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Baculovirus - 波仕特生物科技股份有限公司

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For <strong>Baculovirus</strong> Expression System<br />

<strong>Baculovirus</strong> DNA<br />

Insect Cell Transfection Kits<br />

Insect Cell Lines and Culture Medium<br />

Insect Lysis buffer<br />

<strong>Baculovirus</strong> Transfer Vectors and Control Vectors<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Expression System<br />

Dual-Expression System<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Control Vectors<br />

B2M TM<br />

Viral Gene Delivery System<br />

波 仕 特 生 物 科 技 有 限 公 司 Protech Technology Enterprise Co., LTD<br />

http://www.bio-protech.com.tw<br />

tech@bio-protech.com.tw service@bio-protech.com.tw<br />

台 北 02-2655-7677 新 竹 037-680-138 高 雄 07-342-5707 台 中 04-2262-4883<br />

花 蓮 038-463-953 北 部 0800-231-530 中 部 0800-555-650 南 部 0800-268-266


昆 蟲 桿 狀 病 毒<br />

<strong>Baculovirus</strong><br />

By Tiffany Lin<br />

桿 狀 病 毒 在 1974 年 由 Bergold 證 實 桿 狀 病 毒 的 宿 主 為 昆 蟲 , 主 要 是 感 染 鱗 翅 目<br />

(Lepidoptera) 的 昆 蟲 腸 道 , 例 如 butterflies 和 moths。 宿 主 專 一 性 強 且 對 於 其 他 種 類 的<br />

動 物 則 不 具 感 染 性 。 桿 狀 病 毒 外 觀 呈 現 長 桿 狀 , 長 約 200-400nm, 寬 約 40-50nm, 雙 股<br />

螺 旋 DNA 的 長 度 約 80-200kbp (Blissard and Rohrmann, 1990), 其 核 蛋 白<br />

(nucleocapsid) 外 覆 有 磷 酸 蛋 白 (phosphoprotein) 的 套 膜 (envelop)。<br />

桿 狀 病 毒 感 染 寄 主 後 , 會 大 量 表 達 多 角 體 蛋 白 , 在 細 胞 核 中 包 裹 病 毒 顆 粒 形 成 明 顯 的<br />

包 涵 體 (occlusion body) 又 稱 核 多 角 體 (polyhedral inclusion body), 因 此 這 一 類 病 毒 又<br />

稱 為 核 多 角 體 病 毒 (Nucleopolyhedrovirus, NPV)。<br />

桿 狀 病 毒 分 成 兩 種 不 同 的 複 製 生 活 史 , 一 為 產 生 出 芽 病 毒 (budded virus, BV), 另 一<br />

為 包 涵 體 病 毒 (occlusion derived virus, ODV), 這 兩 種 病 毒 的 差 別 在 於 : 出 芽 病 毒 較 早 形<br />

成 , 且 不 包 含 在 由 polyhedrin 形 成 的 包 涵 體 內 ; 而 包 涵 體 病 毒 則 包 在 包 涵 體 內 , 包 涵 體 主<br />

要 是 由 polyhedrin 所 組 成 , 這 種 構 造 最 主 要 是 維 持 桿 狀 病 毒 在 自 然 環 境 下 的 生 存 能 力 , 使<br />

其 可 以 在 土 壤 或 是 植 物 上 生 存 數 年 之 久 。 當 昆 蟲 吃 到 含 有 病 毒 顆 粒 的 包 涵 體 時 , 在 鹼 性 的<br />

腸 道 環 境 下 , 可 以 將 polyhedrin 結 構 分 解 , 釋 放 出 病 毒 顆 粒 , 再 和 腸 道 上 皮 細 胞 之 微 絨 毛<br />

膜 進 行 融 合 , 進 而 感 染 昆 蟲 , 此 時 可 稱 為 初 次 感 染 (primary infection)。 而 出 芽 病 毒 主 要 是<br />

