Influenza A+B FIA - Quidel Corporation

Influenza A+B FIADa usare esclusivamente con l'analizzatore SofiaUSO PREVISTOIl test Sofia Influenza A+B FIA utilizza la tecnologia dell'immunofluorescenza per rilevare gli antigeni virali dell'Influenza Ae Influenza B in campioni su striscio nasale, striscio nasofaringeo e aspirato/lavaggio nasofaringeo ottenuti direttamenteda pazienti sintomatici. Questo test qualitativo è previsto per l'uso come ausilio nella differenziazione diagnostica rapidadi infezioni virali acute di Influenza A e Influenza B. Il test non è concepito per rilevare gli antigeni dell'influenza C. Un testnegativo è presuntivo e si raccomanda di confermare tali risultati mediante coltura cellulare. Risultati negativi non escludonocompletamente un'infezione da un virus influenzale e non dovrebbero essere usati come unica base per il trattamento o altredecisioni mediche. Il test è previsto per l'uso professionale e in laboratorio.SOMMARIO E SPIEGAZIONEI virus dell'influenza sono agenti causativi di infezioni virali acute altamente contagiose del tratto respiratorio.I virus dell'influenza sono virus con RNA a singolo filamento immunologicamente diversi. Esistono tre tipi di virusdell'influenza: A, B e C. I virus di tipo A sono quelli più prevalenti e sono legati alle epidemie più gravi. I virus di tipo Bproducono una malattia in genere meno grave rispetto a quella causata dal tipo A. I virus di tipo C non sono mai staticorrelati a gravi forme epidemiche nell'uomo. I virus di tipo A e B possono circolare contemporaneamente, ma in genere inuna data stagione un tipo è predominante. 1Ogni anno negli Stati Uniti, in media il 5 - 20% della popolazione contrae l'influenza; più di 200.000 persone vengonoricoverate in ospedale in seguito a complicazioni influenzali; e circa 36.000 persone muoiono di cause connesse all'influenza.Alcune persone, come adulti dai 65 anni in su, bambini, e individui che soffrono di certe condizioni mediche, sono ad altorischio di gravi complicazioni dell'influenza. 2PRINCIPIO DEL TESTIl test Sofia Influenza A+B FIA si serve della tecnologia dell'immunofluorescenza usata con l'Analizzatore Sofia per rilevare lenucleoproteine del virus dell'influenza. Il test consente il rilevamento differenziale degli antigeni dell'Influenza A e B.Il test Sofia Influenza A+B FIA comporta la disgregazione degli antigeni virali dell'Influenza A e B. Il campione clinico vienecollocato nella provetta del reagente, disgregando così le particelle virali nel campione ed esponendo le nucleoproteinevirali interne. Dopo la disgregazione, il campione viene distribuito nel pozzetto del campione della cassetta. Dal pozzetto,il campione passa attraverso una striscia di test che contiene diversi ambienti chimici unici. Se è presente, l'antigene viraledell'influenza viene intrappolato in un punto specifico.Nota: secondo le preferenze dell'utente, la cassetta viene collocata nell'Analizzatore Sofia per un tempo di sviluppoautomatico (modalità Walk Away) o sul banco per uno sviluppo cronometrato manualmente e quindi collocatonell'Analizzatore Sofia per la scansione (Modalità Read Now).L'Analizzatore Sofia esegue la scansione della striscia di test e misura il segnale fluorescente elaborando i risultati mediantealgoritmi specifici per il metodo. L'Analizzatore Sofia visualizza i risultati del test (Positivo, Negativo o Nullo). I risultatipossono anche essere stampati automaticamente su una stampante integrata se si seleziona tale opzione.Sofia Influenza A+B FIAPage 1 of 18

