Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-Komersialisasi.pdf

Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-
Komersialisasi
Edi Husen
Peneliti Badan Litbang Pertanian di Balai Besar Litbang Sumberdaya Lahan Pertanian, Jl. Tentara
Pelajar No. 12, Bogor (Email: edihusen@yahoo.com)
Abstrak. Keunggulan suatu produk pupuk hayati ditentukan oleh jumlah populasi,
viabilitas mikroba dalam kurun waktu tertentu, dan efikasinya pada tanaman pada
berbagai kondisi di lapangan. Sistem kendali mutu pupuk hayati merupakan salah
instrumen penting untuk menjamin keefektifan pupuk hayati dalam meningkatkan
pertumbuhan dan hasil tanaman serta menjaga keberlanjutan produktivitas tanah. Sebagai
makhluk hidup yang tersimpan dalam bahan pembawa (carrier), keberhasilan penggunaan
pupuk hayati tidak hanya ditentukan oleh keungulan inokulan, tetapi juga oleh proses
formulasi yang terkait dengan higienisitas produksi dan kecocokan bahan pembawa.
Sistem kendali mutu internal yang diterapkan saat ini masih terbatas pada uji laboratorium
dan belum sampai pada uji efikasi pada tanaman dan tanah dengan penetapan masa
kedaluara pupuk. Makalah ini menyajikan proposal sistem kendali mutu pupuk hayati pra-
komersialisasi yang dimulai dari sampling pupuk untuk uji laboratorium dan efektivitas,
serta penetapan masa kedaluarsa pupuk. Parameter uji mencakup viabilitas dan karakter
funsional mikroba selama masa simpan, patogenisitas, dan tingkat kontaminasi serta
pengaruhnya pada tanaman dan aktivitas mikroba tanah pasca inokulasi.
Kata kunci: kendali mutu, pupuk hayati, mikroba, viabilitas, komersialisasi
Abstract. The quality of a product of biofertilizer is determined mainly by the number of
population, viability of microbes in a particular period of time, and its efficacy on plants
in various field conditions. A system of quality control is one important instrument to
ensure the effectiveness of a biofertilizer in increasing plant growth and yield and
sustaining soil productivity. As a living organism lived in the carrier material, the
succsessful use of biofertilizer is not only determined by its excellent traits, but also by its
formulation process associated with higienist procedures and material compatibility
(carrier). Current internal quality control system implemented is still limited to
laboratory tests and not to the efficacy trials on plants and soil as well as determination
of expiring date. This paper presents a proposed quality control system of biofertilizer
prior to commercialization starting from sampling procedures for laboratory testing and
its efficacy, as well as the determination of the expiring date period. Test parameters
include microbial viability and traits during storage, pathogenicity, and the level of
contamination and its effects on plant growth and soil microbial activity after inoculation.
Keywords: quality control, biofertilizer, microbes, viability, commercialization
70
749

E. Husen
PENDAHULUAN
Sistem kendali mutu pupuk hayati merupakan salah satu aspek penting untuk menjamin
keefektifan pupuk hayati dalam meningkatkan pertumbuhan dan hasil tanaman serta
menjaga keberlanjutan produktivitas tanah. Sebagai makhluk hidup yang disimpan dalam
bahan pembawa (carrier), keberhasilan penggunaan pupuk hayati tidak hanya ditentukan
oleh mutu inokulan saat diproduksi, tetapi juga oleh mutu inokulan pasca produksi yang
terkait dengan penyimpanan dan pengangkutan pupuk (Simanungkalit et al. 2006). Mutu
inokulan saat diproduksi antara lain berhubungan dengan higienisitas produksi dan bahan
pembawa yang digunakan. Teknik produksi yang terkontrol berpengaruh pada kepadatan
populasi yang diinginkan dan viabilitas inokulan selama penyimpanan serta mengurangi
tingkat kontaminasi, sehingga inokulan yang dihasilkan memiliki masa kedaluarsa yang
lebih panjang.