造 成 昆 蟲 體 內 細 胞 的 二 次 感 染 (secondary infection)。<br />

目 前 已 有 500 多 種 桿 狀 病 毒 被 分 離 出 來 , 但 最 主 要 用 來 生 產 的 兩 種 病 毒 為<br />

Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) 和 Bombyx<br />

mori (silkworm) nuclear polyhedrosis virus (BmNPV)。polh 及 p10 皆 為 非 必 要 的 結 構<br />

性 基 因 , 在 細 胞 培 養 上 不 影 響 桿 狀 病 毒 感 染 與 複 製 能 力 , 同 時 具 有 很 強 的 起 動 子<br />

(promoter) 活 性 , 用 來 生 產 外 源 蛋 白 可 以 達 到 細 胞 蛋 白 質 總 產 量 的<br />

25%~50%。 桿 狀 病 毒 可 以 由 感 染 過 的 細 胞 培 養 液 中 抽 取 病 毒 的<br />

DNA, 再 經 由 細 胞 的 轉 染 (transfection) 過 程 , 即 可 複 製 完 成 具 有 感<br />

染 能 力 的 病 毒 顆 粒 。 由 於 桿 狀 病 毒 的 DNA 具 有 可 以 轉 染 細 胞 的 特<br />

性 , 提 高 了 在 基 因 體 上 操 作 改 造 的 便 利 性 , 因 此 透 過 基 因 重 組 的 方<br />

式 , 即 可 以 大 幅 提 升 桿 狀 病 毒 的 應 用 價 值 。<br />

1


桿 狀 病 毒 表 現 系 統 的 優 點<br />

Advantage of BVES Technology<br />

桿 狀 病 毒 表 現 系 統 的 優 點 如 下 :<br />

1. 操 作 安 全 , 由 於 宿 主 的 範 圍 很 小 , 僅 限 於 特 定 的 無 脊 椎 動 物 , 所 以 和 大 部 分 的 病 毒 表 現<br />

系 統 相 比 , 安 全 性 相 對 的 高 很 多 。<br />

2. 可 以 表 現 大 片 段 基 因 (15Kb) 或 利 用 IRES 來 表 現 多 段 基 因 。<br />

3. 可 以 用 桿 狀 病 毒 不 同 時 期 的 promoter 來 調 控 基 因 表 現 : 例 如 immediate early (ie1<br />

promoter), delayed early, late 和 very late promoter (polh promoter, p10<br />

promoter)。<br />

4. 桿 狀 病 毒 的 non-essential gene promoter 的 生 產 蛋 白 效 率 很 高 , 例 如 very late<br />

promoter—polh, 外 源 蛋 白 產 量 可 高 達 總 蛋 白 產 量 的 50%; 若 在 promoter 前 端 加 上<br />

enhancer 序 列 , 亦 可 以 再 增 加 外 源 蛋 白 的 產 量 。<br />

5. 重 組 蛋 白 表 現 的 正 確 性 很 高 。 由 於 桿 狀 病 毒 具 有 後 修 飾 作 用 , 例 如 signal peptide 的 切<br />

除 , 核 蛋 白 , 細 胞 膜 蛋 白 , 分 泌 型 蛋 白 , 蛋 白 質 的 磷 酸 化 、 醣 化 、 醯 化 等 等 。<br />

» 重 組 蛋 白 的 活 性 優 於 E coli 表 現 系 統 !<br />

6. 生 產 出 的 外 源 重 組 蛋 白 大 多 具 有 生 物 活 性 。 以 目 前 發 表 的 paper 來 看 , 具 有 生 物 活 性 的<br />

重 組 蛋 白 高 達 95%。<br />

7. 易 於 大 量 培 養 生 產 : 昆 蟲 細 胞 可 以 懸 浮 培 養 , 所 以 體 積 可 以 從 小 量 如 100mL 放 大 到 36L<br />

甚 至 100L 的 生 物 反 應 器 培 養 。<br />

» 成 本 優 於 mammalian 表 現 系 統 !<br />

8. 除 了 可 以 大 量 生 產 具 有 活 性 的 且 摺 疊 正 確 的 蛋 白 質 外 , 還 可 以 應 用 在 疫 苗 的 生 產 。<br />

9. 目 前 已 將 桿 狀 病 毒 表 現 系 統 應 用 在 iPS Cells 上 , 達 到 最 佳 的 生 物 安 全 性 。<br />

10. 以 AcMNPV 來 說 , 可 以 將 重 組 的 桿 狀 病 毒 打 到 鱗 翅 目 的 昆 蟲 幼 體 內 來 大 量 生 產 重 組 蛋<br />