REAGENTI E MATERIALI FORNITIKit da 25 test: Cassette in confezione individuale (25): anticorpi monoclonali murini anti-influenza A e anti-influenza B Provette di reagente (25): tampone liofilizzato con detergenti e sostanze riducenti Soluzione di reagente (25): ampolle con soluzione salina Tamponi nasali sterili (25) Pipette a volume fisso (25) Striscio di controllo positivo per l'Influenza A e B (1): lo striscio è rivestito di antigeni ricombinanti non infettivi dell'InfluenzaA e Influenza B Striscio di controllo negativo (1): lo striscio è rivestito di antigene allo Streptococcus C non infettivo, disattivato medianteformalina Foglietto illustrativo (1) Istruzioni di riferimento rapido (1) Scheda CQ (sulla scatola del kit) Carta per stampante (1)MATERIALI NON INCLUSI NEL KIT Timer o orologio Strumento dell'Analizzatore Sofia Micropipettatore Contenitore del campione Cassetta di calibrazione (fornita con l'Analizzatore Sofia)AVVERTENZE E PRECAUZIONI Per uso diagnostico In Vitro. Non usare il contenuto del kit oltre la data di scadenza stampata all'esterno della confezione. Attenersi alle dovute precauzioni durante il prelievo, trattamento, conservazione e smaltimento di campioni clinici econtenuti di kit usati. 3 Si raccomanda di usare guanti di nitrile o latex (o materiale equivalente) nel toccare i campioni dei pazienti. 3 Smaltire i contenitori e gli scarichi in conformità alla normativa nazionale e locale in vigore. La cassetta deve rimanere sigillata nel sacchetto protettivo in alufoil fino al momento dell'uso. La Soluzione di reagente contiene una soluzione salina. Se la soluzione entra in contatto con la cute o gli occhi, lavare conacqua abbondante. Per ottenere risultati accurati, occorre seguire le Istruzioni del foglietto illustrativo. Conservare la cassetta di calibrazione nel sacchetto apposito in dotazione quando non è in uso. Metodi di prelievo, conservazione e trasporto dei campioni inadeguati o non idonei possono produrre risultati falsi. Se non si ha esperienza nel prelievo e maneggiamento dei campioni, chiedere formazione o assistenza specifica. Usare i terreni di trasporto virali raccomandati nel Foglietto illustrativo. Per prelevare un campione di striscio nasale, usare il tampone apposito incluso nel kit. Per prelevare un campione di striscio nasofaringeo, usare un tampone nasofaringeo floccato in nylon. Non scrivere sul codice a barre della cassetta. Il codice viene usato dall'Analizzatore Sofia per identificare il tipo di testeseguito e la cassetta individuale in modo da prevenire una seconda lettura della cassetta dallo stesso Analizzatore Sofia. Se si sospetta un'infezione causata da un nuovo virus dell'Influenza A, in base a criteri di valutazione clinica edepidemiologica correnti raccomandati dalle autorità sanitarie, i campioni devono essere prelevati seguendo le precauzionidi controllo delle infezioni appropriate per nuovi virus dell'influenza virulenta e inviati ai dipartimenti della sanitàcompetenti per l'esame. Non tentare la coltura virale in questi casi, a meno che non sia disponibile un laboratorio disicurezza BSL (livello di biosicurezza) 3+ in grado di ricevere e mettere in coltura i campioni. Sebbene questo test si sia dimostrato capace di rilevare, mediante esame colturale, i virus dell'influenza aviaria, fra cui ilvirus dell'Influenza A, sottotipo H5N1, le caratteristiche di rendimento di questo test con campioni umani infetti con H5N1o altri virus dell'influenza aviaria non sono note. Poiché il reagente di rilevamento è un composto fluorescente, non si formano risultati visibili sulla striscia di test. Occorreusare l'Analizzatore Sofia per l'interpretazione dei risultati.Sofia Influenza A+B FIAPage 2 of 18

Controlli procedurali incorporatiIl test Sofia Influenza A+B contiene una funzione di controlloprocedurale incorporata. Ogni volta che viene eseguito un testnell'Analizzatore Sofia, la zona del controllo procedurale viene lettadall'Analizzatore Sofia e il risultato viene visualizzato sullo schermo.Il produttore raccomanda, per il controllo giornaliero, didocumentare i risultati di questi controlli procedurali incorporati peril primo campione analizzato ogni giorno. Questa documentazioneviene registrata automaticamente nell'Analizzatore con ciascunrisultato di test.Un risultato valido ottenuto dal controllo procedurale dimostrache il test ha funzionato correttamente e che l'integrità funzionaledella cassetta è stata preservata. Il controllo procedurale vieneinterpretato dall'Analizzatore Sofia dopo quindici (15) minutidi sviluppo della cassetta. Se il test non viene eseguitocorrettamente, l'Analizzatore indica che il risultato è nullo. Inquesto caso, esaminare la procedura e ripetere il test con un nuovocampione clinico e una nuova cassetta di test.Per esempio: questo risultato mostra che siè verificato un risultato nullo.Controllo di qualità esternoÈ possibile utilizzare controlli esterni al fine di dimostrare che la procedura di analisi è stata eseguita correttamente e che ireagenti hanno funzionato come previsto.Quidel raccomanda di eseguire i Controlli positivi e negativi almeno una volta per ciascun operatore inesperto, una voltaper ciascuna spedizione di kit - provando ciascun lotto differente incluso nella spedizione - e, in aggiunta, come ritenutonecessario secondo le procedure di controllo della qualità interne e la normativa vigente in merito.L'utente deve selezionare prima di tutto Esegui CQ dal Menu principale dell'Analizzatore Sofia e, al prompt eseguire lascansione della scheda CQ (sulla scatola del kit). Questa scheda fornisce informazioni specifiche per il lotto di kit, fra cui ilnumero di lotto e la data di scadenza.L'Analizzatore chiede quindi all'utente di analizzare i tamponi di controllo esterno.Strisci di controllo esterno negativo e positivo sono inclusi nel kit e devono essere provati usando il metodo di test constriscio descritto nel Foglietto illustrativo o nelle Istruzioni di riferimento rapido. Nota: lo striscio di controllo positivo perl'influenza dovrebbe dare un risultato positivo per entrambi i virus dell'Influenza A e Influenza B.Se i controlli non funzionano come previsto, ripetere il test o contattare l'assistenza tecnica Quidel prima di analizzare icampioni del paziente.Altri strisci di controllo esterno sono disponibili separatamente presso i Servizi di assistenza clienti Quidel al numero verde(Stati Uniti) (800) 874.1517 o al (858) 552.1100.PRELIEVO E MANEGGIAMENTO DEI CAMPIONIPRELIEVO DEI CAMPIONICampione di striscio nasaleUsare il tampone apposito incluso nel kit.Per prelevare un campione di striscio nasale, inserire con cura il tampone (incluso nel kit) nella narice che ad un esame visivopresenta la secrezione più abbondante. Facendo ruotare delicatamente il tampone, spingerlo fino ad incontrare resistenza incorrispondenza dei turbinati (meno di 25 mm dentro la narice). Far ruotare il tampone diverse volte contro la parete nasale,quindi estrarlo dalla narice.Campione di striscio nasofaringeoUsare un tampone nasofaringeo floccato in nylon, non incluso nel kit.Per prelevare uno striscio nasofaringeo, inserire con cura il tampone nella narice che presenta più secrezione evidente. Tenereil tampone vicino al fondo del setto nasale spingendolo nella rinofaringe posteriore. Far ruotare il tampone diverse volte edestrarlo dalla rinofaringe.Sofia Influenza A+B FIAPage 4 of 18