750
Saat ini berbagai jenis pupuk hayati telah dihasilkan oleh berbagai lembaga
penelitian dan perguruan tinggi dan sebagian sudah dikomersialkan (beredar di pasaran).
Pupuk hayati yang ditawarkan untuk meningkatkan produktivitas tanah dan tanaman
cukup beragam, antara lain pupuk hayati yang mengandung mikroba penambat N
(simbiotik dan non-simbiotik), pelarut fosfat, penghasil zat pemacu tumbuh, pengendali
cekaman lingkungan ekstrim dan patogen, baik yang diproduksi dalam bentuk pupuk
hayati tunggal maupun dalam bentuk majemuk (consortia). Beragamnya jenis pupuk
hayati yang beredar saat ini, pada satu sisi memberi keuntungan bagi pengguna/ petani
karena banyak pilihan yang tersedia. Namun pada sisi lain, biaya tambahan yang
dikeluarkan untuk membeli pupuk hayati dapat saja tidak seimbang dengan kenaikan
produksi tanaman bila mutu pupuk rendah. Hasil penelitian pada tahun 2005-2006
memperlihatkan bahwa tidak semua pupuk hayati komersial yang beredar memiliki mutu
sesuai dengan promosi yang dijanjikan (Husen et al. 2007). Penyebabnya antara lain bisa
dari teknologi produksi yang belum sempurna atau pupuk yang digunakan telah melewati
masa kedaluarsa. Untuk itu, sistem pengendalian mutu pupuk hayati terpadu pasca
komersialisasi yaitu sebelum pupuk diproduksi dalam skala komersial diperlukan agar
pupuk yang dihasilkan memberikan hasil yang sepadan dengan harga jual produk.
Penggunaan pupuk hayati bermutu tidak saja akan meningkatkan kepercayaan konsumen
terhadap manfaat pupuk hayati, tetapi juga dapat meningkatkan daya saing produk-produk
pupuk hayati lokal terhadap pupuk hayati sejenis dari luar negeri.
Makalah ini menyajikan proposal sistem pengendalian mutu pupuk hayati internal
pra-komersialisasi sebagai salah satu instrumen penting dalam pengembangan pupuk
hayati pada skala industri. Konsep kanjian sistem pengujian mutu ini mengacu pada
sistem yang sudah dikembangkan sebelumnya dengan menambahkan beberapa aspek
penting sesuai dengan perkembangan teknologi saat ini.

Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-Komersialisasi
TINJAUAN SISTEM KENDALI DAN SYARAT MUTU
Regulasi Sistem Kendali Mutu
Sistem kendali mutu pupuk hayati yang pertama kali diberlakukan di Indonesia diatur
berdasarkan Surat Keputusan Direktorat Jenderal Tanaman Pangan No.SK.I.A.5.84.5, tahun
1984 yang selanjutnya disempurnakan dengan SK.I.HK.050.91.7A, tahun 1991. Regulasi ini
dikeluarkan dalam rangka pelaksanaan program intensifikasi kedelai pada masa itu.
Mekanisme pengujian dan penetapan kelayakan mutu produk pupuk hayati pada tahun
1991 tersebut di atas secara rinci diuraikan oleh Simanungkalit et al. (2006). Pupuk hayati
diuji di laboratorium pengawasan mutu benih yang ditunjuk untuk menentukan kelayakan
mutu inokulan sesuai standar yang ditetapkan. Mengingat pupuk hayati ini digunakan
untuk program intensifikasi kedelai, maka pengambilan contohnya untuk diuji di
laboratorium juga dilakukan oleh lembaga resmi, yaitu Balai Pengawasan Sertifikasi
Benih. Syarat mutu dan sistem kendalinya relatif mudah dipenuhi oleh produsen pupuk
karena pupuk hayati yang diproduksi hanya mengandung satu jenis mikroba (pupuk hayati
tunggal), yaitu bakteri bintil akar kedelai Rhizobium. Salah satu syarat mutu yang
diutamakan adalah jumlah populasi bakteri minimum yang terdapat dalam kemasan
pupuk, yaitu >10 9 sel g -1 atau ml -1 pada saat diproduksi dan >10 7 sel g -1 atau ml -1 pada
masa kedaluarsa. Syarat mutu pupuk hayati ini sangat jauh berbeda dengan yang
diberlakukan saat ini karena mikroba yang dikandung oleh pupuk hayati umumnya lebih
dari satu jenis mikroba (pupuk hayati majemuk).
