. ALTERED CHEMOTACTIC RESPONSES OF CD4 T CELLS IN HIV INFECTION 

(S. Perez-Patrigeon)............................................................................................................................ 110 


60. ACUTE HEPATITIS C INFECTION IN HIV-INFECTED PATIENTS: LOW RATE OF 

SPONTANEOUS CLEARANCE AND WEAK PERIPHERAL T CELL RESPONSES TO HEPATITIS C 

VIRUS ASSOCIATED WITH HIV-RELATED CD4 DEFICIENCY (A. Schnuriger),............................. 111 

61. UNINTEGRATED HIV-1 PROVIDES AN INDUCIBLE AND FUNCTIONAL RESERVOIR IN 

UNTREATED AND HIGHLY ACTIVE ANTIRETROVIRAL THERAPY-TREATED PATIENTS 

(J P. Vendrell)...................................................................................................................................... 112 

62. PRODUCTION AND CHARACTERIZATION OF HUMANIZED MONOCLONAL IGA 

ANTIBODIES DIRECTED TO HIV-1 ENVELOPE GLYCOPROTEIN (N. Vincent)............................. 113 

63. DEVELOPPEMENT DE MIMOTOPES DE L'ANTICORPS NEUTRALISANT B12 (T. Abache) 115 

64. WITHOUT MUCOSAL ADJUVANT, VIROSOME-GP41 PEPTIDE FROM THE MEMBRANE 

PROXIMAL REGION CAN ELICIT PROTECTIVE MUCOSAL IGA IN VACCINATED MACAQUES 

(M. Bomsel) ......................................................................................................................................... 116 

65. MIME DE CD4, CANDIDAT MICROBICIDE ANTI-VIH : LA ROUTE VERS LE TEST ANIMAL 

CHEZ LE MACAQUE (L. Martin)......................................................................................................... 117 

66. MISE AU POINT DE CANDIDATS VACCINS CONTRE LE VIH-1 COMPOSES DE PLUSIEURS 

PROTEINES D’ENVELOPPE STABILISEES PAR UN MIME DU CD4 (G. Martin) ........................... 118 

67. COMPARAISON DE DIFFERENTES STRATEGIES DE PRIMO-VACCINATION/RAPPEL 

UTILISANT UN VECTEUR VIRAL (RMVA) ET DES NANOPARTICULES DE POLY(ACIDE 

LACTIQUE) (S. Munier)....................................................................................................................... 119 

68. COMPREHENSIVE ANALYSIS OF VIRUS-SPECIFIC CD8+ AND CD4+ T CELLS PROVIDES 

CLUES FOR THE FAILURE OF THERAPEUTIC IMMUNIZATION WITH ALVAC-HIV (VCP1452) 

VACCINE (L. Papagno ) ....................................................................................................................... 120 

69. INHIBITORY ACTIVITY OF ANTIBODIES ON HIV-1 INFECTION OF LANGERHANS CELLS, 

AND OF TRANSFER TO T CELLS (M Peressin) ............................................................................... 121 

70. EVALUATION OF THE IMMUNOGENICITY OF A NEW TAT CANDIDATE VACCINE AGAINST 

HIV, IN A NON HUMAN PRIMATE MODEL (S. Turbant) ................................................................... 122 

71. CONCEPTION D’IMMUNOGENES GP140 D’ENVELOPPE D’UN ISOLAT PRIMAIRE DE 

PRIMO-INFECTION DE VIH-1 PAR ADDITION OU DELETION PONCTUELLES DE SITES DE N- 

GLYCOSYLATION (N. Willkomm) ...................................................................................................... 123 

72. HIV-1 REPLICATION IS INCREASED IN IMMATURE DENDRITIC CELLS IN THE PRESENCE 

OF CD4 T OR CD19 B LYMPHOCYTES (K. Xu)................................................................................ 124 


Accueil à partir de 9h 

Programme 

Lundi 14 avril 

10h00-10h15 Ouverture : Jean-François Delfraissy, Directeur de l’ANRS 

10h15-11h30 Les défis de la recherche sur l’infection par le VIH en 2008 

modérateurs 

Patrick Yéni (Hôpital Bichat-Claude Bernard, Paris) 

Fernando Arenzana-Seisdedos (Institut Pasteur, Inserm U819, Paris) 

10h15 -10h45 Infection VIH : quels objectifs pour la recherche clinique de demain ? 

Christine Katlama (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris) 

10H45 -11H15 La recherche fondamentale sur le VIH et le SIDA: où allons nous? 

Olivier Schwartz (Institut Pasteur, Paris) 

11h15 – 11h30 Discussion 

11h30-12h50 Nouvelles stratégies thérapeutiques 

11h30 -11h50 Quand commencer les traitements antirétroviraux ? 

Geneviève Chêne 

(Université Victor Segalen Bordeaux II, Inserm U897) 

11h50 -12h10 Initiation thérapeutique et nouvelles molécules 

Jacques Reynes (Hôpital Gui de Chauliac, Montpellier) 

12h10 -12h30 L’interleukine-2 peut-elle prévenir le déficit immunitaire et retarder 

l’initiation du traitement antirétroviral chez les patients infectés par le 

VIH ? Résultats de l’essai ANRS 119 Interstart 

Jean-Michel Molina (Hôpital Saint-Louis, Paris) 

12h30 -12h50 Conséquences du blocage de CCR5 dans le traitement anti-VIH 

Pierre Corbeau 

(Institut de Génétique Humaine, UPR 1142 CNRS, Montpellier) 

12h50-14h00 Déjeuner 

14h00-16h30 Réservoirs : vers l’éradication ? 

Cette session se déroulera en anglais 

modérateurs 

François Clavel (Hôpital Bichat-Claude Bernard, Inserm U 552, Paris) 

Monsef Benkirane (Institut de Génétique Humaine, UPR 1142 CNRS , 

Montpellier) 


14h00 -14h30 Conférence : HIV latency and reservoirs 

Ronald Veazey (Tulane University School of Medicine, Louisiana, 

USA) 

14h30 -14h50 L’étude des réservoirs VIH : une aide à la réflexion sur les traitements 

de l’infection à VIH ? 

Christine Rouzioux (Hôpital Necker-Enfants malades, Paris) 

14h50 -15h10 Modèles animaux et réservoirs : dynamique et distribution tissulaire 

des formes non intégrées à 2-LTR chez les macaques infectés par SIV 

Roger Le Grand (CEA, Fontenay-aux-Roses) 

15h10 - 15h50 Pause 

Résumés sélectionnés 

15h50 - 16h00 Contrôle spontané du VIH dès la primo-infection : peut-on prédire la 

statut de « HIV controller » ? 

Cécile Goujard (Hôpital de Bicêtre, Le Kremlin Bicêtre) 

16h00 -16h10 Activation de la réplication du VIH latent par des composés hybrides 

bipolaires, rôle du facteur de transcription P-TEFB 

Xavier Contreras (University of California, San Francisco) 

16h10 - 16h20 Etude quantitative des réservoirs VIH dans le tissu lymphoïde rectal et 

caractérisation des quasi espèces virales 

Véronique Avettand-Fenoel (Hôpital Necker-Enfant malades, Paris) 

16h20 -16h30 Evolution de la diversité génétique et des mutations de résistance aux 

traitements du VIH-1 parmi des patients non traités au Mali 

entre 2005 et 2006 

Anne Derache (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris) 

16h30-17h00 Questions clés de la recherche dans les pays en développement 

en 2008 

François Dabis (Université Victor Segalen Bordeaux II, Inserm U897) 

17h00-17h50 Table Ronde: Questions de recherche dans les pays du Sud: 

comment traiter, comment prévenir ? 

animateur : Pierre-Marie Girard (Hôpital Saint-Antoine, Paris) 

Serge Eholié (CHU Treichville, Abidjan), Alexandra Calmy (Médecins 

Sans Frontières Suisse), Eric Delaporte (Université de Montpellier I, 

UMR 145 IRD), François Dabis (Université Victor Segalen Bordeaux II, 

Inserm U897) 

17h50 «Happy Hour » et posters 


Mardi 15 avril 

9h00-12h10 Pathogénèse atténuée : le virus ou l’hôte ? 

modérateurs 

Lisa Chakrabarti (Institut Pasteur, Paris) 

Laurence Weiss (Hôpital européen Georges-Pompidou, 

Institut Pasteur, Paris) 

9h00 - 9h20 Infection par le VIH-2 

Françoise Brun-Vézinet (Hôpital Bichat-Claude Bernard, Paris) 

9h20 - 9h40 L’infection par le SIV aGM non pathogène chez les singes 

verts africains : leçons à tirer sur les réponses protectrices de l’hôte 

Michaela Müller-Trutwin (Institut Pasteur, Paris) 

9h40 - 10h00 Avidité, polyfonctionnalité et turn over clonal à la base de l’efficacité de 

la réponse TCD8 + dans l’infection VIH 

Victor Appay (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Inserm U543, Paris) 

10h00 -10h20 Réponse T CD8+ spécifique, HLA classe I et contrôle du VIH 

Alain Venet (Faculté de Médecine Paris-Sud, Inserm U802, Le 

Kremlin-Bicêtre) 

10h20 - 10h40 Discussion 

10h40 - 11h00 Pause 

11h00-11h30 Utilisation de la plate-forme de génotypage à haute débit dans une 

étude chez des patients infectés par le VIH-1 : rôle des loci dans le 

contrôle de la charge virale et les réservoirs. 

Ioannis Théodorou (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Inserm U543, Paris) 


11h30 -11h40 L’observatoire national ANRS des « HIV controllers »: bilan après 

deux années de recrutement 

Olivier Lambotte (Hôpital de Bicêtre, Inserm U802, Le Kremlin 

Bicêtre) 

11h40 -11h50 Fortes réponses prolifératives T CD4 au VIH chez des patients traités 

et contrôlés virologiquement depuis 10 ans (étude DECAMUNE) 

Amélie Guihot (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Inserm U543, Paris) 

11h50 -12h00 Les cellules NK activées induisent la maturation de cellules 

dendritiques infectées par un mécanisme dépendant HMGB1. 

Implication pour l’établissement des réservoirs 

Héla Saidi (Institut Pasteur Paris) 

12h00 -12h10 Test rapide de neutralisation du VIH-1 pour mesurer la capacité 

antivirale des CD8 

So Youn Shin (Institut Pasteur, Paris) 


12h10 -12h40 Conférence : Où en est-on de la recherche thérapeutique anti-VHC ? 

Yves Benhamou (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris) 

12h40-14h00 Déjeuner / posters 

14h00-16h30 Où en sommes nous des vaccins anti-VIH ? : l’après «Merck» 

modérateurs 

Françoise Barré-Sinoussi (Institut Pasteur, Paris) 

Anne Hosmalin 

(Institut Cochin, Inserm U567, UMR 8104 CNRS, Paris) 

14h00 -14h15 Vaccins préventifs VIH/SIDA : vers de nouvelles approches 

vaccinales ? 

Marc Girard (Professeur honoraire, Université Paris-Diderot) 

14h15 -14h30 Immunisation thérapeutique anti-VIH : Bilan 

Brigitte Autran (Hôpital Pitié-Salpêtrière, UMR Inserm U543, Paris) 

14h30 – 14h45 Discussion 

14h45 -15h15 Conférence : Présentation antigénique et activation des lymphocytes T 

par les cellules dendritiques 

Sebastian Amigorena (Institut Curie, Inserm U653, Paris) 

15h15 -15h30 Place des anticorps dans les stratégies vaccinales 

Christiane Moog (Institut de Virologie, Inserm U575, Strasbourg) 

15h30 -15h45 Le programme vaccinal de l’ANRS 

Yves Lévy (Hôpital Henri Mondor, Créteil) 

15h45 - 16h00 Discussion 


16h00 -16h10 Présentation HLA restreinte des antigènes du VIH par des APC 

infectées : implication de l’autophagie 

Arnaud Moris (Institut Pasteur, URA 3015 CNRS, Paris) 

16h10 -16h20 La vaccination par vecteur lentiviral en prime-boost confère une forte 

protection contre SIVMAC251 chez les macaques. 

Anne-Sophie Beignon (Institut Pasteur, URA 3015 CNRS, Paris) 

16h20 - 16h30 Une nouvelle stratégie vaccinale anti-VIH1 : de la théorie à la preuve 

de concept chez le macaque 

Vincent Vieillard (Hôpital Pitié-Salpêtrière, Inserm U543, Paris) 

16h30 - 17h30 Table Ronde: Comment poursuivre la recherche vaccinale ? 

animateur : Françoise Barré-Sinoussi (Institut Pasteur, Paris) 

17h30 Clôture 

Marc Girard, Yves Levy, Christiane Moog, Brigitte Autran, 

Roger Le grand 


Résumés 


Résumés des 

présentations orales 


1. INFECTION VIH : QUELS OBJECTIFS POUR LA 

RECHERCHE CLINIQUE DE DEMAIN ? 

Christine Katlama 

Hôpital Pitié-Salpêtrière / Service Maladies Infectieuses et Tropicales 

47/83 Boulevard de L'Hôpital 75651 Paris Cedex 13 

christine.katlama@psl.aphp.fr 

La décennie achevée en 2006 fut celle de la démonstration éclatante que l’on pouvait durablement 

contrôler la réplication virale à l’aide de traitements combinées (cART ) , que la suppression 

maximale de la réplication virale à son plus bas niveau était le meilleur garant de la durabilité de 

l’efficacité des traitements , de l’absence de développement de la résistance virale , d’une 

restauration immunitaire satisfaisante . Elle fut aussi celle d’une accélération de l’accès aux 

traitements dans le monde entier. 

Parce que ces progrès ont permis d’augmenter de façon spectaculaire la survie avec près de 85% 

des patients avec une virémie contrôlée, sont apparus avec acuité d’autres problèmes : toxicité 

des traitements, co-morbidites liées aux virus des hépatites , risque cardio-vasculaires ,cancers , 

troubles osseux. Parce que l’interruption thérapeutique s’est révélée cliniquement délétère, parce 

que l’éradication n’a à ce jour pas été possible, le traitement doit être maintenu à vie. La recherche 

clinique doit maintenant s’orienter : 

1/ sur la recherche de stratégies thérapeutiques permettant d’identifier des stratégies d’épargne 

médicamenteuse et de réduction de toxicité permettant de traiter les patients sans dommage et 

efficacement pendant environ 40 ans ; 

2/ l’évaluation de l’impact des nouvelles classes médicamenteuses – inhibiteurs de CCR5, 

d’intégrase sur la physiopathologie et de l’infection VIH, le réservoir viral et l’immunorestauration. 


Olivier Schwartz 

2. LA RECHERCHE FONDAMENTALE SUR LE VIH 

ET LE SIDA: OU ALLONS NOUS? 

Institut Pasteur, Paris 

schwartz@pasteur.fr 

La recherche fondamentale a énormément progressé depuis l’identification du VIH, il y a 

maintenant 25 ans. Le cycle de multiplication du virus, les interactions virus-cellules cibles, la 

reconnaissance des cellules infectées par le système immunitaire, ainsi que les mécanismes de la 

physiopathologie commencent à être bien décryptés. Des zones d’ombres restent encore à 

explorer. Cette présentation fera la point sur les avancées récentes dans la connaissance de la 

biologie du VIH, sur leurs conséquences éventuelles dans le domaine thérapeutique, et sur les 

questions qui méritent d’être posées. 


Geneviève Chêne 

3. QUAND COMMENCER LES TRAITEMENTS 

ANTIRETROVIRAUX? 

Centre de Recherche en Emergence (CRE) INSERM U897, Institut de Santé Publique, 

d’Epidémiologie et de Santé Publique (ISPED), Université Victor Segalen Bordeaux 2, 146 

rue Léo-Saignat, 33076 Bordeaux cedex, France. 

genevieve.chene@isped.u-bordeaux2.fr 

Actuellement, il est recommandé de débuter le traitement antirétroviral chez l’adulte infecté par le 

VIH lorsque les lymphocytes CD4+ atteignent le seuil de 350/mm 3 . Au-dessus de ce seuil, ou 

lorsque l’infection est diagnostiquée au stade de la primo-infection, la mise au traitement n’est 

recommandée que dans certaines circonstances témoignant d’une particulière gravité de la 

maladie. 

Cette recommandation vise à apporter le meilleur bénéfice au prix de la survenue d’un nombre 

limité d’inconvénients. En effet, les traitements antirétroviraux disponibles ne permettent pas de 

guérir la maladie. Ils diminuent la mortalité et la morbidité de l’infection par le VIH grâce à une 

réduction efficace et prolongée de la réplication virale permettant de limiter la sélection de virus 

résistants et de restaurer le nombre de lymphocytes CD4+ (en atteignant 500/mm 3 durablement). 

Le risque de transmission de la mère à l’enfant est par ailleurs extrêmement réduit. Les 

inconvénients se mesurent en termes de tolérance à court, moyen et long terme et d’impact sur la 

qualité de vie compte tenu que l’exposition au traitement doit être continue et prolongée. 

Les recommandations se fondent sur les résultats des essais de nouveaux médicaments ou de 

stratégies d’interruption et des cohortes observationnelles, car il n’existe pas actuellement de 

résultats d’essai randomisé comparant des stratégies d’initiation de traitement en fonction du 

niveau des lymphocytes CD4+. 

Or, les essais récents de nouveaux médicaments montrent une très grande efficacité pour de 

nouvelles associations ou de nouvelles classes ayant une certaine facilité de prise et une bonne 

tolérance non seulement en 1 ère ligne de traitement mais également chez les patients pré-traités. 

L’essai d’interruption SMART et les cohortes d’observation montrent que la morbidité et la 

mortalité peut être élevée même lorsque les lymphocytes CD4+ sont supérieurs à 350/mm 3 et que 

les causes les plus fréquentes (infections sévères ou cancers non classant sida, complications 

hépatiques, rénales ou cardio-vasculaires, en particulier) peuvent être associées à 

l’immunodéficience, ou au mauvais contrôle de la réplication virale. Un traitement antirétroviral 

plus précoce pourrait donc avoir pour objectif de réduire également l’incidence de ces maladies 

associées, et de permettre une remontée plus importante et rapide des lymphocytes CD4+. 

L’essai START, en cours de conception, apportera des réponses à ces interrogations. 

L’initiation d’un traitement antirétroviral en 2008 implique que ce traitement sera poursuivi tout au 

long de la vie. Le développement de nouveaux médicaments encore plus efficaces, mieux tolérés 

et plus faciles à prendre reste d’actualité. La compréhension des conditions de la durabilité de 

l’effet de ces traitements, en particulier des séquences successives de traitement les plus 

appropriées, et donc des conditions du maintien du meilleur rapport bénéfice/risque pour le 

malade est un champ important de recherche pour les cohortes. Enfin, toutes les informations 

allant dans le sens d’un début plus précoce du traitement ne pourront avoir véritablement d’impact 

sans une politique et des activités de dépistage de l’infection par le VIH permettant un diagnostic 

suffisamment précoce pour que les malades puissent pleinement bénéficier des progrès 

thérapeutiques. 


4. L’INTERLEUKINE-2 PEUT-ELLE PREVENIR LE 

DEFICIT IMMUNITAIRE ET RETARDER 

L’INITIATION DU TRAITEMENT 

ANTIRETROVIRAL CHEZ LES PATIENTS 

INFECTES PAR LE VIH ? RESULTATS DE 

L’ESSAI ANRS 119 INTERSTART 

Jean-Michel Molina, Yves Levy, Isabelle Fournier, Stephanie Hamonic, Michèle 

Bentata,, Genevieve Beck-Wirth, Marie-Lise Goujeon, Isabelle Madelaine, Daniel 

Sereni, François Jeanblanc, Thomas Boulet, François Simon,and Jean-Pierre 

Aboulker, au nom du groupe Interstart (ANRS 119) 

Assistance-Publique Hôpitaux de Paris, Hopital Saint-Louis et Université de Paris 7 Denis 

Diderot (J.M.M., I.M., D.S., F.S.), Hôpital Henri-Mondor, INSERM 841 et Université de 

Paris 12, Creteil (Y.L.), INSERM SC 10, Villejuif (S.H., I.F., T.B., J.P.A.), Hôpital Avicenne, 

Bobigny (M.B.), Hôpitaux de Mulhouse (G.B.), Hôpital Edouard Herriot, Lyon (F.J.), Institut 

Pasteur, Paris (M.L.G.). 

jean-michel.molina@sls.aphp.fr 

Le traitement antirétroviral est aujourd’hui indiqué chez les patients infectés par le VIH 

asymptomatiques dès que le taux de CD4 diminue en dessous de 350/mm 3 . L’interleukine-2 (IL-2), de 

part son action sur la régulation de la prolifération et de la survie des CD4 pourrait permettre de ralentir 

le déficit immunitaire et retarder ainsi l’initiation d’un traitement antirétroviral continu. 

L’objectif de l’essai INTERSTART était d’évaluer l’efficacité et la tolérance de l’IL-2 à retarder la chute 

des CD4 et donc l’initiation de la trithérapie chez des patients asymptomatiques n’ayant pas 

d’indication thérapeutique antirétrovirale. 

130 patients naïfs d’antirétroviraux, ayant entre 300 et 500 CD4, ont été recrutés entre Décembre 2003 

et Décembre 2004 dans 29 centres ANRS en France pour participer à cette étude. Ils ont reçu après 

tirage au sort un traitement par IL-2 (4 cycles de 4.5 M IU en sous cutané deux fois par jour pendant 5 

jours aux semaines 0, 8, 16 et 24 la première année, et un maximum de deux cycles par an par la 

suite) ou aucun traitement. 

Le critère de jugement principal de l’étude était la progression de l’infection VIH à 96 semaines, défini 

par une chute des CD4 confirmée

Pierre Corbeau 

5. CONSEQUENCES DU BLOCAGE DE CCR5 DANS 

LE TRAITEMENT ANTI-VIH 

Laboratoire d'Immunologie du CHU de Nîmes et Institut de Génétique Humaine du CNRS 

(UPR1142) 141 rue de la Cardonille 34396 Montpellier cedex 5 

pierre.corbeau@igh.cnrs.fr 

Comme bien d'autres acteurs du système immunitaire, le récepteur de C-C chimiokines CCR5 

peut jouer un rôle bénéfique ou néfaste selon la situation pathologique. Ainsi s'il participe à la 

réponse immunitaire contre certains agents infectieux, il peut en revanche être coresponsable de 

dégâts immuno-pathologiques. Son blocage par un antagoniste à visée thérapeutique anti-VIH va 

avoir des conséquences virologiques et immunologiques. Sur le plan virologique il va bien sûr 

réduire l'entrée virale et par là la réplication. Mais il va inhiber aussi les 3 effets cytopathogènes 

que sont la formation de syncitia, l'apoptose et la cytolyse induites par les enveloppes virales R5 

intracellulaires. Enfin en réduisant la densité membranaire fonctionnelle en CCR5 il devrait 

optimiser l'efficacité des autres anti-rétroviraux, en particulier celle des inhibiteurs de fusion. En 

revanche il y a évidemment le risque de sélection de mutant résistant, en particulier du fait de 

l’acquisition de la capacité de liaison au complexe formé par CCR5 et l’antagoniste. Un autre 

risque est l'induction de la commutation de R5 vers X4 correspondant à un gain de 

cytopathogénicité. Certaines données expérimentales vont dans le sens d'un tel risque alors que 

d'autres non. Sur le plan immunologique, les antagonistes actuellement utilisés, en bloquant les 

interactions entre CCR5 et les chimiokines qui s'y lient, exposent au risque d’affaiblissement de la 

réponse dirigée contre certains agents infectieux parmi lesquels certains peuvent être retrouvés 

au stade SIDA. En revanche ils pourraient avoir un effet bénéfique dans les situations 

inflammatoires où CCR5 est impliqué, comme par exemple dans la polyarthrite rhumatoïde, 

l’athérosclérose ou le rejet de greffe. Enfin la récente observation que les antagonistes de CCR5 

permettent une remontée du nombre de cellules T4 plus importante que d'autres anti-rétroviraux 

soulève l'intéressante hypothèse qu'ils pourraient protéger le système immunitaire d'une activation 

polyclonale qu'on sait délétère. 


Ronald S. Veazey 

6. HIV LATENCY AND RESERVOIRS 

Tulane National Primate Research Center, Covington, Louisiana, USA 

rveazey@tulane.edu 

Despite 25 years of research, an effective vaccine or cure for HIV infection remains elusive. 

Perhaps the largest impediments to progress in these areas relate to our lack of understanding of 

correlates of immunity to infection, and major tissues that serve as reservoirs for viral persistence 

in treated patients. We have previously demonstrated that the intestinal tract is the major site for 

viral replication and amplification in primary SIV infection, regardless of the route of inoculation. 

More recently we have been examining tissues in chronically infected macaques that are 

controlling viral replication to those that are not, to assess whether the intestine is also a major 

reservoir in animals controlling plasma viremia. Approximately 1/3 of Chinese-origin rhesus 

macaques (Ch Rh) become long-term nonprogressors (LTNP) after infection with SIVmac239, 

whereas the other 2/3 progress to AIDS, similar to Indian origin macaques and HIV-infected 

humans. Furthermore, we have examined immune outcome and viral replication in tissues of 

macaques previously “immunized” with SHIV162P3 and subsequently challenged with pathogenic 

SIVmac, which usually results in excellent control of viral replication. In the latter studies, this viral 

control is clearly not due to inherent resistance to infection, since all supported high levels of 

replication during primary SHIV infection, yet all showed marked control of pathogenic SIV 

challenge compared to naïve Chinese controls inoculated with the same challenge. Both of these 

models have the potential for studying viral reservoirs and immune correlates of protection in 

tissues of animals controlling infection. 

Using RT-PCR, we have quantified cell-associated levels of virus in the blood, lymph nodes, 

jejunum and colon of progressors and nonprogressors throughout infection. Using tissues 

collected at necropsy, we have also examined and compared levels of viral persistence and 

replication in brain, intestine, lymph nodes, spleen, bone marrow, and thymus by in situ 

hybridization for viral RNA. Both methods demonstrate that lymph nodes and inductive lymphoid 

tissues of the intestine are major sites for viral persistence and replication, particularly in animals 

that have low or undetectable levels of plasma viremia. The major reservoirs for virus in 

macaques controlling infection are lymph nodes and ileum and colon which contain abundant 

organized lymphoid tissues. In contrast, virus is usually undetectable in tissues such as the 

thymus and brain in animals controlling infection. Furthermore, analysis of cell subsets in these 

tissues indicates that the level of viral replication in tissues is directly correlated with cellular 

activation in these tissues. Combined, these data indicate that organized lymphoid tissues 

including the GALT are major reservoirs for viral persistence, and that anti-retroviral therapy and 

vaccine research should consider specifically targeting mucosal tissue sites. 


7. L’ETUDE DES RESERVOIRS VIH : UNE AIDE A 

LA REFLEXION SUR LES TRAITEMENTS DE 

L’INFECTION A VIH ? 

Christine Rouzioux 

EA 3620 Université Paris Descartes, Laboratoire de Virologie, CHU Necker Enfants 

Malades, Paris 

christine.rouzioux@nck.aphp.fr 

La présence de virus latent sous forme intégrée dans les cellules infectées reste l’obstacle majeur 

au traitement de l’infection à VIH. La dynamique de l’infection à VIH au cours du temps et dans 

l’organisme aboutit à la constitution de réservoirs de cellules infectées, notamment dans le tissu 

digestif. L’exploration des réservoirs via la mesure de l’ADN VIH dans le sang périphérique 

apporte de nombreuses informations, qu’il s’agisse de patients en primo-infection, en phase 

chronique ou sous traitements. Elle montre notamment que le niveau d’ADN VIH des cellules 

sanguines reflète bien le niveau des réservoirs profonds à différents stades de l’infection. 

Plusieurs études des réservoirs chez des patients sous HAART rapportent la persistance de 

réservoirs stables, malgré de longues années de traitement efficace. La caractérisation des 

différents types de lymphocytes infectés permet de comprendre l’effet des traitements sur la 

réduction des réservoirs et d’estimer la durée de vie des cellules réservoirs. La mise en évidence 

de cellules infectées T CD4 + naïves, centrales mémoires ou mémoires effectrices révèle la 

dynamique de l’infection dans l’organisme. 

Les variations de diffusion des antirétroviraux dans les tissus profonds sont sans doute à l’origine 

des sites autonomes de réplication résiduelle sous traitement, y compris chez des sujets ayant un 

ARN VIH plasmatique inférieur à 50 copies/mL. Cette réplication résiduelle pose la question de 

l’utilisation des traitements puissants, instaurés précocement et maintenus longtemps afin de 

réduire au plus tôt le stock de cellules infectées, tout en préservant le système immunitaire. 

Différentes approches thérapeutiques ayant pour objectif la purge des réservoirs et des cellules 

infectées latentes ont apporté des premiers résultats décevants. Les études des mécanismes 

d’intégration du provirus au sein de la chromatine, des mécanismes du maintien de la latence et 

du rôle de l’activation lymphocytaire sont indispensables à la compréhension des réservoirs 

lymphocytaires dans l’infection à VIH. 


8. MODELES ANIMAUX ET RESERVOIRS : 

DYNAMIQUE ET DISTRIBUTION TISSULAIRE 

DES FORMES NON INTEGREES A 2-LTR CHEZ 

LES MACAQUES INFECTES PAR SIV 

Mannioui A 1,2 , Sellier P 1,2,3, Delache B 1,2 , Brochard P 1,2 , Vaslin B 1,2 , Karlsson I 1,2 , 

Malleret B 1,2 , Roques P 1,2 , Le Grand R 1,2 . 