Campione di aspirato/lavaggio nasofaringeoSeguire il protocollo dell'ospedale per il prelievo di campioni di aspirato/lavaggio nasofaringeo. Usare la quantità minimadi soluzione salina consentita dalla procedura. Come alternativa, se l'ospedale non dispone di un protocollo, considerarei seguenti metodi utilizzati da personale medico.Per prelevare un campione di aspirato nasofaringeo: instillare alcune gocce di soluzione salina nella narice. Inserireil tubicino di plastica flessibile lungo la parete della narice, parallelo al palato. Estrarre quindi il tubicino dalla nasofaringeaspirando le secrezioni. Ripetere la procedura nell'altra narice se le secrezioni prelevate nella prima narice sono insufficienti.Per prelevare un campione di lavaggio nasofaringeo: un bambino può sedersi in grembo al genitore rivolto in avanti,con il capo appoggiato al torace del genitore. Riempire la siringa o il bulbo di aspirazione con il volume minimo di soluzionesalina consentito dalle dimensioni e dall'età del paziente. Instillare la soluzione salina in una narice con il capo del pazienteinclinato all'indietro. Aspirare il campione di lavaggio nella siringa o nel bulbo. Con tutta probabilità il volume del campionedi lavaggio aspirato sarà di circa 1 cc.In alternativa, dopo l'instillazione della soluzione salina, inclinare il capo del bambino in avanti e lasciare che la soluzionesalina scoli in un contenitore apposito pulito.TRASPORTO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONII campioni devono essere analizzati non appena possibile dopo il prelievo. Tuttavia, se fosse necessario trasportarli, se neraccomanda una diluizione minima, per evitare di diminuire la sensibilità del test. Si raccomanda un (1) millilitro o meno perottenere il miglior rendimento del test rapido. I seguenti terreni di trasporto virali elencati nella Tabella 1 sono compatibilicon il test Sofia Influenza A+B FIA:Tabella 1Terreni di trasporto virali raccomandatiCondizioni di conservazioneraccomandateTerreni di trasporto virali2–8°C 25°CTerreni di trasporto universali Copan 72 ore 72 oreHank’s Balanced Salt Solution 24 ore Non raccomandatoM4 72 ore 72 oreM4-RT 72 ore 72 oreM5 72 ore 72 oreM6 72 ore 72 oreTerreno di trasporto liquido 6 ore Non raccomandatoStuarts modificatoSoluzione fisiologica 24 ore 4 oreStarplex Multitrans 72 ore 72 orePROCEDURE DI TESTTutti i campioni clinici devono essere a temperatura ambiente prima di iniziare l'analisi.Data di scadenza: Controllare la data di scadenza su ciascuna confezione di test o sull’astuccio esterno prima dell'uso.Non usare test oltre la data di scadenza indicata sull'etichettaProcedura di test con striscio (nasale/nasofaringeo1. Aggiungere la soluzione di reagente nella Provetta del reagente. Agitare delicatamente la Provettadel reagente per dissolvere il contenuto.Soluzione direagenteProvetta delreagenteSofia Influenza A+B FIAPage 5 of 18

2. Collocare immediatamente il tampone con lo striscio ottenuto dal paziente nella Provetta del reagente.Rotolare almeno tre (3) volte il tampone premendo la testa contro il fondo e il lato della Provetta delreagente.3xLasciare il tampone nella Provetta del reagente per un (1) minuto13. Spremere tutto il liquido dal tampone facendolo rotolare contro l'interno della Provetta del reagentenell'estrarlo. Gettare il tampone seguendo il protocollo per lo smaltimento dei rifiuti a rischio biologico.3x4. Riempire la pipetta a volume fisso (120 μl) in dotazione o un micropipettatore con 120 µldi campione clinico dalla provetta del reagente.Per riempire la pipetta a volume fisso con il campione clinico:a. Schiacciare FERMAMENTE il bulbo in alto.b. Sempre schiacciando, inserire la punta della pipetta nel campione liquido.c. Mentre la pipetta è nel campione liquido, rilasciare la pressione sul bulbo per riempirela pipetta.SchiacciarequiTraboccoPipettaOCampione clinico5. Versare il campione clinico nel pozzetto del campione della cassetta. Schiacciarefermamente il bulbo superiore per svuotare il contenuto della pipetta a volumefisso nel pozzetto del campione della cassetta (la presenza di liquido in eccesso nelbulbo di trabocco è accettabile).NOTA: la pipetta a volume fisso raccoglie e distribuisce la quantità corretta dicampione liquido. Gettare la pipetta seguendo il protocollo per lo smaltimento deirifiuti a rischio biologico.OReaderFLUA+BPozzettodi campioneReaderFLUA+BPozzettodi campione6. Passare alla sezione "Uso dell'Analizzatore Sofia" di questo foglietto illustrativo.Sofia Influenza A+B FIAPage 6 of 18

