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Proprietà funzionali degli idrolizzati proteici - Siteia

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<strong>Proprietà</strong> <strong>funzionali</strong> <strong>degli</strong> <strong>idrolizzati</strong><br />

<strong>proteici</strong><br />

Prof. Marco Dalla Rosa,<br />

Docente di Formulazioni e innnovazione di<br />

prodotto<br />

Alma Mater Studiorum - Università di<br />

Bologna, Polo di Cesena<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO,<br />

2009


Definizioni di proprietà<br />

<strong>funzionali</strong><br />

PROPRIETA’ DI UN COMPONENTE “FUNZIONALE”<br />

1. APPROCCIO TECNOLOGICO (CLASSICO DELLA T.A.)<br />

<strong>Proprietà</strong> di svolgere una specifica<br />

funzione che influenza gli aspetti<br />

fisici, strutturali, (sensoriali nel caso<br />

di una formulazione alimentare) e di<br />

stabilità<br />

Legato principalmente a parametri reologicostrutturali<br />

e di stabilità chimico-fisica (a w )<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Definizioni di proprietà<br />

<strong>funzionali</strong><br />

2. APPROCCIO NUTRACEUTICO<br />

- INTRODOTTO DA NUTRIZIONISTI NEL RAPPORTO TRA<br />

ALIMENTI E SALUTE.<br />

- RECENTE NELLA FORMULAZIONE DI NUOVI ALIMENTI<br />

PROTETTIVI - APPROCCIO NUTRIZIONISTICO/MEDICO))<br />

Food or food ingredient that has been shown to affect<br />

specific functions or systems in the body. Functional foods<br />

play an important role in disease prevention<br />

Functional foods (properties) are designed to provide a<br />

specific and beneficial physiological effect on health,<br />

performance and/or well-being extending beyond the<br />

provision of simple nutrients. The effect should be<br />

documented scientifically<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


•capacità di legare e<br />

adsorbire acqua,<br />

solubilità<br />

•capacità emulsionante,<br />

•capacità addensante,<br />

•capacità adesiva,<br />

•capacità dispersiva,<br />

•capacità<br />

solubilizzante,<br />

•capacità gelificante,<br />

•capacità schiumogena,<br />

•capacità di legare<br />

aromi<br />

Elenco proprietà <strong>funzionali</strong><br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

tecnologiche<br />

•capacità di rilasciare<br />

aromi,<br />

•capacità edulcorante,<br />

•capacità acidificante,<br />

•capacità<br />

aromatizzante,<br />

•capacità di abbassare<br />

l’attività dell’acqua,<br />

•capacità di innalzare la<br />

temperatura di<br />

transizione vetrosa<br />

•proprietà antiossidante<br />

•proprietà antimicrobica<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


<strong>Proprietà</strong> <strong>funzionali</strong> “protettive o<br />

nutraceutiche” (bioattività)<br />

• Effetto antiossidante antiradicalico (oxygen<br />

scavenger)<br />

• Promozione dello sviluppo della flora<br />

intestinale (prebiotico)<br />

• Bilanciamento nutrizionale (aa essenziali)<br />

• Riduzione colesterolo, prevenzione tumori<br />

intestinali, malattie cardiovascolari, diabete<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Dalle proprietà <strong>funzionali</strong> alla funzione <strong>degli</strong><br />

ingredienti in formulazione<br />

Ruguo, 1999<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

Evolution:<br />

-texture & microstructure, desired<br />

mouthfeel<br />

-sound properties<br />

-- stability or safety properties<br />

-- water activity<br />

-- Tg / freezable water<br />

-- protective functional properties<br />

-Antioxidants<br />

-- nutritional fibers<br />

-- pre/probiotics<br />

-- compound bioactivity<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Recupero, isolamento e<br />