1 . CEA, Devision of immuno-virology, Institute for emergent diseases and innovative 

therapies, DSV, IPSC, Fontenay-aux-Roses, France 

2 . Université Paris XI, UMRE01, Orsay, France 

3 . Assistance publique-Hôpitaux de Paris, service de médecine interne A, Hôpital 

Lariboisière. 

roger.le-grand@cea.fr 

Antiretroviral therapy (ART) inhibits viral replication and results in reduction of HIV-1 plasma 

viremia below detection threshold but does not eradicate viral reservoirs. In experimental infection 

of cynomolgus macaques with SIVmac251, a model which closely mimic HIV pathogenesis in 

humans, we examined 2-LTR circles as marker of new viral infection in association with total viral 

DNA, in PBMC and lymphoid and mucosal tissues, as indicator of dynamic and 

compartmentalization of viral reservoirs before and after ART. A correlation between kinetics of 2- 

LTR circles copy numbers and plasma viral load or total viral DNA, whatever the SIVmac251 

inoculation dose, was observed. Rebound of 2-LTR level in PBMC was observed after withdraw of 

post-exposure antiretroviral prophylaxis treatment confirming that 2-LTR circles are markers of 

recent infection events in vivo. Further, we evaluated before starting ART the variation of the 2- 

LTR circles in different tissues during acute and chronic stages of infection. While total viral DNA 

still stable just after initial peak of viremia, 2-LTR circles levels were high in lymph nodes (LN) and 

low in gut-associated lymphoid tissue (GALT). Later on, during chronic stage, the 2-LTR circles 

persisted at low levels in LN but become elevated in GALT. Importantly, in ART treated macaques 

during early chronic stage, that despite undetectable plasma viral load, both total viral DNA and 2- 

LTR circles could be detected at high levels in LN compared to that observed in PBMC and GALT. 

Thus in chronic stage with successful ART it is possible that LN are major contributors to the 

replenishment of the viral reservoir and generation of newly infected cells. 


9. CONTROLE SPONTANE DU VIH DES LA 

PRIMO-INFECTION : PEUT-ON PREDIRE LE 

STATUT DE « HIV CONTROLLER » ? 

Cécile Goujard 1,2 , Alain Venet 2 , Olivier Lambotte 1,2 , Christiane Deveau 3 , Christine 

Rouzioux 4 , Yasmine Zittoun 3 , Laurent Tran 3 , Martine Sinet 2 , Jean-François 

Delfraissy 1,2 , Laurence Meyer 3 , Cohorte ANRS CO 06-PRIMO. 

1 INSERM U 802, Faculté de Médecine Paris-Sud 11, Le Kremlin Bicêtre ; 2 Service de 

médecine interne, Hôpital Bicêtre, AP-HP ; 3 INSERM U 822, INED, Faculté de Médecine 

Paris-Sud 11, Hôpital Bicêtre, AP-HP, Le Kremlin Bicêtre ; 4 Laboratoire de virologie, EA- 

MRT 3620, Hôpital Necker, AP-HP, Paris, France. 

cecile.goujard@bct.aphp.fr 

De rares patients ont une évolution particulière, caractérisée par une charge virale VIH (CV) 

spontanément indétectable et persistante à long terme (HIV controllers). Leur statut à la primoinfection, 

et la cinétique d’établissement du contrôle viral, sont inconnus. 

Nous avons étudié dans la cohorte prospective ANRS PRIMO les patients inclus entre 1996 et 

2006, non traités, et présentant une CV

10. ACTIVATION DE LA REPLICATION DU VIH 

LATENT PAR DES COMPOSES HYBRIDES 

BIPOLAIRES, ROLE DU FACTEUR DE 

TRANSCRIPTION P-TEFB 

Xavier Contreras, Lenasi Tina, Barboric Matjaz, Schweneker Marc, Chen Ching-Shih, 

Martin Jeff, Deeks Steve, McCune Joseph, Peterlin Matija 

University of California San Francisco, Matija Peterlin’s Laboratory 

xavier.contreras@ucsf.edu 

L’utilisation des trithérapies a montré son efficacité dans la lutte contre la progression de l’infection 

VIH. Cependant, des génomes viraux persistent sous une forme latente, inaccessible aux 

thérapies et se réactive lorsque ceux-ci sont interrompus. Une approche consiste à réactiver ce 

virus latent au niveau transcriptionnel de façon à le rendre de nouveau accessible aux thérapies. 

L’acide suberoylanilide hydroxamique (SAHA) est une molécule thérapeutique récemment 

acceptée pour le traitement de lymphomes cutanés. De même que son homologue, 

hexamethylène bisacétamide (HMBA), il stimule la production de VIH dans les cellules infectées 

de façon chronique. Cependant, son mécanisme d’action demeure mal défini. Dans cette étude, 

nous démontrons que le SAHA active de façon transitoire la voie PI3K/Akt dans les cellules T 

mémoire et quiescentes. HEXIM1 est phosphorylé et ainsi induit la libération de facteur P-TEFb 

actif précédemment piégé en complexe avec HEXIM1 et 7sk snRNA. Ainsi, P-TEFb est recruté au 

promoteur du VIH pour stimuler l’élongation de la transcription et la production virale. En dépit de 

la présence continue de SAHA, P-TEFb se réassemble rapidement avec 7SK snRNA et HEXIM1. 

Le SAHA réactive la réplication virale à partir de PBMC issus de patient sous trithérapie sans 

charge virale détectable. Ainsi, notre étude révèle le mécanisme d’induction de la transcription du 

VIH par SAHA et suggère de nouvelles approches thérapeutiques. 


11. ETUDE QUANTITATIVE DES RESERVOIRS 

VIH DANS LE TISSU LYMPHOÏDE RECTAL ET 

CARACTERISATION DES QUASIESPECES 

VIRALES 

Véronique Avettand-Fenoel 1 , Thierry Prazuck 2 , Laurent Hocqueloux 2 , Adeline 

Mélard 1 , Rémy Kerdraon 2 , Hayete Djarech 2 , Christine Rouzioux 1 

1 Université Paris-Descartes, EA3620, APHP, Laboratoire de Virologie – Hôpital Necker- 

Enfants Malades 2 CHR d'Orléans - La Source, Orléans, France 

veronique.avettand@nck.aphp.fr 

Le tissu lymphoïde digestif joue un rôle majeur dans la physiopathologie de l’infection VIH. Nous 

avons étudié ces réservoirs profonds (niveau d’infection et quasiespèces sanguines et tissulaires). 

Des biopsies rectales ont été proposées à 14 patients : 4 en « rémission » (antirétroviraux initiés 

dès la primo-infection et contrôle immuno-virologique >30 mois après l’interruption thérapeutique), 

2 contrôlant naturellement l’infection (LTNP), 5 traités depuis la phase chronique, 3 virémiques. 

L’ADN-VIH était quantifié dans les cellules mononucléées sanguines (PBMC) et dans les cellules 

rectales par qPCR (technique ANRS). Une analyse phylogénétique après clonage moléculaire 

(région V3) a été appliquée. 

Les médianes d’ADN-VIH étaient 2,0, 2,0, 2,5 et 3,3 Log cp/10 6 cellules rectales vs 1,9, 2,2, 3,5 et 

3,7 Log cp/10 6 PBMC pour les patients en « rémission », les LTNP, les avirémiques traités et les 

non traités, respectivement. L’ADN-VIH/PBMC était très corrélé à l’ADN-VIH/cellules rectales 

(r=0,898,p=0,001). Les 7 patients ayant un ADN-VIH/PBMC2,7 Log (médiane 3,5 Log) (4 patients traités pendant la phase chronique, 3 

virémiques) (ADN-VIH rectal : 2,8 Log,p=0.002). L’analyse phylogénétique évoquait une 

réplication tissulaire. 

Le niveau d’infection sanguin reflète celui du rectum. Les LTNP et les patients en « rémission » 

ont un faible taux d’ADN-VIH sanguin et rectal. Cette étude souligne la dynamique virale et l’intérêt 

d’un traitement précoce prolongé pour mimer le statut des LTNP. 


12. EVOLUTION DE LA DIVERSITE GENETIQUE 

ET DES MUTATIONS DE RESISTANCE AUX 

TRAITEMENTS DU VIH-1 PARMI DES PATIENTS 

NON TRAITES AU MALI ENTRE 2005 ET 2006 

Anne Derache, Almoustapha-Issiaka Maiga, Ousmane Traore, Alain Akonde, 

Mamadou Cisse, Bernard Jarrousse, Victoria Koita, Bah Diarra, Guislaine Carcelain, 

Francis Barin, Cecilia Pizzocolo, Louis Pizarro, Christine Katlama, Vincent Calvez, 

Anne-Genevieve Marcelin 

UPMC Paris VI, Laboratoire de Virologie, Hôpital de la Pitié-Salpêtrière 

derache_anne@yahoo.fr 

Objectifs: décrire les variants du VIH-1 circulant au Mali et estimer le taux de transmission du 

VIH-1 portant des mutations de résistance en 2006. 

Patients et méthodes: les gènes de la transcriptase inverse (TI) et de la protéase (PR) de 198 

patients, non traités et diagnostiqués positifs pour le VIH-1 en mai 2006 à Bamako et à Ségou, ont 

été séquencés. 

Résultats: bien que le recombinant CRF02_AG soit toujours prédominant (72%), une plus grande 

diversité génétique a été observée par rapport à l’année 2005. La prévalence globale de la 

résistance primaire a été évaluée à 11,5% au Mali en 2006 (INTI: 1,5%, INNTI: 9%, IP: 1%) et à 

2,5% (INTI: 1%, INNTI: 1,5%, IP: 0%) selon les listes de mutations IAS-USA 2007 et Stanford 

respectivement. Il n’y a pas de différence significative entre 2005 et 2006 pour la résistance 

primaire globale ainsi que pour les prévalences des mutations aux différentes classes 

thérapeutiques. Les mutations de résistance trouvées sur les gènes de la TI et de la PR sont en 

accord avec le régime thérapeutique prescrit au Mali, à l’exception des mutations V90I, V106I et 

A98G, associées à la résistance à l’Etravirine, qui sont polymorphiques dans les sous-types non- 

B. 

Conclusion: la diversité génétique du VIH-1 semble augmenter au Mali et la prévalence de la 

résistance primaire globale du VIH-1 demeure faible. Ceci est en accord avec les résultats 

obtenus dans d’autres pays de l’Afrique de l’Ouest où le taux de prévalence est inférieur à 5%. 


François Dabis 

13. QUESTIONS CLES DE LA RECHERCHE 

DANS LES PAYS EN DEVELOPPEMENT EN 2008 

INSERM U897, ISPED, Université Victor Segalen, Bordeaux 

Francois.Dabis@isped.u-bordeaux2.fr 

La pandémie de VIH/Sida ne marque toujours pas le pas. Les statistiques les plus récentes de 

l’OMS/ONUSIDA donnent une impression d’apparente stagnation, alors que la dynamique de 

cette infection létale reste particulièrement forte : 2,1 millions d’adultes et 420.000 enfants se sont 

ainsi contaminés en 2007 (96% dans les pays en développement), soit plus que le nombre total de 

décès estimés pour cette même année (1,7 million d’adultes et 290.000 enfants). L’Afrique subsaharienne 

reste plus que jamais l’épicentre de la pandémie. Pourtant ce sont près de 2,5 millions 

de personnes qui vivent avec le VIH qui sont désormais sous traitement antirétroviral, soit un tiers 

de ceux qui en ont un besoin immédiat. 

Dans ce contexte fortement évolutif, de nombreuses solutions validées s’offrent aux décideurs, 

acteurs de santé et de la prévention et à leurs populations cibles et la recherche contribue toujours 

activement à leur amélioration. La communauté scientifique reste toujours fortement mobilisée 

pour d’une part identifier des nouvelles approches préventives et thérapeutiques et d’autre part 

optimiser les stratégies d’efficacité démontrée et les faire appliquer rapidement et à large échelle. 

L’ANRS est fortement mobilisée pour soutenir la recherche dans les pays en développement au 

travers de sa politique de sites (Afrique du Sud, Brésil, Burkina Faso, Cambodge, Cameroun, Côte 

d’Ivoire, Egypte, Sénégal, VietNam). La part de son budget consacrée à la recherche dans les 

pays en développement augmente ainsi régulièrement. 

L’Action Coordonnée n°12 est le mécanisme d’animation scientifique de la recherche de l’Agence 

dans les pays en développement. L’AC12 fonctionne par grands axes prioritaires de recherche 

partagés entre chercheurs français et des pays en développement : prévention de la transmission 

sexuelle, prévention et traitement de l’infection de la mère et de l’enfant, morbidité et complications 

thérapeutiques, tuberculose, co-infection par les hépatites virales, quantification et résistance 

virale, économie de la santé, recherche opérationnelle. 

Le résumé des travaux récemment engagés par ces groupes de travail de l’AC12 ainsi que les 

conclusions d’une réunion récente de l’Organisation Mondiale de la Santé sur les lacunes en 

matière de recherche pour guider les politiques publiques permettent de dresser une liste non 

exhaustive des priorités de recherche dans les pays en développement à court et moyen terme. 


14. THE NON-PATHOGENIC SIVAGM 

INFECTION IN AFRICAN GREEN MONKEYS: 

LESSONS ON PROTECTIVE HOST RESPONSES 

B. Jaquelin 1 , V. Mayau 1 , G. Brysbaert 2 , M. Ploquin 1,# , D. Kunkel 1 , O. Diop 3 , C. Butor 4 , 

P. Lebon 5 , A. Hosmalin 6 , F. Barré-Sinoussi 1 , A. Benecke 2 & M. Müller-Trutwin 1 . 

1 Institut Pasteur, Unité de Régulation des Infections Rétrovirales, Paris; 2 Institut des 

Hautes Etudes Scientifiques; 3 Institut Pasteur, Sénégal; 4 Université Paris 7; 5 Laboratoire 

de Virologie, Hôpital Saint-Vincent de Paul et Université Paris V; 6 Institut Cochin INSERM 

U567, CNRS UMR8104, IFR 116, Université Paris 5. #Present address: MRC-National 

Institute for Medical Research, London, UK. 

mmuller@pasteur.fr 

We search for the immunological correlates of protection against AIDS by studying non-pathogenic 

SIVagm infection in African Green monkeys (AGM). We have previously shown that the plasma 

and intestinal viral loads are similar to those reported in pathogenic SIVmac and HIV-1 infections. 

Despite this continuous viral replication, AGMs do not show chronic T cell activation. The 

protection against AIDS in AGMs is thus not associated with a more efficient control of viral 

replication, but with a better control of deleterious bystander immune activation. In order to assess 

the role of innate immune responses in T cell activation profiles in SIVagm-infected AGMs, we 

followed the dynamics of dendritic cells in blood and lymph nodes and searched whether they 

were associated with a particular cytokine balance. In order to analyze the impact of this early 

environment on CD4 + T cells, we performed transcriptional profiling on CD4 + T cells collected 

starting from day 1 post-infection in blood and lymph nodes from 6 AGMs and 6 rhesus macaques 

using a microarray platform. We aim to distinguish those signaling pathways that are induced 

specifically in either pathogenic or non pathogenic SIV infection. Altogether, such studies of the 

early events will contribute to decipher mechanisms underlying the regulation of harmful chronic T 

cell activation and disease progression. 


Victor Appay 

15. AVIDITE, POLYFONCTIONNALITE ET 

TURNOVER CLONAL A LA BASE DE 

L’EFFICACITE DE LA REPONSE T CD8+ DANS 

L’INFECTION VIH 

Laboratoire d’immunologie cellulaire, INSERM U543, Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris, 

France 

appay@chups.jussieu.fr 

Les récents résultats de l’essai vaccinal réalisé par Merck (STEP), visant à induire une immunité T 

anti-VIH, n’ont indiqué aucun effet bénéfique de ce vaccin chez les patients vaccinés. Au delà de 

la déception engendrée par ces résultats, cet échec nous fait surtout prendre conscience que 

notre connaissance de l’immunité T et de son induction efficace par un vaccin est encore très 

limitée. La recherche de caractéristiques qualitatives reliées à une meilleure protection par les 

lymphocytes T CD8 contre le VIH reste donc un objectif majeur. Dans ce but, nous avons réalisé 

une étude détaillé des lymphocytes T CD8 restreints part HLA B27 et spécifiques d’un épitope de 

gag (KK10), qui sont associées à une capacité protectrice supérieure chez des patients infectés 

par le VIH. Cette stratégie nous permet de restreindre sensiblement la difficulté reliée a 

l’hétérogènéité des lymphocytes T CD8 spécifiques du VIH, en nous concentrant sur l’analyse 

d’une population homogène (cad les lymphocytes T CD8 B27-KK10), et donc d’identifier des 

paramètres clairs associés au meilleur contrôle du VIH. En effet, les lymphocytes T CD8 B27- 

KK10 présentent une avidité fonctionnelle élevée et une capacité polyfonctionnelle supérieure par 

rapport aux lymphocytes T CD8 spécifiques d’autres épitopes du VIH (et restreints par d’autres 

allèles HLA). Ces deux paramètres identifiés semblent constituer la base du meilleur contrôle du 

VIH. Nous avons aussi démontré que les lymphocytes T CD8 B27-KK10 présentent un turnover 

clonal important, associé à un rapprochement vers un stade de sénescence réplicative (du fait de 

leur sensibilité pour l’antigène), ou à l’apparition d’un variant d’échappement. Il est important de 

considérer l’équilibre dynamique qui s’opère autour de ces paramètres pour instaurer un contrôle 

du VIH, qui, dans le temps, dépend fortement de la capacité du système immunitaire à renouveler 

son pool de lymphocytes T CD8 protectrices. Il semble à présent impératif de considérer ces 

paramètres, lors du design de vaccins anti-VIH basé sur l’immunité T, ainsi que pour 

l’immunomonitoring de ces vaccins. 


Alain Venet, 

16. REPONSE T CD8+ SPECIFIQUE, HLA 

CLASSE I ET CONTROLE DU VIH 

Unité INSERM U802, Faculté de Médecine Paris-Sud, 63 rue Gabriel Péri, 94276 Le 

Kremlin-Bicêtre. 

alain.venet@u-psud.fr 

Un faible nombre de patients infectés par le VIH présente un contrôle spontané et durable de la 

réplication virale. La réponse immunitaire spécifique de ces patients apparaît en étroite relation 

avec ce contrôle : les lymphocytes T CD4+ spécifiques synthétisent de l’IL-2, les lymphocytes T 

CD8+ sont capables d’exercer ex vivo une capacité suppressive majeure de la réplication virale en 

l’absence de toute stimulation exogène. Cette dernière activité apparaît essentiellement liée à la 

présence de cellules T CD8+ spécifiques du VIH, en particulier celles restreintes par les allèles 

HLA-B27 et HLA-B57. Cependant, le lien entre les réponses T et le contrôle viral est plus subtil. 

D’une part, certaines fonctions des cellules HLA-B57 restreintes des patients HIC sont retrouvées 

chez des patients traités et pourraient ne traduire que l’effet d’une charge antigénique faible. 

D’autre part, une forte proportion de patients HLA-B57 n’appartient pas au groupe des HIC et leur 

réponse T CD8+ est sensiblement différente. Enfin, chez les patients HIC, les réponses nonrestreintes 

par HLA-B57 ont des caractéristiques similaires à celles restreintes par HLA-B57, et ce 

quel que soit l’haplotype du patient. Les différentes facettes des réponses T CD8+ dans ces 

différents groupes seront présentées. 

Ce travail a été réalisé à l’U802 (Bicêtre, Paris-Sud) en étroite collaboration avec les équipes de 

G. Pancino, A. Saez-Cirion et L. Chakrabarti (Institut Pasteur) sous la coordination du Dr O. 

Lambotte. 


17. A GENOME WIDE ASSOCIATION STUDY IN 

HIV-1 INFECTED PATIENTS SHOWS THAT 

DIFFERENT LOCI CONTROL SERUM VIRAL 

LOAD AND RESERVOIR 

Ioannis Theodorou 

Hôpital Pitié – Salpétrière, INSERM U 543, Paris. 

ioannis.theodorou@psl.aphp.fr 

Since the last few years, there has been a growing interest for the identification of novel loci in the 

host’s genome that control complex diseases by genome-wide association studies (GWA). In the 

field of common infectious diseases, the first genome-wide association study correlated two SNP 

variants within the MHC region with control of serum viral load 6 to 18 months after HIV 

infection.(Fellay et al. 2007). A third SNP variant has been found in the same region controlling 

disease progression. However GWA association studies have several pitfalls including high rates 

of false positive and false negative signals. Although several statistical methods are available to 

reduce these errors, the gold standard is to perform a similar study in different cohorts with a 

similar methodology and validate positive signals, but also pick up SNPs that proved to be 

negative during the first study. 

In this study we carried out a genome-wide association study (GWAS) in a cohort of Caucasian 

seroconverters and used different set points (compared to the Euro Chavi study) to find SNPs that 

influence HIV-1 viral loads. He have analysed data from 600 patients with a well documented 

seroconversion date and searched for genomic regions that control either serum or DNA viral load 

at very early stages of HIV-1 disease. We have also analysed a cohort of 45 HIV controllers in 

order to test whether the SNPs that affect very early viral load can also influence HIV-1 viral loads 

for longer periods. Finally we have performed a joint analysis of the data obtained in our study and 

those publicly available from the Euro-CHAVI consortium. 

Taken together our data and those previously published suggest that the host’s Major 

Histocompatibility locus genotype strongly influences HIV-1 serum viral loads during the whole 

course of HIV-1 disease. This same locus also influences HIV-1 DNA viral load but surprisingly 

other loci also seem to participate to the control of this phenotype. 


18. L’OBSERVATOIRE NATIONAL ANRS DES 

« HIV CONTROLLERS » (HIC) : BILAN APRES 

DEUX ANNEES DE RECRUTEMENT 

Boufassa F 1 , Olivier Lambotte 2 , Rouzioux C 3 , Delfraissy JF 2 , Meyer L 1 

pour le groupe d’étude ANRS EP36. 

1 INSERM U 822, Service d’épidémiologie, Hôpital Bicêtre, Paris Sud 11, Le Kremlin- 

Bicêtre, 2 Service de Médecine interne, Hôpital Bicêtre, Le Kremlin-Bicêtre, France, 

3 Laboratoire de Virologie, Hôpital Necker, Paris, France. 

olivier.lambotte@bct.ap-hop-paris.fr 

Les HIC sont des patients infectés par le VIH-1 depuis plus de 10 ans, n’ayant jamais reçu de 

traitement antirétroviral et dont plus de 90% des mesures d’ARN VIH plasmatique sont < 400 

copies/ml. L’Observatoire National des HIC a été mis en place en 2006 dans une trentaine de 

centres ANRS en France métropolitaine et dans les DOM. Les données de CD4 et charge virale 

recueillies depuis le diagnostic de l’infection VIH sont colligées. Une biothèque est constituée au 

moment du recrutement qui servira à répondre à des questions d’ordre virologique et génétique 

sur les mécanismes de protection contre le VIH. A ce jour, 76 patients ont été recrutés et pour 64 

les données sont saisies. L’âge médian au diagnostic d’infection VIH est de 29 ans (étendue : 0- 

49), 42% sont des femmes et 87% caucasiens. L’année médiane de diagnostic VIH est 1989 

(1983-1997), soit en médiane 18 années d’infection VIH connue. La médiane des mesures de 

CD4 entre 1986 et 2007 est de 751 CD4/mm 3 [IQR : 581-950], 3% des mesures étaient ≤ 350 

/mm 3 . La perte moyenne des CD4 sur la période considérée est estimée à -14 [-16,-12] CD4/mm 3 

par an. Entre 1989 et 2007, seulement 2% des mesures d’ARN VIH étaient ≥ 1000 copies [1600- 

4600]. L’ADN VIH-1 médian à l’inclusion dans l’observatoire était de 1,77 [1,44-2,07] log 

copies/millions PBMC. L’observatoire fournit des données cliniques et épidémiologiques 

essentielles qui permettront de mieux comprendre les mécanismes de contrôle de l’infection par le 

VIH chez ces patients. 


19. FORTES REPONSES PROLIFERATIVES T 

CD4 AU VIH CHEZ DES PATIENTS TRAITES ET 

CONTROLES VIROLOGIQUEMENT DEPUIS 10 

ANS (ETUDE DECAMUNE) 

Amélie Guihot 1 2 , Guillaume Breton 3 , Roland Tubiana 2 , Bahia Amellal 4 , Anne- 

Geneviève Marcelin 4 , Maria-Emilia Gonçalves 2 , Karim Benhadj 1 , Assia Samri 1 , 

Dominique Costagliola 5 , Christine Katlama 2 , Brigitte Autran 1 , Guislaine Carcelain 1 , 

le groupe d’étude ALT-ANRS CO 15 et le groupe d’étude DECAMUNE. 

Laboratoire d'Immunologie Cellulaire et Tissulaire du Pr. Debré, 

Unité Inserm U543, Bâtiment CERVI, Hôpital Pitié-Salpêtrière, 

47, bd de l'hôpital, 75013, Paris, France 

amelie.guihot@psl.aphp.fr 

Nous avons étudié le statut immunitaire de patients sous ARV contrôlés virologiquement (CV 

(600/mm 3 , CV

20. ACTIVATED NK CELLS INDUCE THE 

MATURATION OF INFECTED DC BY AN HMGB1- 

DEPENDENT MECHANISM. IMPLICATION FOR 

THE ESTABLISHMENT OF HIV-1 RESERVOIRS 

Héla Saidi, Marie-Thérèse Melki, Marie-Lise Gougeon 

Antiviral Immunity, Biotherapy and Vaccine Unit, Institut Pasteur, 25-28 rue du Dr. Roux, 

75015 Paris 

hsaidi@pasteur.fr 

Early stages of viral infections are associated with local recruitment and activation of NK cells and 

DC, an essential subset for both antigen-presentation and activation of naïve CD4 + T cells. NK-DC 

crosstalk is important for DC homeostasis and maturation. In this study, we addressed the 

question of the influence of NK cells on infected DC maturation, and the mechanisms involved. We 

report that HIV-infection of iDC did not induce their maturation, as evaluated by the coexpression 

of CD86 and HLA-DR, while their coculture with aNK cells did. NK-induced maturation of infected 

DC was inhibited by polyclonal antibodies specific for HMGB1 molecule or by glycyrrhizin, 

suggesting an important role of the pro-inflammatory cytokine HMGB1 in this process. 

Interestingly, aNK were also able to polarize the production of IL-12 by DC that in turn induced a T 

helper 1-like immune response when cultured with CD4 + CD45RA + T cells. In contrast, infected 

DCs were no more susceptible to NK-dependent IL-12 polarization, and thus no more able to 

polarize T cell responses. In addition, NK-dependent DC maturation was associated with an 

increased production of HIV-1 by DC. 

Altogether, our results show that aNK cells 1 - induce the maturation of infected DC through an 

HMGB-1 mechanism; 2- induce IL-12 production by DC and Th1 polarization; 3- increase HIV 

production by infected DC. Thus, NK cells would facilitate both HIV-1 persistence in DC and inhibit 

Th1 polarization by DC. 


21. A RAPID HIV-1 NEUTRALIZATION ASSAY 

FOR MEASURING THE ANTIVIRAL CAPACITY 

OF CD8 T CELLS 

So Youn Shin 1 , Pierre Versmisse 1 , Alejandra Urrutia 2 , Olivier Lambotte 2 , Martine 

Sinet 2 , Alain Venet 2 , Gianfranco Pancino 1 and Asier Sáez-Cirión 1 for the Agence 

Nationale de Recherche sur le Sida EP36 HIV Controllers Study Group. 

1 Institut Pasteur, Unité de Régulation des Infections Rétrovirales, 75725 Paris, France; 2 

INSERM, Unité 802, Faculté de Médecine Paris XI, 94276 Le Kremlin-Bicêtre, France; 3 

Hôpital Bicêtre, Service de Médecine Interne et Maladies Infectieuses, 94276 Le Kremlin- 

Bicêtre, France. 

syshin@pasteur.fr 

Current methods used to asse HIV specific CD8 T cell responses (e.g. measuring cytokines 

production) might not accurately measure the function of these cells, and their convenience to 

evaluate vaccine-elicited cellular immune responses has been challenged. We have shown that 

capacity of ex vivo CD8 T cells to suppress HIV-1 infection, which is the ultimate function of 

cytotoxic CD8 T cells, correlates with spontaneous control of viremia in HIV controllers (HIC). 

In this study we settup a rapid and convenient virus “neutralization” assay which quantitatively 

measures the capacity of CD8 T cell to suppress HIV infection in autologous CD4 T cells. CD4 and 

CD8 T cells were purified from freshly isolated PBMCs from HIV viremic individuals, HICs and 

normal donors. CD4 T cells were activated for 3 days with phytohemagglutinin, challenged with 

HIV-1 BaL and mixed with non-stimulated autologous CD8 T cells at different ratios. HIV-1 

replication was monitored at 72h post infection by intracellular staining of 5x10 4 cells for Gag 

antigens. 

Using this technique we observed that ex vivo CD8 T cells from HIC have a higher capacity to 

suppress HIV infection than those from viremic individuals, confirming our previous results 

obtained with p24 ELISA monitoring during 14 days. This capacity is absent in normal donors. 

Importantly, in HICs the antiviral capacity of CD8 T cells correlates with IFN-γ production upon 

peptide stimulation (R=0.857, p=0.002). 

