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Post-column 유도체화 - Young Lin

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아 산<br />

미<br />

노<br />

<strong>Post</strong>-<strong>column</strong> 유도체화<br />

전용 시스템<br />

아미노산 전용분석 시스템은 최고의 재현성 및 효율성을 갖고<br />

있는 <strong>Post</strong>-<strong>column</strong> 유도체화 방법을 이용한 시스템입니다.<br />

<strong>Post</strong>-<strong>column</strong> 유도체화 (<strong>Post</strong>-<strong>column</strong> derivatization)<br />

방법이란, 양이온 교환 컬럼에서 분리된 아미노산이 검출기로<br />

들어가기 전에 반응기에 유도체화 시약을 넣어주어 on-line으<br />

로 유도체를 만들어 검출하는 방법입니다.<br />

<strong>Post</strong>-<strong>column</strong> 유도체화를 통해 유리 아미노산 (생체 조직,<br />

스프, 채소, 과즙, 음료)이나 가수분해 된 아미노산 (펩타이드,<br />

단백질, 콜라겐, 가공식품)을 고감도로 분석할 수 있습니다.<br />

영린 아미노산 전용분석 시스템은 아미노산 분석에 대하여<br />

Ninhydrin(TRIONE) 과 OPA(o-Phthalalehyde) 두가지의<br />

유도체화 방법을 제공하고 있습니다.<br />

필수 아미노산을 포함한 18 종 아미노산 분석에는 Sodium ion<br />

exchange 컬럼 및 시약을 공급하고, 광범위한 분석이 필요한<br />

경우에는 47 종 아미노산을 분석할 수 있는 Lithiumexchange<br />

컬럼 및 시약을 공급합니다. 또한 분석 목적에 따라 적합한 응용<br />

키트를 제공, 신뢰성 있는 데이터 확보까지 전 과정에 대한 솔루<br />

션을 제공해 드립니다.<br />

Ninhydrin법<br />

유리 아미노산을 양이온 교환 컬럼으로 분리한 후 Ninhydrin과 반응시켜 UV/Vis 검출기<br />

로 검출하는 방법입니다. Ninhydrin법의 경우 1 차, 2 차 아미노산 모두에 대해 유도체화가<br />

가능하며, 1 차 아미노산의 경우 130℃에서 Ninhydrin 시약과 반응하여 Hydrindantin을<br />

거쳐 570 nm, 405 nm에서 최대 흡광도를 갖는 보라색의 반응물이 생성됩니다.<br />

따라서, Ninhydrin법의 경우는 UV/VIS 검출기를 이용합니다.<br />

Ninhydrin<br />

OPA법<br />

1° Amino Acid<br />

CO2<br />

H NH2<br />

R<br />

130°C, 50 sec<br />

Hydrindanth<br />

그림1 . 1 차 아미노산의 Ninhydrin법<br />

Ruhemann's Purple<br />

570, 405 nm<br />

유리 아미노산을 양이온 교환 컬럼으로 분리한 후 OPA와 반응시켜 형광검출기로 검출하는<br />

방법입니다.OPA법의 경우 1 차 아미노산에 대하여 유도체화가 가능하며, Ninhydrin법과<br />

는 달리 상온에서 OPA시약 및 Thiofluor와 반응하여 형광을 띄는 Isoindole이 생성됩니다.<br />

따라서 OPA법의 경우는 형광검출기를 이용합니다.<br />

OPA<br />

1° Amino Acid<br />

NMe2<br />

CHO CO2 - pH ≥ 9, RT<br />

S<br />

H NH2<br />

H<br />

CHO<br />

R<br />

H CO2 -<br />

R<br />

HS<br />

NMe2<br />

N-Substiruted 2-Alkylthio Isoindole<br />

Thiofluor<br />

그림2. 1 차 아미노산의 OPA법<br />

영 린 기 기


아미노산 분석을 위한 <strong>Post</strong>-<strong>column</strong> 조건 (공통)<br />

Ninhydrin법<br />

• Reagent : TRIONE<br />

• Reactor : 130℃, 0.5 mL<br />

• Reagent Flow Rate : 0.3 mL/min<br />

• Detection<br />

UV/Vis Detector : λ = 570 nm for primary amino acids<br />

λ = 440 nm for secondary amino acids<br />

OPA법<br />

• Reagent : 300 mg of OPA, 2 g Thiofluor TM 3 mL of 30% Brij<br />

35 solution in 950 mL of OPA Diluent (OD104)<br />

• Reactor : 45℃, 0.15 mL<br />

• Reagent Flow Rate : 0.3 mL/min<br />

• Detection<br />

Fluorescence Detector : λex 330 nm<br />

λem 465 nm<br />

22 종의 아미노산 표준시료 분석<br />

10<br />

3 4 5 6<br />

8<br />

9<br />

11 12 13<br />

14<br />

1516<br />

18<br />

19<br />

20<br />

Protein<br />

Hydrolysate<br />

1<br />

3 4<br />

5<br />

6<br />

11<br />

9 1213<br />

18<br />

14<br />

8<br />

20<br />

10<br />

15 16 17<br />

19<br />

Collagen<br />

Hydrolysate<br />

7<br />

21<br />

22<br />

2<br />

7<br />

22<br />

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60<br />

min<br />

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60<br />

min<br />

1. Methionine-D, L-Sulfoxide<br />

2. trans-4 Hydroxy-LProline<br />

3. Aspatic Acid<br />

4. Threonine<br />

5. Serine<br />

6. Glutamic Acid<br />

7. Proline<br />

8. Glycine<br />

9. Alanine<br />

10. Cystine<br />

11. Valine<br />

12. Methionine<br />

13. Isoleucine<br />

14. Leucine<br />

15. Tyrosine<br />

16. Phenylalanine<br />

17. D, L & allo-Hydroxylysine<br />

18. Lysine<br />

19. Ammonia<br />

20. Histidine<br />

21. Tryptophan<br />

22. Argnine<br />

고객 지원 프로그램<br />

• 무상 품질 보증기간 2년<br />

• 고객 요청 후 24시간 이내 서비스<br />

• 매월 정기 워크샵 개최<br />

• 매월 유지보수 워크샵 개최<br />

• 매월 초청 세미나 개최<br />

• 찾아가는 서비스 On-Site Seminar<br />

• 연간 유지보수 계약을 통한 효과적인 기기관리<br />

(431-836) 경기도 안양시 동안구 안양천동로 60 영린빌딩 (구 경기도 안양시 동안구 호계2동 899-6)<br />

■ E-mail: sales@younglin.com ■ Homepage: www.younglin.com<br />

■ 본사 : Tel: 031-428-8700 ■ Fax: 031-428-8787<br />

■ 대전: T.042-825-8705 / F.042-825-8709 ■ 대구: T.053-741-0732 / F.053-741-0733 ■ 부산: T.051-851-5240 / F.051-851-5241

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