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Determinação do método de inoculação e da concentração de inóculo
para identificação de genótipos de meloeiro resistentes a Acidovorax
avenae subsp. citrulli.
Caroline da Costa Melo 1 ; Selma Rogéria C. Nascimento 1 ; Andréa Mendonça dos
Santos Peixoto 1 ; Elaíne Welk Lopes Pereira 1 ; Glauber Henrique de Sousa Nunes 1 ;
Lonjoré Leocádio de Lima 1 ;Francisco Bezerra Neto 1 1 Depto. de Fitotecnia, Escola Superior de
Agricultura de Mossoró-ESAM, caixa postal 137, CEP 59.625-900, Mossoró – RN. E-mail: glauber@esam.br.
RESUMO
O objetivo do trabalho foi determinar o método de inoculação e concentração de inóculo que
proporcionem uma melhor identificação de genótipos de melão resistentes à bactéria A.
avenae. Para isso, foram conduzidos dois experimentos em delineamento inteiramente
casualizado com quatro repetições. No primeiro experimento, os tratamentos foram
arranjados em esquema fatorial, tendo como fatores, isolados da bactéria (Me 112, Me 120
e Me 125) e concentrações da suspensão (10 5 , 10 7 e 10 9 ufc.mL -1 ). No segundo
experimento, os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial, tendo como fatores,
métodos de inoculação (agulha e pulverização) e isolados da bactéria (Me 112, Me 120, Me
125, Me 140 e Me 148). As plantas foram inoculadas aos 20 dias de idade com uma com a
suspensão bacteriana na concentração de inóculo de 10 9 ufc/mL. Após a inoculação, as
plantas permaneceram por 48 horas em câmara úmida formada de um saco plástico
previamente umedecido. As plantas foram avaliadas aos 8 dias após a inoculação através
de uma escala de notas variando de 1 (sem sintomas) até 6 (plantas mortas). Não foi
detectado efeito significativo para os efeitos de isolados e interação isolados e
concentrações. A análise de regressão indicou efeito significativo (P≤0,05) da concentração
do inoculo, com o modelo ajustado y = 2,31 + 0,008.(log10 x) 0,5 e coeficiente de determinação
de 99,98 %. A severidade da doença aumentou em função da concentração do inoculo. Não
se observou diferenças significativas entre os métodos de inoculação, isolados e interação
entre esses fatores.
Palavras-chave: Cucumis melo L., metodologia, seleção.
ABSTRACT

Determination of method of inoculation and inoculum concentration to identification of
genotypes of melon resistant to Acidovorax avenae subsp. citrulli
Two experiments were carried out with the objective to study inoculation methods and
concentrations on genotype identification of melon resistant to A. avenae bacterium. The
experimental design used in both experiments was a completely randomized with four
replications. In the first experiment a 3 x 3 factorial scheme was arranged. The treatments
consisted of the combination of three bacterial strains (Me 112, me 120 and me 125) with
three inoculation concentrations (10 5 , 10 7 and 10 9 ufc.mL -1 ). In the second experiment, a 2 x
5 factorial scheme was arranged. The treatments consisted of the combination of two
inoculation methods (needle and spraying) with five bacterial strains (Me 112, Me 120 and
Me 125, Me 140 and Me148). The plants were inoculated at twenty days of age with a
bacterial suspension in the concentration of 10 9 ufc/mL. After the inoculation, the plants
stood to 72 hours in the moist chamber formed of a moist plastic bag. The plants were
assessed at eight days after the inoculation through a score scale varying from 1 (no
symptom) until 6 (died plants). It was not observed significant interaction between the
treatment-factors studied, among bacterial strains and between inoculation methods for any
assessed traits. A response equation y = 2.31+0.008(log10X) 0.5 with R 2 = 99.98% was fitted for
disease severity in function of inoculation concentrations. The disease severity increased
with inoculation concentrations increasing. It wasn’t observed differences between methods
of inoculations, strains and interaction between them.
Key-words: Cucumis melo L., methodology, selection
O meloeiro (Cucumis melo L.) é a principal hortaliça cultivada no estado do Rio
Grande do Norte, sendo essa unidade federativa responsável por mais de 50% da produção
no ano de 2000 (Soares, 2001).
As doenças que afetam essa cultura são responsáveis pela redução na quantidade
de frutos comerciais produzidos, acarretando prejuízos consideráveis aos produtores.
Dentre as enfermidades que acometem o meloeiro está a mancha aquosa, causada pela
bactéria Acidovorax avenae subsp. citrulli, que tem causado perdas de 40 a 50%, podendo
atingir até 100 % em algumas áreas produtoras do estado (Sales Júnior e Menezes, 2001).
A introdução da mancha aquosa no Nordeste ocorreu provavelmente pelo uso de
sementes contaminadas importadas da América do Norte (Assis et al., 1999). Nesse
sentido, o controle da mancha aquosa mais recomendável é a exclusão, evitando-se a
entrada do patógeno na área pelo uso de sementes sadias e eliminação de cucurbitáceas
silvestres hospedeiras da bactéria. Por outro lado, uma vez a bactéria presente, são