Procedura di test con aspirato/lavaggio nasofaringeo o campioni in terreni di trasporto virali1. Aggiungere la soluzione di reagente nella Provetta del reagente. Agitare delicatamente la Provettadel reagente per dissolvere il contenuto.Soluzione direagenteProvetta delreagente2. Riempire il micropipettatore con 260 μL di campione ottenuto dal campione clinicoliquido. Versare il contenuto del micropipettatore nella Provetta del reagente. Agitaredelicatamente la Provetta del reagente per mescolare il contenuto.CampioneclinicoProvetta delreagente3. Riempire la pipetta a volume fisso (120 μl) in dotazione o un micropipettatore con120 µl di campione clinico dalla provetta del reagente.Per riempire la pipetta a volume fisso con il campione clinico:a. Schiacciare FERMAMENTE il bulbo in alto.b. Sempre schiacciando, inserire la punta della pipetta nel campione liquido.c. Mentre la pipetta è nel campione liquido, rilasciare la pressione sul bulbo per riempirela pipetta.SchiacciarequiTraboccoPipettaOCampione clinico4. Versare il campione clinico nel pozzetto del campione della cassetta. Schiacciarefermamente il bulbo superiore per svuotare il contenuto della pipetta a volumefisso nel pozzetto del campione della cassetta (la presenza di liquido in eccessonel bulbo di trabocco è accettabile).NOTA: la pipetta a volume fisso raccoglie e distribuisce la quantità corretta dicampione liquido. Gettare la pipetta seguendo il protocollo per lo smaltimentodei rifiuti a rischio biologico.O5. Passare alla sezione "Uso dell'Analizzatore Sofia" di questo foglietto illustrativo.ReaderFLUA+BPozzettodi campioneReaderFLUA+BPozzettodi campioneSofia Influenza A+B FIAPage 7 of 18

USO DELL'ANALIZZATORE SOFIAModalità Walk Away/Read NowPer istruzioni consultare il Manuale per l'uso dell'Analizzatore Sofia. .L'analizzatore Sofia può essere impostato su due diverse modalità di sviluppo cronometrato (Walk Away e Read Now). Nelseguito sono descritti i metodi per ciascuna modalità.Modalità Walk AwayImmettere l'ID Utente e l'ID Paziente usando il lettore del codice a barre. Una volta aggiunto il campione clinico e inseritala cassetta nell'Analizzatore Sofia, l'Analizzatore cronometra automaticamente lo sviluppo del test, esegue la scansione evisualizza il risultato del test in circa quindici (15) minuti.Modalità Read NowLa modalità Read Now rappresenta un comodo modo di condurre analisi in batch per laboratori con un alto carico dilavoro. L'utente aggiunge il campione clinico nella cassetta e colloca la cassetta sul banco per quindici (15) minuti (fuoridell'Analizzatore). L'utente deve cronometrare manualmente con cura la fase di sviluppo. Quando il tempo di sviluppo è quasiconcluso, immettere l'ID Utente e l'ID Paziente usando il lettore del codice a barre fornito. Alla fine del tempo di sviluppo,l'utente inserisce immediatamente la cassetta nell'Analizzatore Sofia. L'Analizzatore legge e visualizza il risultato del test entroun (1) minuto.Secondo il carico di lavoro, vi sono diverse opzioni per agevolare l'analisi in batch. L'utente può versare la soluzione direagente in una o più provette di reagente, ritapparle e conservarle sul banco a temperatura ambiente per un massimo di 12ore senza perdita di attività prima di aggiungere il o i campioni. In alternativa, dopo l'aggiunta della soluzione di reagente,l'utente può inserire i campioni su striscio o liquidi nella provetta del reagente, quindi dopo aver estratto il tampone,ritappare la provetta e lasciarla a temperatura ambiente per un massimo di 12 ore senza perdita di attività prima dell'analisi.È estremamente importante che il sacchetto di alufoil non sia aperto, esponendo così la cassetta di test all'ambiente, fino almomento dell'uso.Esegui testQuando si inserisce la cassetta nell'Analizzatore Sofia, l'ID dell'utente, l'ID del paziente e il numero dell'ordine possonoessere immessi mediante un lettore di codice a barre palmare o manualmente usando la tastiera dell'Analizzatore. L'ID deltest (tipo di test, N. di lotto, N. di serie della cassetta e data di scadenza del test) sulla cassetta viene letto automaticamentenell'Analizzatore Sofia con un lettore di codice a barre interno. Il test viene interpretato automaticamente dopo quindici (15)minuti quando l'Analizzatore è impostato nella modalità Walk Away ed entro un (1) minuto dall'inserimento della cassettaquando l'Analizzatore è impostato nella modalità Read Now.NOTA: se si legge per errore il codice a barre sbagliato, basta leggere il codice a barre corretto sovrascrivendo così il primocodice a barre.1. Evidenziare il campo ID Utente usando i tasti a freccia sulla tastiera dell'Analizzatore Sofia. Immettere l'ID Utente usando illettore del codice a barre o immettere manualmente i dati mediante la tastiera.Sofia Influenza A+B FIAPage 8 of 18

2. Premere la freccia giù sulla tastiera dell'Analizzatore Sofia per passare al campo ID Paziente o N. Ordine. Immettere l'IDPaziente o il N. Ordine usando il lettore del codice a barre o immettere manualmente i dati usando la tastiera.3. Premere Avvia Test. Il cassetto dell'analizzatore si apre automaticamente4. Verificare che la modalità di sviluppo corretta, Walk Away o Read Now,sia stata selezionata. Inserire immediatamente la cassetta di testpreparata nel cassetto dell'Analizzatore e chiudere il cassetto.5. Una volta chiuso il cassetto, l'Analizzatore Sofia si avvia automaticamente e visualizza il progresso come mostratonell'esempio qui sotto. Nella modalità Walk Away, i risultati del test sono visualizzati dopo circa quindici (15) minutidall'inserimento della cassetta nell'Analizzatore Sofia. Nella modalità Read Now, i risultati del test sono visualizzati dopoun (1) minuto dall'inserimento della cassetta nell'Analizzatore. Consultare la sezione Interpretazione dei risultati.Per esempio: in questa schermata rimangono12 minuti, 13 secondi di test nella modalitàWalk Away. L'Analizzatore Sofia legge evisualizza i risultati dopo 15 minuti.Sofia Influenza A+B FIAPage 9 of 18