purificazione<br />

delle proteine su scala<br />

di laboratorio<br />

Valutazione<br />

proprietà<br />

<strong>funzionali</strong> su<br />

sistemi modello<br />

si/no<br />

Sperimentazione<br />

del processo<br />

ottimizzato su scala pilota<br />

Valutazione<br />

proprietà<br />

<strong>funzionali</strong> in<br />

formulazione<br />

Feed-back /<br />

ottimizzaz.<br />

Condizioni<br />

operative<br />

Feed-back / ottimizzaz. Condizioni operative<br />

si/no<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

Messa a punto di un<br />

componente funzionale<br />

proteico<br />

Modificazioni<br />

delle proprietà<br />

<strong>funzionali</strong> con<br />

mezzi fisici<br />

e/o chimici<br />

e/o enzimatici<br />

ALL’USO<br />

INDUSTRIALE<br />

Studio fondamentale<br />

relazioni tra<br />

caratteristiche<br />

chimico-strutturali<br />

delle proteine<br />

e proprietà <strong>funzionali</strong><br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Fattori che influenzano la<br />

<strong>funzionali</strong>tà<br />

FATTORI INTRINSECI<br />

• - composizione amminoacidica<br />

• - sequenza amminoacidica<br />

• - struttura secondaria e terziaria<br />

• - forze di stabilizzazione intramolecolari (interazioni<br />

ioniche e idrofobiche<br />

• - carica netta superficiale, idrofobicità effettiva<br />

• - struttura quaternaria<br />

• - interazioni secondarie (intra e inter-peptide)<br />

• - gruppi sostituenti (fosforico e glucidico)<br />

• - legame e/o gruppo prostetico (ferro, calcio, lipidi)<br />

• - gruppi disolfuro o tiolici<br />

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Fattori che influenzano la<br />

<strong>funzionali</strong>tà<br />

FATTORI ESTRINSECI<br />

• Grado di degrassatura<br />

• Rapporto proteine/ proteasi<br />

• Tipo e condizioni di utilizzo di proteasi<br />

• Trattamenti tecnologici di separazione<br />

• Trattamenti termici<br />

• Acidità / pH<br />

• Forza ionica<br />

• Reazione di Maillard in stoccaggio<br />

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VALUTAZIONE DELLE<br />

PROPRIETA’ FUNZIONALI<br />

-Analisi su sitemi modello<br />

• Ogni singola proprietà considerata<br />

singolarmente<br />

• Forte semplificazione del sistema<br />

• Carenza informazioni su relazioni tra<br />

prop. Funzionali<br />

• Difficoltà di trasferimento al sistema<br />

reale<br />

• Necessità di standards di riferimento<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


METODI DI VALUTAZIONE<br />

DELLE PROPRIETA’<br />

FUNZIONALI<br />

-Analisi su sistemi reali<br />

• Maggiore affinità con lʼapplicabilità<br />

pratica<br />

• Scarsa ripetibilità<br />

• Non considera alcune variabili<br />

tecnologiche industriali<br />

• Scarsa riproducibilità di scala<br />

• Necessità di ricorrere a parametri<br />

reologici fondamentali<br />

• Necessità di evolvere dalla scala di<br />

laboratorio a quella pilota<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


METODI DI VALUTAZIONE<br />

DELLE PROPRIETA’<br />

FUNZIONALI<br />

Studio e ricerca a livello molecolare<br />

• Approccio interdisciplinare<br />

• Analisi fine dei principi molecolari alla base<br />

della proprietà <strong>funzionali</strong>, con mezzi<br />

analitici chimici e fisici (NMR, NIR, ecc.)<br />

• Valutazione oggettiva con parametri<br />

fondamentali delle modificazioni chimiche,<br />

fisiche e enzimatiche<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Dal componente funzionale alla formulazione:<br />

Food / Feed (pet-food) design<br />

Necessaria l’impostazione di un piano<br />

sperimentale adeguato<br />

•CRITERI:<br />

Identificare ogni limite dei componenti della formulazione<br />

al fine di specificare la regione sperimentale<br />

•Identificare le variabili - risposta da misurare<br />

• Impostare un modello appropriato per prevedere i risultati<br />

in funzione dei componenti della miscela<br />

•Selezionare un piano sperimentale appropriato (DOE)<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


