Test salivare

DESTINAZIONE D’USO
Questo test consiste in un’analisi immunocromatografica
(lateral flow test) che permette
l’identificazione qualitativa rapida di droghe quali
amfetamina, metamfetamina, metadone, cocaine,
oppiacei, marijuana, feniciclidina e i loro metaboliti
nella saliva, con le seguenti soglie di concentrazione
(cut-offs):
Test Sostanza Cut-off
Amfetamina (AMP) d-Amfetamina 50 ng/mL
Cocaina (COC) bBenzoilecgonina 20 ng/mL
Marijuana (THC) Δ-THC-9 COOH 12 ng/mL
Metamfetamina (MET) d-Metamfetamina 50 ng/mL
Metadone (MTD) Metadone 30 ng/mL
Oppiacei (OPI) Morfina 40 ng/mL
Fenciclidina (PCP) Feniciclidina 10 ng/mL
Prodotto AMP COC MET MTD OPI PCP THC
114051 X X X X X X
114052 X X X X X X
114053 X X X
114054 X X X
Questo test rileva anche altri composti connessi
(riferirsi alla tabella “Specificità Analitica” del
foglietto illustrativo).
AMP: L’amfetamina è un’ammina simpaticomimetica
con indicazioni terapeutiche. Questa
droga è generalmente assunta via orale o nasale.
COC: La cocaina è un potente stimolante del
sistema centrale nervoso e un anestetico locale
estratto dalla pianta della coca (Erythroxylum
coca). 1
MET: La metamfetamina è un potente stimolante
chimicamente correlato all’amfetamina, ma con
maggiori proprietà stimolanti sul sistema centrale
nervoso. Questa droga è spesso somministrata via
nasale, via orale o attraverso il fumo.
MTD: Il Metadone è una sostanza chimica di sintesi
dotata di proprietà farmacologiche qualitativamente
simili a quelle della morfina, frequentemente usato per
il trattamento di dipendenza da oppiacei. La presenza
di questa sostanza nella saliva può essere identificata 2
giorni dopo la sua assunzione.
OPI: La categoria degli oppiacei comprende
qualsiasi droga derivata dal Papaver somniferum,
come morfina e codeina, e da droghe semi-sintetiche
come l’eroina. Gli oppiacei attenuano la sensazione
di dolore danneggiando il sistema nervoso centrale
e generando una forte dipendenza a seguito del loro
consumo nel lungo periodo. Queste sostanze possono
essere inalate, ingerite o assunte via endovenosa,
intramuscolare o sottocutanea.
PCP: La Feniciclidina è un allucinogeno che può essere
individuato nella saliva come risultato del passaggio
della droga tra il sistema circolatorio e la cavità orale.
THC: I cannabinoidi, componenti attivi della
marijuana (Cannabis sativa), sono individuabili nella
saliva già poco tempo dopo il suo uso. L’utilizzo di
queste sostanze è principalmente dovuto alla loro
facilità di assunzione, per via orale o tramite fumo.
Il test salivare fornisce un risultato analitico
preliminare che dovrà essere confermato da
un’analisi complementare in laboratorio.
I metodi più appropriati sono la
gascromatografia / spectrometria di massa (GC/
MS) e la gascromatografia/spectrometria di
massa tandem. È necessario ricorrere ad un
giudizio professionale, in particolare nel caso di
risultati positivi preliminari.
PRINCIPIO DI ANALISI
Il test è un'analisi immunologica basata sul principio del
legame competitivo. Le sostanze che possono essere
presenti nel campione di saliva competono con i
rispettivi coniugati per i medesimi siti di legame del
proprio anticorpo specifico.
Durante il test, una parte del campione di saliva si
sposta verso l’alto attraverso un’azione capillare. La
sostanza cercata, se presente nel campione di saliva a
concentrazione inferiore al proprio cut-off, non sarà in
grado di saturare i siti di legame del proprio anticorpo
specifico. L’anticorpo reagirà quindi con il coniugato
sostanza-proteina e una linea colorata apparirà nella
zona della banda del test line della relativa striscia. La
presenza di sostanza a concentrazione superiore al
proprio cut-off nel campione di saliva saturerà invece
tutti i siti di legame dell’anticorpo. Di conseguenza,
nella zona della banda del test non comparirà alcuna
linea colorata.
Un campione di saliva positivo non genererà alcuna
linea colorata nell’area di esame, mentre un
risultato negativo vi farà apparire una linea colorata
a causa dell’assenza di competizione.
Come controllo procedurale, apparirà sempre una
linea colorata nell’area di controllo che indica un
esatto volume di campione e che è avvenuta la
migrazione sulla membrana.