The antiviral capacity of circulating CD8 T cells can thus be measured in 72 hours using a small 

number of cells. This assay could be used as a surrogate marker in evaluating efficacy of HIV 

specific responses in vaccine trials. 


Marc P Girard 

22. VACCINS PREVENTIFS VIH/SIDA : VERS 

DE NOUVELLES APPROCHES VACCINALES ? 

Université Paris 7-Denis Diderot, Lyon 

marc.girard36@wanadoo.fr 

Le développement d’un vaccin contre le VIH/SIDA se heurte à des difficultés considérables qui 

sont bien connues: hypervariabilité génétique du virus et génération de mutants d’échappement 

aux CTL ou aux anticorps neutralisants, intégration du génome viral sous forme de provirus 

potentiellement latent à l’abri du système immunitaire, absence totale d’éventuels corrélats de 

protection, incapacité où nous sommes aujourd’hui encore d’induire par la vaccination des 

anticorps neutralisants de large spectre d’activité (« cross-clade ») qui soient actifs contre les 

isolats sauvages du virus, etc. L’arrêt prématuré de l’étude de Phase IIb du vaccin Merck, basé 

sur un vecteur adenovirus 5 (Ad5-HIV) qui devait induire la production de lymphocytes T CD8 + 

capables de contrôler les charges virales chez les vaccinés qui s’infecteraient, fait suite à l’échec 

des Phases III du vaccin sous-unité à base de gp120 qui devait induire des anticorps neutralisants 

circulants chez les vaccinés. Ces deux échecs ne signifient pas que les approches ainsi 

développées sont des impasses, mais ils en illustrent les difficultés et les limites. Ils impliquent 

aussi que les tests immunologiques utilisés pour mesurer l’immunogénicité des candidats vaccins 

utilisés dans ces études étaient insuffisants, voire inadaptés, notamment car ils ne permettaient 

pas de mesurer la fonctionnalité des réponses immunitaires induites par le vaccin. Les mêmes 

vaccins se sont d’ailleurs avérés dépourvus d’efficacité dans le modèle animal SIV /macaque. 

Devant l’insuccès de ces deux premières générations de vaccins VIH, la possibilité de développer 

une troisième génération de vaccin se fait attirante, en mettant l’accent sur l’immunité muqueuse 

et en tentant d’établir une double barrière, humorale (à base d’IgA et IgG) et cellulaire, au niveau 

des muqueuses et sous-muqueuses génitale et intestinale qui représentent les principaux sites 

d’entrée puis de réplication du virus. 


Brigitte Autran 

23. IMMUNISATION THERAPEUTIQUE ANTI- 

VIH : BILAN 

Laboratoire d’Immunologie Cellulaire, UMR INSERM 543, Hôpital Pitié-Salpétrière, 

Université Pierre et Marie Curie-Paris-6 

brigitte.autran@psl.ap-hop-paris.fr 

L’évaluation de stratégies d’immunisation thérapeutique anti-VIH a été proposée afin d’explorer le 

développement de stratégies de relais des antirétroviraux (ARV) dans la gestion à long terme de 

l’infection VIH. Ces stratégies alternatives d’immunothérapie étaient justifiées par la nécessité de 

maintenir un traitement ARV à vie, du fait de l’incapacité des ARV à éliminer le virus. Les succès 

thérapeutiques des ARV, quelle que soit leur classe, sont également limités par leur toxicité à long 

terme et leur coût, ainsi que par leur incapacité à restaurer une forte réponse immune anti-VIH, 

ceci reflétant simplement la baisse de production d’antigènes VIH et non un déficit immunitaire. De 

plus les essais d’interruption thérapeutique se sont révélés inéluctablement suivis de rechutes de 

réplication virale imposant la reprise des traitements, mais ont eu le mérite de montrer que les 

réponses immunes anti-VIH étaient restimulées par la ré-exposition au virus. Ainsi il a été proposé 

de restimuler les défenses immunes anti-VIH avant d’interrompre les ARV, en associant aux ARV 

des préparations vaccinales activant essentiellement l’immunité cellulaire anti-VIH. Ces stratégies 

ont été testées soit en phase aigue soit en phase chronique de l’infection VIH et ont utilisé divers 

candidats vaccins au premier rang desquels viennent les vecteur viraux recombinés pour des 

gènes du VIH, utilisés seuls ou en association avec d’autres candidats vaccins ou des cytokines. 

Plusieurs essais cliniques randomisés, multicentriques ont été conduits en France, avec l’ANRS, 

et dans le monde. Un bilan et une analyse comparative des résultats seront présentés et discutés. 


Sebastian Amigorena 

24. DENDRITIC CELLS CROSS PRESENT 

ANTIGENS AND ACTIVATE T CELLS 

Institut Curie, Inserm U 653, Paris 

sebas@curie.fr 

Dendritic cells initiate most adaptative immune responses. They phagocytose antigens in 

peripheral tissues and then migrate to lymph nodes, where they present antigens to CD4+ and 

CD8 T cells. In the last few years, we have analysed the phagocytic pathway of dendritic cells, 

unraveling several unique characteristics of these particular type of phagocytes. We have also 

imaged the interactions of dendritic cells with T cells intravitally, thus describing some of the 

fundamental mechanisms of T cell activation by dendritic cells. We will discuss how the 

understanding dendritic cell function can contribute to the design of efficient vaccination strategies 

in humans. 


Christiane Moog 

25. PLACE DES ANTICORPS DANS LES 

STRATEGIES VACCINALES 

U575 INSERM/ULP, Institut de Virologie, 3 rue koeberlé 67 000 Strasbourg 

c.moog@viro-ulp.u-strasbg.fr 

Il est maintenant admis que les anticorps neutralisants, anticorps susceptibles à eux seuls 

d’inhiber le pouvoir infectieux du virus, constituent l’un des composants de la réponse immunitaire 

à induire pour espérer obtenir un vaccin efficace contre le VIH. En effet, de nombreuses études 

ont démontré que le transfert d’anticorps neutralisants permet une protection dans un modèle 

d’infection expérimentale de primates non humains. De plus, les récents résultats de l’essai STEP 

Merck chez l’homme démontrant l’inefficacité d’un vaccin basé uniquement sur l’induction d’une 

réponse cellulaire avec un possible effet facilitant, redirigent les efforts de vaccination vers la 

recherche de protocoles vaccinaux permettant aussi l’induction d’une réponse immunitaire 

humorale, en particulier d’anticorps neutralisants. L’induction d’anticorps neutralisants s’avère 

toutefois être une tache très ardue : aucun immunogène n’a permis, pour l’instant, d’induire des 

anticorps neutralisant un large spectre d’isolats primaires. L’essai Vaxgen de phase III basé sur 

l’inoculation de gp120 a été un échec. De plus, malgré de nombreux efforts, nous ne disposons 

que de cinq anticorps monoclonaux (IgG1b12, 2F5, 4E10, 447-D, 2G12) neutralisant un large 

spectre d’isolats primaires. Ainsi les anticorps neutralisants sont rares et difficiles à induire. 

Etant donné que la transmission hétérosexuelle du VIH par les muqueuses est devenue le mode majeur de 

contamination (environ 80% des infections), de nombreuses études sont focalisées sur la détermination du 

mécanisme d’entrée du virus dans les différentes muqueuses. Ces études proposent que les cellules 

dendritiques seraient vraisemblablement les premières cellules cibles du virus dans les muqueuses. Il est 

donc important de pouvoir prévenir l’infection de ces cellules. 

L’analyse de l’activité neutralisante d’anticorps anti-VIH a révélé plus fréquemment une activité inhibitrice 

avec des titres plus élevés lorsque les cellules dendritiques et les macrophages sont les cibles du virus et 

non les lymphocytes. L’étude du mécanisme de neutralisation nous a permis de démontrer que cette 

augmentation de l’activité inhibitrice implique la participation des récepteurs FcγRI et FcγRII exprimés à la 

membrane des macrophages et des cellules dendritiques immatures respectivement. Ce mécanisme 

d’inhibition, distinct de la neutralisation du pouvoir infectieux du virus via la partie Fab des immunoglobulines 

G (IgG), fait intervenir la partie Fc des IgG et les récepteurs Fcγ présents à la membrane cellulaire. De plus, 

certains anticorps non neutralisants, qui ne sont pas capables d’inhiber le VIH dan les lymphocytes, 

inhibent efficacement l’infection des macrophages et des cellules dendritiques par le mécanisme d’inhibition 

Fc dépendant; de ce fait, ces anticorps ont été nommés « anticorps non-neutralisants inhibiteurs ». 

L’équipe de D. Burton (SCRIPPS Institute, La Jolla) a récemment montré que les récepteurs Fcγ participent 

à la protection conférée par l’anticorps neutralisant b12 dans le modèle de macaque infecté 

expérimentalement par voie vaginale. En effet, à l’inverse des résultats obtenus avec l’anticorps sauvage, la 

protection est diminuée après transfert d’un anticorps muté qui ne permet pas la fixation aux récepteurs Fcγ. 

L’étude de l’activité d’anticorps neutralisants doit donc être élargie à d’autres anticorps, anticorps 

qui n’ont pas forcement une activité neutralisante, mais peuvent inhiber l’infection par d’autres 

mécanismes ou favoriser la clearance du VIH. En plus des récepteurs Fc, d’autres mécanismes 

pourraient participer à l’inhibition du VIH comme le complément, l’agrégation ou l’ADCC (antibody 

dependent cellular cytotoxicity). 

Une meilleure connaissance de ces nouveaux mécanismes d’inhibition devrait nous permettre de 

développer de nouveaux immunogènes capables d’induire, par vaccination, des anticorps 

protecteurs. 


Yves Lévy 

26. PROGRAMME VACCINAL DE L’ANRS 

Hôpital Henri Mondor 04010 Créteil Cedex 

yves.levy@hmn.aphp.fr 

L’ANRS est engagée depuis près de 15 ans dans la recherche vaccinale. L’Agence est à la fois 

financeur de recherches fondamentales sur le vaccin, développeur d’une stratégie vaccinale de 

« Prime-Boost » d’une immunité à médiation cellulaire et promoteur d’études de différents 

candidats vaccins dans le cadre d’essais cliniques de vaccins préventifs et thérapeutiques. 

Un nouvel agenda scientifique s’est mis en place à partir de fin 2006 afin d’intégrer les avancées 

dans le domaine des connaissances fondamentales de l’immunologie, l’évolution des concepts et 

les données les plus récentes obtenues avec différents candidats vaccins. La stratégie est : i) de 

mobiliser les efforts autour de la recherche vaccinale au sein d’une structure administrative 

unique à l’ANRS ; ii) de renouveler le partenariat entre l’ANRS et des chercheurs immunologistes, 

virologistes, biologistes cellulaires, spécialistes de modèles primates ; iii) de diversifier la 

stratégie vaccinale en termes de candidats vaccins à associer aux lipopeptides ou de modes de 

présentation des épitopes du VIH contenus dans ces vaccins ; iv) d’établir un nouveau partenariat 

avec les sites cliniques ; v) faire évoluer la technologie des tests immunologiques utilisés dans les 

essais vaccinaux. L’ensemble de cette recherche s’intègre dans un partenariat international au 

niveau académique, industriel ou institutionnel comme la Global HIV Vaccine Enterprise. 

L’administration répétée des vecteurs recombinants se heurte à leur immunogénicité propre ce qui 

renforce l’intérêt de développer une stratégie fondée sur l’utilisation des épitopes peptidiques du 

VIH. Ces épitopes, jusqu’à présent adjuvantés par le couplage lipidique (lipopeptide), sont utilisés 

en rappel d’une administration de vaccins ADN ou de vecteurs recombinants (Pox Virus). Plus 

récemment, en partenariat avec le Baylor Institute/INSERM (Dallas), l’ANRS a mis en place une 

nouvelle approche originale reposant sur le ciblage des épitopes du VIH sur les Cellules 

Dendritiques (CD) à l’aide d’une série d’anticorps monoclonaux humains (AcmHu) spécifiques de 

molécules de surface des CD. En partenariat avec Transgène, l’ANRS développe un vaccin MVA 

(Gag/Pol/Nef (B)) avec pour objectif l’évaluation, dès 2008, d’une stratégie associant ce vecteur et 

le vaccin lipopeptide actuellement testé en phase II (Essai ANRS Vac 18). D’autre part, avec le 

consortium Européen Eurovacc et sous promotion ANRS, un essai de phase II (EV03/ANRS 

VAC20) testant différentes stratégies de « Prime » basées sur un vaccin ADN (clade C) et un 

« boost » NYVAC (C) est en cours d’évaluation dans les sites cliniques vaccinaux de l’ANRS, en 

Angleterre, Allemagne et en Suisse. Enfin, un partenariat avec la firme FitBio va permettre 

l’évaluation d’une combinaison d’un vaccin ADN Multiclade (A/B/C) et du vaccin lipopeptide dans 

un essai prophylactique et thérapeutique. 

Le programme clinique de vaccination préventive repose sur le réseau des volontaires de l’ANRS. 

En 2008, sera mis en place la cohorte post- vaccinale COHVAC. Cette étude de suivi à long 

terme sera proposée à tous les volontaires qui ont participé à un essai vaccinal de l’ANRS depuis 

1992 afin d’évaluer la tolérance à long terme de l’immunisation anti-VIH de volontaires sains. 

Après les résultats des essais de vaccination thérapeutique (ANRS 093 et 095), l’ANRS poursuit 

cette stratégie par plusieurs essais utilisant les vecteurs développés par l’ANRS seule ou en 

partenariat. Par ailleurs, un essai d’immunisation par des CD autologues générées in vitro et 

chargées des lipopeptides, chez des patients infectés par le VIH sous traitement antiviral, 

débutera fin 2008 à Dallas. 

Sur le plan fondamental et pré clinique, les objectifs du programme sont de mieux comprendre 

l’immunogénicité des lipopeptides seuls ou associés à des vecteurs recombinants in vitro en 


intégrant les données les plus récentes sur la synapse immunologique entre les CD et les 

lymphocytes T spécifiques. L’identification de nouveaux corrélats immunologiques innés 

d'immunité protectrice à pour objectif une meilleure compréhension des mécanismes d’induction 

d’une réponse T polarisée, notamment avec les vaccins recombinants. Les modèles primates sont 

utilisés pour tester la qualité de la réponse immune induite par les lipopeptides et les peptides du 

VIH ciblés par anticorps sur les CD, utilisés seuls ou associés aux vaccins recombinants 

développés par l’ANRS. 

Fort des résultats acquis ces dernières années, le nouveau projet de l’ANRS répond à la nécessité 

d’adapter la recherche vaccinale, fondée sur l’utilisation d'épitopes du VIH, aux nouveaux défis. 

L’enjeu est de passer d’approches empiriques à la formulation de questions reposant sur 

l’amélioration des connaissances acquises dans les différents domaines impliqués dans la mise au 

point d’un vaccin. Cet agenda repose sur une nouvelle structuration et coordination de la 

recherche vaccinale, l’extension de collaborations avec des partenaires scientifiques 

académiques, industriels ou institutions Européennes et internationales. Cette nouvelle étape 

devrait permettre de définir les meilleures associations vaccinales en terme de tolérance et 

d’immunogénicité qui seront évaluées dans des essais de phase IIb. Ces essais auront pour but 

de démontrer la preuve du concept d’une vaccination fondée sur une approche épitopique dans la 

réduction du risque d’infection et/ou le contrôle de la réplication virale après infection. Enfin, ces 

essais de phase IIb devraient impliquer les centres ANRS présents en Afrique (Cameroun, Burkina 

Faso) ou en Amérique du Sud (Brésil). En tant que promoteur, il sera important d’initier en amont 

une réflexion globale sur des questions d’éthique et sur le bénéfice/risque des essais vaccinaux 

dans les sites ANRS des pays en développement. L’agenda de l’ANRS prévoit la mise en place au 

plus tôt d’un partenariat avec ces centres. 


27. MHC-II PRESENTATION OF HIV ANTIGENS 

BY INFECTED APC : INVOLVEMENT OF 

AUTOPHAGY 

A. Moris 1 , M. Guerbois 2 , F. Guivel-Benhassine 1 , C. Trouillet 1 , F. Tangy 2 and O. 

Schwartz 1 . 

1 Unité Virus et Immunité, 2 Génomique virale et Vaccination, Institut Pasteur, Paris, 

moris@pasteur.fr 

Antigen presenting cells (APC) such as DC, macrophages can be productively infected by HIV and 

present viral antigens by MHC molecules. HIV-specific (HS) CD4+ lymphocytes are preferentially 

infected in HIV-positive individuals. We have previously shown a direct link between antigenspecific 

T cell activation and HIV transfer from DC to HS CD4+ cells. We are currently dissecting 

HIV antigen presentation by APC. MHC class II molecules are generally loaded with exogenous 

antigens derived from incoming virions. We asked whether neosynthesized viral proteins represent 

a source of endogenous antigens for MHC-II molecules and activate HS CD4+ T cells. 

We first used a variety of cell types, including B cell lines, HLA-DR+CD4+ HeLa cells, and primary 

DC, to determine whether MHC-II presentation occurs after processing of exogenous or 

endogenous viral antigens. HeLa and B cells loaded with replication-defective HIV poorly stimulate 

HS CD4+ T, but efficiently presented HIV antigens after productive infection. In contrast HIVpulsed 

DC activate HS CD4+ T cells through the exogenous pathway. To determine further 

whether endogenous viral antigens are presented by MHC-II molecules in DC, we infected these 

cells with recombinant measles virus vectors (MV) expressing HIV-1 Gag. MV-infected DC 

expressed Gag and induced a potent activation of HS CD4+ T cells. Additionnal, experiments with 

infectious and defective HIV indicated that DC are efficiently presenting epitopes derived from 

neosynthesized endogenous antigens 

Autophagic processes, including macro-autophagy and chaperone-mediated autophagy (CMA) 

contribute to the generation of MHC-II-restricted peptides. Using inhibitors and markers of 

autophagosome formation, we observed that macro-autophagy is not involved in the processing of 

Gag epitopes. In contrast, shRNA-mediated knock-down of Lamp2a, a major component of CMA, 

reduced the capacity of HIV-infected cells to activate Gag-specific CD4+ T cells. We are currently 

examining whether and how Gag proteins are trafficking towards CMA compartments. 

In sum, we show that newly-synthesized endogenous HIV proteins are a major source of MHC-IIrestricted 

antigens in APC, through a process involving in part chaperone-mediated autophagy. 


28. A LENTIVIRAL VECTOR PRIME-BOOST 

VACCINATION CONFERS STRONG 

PROTECTION AGAINST MASSIVE SIVMAC251 

CHALLENGE IN MACAQUES 

Anne-Sophie Beignon * , Karine Courbeyrette § , Christelle Liard *ß , Frédéric Coutant * , 

Sandie Munier * , Julie Rivière # , Roger Legrand ‡ , Philippe Souque * and Pierre 

Charneau *§ 

* CNRS URA 3015, G5 Virologie Moléculaire et Vectorologie, Institut Pasteur, Paris, 

France § TheraVectys, Institut Pasteur – BioTop, Paris, France ‡ Service d'immuno-virologie 

/ UMR E1, Paris XI, Commissariat à l'Energie Atomique, DSV/iMETI, Fontenay-aux- 

Roses, France # INSERM U768, Université René Descartes-Paris 5, Hôpital Necker- 

Enfants Malades, Paris, France ß Present address : INSERM U543, Paris, France 

asb@pasteur.fr 

The field of AIDS vaccination has a pressing need for more potent vaccination vectors capable of 

eliciting strong, diversified and long-lasting cellular immune responses against HIV. Lentiviral 

vectors have a proven efficiency not only as gene delivery vehicles for gene therapy applications 

but also as vaccination tools. This is likely due to their ability to transduce non-dividing cells, 

including dendritic cells, enabling sustained endogenous antigen presentation and thus the 

induction of high proportions of specific cytotoxic T cells and long-lasting memory T cells. 

We show here that a prime-boost vaccination strategy using lentiviral vectors pseudotyped with a 

glycoprotein G from two non-cross-reactive VSV serotypes elicited robust and broad cellular 

immune responses against the vector-encoded antigen, SIV GAG, in cynomolgus macaques. 

Vaccination conferred protection against a massive intra-rectal challenge (500 AID50) with 

SIVmac251 as evidenced both by the reduction of viremia at the peak of primo-infection (a mean 

of 2 log10 fold reduction) and the full preservation of the central memory CD4 + T cells during the 

acute phase. Post-acute viremia was lower in vaccinees compared to naive animals and mockvaccinees, 

particularly when compared to unvaccinated progressor animals. Immune correlates of 

protection were found between the reduction of viremia at the peak of primo-infection and both the 

magnitude of the vaccine-induced GAG-specific immunity and the maintenance of the central 

memory CD4 + T cells compartment during the acute phase of infection. 

A simple and non-optimized SIV GAG antigen was chosen in this study to underline the strong 

potential of the lentiviral vector system for vaccination. Given that a stronger protection can be 

anticipated from a modern HIV-1 antigen design, gene transfer vectors derived from HIV-1 appear 

as promising candidates for vaccination against HIV-1 infection itself. 


29. UNE NOUVELLE STRATEGIE VACCINALE 

ANTI-HIV1 : DE LA THEORIE À LA PREUVE DE 

CONCEPT CHEZ LE MACAQUE 

Vincent Vieillard, Roger Le Grand, Dominique Costagliola, Patrice Debré 

INSERM U543, Laboratoire d’Immunologie Cellulaire et Tissulaire, Hôpital Pitié- 

Salpêtrière, Paris, France 

vincent.vieillard@chups.jussieu.fr 

Contrairement aux diverses stratégies d’immunothérapie qui visent à prévenir ou diminuer 

l’infection HIV, nous nous sommes focalisés sur une nouvelle stratégie vaccinale pour prévenir la 

pathogénèse qu’elle induit. Cette approche découle de différents résultats : 

- Ex vivo, nous avons montré que NKp44L, le ligand de NKp44, récepteur activateur NK s’exprime 

exclusivement sur les cellules T CD4. Son expression est corrélée au taux de CD4 et de la charge 

virale. Un motif hautement conservé et specifique de la gp41 du HIV1, appelé 3S, induit 

spécifiquement l’expression de NKp44L. La présence d’anticorps anti-3S est détectable chez les 

patients infectés aux stades initiaux de l’infection et leur diminution ou absence est un élément 

prédictif de la chute du taux des CD4. 

- In vivo, le rôle protecteur des anticorps anti-3S sur la déplétion CD4 a été confirmé dans un 

modèle de macaques cynomolgus infectés par le SHIV162P3. Les animaux ont été immunisés par 

le peptide 3S couplé à la KLH ou par le KLH seul, infectés par le SHIV puis suivis pendant 200 

jours. Nos résultats montrent que la forte production d’anticorps anti-3S a) n’a pas d’effet sur la 

charge virale; b) inhibe l’expression du NKp44L sur les CD4 ainsi que l’apoptose de ces cellules ; 

c) prévient la déplétion lymphocytaire : le taux et le pourcentage des CD4 sont similaires à la 

valeur basale chez les animaux vaccinés contre 3S, tandis qu’ils diminuent significativement chez 

les animaux contrôles. 

L’ensemble de ces résultats suggère que l’immunisation par le motif 3S représente une nouvelle 

approche vaccinale dirigée, non contre le HIV, mais contre la pathogénèse qu’il induit, validant un 

concept appliqué dans d’autres modèles, telles les vaccinations par des anatoxines. 


Présentations 

affichées 


Histoire naturelle 

Thérapeutique 


1. TENOTHIOVIR ET ADETHIOVIR: NOUVEAUX 

ANALOGUES PHOSPHONATES ACYCLIQUES 

ACTIFS CONTRE LE VIH ET LE VHB 

Karine Alvarez, Karine Barral , Antoine Frangeul , Johan Neyts , Jan Balzarini , Jeanlouis 

Romette et Bruno Canard 

Laboratoire AFMB : Architecture et Fonction des Macromolécules Biologiques, UMR 6098 

Le Tenofovir sous forme de prodrogue (VIREAD®, Gilead) est donné en monothérapie contre le 

VIH-1 depuis 2001. C' est un médicament majeur dans la lutte anti-VIH. Ce composé est un 

analogue de nucléotide de type phosphonate acyclique. Il a révolutionné le traitement contre le 

VIH-1 et a permis de véritablement améliorer les prises (fréquence, dosage) du médicament. 

Toutefois, comme pour tous les autres nucléosides utilisés en thérapie, les virus (en particulier, 

ceux déjà résistants à l'AZT) répondent mal au traitement, ou bien deviennent résistants à ce 

composé (mutation K65R). Notre groupe s’interesse de très près à ces problèmes de résistance. 

Leur compréhension est fondamentale pour nous guider vers la conception de nouveaux 

médicaments plus efficaces. 

Nous avons récemment découvert des analogues thiophosphonates dérivés de l’Adéfovir (PMEA) 

et Ténofovir (PMPA), actifs contre le VIH-1, VIH-2 et le VHB en culture de cellules infectées. Ces 

composés, baptisés Adethiovir et Tenothiovir, ont été synthétisés selon une méthode originale. 

Nous avons synthétisé les formes triphosphates correspondantes et vérifié qu’ils sont de bons 

substrats et inhibiteurs de la RT du VIH. Ils sont terminateurs de chaine et contournent la 

résistance de plusieurs mutants dintérêt, faisant de ces molécules des candidats médicaments 

particulièrement prometteurs [1]. 

Les recherches en cours, les résultats et les perspectives seront présentées et discutées. 


2. EVOLUTION VIRO-IMMUNOLOIQUE APRES 

INITIATION D’UNE PREMIERE COMBINAISON 

DE TRAITEMENTS ANTIRETROVIRAUX 

CONTENANT DU LOPINAVIR-RITONAVIR CHEZ 

DES PATIENTS INFECTES PAR LE VIH-2. 

COHORTE ANRS CO5 VIH-2, 2002-2007 

A Bénard 1 , F Damond 2 , P Campa 3 , A Taieb 1 , F Simon 4 , D Descamps 2 , B Autran 5 , F 

Brun-Vézinet 2 , G Chêne 1 , S Matheron 6 and the ANRS CO5 HIV-2 Cohort. 

1 

-INSERM, U897, Bordeaux, F-33076 France; Université Victor Segalen Bordeaux 2, ISPED, 

Bordeaux, F-33076 France; 

2 

-APHP, Hôpital Bichat-Claude Bernard, Laboratoire de virologie, Paris, F-75018 France; 

3 

-APHP, Hôpital Saint Antoine, Service de Maladies Infectieuses et Tropicales, Paris, F-75012 

France; 

4 

-APHP, Hôpital Saint Louis, Laboratoire de Virologie, Paris, F-75010 France; 

5 

-APHP, Hôpital Pitié-Salpêtrière, Laboratoire d'Immunologie Cellulaire, Paris, F-75013 France; 

6 

-APHP, Hôpital Bichat-Claude Bernard, Service de Maladies Infectieuses et Tropicales, Paris, F- 

75018 France. 

Objectif : 

Estimer la réponse immuno-virologique après l’initiation d’une combinaison de traitements 

antirétroviraux (cART) contenant du lopinavir-ritonavir (LPV/r) chez des patients naïfs infectés par 

le VIH-2. 

Méthodes : 

Les patients naïfs de la cohorte ANRS CO5 VIH-2 ayant débuté une première cART contenant du 

LPV/r ont été inclus dans l’étude. Le succès thérapeutique était défini comme un delta ≥+50 

lymphocytes TCD4 entre le début du traitement (S0) et la 24ème semaine (S24), associée a une 

charge virale (CV) indétectable à S24. Un modèle linéaire généralisé a permis d’estimer les pentes 

d’évolution des CD4. 

Résultats : 

Vingt neuf patients ont été inclus dans l’analyse. A S0, la médiane de CD4 était de 142/mm3 

(Intervalle Inter-Quartile (IIQ) : 59-259) et la CV médiane était de 2189 copies/ml (IIQ : 1024-7122) 

chez les 16 patients (69%) ayant une CV détectable. 

A S24, 17 patients étaient en succès thérapeutique (59% ; Intervalle de Confiance à 95% 

(IC) :3976). Le delta médian de CD4 était de +71/mm3 (IIQ : 12-112) à S24, + 142/mm3 (IIQ : 75- 

173) à S48 et +132/mm3 (IIQ : 110-273) à S96. 

La pente d’évolution des CD4 était estimée à +30/mm3/mois (CI : 7-53) entre S0 et S6 et à 

+8/mm3/mois (CI : 5-11) entre S7 et S96. 

Conclusion : 

Avec un traitement par LPV/r chez des patients naïfs infectés par le VIH-2, nous avons montré 

pour la première fois une élévation importante et prolongée du nombre de CD4, avec une phase 

de redistribution suivie d’une phase de prolifération. 


3. COMPARAISON DE L’EVOLUTION DES CD4 ET 

DE L’ARN VIH-1 CHEZ DES 

ASYMPTOMATIQUES A LONG TERME (ALT) ET 

DES « HIV CONTROLLERS » (HIC) A PARTIR 

DES ETUDES ANRS SEROCO ET DE 

L’OBSERVATOIRE NATIONAL DES « HIV 

CONTROLLERS » 

Boufassa F 1 , Madec Y 2 , Delfraissy JF 3 , Meyer L 1 , Lambotte O 3 pour le groupe 

d’étude ANRS EP36. 

