paper_Biology molecular ut tanaman tahan

Tabel 1. Protocol isolasi plasmid DNA darikelompok bakteri viridans, streptococci danstaphylococciketahanan] yang diinginkan diantara banyakpopulasi DNA rekombinan yang ada. Kegiatanseleksi ini dapat dilakukan dengan identifikasimelalui penanda antibiotic, warna koloniberdasarkan penanda vector, dan markamolekuler terhadap adanya gen targetmenggunakan hibridisasi protein-protein DNAdan amplifikasi gen target menggunakanprosedur PCR.Sumber : Cloning of genes from genomic DNA Part 1 and2: DNA Isolation and PCR [EVE and TWIST ProjectProtocol][b]. Penyisipan fragment DNA danPenyambunganGen murni dari sel DNA yang memiliki sifatketahanan tadi disisipkan pada sel DNA vectorkemudian disambung lagi denganmenambahkan enzim ligase. Sel DNA vectoryang telah disisipkan gen [fragment DNA] inidinamakan dengan molekul DNA rekombinan.[c]. Transformasi DNA rekombinanMolekul DNA rekombinan yang telah siapditransformasi pada bakteri E. colli untuk prosespenggandaan. Masing-masing sel E coli yangmengandung DNA rekombinan akan terusmembelah diri, sehingga masing-masingmolekul rekombinan diperbanyak. Disampingitu, molekul plasmid vektor yang ada dalam seljuga bereplikasi, sehingga dalam satu selterdapat perbanyakan kopi melekul DNArekombinan[d]. Seleksi klon DNAKegiatan ini ditujukan untuk mendapatkanDNA rekombinan yang benar-benarmengandung fragmen DNA sisipan [gen[Gbr 6. Pemotongan DNA dan penyisipanfragment DNA dalam proses kloning]Sumber gen ketahanan sebenarnya tidak harusselalu bersumber dari tanaman, aplikasi biotekmemungkinkan pengambilan gen-gen tahan darihewan bahkan manusia. Secara prinsip prosespengambilan seperti pada tahap 1 ini dan bisadilakukan beberapa modifikasi sesuai denganmetode yang tengah berkembang. Beberapasumber gen yang bisa digunakan seperti padatable 2 dan 3.Tabel 2. Gen ketahanan terhadap seranggaSumber :M. Herman. Perakitan tanaman tahan seranggahama melalui teknik rekayasa genetic. Bulletin Agrobio5[1]:1-13