REAGENTI
Il test contiene strisce di membrana rivestite di
coniugati sostanza-proteina sulla banda del test. Sulla

linea di controllo si posiziona un anticorpo di capra
policlonato che si aggiunge al coniugato oro-proteina.
Sulla striscia di membrana si osserva un colore
identificativo che contiene un anticorpo monoclonale
di topo combinato con particelle dorate colloidali.
Questo anticorpo è specifico per le amfetamine, la
metamfetamina, il metadone, la benzoilecgonina, la
morfina, il Δ-THC-9-COOH e la feniciclidina.
MATERIALE FORNITO
• Confezione singola
• Recipiente
• Raccoglitore, confezione singola
• Tampone
• Foglietto illustrativo
OCCORRENTE NECESSARIO (NON FORNITO)
• Cronometro
CONSERVAZIONE
Conservare in confezioni sigillate a temperatura
ambiente o al fresco (2-30 °C). Il test è utilizzabile fino
alla data di scadenza riportata sulla confezione. Il test
deve rimanere nella confezione fino al suo utilizzo.
• Non congelare
• Non utilizzare dopo la data di scadenza
PRECAUZIONI
• Per uso diagnostico in vitro
• Non utilizzare il kit oltre la data di scadenza
• Conservare l’involucro sigillato fino al suo utilizzo
• Non inumidire la membrana della nitrocellulosa col
campione
• Usare la corretta quantità (min. 180μl per test)
• I campioni devono essere considerati come
potenzialmente dannosi e trattati come agenti
infettivi.
• Smaltire i test usati in conformità alle normative in
vigore.
RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI
La saliva deve essere raccolta usando il raccoglitore
fornito col kit. Attenersi alle istruzioni dettagliate
riportate di seguito. Non utilizzare dispositivi diversi da
quelli forniti. Possono essere utilizzati campioni di
urina raccolti durante l’arco della giornata. Il campione
è analizzabile fino a due giorni se tenuto ad una
temperatura compresa tra i 2 e gli 8°C, e fino a tre
giorni ad una temperatura di -20°C. I campioni
possono essere trasportati con contenitori refrigerati
(2-8 °C).
METODO DI UTILIZZO
La saliva deve essere raccolta utilizzando il
raccoglitore fornito col kit. Seguire le seguenti
istruzioni:
1. Premere il raccoglitore nel recipiente e pressarlo
affinché rilasci più liquido possibile. Togliere il
raccoglitore.
2. Posizionare il cappuccio sul tubo raccoglitore
3. Posizionare il test su una superficie piana e pulita.
Svitare il tappo dal tubo raccoglitore. Capovolgere
il tubo raccoglitore e inserire 3 gocce di saliva
(circa 180μl) nella cuvette, e avviare il
cronometro. Evitare che si formino bolle d’aria nel
campione. Rimettere il tappo al tubo raccoglitore.
4. Aspettare che appaiano le linee colorate. Leggere
dopo 10 minuti. Non leggere i risultati dopo piú di
un’ora.
5. Inserire il tampone nel tubo raccoglitore, chiuderlo
e inviarlo in laboratorio per la conferma.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI

Negativo
Apparirà una linea colorata nella finestra di controllo
(C) e una linea colorata del test (T) per ogni droga
specifica. Questo indica che la concentrazione di droga
presente nel campione di saliva è al di sotto del livello
di concentrazione (cut-off).
Positivo
Apparirà solo una linea colorata nella finestra di
controllo (C) e non apparirà la linea del test (T).
Questo significa che la concentrazione di droga
presente nel campione di saliva é al di sopra del livello
di concentrazione (cut-off).
Non valido
Non appare alcuna linea di controllo. Le cause più
frequenti per cui la linea di controllo non appare sono
un volume insufficiente di campione o un procedimento
errato. Rivedere la procedura e ripetere il test usando
un nuovo dispositivo. Se il problema persiste,
interrompere immediatamente l’utilizzo del lotto e
contattare il produttore.
Negativ
Positiv
Ungültig
LIMITI
Sicherheitssiegel
Sigillo di
sicurezza
Il test fornisce solo risultati analitici preliminari
qualitativi. Deve essere utilizzato un secondo metodo
analitico per confermare il risultato come la
gastromatografia/spettometria di massa o la
gastromatografia/spettometria di massa tandem.
Un risultato positivo non indica la concentrazione di
droga presente nel campione né il modo di
somministrazione.
Un risultato negativo non necessariamente indica
l’assenza di sostanze nel campione. Le sostanze
potrebberero essere presenti a concentrazioni inferiori
al livello di cut-off dell’analisi.