1 INSERM U 822, Service d’épidémiologie, Hôpital Bicêtre, Paris Sud 11, Le Kremlin- 

Bicêtre, 2 Unité d’Epidémiologie des maladies Emergentes, Institut Pasteur, Paris, France, 

3 Service de Médecine interne, Hôpital Bicêtre, Le Kremlin-Bicêtre, France 

Nous avons comparé, dans cette étude, les évolutions des CD4 et de l’ARN VIH-1 plasmatique au 

cours des 8 premières années suivant le diagnostic d’infection entre des patients ALT et HIC 

suivis dans la cohorte ANRS SEROCO ou l’Observatoire ANRS des « HIV Controllers ». Les ALT 

sont des patients infectés par le VIH-1, non traités, ayant conservé des CD4 ≥500/mm 3 durant au 

moins 8 ans après le diagnostic. Les HIC sont des patients infectés par le VIH-1 depuis plus de 10 

ans, non traités, et dont plus de 90% des mesures d’ARN VIH plasmatiques sont

4. ETUDE DES FACTEURS IMMUNOLOGIQUES ET 

VIROLOGIQUES ASSOCIES A UN DIAGNOSTIC 

DE CANCER CHEZ LES PATIENTS INFECTES 

PAR LE VIRUS DE L’IMMUNODEFICIENCE 

HUMAINE 

M Bruyand, R Thiébaut , S Lawson-Ayayi, P Joly, A.J Sasco, P Mercié , JL Pellegrin, 

M. Decoin, D Neau, F Dabis, P Morlat , G Chêne et F Bonnet pour le Groupe 

d’Epidémiologie Clinique du SIDA en Aquitaine (GECSA). 

INSERM U 897 « épidémiologie et biostatistiques » 33076 Bordeaux 

Contexte : L’infection à VIH est associée à un risque accru de cancer, classant sida ou non. 

L’explication est probablement multifactorielle, cependant un rôle propre à l’immunodépression ou 

au virus est évoqué. Nous avons recherché une association entre un premier diagnostic de cancer 

et les caractéristiques immuno-virologiques des patients infectés par le VIH. 

Méthodes : Les patients de la cohorte ANRS CO3 Aquitaine ayant plus de trois mois de suivi 

pendant la période d’étude (1998-2006) ont été inclus. Des modèles de Cox à entrée retardée et 

prenant en compte les variables dépendantes du temps ont été employés. 

Résultats : Une incidence accrue des cancers classant sida (109 cas présentés par les 4194 

patients inclus) était indépendamment associée à chaque année d’exposition à : i) une charge 

virale (CV)>500 copies/ml (RR=1,16; 95% CI [1,01-1,32]) et ii) un taux de lymphocytes 

CD4

5. EVALUATIONS VIROLOGIQUE ET 

GENOTYPIQUE DES PATIENTS SOUS 

RALTEGRAVIR, INFECTES PAR UN VIRUS VIH 

MULTI-RESISTANT 

F. Caby*, L. Schneider, R.M Andrade, I. Malet, C. Soulie, G. Peytavin, A. Simon, G. 

Breton, A. Canestri, C.Katlama. 

*Sce Maladies Infectieuses et Tropicales, Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris. 

OBJECTIFS : 

Evaluer l’impact virologique du raltégravir(RAL) plus traitement antirétroviral optimisé(TO) chez 

des patients en multi-échecs. 

Décrire l’émergence de mutations de résistance au RAL. 

METHODES : 

Evaluation prospective des patients en échec thérapeutique aux 3 classes d’antirétroviraux, ayant 

débuté RAL entre le 28/11/06 et le 30/09/07. 

Données recueillies: CD4-CV à J0-M1-3-6-9-12, génotype de résistance du VIH avant J0 puis en 

cas d’échec virologique. 

Définition du succès virologique: CVVIH40cp/mL à M3, 2 groupes sont distingués : 

Groupe1=Réplication virale persistante 

Groupe2=Rebond virologique 

Leurs profils évolutifs virologiques après M3 sont représentés dans le tableau suivant: 

Groupe1 Groupe2 

40400cp/mL(4/5). 

CONCLUSION : 

-Taux élevé de succès virologiques chez ces patients en multi-échec(67%). 

-Faible taux d’émergence de mutations de résistance au RAL, observées chez les patients avec 

CV>400cp/mL. 

-L'étude de facteurs prédictifs d’échec virologque incluant concentrations plasmatiques de RAL et 

profils génotypiques à J0 est en cours. 


6. EFFICACITE DU RALTEGRAVIR ET DE 

L’ETRAVIRINE CHEZ DES PATIENTS AVEC UN 

VIRUS MULTIRESISTANT, EN ECHEC 

VIROLOGIQUE SOUS DARUNAVIR 

Canestri A., Blanc C., Wirden M., Ktorza N., Peytavin G., Ait-Mohand H. Katlama C. 

Sce de Maladies Infectieuses et Tropicales de la Pitié-Salpétrière, INSERM U720. 

Objectif : Evaluer le raltégravir (RAL) et l’étravirine (ETV), chez des patients (pts) avec un 

virus multirésistant et une virémie persistante sous darunavir (DRV). 

Méthode : Etude pilote, prospective, ayant inclus des pts exposés aux trois classes 

thérapeutiques, avec une charge virale (CV)>1000 cp/ml sous un traitement comportant du DRV. 

Le critère d’évaluation principal est le pourcentage de pts avec CV

7. CONTROLE DE LA REPLICATION DU VIH 

APRES INTERRUPTION THERAPEUTIQUE CHEZ 

DES PATIENTS TRAITES DES LA PRIMO- 

INFECTION : QUELS PATIENTS ? 

Cécile Goujard 1,2 , Martine Sinet 2 , Christiane Deveau 3 , Christine Rouzioux 4 , Laurent 

Tran 3 , Noureddine Balegroune 3 , Marie-Laure Chaix 4 , Jean-François Delfraissy 1,2 , 

Alain Venet 2 , Laurence Meyer 3 , Cohorte ANRS CO 06-PRIMO. 

INSERM U 802, Faculté de Médecine Paris-Sud 11, et Service de médecine interne, 

Hôpital Bicêtre, AP-HP ; 78 rue du Général Leclerc, 94275 LE KREMLIN BICETRE 

CEDEX 

L’intérêt d’un traitement transitoire dès la primo-infection est discuté. Quelques patients traités 

précocement gardent une charge virale (CV) faible ou indétectable après interruption 

thérapeutique, mais la fréquence de ce phénomène et sa cinétique sont mal connues. 

Nous avons étudié dans la cohorte prospective ANRS PRIMO, parmi les patients traités pendant 

plus de 3 mois, dans les 3 mois suivant la contamination, et ayant interrompu leur traitement plus 

de 12 mois, ceux qui présentaient une CV

8. PROLONGED VALPROIC ACID TREATMENT 

DOES NOT REDUCE THE SIZE OF LATENT HIV 

RESERVOIR: THE ANRS EP39 STUDY 

Nathalie Sagot-Lerolle, Aurelia Lamine, Marie-Laure Chaix, Faroudy Boufassa, Jean- 

Paul Aboulker, Dominique Costagliola, Cécile Goujard , Coralie Pailler, Jean- 

François Delfraissy, Olivier Lambotte. 

Laboratoire Inserm U802, Service de Médecine Interne, CHU Bicêtre 

Objective: To investigate the impact of prolonged valproic acid treatment on the human 

immunodeficiency virus (HIV) reservoir in patients on highly active antiretroviral therapy (HAART). 

Design: In a single-center pilot study, the size of the HIV reservoir was compared in eleven 

patients receiving valproic acid for seizures for more than two years and thirteen matched patients. 

In addition, the outcome of patients receiving valproic acid in the French clinical trials of scheduled 

treatment interruption (STI) was recorded. 

Methods: Total and integrated HIV-1 DNA in, respectively, peripheral blood mononuclear cells 

(PBMCs) and CD4 T cells of the patients were quantified by real-time PCR methods. The 

frequency of CD4 T cells carrying replication-competent virus was estimated by a quantitative 

limiting-dilution assay in which virus growth was detected by RT-PCR in culture supernatants of 

activated CD4 T cells. 

Clinical charts of the patients included in STI trials receiving valproic acid were reviewed. 

Results: Total and integrated HIV DNA were logarithmically more abundant than cells carrying 

replication-competent virus, but there was no significant difference in these three parameters 

between the two groups of matched patients. 

Three patients receiving valproic acid were included in STI trials. The rebound of viral replication 

was similar to that of the other patients of the trials. 

Conclusions: Long-term valproic acid therapy seems to be insufficient to reduce the size of the 

HIV-1 reservoir. 


9. BITHERAPIES D’INHIBITEURS DE LA 

PROTEASE (IP) POUR LE TRAITEMENT INITIAL 

DE L’INFECTION A VIH-1: UNE ETUDE PILOTE 

RANDOMISEE (2IP ANRS 127) 

Landman R, Capitant C, Descamps D, Chazallon C, Peytavin G, Katlama C, Pialoux 

G, Perré P, Bentata M, Yeni P, Aboulker JP, pour le groupe d’étude ANRS 127. 

Hôpital Bichat – Claude-Bernard 

Objectif: Efficacité et tolérance d’associations comportant uniquement 2 IP chez des patients 

naïfs d’ARV. 

Méthode: Essai randomisé, chez des patients ayant un ARN-VIH plasmatique (CV) entre 10000- 

750000 copies/ml et des CD4>200/mm 3 , évaluant: fosamprenavir (700mg x2/j) + atazanavir 

(300mg x1/j) + ritonavir (100mg x2/j) (groupe 1) ou saquinavir (1500mg x1/j) + atazanavir (300mg 

x1/j) + ritonavir (100mg x1/j) (groupe 2). Pour se qualifier d’aussi puissante qu’une trithérapie 

classique, chaque bithérapie devait garantir à S16 un taux de succès virologique (CV50%, toute modification des ART étant analysée comme un échec. 

Résultats: 61 patients avec une CV=4.8 log10 copies/ml et des CD4=271/mm 3 ont été inclus (30 

groupe 1, 31 groupe 2). Le traitement de 8 patients a été modifié avant S16 (4 pour EI, 4 pour 

augmentation du SQV ou non observance ou réduction insuffisante de la CV). A S16, 12/30 

(40.0%) dans le groupe 1 et 13/31 (41.9%) dans le groupe 2 avaient une CV

10. TOXICITE DE LA STAVUDINE SUR LES 

ADIPOCYTES EN CULTURE : BENEFICE 

POTENTIEL D’UNE DIMINUTION DE 

CONCENTRATION 

Chloé Lefevre, Martine Auclair, Jacqueline Capeau, Martine Caron 

INSERM UMRS-893 Faculté de Médecine Saint-Antoine, 27 rue Chaligny 75012 Paris 

Le syndrome lipodystrophique est un effet secondaire majeur de certaines molécules 

antriétrovirales associant une redistribution du tissu adipeux et des troubles métaboliques. La 

stavudine induit des altérations des adipocytes in vitro et une lipoatrophie. Elle n’est plus 

recommandée en Europe et aux USA pour le traitement des patients naifs. Elle reste utilisée pour 

certains patients présentant des résistances multiples et dans les pays à faibles ressources 

économiques en raison de son efficacité sur la charge virale et de son faible coût de fabrication. 

Quelques études récentes ont évalué les bénéfices de la réduction des doses de stavudine dans 

les multithérapies. Elles ont montré qu’une réduction de 25% de la dose de stavudine ne modifie 

pas son efficacité antivirale (Milinkovic A, 2007 ; Pedrol E, Med Clin (Barc) 2007 ; Sanchez-Conde 

M, HIV Clin Trials 2005) mais a peu d’effet bénéfique sur les constantes métaboliques et la 

lipodystrophie. 

L’objectif de ce travail a été d’étudier l’impact de doses décroissantes de stavudine (10-1 µM) sur 

les principales fonctions adipocytaires in vitro. Nous observons que les effets toxiques de la 

stavudine sur le stockage des lipides, les fonctions mitochondriales et le stress oxydant observés 

à 10 µM diminuent progressivement et ne sont plus observés à et en dessous de 4µM. 

Ces premiers résultats obtenus in vitro montrent que la toxicité adipocytaire de la stavudine 

dépend de sa concentration. Une reformulation des doses de stavudine ou de son générique 

pourrait permettre de diminuer l’incidence des effets toxiques du traitement en attendant la mise 

sur le marché de nouvelles molécules à plus faible coût de fabrication pour les pays à faibles 

ressources économiques. 


11. ASSOCIATION BETWEEN CARDIOLIPIN 

ACTIVITY, VIRAL REPLICATION AND 

NEUTRALIZING ANTIBODIES IN SLOW 

PROGRESSORS OF THE HIV INFECTION 

Valérie Martinez 1 , Marie-Claude Diemert 2 , Martine Braibant 3 , Jean-Luc Charuel 2 , 

Francis Barin 3 , Valérie Potard 4 , Dominique Costagliola 4 , Eric Caumes 5 , Jean-Pierre 

Clauvel 6 , Brigitte Autran 1 , Lucile Musset 2 and the ALT study group. 

1 Lab. d'Immunologie Cellulaire et Tissulaire, UMR INSERM 543, Université Pierre et Marie 

Curie-Paris-6, Hôpital Pitié-Salpêtrière, AP-HP, Paris, 2 Lab. d'Immunochimie, Hôpital Pitié- 

Salpêtrière, AP-HP, Paris, 5 Serv. des Maladies Infectieuses et Tropicales, Université 

Pierre et Marie Curie, Hôpital Pitié-Salpêtrière, AP-HP, Paris, 3 Lab. de Virologie, 

Université François-Rabelais, INSERM ERI 19, Tours, 4 INSERM U720, Université Pierre 

et Marie Curie-Paris-6, Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris, 5 Serv. d’Immuno-Hématologie, 

Hôpital Saint-Louis, Paris. 

Background: The question of autoimmune manifestations during HIV infection is currently 

revisited because of the cardiolipin reactivity demonstrated in vitro for two broadly HIV-specific 

neutralizing-antibodies. 

Methods: We evaluated anticardiolipin (aCL), anti-β2GP1, anti-nuclear and other autoantibodies in 

67 HIV+ untreated asymptomatic slow progressors (SP), the correlation between autoantibodies 

and HIV-specific neutralizing antibodies, virologic, immune activation and clinical parameters. A 

group of 50 chronically HIV-infected progressors (P) was evaluated as controls. 

Results: Characteristics of i) SP were: men (78%), median age 37 years, median CD4 count 

672/mm 3 , HIV plasma load (pVL) 6,200 copies/ml and ii) P: men (76%), on HAART (62%), median 

age 43 years, median CD4 count 202/mm 3 and pVL: 2,265 copies/ml. aCL with IgG isotype were 

detectable in 49% and 58% of SP and P patients respectively, with similar levels between both 

groups, while anti-β2GP1 (IgG or IgM) were detected in only 4.5%. Both detection and levels of 

aCL were associated to higher pVL and cell-associated DNA loads (p

12. IMPACT DES ANTIRETROVIRAUX SUR LE 

MODELE MATHEMATIQUE 

Marie-José Mhawej, Claude Moog. 

IRCCYN, UMR CNRS 6597, BP 92101, 44321 NANTES CEDEX 3 

Objectif : 

Identifier l’impact des traitements antirétoviraux sur les paramètres du modèle mathématique de la 

dynamique du VIH. 

Méthode : 

Les données cliniques (taux de lymphocytes CD4+ et charge virale) de 6 patients VIH+ du CHU de 

Nantes ont été analysées. Pour chacun de ces 6 patients, deux séries de données cliniques 

(avant et après traitement) ont permis de calculer 1 deux ensembles de paramètres : le premier 

caractérise le modèle sans traitement et le deuxième caractérise le modèle sous traitement. 

Résultats : 

Le modèle mathématique de base fait intervenir six paramètres : le taux de production de CD4 

sains s, les durées de vie respectives des CD4 sains, infectés et de virus: δ, µ et c, l’infectivité β 

des CD4 sains et le taux de production de virus k. Il s’avère que les effets des RTIs et des PIs ne 

peuvent pas être découplés, contrairement à ce que relate la littérature dans laquelle les 

paramètres k et β sont des paramètres de contrôle. On observe que la thérapie HAART affecte 

principalement le paramètre k alors que β ne décroit que très faiblement sous traitement. Pour les 

six patients étudiés, s, δ, µ et c ne varient pas considérablement avant et après traitement. 

Conclusion : 

Cette étude permet d’identifier le paramètre du modèle le plus sensible au traitement et constitue 

une première étape vers une modélisation « réaliste » de l’entrée du système en vue du contrôle 

de l’infection et de ses simulations. 


13. LA MUTATION M184V PERMET AU VIH DE 

RESISTER A LA 3TC, MAIS PAS D'ECHAPPER A 

LA REPONSE IMMUNE DIRIGEE CONTRE 

L'EPITOPE RT181-189 

Yovana Pacheco 1, Clotilde Allavena 2, Yannick Guilloux 3, Julia Arias 1, Elisabeth 

André-Garnier 1, Virginie Ferré 1, Eric Billaud 2, François Raffi 2, Dorian McIlroy 1. 

1. Immunovirologie et polymorphisme génétique, Université de Nantes 2. Service 

d’infectiologie, CHU Hôtel Dieu Nantes, 3.INSERM 892,CHU Hôtel dieu Nantes. 

Introduction : La mutation M184V de la transcriptase inverse du VIH confère une résistance à la 

3TC. Elle se situe au sein de l'épitope RT181-189 présenté dans le contexte du HLA-A2, 

suggérant que la réponse immune dirigée contre cet épitope pourrait limiter la réplication des virus 

résistants à la 3TC. 

Méthodes : La réponse immune cellulaire a été évaluée par ELISPOT IFNγ chez 19 patients HLA- 

A2+ naïfs de traitement et 13 patients HLA-A2+ en échec virologique sous 3TC. Des peptides 

contenant la séquence sauvage (184M) et la séquence mutée (184V) de l'épitope RT181-189, ont 

été testés systématiquement. 

Résultats : 10/19 des patients naïfs avaient une réponse ELISPOT dirigée contre à la fois l'épitope 

184M et contre l'épitope 184V. Chez les patients 3TC, 1/13 avait une réponse ELISPOT dirigée 

contre l'épitope 184M accompagnée d'une réponse contre l'épitope 184V, et 2/13 avaient une 

réponse ELISPOT spécifiquement dirigée contre l'épitope 184V. Chez 3 patients naïfs, les avidités 

fonctionnelles des réponses ELISPOT dirigées contre les épitopes 184V et 184M étaient 

semblables. L'obtention d'un clone spécifique de l'épitope RT181-189 à partir des PBMC d'un 

patient naïf a permis de confirmer la réactivité croisée de la réponse. 

Conclusions : 10/19 (52%) des patients naïfs avaient développé une réponse immune contre 

l'épitope 184M, montrant une réactivité croisée avec l'épitope 184V. La mutation 184V ne permet 

donc pas au virus d'échapper à la réponse immune contre l'épitope RT181-189. 


14. PREVALENCE DE LA FIBROSE HEPATIQUE 

F3/F4 AU SEIN DE LA COHORTE 

ANRS C013- HEPAVIH 

Poizot-Martin I, Bonnard P., Winnock M., Dequae-Merchadou L., Pialoux G., Salmon 

D. et le Groupe d’études HEPAVIH. 

CISIH-SUD, Pôle Oncologie Spécialités Médicales et Chirurgicales, Hôpital Sainte- 

Marguerite, 13009 Marseille, France 

Objectif : Estimer la prévalence de la fibrose hépatique extensive parmi des patients co-infectés 

VIH/VHC et/ou VHB. 

Méthodes : Etude transversale sur les patients avec un score METAVIR F3 et F4 déterminé par 

Fibrotest® et/ou ponction biopsie hépatique (PBH) et/ou Fibroscan® (>9.5Kpa) 

Résultats : Au 07/01/2008, les données de 528 patients ont été analysées; 290 patients (55%) 

avaient un score METAVIR F3/F4 (230 hommes, age médian: 45 ans, médiane de suivi de 

l’infection par le VIH et le VHC: 17 ans; 5 triple infections avec VHB) ont été identifiés. 281 de ces 

patients ont eu une évaluation du score METAVIR par Fibrotest, 194 par PBH et 200 par 

Fibroscan. 270 patients sont sous traitement antirétroviral depuis en moyenne 8 ans (163 avec 2 

NRTI+1IP, dont 47% avec ATV et 3% avec IDV; 35 avec 2 NRTI+1NNRTI, 24 avec 3NRTI) 192 

patients (66%) ont une charge virale VIH indétectable. La médiane des CD4 est de 397/mm 3 

(médiane du nadir: 118/mm 3 ). 136/252 (54%) ont reçu au moins un traitement anti-VHC (Echec: 

n=102,75%).Le génotype VHC est G1 pour 55,5% des patients, G2 pour 2%, G3 pour 18,6%, G4 

pour 14,5% et G5 pour 2 patients. Parmi les 122 patients avec une cirrhose (42%), 14% ont un 

stade Child-Pugh B et 1% un stade Child-Pugh C. 

Conclusion : La forte prévalence de fibrose extensive au sein de cette cohorte VIH 

majoritairement co-infectée par un VHC-G1 signifie un risque élevé de décompensation et pour 

certains, la nécessité d’une transplantation.Le taux élevé d’échec au traitement souligne le besoin 

urgent de molécules plus efficaces. 


15. APPORT DES MODELES MATHEMATIQUES 

EN RECHERCHE CLINIQUE ET FONDAMENTALE 

SUR LE VIH 

Rodolphe Thiebaut, Robin Callard, Daniel Commenges 

Inserm U897, Université Bordeaux 2, ISPED, 33076 Bordeaux, France 

Il s’agit d’illustrer l’apport des modèles mathématiques pour l’évaluation des traitements ainsi que 

pour la compréhension de la physiopathologie du VIH/SIV à travers plusieurs exemples. Une des 

premières utilisations des modèles mathématiques a été l’évaluation de la demi-vie des cellules 

infectées et du virus en utilisant les données de chute de la charge virale plasmatique suite à 

l’initiation d’un traitements antirétroviral. Ces travaux (Ho & Wei Nature 1995, Perelson Science 

1996) ont permis de mettre en évidence le renouvellement intense à la fois du virus et des 

lymphocytes. D’autres paramètres notamment l’infectivité du virus ont pu être estimé à partir de 

données d’infection à SIV/SHIV (SHIV 89-6P Davenport JAIDS 2006, SIVmac251 Wilson J Virol 

2007). Le même type de modèles dynamiques ont aussi été étudiés en simulation pour tester 

certaines hypothèses physiopathologiques telles que le rôle de l’activation cellulaire dans la 

décroissance des lymphocytes T CD4+ au cours de l’infection (Yates PLOS Medicine 2007). 

Un autre grand domaine d’application est l’évaluation du turnover lymphocytaire à l’aide 

d’expériences spécifiques (BrDU, H², CFSE). Les modèles mathématiques ont supplanté les 

interprétations qualitatives des résultats en permettant une estimation des taux de la prolifération 

et du taux de décès cellulaires. 

Enfin, un domaine d’application prometteur est l’évaluation des nouvelles thérapeutiques 

antirétrovirales (Markowitz JID 2007) ou des immunothérapies. En effet, grâce à l’utilisation 

optimale de l’information disponible (multiples marqueurs mesurés de façon répétée) cette 

approche permet une évaluation plus précoce et plus complète (mécanismes d’action) des 

thérapeutiques. Toutefois, un inconvénient majeur de ce type d’approche est la difficulté 

d’estimation des paramètres qui nécessite des protocoles adaptés. 


16. RÉPONSE VIROLOGIQUE À LA PREMIÈRE 

LIGNE DE TRAITEMENT : COMPARAISON 

ENTRE TRUVADA ET KIVEXA DANS UNE 

COHORTE OBSERVATIONNELLE 

R Thomas, B Trottier, D Longpré, S Vézina, VK Nguyen, N Machouf 

Clinique médicale l’Actuel, Montréal, Québec 

Introduction : L’objectif de cette étude était de comparer la réponse virologique des traitements 

de première ligne avec truvada ou kivexa. 

Méthode : Étude rétrospective sur les patients d’un centre extrahospitalier de Montréal. Tous 

patients avec kivexa ou truvada en 1 ère ligne ont été inclus. À l’aide d’analyses de regression 

logistique, nous avons identifié les facteurs associés au succès virologique à 24 semaines. 

Résultats : 68 patients (KVX=46,TVD=22) ont été inclus. 81% étaient des hommes, moyenne 

d’âge 41,2±9,2 , 75% étaient HSH. Médiane des CD4 pré-traitement était de 240 cells/mm3 

(IQR :180-306) avec une charge virale médiane de 5,05 log et similaire dans les deux groupes. Le 

pourcentage de patients avec cv

17. ETUDE EX-VIVO DES ANOMALIES 

METABOLIQUES INDUITES PAR DES 

ANTI-RÉTROVIRAUX UTILISES EN TRITHERAPIE 

Olivia Touzet, Annick Bourret et Alexandre Philips 

ERI 25 INSERM 

Les traitements antirétroviraux ont permis de diminuer la morbidité et la mortalité liées à l'infection 

par le VIH transformant la pathologie en une maladie chronique. Ces traitements sont néanmoins 

responsables d'effets secondaires sévères. Ils induisent un risque accru de désordres 

métaboliques et hormonaux, incluant une lipodystrophie, une résistance à l'insuline et une 

diminution de la densité osseuse. 

Les effets secondaires résultent de mécanismes cellulaires et moléculaires multifactoriels qui 

ne sont pas clairement définis et dont l'étude peut être réalisée ex vivo en première approche, à 

l'aide de modèles de culture cellulaire. A l'aide de myoblastes primaires humains, nous 

déterminons par quels mécanismes cellulaires les inhibiteurs de protéase (IPs) (Lopinavir, 

Ritonavir, Saquinavir) conduisent à une résistance à l'insuline. Nous analysons et comparons les 

effets de ces IPs sur l'expression et l'activité de protéines connues pour relayer la réponse à 

l'insuline. Nos premiers résultats indiquent que les IPs altèrent les mécanismes de localisation 

membranaire aux "lipid rafts" qui sont des plates-formes de signalisation importantes pour la 

réponse à l'insuline, pour la différenciation et le fonctionnement des cellules musculaires. 

L'identification des défauts cellulaires induits par les IPs revient à comprendre l'origine du 

syndrome métabolique et pourrait aider à orienter le traitement des effets secondaires. La gestion 

thérapeutique du syndrome métabolique est primordiale : la thérapie antirétrovirale étant de plus 

en plus efficace, la durée de vie des patients s'allonge mais la résistance à l'insuline et 

l'ostéoporose vont s'aggraver avec l'âge. 


18. EARLY VIROLOGICAL PARAMETERS AND 

THEIR PREDICTION PERFORMANCE FOR 

INDETECTABILITY OF HIV RNA BY WEEK 26 

Linda Wittkop, Rodolphe Thiebaut, Geneviève Chêne, Gilles Raguin, Laurence 

Morand - Joubert, Daniel Commenges 

Inserm-U897, Bordeaux 2 university, ISPED-Bordeaux Public Health School, 33076 

Bordeaux, France 

Simple parameters such as a HIV RNA below detection limit are used to evaluate drug 

performance. Mathematical models have the advantage to consider dynamics of HIV RNA. The 

derived decay parameters can be simply applied probably serving as a prognostic tool. The 

objective of this study was to compare the performance of early HIV RNA derived parameters for 

the prediction of the virological response (HIV-RNA < 50 copies/mL) at week 26. We used data 

from 37 HIV-1 infected patient’s participating in Puzzle 1-ANRS 104, a randomized, open-label, 

multi-centre clinical trial. HIV RNA was determined at baseline and weeks 2, 4, 6, 14 and 26. HIV 

RNA parameters i) < 50 copies/mL at week 6 ii) > 1 log10 copies/mL reduction between week 6 and 

baseline iii) HIV-RNA difference between week 6 and baseline iv) a decay rate parameter 

determined with a linear mixed model using HIV-RNA measurements at baseline, weeks 2, 4 and 

6 were used. A logistic model was applied to assess the prediction performance. The sensitivities 

(specificities) were 24% (95%), 100% (40%), 76% (65%) and 76% (80%) for < 50 copies/mL, > 1 

log10 copies/mL reduction, HIV RNA difference and the decay parameter, respectively. The areas 

under the receiver operator characteristics curve were 0.593, 0.700, 0.787 and 0.847 for < 50 

copies/mL, > 1 log10 copies/mL reduction, HIV RNA difference and the decay parameter. We 

concluded that the decay parameter from the linear mixed model showed the best performance as 

an early evaluation parameter. 


Pays du Sud 


19. ETUDE PRELIMINAIRE SUR LA 

PREVALENCE DE LA RESISTANCE DU VIH-1 

AUX ANTIRETROVIRAUX DANS LA PARTIE EST 

ET WEST DE LA REPUBLIQUE DEMOCRATIQUE 

DU CONGO 

Steve Ahuka Mundeke, Lay Myint Yoshida, Muyembe Tamfum, Koya Ariyoshi 

Institut National de Recherches Biomédicales, Kinshasa, RDC 

The use of highly active antiretroviral therapy (HAART) has had a dramatic effect on the natural 

history of HIV disease in developed world. M. Selection of drug resistant variants becomes 

inevitable in a setting of continued viral replication. In Democratic Republic of Congo (DRC) where 

the highest diversity of HIV-1 group M variants circulates, HAART program started in big cities in 

2002.However access to antiretroviral therapy remains limited in the majority of province. 