Penggabungan berbagai jenis mikroba dalam pupuk hayati yang saat ini banyak
diproduksi dan diperdagangkan hampir umum dijumpai. Bakteri penambat N (simbiotik
maupun non-simbiotik) disatukan dengan pelarut fosfat, penghasil zat pemacu tumbuh
ataupun pengendali cekaman (stres) yang juga dikenal dengan istilah konsorsia mikroba.
Kemajuan di bidang mikrobiologi dewasa ini juga memungkinkan menyatukan lebih dari
satu jenis kelompok fungsional mikroba di dalam satu kemasan pupuk hayati seperti
kelompok bakteri yang disatukan dengan aktinomisetes dan/atau fungi (cendawan) dengan
fungsi beragam. Terlepas dari keraguan apakah pupuk hayati majemuk ini efektif
meningkatkan pertumbuhan tanaman (karena potensi munculnya sifat kompetisi antar
mikroba pasca aplikasi), yang jelas penetapan syarat mutu dan sistem kendalinya menjadi
semakin kompleks.
Syarat Mutu dan Sertifikasi (Permentan No.70/2011)
Dalam rangka pengendalian mutu dan memberikan kepastian usaha bagi produsen/
pelaku usaha pupuk hayati, Kementerian Pertanian telah mengeluarkan Peraturan Menteri
Pertanian Nomor: 70/Permentan/SR.140/10/2011 tentang Pupuk Organik, Pupuk Hayati
751

E. Husen
dan Pembenah Tanah. Di dalam Permentan ini diatur alur sistem uji mutu dan efektivitas
pupuk hayati sampai pada serifikasi ijin edar. Penetapan syarat mutu pupuk hayati
sebagaimana yang diatur dalam Permentan ini didasarkan atas hasil penelitian dan
pengkajian yang dilakukan oleh Badan Litbang Petanian (Simanungkalit et al. 2006;
Husen et al. 2007) dan sumber-sumber lain yang terkait (Ghosh, 2001; Roughley et al.
1990). Selain pengujian jumlah populasi mikroba yang dikandung pupuk hayati, juga
disyaratkan uji fungsional yang mencakup uji kemampuan menambat N, melarutkan P,
menghasilkan hormon, dan uji fungsional lainnya. Tabel 1 menyajikan contoh syarat
teknis jumlah populasi mikroba pada pupuk hayati tunggal dan majemuk yang disarikan
dari Permentan Nomor: 70/Permentan/SR.140/ 10/2011.
Tabel 1. Ringkasan syarat teknis jumlah populasi mikroba pada pupuk hayati tunggal dan
majemuk (Permentan Nomor: 70/Permentan/SR.140/ 10/2011)
Jenis Pupuk Hayati/Mikroba Syarat Teknis Menurut Jenis Bahan Pembawa
Tepung/serbuk Granul/pelet Cair
Pupuk Hayati Tunggal
A. Bakteri bintil akar (Rhizobium/dll) > 10 7 cfu/g > 10 7 cfu/g > 10 7 cfu/ml
B. Endomikoriza
- Mikoriza Arbuskular (total propagul) > 50 MPN/g > 50 MPN/g
- Gigaspora margarita (total spora) 25-30 spora/g 25-30 spora/g
- Glomus manihotis (total spora) > 50 spora/g > 50 spora/g
- Glomus agregatum (total spora) > 10 spora/g > 10 spora/g
C. Ektomikoriza
- Sceloderma columnare, Pisholitus tintorius/dll
(total propagul/spora)
D. Mikroba non-simbiotik dan/atau Endofitik
- Bakteri: Azospirilum/Azotobacter/Bacillus/
Pseudomonas/ dll. (total sel)
752
> 5% dari
volume
> 5% dari
volume
> 10 7 cfu/g > 10 7 cfu/g > 10 8 cfu/ml
- Aktinomiset: Streptomyces/ dll. (total sel) > 10 6 cfu/g > 10 5 cfu/g > 10 5 cfu/ml
- Fungi/Cendawan: Aspergillus/Penicillium/ dll
(total sel)
> 10 5 cfu/g > 10 4 cfu/g > 10 4 cfu/ml
Pupuk Hayati Majemuk (Konsorsia)
Total sel masing-masing jenis mikroba:
- Bakteri: Azospirilum/Azotobacter/Bacillus/
Pseudomonas/ dll.