INTERPRETAZIONE DEI RISULTATIUna volta completato il test, i risultati sono visualizzati nello schermo dell'Analizzatore Sofia. I risultati possono anche esserestampati automaticamente su una stampante integrata se si seleziona tale opzione.L'Analizzatore Sofia rileva la linea di test. La linea di test non è visibile per l'utente.Lo schermo dell'Analizzatore Sofia visualizza risultati per il controllo procedurale come "validi o nulli" e fornisceindividualmente un risultato positivo o negativo per l'influenza A e l'influenza B. Se il controllo procedurale risulta "nullo",occorre ripetere il test con un nuovo campione clinico e una nuova cassetta.Risultati positiviRisultati negativiPer esempio: questo risultato mostra chesi è verificato un risultato valido e che ilcampione era positivo per l'Influenza A.Per esempio: questo risultato mostra che si èverificato un risultato valido e che il campioneera negativo per l'Influenza A e l'Influenza B.NOTA: Un risultato positivo non esclude infezioniconcomitanti causate da altri patogeni né consentel’identificazione di sottotipi specifici del virusdell'influenza A.NOTA: Un risultato negativo non esclude l'infezionevirale da influenza. I risultati negativi devono essereconfermati mediante coltura cellulare..Risultati nulliPer esempio: questo risultato mostra chesi è verificato un risultato valido e che ilcampione era positivo per l'Influenza B.NOTA: un risultato positivo non esclude infezioniconcomitanti causate da altri patogeni.Per esempio: questo risultato mostra che si èverificato un risultato nullo.Risultato nullo: se il test risulta nullo, occorre ripetereil test con un nuovo campione clinico e una nuovacassetta.Sofia Influenza A+B FIAPage 10 of 18

LIMITAZIONI Il contenuto di questo test deve essere usato per il rilevamento qualitativo degli antigeni dell'influenza A e B da campioni distrisci nasali, strisci nasofaringei, aspirati/lavaggi nasofaringei. Un risultato di test negativo può verificarsi se il livello di antigeni in un campione è inferiore al limite di rilevamento del testo se il campione non è stato prelevato correttamente. Se non si segue la Procedura di test, il rendimento del test può essere compromesso e/o il risultato del test può non esserevalido. I risultati dei test devono essere valutati insieme ad altri dati clinici disponibili al medico. Risultati di test negativi non escludono possibili infezioni virali diverse dall'influenza. Risultati di test positivi non escludono infezioni concomitanti causate da altri patogeni. Risultati di test positivi non consentono l’identificazione di sottotipi specifici del virus dell'influenza A. Risultati di test negativi non escludono altre infezioni virali o batteriche non influenzali. I bambini hanno la tendenza a eliminare il virus più abbondantemente e più a lungo degli adulti. Per questo motivo,l'analisi di campioni provenienti da adulti dimostra spesso una sensibilità inferiore a quella ottenuta con l'analisi dicampioni pediatrici. Valori predittivi positivi e negativi dipendono in gran parte dalla prevalenza. Risultati di test falsamente negativi sono piùprobabili durante l'attività di punta, quando la prevalenza della malattia è elevata. Risultati di test falsamente positivi sonopiù probabili durante periodi di bassa attività dell'influenza quando la prevalenza della malattia è da moderata a bassa. Gli individui che hanno ricevuto il vaccino per l'influenza A per via nasale possono risultare positivi al test fino a tre giornidopo la vaccinazione. Gli anticorpi monoclonali possono non rilevare, o rilevare con una sensibilità inferiore i virus dell'influenza A che hannosubito cambiamenti minori degli amminoacidi nella regione degli epitopi target. Se si rende necessaria la differenziazione di sottotipi specifici e ceppi dell'influenza A, occorre eseguire altri test,consultando gli enti sanitari competenti.VALORI ATTESIEpidemie stagionali di influenza si verificano in tutto il mondo, in entrambi gli emisferi, causando malattia diffusa ogniinverno. La percentuale media di casi di influenza è 26-33 casi per 100 individui ogni anno. Il rischio di ricovero è di circa1 su 300 casi, fra i giovanissimi e gli anziani. In un periodo di 30 anni, fra il 1976 e il 2006, la stima dei casi di morte dovutaall'influenza negli Stati Uniti andava da un minimo di 3.000 a un massimo di circa 49.000. 2 Il novanta per cento (90%) deidecessi si verifica in pazienti di 65 anni o oltre. 4 Si sono verificate pandemie influenzali nel 1918, 1957, 1968 e 2009. Nellapandemia del 1918, vi sono stati 40-50 milioni di casi stimati di morte in tutto il mondo. Nello studio clinico multicentricocondotto Quidel durante la stagione influenzale del 2011 nell'America del Nord, è stata osservata una prevalenza dellamalattia del 15% per il tipo A e del 13% per il tipo B.CARATTERISTICHE DI RENDIMENTORendimento del test Sofia Influenza A+B FIA rispetto alla Coltura cellulareIl rendimento del test Sofia Influenza A+B FIA è stato messo a raffronto con i metodi della coltura cellulare virale e dellacolorazione degli anticorpi a fluorescenza diretta (AFD) in uno studio clinico multicentrico durante la stagione influenzaledel 2011 negli Stati Uniti. Questo studio è stato condotto da personale medico presso diciassette (17) centri distinti in diverseregioni degli Stati Uniti. In questo studio multicentrico Point-Of-Care (POC), sono stati prelevati due (2) strisci nasali o due(2) strisci nasofaringei o campioni di aspirato/lavaggio nasofaringeo da ciascuno dei duemila-quarantasette (2047) pazienti.Seicento sessantacinque (665) pazienti hanno fornito uno striscio nasale, settecento trentatre (733) hanno fornito un campionenasofaringeo e seicento quarantanove (649) hanno fornito un campione di aspirato/lavaggio nasofaringeo. Tutti i campioniclinici sono stati prelevati da pazienti sintomatici. Settantun percento (71%) della popolazione analizzata aveva < 6 anni di età,22% aveva un’età compresa fra i 6 e i 21 anni, il 6% fra i 22 e i 59 anni, e l'1% ≥ 60 anni; cinquantatre percento (53%) era di sessomaschile e quarantasette percento (47%) di sesso femminile.L'analisi in loco di uno striscio nasale o nasofaringeo o di una porzione di campione di aspirato/lavaggio nasofaringeonel test Sofia Influenza A+B FIA è stata eseguita sul campione fresco da personale medico nell'ambulatorio medico eall'ospedale. Il campione rimasto è stato collocato nei terreni di trasporto virali. La coltura cellulare è stata eseguita pressoun laboratorio di virologia locale del centro di test o trasportata fredda su pacchi di ghiaccio, non congelata, per la consegnaSofia Influenza A+B FIAPage 11 of 18