To evaluate and compare the prevalence of antiretroviral drug resistant HIV among blood donors 

in two regions of DRC and to determine and compare the distribution of HIV subtypes among 

blood donors in the two regions of DRC. 

one hundred and eighty-three HIV positive blood samples were collected using FTA card from 

blood donors, recruited at General reference hospitals in South Kivu province and Kinshasa in 

DRC from July to December, 2007. RT and LTR region were amplified and RT region was then 

sequenced by using an automated sequencer (applied Biosystems3730DNA) with Big Dye 

Terminator v1.1 cycle sequencing Kit. Sequencing analysis was done using online sequence 

analysis programs from Stanford University, HIV Drug Resistance Database. For HIV-1 subyping, 

REGA-HIV-1 subtyping tool Version 2.0 and MEGA 3.1 was used, and for drug resistance 

genotype analysis, HIVdb Program: Mutation List Analysis was used. 

HIV-1 RT gene nested PCR were performed to 32 samples from Kinshasa and 34 samples from 

South Kivu. HXB2 (HIV-1 subtype B) DNA was used as a positive control. Positive and negative 

controls were included in all the PCR reactions. A total of 37 samples, 22 from South Kivu and 15 

from Kinshasa showed correct size positive PCR product. Selected negative samples were further 

investigated for the presence of integrated HIV-1 gene by LTR PCR. All tested samples were 

positive indicating the presence of HIV-1 DNA in the samples. A total of 37 amplified HIV-1 RT 

gene PCR products were sequenced. The sequence analysis showed that 34 samples were found 

to be HXB2 strain, indicating contamination and only three samples, one from Kinshasa and two 

from South Kivu sequences were completely different from HXB2. Phylogenetic analysis revealed 

that the sample from Kinshasa, Kin29 was subtype G and two samples from South Kivu, Kiliba1 

and Kiliba29 were subtype A1. No HIV-1 drug resistance mutations were found. 

Although sequence results have been available for only three samples so far, we found no drug 

resistance mutation, suggesting the limited distribution of drug resistant HIV-1 in recently infected 

population. It is interesting to see that the subtype of Kinshasa and South Kivu are different. This 

suggested the possibility that different subtype might be prevailing in the eastern and western part 

of DRC. Further study is warranted. 


20. EFFET DE LA TEMPERATURE DE 

CONSERVATION DU PLASMA SUR LA CHARGE 

VIRALE VIH-1 

Bahia Amellal ; Anne-Geneviève Marcelin ; Christel Brunet ; Almoustapha Maiga ; 

Laurence Kalkias ; Gilles Brucker; Christine Katlama; Vincent Calvez. 

Laboratoire de virologie. Hôpital La pitié salpêtrière. UPMC université Paris 6, EA 2387 

Paris. 

L’accès aux molécules anti-rétrovirales dans les pays en voie de développement, devient de plus 

en plus important. Une connaissance précise de la valeur de la charge virale (CV) plasmatique est 

nécessaire pour décider d’un éventuel changement de traitement. Une alternative pratique pour 

ces pays, est souhaitée. Dans cette étude, nous avons soumis des plasmas à différentes 

températures (4, 22, 30 et 37°C) sur une durée d’une semaine. Il en est ressorti que la 

conservation du plasma jusqu’à 30°C, est possible et n’altère pas la valeur de la charge virale 

plasmatique. En revanche, la température de 37°C s’est avérée délétère avec une perte 

significative en ARN plasmatique et de l’ordre de 0.92 Log10 copies/mL (p=0.005). La corrélation 

entre les valeurs obtenues à partir des plasmas frais et celles obtenues à partir de plasmas 

soumis à 37°C, est faible (Rho=0.84 ; p=0.012). Aussi des valeurs discordantes (∆ CV > 0.5 log 10 

copies/mL) ont été enregistrées dans le cas des plasmas gardés à 37°C et seulement dans ce 

cas-ci. Au vu des résultats obtenus dans cette étude, nous proposons un stockage des plasmas 

recueillis dans la semaine, à une température ne dépassant pas 30°C. Ces prélèvements seront, 

dans ce délai, acheminés au laboratoire central pour la quantification de l’ARN VIH-1 plasmatique. 


21. SURVEY OF HIV-1 DRUG RESISTANCE 

MUTATIONS IN RECENTLY INFECTED, 

ANTIRETROVIRAL NAÏVE PATIENTS FROM SUB 

SAHARAN AFRICA AND SOUTH EAST OF ASIA: 

THE ANRS 12134 STUDY 

Ahidjo Ayouba, Eric Nerrienet, Truong T.X.Lien, Laurence Vergne, Eitel Mpoudi 

Ngole, Diane Valea, Nicole Ngo-Giang-Huong, Dominique Costagliola, Martine 

Peeters, Marie-Laure Chaix and ANRS 12134 Study group. 

Institut de Recherche pour le Developpement (IRD), UMR 145, Montpellier 

Background: 

Universal access to antiretroviral therapy in developing countries has raised concerns that HIV 

drug resistance could develop and spread quickly in recently infected people. We evaluated the 

frequency of transmitted HIV drug resistance (HIVDR) in Cambodia, Thailand, Vietnam, Burkina 

Faso and Cameroon. 

Methods: 

The target population was adapted to the characteristics of the HIV epidemic in each country. HIV- 

1 genotypic resistance tests were performed on plasma samples and phylogenetic analysis done 

on protease and RT sequences. Resistance associated mutations were interpreted with the 2007 

Stanford HIVdb and ANRS algorithms and the IAS USA list. 

Results: 

As recommended by the generic protocol for HIV-1 drug resistance developed by WHO- 

HIVRESNET, pregnant women aged between 15 and 24 years at first pregnancy were enrolled in 

Cameroon. In Burkina Faso and Thailand, pregnant women were also included but, in addition to 

age and number of pregnancies, CD4 count > 500/mm3 was added as marker for recent infection. 

In Cambodia and Vietnam, individuals attending VCT centers were included based on age and 

CD4 counts. 


22. MEASURE OF VIRAL LOAD BY USING THE 

ABBOTT REALTIME HIV-1 ASSAY ON DRIED 

SPOT SPECIMENS OF BLOOD OR PLASMA 

COLLECTED IN TWO RURAL DISPENSARIES IN 

CAMEROON 

Thomas Bourlet 5, André Dieudonné Mbida 1 , Samuel Sosso 2 , Pierre Flori 3 , Sven 

Schaffer 4 , Renato Pulvirenti 4 , Cheick Cissé 4 , Henia Saoudin 5 , Yves Oyono 1 , Edward 

Ndzi 1 , Giulia Cappelli 2 , Odile Ouwe Missi Oukem 2 , Bruno Pozzetto 5 , Sven Thamm 4 

and Marcel Monny Lobe 2 . 

1 

Institut des Plantes Médicinales, Yaoundé, Dispensaire d’Obout, Nkolmetet, Cameroon 

2 Chantal Biya International Reference Centre, Yaoundé, Cameroun 

3 Laboratory of Parasitology, Saint-Etienne 

4 Abbott Molecular 

5 Laboratory of Virology, Saint-Etienne. 

The aim of this work was to evaluate the use of dried blood spots (DBS) and dried plasma spots 

(DPS) as an alternative to frozen plasma (FP) for the quantification of HIV-1 RNA. The study was 

undertaken in subjects sampled by venous puncture in two rural dispensaries in Cameroon in 

November 2007. Forty-one subjects gave informed consent to participate (mean age 34 years 

[range: 18-59], sex ratio M/F, 0.38), including 10 tested negative and 31 positive for HIV antibodies 

among which 10 were under antiretroviral therapy. Fifty microlitres of whole blood (DBS) or plasma 

(DPS) were deposited onto each of the 5 spots of a Whatman 903 card and dried for 3 hours at 

room temperature. The rest of the plasma was frozen until use. Frozen plasmas were tested at the 

CIRCB in Yaoundé by Real-Time HIV Abbott assay. DBS and DPS were transported by plane and 

tested two weeks later at the Virology Laboratory of CHU of Saint-Etienne by the same technique. 

The correlation coefficient between viral loads obtained from FP and DBS, and from plasmas and 

DPS, was 0.98 and 0.99, respectively. The specificity of the tests performed on DBS and DPS with 

regard to those performed on FP was 100% in both cases. The mean difference between viral 

loads measured on DBS and plasmas was 0.01±0.5 log copies/ml, 81% and 88% of samples 

differing from less than a half log and one log, respectively. This study demonstrates that DBS and 

DPS collected in limited-resource settings are suitable supports for the differed quantification of 

HIV-1 RNA by using the Real-Time HIV Abbott assay. 


Fatoumata Hané 

23. LES ENJEUX DE LA PRISE EN CHARGE 

CROISEE DE LA TUBERCULOSE ET DU VIH AU 

SENEGAL 

UMR 912 (Inserm-Ird-Université de la Méditerranée). Sciences économiques et sociales, 

Systèmes de santé, Sociétés (SE4S) 

ORS, 23 rue Stanislas Torrents 

13006 - Marseille 

Au niveau international, on observe une multiplication des incitations à la mise en place de luttes 

conjointes contre le VIH et la tuberculose, tant sur le plan de la structuration des programmes que 

du point de vue des actions de prévention et des modalités d’accès aux traitements (OMS, 2004 ; 

Stop TB, 2006-a & -b). Si la voie en matière de politique de santé est ainsi tracée, elle est peu 

étudiée dans ses déclinaisons pratiques. Or la structuration conjointe de la lutte contre ces deux 

pathologies ne va pas sans générer de possibles difficultés dès lors qu’elle doit puiser dans des 

histoires et des cultures organisationnelles différentes. Elle est par ailleurs tenue de s’appuyer sur 

des politiques de décentralisation qui ont atteint des niveaux différents selon les pathologies, alors 

que l’ensemble des problèmes liés à l’accès aux dépistages et aux traitements ne sont pas 

résolus. Par ailleurs, chez les professionnels de santé, appréhender conjointement la tuberculose 

et l’infection à VIH suppose l’appropriation de savoirs et de pratiques qui relèvent des spécificités 

de l’une et de l’autre infection, mais aussi naturellement de celles de la co-infection. Enfin, 

rapprocher les prises en charge du VIH et de la tuberculose suppose de penser les conjonctions 

de processus de craintes et de stigmatisation inhérents à chacune des deux maladies. L’objectif 

de cette communication est donc de montrer les enjeux ainsi que les contraintes que pose cette 

prise en charge conjointe TB/VIH au niveau national, à l’échelle des structures de santé et chez 

les patients. 


24. CO-MORBIDITE VIH ET LES CANCERS 

NON-CLASSANT SIDA : CAS DU CENTRE 

HOSPITALIER DE KINSHASA 

Madiata M.E, Mbendi C., Batalansi D 

Centre Hospitalier Nganda Kinshasa Rep. Dem. Du Congo 

Nous avons mené une étude sur 361 malades souffrant de l’infection au VIH au cours de l’année 

2007et avons remarqué que 

- 48 patients sur l’ensemble soit 13,2 % souffraient des cancers dont 11 

soit 3 % de l’ensemble et 22,9 % des patients cancéreux présentaient des cancers non 

classant SIDA( Hepatocarcinome : 4, cancer du larynx : 2, cancer du palais 1, cancer de l’œil :1, 

cancer du pancréas : 2, cancer du sein : 1) 

- Le taux de CD 4 des malades avec les cancers non classant SIDA était significativement plus 

bas que groupe presentant des cancers classant SIDA 

- La réponse aux ARV( Haart) restait moins bonne chez les malades atteints des cancers non 

classant SIDA 

- La réponse à la chimiothérapie était dans l’ensemble identique 

- Le taux de mortalité est resté plus important chez les malades avec les cancers non classant 

SIDA 

Nous sommes arrivés aux conclusions suivantes : 

-Le taux des cancers non classant SIDA tend à augmenter dans notre milieu comparativement aux 

années passées 

-Les cancers non classant SIDA seraient des facteurs de mauvais pronostic sur la réponse au 

traitement et sur la survie des malades infectés par le VIH 

-la réponse immunitaire reste faible chez les patients présentant des cancers en général, plus 

faible encore chez les malades avec cancers non classant SIDA 

Cette étude sera poursuivie pour déterminer, en incluant d’autres paramètres d’évaluation, avec 

quasi certitude le pourquoi de l’augmentation de la prévalence des cancers non classant SIDA 

dans la population de Kinshasa, quels sont facteurs intervenant dans la baisse de taux de CD4 et 

dans la mauvaise réponse aux différents traitements. 


25. EVOLUTION VERS LES CRITERES 

D’ADMINISTRATION DU COTRIMOXAZOLE ET 

DES ANTIRETROVIRAUX CHEZ LES 

PERSONNES INFECTEES PAR LE VIH 

DIAGNOSTIQUEES AVEC DES CD4 SUPERIEURS 

A 500/MM3, COHORTE ANRS 1220 PRIMO-CI 

Albert Minga, Ali Coulibaly, Xavier Anglaret, Thomas Toni, André Inwoley, Roger 

Salamon, Charlotte Lewden 

Programme PAC-CI, Abidjan 

Objectif: Décrire le passage des lymphocytes CD4 500/mm 3 à l’inclusion, dont 65 

hommes (64%). Le délai médian entre la date estimée de séroconvertion et l’inclusion était de 8 

mois (EIQ:5-14), les CD4 médians 673/mm3 IQR (585-784). Pendant 387 personnes-année, 9 

patients étaient décédés et 9 perdus de vue. A 4 ans, la probabilité de maintenir les 

CD4>500/mm 3 était de 25% et >350/mm 3 de 50%. En analyse multi variée, les CD4 initiaux et le 

sexe masculin (risque relatif (RR) 1,9 (95%CI 1.0-3,4) étaient associés au passage des CD4 en 

dessous de 350/mm 3 . 

Conclusion: Quatre ans après l’inclusion des patients dans cette cohorte, 50% arrivent à un stade 

immunologique où l’initiation du traitement antirétroviral peut être discutée. Un diagnostic précoce 

de l’infection par le VIH pourrait améliorer la prise en charge et réduire le risque d’infection 

opportuniste grave. 


26. EVALUATION OF DIFFERENT EXTRACTION 

PROTOCOLS AND STORAGE CONDITIONS OF 

DRIED PLASMA SPOTS FOR HIV-1 RNA 

QUANTIFICATION AND PCR AMPLIFICATION 

FOR GENOTYPIC DRUG RESISTANCE TESTING 

Marjorie Monleau 1 , Céline Montavon 1 , Paula Fujiwara 2 , François Boillot 3 , Eric 

Delaporte 1 , Martine Peeters 1 

1 : UMR 145, Montpellier ; 2 : UITCMR ; 3 : Alter – Santé Internationale & Développement, 

Montpellier 

Dried Blood or Plasma spots are an alternative to plasma for monitoring of HIV in resource-limited 

countries. Our major aim was to study two crucial steps, i.e. viral RNA extraction and storage 

conditions over time of dried plasma spots (DPS) for HIV viral load (VL) and drug resistance 

testing. 

DPS were prepared with different concentrations (2,000, 20,000 and 200,000 cop/mL) of HIV viral 

RNA spiked in human seronegative plasma. HIV-1 RNA recovery was compared with four different 

manual viral RNA extraction kits (Qiagen, Abbott, Nuclisens and Roche). Viral RNA was 

subsequently quantified by the same real-time RT-PCR assay (Generic HIV VL, Biocentric). 

Protease (PT) and reverse transcriptase (RT) regions of the pol gene were amplified according to 

the ANRS protocol. 

After 48h, the RNA recovery with Qiagen and Roche extractions revealed a significant loss of 

0.8 to 1.4 log10 and 2.2 log10 respectively. Extractions with Abbott or Nuclisens resulted in loss of 

0.4 to 0.8 log10 and of 0 to 0.8 log10 respectively. Only with these extractions, RT and PT could be 

amplified for all concentrations. Using Abbott and Nuclisens extractions, no additional loss in VL 

was observed after 4 weeks at 20°C and at 37°C. Similarly, PT and RT amplifications were 

successful at 20 and 37°C after 4 weeks, except for the lowest (2,000 cop/mL) concentration. 

In conclusion, RNA extractions with Nuclisens and Abbott extractions show correct RNA 

recovery from DPS. Moreover viral RNA remains stable over time for at least 4 weeks at 20°C and 

37°C. Experiments are needed in the field to determine the optimal storage conditions. 

Keywords: HIV; dried spots; RNA extraction kit; viral load quantification; drug resistance; resourcelimited 

countries 


27. EPIDEMIOLOGIE DE L’INFECTION A 

VIH/SIDA DANS LA WILYA DE TIZI-OUZOU - 

ALGERIE 

F.Toudeft 1 , F.Belateche 2 , A. Amrane 3 - A. Touat 4 

(1) SEMEP CHU Tizi-Ouzou ; (2) SEMEP CHU Hussein-Dez Alger ; (3) Service de Maladies 

infectieuses-EHS EL HAADI FLICI ; (4) Service de Maladies infectieuses CHU Tizi-Ouzou 

Le premier cas de SIDA rapporté en ALGERIE a été diagnostiqué en décembre 1985, depuis, le 

nombre de cas ne cesse d’augmenter. 

Jusqu’au 31 janvier 2008, 841 cas de SIDA et 2955 cas de séropositifs ont été enregistrés et 

confirmés par le Laboratoire National de Référence (LNR), comparativement aux nombres 

enregistrés au 30 septembre 1995 qui étaient de 244 cas de SIDA et de 512 cas de séropositifs. 

On note une prédominance masculine avec un Sex-ratio de 1.39 ; la tranche d’âge 20-44 (active 

sexuellement) est la plus touchée (20% des cas); le mode de contamination est dominé par la voie 

hétérosexuelle (17,34%), l’homosexualité est retrouvée chez l’homme, l’hétérosexualité chez la 

femme. 

Il ressort également qu’avant l’année 1999, le mode de contamination était dominé par la 

transfusion sanguine et l’injection de drogues, au cours de ces dernières années, la voie sexuelle 

domine le tableau épidémiologique. 

Le VIH1 est le plus souvent retrouvé, cependant une dizaine de cas à VIH2 chez les populations 

non autochtones du Sud ont été signalées par le LNR (8) . Il faut signaler que le sous type B est 

prédominant au Nord de l’Algérie (17 sous types) et le sous type C est retrouvé dans le Sud (5 

sous types à Tamanrasset) d’après les travaux de Mohammedi. La présence du sous type C 

pourrait expliquer la plus grande fréquence de la maladie dans le Sud en raison de son extrême 

transmissibilité. 

Parmi les wilayas du Nord, la Wilaya d’Alger enregistre près des ¾ des cas notifiés de 

séropositifs (70,73%) avec une incidence de période de 12,3 cas p.100000 habitants ; la wilaya de 

Tizi-Ouzou vient au deuxième rang, suivie de Bejaia. 

Objectif 

Déterminer la tendance évolutive de l’infection à VIH/SIDA dans la wilaya de Tizi-Ouzou ainsi que 

les caractéristiques épidémiologiques des cas de patients infectés depuis le début de l’épidémie. 

Matériel et Méthode 

Enquête prospective, longitudinale sur les nouveaux cas infectés par le VIH/SIDA et/ou nouveaux 

malades, recensés à partir du 1 er juillet 2006 au 31 décembre 2007 ; complétée par une étude 

rétrospective de tous les cas notifiés depuis le début de l’épidémie au 30 juin 2006, tous résidant 

dans la wilaya de Tizi-Ouzou. 

Sont inclus tous les patients séropositifs et/ou malades, hospitalisés durant ces deux périodes au 

service de maladies infectieuses du CHU de Tizi-Ouzou et/ou à l’EHS El-Kettar (Alger), ou se 

présentant en consultations au courant des deux périodes. 

La collecte d’informations s’est faite par la mise en place d’un réseau de suivi (SEMEP- Service 

des maladies infectieuses du CHU de Tizi-Ouzou- laboratoire de dépistage du VIH (CDAG) du 

CHU de Tizi-Ouzou- EHS El Kettar- LNR/VIH/SIDA) ainsi que sur dossiers patients hospitalisés 

dans les mêmes services sus cités, 

Résultats 

67 cas de VIH/SIDA dont un enfant, une femme enceinte et une professionnelle du sexe ont été 

notifiés ; 82,4% malades et 17,6% séropositifs ; on note à ce jour 25 décès et 25 vivants, les 


autres sont perdus de vu. Le 1 er cas est diagnostiqué le 14.05.1986, le dernier cas le 27.10.2007. 

L’âge moyen des patients est de 44,5+/-16 ans ; 61,8% de mariés, 7,4% de célibataires et 7,4% 

de veuf(ve)s. Le sex ratio est de 1,1; le niveau d’instruction le plus élevé est le secondaire retrouvé 

chez deux personnes, 14,7% d’analphabètes. 

La notion de migration est retrouvée dans 66,2% des cas (60,3% en France et dont 35,3% il s’agit 

de femmes de conjoints émigrés). Le mode de contamination le plus retrouvé est l’hétérosexualité 

en Algérie (36,8%), l’hétérosexualité en France (19,1%), la toxicomanie à l’étranger et locale dans 

2,9% des cas chacune et la transfusion à l’étranger (2,9%); le VIH1 est retrouvé dans 29,4%, 1 

cas d’association VIH1/VIH2, dans le reste des cas le typage est indéterminé. Dans les 

comportements des patients, les pratiques sexuelles à risque sont de 17,6% (partenaires 

multiples :10,3% ; profession du sexe :4,4%). 

Les infections opportunistes observées sont : zona, pneumocystoses, tuberculose, diarrhées, 

candidoses. 13,2% ont reçu la trithérapie, 8 ,8% ont reçu un traitement symptomatique et 8,8% les 

deux en même. 


28. ENQUETE COMPORTEMENTALE CHEZ LES 

MIGRANTS DE LA COMMUNE DE TIZI-OUZOU - 

ALGERIE 

F.Toudeft 1 , N.Halli 1 N.Bekri 1 - F.Belateche 2 

(1) SEMEP CHU Tizi-Ouzou 

(2) SEMEP CHU Hussein-Dey Alger 

En Algérie, l’importante migration nationale et internationale est l’un des principaux déterminants 

de l’épidémie du VIH/SIDA. Cette migration est constituée essentiellement par l’émigration 

d’algériens en France qui a débuté depuis les années de la première guerre mondiale 

(mobilisation de travailleurs « libres » ou des réquisitions de soldats mobilisés, provenant 

essentiellement de la Kabylie). Le deuxième type de migration est constitué par le flux migratoire 

entre les frontières du Sud Algérien et l’Afrique Sub Saharienne, constitué essentiellement par la 

libre circulation des personnes, accentuée à partir des années 1990 suite à l’ouverture des 

frontières. Les mouvements migratoires existent aussi et souvent incontrôlés, entre le Nord et le 

Sud du pays ainsi que le Nord et d’autres pays du Maghreb (Tunisie, Maroc). 

Ces échanges rendent compte des risques liés aux mouvements de populations qui se traduisent 

par une aggravation de l’épidémie au sein des populations vulnérables autochtones et des 

populations mobiles. 

L’émigration vers l’Europe représente un risque non négligeable dans la transmission du 

VIH surtout au début de l’épidémie, comme l’a démontré la notification des cas de SIDA et des 

séropositifs. Une analyse des cas de SIDA enregistrés de 1985 à 2005, montre que les nationaux 

résidents à l’étranger et les personnes de nationalité étrangère constituent à eux seuls 18,14% 

des cas (127 cas/700 cas). 

D’où la nécessité de se pencher sur ces populations ainsi que sur leurs familles, en mettant en 

place une surveillance basée sur des indicateurs appropriés. Une étude de l’impact des 

mouvements migratoires sur une commune d’une wilaya à risque d’Algérie dont Tizi-Ouzou, 

touchée par l’épidémie et par des flux migratoires humains, nous ait parue intéressante. 

Objectifs 

- Mieux connaître les facteurs de risque impliqués dans le processus de mobilité, ainsi que les 

facteurs déterminants les comportements à risque d’infection à VIH/SIDA ; 

- Proposer des mesures spécifiques de prévention permettant une prise en charge de l’épidémie 

et une lutte contre sa progression dans le cadre d’une approche multisectorielle et régionale. 

Matériel et Méthode 

Le groupe de migrants est recruté de façon continue sur une durée de trois mois, au niveau des 

agences de voyages implantées dela commune du chef lieu de wilaya. L’enquête s’est effectuée 

durant la période de vacances estivales afin de cibler le maximum de personnes de retour au 

pays d’origine. 

Sont incluses toutes les personnes émigrées ou travaillant de façon permanente à plus de 

200 Kms de leur lieu de résidence, se présentant au niveau des agences de voyage de la 

commune de juillet à septembre 2006. 

Dans les agences de voyage, l’approche est individuelle après information de la personne à 

enquêter par le personnel de l’agence. 

Résultats 

147 migrants ont été enquêtés ; leur âge moyen est de 34,9+/-11,5 ans, le sex ratio est de 6 ; leur 

niveau d’instruction est universitaire (46,3%), secondaire (31,3%), moyen (13,3%) ; les 


analphabètes ne sont que de 2%. 51% d’entre eux sont mariés et 44,9% de célibataires. 82,3% 

sont algériens et 13,6% ont une nationalité algéro-française. La migration se fait dans 58,8% des 

cas vers l’Europe et la France est représentée dans 89,8% des situations. 

38% des personnes mariées migrent sans le conjoint ; les raisons de migration sont la recherche 

d’une vie meilleure (53,9%), 34,3% à cause du chômage, pour poursuivre les études (8,8%) et 

dans le cadre du rapprochement familial (9,8%). 

95,9% d’entre eux connaissent le VIH/SIDA et savent que c’est une grave maladie ; la 

séropositivité est connue dans 65,3% ; 78,9% la trouvent mortelle ; 87,8% savent qu’elle est 

causée par un virus ; 69,4% connaissent le mode de contamination. Le préservatif est considéré 

comme moyen de protection (96,6% des cas), il est à usage unique pour 64,6% d’entre eux, 

multiple (10,2%) ; 76,9% savent que la pilule n’a aucun rôle. 

Dans leurs comportements, 17,7% des migrants usent des drogues injectables et parmi eux, 

53,9% le font en France. 

L’âge du 1 er rapport sexuel est de 19,9+/-3années ; ce 1 er rapport est protégé dans 34,4% 

seulement : cette protection augmente avec le niveau d’instruction des migrants (X2=5,47 ; 

p

29. ENQUETE COMPORTEMENTALE CHEZ LES 

JEUNES DE LA COMMUNE DE TIZI-OUZOU – 

ALGERIE SEPT-DEC 2006 

F.Toudeft 1 F.Belateche 2 N.Halli 1 N.Bekri 1 

(1) SEMEP CHU Tizi-Ouzou (2) SEMEP CHU Hussein-Dez Alger 

Dans le cas d’épidémie peu active de VIH/SIDA, où l’on enregistre un faible taux de prévalence 

dans tous les groupes de populations (

virus ; 39,4 seulement connaissent les modes de transmission de la maladie et 48,6% seulement 

connaissent les moyens de transmission ; la séropositivité est connue dans 51,3% seulement, 

81,2% savent que le préservatif est un moyen de protection, 65,8% de ces derniers savent qu’il 

n’est utilisable qu’une seule fois ; 57,4% seulement savent que la pilule n’a aucun rôle dans la 

prévention . 

Parmi ces jeunes, 15,6% consomment des drogues injectables, 27,4% ont eu des gestes à risque 

(cuping, piercing) et 24,2% seulement de ces gestes sont pratiqués chez un médecin, le reste 

chez le guérisseur ou le taleb. 

20% ont déclaré avoir eu des rapports sexuels, le nombre moyen de partenaires est de 7 et dans 

54,4% ce sont des connaissances mais dans 8,1% il s’agit de professionnels du sexe. L’âge 

moyen du 1 er rapport sexuel est 17,8 années+/- 4 ; ce premier rapport est protége dans 

seulement 33,9% des cas. 

Actuellement, 65,1% déclarent avoir un seul partenaire et 34,9% en ont plusieurs. Les rapports 

actuels sont protégés dans 51,7% seulement et les raisons de la non protection du reste des 

jeunes sont la confiance (44,3%), oubli (12,5%), absence d’information (9,1%), non conviction 

(8%) et 3,4% n’ont pas les moyens d’en acquérir. Parmi ces derniers, 82,2% ont des pratiques 

hétérosexuelles, dans 9,6%, elles sont homosexuelles et 8,3% pratiquent les deux. Dans tous les 

cas les relations sont vaginales (22,6%des cas), buccales (27,8%), anales (10,4% et dans 22,6% 

des cas on note un mélange de comportement. 

21,4% déclarent avoir eu des rapports avec un partenaire non régulier durant les 12 derniers mois 

et ce dernier n’est protégé que dans 44,2% des cas. 


Réservoirs 


30. CHARACTERIZATION OF INFECTIOUS 

RECOMBINANT VIRUSES EXHIBITING HIV-1 

ENV FROM SEMINAL STRAINS 

Philip Lawrence 1 , Willy Berlier 1 , Kaiqing PAN 1 , Olivier Delezay 1 , François Clavel 2 , 

Fabrizio Mammano 2 , Sabine Palle 4 , Thomas Olivier 4 , Frédéric Lucht 1,3 and Bruno 

Pozzetto 1 et Thomas Bourlet. 