<strong>Proprietà</strong> reologiche legate<br />

alla <strong>funzionali</strong>tà dei<br />

componenti <strong>proteici</strong><br />

PROPRIETA’ CHIMICHE O STRUTTURALI PROPRIETA’ FUNZIONALI<br />

Fattori Fattori Processi Di superficie o Idrodinamiche Bioattività<br />

intrinseci estrinseci<br />

di interfaccia<br />

Composizione pH<br />

Riscaldamento Solubilità Viscosità Enzimi<br />

ammnoacidica<br />

Struttura<br />

1°,2°,3°,4°<br />

Strutture<br />

coniugate<br />

Subunità<br />

Pot redox<br />

Temperatura<br />

Sali, altri ioni<br />

Solvente<br />

Altri costituenti<br />

maggioritari o<br />

minoritari<br />

Raffreddamento,<br />

congelamento<br />

Essiccamento<br />

Concentrazione<br />

Stoccaggio<br />

Sforzo di taglio<br />

Pressione<br />

Modificazioni<br />

chimiche o<br />

enzimatiche<br />

Umettamento<br />

Disperdibilità<br />

Schiumosità<br />

Emulsificazione<br />

Cap. di legare i<br />

grassi<br />

Cap. di legare<br />

aromi<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

Addensante<br />

Gelificante<br />

Coagulante<br />

Cap. di formare<br />

film<br />

Ormoni<br />

Antimicrobica<br />

Anti-ipertensiva<br />

Immunomodulatore<br />

Antiossidante<br />

Oppioide<br />

Li Chan in Proteins in food processing, CRC press,<br />

2004<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Proteine delle carni e<br />

componenti <strong>funzionali</strong><br />

Proteina Fonte Funzione / applicazione<br />

Proteine in situ<br />

Miofibrillari<br />

Sarcoplasmatiche<br />

Collagene<br />

Ingredienti <strong>proteici</strong><br />

Prot. Miofibrillari<br />

Collagene<br />

Gelatina<br />

Surimi<br />

Proteine del plasma<br />

Tessuto muscolare magro<br />

Tessuto muscolare magro<br />

Tessuto connettivo<br />

Ritagli macellazione; sottoprodotti<br />

animali<br />

Pelli di suino, tacchino, pollame e<br />

pesce<br />

Collagene idrolizzato da pelli<br />

animali, cartilagini, pellame, pelli di<br />

suino trattato termicamente e<br />

pollame<br />

Pesci; carne meccanicamente<br />

separata e lavata; sottoprodotti<br />

carnei<br />

Plasma bovino<br />

Adesione carni; legame acqua;<br />

emulsione lipidi; texture prodotti<br />

carnei<br />

Legame acqua; emulsione lipidi;<br />

colore<br />

Texture prodotti carnei<br />

Adesione carni; legame acqua;<br />

emulsione lipidi<br />

Legame acqua, succosità, resa<br />

ponderale<br />

Adesione carni; legame acqua;<br />

stabilizzazione di emulsioni<br />

Analoghi di crostacei e frutti di mare;<br />

Adesione carni; legame acqua;<br />

emulsione lipidi<br />

Adesione carni; legame acqua;<br />

inibitori di proteasi nel surimi<br />

Xiong Y.L., in Proteins in food processing, CRC<br />

press, 2004<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009 Yada, Proteins in food processing, CRC press, 2004<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Categoria <strong>Proprietà</strong> Modo di azione Esempi di alimenti<br />