> 10 7 cfu/g > 10 7 cfu/g > 10 8 cfu/ml
- Aktinomiset: Streptomyces/ dll. > 10 6 cfu/g > 10 5 cfu/g > 10 5 cfu/ml
- Fungi/Cendawan: Aspergillus/Penicillium/ dll > 10 5 cfu/g > 10 4 cfu/g > 10 4 cfu/ml
Keterangan:
- Nama-nama mikroba yang disebutkan dalam tabel adalah contoh mikroba.
- Cfu = colony forming unit (satuan bentukan koloni); MPN = most probable number
Uji efikasi pada tanaman dilakukan setelah lolos persyaratan teknis dari hasil uji
mutu di laboratorium. Pengujian umumnya dilakukan di rumah kaca menggunakan
tanaman semusim atau sesuai dengan peruntukan pupuk hayati yang diuji. Basis dari uji
efikasi adalah bahwa pupuk hayati yang diuji mampu meningkatkan pertumbuhan
tanaman dan atau mampu menghemat penggunaan pupuk anorganik minimal sampai 25%

Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-Komersialisasi
dari dosis rekomendasi (dosis standar). Hasil ini didapatkan bila nilai RA E (relative
agronomic effectiveness), yaitu perbandingan antara kenaikan hasil pada pupuk yang diuji
dengan kenaikan hasil pada pupuk standar lebih dari 100% (Machay et al. 1984).
Sertifikat lolos uji (izin edar) diberikan untuk jangka waktu lima tahun dan setelah itu
pemilik pupuk dapat memperpanjang kembali.
Uraian di atas memperlihatkan bahwa untuk mendapatkan sertifikat izin edar
pupuk hayati diperlukan berbagai pengujian. Hal ini menyiratkan bahwa hanya pupuk
hayati yang betul-betul bermutu dengan hasil konsisten yang akan memperoleh sertifikat
izin edar. Hasil ini sesuai dengan fakta bahwa jumlah pupuk hayati yang beredar masih
sangat sedikit, yaitu sekitar 35 merek pupuk hayati pada tahun 2003 dan popularitasnya
masih tergolong rendah yang diukur dari jumlah petani pemakai yang kurang dari 10%
(Husen et al. 2007). Berbeda dengan pupuk anorganik atau pupuk kimia lainnya, pupuk
hayati mengandung makhluk hidup yang disimpan dalam bahan pembawa, sehingga
viabilitas mikrobanya perlu dipertahankan dengan baik selama kurun waktu sebelum masa
kedaluarsa, yakni sekitar 6 bulan. Dengan demikian, teknik formulasi pupuk hayati yang
tepat dengan sistem kendali mutu terpadu sangat diperlukan.
PROPOSAL SISTEM KENDALI MUTU PRA-KOMERSIALISASI
Sistem kendali mutu terpadu sebaiknya dimulai pada waktu pupuk hayati sudah
diproduksi dalam skala pilot (berupa prototipe produk) atau sebelum pupuk diproduksi
dalam skala komersial. Tahapannya mencakup: (i) sampling pupuk, penataan (layout)
tempat penyimpanan, uji lapangan dan laboratorium. Secara skematis diagram alir
tahapan pelaksanaan sistem kendali mutu pupuk hayati yang diusulkan disajikan pada
Gambar 1.