il mattino successivo a un laboratorio centrale per la coltura entro 48 ore. Piastre R-Mix Too Cluster sono state inoculate conuna porzione dello striscio nasale, nasofaringeo o campione di aspirato/lavaggio nasofaringeo e incubate a 35°C, 5% CO2per 40-48 ore. Le cellule inoculate sono state recuperate da coltura tessutale ed analizzate per l'influenza A o B mediantecolorazione degli anticorpi a fluorescenza diretta (AFD). Le Tabelle 2-6 elencano i risultati.Tabella 2Risultati del test dello striscio nasale con il sistema Sofia Influenza A+B FIA rispetto ai risultati con la coltura(Tutti i gruppi di età)TIPO ATIPO BCultura Sens = 124/138 = 90%Cultura Sens = 100/112 = 89%Pos. Neg. (95% I.C. 84–94%)Pos. Neg. (95% I.C. 82–94%)Pos Sofia 124 27Neg Sofia 14 500Spec = 500/527 = 95%(95% I.C. 93–96%)VPP = 124/151 = 82%VNP = 500/514 = 97%Pos Sofia 100 23Neg Sofia 12 530Spec = 530/553 = 96%(95% I.C. 94–97%)VPP = 100/123 = 81%VNP = 530/542 = 98%Tabella 3Risultati del test dello striscio nasofaringeo con il sistema Sofia Influenza A+B FIA rispetto ai risultati con la coltura(Tutti i gruppi di età)TIPO ATIPO BCultura Sens = 100/103 = 97%Cultura Sens = 101/112 = 90%Pos. Neg. (95% I.C. 91–99%)Pos. Neg. (95% I.C. 83-95%)Pos Sofia 100 34Neg Sofia 3 596Spec = 596/630 = 95%(95% I.C. 93–96%)VPP = 100/134 = 75%VNP = 596/599 = 99%Pos Sofia 101 19Neg Sofia 11 602Spec = 602/621 = 97%(95% I.C. 95-98%)VPP= 101/120 = 84%VNP = 602/613 = 98%Tabella 4Risultati dell'aspirato/lavaggio nasofaringeo con il sistema Sofia Influenza A+B FIA rispetto ai risultati con la coltura(tutti i gruppi di età)TIPO ATIPO BCulturaPos. Neg.Pos Sofia 68 26Neg Sofia 1 554Sens = 68/69 = 99%(95% I.C. 91–100%)Spec = 554/580 = 96%(95% I.C. 93–97%)VPP = 68/94 = 72%VNP = 554/555 = 100%CulturaPos. Neg.Pos Sofia 46 22Neg Sofia 6 575Sens = 46/52 = 88%(95% I.C. 77–95%)Spec = 575/597 = 96%(95% I.C. 94–98%)VPP = 46/68 = 68%VNP = 575/581 = 99%Sofia Influenza A+B FIAPage 12 of 18

Tabella 5Rendimento rispetto alla coltura per ciascun tipo di campione secondo i gruppi di età per l'Influenza ATuttele etàStrisIC nasali StrisIC nasofaringei Aspirato/lavaggio nasofaringeoSensibilità Specificità Sensibilità Specificità Sensibilità Specificità90% (124/138)(95%IC=84-94%)95% (500/527)(95%IC=93-96%)97% (100/103)(95%IC=91-99%)95% (596/630)(95%IC=93-96%)99% (68/69)(95%IC=91-100%)96% (554/580)(95%IC=93-97%)