白 ; 或 是 使 用 BmNPV 來 打 入 家 蠶 體 內 來 大 量 生 產 重 組 蛋 白 , 如 此 即 可 應 用 在 飼 料 添 加 物<br />

或 健 康 食 品 類 等 等 方 面 。<br />

BVES 提 供 高 產 率 低 成 本 的 表 現 平 台<br />

大 量 表 現 具 有 生 物 活 性 的 真 核 蛋 白<br />

2


各 種 重 組 蛋 白 表 現 系 統 的 比 較<br />

Protein Expression System<br />

Bacterial Yeast <strong>Baculovirus</strong> Mammalian<br />

操 作 步 驟 難 易 度<br />

設 備 需 求<br />

所 需 時 間<br />

產 量<br />

Inclusion Bodies<br />

花 費<br />

最 易 易 中 等 難<br />

低 低 中 等 多<br />

最 短 短 中 等 長<br />

最 高 高 中 等 低<br />

V - - -<br />

低 低 中 高<br />

蛋 白 摺 疊 正 確 性 最 低 低 高 最 高<br />

桿 狀 病 毒 重 組 的 原 理 :<br />

利 用 同 源 重 組 (Homologous recombinaon) 的 方 式 , 將 欲 研 究 的 基 因 置 換 到 桿 狀 病 毒 的<br />

DNA 中 , 生 產 出 重 組 病 毒 , 再 使 用 桿 狀 病 毒 強 而 有 力 的 promoter 來 驅 動 進 而 生 產 出 重 組<br />