Ideazione Capacità di legare e<br />

trattenere e assorbire<br />

acqua<br />

Solubilità<br />

Rigonfiamento<br />

Struttura / texture Gelificazione<br />

Coesione / adesione<br />

/legami<br />

Capacità di legare<br />

acqua con legami<br />

idrogeno; acqua<br />

trattenuta nella matrice<br />

miofibrillare<br />

Interazione proteinaacqua<br />

con legani<br />

idrogeno; repulsione di<br />

carica per la presenza<br />

di ioni Na ++ e Cl - e<br />

fosfato<br />

Penetrazione di acqua<br />

nella matrice<br />

miofibrillare<br />

Formazione di matrice<br />

ordinata per estrazione<br />

di proteine<br />

miofibrillari,<br />

interazione proteine –<br />

collagene<br />

Gel di proteine sali /<br />

solubili come agenti<br />

leganti; interazione<br />

proteine-proteine nel<br />

surimi; gelificazione di<br />

proteine del collagene<br />

Superficie Emulsicazione Assorbimento di<br />

proteine su<br />

componenti lipidici;<br />

formazione membrane<br />

proteiche rigide in<br />

emulsione grassa<br />

Carne fresca, carni<br />

salamoiate per<br />

iniezione, marinate e<br />

salate<br />

Carni salate; carni<br />

salamoiate e<br />

massaggiate<br />

carni salamoiate per<br />

iniezione, marinate e<br />

salate<br />

Carni ristrutturate /<br />

ricombinate; emulsioni<br />

carnee (luncheon<br />

meats); gel <strong>proteici</strong><br />

alimentari<br />

Carni ristrutturate /<br />

ricombinate; emulsioni<br />

carnee; analoghi di<br />

pesce, crostacei e<br />

molluschi; alimenti<br />

gellificati a base<br />

proteica<br />

Insaccati, emulsificati<br />

di carne, prodotti tipo<br />

wurstel o mortadelle<br />

Yada, Proteins in food processing, CRC press, 2004<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

<strong>Proprietà</strong><br />

<strong>funzionali</strong> delle<br />

proteine carnee e<br />

modo di azione<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Solubilità Molto buona<br />

Dispersione Molto buona<br />

Capacità di legare acqua Buona<br />

Viscosità Buona<br />

Stabilità al calore Debole<br />

Capacità schiumogene Buona<br />

Stailità della schiuma Buona<br />

Capacità emulsionante Buona<br />

Stabilità dell'emulsione Molto buona<br />

Attitudine alla gelificazione Molto buona<br />

<strong>Proprietà</strong> <strong>funzionali</strong> delle<br />

proteine allo stato nativo<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

il trattamento<br />

tecnologico di<br />

produzione può<br />

modificare la<br />

struttura delle<br />

proteine e di<br />

conseguenza le<br />

proprietà <strong>funzionali</strong><br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Solubilità<br />

• E’ un'importante proprietà funzionale che<br />

influenza sia la formazione di schiuma che la<br />

formazione di emulsioni. Una bassa<br />

concentrazione di sali (0.1 m NaCl) è essenziale<br />

tra pH 4.0-5.0 per la solubilità di alcuni<br />

componenti <strong>proteici</strong><br />

• All'interno dell'intervallo isoelettrico e in<br />

soluzioni a bassa concentrazione di sali le proteine<br />

non hanno una buona solubilità; questa migliora<br />

con l'aggiunta di sali o con un aumento di pH (pH<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


<strong>Proprietà</strong> di idratazione<br />

• dipendente dalla concentrazione proteica, dal<br />

contenuto di sali, dal trattamento termico (che<br />

denatura le proteine), da interventi di idrolisi e<br />

dalle dimensioni delle particelle delle polveri.<br />

• Sieroproteine allo stato nativo e denaturato<br />

riescono a legare rispettivamente 0.5 e 1.2 g di<br />

acqua per grammo di sostanza secca<br />

• valore molto basso in confronto alle proteine di<br />

soia e ai caseinati di sodio. Il cloruro di calcio (in<br />

concentrazione di 0.03mol/l) migliora le capacità<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


M (gH2O/100 g s.s.)<br />

80<br />

70<br />

60<br />

50<br />

40<br />

K= dM/dt<br />

30<br />

20<br />

10<br />

0<br />

Cinetiche idratazione<br />

0 5 10 15 20<br />

Tempo (giorni)<br />

0,14 0,44 0,76 0,88 0,94 0,98<br />

Giavedoni P., Bressa F. e Dalla Rosa M.: <strong>Proprietà</strong> <strong>funzionali</strong> di concentrati di<br />

siero ottenuti per ultrafiltrazione. 2: Capacità di idratazione. Il Latte, 1, 71-74,<br />