Sampling pupuk hayati dan tanah
Sampling pupuk hayati untuk pengujian dilakukan terhadap produk pupuk dalam
satu batch (seri) produksi. Sebanyak 12 sampai 15 kemasan diambil secara acak. Masing-
masing 5 kemasan ditempatkan dalam wadah terbuka yang selanjutnya 5 kemasan
pertama disimpan di ruangan (indoor) dan 5 kemasan kedua disimpan di tempat terbuka
(outdoor) untuk uji daya simpan 0, 3, 6, 9 dan 12 bulan. Sisanya digunakan untuk
keperluan uji efikasi di lapangan. Pupuk hayati yang sudah dibuka dan digunakan untuk
uji efikasi selanjutnya ditempatkan di ruangan untuk uji daya simpan seperti di atas.
Pengujian pada perlakuan penyimpanan mencakup uji viabilitas, uji karakter fungsional,
patogenisitias, dan higienisitas pupuk hayati.
Sampling contoh tanah dilakukan pada tiap petak percobaan pasca aplikasi pupuk
hayati, termasuk perlakuan tanpa pupuk hayati. Pengambilan contoh tanah dapat
753

E. Husen
dilakukan dua kali, yaitu pada kurun waktu 2 minggu setelah aplikasi dan pada fase awal
pembungan. Pengaruh aplikasi pupuk hayati terhadap perbaikan kualitas tanah dapat
dievaluasi dari tingkat aktivitas mikroba.
754
Gambar 1. Diagram alir sistem kendali mutu pupuk hayati pra-komersialisasi
Uji viabilitas
Viabilitas mikroba selama masa penyimpanan diuji berdasarkan kepadatan
populasi mikroba per gram atau ml contoh pupuk yang dihitung dengan teknik
pengenceran bertingkat (10 1 – 10 9 ). Mikroba dalam larutan yang sudah diencerkan
ditumbuhkan dalam media agar selektif dengan metode spread plate (Zuberer, 1994).
Media agar yang akan digunakan dapat menggunakan media agar umum untuk
menghitung pupulasi total bakteri, aktinomisetes, dan fungi/cendawan atau media selektif
berdasarkan fungsi mikroba seperti media bakteri penambat N2 dan media pelarut P
maupun media selektif untuk species spesifik. Media untuk menghitung populasi total
bakteri antara lain nutrient agar (NA), tryptone-yeast (TY), total aktinomisetes yaitu
media M3 ditambah antibiotik dan anti fungi, total fungi dengan media potato dextrose
agar (PDA) yang ditambahkan antibiotik. Media selektif penambat N2 hidup bebas (freeliving)
yaitu dengan media bebas-N. Media selektif bakteri pelarut P dapat menggunakan
media Pikovskaya atau yang dimodifikasi. Selain media tersebut, juga dapat digunakan
media MRS (Man, Rogosa & Sharpe) untuk pengujian Lactobacillus dan yeast mannitol

Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-Komersialisasi
agar untuk Rhizobium. Komposisi media tersebut di atas mengikuti media yang diuraikan
oleh Weaver et al. (1994), Somasegaran dan Hoben (1994), Alef (1995), Cowan (1974),
dan Subba-Rao (1999).
Hasil uji viabilitas mikroba selama masa penyimpanan akan menentukan masa
kedaluarsa pupuk. Jumlah populasi yang masih berada di atas batas minimal populasi
(Tabel 1) pada tahapan pengujian tertentu menjadi patokan masa kedaluarsa pupuk.
Uji karakter fenotip (fungsional)
Pengujian karakter fenotip/fungsional mikroba yang mencerminkan fungsi dan
kegunaan pupuk hayati dapat dilakukan secara selektif, antara lain uji kemampuan
melarutkan P terikat, menambat N2, dan menghasilkan hormon seperti IAA (indoleacetic
acid). Pengujian secara kualitatif dapat dilakukan dengan menggunakan media agar
selektif seperti diuraikan di atas. Mikroba pelarut P pada media agar dicirikan oleh zona
terang (halo zone) di sekeliling koloni. Kemampuan menambat N2 ditentukan oleh
kemampuannya tumbuh pada media tanpa N (N-free) seperti media Azotobacter atau
media yeast mannitol agar (YMA).