CONTROLLO DI QUALITÀ
Positivo
Negativo
Il test prevede un controllo procedurale interno
costituito dalla comparsa di una linea colorata nella
zona di controllo (C). Questo conferma
l’adeguatezza del volume del campione e
dell’assorbimento della membrana, nonché la
correttezza del metodo procedurale.
SPECIFICITÀ ANALITICA
La seguente tabella mostra la concentrazione di
composti (ng/ml) oltre la quale il Saliva Test identifica
risultati positivi in 10 minuti:
Amfetamine ng/ml Oppiacei ng/ml
D- Amfetamina 50 Codeina 10
DL-Amfetamina 125 Etilomorfina 25
(+)3,4-metildiossi- 150 6-Monoacetil- 25
anfetamimna (MDA)
Morfina
p-Idrossiamfetamina
800 Morfina 40
Triptamina 1 500 Diacetilmorfina 50
ß-Feniletilamina 4 000 Morfina 3-ß-D-
Glucuronide
50
Idrocodone 100
Cocaina e
Metaboliti
Idromorfone 100
Benzoilecgonina 20 Levorfanolo 400
Cocaina HCI 20 Norcodeina 1 500
Cocaetilina 25 Tebaina 1 500
Ecogonina HCI 1 500 Ossicodone 6 000
Ecogonina
metilestere
12 500 Nalorfina 10 000
Normorfina 12 500
Marijuana e
Metaboliti
Ossimorfone 25 000
11-nor-∆-9-THC-9
COOH
12 Metamfetamine
11-nor-∆-8-THC-9
COOH
2 D-Metamfetamina 50
∆-8-THC 6 000 3, 4-metilendiossimetamfetamina
(MDMA)
50
∆-9-THC 10 000 p-idrossimetaamfetamina
400
Cannabinolo 12 500 (1R,2S) – (-)
efedrina
400
Metadone Procaina 2 000
Metadone 30 L-fenileprina 4 000
Doxilamina 50 000 Metoxitenammina 25 000
Estrone-3-Solfato 50 000 Fenfluramina 60 000
Feniciclidine
Feniciclidina
50 000
Feniciclidina 10
Tetraidrozolina 50 000
REATTIVITÀ INCROCIATA
È stato condotto uno studio per determinare la
reattività incrociata del test salivare con

composti aggiunti a uno stock PBS privo di
sostanze. Questi composti, con il test in
questione, non hanno mostrato alcun risultato
positivo falso se vengono utilizzati con
concentrazioni fino a 100 µg/mL.
Acetaminofen l-(-)-Epinefrina Ossimetazolina
Acetofenitidina Eritromicina Papaverina
N-Acetilprocainamide
Fenoprofene Penicillina-G
Acido
acetilsalicilico
Furosemide Pentazocina
Aminopirina Acido gentisico Perfenazina
Amoxicillina Emoglobina Fenelzina
Ampicillina Idralazina Trans-2-fenilciclopropilamina
Acido l-ascorbico Idroclorotiazide
Apomorfina Idrocortisone Fenilpropanolamina
Aspartame Acido αidrossiippurico
Prednisolone
Atropina p-idrossitiramina
Prednisone
Acido benzilico Ibuprofen d,l-Propranololo
Acido benzoico Iproniazide d-propossifene
Benzfetamina d,l-isoproterenolo
d-pseudoefedrina
Bilirubina Isossisuprina Quinacrina
d,lbromfeniramina
Ketamina Chinina
Caffeina Ketoprofene Chindina
Cannabinolo Iproniazide Ranitidina
Cloralio d.l-lsoproterenolo
Acido salicilico
Cloramfenicolo Isossisuprina Serotonina
Clorotiazide Chetamina Sulfametazina
d,l-Clorfeniramina Chetoprofene Sulindaco
Clorpromazina Labetalolo Tetraciclina
Clorochina Loperamide Tetraidrocortisone
3-acetato
Colesterolo Meperidina
Clonidina Meprobamato Tiamina
Cortisone Metilfenidato Tioridazina
I-Cotinina Acido
nadilixico
d,l-tirosina
Creatinina Naloxone Tolbutamide
Deossicorticosterone
Naltrexone Triamterene
Dextrometorfano Naprossene Trifluoperazina
RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI
1. Moolchan, E et al, Saliva and Plasma Testing for
Drugs of Abuse: Comparison of the Disposition and
Pharmacological Effects of Cocaine. Addiction
Research center IRP, NIDA, NIH, Baltimore, MD. As
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