1995<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

M finale<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


M (gH2O/100 g s.s.)<br />

Isoterma di adsorbimento<br />

100<br />

90<br />

80<br />

70<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

0<br />

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1<br />

Attività dell'acqua<br />

UF 1 UF 2<br />

Giavedoni P., Bressa F. e Dalla Rosa M.: <strong>Proprietà</strong> <strong>funzionali</strong> di concentrati di<br />

siero ottenuti per ultrafiltrazione. 2: Capacità di idratazione. Il Latte, 1, 71-74,<br />

1995<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Capacità gelificante<br />

• Gel proteico riferito ad una entità visoelastica costituita di<br />

catene cross-linked in una struttura reticolare continua capace di<br />

immobilizzare una elevata quantità d’acqua<br />

Tracciato reometrico di proteine<br />

miofibrillari di fibre muscolari<br />

di pollo<br />

Yada, Proteins in food processing, CRC press, 2004<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

Favorita da denaturazione<br />

termica e idrolisi per<br />

produrre polipeptidi in<br />

strutture lineari in grado di<br />

inglobare l’acqua<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Effetto idrolisi enzimatica<br />

• Miglioramento delle proprietà <strong>funzionali</strong><br />

• Miglioramento della digeribilità<br />

• Maggiore possibilità di utilizzo dietetico<br />

• Utilizzo in formulazioni nutrizionali con<br />

arricchimento di amminoacidi essenziali<br />

• Maggiore possibilità di utilizzo di sottoprodotti<br />

della macellazione<br />

• Ingredienti per alimenti a basso costo (risk of<br />

poverty)<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Ricerca EU<br />

• KBBE.2010.2.3-03 Health-value-added food<br />

products for population groups at risk of poverty<br />

• ….. The health-value-added food products should be<br />

developed considering lower production costs, high<br />

accessibility, convenience, sensory quality, nutritional<br />

quality, shelf-life, and safety.<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


Es: proteasi fungina su<br />

sottoprodotto della<br />

macellazione ovina<br />

Idrolisi enzimatica<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

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Criticità nell’utilizzo di<br />

componenti / ingredienti<br />

<strong>funzionali</strong> <strong>proteici</strong><br />

• Aspetti normativi / autorizzazioni<br />

• Possibile presenza di aspetti sensoriali sgraditi<br />

• Disomogeità / incostanza delle materie prime<br />

• Componenti non proteiche<br />

– Dalla materia prima<br />

– Dal processo biochimico<br />

• Tendenze di mercato<br />

– Riduzione numero di ingredienti<br />

– Assenza di ingredienti semi-lavorati non disponibili al<br />

consumatore<br />

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Dove operiamo:<br />

Campus Universitario Scienze <strong>degli</strong> Alimenti<br />

Corsi di Laurea in Scienze e<br />

Tecnologie Alimentari<br />

Presidente<br />

Prof. Marco Dalla Rosa<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

© MARCO DALLA ROSA, UNIBO, 2009


BIBLIOGRAFIA :<br />

Giavedoni P., Bressa F. e Dalla Rosa M. 1995. <strong>Proprietà</strong><br />

<strong>funzionali</strong> di concentrati di siero ottenuti per<br />

ultrafiltrazione. 2: Capacità di idratazione. Il Latte, 1,<br />

71-74.<br />

Bhaskar N., Modi V.K., Govindaraju K., Radha C.,<br />

Lalitha R.G. 2007. Utilization of meat industry by<br />

products: Protein hydrolysate from sheep visceral mass.<br />

Bioresource Technology 98, 388–394.<br />

Ruguo Hu. 1999. Food Product Design. A computeraided<br />

statistical approach. Technomic Publ. Co.<br />

Lancaster, Penn. USA.<br />

Li Chan E.C.Y. 2004. in Proteins in food processing,<br />

Yada R.Y., ed. CRC press.<br />

Xiong Y.L. 2004. in Proteins in food processing, Yada<br />

R.Y., ed. CRC press<br />

CENTRO LERICI - BERTINORO 10.12.2009<br />

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