蛋 白 , 所 以 選 擇 合 適 的 transfer vector 是 非 常 重 要 的 !!<br />

Target gene<br />

將 Target gene 接 到 transfer<br />

vector 上 , 得 到 recombinant<br />

將 baculovirus linear DNA 和<br />

recombinant plasmid 利 用<br />

transfection reagent 來 做 cotransfection<br />

到 昆 蟲 細 胞 裡 面 進<br />

行 同 源 重 組 , 以 獲 得 重 組 病 毒<br />

收 取 細 胞 的 上 清 液 , 內 含 重 組<br />

病 毒<br />

利 用 PAGE 和 western 來 確<br />

認 重 組 蛋 白 的 產 量 , 之 後 大<br />

量 感 染 純 化 收 取 重 組 蛋 白<br />

用 收 取 的 上 清 液 測 定 病 毒 濃<br />

度 後 來 感 染 細 胞 , 若 之 前 在<br />

recombinant plasmid 內 有 裝<br />

入 螢 光 蛋 白 來 當 reporter, 則<br />

可 以 用 螢 光 顯 微 鏡 來 觀 察 感<br />

染 的 狀 況 ; 若 無 螢 光 當<br />

reporter, 則 可 以 用 高 倍 率 來<br />

看 細 胞 內 是 否 有 病 毒 顆 粒 形<br />

3


桿 狀 病 毒 感 染 昆 蟲 細 胞 表 現 重 組 蛋 白 系 統 操 作<br />

Target gene clone to <strong>Baculovirus</strong><br />

Transfer vector , 1 ug<br />

請 參 考 P5~7 的 產 品 列 表 (D)<br />

+<br />

<strong>Baculovirus</strong> linear DNA<br />

ex: Sapphire <strong>Baculovirus</strong><br />

DNA,500ng (5 ul)<br />

請 參 考 P4 的 產 品 列 表 (A)<br />

co‐transfecon<br />

1ml TNM‐FH without serum<br />

5ul transfecon reagent<br />

請 參 考 P6 的 產 品 列 表 (B)<br />

Incubate at room temp. for 15‐30 mins<br />

Cell need use TNM‐FH wash 2 mes<br />

Add to Sf21 / Sf9 cell<br />

(1 X 10 6 Sf21 / 35mm dish)<br />

請 參 考 P6 的 產 品 列 表 (C)<br />

Aer 5 hour, add 1ml TNM‐FH+10 % FBS<br />

Incubate 4‐5 days<br />

Harvest supernatant to analysis recombinant protein producon<br />

Western blot to make sure recombinant protein producon<br />

Amplify virus stock (MOI < 1)<br />

If wants to producon secretary protein on large scale, please use serum<br />

free insect cell culture medium<br />

Use End‐point Diluon or Q‐PCR<br />

to determine viral ter<br />

4


Allele Biotech Sapphire <strong>Baculovirus</strong> DNA 的 特 色<br />

For <strong>Baculovirus</strong> Expression System<br />

1. Linear genomic DNA of <strong>Baculovirus</strong>. 使 用 Linear form DNA 可 以 確 保 只 有 變 成 circular<br />

form 的 重 組 病 毒 才 能 存 活 , 不 會 有 未 重 組 病 毒 的 干 擾 。<br />

2. Enhance protein folding. 在 p10 locus 插 入 disulfide isomerases gene, 可 以 確 保 蛋 白 質 雙<br />

硫 鍵 的 形 成 。<br />

3. High recombinaon efficiency. Sapphire TM baculovirus DNA 已 經 將 ORF1629 做 delecon,<br />

如 此 只 有 homologous recombinaon 成 功 的 病 毒 才 會 存 活 , 此 設 計 為 減 少 plaque assays<br />

和 end‐point diluon 的 次 數 與 時 間 , 可 更 快 速 得 到 桿 狀<br />

重 組 病 毒 。<br />

4. High level expression. Sapphire TM baculovirus DNA 已 經<br />

將 p10 promoter 做 部 分 的 去 活 性 且 將 lyc p10 gene 去<br />

除 , 如 此 可 以 使 得 感 染 的 細 胞 不 會 那 麼 快 裂 解 , 增 加 外 源<br />

蛋 白 的 產 量 。<br />

產 品 訂 購 資 訊<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

<strong>Baculovirus</strong> Linear DNA 桿 狀 病 毒 線 性 DNA (A)<br />

<strong>Baculovirus</strong> DNA: Sapphire TM <strong>Baculovirus</strong> DNA 5 ug ABP-BVD-10001<br />

<strong>Baculovirus</strong> DNA: Sapphire TM <strong>Baculovirus</strong> DNA<br />

and Transfection Kit 2.0<br />

1 Kit ABP-BVD-10002.1<br />

Insect Transfection Reagent 昆 蟲 細 胞 轉 殖 試 劑 (B)<br />

Sapphire TM Insect Transfection Kit 25 reactions ABP-BVD-10003<br />

Inscet Cell Line 昆 蟲 細 胞 株 (C)<br />

Sf21 Insect Cells (Frozen) 1 X 10 7 cells ABP-CEL-10007<br />

Sf9 Insect Cells (Culture) 1 X 10 7 cells ABP-CEL-10002<br />

Sf9 Insect Cells (Frozen) 1 X 10 7 cells ABP-CEL-10006<br />

T,ni Insect Cells (Culture) 1 X 10 7 cells ABP-CEL-10005<br />

T,ni Insect Cells (Frozen) 1 X 10 7 cells ABP-CEL-10008<br />

Insect Cell Culture Medium 昆 蟲 細 胞 培 養 液<br />

Ready‐to‐Use<br />

Grace’s Insect Medium (Unsupplemented) 1 L ABP-MED-10004<br />

Serum-Free Insect Culture Medium 1 L ABP-MED-10002<br />

TNM-FH Insect Culture Medium (contain FBS) 1 L ABP-MED-10001<br />

For Insect Cells Buffer<br />

5<br />

XyIE Staining Solution<br />

5X Insect Lysis Buffer (with Protease Inhibitor)<br />

1 ml ABP-BUF-10020<br />

10 ml ABP-BUF-10010


Allele Biotech <strong>Baculovirus</strong> for Insect cell Expression System<br />