1 Groupe Immunité des Muqueuses et Agents Pathogènes (GIMAP-EA 3064), Faculté de 

Médecine J. Lisfranc, CHU de Saint-Etienne, Saint-Etienne, France 

2 INSERM U552, Hôpital Bichat Claude Bernard, Paris, France 

3 Infectious Diseases Department, CHU de Saint-Etienne, Saint-Etienne, France 

4 Centre de Microscopie Confocale Multiphotonique, Université Jean Monnet, Saint- 

Etienne, France 

The aim of this study was to construct infectious recombinant viruses (cell-free and cellassociated) 

exhibiting HIV-1 env from seminal strains. Genetic differences between blood and 

mucosal-derived HIV-1 strains have been widely reported. Unfortunately, amplification of HIV-1 

strains from mucosal samples including semen or saliva by co-culture is fastidious and has low 

sensitivity. To overcome this difficulty, we have developed the construction of chimeric viruses 

expressing wild-type seminal HIV-1 envelope protein using the V1-V3 deleted vector pNL 4-3. A 

940 bp fragment containing the envelope region spanning V1-V3 of HIV-1 was amplified by 

nested-PCR from HIV-1 RNA-positive seminal plasma and, as controls, from the laboratory strains 

HIV-1LAI (X4-tropic) and HIV-1BAL (R5-tropic). Chimeric viruses were then produced by cotransfection 

of a mixture of 6 nested-PCR fragments (per sample) and the HIV-1 genomic 

construct pNL 4-3 ∆V in 293 T cells. After an initial testing of co-receptor usage by a tropism 

recombinant test, replication capacity and amplification of these recombinant viruses were 

assessed using PBMC. V1-V3 fragments were successfully amplified from eleven seminal 

samples from HIV-1 infected men. Four chimeric replicative strains were produced with viral titers 

ranging from 0.036 to 0.130 ng/ml of p24 (TCID50). The interaction between free or cell-associated 

viral particles and a reporter cell line was visualized by confocal microscopy. These replicative 

chimeric seminal viruses (cell-free and cell-associated) represent useful tools for the study of the 

heterosexual transmission of HIV-1 using in vitro models of genital barriers, testing of microbicide 

activity and for mucosal immunity. 

. 


31. ROLE OF CHROMATIN REMODELING 

COMPLEXES IN CONTROLLING HIV-1 

EXPRESSION IN PRIMARY CD4+ T CELLS 

Guillemette X. Masse 1, 2 1, 2 

and Stéphane Emiliani 

1 . Institut Cochin, Université Paris Descartes, CNRS (UMR 8104), Paris, France. 

2 . Inserm, U567, Paris, France. 

Viral latency is one of the limits of complete eradication of Human Immunodeficiency Virus (HIV-1) 

in particular in HAART treated patients. The molecular mechanisms controlling HIV-1 expression in 

latently infected CD4 + T lymphocytes are still not understood. Tat is a viral transactivator that 

increases transcription from the 5’ LTR viral promoter by improving the efficiency of elongation of 

the initiated complex. Several cellular co-factors of Tat involved in transcription elongation (Cyclin 

T1, Cdk-9) or histone acetylation (p300, PCAF) have been identified. Recently, we (and others) 

showed that chromatin remodeling complexes are also important for Tat-mediated transcriptional 

activation of the viral promoter. Understanding the role of these cofactors of Tat in latently infected 

CD4 + T lymphocytes in vivo is determinant in the knowledge of HIV disease. 

We first propose to recapitulate the involvement of these Tat cofactors on HIV-1 transcription in in 

vitro infected primary CD4 + T cells. The second aspect of our project is to decipher the role of Tat 

cofactors in the latent phase of the virus and/or in the re-activation of HIV-1 from latently infected 

CD4 + T lymphocytes. Since Tat function is essential for productive viral replication and has no 

known cellular homolog, it is an attractive target for the development of anti-HIV drugs. 


32. MECANISMES MOLECULAIRES A 

L'ORIGINE DE LA LATENCE POST- 

INTEGRATIVE DANS LE SYSTEME NERVEUX 

CENTRAL 

Marban C, Suzanne S, Dequiedt F, de Walque S, Redel L, Van Lint C, Aunis D et 

Rohr O 

INSERM / Université Louis Pasteur –Strasbourg- 

La persistance des réservoirs cellulaires infectés de manière latente par le VIH-1 chez les patients 

sous traitement anti-rétroviral actif (HAART) représente un obstacle majeur à l'éradication 

définitive du virus. Ces réservoirs, de nature diverse, échappent à l'action des drogues et du 

système immunitaire et représentent une source permanente de réactivation virale suite à 

l'interruption du traitement HAAR. 

Nos travaux portent sur les mécanismes moléculaires qui contrôlent la latence et la réactivation 

transcriptionnelle du virus VIH-1, dans son contexte naturel représenté par le provirus intégré dans 

le génome cellulaire et organisé sous forme de chromatine. Nous avons démontré l'importance du 

facteur cellulaire CTIP2 dans l'établissement de la latence transcriptionnelle dans des cellules 

microgliales, les macrophages résidents du Système Nerveux Central (SNC). Infectées de façon 

latente, ces cellules constituent d'excellents réservoirs viraux. CTIP2 recrute HDAC1, HDAC2 et 

SUV39H1 sur le promoteur du VIH-1, provoquant une déacétylation puis une méthylation des 

histones à l'origine de la formation de structures hétérochromatiniennes et du silencing des gènes 

viraux. CTIP2, en association avec HDAC1/2 et SUV39H1, apparaît donc comme un facteur clé 

dans la formation de réservoirs viraux dans le système nerveux central. 


33. LES SITES AP-1 LOCALISES DANS LA 

REGION CIS-REGULATRICE DU GENE POL DU 

HIV-1 SONT IMPORTANTS POUR 

L’INFECTIVITE VIRALE 

N. Vandenhoudt 1 , S. de Walque 1 , B. Van Driessche 1 , L. Colin 1 , A. Guiguen 1 , V. 

Martinelli 1, C. Vanhulle 1 , A. Burny 1 , O. Rohr 2 et C. Van Lint 1 . 

1 Université Libre de Bruxelles, Institut de Biologie et de Médecine Moléculaires, 

Laboratoire de Virologie Moléculaire, 6041 Gosselies, Belgique 2 Institut de Virologie, 

67000 Strasbourg, France 

La transcription du HIV-1 est contrôlée par des séquences spécifiques agissant en cis localisée au 

niveau des deux LTRs, par la protéine vriale trans-activatrice Tat et par des facteurs de 

transcription cellulaires. En plus de ces éléments, notre laboratoire a précédemment identifié un 

enhancer intragénique inductible par le PMA dans le gène pol du HIV-1. Cet enhancer est 

composé de deux fragments fonctionnels : le fragment 5103 et le fragment 5105 localisés 

respectivement dans la partie centrale du gène pol et dans une région couvrant la fin du gène pol, 

le gène vif, le gène vpr et le premier exon codant des gènes tat et rev. De manière intéressante, 

notre laboratoire a identifié trois sites de liaison pour le facteur AP-1 dans le fragment 5103. Nous 

avons montré que des facteurs AP-1, et plus précisément c-Fos et JunB, lient spécifiquement les 

sites AP-1 précédemment identifiés dans le fragment 5103 et sont recrutés in vivo spécifiquement 

dans la région du fragment 5103. Nous avons également montré in vitro, dans le contexte 

hétérologue du promoteur de la thymidine kinase, que ces sites sont entièrement responsables de 

l’activité enhancer inductible par le PMA démontrée par le fragment 5103. Nos résultats 

démontrent que l’intégrité des sites AP-1 intragéniques localisés ~ 4 kb en aval du site d’initiation 

de la transcription est importante pour la réplication du HIV-1 dans des lignées cellulaires 

humaines CD4+ lymphocytaires T et monocytaires/macrophagiques, indiquant une fonction 

régulatrice positive in vivo du fragment 5103. 


34. LONG-TERM PERSISTENCE OF MEMORY B 

CELLS SPECIFIC FOR HEPATITIS B SURFACE 

ANTIGEN IN HIV-1 INFECTED PATIENTS 

Edouard Tuaillon a , Yassine Al Tabaa a , Vincent Baillat b , Gaël Petitjean a and Jacques 

Reynes b and Jean Pierre Vendrell a . 

Laboratoire de Virologie a , Hôpital Lapeyronie, Montpellier, France; and Departement des 

Maladies Infectieuses et Tropicales, Hôpital Gui de Chauliac, Centre Hospitalier 

Universitaire de Montpellier b , Montpellier, France. 

To investigate the maintenance of long-term memory B cells specific for hepatitis B surface 

antigen (HBsAg), purified blood B cells from 10 HIV-1 infected patients who had recovered from 

HBV infection, 10 HIV-1 infected patients HbsAg vaccinated and 20 HbsAg vaccinated healthy 

controls, were stimulated and cells secreting antibodies directed to HBsAg (HBs-SC) enumerated 

by an ELISpot assay. 

HBs-SC were found in 18/20 HIV-1-infected patients with either natural or vaccinal immunity to 

hepatitis B virus, including six subjects with serum anti-hepatitis B surface antibody levels less 

than 10 mIU/ml. A lower number of HBs-SC was found in HBsAg-vaccinated patients compared 

with vaccinated controls. HbsAg-specific memory B cells could be detected several years after 

HbsAg vaccination or HBV recovery in HIV-1 infected patients including some individuals with 

undetectable anti-HBs antibodies in serum. HbsAg memory B cells persist in HIV-1 infected 

patients. 


Virologie 


35. INHIBITION DE L’EPISSAGE DU PRE- 

MESSAGER D’HIV-1 PAR DES PETITES 

MOLECULES CHIMIQUES : UNE NOUVELLE 

STRATEGIE ANTIRETROVIRALE 

Nadia Bakkour, Yea-Lih Lin, Sophie Maire, Lilia Ayadi, Florence Mahuteau-Betzer, 

Chi Hung Nguyen, Pierre Portales, David Grierson, Benoit Chabot, Philippe 

Jeanteur, Pierre Corbeau, Christiane Branlant and Jamal Tazi. 

Institut de génétique moléculaire de Montpellier- UMR 5535 ; UMII-CNRS 

Le virus du SIDA, comme pratiquement tous les rétrovirus, a recours au mécanisme d’épissage 

pour exprimer des gènes essentiels à sa multiplication. En effet, la version du virus qui s’intègre 

dans le génome des cellules humaines est transcrite sous forme d’un précurseur unique qui, par 

épissage alternatif, génère 40 ARN messagers codant pour des protéines virales différentes. Ces 

évènements d'épissage sont contrôlés par plusieurs séquences régulatrices de type ESE (Exonic 

Splicing Enhancer) dont certaines sont localisées en aval de sites d’épissage responsables de 

l’expression des protéines clefs de la multiplication virale comme Tat, Rev, Vpu, Env et Nef. Les 

protéines qui interagissent avec ces séquences ESE appartiennent à la famille des protéines SR 

(Serine Arginine-rich) connues pour leur implication dans le choix des sites d’épissage et le 

contrôle de l’épissage alternatif. Nous avons effectué un criblage de molécules nous permettant 

d’identifier plusieurs molécules affectant ce mécanisme de façon spécifique et appartenant à la 

famille des benzo-pyrido indoles et pyrido-carbazoles. 

En particulier nous avons identifié une nouvelle molécule dérivée d’indole (IDC16), qui est 

capable d’interférer avec la réplication de souches virales de laboratoire, d’isolats cliniques et 

même de souches issues de patients résistants aux tri-thérapies anti-VIH. 

Il est important de noter que le traitement de cellules primaires du sang n’altère pas le profil 

d’épissage de gènes endogènes impliqués dans la progression du cycle cellulaire et l’apoptose. 

Ainsi, les facteurs d’épissage humains représentent une nouvelle cible prometteuse pour le 

développement de thérapies antiretrovirales, particulièrement pour l’inhibition de souches multirésistantes. 


36. CARACTERISTIQUES DES GENES 

D’ENVELOPPE DU VIRUS DE 

L’IMMUNODEFICIENCE HUMAINE DE TYPE 1 

(VIH-1) DE SOUS-TYPE CRF01_AE TRANSMIS 

DE LA MERE A L’ENFANT 

Samleerat T, Braibant T, Jourdain G, Moreau A, Ngo-Giang-Huong N, Leechana Chai 

P, Hemvuttiphan J, Hinjiranandana T, Changchit T, Warachit B, Suraseranivong V, 

Lallemant M et Barin F. 

Université François-Rabelais, Inserm ERI19 et CHU Bretonneau, Tours. 

Des études récentes ayant mis en évidence certaines caractéristiques des virus transmis 

sexuellement isolés précocement dans l’infection (gp120 plus compacte et moindre nombre de 

sites de N-glycosylation, par comparaison à des isolats tardifs), nous avons analysé les 

caractéristiques moléculaires des virus transmis dans le contexte de la transmission mère-enfant 

(TME). 

Matériel et Méthodes: 17 couples mère-enfant ont été étudiés, 6 enfants ayant été infectés in 

utero et 11 enfants en période périnatale. Les séquences du gène env (gp120) ont été amplifiées 

à partir de l’ADN proviral extrait des cellules mononuclées (PBMC) maternelles obtenues à 

l’accouchement et à partir de l’ARN viral extrait du premier prélèvement plasmatique positif chez 

l’enfant. Les amplicons ont été clonés et séquencés. Un total de 353 clones étaient disponibles 

pour l’analyse moléculaire. 

Résultats: 14 mères ont transmis une population virale homogène restreinte génétiquement et 3 

mères ont transmis de multiples variants à leur enfant. La longueur de la gp120 (nombre d’a.a.) et 

le nombre de sites potentiels de N-glycosylation (PNGS) étaient similaires pour la mère et l’enfant 

au sein de chaque couple. L’analyse fine a révélé que 4 PNGS (N241, N301, N354, et N384) 

étaient systématiquement conservés chez les variants des infants mais étaient irrégulièrement 

présents chez les variants maternels, suggérant qu’ils pourraient conférer un avantage sélectif. 

Conclusions: Une gp 120 plus compacte et une moindre glycosylation ne sont pas des 

caractéristiques des virus transmis de la mère à l’enfant, au contraire de ce qui a été suggéré en 

cas de transmission sexuelle pour certains sous-types de VIH-1. Quatre sites de N-glycosylation 

semblent être sélectionnés chez les virus transmis, ce qui pourrait conforter l’implication du 

« bouclier glycanique » de la gp120 dans l’avantage sélectif. 


37. MECHANISMS INVOLVED IN NEF- 

DEPENDENT INCREASE OF HIV-1 INFECTIVITY 

Laguette N. 1 , Zarka M. 1 , Bouchet J. 1 and Benichou S. 1 and Basmaciogullari S 1 

1 Institut Cochin, CNRS UMR 8104, Inserm U 567, Université Paris Descartes, Paris, 

France 

The nef gene of human and simian immunodeficiency viruses encodes a 27kDa protein that plays 

an important role in the progression of the infection to AIDS. In vitro, single round and replication 

competent viruses deleted from nef are less infectious than their wild-type counterpart. There is a 

relative consensus on the rules that govern this phenotype: i) the infectivity of ∆nef viruses can be 

restored when Nef is expressed in producer cells, not in target cells; ii) Nef does not affect entry; 

iii) Nef increases the infectivity of viruses that enter target cells by fusion at the plasma membrane, 

not in endocytic vesicles; iv) this phenotype requires the integrity of the di-leucin motif that 

connects Nef to the clathrin adaptor complexes. In order to better understand the molecular basis 

of this phenotype, we determined whether the incorporation of Nef in viral particles is a 

prerequisite or if the presence of Nef in the virus producing cell is sufficient. We used Nef-Vpr 

chimerae to manipulate the amount of Nef incorporated in the virus through the Vpr domain. We 

showed that increasing the amount of Nef incorporated in the virus without affecting the amount of 

Nef expressed in producer cells did not increase HIV-1 infectivity. These results suggest a role of 

Nef during the assembly of the virus that eventually leads to the release of fully infectious viruses. 

In support of this hypothesis, the use of differential 2-D gel electrophoresis (DiGE) revealed 

differences in the protein content of wild-type and ∆nef viruses. 


38. TIP47 PROMOTES THE EFFICIENT 

RELEASE OF INFECTIOUS HIV-1 FROM THE 

ASSEMBLY COMPARTMENT OF MACROPHAGES 

Hélène Bauby, Sandra Lopez-Vergès, Guillaume Hoeffel, Katy Janvier, Fabrizio 

Mamano, Anne Hosmalin, Clarisse Berlioz-Torrent 

INSERM U567 Institut Cochin Département Maladies infectieuses 

27 rue du Faubourg St Jacques 75014 Paris 

Macrophages are, along with T CD4 + lymphocytes, the major targets of HIV-1 infection and play a 

key role in viral pathogenesis as a significant reservoir. Identification of the cellular cofactors 

involved in the production of infectious HIV-1 from macrophages is thus crucial. Nevertheless 

molecular mechanisms allowing the production of infectious particles from macrophages are not 

entirely deciphered. In this study, we investigated the role of the cellular cofactor TIP47 in HIV-1 

morphogenesis in primary macrophages. Our data show that TIP47 is essential for HIV-1 infectivity 

and propagation. Mutations in HIV-1 Gag or Envelope (Env) proteins, which abolish interaction 

with TIP47, impair HIV-1 propagation and infectivity preventing colocalization of Gag and Env, and 

thereby inhibiting Env incorporation into virions. Whereas disruption of Gag-TIP47 interaction 

increases Gag particles production, impaired Env-TIP47 binding reduces Gag particles release 

and, strikingly, induces their retention in the viral assembly compartments. Thus, as in T 

lymphocytes, TIP47 is critical for the efficient release of infectious HIV-1 particles from the 

assembly compartment of primary macrophages, making TIP47 a new potential therapeutic target 

for limiting HIV-1 infectivity and spreading. This work is supported by grants from ANRS, 

SIDACTION, ANR and FRM. 


39. THE 3-O-(3’,3’-DIMETHYLSUCCINYL) 

DERIVATIVE OF BETULINIC ACID (DSB OR PA- 

457) INHIBITS THE ASSEMBLY OF VIRUS-LIKE 

PARTICLES (VLP) IN HIV-1 GAG-EXPRESSING 

CELLS 

Sandrina DaFonseca, Pascale Coric, Saw See Hong and Serge Bouaziz and Pierre 

Boulanger. 

Université Lyon I, Faculté de Médecine Laennec de Lyon 

PA-457 (or Bevirimat) has been shown to block the step of maturation and hence the infectivity 

of HIV-1 by interfering with the viral protease (PR) at the CA-SP1 cleavage site delineating the Nterminal 

boundary of the SP1 domain of HIV-1 Gag precursor (Pr55Gag HIV ). Since SP1 is critical 

for HIV-1 morphogenesis, we analyzed the effect of DSB on the assembly of recombinant 

Pr55Gag HIV into virus-like particles (VLP), in a cellular context devoid of PR (1). We found a dosedependent 

negative effect of DSB on HIV-1 VLP assembly and release, with an IC50 of ~10 µM. 

The DSB effect was not due to the inhibition of Gag protein synthesis, or to a higher degradation 

rate of Gag precursor. It also occurred in a N-myristoylation- and p6-independent manner, implying 

that plasma membrane addressing and p6-interacting proteins were not required for the Gag 

sensitivity to DSB. HIV-1 VLP which assembled in the presence of DSB exhibited a dosedependent 

decrease in stability of their inner cores upon membrane delipidation, compared to 

control VLP, suggesting weaker Gag-Gag interactions. DSB also inhibited SIVmac251 VLP 

assembly, although with a 2-fold lower efficacy (IC50 ~20 µM). but no detectable inhibitory activity 

was observed for MLV VLP. 

In order to map the DSB-sensitive sequence, we constructed a chimeric Gag consisting of the MA- 

CA domains from MLV (DSB R ) fused to SP1-NC-p6 from HIV-1 (DSB S ), and assayed the DSB 

sensitivity of the MLV MACA -HIV SP1NC Gag chimera with respect to VLP assembly. Our data indicated 

that the main DSB target on Pr55Gag was the SP1 domain, but that other upstream Gag region(s) 

might contribute to DSB sensitivity. Structural analysis of the Gag domain overlapping the CA-NC 

junction in HIV-1, SIVmac251 and MLV MACA -HIV SP1NC chimera suggested that a lower hydrophobic 

character of the CA domain immediatetely upstream to the HIV-1 CA-SP1 junction was associated 

with a lower DSB sensitivity. This result had important implications in terms of prediction of future 

DSB-resistant mutations in HIV-1 Gag. 

(1) DaFonseca et al., Antiviral Therapy, 12, 2007, 1185-1203. SDF was supported by an ANRS doctoral fellowship 


40. LE GENOTYPAGE DE V3 PEUT-IL 

REMPLACER LES TESTS PHENOTYPIQUES 

POUR LA DETERMINATION EN ROUTINE DU 

TROPISME DU HIV-1 ? 

Delobel P., Raymond S., Sandres-Saune K., Cuzin L., Marchou B., Massip P., 

Izopet J. 

Service des Maladies Infectieuses et Tropicales et Laboratoire de Virologie - INSERM 

U563 Centre Hospitalier Universitaire de Toulouse 

Objectif : 

L’utilisation des antagonistes de CCR5 nécessite de pouvoir déterminer l’utilisation des 

corécepteurs d’entrée du HIV-1. Le séquençage direct de la région V3 env pourrait offrir une 

alternative simple aux techniques phénotypiques complexes actuellement utilisées pour 

déterminer le tropisme du HIV-1. 

Méthodes : 

L’utilisation des corécepteurs d’entrée a été déterminée en parallèle par séquençage direct de V3 

et par un test phénotypique chez 103 patients. Les performances de différents outils génotypiques 

pour la détection des virus utilisant le corécepteur CXCR4 ont été comparées au test de référence 

phénotypique. 

Résultats : 

Les données génotypiques et phénotypiques ont été obtenues chez 98 patients. La règle 11/25 a 

eu une sensibilité de 65% pour la détection des virus utilisant CXCR4. Les algorithmes 

bioinformatiques WebPSSM et Geno2Pheno ont eu respectivement une sensibilité de 69% et 88% 

et une spécificité de 97% et 87% pour la détection des virus utilisant CXCR4. Nous proposons un 

nouvel algorithme, basé sur la combinaison de mutations aux positions 11 et 25 avec la charge 

électrostatique nette de la boucle V3. Cet algorithme simple a permis d’obtenir des performances 

similaires aux approches bioinformatiques avec une sensibilité de 77% et une spécificité de 96% 

pour la détection des virus utilisant CXCR4, et une concordance globale entre génotype et 

phénotype de 91%. 

Conclusion : 

Le séquençage direct de la région V3 env pourrait donc constituer une alternative simple et 

efficace aux techniques phénotypiques pour la détermination de l’utilisation des corécepteurs 

d’entrée du HIV-1 en pratique clinique. 


41. LE VIH-1 EST A DEUX DOIGTS DES VIRUS 

ADN DE TYPE HBV OU SPUMAVIRUS 

L. Houzet, L. Didierlaurent, Z. Morichaud, D. Muriaux, J-L. Darlix and M. Mougel. 

Equipe Marylène Mougel - Métabolisme des ARN rétroviraux et réplication rétrovirale 

CNRS UMR 5236 - Institut de biologie 

4 Bd Henri IV 4965 Montpellier cedex 2 

La protéine de nucléocapside (NC) du VIH-1 est composée de domaines basiques flanqués de 2 

doigts de zinc (ZF) hautement conservés. La NC intervient dans de nombreuses étapes du cycle 

de réplication aussi bien précoces, comme la transcription-inverse (RT) et l’intégration, que 

tardives avec l’assemblage et le bourgeonnement des virions. Ceci explique que la NC est 

essentielle pour la réplication du VIH-1 et qu’elle constitue aujourd’hui un réel espoir comme 

nouvelle cible antivirale. Nous rapportons ici la découverte d’un nouveau rôle de la NC dans la 

réplication du VIH-1. 

Des travaux de RT in vitro ont montré que la NC possède une activité chaperonne des acides 

nucléiques, portée par ses motifs ZF, et essentielle pour la RT. En culture cellulaire, la mutation 

des ZF entraîne une forte chute du taux d’ADN viral dans les cellules infectées. Contre toute 

attente, nos travaux révèlent que cette chute d’ADN viral dans les cellules infectées s’explique par 

le fait que la RT s’est déjà entièrement déroulée avant l’entrée dans la cellule. Nous montrons ici 

que les virions VIH-1 délétés des ZF renferment près de 1000 X plus d’ADN que les particules 

sauvages. Après avoir écarté une possible RT intravirion, nous montrons pour la première fois que 

la délétion d’un seul ou des deux ZF conduit à une synthèse d’ADN dans les cellules transfectées 

productrices de virions, à l’instar des virus foamy ou HBV. La NC se révèle être un véritable 

régulateur temporel de la RT, puisqu’elle contrôle la RT lors des étapes tardives d’assemblage. 


42. IDENTIFICATION D’UN FACTEUR 

CELLULAIRE IMPLIQUÉ DANS LA 

RÉPLICATION DU VIH-1 ET LA RÉSISTANCE 

AUX INHIBITEURS NUCLÉOSIDIQUES DE LA 

RÉTRO-TRANSCRIPTION 

Céline Ducloux, Catherine Isel, Jean-Christophe Paillart, Valérie Goldschmidt, 

Roland Marquet 

Architecture et Réactivité de l’ARN, Université Louis Pasteur, CNRS, IBMC, 15, rue René 

Descartes 67084 Strasbourg France. 

La rétro-transcription du VIH-1 est une cible thérapeutique privilégiée, avec notamment des 

inhibiteurs nucléosidiques (NRTI) agissant comme terminateurs de chaîne. Cependant, leur 

efficacité est limitée par l’émergence de mutations de résistance dans le gène de la rétrotranscriptase 

virale (RT). Si l’enzyme sauvage est capable d’exciser un NRTI par 

pyrophosphorolyse, certaines mutations de résistance favorisent un enlèvement des NRTIs par un 

clivage phosphorolytique utilisant non le PPi, mais l’ATP comme nucléophile. Ces données sont à 

l’origine d’un paradoxe: en effet, in vitro, en présence de concentrations physiologiques de PPi et 

d’ATP, les mutations de résistance n’offrent pas d’avantage significatif à la RT. Une hypothèse 

permettant de concilier ces résultats avec le fait que le VIH-1 ait évolué pour exciser l’AZT en 

utilisant l’ATP est la présence d’une pyrophosphatase (PPase) dans le complexe de rétrotranscription. 

Nous testons la présence d’une activité PPase cellulaire au sein de virions et de cores purifiés et 

souhaitons démontrer son rôle dans la réplication du VIH-1 et dans la résistance aux NRTIs. 

Néanmoins, nos premiers résultats indiquent que la présence d’une PPase dépend de manière 

critique du protocole de purification utilisé. Nous améliorons actuellement ces protocoles afin de 

supprimer la probable contamination par des microvésicules et de pouvoir obtenir ainsi une 

réponse non équivoque à la présence d’une phosphatase dans les particules du VIH-1. 


43. DES LIPOPEPTIDES INHIBENT AU NIVEAU 

NANOMOLAIRE DES PROTEASES DU VIH-1 EN 

SEQUESTRANT LA FORME MONOMERIQUE DE 

L'ENZYME CIBLE 

Ludovic Bannwarth 1* , Laure Dufau 1 , Thierry Rose 2 , Régis Vanderesse 3 , Brigitte 

Jamart-Grégoire 3 , Christophe Pannecouque 4 , Erik De Clercq 4 et Michèle Reboud- 

Ravaux 1 . 

1Enzymologie 

Moléculaire et Fonctionnelle, FRE 2852, CNRS-Université Paris 6,75251 

Paris, 

2 

Unité d’Immunologie Cellulaire, Institut Pasteur, 75015 Paris, 

3 

Laboratoire de Chimie Physique Macromoléculaire, UMR 7568, 54001 Nancy, 

4 Rega Institute, Leuven, Belgium 

Les antiprotéases utilisées en trithérapie sont des analogues de l’état de transition qui ciblent le 

site actif situé à l’interface de l’enzyme dimérique. Leur utilisation s’accompagne d’apparition de 

mutations au sein de la protéase du VIH-1 qui sont responsables du phénomène de résistances 

croisées aux antiprotéases thérapeutiques. Une alternative à l’interaction des inhibiteurs avec le 

site actif de l’enzyme est le ciblage de l’interface du dimère au niveau du feuillet β antiparallèle 

formé par l’interdigitation des extrémités N- et C-terminales de chaque monomère. En effet, cette 

région est responsable de 75% de l’énergie de stabilisation du dimère et est hautement conservée 

dans les isolats du VIH-1 et les variants multi-résistants. Nous présentons ici les derniers 

représentants d'une série des lipopeptides dont l’efficacité in vitro est subnanomolaire. Nous 

avons apporté des preuves expérimentales de l’existence d’un complexe monomère-inhibiteur par 

ultracentrifugation analytique et RMN [ 1 H- 13 C]-HSQC. Par ailleurs, ces molécules inhibent des 

protéases mutées similaires à celles qui sont observées chez des patients infectés multirésistants. 

Une étude de "drugabilité" de ces molécules devrait permettre de démontrer leur 

potentialité réelle en vue d'une application thérapeutique. 