ecomendadas a rotação de culturas, uso de bactericidas e fungicidas cúpricos, uso de
ativadores de resistência e cultivo de genótipos resistentes.
A utilização de genótipos resistentes tem a vantagem da fácil adoção por parte do
produtor e não agressão ao meio-ambiente. Com efeito, a identificação de fontes de
resistência à bactéria deve ser considerada nos programas de melhoramento. Não obstante,
é necessário definir a melhor maneira de selecionar os genótipos resistentes. Dentro desse
contexto, é importante determinar os critérios de avaliação, a forma de inoculação e a
concentração de inoculo que será utilizada para distinção do materiais.
Assim sendo, o presente trabalho tem como objetivo determinar o método de
inoculação e potencial de inoculo que proporcionem uma melhor identificação de genótipos
de melão resistentes à bactéria A. avenae.
MATERIAL E MÉTODOS
Os experimentos foram conduzidos no Departamento de Fitossanidade da Escola
Superior de Agricultura de Mossoró-ESAM, situada no município de Mossoró que se
encontra à latitude Sul 5º 11’, longitude 37º 21’ a Oeste de Greenwich e altitude de 18
metros. O clima, segundo a classificação de Koppen é BSwh’ que significa muito seco, com
estação de chuva no verão atrasando-se para o outono.
Nos dois experimentos, foi utilizado o híbrido simples do tipo amarelo AF-646,
considerado suscetível ao patógeno.
Determinação da concentração de inóculo
As sementes foram semeadas em bandejas de isopropileno e transplantou-se as
plântulas aos 15 dias após à semeadura para sacos plásticos pretos. As plantas foram
inoculadas aos 20 dias de idade pulverizando-se com a suspensão bacteriana até o
escorrimento. Após a inoculação, as plantas permaneceram por 72 horas em câmara úmida
formada de um saco plástico previamente umedecido. As plantas foram avaliadas aos 8
dias após a inoculação através de uma escala de notas variando de 1 (sem sintomas) até 6
(plantas mortas).
O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições, sendo
a parcela constituída por uma planta por saco plástico. Os tratamentos foram arranjados em
esquema fatorial 3 x 2, sendo o primeiro fator a concentração de inoculo (10 5 , 10 7 e 10 9
ufc/mL) e o segundo fator o isolado (isolados Me 112, Me 120). Todos os isolados foram
obtidos de frutos atacados provenientes dos municípios de Mossoró e Baraúna, principais
produtores do Rio Grande do Norte.