<strong>Baculovirus</strong> Transfer Vectors for Incect Cell Expression System:<br />

pAcIRES Vector: 內 含 cricket paralysis virus (CrPV) 的 internal ribosome entry site (IRES), 可 以 由<br />

polyhedron promoter 來 驅 動 並 translate 兩 個 蛋 白 質 。<br />

pAcSec1 Vector: 內 含 acidic glycoprotein gp64 的 signal sequence, 適 合 用 於 生 產 分 泌 性 蛋 白 。<br />

pORB Vector: 適 合 用 於 大 片 段 的 insert, 範 圍 為 10‐15 kb。<br />

產 品 訂 購 資 訊<br />

請 參 考 以 下 的 vector 資 訊 , 來 選 擇 表 現 蛋 白 質 的 載 體<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

<strong>Baculovirus</strong> Transfer Vector (D)<br />

pAcIRES Vector 可 以 一 次 表 現 兩 個 蛋 白 質 10 ug ABP-BVP-10005<br />

For <strong>Baculovirus</strong> Expression System<br />

pAcSec1 Vector 適 合 用 於 表 現 分 泌 型 蛋 白 10 ug ABP-BVP-10004<br />

pORB Vector 適 合 表 現 大 片 段 的 基 因 10 ug ABP-BVP-10003<br />

pVL1392 Vector 傳 統 的 vector 10 ug ABP-BVP-10001<br />

pVL1393 Vector 傳 統 的 vector 10 ug ABP-BVP-10002<br />

<strong>Baculovirus</strong> Control Vectors:<br />

Control vector 可 以 當 作 實 驗 的 對 照 組 , 如 此 才 可 以 與 實 驗 組 做 比 較 , 確 保 每 次 實 驗 的 一 致 性<br />

與 再 現 性 。<br />

Allele Biotech 提 供 的 control vector 有 紅 光 和 綠 光 可 供 選 擇 , 亦 有 使 用 XyIE 染 色<br />

的 control vector。<br />

請 參 考 以 下 的 vector 資 訊 , 來 選 擇 適 合 的 對 照 組<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

For Insect Cells Control Vectors<br />

pORB-Polh-LanRFP ( 在 顯 微 鏡 下 觀 察 insect<br />

cell 為 紅 光 )<br />

pORB-Polh-mWasabi ( 在 顯 微 鏡 下 觀 察 insect<br />

cell 為 綠 光 )<br />

pVL1392-XyIE Control Vector Kit ( 經 由 XyIE<br />

染 色 會 呈 現 亮 黃 色 )<br />

10 ug ABP-BM-CTRLR10<br />

10 ug ABP-BM-CTRLW10<br />

1 Kit ABP-BVP-10007<br />

6


Allele Biotech <strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Expression System<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Expression System<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Cell Expression System (B2Mam TM )<br />

有 兩 大 system, 分 別 為 Dual‐Expression System,Viral Gene Delivery System。 由 於 桿 狀 病 毒<br />

並 不 會 去 和 對 人 類 有 致 病 性 的 病 原 菌 重 組 , 所 以 在 操 作 上 是 很 安 全 的 。Allele Biotech 推 出<br />

全 新 的 <strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Cells System (BacMam), 特 色 如 下 :<br />

1. 利 用 pseudo‐typed 的 桿 狀 病 毒 去 感 染 mammalian cells, 對 細 胞 毒 性 低 且 操 作 安 全 ;<br />

2. 並 用 mammalian promoter 和 tropism enhancing factor 來 提 高 mammalian protein 的 生 產<br />

效 率 和 可 使 用 的 mammalian cell lines。<br />

Dual‐Expression System : 除 了 在 insect cells 內 可 以 表 現 reporter gene( 例 如 螢 光 蛋 白 ) 之<br />

外 , 還 可 以 用 CAG Promoter 在 mammalian cells 內 表 現 target protein。<br />

CAG Promoter: 包 含 了 CMV ie enhancer, Chicken b acn promoter, Exon1, Intron 和 paral Exon2。<br />

VSVG gene: 可 以 使 得 桿 狀 病 毒 形 成 pseudo‐typed, 以 利 感 染 多 種 的 mammalian cells。<br />