Studi sulla riproducibilitàLa riproducibilità del test Sofia Influenza A+B FIA è stata valutata presso tre laboratori diversi, fra cui il laboratorio Quidel.Due diversi operatori presso ciascun centro hanno analizzato una serie di campioni codificati, forzati, preparati in una matriceclinica negativa, da debolmente negativi a moderatamente positivi per l'Influenza A e l'Influenza B. L'accordo interlaboratorio(Tabella 7) era del 94-100% per i campioni negativi e del 98-100% per i campioni positivi. L'accordo interlaboratorio (Tabella 8)per tutti i campioni era del 98 - 99%.Tabella 7Accordo interlaboratorio per lo studio sulla riproducibilità del test Sofia Influenza A+BLaboratorioAccordocomplessivopercentualecon ilrisultatoprevisto(95% IC)Debolmentenegativo(assenza divirus)100%(95-100%)Flu AAltamentenegativo(C 5 )98%(92-100%)Flu ADebolmentepositivo(C 95 )100%(95-100%)Flu AModeratamentepositivo(C 3X )100%(95-100%)Flu BAltamentenegativo(C 5 )94%(87-98%)Flu BDebolmentepositivo(C 95 )98%(92-100%)Flu BModeratamentepositivo(C 3X )1 30/30 29/30 30/30 30/30 28/30 29/30 30/302 30/30 29/30 30/30 30/30 30/30 29/30 30/303 30/30 30/30 30/30 30/30 27/30 30/30 30/30Totale 90/90 88/90 90/90 90/90 85/90 88/90 90/90100%(95-100%)LaboratorioTabella 8Accordo interlaboratorio per lo studio sulla riproducibilità del test Sofia Influenza A+BDebolmentenegativo(assenza divirus)Flu AAltamentenegativo(C 5 )Flu ADebolmentepositivo(C 95 )Flu AModeratamentepositivo(C 3X )Flu BAltamentenegativo(C 5 )Flu BDebolmentepositivo(C 95 )Flu BModeratamentepositivo(C 3X )1 30/30 29/30 30/30 30/30 28/30 29/30 30/30Accordocomplessivopercentualecon il risultatoprevisto(95% IC)98%(206/210)(95-100%)2 30/30 29/30 30/30 30/30 30/30 29/30 30/303 30/30 30/30 30/30 30/30 27/30 30/30 30/3098%(208/210)(96-100%)99%(207/210)(96-100%)Sofia Influenza A+B FIAPage 14 of 18

Sensibilità analitica e limite di rilevamentoLa sensibilità analitica è stata dimostrata usando un totale di 33 ceppi di virus dell'influenza umana consistenti in ventidue(22) virus dell'Influenza A e undici (11) virus dell'influenza B (Tabella 9).Tabella 9Sensibilità analitica con isolati umani dell'Influenza A e BCeppo viraleTipoviraleSottotipoLivellominimorilevabile(TCID 50 /mL)A/California/07/2009* A H1N1 202A/Fort Monmouth/1/47 A H1N1 50A/Hong Kong/8/68 A H1N1 105A/New Caledonia/20/1999 A H1N1 200A/New Jersey/8/76 A H1N1 500A/NWS/33 A H1N1 0,63A/Puerto Rico/8/34 A H1N1 100A/Solomon Islands/3/06 A H1N1 0,31A/Taiwan/42/06 A H1N1 200A/WI/629-9/2008 A H1N1 200A1/Denver/1/57 A H1N1 20Influenza/Mexico/4108/2009 A H1N1 200A/WI/629-S5 (D02312)/2009 A H1N1 50A/WI/629-S7(D02473)/2009 A H1N1 25A/Port Chalmers/1/73 A H3N2 500A/Victoria/3/75 A H3N2 200A/WI/629-2/2008 A H3N2 20Ceppo viraleTipoviraleSottotipoLivellominimorilevabile(TCID 50 /mL)A/Wisconsin/67/05 A H3N2 20A2/Aichi/2/68 A H3N2 1,25A/Anhui/01/2005 A H5N1 5A/GWT/LA/169GW/88 A H10N7 20A/Shearwater/Australia A H15N9 102576/79B/Allen/45 B 40B/Brisbane/60/2008 B 10B/Florida/04/2006 B 250B/Florida/07/2004 B 500B/GL/1739/54 B 1000B/Hong Kong/5/72 B 20B/Lee/40 B 5B/Malaysia/2506/04 B 24B/Maryland/1/59 B 50B/Ohio/1/2005 B 50B/Taiwan/2/62 B 50TCID50/mL = dose infettante coltura tessutale 50%. I livelli TCID50 sono stati determinati mediante ilmetodo di Reed-Muench.*Sebbene questo test abbia dimostrato di rilevare il virus H1N1 2009 coltivato da un campionerespiratorio umano positivo, le caratteristiche di rendimento di questo dispositivo con campioniclinici positivi per il virus dell'influenza H1N1 2009 non sono state stabilite. Il test Sofia InfluenzaA+B FIA è in grado di distinguere fra i virus dell'influenza A e dell'influenza B, ma non puòdifferenziare sottotipi di virus influenzali.La sensibilità analitica è stata ulteriormente valutata usando un totale di dodici (12) virus dell'influenza A isolati da uccelli. Il test SofiaInfluenza A+B ha rilevato tutti i ceppi esaminati (Tabella 10).Tabella 10Sensibilità analitica con diversi isolati dell'Influenza aviaria ACeppo virale*TipoviraleSottotipoLivellominimorilevabile(TCID 50 /mL)A/Mallard/NY6750/78 A H2N2 100A/Mallard/OH/338/86 A H4N8 50A/Mallard/WI/34/75 A H5N2 100A/Chicken/CA/431/00 A H6N2 50A/Chicken/NJ/15086-3/94 A H7N3 5A/Blue Winged Teal/LA/B174/86 A H8N4 10A/Chicken/NJ/122210/97 A H9N2 10A/Chicken/NJ/15906-9/96 A H11N9 50A/Duck/LA/188D/87 A H12N5 50A/Gull/MD/704/77 A H13N6 0,625A/Mallard/GurjevRussia/262/82 A H14N5 20A/Shorebird/DE/172/2006 A H16N3 2*Non sono state stabilite le caratteristiche di rendimento peri sottotipi del virus dell'Influenza A emergenti come patogeniumani.Sofia Influenza A+B FIAPage 15 of 18