Pengujian secara kuantitatif karakter fungsional mikroba dapat dilakukan secara
kolorimetri menggunakan spektrofotometer, yaitu untuk mikroba pelarut P dan penghasil
IAA. Mikroba penghasil hormon IAA dapat diuji dengan menumbuhkan mikroba pada
pupuk hayati pada dalam media cair garam minimal yang diperkaya dengan L-tryptophan
(Frankenberger dan Poth, 1988) atau media tanpa L-tryptophan yaitu media yeast-glucose
(Benizri et al. 1998). Kemampuan mikroba menghasilkan IAA dari media yeast-glucose
atau mengubah L-tryptophan (prekursor IAA) menjadi IAA diukur secara kolorimetri
mengikuti metode Gordon dan Weber (1951). Pengukuran umumnya dilakukan setelah
masa inkubasi selama 0 (kontrol) dan 48 jam (Husen et al. 2007). Uji kuantitatif mikroba
pelarut P dapat dilakukan dengan menumbuhkan mikroba pada pupuk hayati pada media
cair Pikovskaya (2,5 g/L Ca2PO4). Pengukuran konsentrasi P tersedia (yang dibebaskan
oleh mikroba) dapat dihitung mengikuti metode Puslittanak (1998).
Uji patogenisitas dan k ontaminan
Uji patogenisitas perlu dilakukan untuk menjamin bahwa mikroba dalam pupuk
hayati tidak mengalami perubahan menjadi patogen baik setelah diproduksi maupun
selama penyimpanan. Pengujian umumnya dilakukan melalui reaksi hipersensitif tanaman
tembakau yang diinokulasi dengan mikroba pada pupuk hayati. Reaksi hipersensitif yang
menandakan mikroba pada pupuk hayati bersifat patogen dicirikan oleh timbulnya gejala
bercak nekrosis pada daun tembakau.
755

E. Husen
Uji kontaminan umumnya dikaitkan dengan tingkat higienisitas bahan dan media
yang digunakan untuk keamanan pengguna dan kesehatan lingkungan. Tingkat
kontaminan diindikasikan oleh jumlah populasi bakteri Salmonella dan Eschericia coli.
Bila masing-masing jumlah pupulasi bakteri kontaminan ini tidak terdeteksi pada media
agar dengan tingkat pengenceran 1000 kali, maka pupuk hayati dinyatakan aman. Uji
kontaminan ini juga untuk menentukan apakah pupuk bekas pakai masih layak digunakan
atau tidak tercemar selama masa penyimpanan.
Uji aktivitas mikroba
756
Tingkat aktivitas mikroba tanah pasca aplikasi pupuk hayati dapat diuji
berdasarkan tingkat respirasi tanah. Prosedur pengukuran laju respirasi dapat
menggunakan metode trapping alkali mengikuti metode Isermeyer (Alef 1995) yang
dimodifikasi Zibilske (1994). Prinsip dari metode pengukuran respirasi ini adalah
mengukur CO2 yang berevolusi (menandakan aktivitas mikroba) selama masa inkubasi
tanah dengan NaOH. Larutan NaOH yang menangkap CO2 dititrasi dengan HCl.
Beberagai tahapan uji yang dilakukan di atas akan dapat ditentukan tingkat efikasi
pupuk terhadap tanaman dan pengaruhnya pada kualitas tanah pasca aplikasi. Selain itu,
akan diperoleh cara penyimpanan pupuk yang baik, masa kedaluarsa pupuk, tingkat
keamanan pupuk, dan stabilitas karakter fungsional mikroba selama masa produksi dan
penyimpanan.
KES IMPULAN
Pupuk hayati yang mengandung makhluk hidup yang disimpan dalam bahan pembawa
rentan terhadap gangguan lingkungan yang akan berpengaruh pada tingkat viabilitas dan
perubahan karakteristik fungsionalnya. Sistem kendali mutu terpadu pupuk hayati prakomersialisasi
sangat diperlukan untuk menjamin bahwa pupuk hayati yang akan
diproduksi dalam skala industri benar-benar berkualitas. Kualitas pupuk hayati ditentukan
oleh jumlah populasi mikroba yang tetap terjaga selama masa penyimpanan (sebelum
masa kedaluarsa), efektif meningkatkan pertumbuhan tanaman, dan aman digunakan baik
untuk tanaman maupun lingkungan.