產 品 訂 購 資 訊<br />

請 參 考 以 下 的 vector 資 訊 , 來 選 擇 適 合 的 載 體<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

Help packaging baculovirus for infecting mammalian cells<br />

B2Mam TM Packing Helper Kit (VSVG-expressing<br />

baculovirus) 可 以 形 成 pseudo-typed, 利 於 感 染 多 種 類<br />

型 的 mammalian cells<br />

20 reactions ABP-BM-B2MPACK<br />

B2Mam TM Dual-Expression System (D)<br />

此 系 統 最 大 特 色 為 可 以 表 現 兩 種 蛋 白 質 (map 請 看 右 頁 )<br />

pORB-MCS-sIRES-VSVG 可 表 現 欲 研 究 蛋 白 與 VSVG 10 ug ABP-BM-sIRESSVG<br />

pORB-MCS1-sIRES-MCS2 可 以 一 次 表 現 兩 種 蛋 白 質 10 ug ABP-BM-sIRESMC<br />

pORB-mWasabi+-SIRES-VSVG 有 綠 螢 光 當 作 reporter 10 ug ABP-BM-sIRESWV<br />

7


<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Control Vectors<br />

特 色 :<br />

可 以 感 染 多 種<br />

mammalian cells<br />

特 色 :<br />

在 sIRES 前 後 都 有<br />

multiple cloning site<br />

特 色 :<br />

3C protease site<br />

mWasasi<br />

6XHis<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Control Vectors :<br />

Control vector 可 以 當 作 實 驗 的 對 照 組 , 如 此 才 可 以 與 實 驗 組 做 比 較 , 確 保 每 次 實 驗 的 一 致 性<br />

與 再 現 性 。<br />

Allele Biotech 提 供 的 control vector 的 選 擇 方 式 如 下 :<br />

第 一 種 : 在 mammalian cell 為 紅 光 , 在 insect cell 則 為 綠 光<br />

第 二 種 : 在 mammalian cell 為 綠 光 , 在 insect cell 則 為 紅 光<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Expression System<br />

For insect Cells and Mammalian Cells Control Vectors<br />

— 為 當 做 實 驗 的 positive control<br />

pORB-CMV-LanRFP-Polh-mWasabi 10 ug ABP-BM-CTRLRW1<br />

pORB-CMV-mWasabi-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-CTRLWR1<br />

使 用 control vectors 可 以 確 保 每 一 次 實 驗 的 正 確<br />

性 及 提 升 實 驗 的 再 現 性 !!<br />

Allele Biotech’s <strong>Baculovirus</strong> DNA and transfer<br />

vector are compatible with most of the other brand<br />

8


B2M TM Viral Gene Delivery System<br />

<strong>Baculovirus</strong> for Mammalian Expression System<br />

B2Mam TM Viral Gene Delivery System<br />

Allele Biotech 提 供 的 expression vector 特 色 如 下 :<br />

1. 將 欲 研 究 的 基 因 clone 到 MCS 上 , 由 CMV promoter 來 drive 並 在 mammalian cells 內 表<br />

現 ;<br />

2. 亦 可 在 昆 蟲 細 胞 內 可 觀 察 螢 光 當 作 reporter ;<br />

3. 有 螢 光 fusion protein 可 以 選 擇 ;<br />

4. Allele Biotech 提 供 的 vector 選 擇 方 式 如 下 :<br />

產 品 訂 購 資 訊<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

Expression Vectors<br />

請 參 考 以 下 的 vector 資 訊 , 來 選 擇 適 合 的 載 體<br />

pORB-CMV-MCS-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M10LR<br />

pORB-CMV-MCS-Polh-mWasabiGFP 10 ug ABP-BM-B2M01MG<br />

pORB-CMV-MCS-IRES-mWasabi-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M02WR<br />

pORB-CMV-MCS1-IRES-MCS-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M020R<br />