Bannwarth L et al. J Med Chem 49:4657-64, 2006 

Breccia P et al. J Med Chem 46:5196-207, 2003 

Dumond J et al. Biochem Pharmacol 65:1097-102, 2003 

Frutos S, et al. Bioplolymers :Peptide Science 88:164-173, 2007 


44. MOLECULAR MECHANISMS INVOLVED IN 

NEF-INDUCED CD4 DOWN-REGULATION IN 

HIV-1 HOST CELLS 

Laguette N. 1 , Bouchet J. 1 , Benmerah A. 1 , Benichou S. 1 and Basmaciogullari S. 1 

1 Institut Cochin, CNRS UMR 8104, Inserm U 567, Université Paris Descartes, Paris, 

France 

HIV-1 Nef interferes with the endocytic machinery of host cells to modulate the cell surface 

expression of membrane receptors, including CD4. Though expressed at the surface of both 

lymphoid and myeloid cells, the trafficking of CD4 is governed by different rules in these cells: in 

myeloid cells CD4 is rapidly internalized from the cell surface whereas in lymphoid cells CD4 is 

stabilized at the plasma membrane through its interaction with the tyrosine kinase p56lck. Nef is 

able to downregulate CD4 in both cell types but an increase of CD4 rate of endocytosis is only 

observed in lymphoid cells. We show that expression of p56lck in non-lymphoid CD4-expressing 

cells restores the ability of Nef to increase CD4 endocytosis rate. Concurrent with this observation, 

the expression of a p56lck-binding deficient mutant of CD4 in lymphoid cells abrogates Nefinduced 

increase of CD4 endocytosis. Moreover, PMA treatment causes an increase of CD4 

endocytic rate in both cell types, suggesting that the endocytic machinery in myeloid cells is not 

saturated. However both PMA treatment and Nef expression cause a decrease of p56lck 

association with CD4 at the cell surface. Our results demonstrate that the presence of p56lck has 

an impact on the pathways used by Nef to downregulate CD4, thus indicating that Nef uses 

different pathways in lymphoid and myeloid cells to reduce the cell surface expression of CD4. 


45. ETUDE DE L’ORGANISATION 

MEMBRANAIRE DYNAMIQUE DES RECEPTEURS 

CD4 ET CCR5 SUR CELLULES VIVANTES 

Patrice Mascalchi, Aurélie Baker, Françoise Bachelerie § , Laurence Salomé, Fabrice 

Dumas et André Lopez. 

Institut de Pharmacologie et Biologie Structurale (IPBS) du CNRS, UMR 5089, 205 route 

de Narbonne, 31077 Toulouse Cedex 4. 

§ Unité de Pathogénie Virale Moléculaire, Institut Pasteur, INSERM U819, Paris. 

L’entrée du VIH dans les cellules requiert l’attachement séquentiel de sa glycoprotéine 

d’enveloppe au récepteur primaire CD4 puis au corécepteur CCR5 ou CXCR4 afin de permettre la 

fusion des membranes virale et cellulaire. La caractérisation de l’organisation des récepteurs du 

VIH à la surface des cellules cibles, les bases moléculaires dont elle dépend et leurs changements 

lors de l’entrée virale, représentera la problématique du poster, et son état d’avancement. 

Sur des cellules HEK 293 T surexprimant un ou les deux récepteurs : 

Par FRET, nous avons démontré des interactions constitutives, à l’état basal, entre CD4 et CCR5 : 

des CD4 tronqués nous ont permis de trouver les requis structuraux pour cette interaction 1 . 

Par des mesures de FRAP à rayon d’observation variable, nous retrouvons cette interaction. De 

plus, ces résultats indiquent que plusieurs CCR5 sont en interaction avec un CD4 2 . 

Par des mesures de Single Particle Tracking, nous confirmons l’interaction entre les 2 récepteurs, 

et proposer en plus un confinement de ces derniers à une plus petite échelle que celle mesurée 

en FRAPrv. 

Nous relaterons donc l’état d’avancement de cette étude qui d’après ces premières données nous 

oriente vers un modèle de double compartimentation des récepteurs CD4 et CCR5. 

1 Gaibelet G, Planchenault T, Mazeres S, Dumas F, Arenzana-Seisdedos F, Lopez A, Lagane 

B, Bachelerie F. 2006. J Biol Chem 281:37921-37929. 

2 Baker A, Saulière A, Gaibelet G, Lagane B, Mazères S, Fourage M, Bachelerie F, Salome L, 

Lopez A, Dumas F. 2007. J Biol Chem 282 :35163-35168. 


46. DISTRIBUTION GEOGRAPHIQUE DU 

SIVGOR CHEZ LES GORILLES SAUVAGES AU 

CAMEROUN 

Cecile Néel, Fran Van Heuverswyn, Eitel Mpoudi Ngole, Florian Liegois, Christelle 

Butel, Eric Delaporte, Martine Peeters. 

Institut de Recherche pour le Développement (IRD) et Université de Montpellier 1, 

Montpellier, France. Projet PRESICA, Yaoundé, Cameroun 

Les SIVs trouvés chez les chimpanzés (P.t. troglodytes) et gorilles (G.g.gorilla) d’Afrique Centrale 

représentent les ancêtres du VIH-1. Les ancêtres du VIH-1 M et N ont été retrouvés dans 2 

populations distinctes de chimpanzés au Sud Cameroun. Cependant, le virus le plus proche 

génétiquement du VIH-1 groupe O, SIVgor, a été identifié chez des gorilles au Cameroun. Ici, 

nous etudions plus en détail la distribution géographique de SIVgor chez les gorilles sauvages au 

Cameroun. 

Des échantillons de fèces ont été collectés dans 8 sites (N= 1083), comprenant 3 dans lesquels 

des gorilles positifs ont été découverts auparavant. Les échantillons, conservés dans l’ARN-Later, 

sont testés pour la présence d’anticorps SIVgor (INNO-LIA HIVI/II Score Assay). L’ARN viral est 

ensuite extrait des échantillons positifs et amplifié par RT-PCR dans env (gp41) et pol. 

L’identification de l’espèce est basée sur les observations de terrain et confirmée par l’analyse de 

l’ADN mitochondrial. 

Sur 1083 échantillons collectés, 881 appartenaient à des gorilles. Seulement dans 1 site (CP), où 

2 gorilles, SIVgor positif, avaient été précédemment identifiés, des échantillons positifs 

additionnels ont été trouvés : 21/156. Les analyses des microsatellites révèlent que ces 21 

échantillons représentent 8 individus différents. Ceci porte a 10 le nombre total de gorilles positifs 

dans cette zone. Les séquences SIVgor, pour 3 nouveaux gorilles, sont génétiquement proches 

des lignées précédemment identifiées dans cette zone. Tous les nouveaux échantillons positifs se 

situent dans une zone d’environ 10km2 et les données de terrain collectées montrent que SIVgor 

circule dans au moins 2 groupes de gorilles différents. 

Notre étude montre une distribution inégale de SIVgor chez les gorilles de l’Ouest (G.g.gorilla) au 

Cameroun et suggère que le réservoir du HIV-1 groupe O pourrait se trouver à l’extérieur du 

Cameroun. 


Immunologie 


47. SUPERIOR CONTROL OF HIV-1 

REPLICATION BY CD8+ T CELLS IS REFLECTED 

BY THEIR AVIDITY, POLYFUNCTIONALITY, 

AND CLONAL TURNOVER 

Jorge R Almeida, David Price, Laura Papagno, Zaina Zaait, Delphine Sauce, Tedi E. 

Asher, Ethan Bornstein, Henri Agut, Anne-Geneviève Marcelin, Daniel Douek, 

Brigitte Autran and Victor Appay 

Laboratoire d’Immunologie Cellulaire et Tissulaire – INSERM U543 Paris, France 

Despite intense efforts, the precise attributes that confer certain CD8+ T-cell populations an 

advantage in controlling HIV replication remain unclear. HLA-B27 restricted Gag-KK10 specific 

CD8+ T-cells represent an unique population, since their sole presence is associated with 

prolonged AIDS-free survival in HIV-1 infection. In order to comprehend the basis of their 

protective nature, we have performed a comprehensive study of this population in comparison with 

other HIV specific CD8+ T-cells. We have used multiparametric flow cytometry together with 

molecular clonotypic analysis, to assess several CD8+ T-cell attributes directly ex vivo, including 

their phenotype (differentiation and replicative senescence), multifunctional capacity (effector 

cytokine production and cytotoxic potential), clonal diversity (TCRB gene usage), and avidity of 

CD8+ T-cell / APC interaction (functional avidity). We found that B27-KK10 specific CD8+ T-cells 

present a superior functionality, an increased clonal turnover (independent from viral mutations, 

but associated with characteristics of senescence), and a higher functional avidity. These 

attributes relate to each other and constitute the basis of an effective control of HIV replication by 

CD8+ T-cells. Moreover, CD8+ T-cell functional avidity was found to correlate with patients’ 

proviral load. These findings represent a major step forward into our comprehension of CD8+ Tcell 

efficacy in virus infections and cancers, and are central for the evaluation of T-cell vaccine 

candidates. 


48. MULTIDIMENSIONAL SCALING: 

UNREVEALING RELATIONAL GEOMETRIC 

PATTERNS IN TRANSCRIPTOME BIOLOGY 

Christophe Bécavin, Arndt Benecke 

Institut des Hautes Études Scientifiques, Bures-sur-Yvette. 

Multidimensional scaling (MDS) is a well-known technique of data analysis, often used in 

psychology, sociology and economy [1], but – given the complications to adopt it to highdimensional 

spaces – not currently used in genomics. This method allows construction of a 

geometric graph in N-dimensions, based on a measure of “distance”, such as correlation, between 

data. The construction quality of the N-dimensional space is evaluated by re-calculating the 

differences between distances in the geometric space, and the original distances in the input data. 

This difference is called the stress; a good MDS algorithm will tend to minimize this stress. 

We have developed two MDS algorithm, both used with distances between biological conditions 

as measured by micro-array experiments. To minimize the stress we use a physical modelling of 

our data, each pair of points is connected by a spring. This physical system of springs converges 

to an equilibrium state with minimal stress.The first algorithm we have developped is a 3D 

multidimensional scaling method. We demonstrate usage of this technique on a problem of gene 

signature definition for regulatory T-cells and we directly observe and compare, in 3D, patterns 

between different biological conditions. The second MDS algorithm we develop uses an N-1dimensional 

space, with N being the number of data points. Applicability of this latter approach will 

be demonstrated using transcriptome measures from a large HIV patient study (ANRS 118) which 

we analyze using this technology. 

[1] Borg, I., and Groenen, P. (1997) Modern Multidimensional Scaling, Springer, New York. 


49. OPTIMAL CENTRAL MEMORY CD4+ T CELL 

FUNCTIONS IN HIV CONTROLLERS 

(ANRS EP36 STUDY) 

Benoît Vingert 1 , Santiago Perez-Patrigeon 1 , Olivier Lambotte 2,3 , Simon Potter 1 , 

Christine Lacabaratz 2 , Martine Sinet 2 , Faroudy Boufassa 4 , Jean-François 

Delfraissy 2,3 , Alain Venet 2 & Jacques Thèze 1 and Lisa A. Chakrabarti. 

1 Unité d'Immunogénétique Cellulaire, Institut Pasteur, Paris. 2 INSERM U802, and 

3 Service de Médecine Interne et Maladies Infectieuses, AP-HP, Hôpital de Bicêtre, and 

4 INSERM U822, Le Kremlin-Bicêtre. 

HIV controllers are rare individuals who spontaneously control HIV-1 replication in the absence of 

antiretroviral treatment. Study subjects, who had controlled HIV replication for over 10 years, were 

recruited through the National Observatory for HIV Controllers established by ANRS. 

In an initial study, we analyzed HIV-specific CD4+ T cell responses in 11 HIV Controllers by 

intracellular cytokine staining. In spite of their very low antigenic load, HIV Controllers maintained 

strong HIV-specific responses, with half of the responding cells producing IL-2. In contrast, IL-2 

producing cells were virtually absent in viremic patients and remained few in HAART-treated 

patients. Of note, Controllers were the only group that showed significant cytokine production in 

the central memory (CM) CD4+ T cell subset (CD45RA-CCR7+), with a predominant IL-2 secretion 

profile. 

To further characterize CM function, we analyzed CD4+ T cell proliferation in response to 

immunodominant Gag peptides. HIV controller CD4+ T cells showed particularly efficient 

proliferative responses to the Gag293-313 peptide, while these responses were less frequently 

observed for viremic and HAART-treated patients. We have developed class II tetramer binding 

assays to further monitor these responses ex vivo. In addition, we have measured the migratory 

capacity of CM CD4+ T cells in responses to CCR7-binding chemokines, using whole blood 

chemotaxis assays. HIV controllers CM cells showed efficient CCR7-dependent migration, while 

these responses were impaired in viremic patients. 

Thus, CM CD4+ T cells from HIV controllers show optimal proliferative and chemotactic functions, 

which may contribute to the long-term maintenance of antiviral immune responses. 


50. USE OF THE INNATE IMMUNITY TOWARDS 

HIV-1 : PRODUCTION OF A SOLUBLE 

MULTIMERIC HETEROCHIMERA PROPERDIN- 

CD4.D1D2 TO CREATE A PLATFORM FOR 

ACTIVATION OF COMPLEMENT ALTERNATIVE 

PATHWAY AT THE SURFACE OF HIV-1 OR HIV- 

INFECTED CELLS, TRIGGERING THEIR LYSIS 

Xavier Dervillez, Jacques HM Cohen & David Klatzmann 

UMR7087 CNRS, groupe Vaccination, Paris. 

Multivalence enhances the biological stability, the effector function as well as the immunogenicity 

of peptides/proteins expressed under multimeric form. We have thus developed by molecular 

engineering a multipurpose biotechnological tool based on the use of the cDNA encoding the C4b 

binding protein c-terminal α-chain used a domain for protein multimerisation (MD). Associated 

downstream to a given gene encoding a therapeutic protein, the MD allows the corresponding 

protein to be spontaneous expressed from eukaryotic cells under recombinant soluble multimeric 

form. With the use of this technology, we are capable of producing recombinant soluble 

homomultimeric, as well as heteromultimeric bi-functional therapeutic molecules, associating a 

multimeric effector moiety to a target moiety. 

This technology may have relevant applications in HIV-1 infection. Given the successive failures of 

vaccine strategies trying to enhance the specific adaptive antibody neutralising response against 

HIV, naturally elicited in some rare HIV-1 infected individuals, partly due to the emergence HIV-1 

variants escaping efficient antibody immune response, we propose alternatively in the present 

project to overcome this problem by using the innate immunity and by redirecting specifically the 

Complement activation towards HIV-1 specific target membrane-surfaces (HIV-1 viruses as well as 

HIV-infected cells). This would consecutively lead to lysis of HIV-virus/infected-cell through the 

formation of membrane-attack complexes. As a tool targeting HIV, we will produce a soluble 

recombinant heteromultimeric bi-functional molecule, whose (i) effector moiety is represented by 

Properdin, the only known positive regulator of Complement activation - only active as a 

membrane-bound form - and (ii) anchoring moiety represented by the D1 and D2 domains of CD4. 

We will first check in vitro whether the multi-Properdin-CD4D1D2 recombinant heteromultimers 

specifically activates the complement cascade - followed by cell lysis - at the surface of target cells 

expressing the native trimeric gp120-gp41 HIV-1 envelope. 


51. L’INFECTION PAR LE VIH-1 INDUIT 

L’EXPRESSION DE NKG2C SUR LES CELLULES T 

VD1+ : EFFET DÉLÉRÈRE SUR LES T CD4+ 

INFECTÉES 

Fausther Bovendo H, Wauquier N, Cherfils-Vicini J, Cremer I, Debre P, Vieillard V. 

INSERM U543, Laboratoire d’Immunologie Cellulaire et Tissulaire du Prof Debré 

Les cellules T gamma delta ne représentent que 1-5% des lymphocytes T (LT) du sang 

périphériques et sont constituées majoritairement de cellule T Vd2+, les cellules T Vd1+ 

représentant moins de 10% des cellules T gamma delta. Elles présentent des caractéristiques 

phénotypiques et fonctionnelles communes avec les cellules NK. Au cours de l’infection VIH, bien 

que la proportion de cellules T gamma delta reste constante, la proportion de cellules T Vd1 

augmente, pour devenir majoritaire. Nous avons étudié l’expression des principaux marqueurs NK 

sur les cellules T gamma delta et nous avons observé que l’expression des récepteurs de type Clectines 

était fortement modulée au cours de l’infection; Ainsi, sur les cellules Vd1+, l’expression 

du récepteur inhibiteur NKG2A est fortement diminuée alors que sa contrepartie activatrice 

NKG2C est très significativement augmentée. Ces cellules Vd1+ NKG2C+ sont fortement 

cytotoxiques envers les cellules exprimant HLA-E, le ligand de NKG2C, dont des LT CD4+ 

infectées par le VIH qui sur-expriment ce ligand. Cette cytotoxicité est fortement inhibée en 

présence d’anticorps anti-NKG2C. Ainsi, Les cellules Vd1+ pourraient jouer un rôle clef dans la 

déplétion des cellules T CD4 au cours de l’infection VIH mais également dans la lyse des cellules 

réservoirs T CD4+ infectées par le VIH-1. 


52. MISE AU POINT ET VALORISATION DE 

TESTS ADAPTES POUR LE DOSAGE DES 

ANTICORPS SECRETOIRES DANS L’INFECTION 

PAR LE VIH 

Bertrand Canard, Jean-Jacques Pin, Christian Genin. 

Groupe Immunité des Muqueuses et Agents Pathogènes (GIMAP) – Faculté de Médecine 

– Université Jean Monnet – Saint Etienne 

Les muqueuses représentent la principale voie de contamination par le VIH. La prise en charge du 

VIH par l’intermédiaire de la gp120 se fait au niveau de la muqueuse par les cellules de 

Langerhans (langerine) et au niveau de la sous-muqueuse par les cellules dendritiques dermiques 

(DC-SIGN). 

Pour nous permettre d’étudier les interactions entre le virus et son hôte, nous avons mis en place 

un test ELISA spécifique de chacune des voies d’entrées du virus. 

Dans un premier temps, nous avons étudié par cytométrie en flux les caractéristiques spécifiques 

à chaque liaison gp120/langerine et gp120/DCSIGN. 

Dans un second temps, nous avons cherché à reproduire cette liaison sur un test ELISA en 

multipliant les stratégies (coating, présentation de l’antigène...) 

Finalement, nous avons pu mettre au point deux tests ELISA permettant de doser l'inhibition de la 

liaison de la gp 120 soit sur DC-SIGN soit sur langerine. Ces tests seront utilisés pour étudier les 

différentes cohortes de sujets VIH-séropositifs et séronégatifs fortement exposés. 


53. CARACTERISTIQUES DES LTCD8 

SPECIFIQUES DU VIH DES PATIENTS HLA B57 

AU COURS DE LA PRIMO-INFECTION 

Isabelle Girault 1 , Caroline Mougel 1* , Camille Lécuroux 1 , Alejandra Urrutia 1 , 

Martine Sinet 1 , Alain Venet 1 , et la Cohorte ANRS CO6-PRIMO 

INSERM U 802, Paris XI, Hôpital Bicêtre, France 

L’allèle HLA B57 est associé à un pronostic favorable de l’infection par le VIH, il est d’ailleurs surreprésenté 

chez les patients contrôleurs du VIH (HIC). Nous avons évalué dès la primo-infection 

(PI), les caractéristiques des LT CD8+ spécifiques du VIH chez des patients B57 en les comparant 

aux autres patients explorés en PI ainsi qu’aux patients HIC B57 afin de définir leur rôle éventuel 

dans le contrôle précoce de la charge virale. 

Dans la cohorte PRIMO-CO6, les 9 patients B57 ont une charge virale à l’inclusion plus faible que 

celle des autres patients PI (3.6±0.4 log10 copies/mL vs 5.0±0.9) et un nombre de CD4 plus élevé 

(772±99 cellules/µL vs 606±42). 

Tous les patients PI B57 ont des LT CD8+ spécifiques du VIH capables de sécréter de l’IFN-γ dès 

J0 contre 76% chez les autres patients PI. Cependant, les fréquences de cellules productrices 

sont similaires (1448 SFC/10 6 PBMC chez les patients PI B57 [IC : 912-1985] vs 1409 [152- 

2665]). Les autres aspects qualitatifs de la réponse T CD8+ spécifique (profil cytokinique, 

prolifération, avidité) ainsi que les paramètres d’activation ne diffèrent pas sensiblement. 

Chez les patients PI B57, la majorité de la réponse IFN-γ (74%) est associée aux peptides B57restreints 

et notamment au peptide Gag-TW10. Ce peptide est rarement reconnu chez les HIC 

B57 (

54. UNCOUPLING OF IL-7 SIGNALING 

RESPONSES IN HIV INFECTION : INCREASED 

JAK/STAT ACTIVATION AND DECREASED BCL- 

2 INDUCTION (ANRS EP33 STUDY) 

Olivier Juffroy, Florence Bugault, Olivier Lambotte, Jean-Paul Viard, Loïc Niel, Anne 

Danckaert, Jean-François Delfraissy, Jacques Thèze, and Lisa A. Chakrabarti 

Unité d’Immunogénétique Cellulaire, Institut Pasteur 

Background: IL-7 and IL-2 are the major cytokines that control CD4+ T cell homeostasis. Both 

cytokines activate the JAK/STAT5 pathway and induce the expression of the survival factor Bcl-2. 

Since HIV is known to perturb CD4+ T cell homeostasis, we set to investigate the effect of HIV 

infection on cytokine-dependent signal transduction. 

Methods: PBMC from healthy blood donors and HIV-infected patients with viral loads >10,000 

copies/ml (n=14) were tested for phospho-STAT5 and Bcl-2 responses to IL-7 and IL-2 by flow 

cytometry. 

Results: Basal levels of pSTAT5 were increased in naive and memory populations (p

55. STUDY OF IMMUNOPREVALENCY AND 

STABILITY OF THE HR1/HR2 COMPLEX OF THE 

GLYCOPROTEIN 41 (GP41) SUBUNIT OF 

HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE 1 

(HIV-1) 

Amadou Koné, Nadine Vincent and Christian Genin 

GIMAP : Groupe Immunité des Muqueuses et Agents Pathogènes 

Faculté de médecine de Saint Etienne 15, rue Ambroise Paré 42000 Saint Etienne 

HIV-1 envelope glycoprotein gp160 is formed by two subunits: gp120, responsible for attachment 

to the CD4 receptor and the CCR5/CXCR4 coreceptors of the cellular membrane, and gp41 which 

is responsible for virus-cell membranes fusion. The gp120/cellular receptors interaction induces a 

conformational change of the gp41 which forms an intermediate fusion core due to the complex 

formation between its two main regions: HR1 (Heptad Repeat 1) and HR2 situated next to the 

viral transmembrane domain. The HR1/HR2 complex formation is an essential step in bringing 

together viral and cellular membranes in the fusion process. The treatment of HIV-1 infected 

patients is until now the association of drugs anti protease and inhibitor of transcriptase inverse of 

virus. It has been demonstrated that peptides inhibiting the HR1/HR2 complex formation are 

powerful antiretroviral molecules. The current challenge against HIV infection remains the 

development of vaccinal strategies to protect subjects. The fusion complex may represent a 

valuable target for neutralizing antibodies. 

HR1 and HR2 regions were cloned from various HIV strains gp160 gene into the histag system 

vector. Western blot analysis show that the HR1 and HR2 proteins form isomers. HR1/HR2 

complex formation is tested with various recombinant HR and/or synthetic peptides HR1 or HR2. 

First we show that the HR1/HR2 complex is recognised by most serum of HIV infected patients. 

We identified several fusion complexes highly stable. We are using these recombinant complexes 

to immunise mice to generate monoclonal antibodies. We hope that these antibodies help us to 

more understand the fusion process. We will test the ability of these antibodies to prevent HIV-1 

infection in the P3 facility. 


56. SUIVI IMMUNO-VIROLOGIQUE DES 

PATIENTS CO-INFECTES VIH1 ET VIH2 

Landman R*,Gerbe J*, Damond F**, Yeni P*, Brun-Vezinet F**, Matheron S* 

* SMIT, ** Virologie, Hôpital Bichat Claude Bernard, Paris 

Contexte : 

En France en 2006, 0,1% des nouvelles infections sont des co-infections VIH1/VIH2. L’histoire 

naturelle et l’évolution sous traitement est peu documentée. 

Méthode : 

Parmi 3700 patients infectés par VIH, 36 sont co-infectés VIH1/VIH2. 23 patients sont évaluables 

dont 6 femmes enceintes traitées pour PTME exclues de l'analyse descriptive. 

Résultats : 

Les 17 patients analysés sont âgés en moyenne de 38,1 + 9,4 ans. 

Au dépistage, les CD4 des 6 patients non traités sont à 455/mm3, l'ARN-VIH1 à 2,3 log et l'ARN- 

VIH2 indétectable (n=6/6). Après un suivi médian de 3,6 années, les CD4 sont à 577/mm3, l’ARN- 

VIH1 à 2,7 log et l’ARN-VIH2 indétectable (n=6/6). 

11 patients ont reçu un premier traitement antirétroviral incluant au moins 2 NRTIs et 1 IP (LPV/r 

9/11) ou 3 NRTIs (1/11). Les CD4 et l’ARN-VIH à J0 du traitement sont respectivement à 

130/mm3, 4,6 log pour VIH1 et < 2,0 log chez 7/9 patients pourVIH2. Après une durée médiane de 

traitement de 2,6 ans, les CD4 sont à 338/mm3, l’ARN-VIH1 et VIH2 indétectable chez 10/11 

patients. 

Le génotypage de résistance du VIH2 montre : RT (n=1) : Q151M + M184V, protéase (n=2) : I54M 

+ I82F et V47A. 

Aucune progression clinique n'a été observée au cours du suivi. 

Conclusion : 

La co-infection VIH1/VIH2 reste rare (< 1%). Malgré une réponse immuno-virologique favorable 

s’apparentant à celle observée au cours des mono-infections VIH1, la sélection de mutations de 

résistance pour VIH2 souligne l’importance du choix de molécules efficaces pour les 2 virus. 


57. EXISTENCE DE LT CD8+ SPECIFIQUES DU 

VIH DE TYPE EFFECTEUR CHEZ LES PATIENTS 

CONTROLANT SPONTANEMENT 

LA REPLICATION VIRALE 

Camille Lécuroux, Alejandra Urrutia, Isabelle Girault, Olivier Lambotte, Cécile 

Goujard, Martine Sinet, Alain Venet, et l’ANRS CO6-PRIMO Cohort et l’ANRS EP36- 

HIC Study Group 

INSERM U 802, Paris XI, Hôpital Bicêtre, France 

Les réponses T CD8 sont essentielles au cours des infections virales. Les réponses de type 

effectrice permettent idéalement un contrôle de la réplication virale. Quand celui-ci est achevé les 

réponses mémoires permettent une surveillance avec réactivation en présence de virus. Nous 

avons comparé les caractéristiques des réponses T CD8 VIH-spécifiques dans 2 situations de 

contrôle de la réplication : des patients contrôlant spontanément l’infection (HIV-Contrôleurs, HIC, 

ANRS EP36) et des patients contrôlés après un c-ART institué dès la primo-infection (c-ART-PI, 

Cohorte ANRS CO6-PRIMO) . 

Dans ces deux groupes, les CD8 + spécifiques du VIH (détectés par multimères HLA cl.I) 

présentent des capacités de prolifération en test CFSE (HIC : 66%±26% Penta + CFSELow ; c-ART : 

62%±41% Penta + CFSELow). Ces résultats s’accompagnent d’une forte expression du récepteur de 

l’IL-7 (CD127) sur les CD8 + anti-VIH (HIC : 60%±26% ; c-ART-PRIMO : 48%±23%) caractérisant 

une réponse CD8 + de type mémoire. Les CD8 + anti-VIH des c-ART-PRIMO ont un profil 

phénotypique de cellules au repos (CD38 - , HLA-DR - , Bcl-2 + ) et un profil de différenciation 

intermédiaire CD27 + CD45RA +/- . En revanche, les CD8 + anti-VIH des HIC ont un profil d’activation 

discordant (CD38 - HLA-DR + ) et de différenciation hétérogène (CD27 +/- CD45RA +/- ) reflétant la 

présence d’effecteurs, confirmée par une production élevée d’IFN-γ (5842±4827 SFC/10 6 PBMC) 

alors qu’elle est faible chez les c-ART-PRIMO (912±1392 SFC/10 6 PBMC). 

En conclusion, dans les deux groupes de patients, il existe une réponse CD8+ de type mémoire 

qui n’est généralement pas observée chez les patients virémiques. En revanche, une forte 

réponse effectrice est observée chez les HIC alors que celle-ci reste faible chez les patients traités 

dès la PI. 


58. IMPACT OF NK-DC CROSSTALK ON THE 

DESTRUCTION OF DC - INFLUENCE OF 

HIV INFECTION 

Marie-Thérèse Melki, Héla Saidi, Marie-Lise Gougeon 

Institut Pasteur, Unité Immunité antivirale, Biothérapies et Vaccins, 25-28 rue du Dr. Roux, 

75015 Paris 

Introduction : HIV infection is associated with a decrease in the number of myeloid and 

plasmacytoid DCs, which harbour a semi-mature phenotype that contributes to the alteration of 

their functions. Since the fate of DC can be controlled by NK cells, we addressed the question of 

the impact of NK–DC crosstalk on DC maturation and death, and the influence of HIV. 

Methods : Immature DCs (iDC) were prepared from healthy donors’ sorted monocytes, cultured for 

6 days in the presence of IL-4 and GM-CSF. In some experiments, DC were infected with R5 

HIV(1ng/ml of p24). Coculture experiments with autologous purified aNK cells (activated by 

PHA+IL-2) were performed at various NK:DC ratios. DC Maturation stage and apoptosis were 

measured by FACS with appropriate tests. 