Specificità analiticaReattività crociataIl test Sofia Influenza A+B FIA è stato valutato con un totale di diciotto (18) microrganismi batterici e fungini e sedici (16)isolati virali non influenzali. Gli isolati batterici e fungini sono stati valutati ad una concentrazione di 2x10 6 ufc/mL. Gli isolativirali sono stati valutati ad una concentrazione di 2x10 5 TCID50/mL. Nessuno degli organismi o dei virus non influenzalielencati qui sotto nella Tabella 11 hanno mostrato segni di reattività crociata nel dosaggio. Anche il flusso del campione el'aspetto della linea di controllo non hanno subito variazioni.Tabella 11Specificità analitica e reattività crociataOrganismo/virus non influenzale Concentrazione* Risultato Flu A Risultato Flu BBordetella pertussis 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoCanidida albicans 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoChlamydia trachomatis 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoCorynebacterium diphteriae 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoEscherichia coli 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoHaemophilus influenzae 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoLactobacillus plantarum 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoLegionella pneumophila 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoMoraxella catarrhalis 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoMycobacterium tuberculosis (avirulento) 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoMycoplasma pneumonia 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoNeisseria meningitidis 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoNeisseria subflava 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoPseudomonas aeruginosa 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoStaphylococcus epidermidis 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoStreptococcus pneumoniae 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoStreptococcus pyogenes 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoStreptococcus salivarius 2x10 6 ufc/ml Negativo NegativoAdenovirus tipo 1 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoAdenovirus tipo 7 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoCoronavirus umano (OC43) 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoCoronavirus umano (229E) 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoCoxsackievirus umano 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoCitomegalovirus 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus di Epstein Barr 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus parainfluenzale umano tipo 1 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus parainfluenzale umano tipo 2 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus parainfluenzale umano tipo 3 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoMorbillo 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoMetapneumovirus umano 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus della parotite 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus respiratorio sinciziale tipo A 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoVirus respiratorio sinciziale tipo B 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo NegativoRhinovirus tipo 1B 2x10 5 TCID 50 /ml Negativo Negativo*I livelli di batteri sono stati determinati limitando la diluizione, la coltura batterica e la conta delle colonie per produrre il valoreufc/ml. Le concentrazioni virali sono state determinate mediante metodi virologici standard, Reed-Muench.Sofia Influenza A+B FIAPage 16 of 18

Sostanze interferentiSono stati valutati campioni di sangue intero, mucina, e diversi prodotti farmaceutici da banco e prodotti chimici comuni, conrisultati negativi per quanto riguarda interferenze con il test Sofia Influenza A+B ai livelli analizzati (Tabella 12).Tabella 12Sostanze non interferentiSostanzaConcentrazioneSangue intero 4%Mucina 0,5%Ricola (Mentolo)1,5 mg/mlSucrets (diclonina/mentolo)1,5 mg/mlChloraseptic (mentolo/benzocaina)1,5 mg/mlNaso GEL (NeilMed)5% v/vCVS Nasal Drops (fenilefrina)15% v/vAfrin (oximetazolina)15% v/vCVS Nasal Spray (Cromolina)15% v/vNasal Gel (oximetazolina)10% v/vZicam5% v/vRimedio omeopatico (Alkalol) Diluizione 1:10Fisherman’s Friend1,5 mg/mlSore Throat Phenol Spray15% v/vTobramicina4 μg/mlMupirocina10 mg/mlFluticasone propionato5% v/vTamiflu (Oseltamivir fosfato)5 mg/mlASSISTENZAPer chiarimenti sull'uso di questo prodotto, contattare l'assistenza tecnica di Quidel al numero 800-874-1517 (numero verdenegli Stati Uniti) o 858-552-1100, da lunedì a venerdì, dalle 7 alle 17, ora di Los Angeles. Fuori degli Stati Uniti, contattare ildistributore di zona o technicalsupport@quidel.com.BIBLIOGRAFIA1. Murphy B.R. and Webster R.G., 1996, Orthomyxoviruses, pp. 1397-1445. In: Fields Virology, 3rd edition, B.N. Fields,D.M. Knipe, P.M. Howley, et al. (eds.), Lippincott-Raven, Philadelphia.2. CDC, Key Facts About Seasonal Influenza. www.cdc.gov/flu/keyfacts.htm accessed 7/2011.3. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th Edition. U.S. Department of Health and Human Services,CDC, NIH, Washington, DC (2007).4. Bartlett J. Management of Respiratory Tract Infections. 2nd Ed, 1999: 149-169.Sofia Influenza A+B FIAPage 17 of 18

20218 – Sofia Influenza A+B FIA – 25 TestMDSS GmbHSchiffgraben 4130175 Hannover,GermaniaQuidel CorporationSede internazionale10165 McKellar CourtSan Diego, CA 92121 USAquidel.com1170000IT00 (09/11)Rappresentante autorizzato nellaComunità europeaNumero di catalogoControllo positivoControllo negativoCodice di lottoPer uso diagnostico In VitroConsultare le istruzioni per l'usoUsare entro ilProduttoreSofia Influenza A+B FIALimiti di temperaturaPage 18 of 18