pORB-LanRFP-C-Fusion-Polh-mWasabi 10 ug ABP-BM-B2M03RC<br />

pORB-LanRFP-N-Fusion-Polh-mWasabi 10 ug ABP-BM-B2M03RN<br />

pORB-LanYFP-C-Fusion-Polh-mWasabi 10 ug ABP-BM-B2M03YC<br />

pORB-LanYFP-N-Fusion-Polh-mWasabi 10 ug ABP-BM-B2M03YN<br />

pORB-mTFP1-C-Fusion-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M03TC<br />

pORB-mTFP1-N-Fusion-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M03TN<br />

pORB-mWasabi-C-Fusion-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M03GC<br />

pORB-mWasabi-N-Fusion-Polh-LanRFP 10 ug ABP-BM-B2M03GN<br />

此 系 列 的 vector 可 以 在 mammalian cells 裡 表 現 target protein<br />

在 insect cell 表 現 螢 光 當 做 觀 察 的 指 標 !<br />

9


蛋 白 質 電 泳 相 關 產 品<br />

Product Unit Size Catalog No.<br />

鑄 膠 產 品<br />

Acryl/Bis 37.5:1, 40 % solution 500 mL AM-0254-500ML<br />

Acryl/Bis 29:1, 40 % solution 500 mL AM-0311-500ML<br />

APS 25 G AM-0486<br />

TEMED 25 mL AM-0761-25ML<br />

SDS, 20% Solution 500 mL AM-0837-500ML<br />

Tris Buffer 1.5M Solution, pH8.8 500 mL PT-J831-500ML<br />

Tris Buffer 0.5M Solution, pH6.8 500 mL PT-J832-500ML<br />

FastBlue Gel Staining Reagent 500 mL PT-P575<br />

TG-SDS Buffer, 10X 2L / 5L PT-0783<br />

TG Buffer, 10X 2L / 5L PT-0307<br />

Protein Loading Dye, 4X 1 mL PT-PRO4XDYE<br />

Prestained Protein Marker Plus 250 uL PT-PS03<br />

TotalBLOT+ TM Nylon Membrane, 0.45uM<br />

TotalBLOT+ TM PVDF Membrane, 0.2uM<br />

AM-E576<br />

AM-E578<br />

還 有 許 多 蛋 白 質 電 泳 與 蛋 白 質 表 現 系 統 相 關 產 品 , 請 洽 波 仕 特 ~<br />

10


Allele Biotechnology 系 列 產 品<br />

iPS Stem Cells<br />

Lentiviral Particles<br />

Retroviral Particles<br />

Fluorescent Protein<br />

提 供 各 種 藍 光 / 綠 光 / 紅 光 / 黃 光 的 表 現 載 體 , 可 在 bacterial / mammalian 內 表 現<br />

Viral Expression System<br />

Retroviral Expression System<br />

Baculoviral Expression System<br />

Pre-packaged Virus<br />

Fluorescent Protein Controls<br />

Reprogramming Factors<br />

Cytokines<br />

Oncogenetics<br />

Cell Cycle Reporters<br />

Cancer Antigens<br />

詳 細 的 資 訊 請 洽 波 仕 特<br />

Validated siRNAs<br />

提 供 各 種 已 發 表 的 siRNA, 不 論 是 純 度 和 效 果 都 非 常 好 !<br />

One-Step Genotyping<br />

只 要 將 sample 加 入 lysis buffer 反 應 後 , 就 可 以 直 接 上 PCR 做 Genotyping<br />

Allele-In-One Human Blood Direct Lysis Buffer<br />

Allele-In-One Human Blood Direct PCR Kit<br />

Allele-In-One Mouse Tail Direct Lysis Buffer<br />

Allele-In-One Mouse Tail Direct PCR Kit<br />

Protein 相 關 試 劑<br />

Protein Extraction Reagents – 有 PBS / Tris base 可 以 選 擇<br />

Luciferase Assay Reagent<br />

重 組 蛋 白 質 備 製 的 客 製 服 務<br />

波 仕 特 生 物 科 技 有 限 公 司 Protech Technology Enterprise Co., LTD<br />

http://www.bio-protech.com.tw<br />

tech@bio-protech.com.tw<br />

service@bio-protech.com.tw

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