Results : aNK-iDC crosstalk induced very rapid apoptosis of uninfected iDCs at 5:1 ratio, involving 

both the perforin and the TRAIL pathways. Following HIV infection of iDCs with R5 virus, aNKdependent 

DCs apoptosis was dramatically decreased. Increased survival of infected iDC may be 

the consequence of resistance of DC to NK cytotoxicity or to NK-induced maturation. While 

infected DCs were more susceptible to TRAIL-induced death, crosstalk with aNK induced their 

maturation (HLA-DR high , CD86 high , DC-SIGN + ). These observations suggest that NK cells induce 

the survival of HIV-1 infected DCs by promoting their maturation. 

Conclusion: We showed that aNK-DC crosstalk has opposite outcomes (apoptosis vs maturation 

and survival) depending on whether DCs are infected or not. Thus NK cells may contribute to the 

constitution of HIV reservoirs in DCs. 


59. ALTERED CHEMOTACTIC RESPONSES OF 

CD4 T CELLS IN HIV INFECTION 

Santiago Perez-Patrigeon, Benoît Vingert, Olivier Lambotte, Jean-Paul Viard, Jean- 

François Delfraissy, Jacques Thèze, and Lisa A. Chakrabarti 

Unité d’Immunogénétique Cellulaire, Institut Pasteur 

Background: CCR7-dependent T cell recirculation is key for the initiation of immune responses by 

naive cells and for the maintenance of immunological memory by central memory cells (TCM). We 

tested the possibility that CD4 T cell migratory properties are altered by HIV infection. 

Methods: Studied groups: (1) viremic patients with viral load >10,000 HIV RNA copies/ml (2) 

treated patients with viral load

60. ACUTE HEPATITIS C INFECTION IN 

HIV-INFECTED PATIENTS: LOW RATE OF 

SPONTANEOUS CLEARANCE AND WEAK 

PERIPHERAL T CELL RESPONSES TO 

HEPATITIS C VIRUS ASSOCIATED WITH 

HIV-RELATED CD4 DEFICIENCY 

Aurélie Schnuriger, Stéphanie Dominguez, Marguerite Guiguet, Assia Samri, Zineb 

Ouazene, Pierre-Marie Girard, Laurence Slama, Anne Simon, Marc-Antoine Valantin, 

Vincent Thibault, Brigitte Autran, ANRS HC EP21 study group 

Laboratoire de virologie, UPRES EA2387, Hôpital Pitié-Salpêtrière, Université Pierre et 

Marie Curie-Paris 6, Paris, France 

Background: Our aim was to explore the onset of specific immunity to hepatitis C virus (HCV) 

during acute HCV infection in HIV co-infected patients, in connection with viral markers and 

spontaneous evolution or therapeutic efficacy. 

Methods: Patients without prior HCV infection and a controlled HIV infection were enrolled for 

acute hepatitis C and followed-up over 15 months. PEG-interferon-α plus ribavirin were proposed 

if HCV persisted at M3. Viral characteristics and HCV-specific T cell responses 

(lymphoproliferation, ELISpot and intracellular cytokine staining assays) were assessed. 

Results: 32 acutely HCV-infected HIV+ patients were prospectively followed-up. At M3, 3 patients 

(9%) showed spontaneous recovery (SR). On the 22 patients initiating treatment, HCV RNA was 

undetectable after 4 weeks (rapid virologic response RVR) in 8 among 19 documented (42%) and 

at M15 (sustained virologic response SVR) in 9 among 12 documented (75%). HCV genotypes 

were predominantly 4 and 1. At inclusion, HCV-specific proliferative responses were detected in 

only 32% of cases, in association with HIV-p24-specific responses and higher CD4 counts 

(p=0.02). HCV-specific IFNγ production wad detectable in 80% of cases but at low intensity ex 

vivo. HCV-specific stimulation amplified mainly CD4 T cells producing IFNγ and IL-2. HCV-specific 

immune responses were stronger in SR patients as compared with patients without RVR 

(p=0.009). 

Conclusion: Acute HCV infection in HIV co-infected patients is characterized by a low rate of SR 

and weak HCV specific immunity mediated mostly by effector-memory CD4 T cells. The HIVinduced 

immune alterations affect onset of HCV-specific immunity, but not anti-HCV treatment 

efficacy. 


61. UNINTEGRATED HIV-1 PROVIDES AN 

INDUCIBLE AND FUNCTIONAL RESERVOIR IN 

UNTREATED AND HIGHLY ACTIVE 

ANTIRETROVIRAL THERAPY-TREATED 

PATIENTS 

Gaël Petitjean a , Yassine Al Tabaa a , Edouard Tuaillon a , Vincent Baillat b , Jacques 

Reynes b and Jean Pierre Vendrell a . 

Laboratoire de Virologie, Hôpital Lapeyronie, Avenue du Doyen Gaston Giraud a , 

Département des Maladies Infectieuses et Tropicales b , Hôpital Gui de Chauliac, Avenue 

Bertin Sans, 34295 Montpellier, France. 

The presence of HIV-1 preintegration reservoir was assessed in an in vitro experimental model of 

latent HIV-1 infection, and in patients treated or not with highly active antiretroviral therapy 

(HAART). 

In resting CD4+ T lymphocytes latently infected in vitro with HIV-1, we demonstrated that the 

polyclonal activation induced a HIV-1 replication, which could be prevented by the use of an HIV-1 

integrase inhibitor. We also showed that this reservoir was labile since the rescuable HIV- 1antigens 

production from unintegrated HIV-1 genomes declined over time. These data confirm that 

our experimental approach allows the characterization of a functional unintegrated HIV-1 reservoir. 

We then explored the preintegration reservoir in HIV-1-infected patients. This reservoir was 

detected in 11 of 12 untreated patients, in 4 of 10 sustained responders to HAART, and in one 

incomplete responder. This reservoir was also inducible, labile, and anti-HIV-1 integrase drug 

inhibited its induction. Finally, this reservoir was associated with the presence of spontaneous HIV- 

1 antigens producing CD4+ T cells in blood from 3 of 3 untreated patients and 2 of 2 sustained 

responders to HAART harboring a preintegration reservoir. 

This preintegration phase of HIV-1 latency could be a consequence of the ongoing viral replication 

in untreated patients and of a residual viral replication in treated patients. 


62. PRODUCTION AND CHARACTERIZATION 

OF HUMANIZED MONOCLONAL IGA 

ANTIBODIES DIRECTED TO HIV-1 ENVELOPE 

GLYCOPROTEIN 

Vincent N 1 , Cogné N 2 , Déloménie C 2 , Cogné M 2 , Chanut B 1 , Koné A 1 , Malvoisin E 1 

and Genin C 1 

1 Groupe Immunité des Muqueuses et Agents Pathogènes (GIMAP), EA 6030, Faculté de 

Médecine, Saint-Etienne. 2 Immunologie, UMR CNRS 6101, Faculté de Médecine, 

Limoges. 

HIV is a pathogen transmitted at mucosal surface. It has been shown that IgAs are able to 

neutralize HIV in vitro. The aim of our work was to develop monoclonal IgA antibodies directed to 

HIV-1 envelope glycoprotein gp160 and to study their biological properties. Unit CNRS 6101 has 

developed mouse models for producing humanized monoclonal IgA1 antibodies. Constant region 

of heavy and light chains of IgA1 produced by the transgenic mice are from human origin. We 

have used the expression system pMAL-c2E to generate recombinant maltose binding protein 

(MBP) fusion proteins containing fragments of the HIV-1 envelope protein. Wild-type HIV-1 gp160 

genes were used to generate the constructs. The MBP-env proteins were validated by recognition 

by monoclonal antibodies described in the literature. Transgenic mice were immunized with 

various gp160 recombinant proteins and hybridoma were obtained after fusion of splenic cells with 

Sp2o cells and appropriate culture conditions. Several clones were identified as positive by 

immunofluorescence on HeLa cells infected with vaccinia virus expressing HIV-1 gp160. Two 

humanized IgA monoclonal antibodies were further characterized. IgA H7 is directed to the 

gp120/gp41 cleavage site. IgA 1G12 is directed to the HR1 region of gp41. Both antibodies inhibit 

HIV-1 infection. IgA H7 inhibits SupT1 infection by LAI with IC50 of 1 µg/ml. Also, IgA H7 prevents 

PBMC infection by Ba-L HIV-1 strain and by several HIV-1 primary isolates. IgA 1G12 inhibits 

SupT1 infection by LAI with IC50 of 5 µg/ml. 


Vaccin 


63. DEVELOPPEMENT DE MIMOTOPES DE 

L'ANTICORPS NEUTRALISANT B12 

Toufik Abache, Gaëlle Debret, Olivier Combes, Loïc Martin, Philippe Cuniasse et 

Pascal Kessler. 

CEA Saclay, DSV, iBiTec-S, SIMOPRO (Service d’ingénierie moléculaire des protéines), 

Gif-sur-Yvette, F-91191, France 

La panoplie de moyens de résistance développée par le VIH-1 explique l'absence de vaccin 

efficace contre ce virus. Cette résistance est en partie liée à l'instabilité structurale de la gp120, 

protéine virale la plus accessible aux anticorps à la surface du virus. 

Cependant l’identification d’anticorps neutralisants chez certains séropositifs et la mise en 

évidence du rôle protecteur de ces anticorps par transfert passif chez le macaque lors 

d’expériences de challenge viral avec le SHIV, ouvrent de nouvelles perspectives dans la 

réalisation d’un vaccin anti-VIH. Récemment la publication de la structure du complexe entre la 

gp120 et un anticorps neutralisant (mAb b12) a permis de définir précisément l'épitope 

correspondant à la surface de la gp120. 

Notre objectif est de transférer ce motif antigénique sur des petites protéines de structure stable, 

afin de le présenter au système immunitaire, et d'induire ainsi la production d'anticorps 

neutralisants de type b12. La recherche de ces plates-formes protéiques, susceptibles de porter 

tout ou partie de la surface antigénique, est effectuée grâce à un logiciel bioinformatique 

développé dans notre service : STAMPS (Search for Three dimensional Atom Motifs in Protein 

Stuctures). Ce programme explore systématiquement les structures 3D de la banque de données 

de structures des protéines (PDB), afin d’identifier des motifs tridimensionnels de résidus, 

topologiquement équivalents au motif antigénique. Nous sommes actuellement en train de 

produire ces protéines hybrides par voie recombinante. Nous réaliserons ensuite des tests de 

liaisons à l'anticorps et de neutralisation de pseudovirus, afin de déterminer leur potentialité en 

tant que candidats-vaccins. 


64. WITHOUT MUCOSAL ADJUVANT, 

VIROSOME-GP41 PEPTIDE FROM THE 

MEMBRANE PROXIMAL REGION CAN ELICIT 

PROTECTIVE MUCOSAL IGA IN VACCINATED 

MACAQUES 

Morgane Bomsel 1 , Daniela Tudor 1 , Anne-Sophie Drillet 1 , Mario Amacker 2 , Rinaldo 

Zurbriggen 2 , Gilles Devillers 3 and Sylvain Fleury 4 . 

1 Institut Cochin, Paris, 75014 Cedex, France; 2 Pevion Biotech AG, CH 3018 Bern, 

Switzerland; 3 BD Medical, Grenoble, 38801 Cedex France; 4 Mymetics Corp., CH 1260 

Nyon, Switzerland. 

Rational: HIV transmission generally occurs through sexual contacts. Therefore, sterile immunity 

might be best achieved by developing a vaccine that promotes a mucosal immune response 

targeting the very early events of HIV infection at mucosal sites. We therefore evaluated a vaccine 

candidate that would elicit a focused mucosal IgA response in genital and rectal compartments. 

Methods: Virosomes are stable biosynthetic lipidic vesicles already use to deliver several vaccine, 

widely market approved with excellent safety profile. Importantly, adjuvant is not required for 

triggering the mucosal response. Gp41 peptides from the conserved membrane proximal region 

(MPR) of HXB2 (R5 clade B) were grafted onto virosome surface for mimicking HIV membrane. 

Female macaques (n=16 Macaca mulata) immunized by the intra-nasal (i.n.) and/or i.m. route 

were investigated over six months with longitudinal harvesting of biological secretions. 

Results: Using the i.n or i.m route, similar levels of specific anti-gp41 mucosal antibodies, IgA and 

IgG, were detected into cervico-vaginal secretions, while rectal lavages contained mostly IgA. 

Antibody titer did not correlate with inhibitory activity but affinity maturation was the key issue. 

Vaginal and rectal secretions blocked up to 90% in vitro HIV transcytosis of primary R5 clade B 

and C viruses and infection of CD4+ cells. The inhibitory activity is mostly due to IgA, supporting 

our hypothesis that gp41 MPR is more adapted for triggering protective mucosal IgA. A novel set 

of animals has been vaccinated with a combination of 2 virosomes, coupled either to MPR or a 

trimeric Gp41 construct and will be mucosally challenged. 


65. MIME DE CD4, CANDIDAT MICROBICIDE 

ANTI-VIH : LA ROUTE VERS LE TEST ANIMAL 

CHEZ LE MACAQUE 

Morellato Laurence 1 , Van Herrewege Yven 2 , Descours Anne 1 , Shattock Robin 3 , 

Vanham Guido 2 et Kessler Pascal 1 et Martin Loïc 1 . 

1 CEA, iBiTecS, SIMOPRO, Gif sur Yvette, F-91190, France. 

2 Institute of Tropical Medicine, University of Antwerp, Antwerp, Belgium. 

3 Centre for Infection, St. George's University, London, UK. 

La recherche d'un agent microbicide contre le VIH représente un enjeu important de prévention 

contre cette maladie. Outre les inhibiteurs de la reverse transcriptase inverse et les composés de 

type détergents, de nouvelles classes d'agents visant spécifiquement les étapes d'entrée du virus 

pourraient être d'un grand apport pour cette prophylaxie dans le cadre des "nouvelles technologies 

de prévention". 

Dans ce but, en 2003, nous avons développé sur une plateforme structurée et stable un peptide 

mime de CD4, dénommé CD4M33 qui présentait une affinité sub-nanomolaire pour différentes 

enveloppes gp120. 

A l’aide de diverses approches, dont notamment l'analyse structurale du complexe CD4M33gp120-17b, 

cette mini-protéine a été progressivement optimisée. Trois voies ont été suivies: la 

première a utilisé la chimie combinatoire, la seconde a cherché à accroitre l'avidité par 

multimérisation, la troisième s'est focalisée sur une recherche d'optimisation de l'interaction avec 

la poche hydrophobe "Phe 43" de la gp120. Le gain de l'activité antivirale a été suivi tout au long 

de ce processus d'optimisation par différents tests : des tests de liaison par ELISA, des tests 

cellulaires sur différentes co-cultures et des tests tissulaires. La haute affinité du meilleur mime du 

CD4 (M48_U1) lui confère la capacité de neutraliser un large échantillon de virus (sous-types B, C 

et E) avec une IC50 comparable à celle du TMC120 (inhibiteur non-nucléosidique de la 

transcriptase inverse). 

Ces résultats ainsi que l'absence apparente de toxicité du M48_U1 nous conduisent à 

entreprendre le test de protection dans le modèle macaque. 


66. MISE AU POINT DE CANDIDATS VACCINS 

CONTRE LE VIH-1 COMPOSES DE PLUSIEURS 

PROTEINES D’ENVELOPPE STABILISEES PAR 

UN MIME DU CD4 

Grégoire Martin 1 , Olivier Combes 1 , Stéphane E. Basmaciogullari 2 , Serge Benichou 2 , 

Guido Vanham 3 , Pascal Kessler 1 et Loïc Martin 1 

1 CEA, iBiTecS, SIMOPRO, Gif sur Yvette, F-91190, France. 

2 Institut Cochin (INSERM U567/CNRS UMR 8104), Département Maladies Infectieuses 

3 Institute of Tropical Medicine, University of Antwerp, Antwerp, Belgium. 

La principale difficulté d’un vaccin contre le VIH-1 réside dans la forte hétérogénéité de la protéine 

Env. Dans le but d’induire une réponse humorale anti-Env efficace, nous avons mis au point des 

candidats vaccins composés de différentes glycoprotéines d’enveloppe complexées à un mime du 

CD4. La liaison du mime du CD4 sur Env permet la stabilisation de la protéine virale dans une 

conformation qui expose des régions conservées, accroissant ainsi la liaison des anticorps CD4induits 

(CD4i). Le choix de l’utilisation de plusieurs glycoprotéines d’enveloppe vise à induire des 

anticorps neutralisant vis-à-vis d’un large spectre de virus. 

Nous avons réalisé un couplage covalent spécifique du mime de CD4 CD4M48 sur la gp120 et la 

gp140. Un rendement de couplage élevé de l’ordre de 80 % a été obtenu pour un échantillonnage 

de dix glycoprotéines d’enveloppe appartenant aux clades B, C et F. Les complexes covalents 

formés sont fortement reconnus par les anticorps CD4i, X5 et 48D ainsi que par le corécepteur 

CCR5. Nous avons réalisé plusieurs immunisations chez le rat et le lapin avec la gp120YU2 (clade 

B) et les gp140ZM96 (clade C) et gp140Br29 (clade F) complexées ou non avec un mime du CD4. 

Les anticorps induits reconnaissent un large panel de gp120 ou de gp140 appartenant aux clades 

B, C, D et F. De plus, les complexes covalents gp120/mime du CD4 induisent 10 à 25 fois plus 

d’anticorps CD4i que la gp120 seule. Enfin, l’activité de neutralisation des anticorps vis-à-vis 

d’isolats primaires hétérologues est en cours d’analyse. 


67. COMPARAISON DE DIFFERENTES 

STRATEGIES DE PRIMO- 

VACCINATION/RAPPEL UTILISANT UN 

VECTEUR VIRAL (RMVA) ET DES 

NANOPARTICULES DE POLY(ACIDE LACTIQUE) 

S. Munier, D. Lamalle-Bernard, W. Xu, P-Y Durand, M-H. Charles, T. Delair, & B. 

Verrier 

CNRS URA 1930, Lab. Virologie moléculaire et vectrologie, Institut Pasteur, Paris. 

La recherche pour le développement d'un vaccin contre le VIH s'oriente vers de nouveaux 

concepts et combinaisons vaccinales. Le but étant d'induire une réponse humorale et cellulaire 

fortes et durables. Nous nous sommes donc intéressés à une stratégie de primovaccination/rappel 

combinant un vecteur synthétique, les nanoparticules de poly(acide lactique) 

comme adjuvant de protéines et un vecteur viral, le MVA (Modified Vaccinia virus Ankara). 

Nous avons comparé l'effet d'un protocole d'immunisation homologue ou hétérologue chez la 

souris BALB/c, par immunisation sous-cutanée (SC) de protéine p24 formulée à la surface des 

nanoparticules de PLA ou par du MVA exprimant la même protéine. Dans le cas des 

immunisations homologues, les complexes PLA-p24 induisent une réponse anticorps anti-p24 plus 

élevée (10 6 ) que celle obtenue avec les MVAgag (10 4 ). Les réponses immunes induites pas les 

immunisations hétérologues, sont deux fois plus élevées avec une primo-vaccination PLA-p24 et 

un rappel MVAgag, par rapport au protocole inverse. Ces deux combinaisons permettent de 

réduire la réponse anti-MVA. Afin de stimuler la réponse immune au niveau des muqueuses nous 

avons administré ces deux vecteurs par voie intranasale (IN) en comparaison à la voie SC. Quelle 

que soit la voie d'immunisation, les nanoparticules de PLA-p24 induisent une réponse muqueuse 

plus forte que le MVAgag. Cependant, les PLA-p24 sont plus efficaces injectées en SC, tandis que 

le MVAgag induit des réponses plus fortes quand il est administré en IN. 

En conclusion, une primo-vaccination sous-cutanée de PLA-p24 suivie d'un rappel MVAgag par 

voie nasale est le protocole de vaccination le plus efficace. 


68. COMPREHENSIVE ANALYSIS OF VIRUS- 

SPECIFIC CD8+ AND CD4+ T CELLS PROVIDES 

CLUES FOR THE FAILURE OF THERAPEUTIC 

IMMUNIZATION WITH ALVAC-HIV (VCP1452) 

VACCINE 

L. Papagno 1 , O. Pellé 1 , D. Costagliola 2 , G. Alter 3 , R. Murphy 4 , M. Altfeld 3 , J. Gatell 5 , 

B. Clotet 6 , C. Katlama 2 , B. Autran 1 and the ORVACS-Manon-02 study group 

1,2 Laboratoire d'Immunologie Cellulaire, INSERM U543, Mal Infect, INSERM U720, Hôp. 

Pitié-Salpêtrière, Université Pierre et Marie Curie-Paris6, France; 3 Partners AIDS 

Research Center, Boston, USA; 4 Northwestern University, Chicago, USA; 5 Hosp Clin Univ, 

Barcelona, Spain; 6 IrsiCaixa Fndn, Barcelona, Spain 

T cell based therapeutic vaccines have been proposed to help control virus and disease 

progression and limit costs and toxicity of treatments. 

We performed a comprehensive analysis of virus-specific CD8 + and CD4 + T-cells after vaccination 

of ART treated HIV-1-infected individuals. 65 patients were randomized in a phase II clinical trial to 

receive 4 or 3 injections of an HIV1 recombinant Canarypox vaccine (vCP1452) or placebo. 

Patients were proposed to stop ART a month after last immunization. 

We used polychromatic flow cytometry to characterize the functional and phenotypic profile of 

antigen-specific CD8 + and CD4 + T-cells induced by the immunization. In addition we performed a 

detailed longitudinal analysis of MHC class I epitope-specific responses to look at differentiation 

and activation phenotype. 

The clinical outcome of the vaccination with vCP1452 was an enhanced HIV replication (p=0.023) 

and an accelerated ART resumption (p=0.013), despite significant immunogenicity measured by 

IFNγ ELISpot on total PBMCs (p=0.014). We tested whether these results could be explained by 

the preferential expansion of HIV-specific CD4 + rather than CD8 + T-cells. We found a significant 

increase from baseline of HIV-specific CD4 + T-cells (producing IFNγ and IL2) (p

69. INHIBITORY ACTIVITY OF ANTIBODIES 

ON HIV-1 INFECTION OF LANGERHANS CELLS, 

AND OF TRANSFER TO T CELLS 

M Peressin, V Holl, K Xu, S Schmidt, T Decoville, AM Aubertin and C Moog 

Institut de Virologie de Strasbourg (Unité Inserm U575) 

We have previously shown that the inhibitory activity of neutralising antibodies on monocyte 

derived dendritic cells was due to two distinct mechanisms: neutralization of infectivity via Fab 

domains and inhibition of HIV via Fcγ-receptors (Holl et al, Blood, 2006). 

Among the different subsets of Dendritic cells (DC) described: 

Langerhans cells (LC), present at mucosal site, have been proposed to be the first HIV-1 targets 

during sexual transmission. They express langerin and lack DC-SIGN expression. 

Interstitial DC (IDC) found in the dermis, express DC-SIGN and mannose receptor. 

The aim of this study was to define the inhibitory activity of antibodies 1) on HIV infection of LC 

and IDC, 2) on HIV transfer from LC/IDC to T cells. 

Methods : LC and IDC were obtained after multiplication and differentiation of CD34 + cells isolated 

from cord blood. Inhibitory activities of antibodies were determined by measuring the percentage of 

p24-positive cells in each cell population. For transfer study, LC and IDC were incubated 2 hours 

with HIV, before culture with T cells. 

Results : We found that neutralising antibodies efficiently inhibit LC and IDC infection, and that the 

mechanism of inhibition involves neutralisation of infectivity and inhibition of infection via Fcγ 

receptors. No transfer of HIV from LC/IDC to T cells could be evidenced after a single cycle of 

infection. 

Conclusions : The infection of LC/IDC can be efficiently inhibited by IgG neutralising antibodies. 

These results strongly suggest that neutralising antibodies should be induced at mucosal site to 

participate in protection of HIV sexual transmission. 


70. EVALUATION OF THE IMMUNOGENICITY 

OF A NEW TAT CANDIDATE VACCINE AGAINST 

HIV, IN A NON HUMAN PRIMATE MODEL 

Turbant S; Moine G; Gadzinsky A; Martinon F; Legrand R; Leonetti M. 

CEA, DSV, iBiTec-S, SPI, LIAS, Gif-Sur-Yvette, F-91191 France 

The transcriptional transactivator (Tat) of human immunodeficiency virus (HIV) represents an 

attractive target in the field of vaccination against AIDS since it is essential for virus replication and 

since non progression to AIDS is associated with a high anti-Tat antibody response. 

We have recently shown that complexes between Tat and various sulfated polysaccharide ligands 

are highly immunogenic in mice. These observations prompted us to assess the immunogenic 

properties of a Tat protein of 101 residues length previously complexed with a sulfated 

polysaccharide (Tat101/SP), in macaques. 

We injected groups of cynomolgus macaques with low amounts (20 µg) of such a candidate 

vaccine, in the presence of either alum or MF59 adjuvants. We reimmunized the animals 4 and 8 

weeks later and we made a follow-up of the antiTat immune response up to 4 months after the last 

injection. All macaques immunized with Tat101/SP complex raises an anti-Tat101 antibody 

response and their sera are capable to neutralize the Tat transactivating activity. However, only 

animals injected in the presence of alum are capable to develop a Tat101 specific T cell response, 

as determined by the IFNγ production of PBMCs restimulated “in vitro” by overlapping Tat101 

peptides. This cellular immune response is long lasting since it is still observed up to 4 months 

after the last injection. 

These promising results pave the way for the assessment of the protective effects provided by a 

Tat101/SP candidate vaccine in macaques subsequently challenged with simian 

immunodeficiency virus (SHIV). 


71. CONCEPTION D’IMMUNOGENES GP140 

D’ENVELOPPE D’UN ISOLAT PRIMAIRE DE 

PRIMO-INFECTION DE VIH-1 PAR ADDITION 

OU DELETION PONCTUELLES DE SITES 

DE N-GLYCOSYLATION 

Nancy Willkomm, Frédéric Bedin et Bernard Verrier 

Laboratoire de rétrovirologie, CNRS FRE 2736, Biomérieux, Lyon. 

Un vaccin VIH devrait induire des anticorps neutralisants dirigés contre l’enveloppe Gp native. La 

densité du manteau de glycanes de la Gp réduit considérablement l’accessibilité aux épitopes 

neutralisants. Notre travail vise à rediriger la réponse immune, par déglycosylation partielle de la 

face neutralisante et surglycosylation de la face silencieuse. 

Le prototype d’enveloppe est un isolat primaire B d’un patient en primo-infection isolé avant 

séroconversion. Précédemment identifiée dans un contexte monomérique Gp120, la mutation g3B 

supprime les sites de N-glycosylation de la région C3. Nous avons donc construit en contexte 

Gp140 (140unc), le mutant 140g3B et pour comparaison 140DV2 (boucle V2 délétée) et 

140g3BDV2. L’expression transitoire en cellules 293T, montre des différences entre les mutants. 

On note une diminution de la sécrétion des mutants 140g3B et 140DV2, mais une rétention 

significative intracellulaire de 140g3BDV2. L’étude conformationelle par ELISA montre un profil 

proche entre les constructions, 140g3B démasquant l’épitope 5F7 dans la boucle V3. 

Parallèlement, nous avons caractérisé 10 mutants de surglycosylation dans un contexte Gp120. 

Parmi eux 6 ont incorporé un N-glycane supplémentaire. Des expériences d’ELISA mettent en 

évidence le mutant G+ qui fixe fortement des anti-CD4bs et des anti-CD4i, mais lie plus faiblement 

le CD4 soluble. La construction du mutant G+ dans le contexte Gp140 et la combinaison avec la 

mutation g3B sont en cours. 

Notre étude illustre que des modifications précises du manteau de glycanes sont susceptibles de 

démasquer des épitopes impliqués dans la neutralisation et de perturber l’affinité pour le récepteur 

CD4. 


72. HIV-1 REPLICATION IS INCREASED IN 

IMMATURE DENDRITIC CELLS IN THE 

PRESENCE OF CD4 T OR CD19 B LYMPHOCYTES 

Ke Xu, Maryse Peressin, Thomas Decoville, Sylvie Schmidt, Anne-Marie Aubertin, 

Vincent Holl, Christiane Moog. 

INSERM Unité 575/Institut de Virologie, Université Louis Pasteur, Strasbourg 

Objectives: It has been proposed that immature dendritic cells (DCs) could efficiently transfer 

infectious HIV particles to CD4 T lymphocytes via virological synapses in trans or after de novo 

production of newly synthesized viruses in cis. The aim of our study was to investigate the early 

events of HIV transfer from immature DC to CD4 T lymphocyte and to determine the mechanism of 

efficient HIV replication in this co-culture. 

Methods: Immature DCs were infected and then washed intensively before exposure to CD4 and 

CD19 lymphocytes. The percentage of HIV-infected cells was measured by flow cytometry 

detection of intracellular p24 antigen. Virus produced in supernatant by each cell type was 

characterized by their cell surface marker incorporated in the virus membrane and measured by 

p24 ELISA. 

Results: In the presence of CD4 T or CD19 B lymphocytes, we found a strong enhancement of 

the percentage of p24-positive DCs after a single cycle of HIV infection compared to DCs alone. At 

that time, only lower percentage of CD4 T lymphocytes were infected and the virus recovered in 

the supernatant was produced by both cell types. These results question about the efficiency of 

HIV transfer from DC to T lymphocyte in trans. 

Conclusion: Our results showed potent HIV replication in immature DC after T and B lymphocytes 

contact. If this phenomenon occurs in vivo, immature DC at the mucosal site may represent 

efficient HIV producing cell that need to be protected by vaccination.

Comité Scientifique et d'organisation Brigitte Autran (Hôpital ...

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