DAFTAR PUS TAKA
Alef, K. 1995. Microbiological characterization of contaminated soils. p 503-505 In K.
Alef and P. Nannipieri (Eds). Methods in Applied Soil Microbilogy and
Biochemistry. Academic Press. London

Kajian Sistem Kendali Mutu Pupuk Hayati Pra-Komersialisasi
Benizri, E., A. Courtade, C. Picard, and A. Guckert. 1998. Role of maize root exudates in
the production of auxins by Pseudomonas fluorescens M.3.1: Short
communication. Soil Biol. Biochem. 30: 1481-1484
Cowan, S.T. 1974. Cowan and Steel’s Manual for the identification of medical bacteria.
2 nd edition. Cambridge University Press. Australia
Frankenberger Jr, W.T. and M. Poth. 1988. L-tryptophan transaminase of a bacterium
isolated from the rhizosphere of Festuca octoflora (Graminae). Soil Biol.
Biochem. 20: 299-304.
Ghosh, T.K. 2001. A Review on quality control of biofertilizer in India Fertiliser
Marketing News 32(8): 1-9.
Gordon, S.A. and R.P. Weber, 1951. Colorimetric estimation of indoleacetic acid. Plant
Physiol 26:192-197.
Husen, E., R.D.M Simanungkalit, and Irawan. 2007. Characterization and quality
assessment of Indonesian commercial biofertilizers. Indonesian Journal of
Agricultural Science 8: 31-38.
Machay. A.D., J.K. Syers, and P.E.H. Gregg. 1984. Ability of chemical extraction
procedures to assess the agronomic effectiveness of phosphate rock material.
New Zealand Journal of Agricultural Research 27:219-230.
Peraturan Menteri Pertanian No. 70/Permentan/SR.140/10/2011 tentang Pupuk Organik,
Pupuk Hayati, dan Pembenah Tanah. Jakarta.
Puslittanak. 1998. Penuntun analisis kimia tanah dan tanaman. Pusat Penelitian Tanah dan
Agroklimat, Bogor.
Roughley, R.J., G.W. Griffith, and L.G. Gemell. 1990. The Australian Inoculants
Research and Control Service (AIRCS). Procedures 1990. NSW Agriculture &
Fisheries, Gosford NSW, Australia.
Simanungkalit, R.D.M., E. Husen, dan R. Saraswati. 2006. Baku Mutu Pupuk Hayati dan
Sistem Pengawasannya, p 245-264 Dalam Pupuk Organik dan Pupuk Hayati.
Balai Besar Litbang Sumberdaya lahan. Bogor.
Somasegaran, P and H.J. Hoben, 1994. Handbook for Rhizobia (Methods in Legume -
Rhizobium Technology). Springer-Verlag. New York.
Subba Rao, N.S. 1999. Soil Microbiology (Fourth Edition of Soil Microorganis ms and
Plant Growth). Science Publishers, Inc. USA.
Weaver, R.W., S. Angle, P. Bottomley, D. Bezdicek, S. Smith, A. Tabatabai, and A.
Wolum. 1994. Methods of Soil Analysis. Part 2 Microbiological and
Biochemical Properties. SSSA. Inc.
757

E. Husen
Zibilske LM (1994) Carbon mineralization, In: RW Weaver RW, Angle S, Bottomley P,
Bezdicek D, Smith S, Tabatabai A, Wollum A (eds) Methods of Soil Analysis, Part
2 Microbiological and Biochemical Properties, SSSA, Inc, pp 835-863.
Zuberer. D.A. 1994. Recovery and enumeration of viable bacteria. P. 119-144. In R.W.
Weaver et al (ed) Methods of Soil Analysis. Part 2 Microbiological and
Biochemical Properties. SSSA. I
758