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A chi di competenza. La ricerca biomedica si basa ... - EuFishBioMed

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A <strong>chi</strong> <strong>di</strong> <strong>competenza</strong>.<br />

<strong>La</strong> <strong>ricerca</strong> biome<strong>di</strong>ca <strong>si</strong> <strong>basa</strong> sempre più sull'utilizzo <strong>di</strong> modelli <strong>di</strong> vertebrati in vivo per<br />

affrontare questioni <strong>di</strong> rilevanza biologica e me<strong>di</strong>ca. Il topo è in questo senso <strong>si</strong>curamente<br />

l'organismo più pertinente, ma negli ultimi 20 anni il piccolo pesce tropicale Danio rerio<br />

(Zebrafish) ha guadagnato enorme popolarità come <strong>si</strong>stema alternativo. In tutto il mondo,<br />

zebrafish consente ai <strong>ricerca</strong>tori <strong>di</strong> affrontare questioni biologiche specifiche in modo più<br />

veloce e meno costoso pos<strong>si</strong>bile rispetto topo. Attualmente, ci sono più <strong>di</strong> 700 laboratori che<br />

utilizzano zebrafish, e particolare in Europa c'è una importante comunità scientifica con oltre<br />

300 laboratori che <strong>si</strong> occupano <strong>di</strong> questo pesce. Parte del successo dello zebrafish deriva<br />

certamente dal principio <strong>di</strong> base delle 3 R (reduction-replacement-refinement): la <strong>ricerca</strong> che<br />

utilizza zebrafish riduce il numero <strong>di</strong> mammiferi sperimentali (topi in particolare),<br />

l’ottenimento <strong>di</strong> embrioni è una proceura non-inva<strong>si</strong>va, a <strong>di</strong>fferenza <strong>di</strong> altre specie <strong>di</strong><br />

vertebrato modello. Inoltre, è <strong>di</strong>ventato ormai <strong>chi</strong>aro che i meccanismi <strong>di</strong> molte patologie<br />

rilevanti per gli esseri umani possono essere rapidamente risolte in zebrafish, e la <strong>ricerca</strong> su<br />

zebrafish ha aiutato a identificare i geni delle malattie umane, così come la produzione <strong>di</strong><br />

informazioni clinicamente rilevanti.<br />

Dal momento che molti laboratori utilizzano zebrafish, ci sembra uno sforzo tempestivo<br />

quello <strong>di</strong> standar<strong>di</strong>zzare le con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> allevamento <strong>si</strong>a a livello nazionale che europeo. In<br />

questa lettera <strong>chi</strong>e<strong>di</strong>amo il vostro sostegno nella <strong>di</strong>scus<strong>si</strong>one che finalizza le con<strong>di</strong>zioni per<br />

l'allevamento <strong>di</strong> zebrafish nei laboratori europei e nazionali. Siccome c’è una lunga storia nel<br />

settore delle con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> allevamento e <strong>di</strong> manutenzione, i laboratori hanno un esperienza<br />

profonda che deve ora essere comunicate in modo concertato alle autorità <strong>di</strong>rettiva. Voi, come<br />

un rappresentante nazionale, speriamo pos<strong>si</strong>ate sostenere questo sforzo che (1) sarà <strong>di</strong><br />

grande aiuto la <strong>ricerca</strong> biome<strong>di</strong>ca, (2) aiuterà i laboratori europei a mantenere l'eccellenza<br />

scientifica, e, cosa più importante (3) armonizzare le con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> allevamento in tutta<br />

Europa un modo eticamente corretto.<br />

I membri della comunità europea zebrafish<br />

(http://itgmv1.fzk.de/eufishbiomed/eufish_main.php) hanno lavorato in<strong>si</strong>eme con i membri<br />

della FELASA, la Federazione delle As<strong>si</strong>ciations Animal Science <strong>La</strong>boratory, per la<br />

formulazione <strong>di</strong> linee guida con<strong>si</strong>gliate nelle con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> allevamento <strong>di</strong> zebrafish<br />