Determinação da metodologia de inoculação
Semeou-se sementes do híbrido em bandejas de isopropileno e transplantou-se as
plântulas aos 15 dias após à semeadura para sacos plásticos pretos. As plantas foram
inoculadas aos 20 dias de idade por dois métodos. No primeiro método, utilizou-se agulhas
múltiplas para ferir três folhas da planta, sendo o patógeno imediatamente colocado em
contato com os ferimentos, através de uma esponja embebida com a suspensão bacteriana.
No segundo método, pulverizou-se a planta até o escorrimento com a suspensão
bacteriana. Em ambos métodos foi utilizada uma concentração de inóculo de 10 9 ufc/mL.
Após a inoculação, as plantas permaneceram por 72 horas em câmara úmida formada de
um saco plástico previamente umedecido.
As plantas foram avaliadas aos 8 dias após a inoculação através de uma escala de
notas variando de 1 (sem sintomas) até 6 (plantas mortas).
O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições, sendo
a parcela constituída por uma planta por saco plástico. Os tratamentos foram arranjados em
esquema fatorial 2 x 5, com o primeiro fator, o tipo de inoculação, constituído por dois níveis
(agulha e pulverização); e o segundo fator, isolado, composto por cinco níveis (isolados Me
112, Me 120, Me 125, Me 147 e Me 148). Todos os isolados foram obtidos de frutos
atacados provenientes dos municípios de Mossoró e Baraúna, principais produtores do Rio
Grande do Norte.
As análises estatísticas dos dois experimentos foram feitas por meio de análise de
variância e teste de comparação múltipla pelo critério de Scott-Knott com um nível de
significância de 5% de probabilidade. Utilizou-se o programa SISVAR para realização de
todas as análises.
Determinação da concentração de inoculo
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Não se observou significância para os efeitos de isolados e interação isolados e
concentrações. A análise de regressão indicou efeito significativo (P≤0,05) da concentração
do inoculo, com a severidade da doença aumentando em função da concentração do
inoculo (Figura 1). Silveira et al. (2003) observaram que a severidade da mancha-aquosa
aumentou com o incremento da concentração de inoculo.
Esse fato ressalta a necessidade de controle da bactéria nas fontes de inoculo para
infecções nas folhas, tais como hospedeiras voluntárias, hospedeiras alternativas e

sementes, em adição ao às folhas de meloeiro infetadas que servem como reservatório da
bactéria para infecção nos frutos (Isakeit, 1999).
Severidade (Nota)
4.50
4.00
3.50
3.00
2.50
2.00
5 7 9
Log - Concentração de inóculo (ufc/mL)
y = 2,31 + 0,08 . (ln10 x) 2,5 r 2 = 99,98%
Figura 1.Severidade do ataque de A. avenae subsp
citrulli em folhas de meloeiro em função do
potencial de inoculo. Mossoró-RN, 2003.
Determinação da metodologia de inoculação
Não se observou diferenças significativas entre os métodos de inoculação, isolados e
interação entre esses fatores. Assim sendo, entre os métodos de inoculação testados,
recomenda-se a utilização do método com pulverização em razão da maior facilidade e por
se aproximar mais das condições naturais no patossistema.
LITERATURA CITADA
ASSIS, S.M.P.; MARIANO, R.L.P.; SILVA-HANLIN, D.M.W.; DUARTE, V. Mancha-aquosa
do melão causada por Acidovorax avenae subsp. Citrulli, no estado do Rio Grande do
Norte. Fitopatologia Brasileira, Brasília, v. 24, n.2, p. 191. 1999.
ISAKEIT, T.; BLACK, M.C.; BARNES, L.W.; JONES, J.B. First report of infection of
honeydew with Acidovorax avenae subsp. Citrulli. Plant Disease, v. 81, n.3, p. 694. 1999.

SALES JÚNIOR, R.; MENEZES, J.B. Mapeamento das doenças fúngicas, bacterianas e
viróticas do cultivo do melão no estado do Rio Grande do Norte. Mossoró. Escola
Superior de Agricultura de Mossoró. Relatório Técnico. 2001. 25p.
SILVEIRA, E.B.; MICHEREFF, S.J.; MARIANO, R.L.R. Severidade da mancha-aquosa em
meloeiro sob diferentes condições de molhamento foliar e concentração de inoculo de
Acidovorax avenae subsp. Citrulli. Fitopatologia Brasileira, Brasília, v. 28, n.2, p. 171-
175. 2003.
SOARES, S. P. F. Qualidade do melão (Cucumis melo L.) exportado pelo porto de
Natal-RN. Mossoró-RN: ESAM, 2001. 55p. (Monografia de Graduação).