(http://www.felasa.eu/working‐groups/working‐groups‐present/zebrafish‐hou<strong>si</strong>ng‐husban<br />

dry‐and‐health‐monitoring‐recommendations/). Una prima bozza <strong>di</strong> queste linee guida (che<br />

contiene alcuni dei parametri più critici) e’ allegata al presente documento. Una serie più<br />

ampia e dettagliata <strong>di</strong> linee guida seguiranno a tempo debito. Per ora, speriamo francamente<br />

che ci pos<strong>si</strong>ate sostenere in questo sforzo importante, e ci aiutiate a <strong>di</strong>scutere le con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong><br />

allevamento con le autorità <strong>di</strong>rettiva.<br />

Non e<strong>si</strong>tate a contattarci se aveste bisogno <strong>di</strong> ulteriori informazioni.


Water provi<strong>si</strong>on Recirculating system<br />

with filter, biofilter, UV<br />

unit<br />

Water quality Parameters to be<br />

checked include pH<br />

and conductivity,<br />

nitrite, nitrate.<br />

Stocking den<strong>si</strong>ty 5 adult fish per liter<br />

tank water are<br />

recommended but<br />

actual number depend<br />

on hou<strong>si</strong>ng and<br />

filtering con<strong>di</strong>tions.<br />

Environmental<br />

enrichment<br />

Permanent enrichment<br />

devices (plants etc) are<br />

not recommended.<br />

Fee<strong>di</strong>ng Mixture of dry food<br />

and freshly hatched<br />

artemia. Paramecia<br />

might be used for fry.<br />

Temperature 24.5 -29°C for all<br />

stages (fry and adults)<br />

Daily water<br />

exchange of 5-<br />

20% is<br />

customary<br />

pH range<br />

between 6.5 and<br />

8.0; conductivity<br />

between 250<br />

and 600 µS,<br />

Nitrate (< 2.5<br />

mg/L), nitrite (≤<br />

0.025 mg/L)<br />

See Matthew<br />

(2002) and<br />

Vargesaan<br />

(2007)<br />

There is no<br />

evidence at<br />

present that<br />

adult fish notice,<br />

or benefit from,<br />

such permanent<br />

enrichment.<br />

Parameters to be<br />

checked frequently in<br />

newly setup system, less<br />

frequently in established<br />

system.<br />

Maintaining fish at<br />

den<strong>si</strong>ties of lower than<br />

1fish/liter will usually<br />

cause problems due to<br />

over-fee<strong>di</strong>ng.<br />

Furthermore, it shifts the<br />

sex ration dramatically<br />

(female bias), which is<br />

taken as an in<strong>di</strong>cation for<br />

a stress <strong>si</strong>tuation.<br />

Tank enrichment with<br />

plants, plastic grass or<br />

<strong>si</strong>milar tends to cause<br />

hygienic problems; it<br />

also induces daily and<br />

uncontrolled spawning,<br />

the effects of which on<br />

the fish are unclear at<br />

present. Fee<strong>di</strong>ng live<br />

artemia, however, can be<br />

con<strong>si</strong>dered as tank<br />

enrichment, as it<br />

stimulates natural<br />

predatory behavior.<br />

Artemia fee<strong>di</strong>ng is<br />

con<strong>si</strong>dered as tank<br />

enrichment.<br />

Zebrafish can clearly<br />

tolerate a much wider<br />

range of temperatures,<br />

but around 26°C seems<br />

to be a preferred<br />

temperature.<br />

Single hou<strong>si</strong>ng acceptable Zebrafish are social<br />

animals, and maintaining<br />

<strong>si</strong>ngle fish, or ≤5 fish in


Spawning Separation prior the<br />

day of requested<br />

spawning.<br />

The use of spawning<br />

trays, artificial plant<br />

material or lowering of<br />

the water level can<br />

support spawning and<br />

increase egg numbers.<br />

Light cycle 12:12 to 8:16<br />

dark:light<br />

less than 3 liters should<br />

be kept to a minimum. It<br />

can be necessary,<br />

though, as there is no<br />

methodology to mark<br />

<strong>si</strong>ngle fish.

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