Cuantificarea efectelor unor noi factori reglatori celulari si moleculari

42-172/2008Cuantificarea efectelor unor noi factori reglatori celulari si moleculariai micromediului asupra tolerantei imune in cursul terapieiantiinflamatoare si/sau antitumoraleInstitutia coordonatoare: Institutul National deCercetare Dezvoltare in Domeniul Patologieisi Stiintelor Biomedicale “Victor Babes”Director Proiect:Prof. Dr. Carmen Ardeleanu

Parteneri in consortiu:1. INCD “Victor Babes:2. Spitalul Clinic “Sfanta Maria” Bucuresti3. Spitalul Universitar de Urgenta Bucuresti4. UMF “Carol Davila” Bucuresti5. UMF Craiova• Buget (conform AAd 2010): 1.990.000 lei2009: 282.500 lei2010:149.249 lei2011: 1.558.251 leihttp://www.ivb.ro/Contract nr. 42-172_2008.pdfhttp://www.ivb.ro/Contract nr. 42-172_2008_en.pdf

Obiectiv: Prin aplicarea tehnologiilor diagnostice de varf (biologie moleculara, imunohistochimie,citometrie in flux, proteomica) in urmarirea unor noi parametri comuni necesari pentru aplicarea simonitorizarea bioterapiei inflamatiilor cronice autoimune si a tumorilor maligne, IMUNOTER seincadreaza in obiectivul general al PNCDI II, privind serviciile inovative. Cuantificarea efectelor noilortipuri de celule T reglatoare (Treg CD4+CD25+FoxP3+) va oferi un plus de precizie diagnosticului,fiind in acelasi timp un mijloc de optimizare a metodelor de preventie in tumori maligne.Elemente de noutate:Propunerea se incadreaza in cea mai noua abordare a imunotolerantei si imunosupresiei atatdin punctul de vedere al caracterizarii unor noi factori reglatori celulari si moleculari cat si din celal noii orientari a bioterapiei.Beneficiarii rezultatelor:-Serviciile de anatomie patologica:-Pacientii din clinicile de Reumatologie-Pacientii din clinicile de OncologiePotentialul de aplicare in economie:-Detectarea si caracterizarea imunohistochimica si moleculara a unor noi markeri ai modulariiraspunsului imun poate fi aplicata in industria farmaceutica in cursul producerii unor noi agentiantiinflamatori sau antitumorali utilizati in terapiile biologice-In economia sanitara aplicarea unor terapii adecvate bazate pe noi factori celulari si molecularipoate duce la importante reduceri de preturi prin evitarea unor terapii costisitoare inutile

Etapa I/2009Documentare. Recoltare probe. Stabilirea criteriilor de includere siexcludere. Alcatuirea loturilor de studiu (artrita reumatoida, tumorimaligne epiteliale si limfoame maligne)Buget: 250.000 leiCheltuieli de personal: 153.833 leiCheltuieli materiale si servicii: 38.501 leiCheltuieli indirecte: 57.666 leiActivitati realizateDocumentare stiintificaFoxp3 in autoimunitateFoxp3 in tumori maligneCriterii de includere si excludereArtrita reumatoidaTumori maligneConsimtamantul scris al pacientuluiFisa de urmarire a pacientuluiAnaliza histopatologica si imunohistochimica preliminara

Etapa II/2009Analiza componentelor celulare si matriciale microambientale (subtipuri delimfocite T, MMP) in biopsii sau punctii-biopsii sinoviale. Stabilireaparametrilor pentru alcatuirea unei baze de dateBuget: 32.500 leiCheltuieli de personal: 19.436 leiCheltuieli materiale si servicii: 5.000 leiCheltuieli indirecte: 8. 064 leiActivitati realizate• Analiza componentelor celulare si matriciale microambientale(subtipuri de limfocite T,MMP) in biopsii sau punctii-biopsiisinoviale.• Stabilirea parametrilor pentru alcatuirea unei baze de date

Etapa III/2010Determinarea profilului imun al micromediului cu accent asuprafactorilor reglatori celulari si moleculari in artrita reumatoida in cazuriarhivate si nou-aparute; corelatii cu nivelul raspunsului la terapieBuget: 149.244Cheltuieli de personal: 103.282 leiCheltuieli materiale si servicii: 16.800 leiCheltuieli indirecte: 29.162 leiActivitati realizate• A3.1.- Stabilirea parametrilor pentru alcatuirea unei baze de date.• A 3.1. - Analiza componentelor celulare si matriciale microambientale (subtipuri de limfocite T, MMP) inbiopsii sau punctii-biopsii sinoviale• A 3.3.- Determinare flow-citometrica in singele periferic, lichid sinovial si suspensii celulare a profiluluicelulelor T-reglatoare (Treg) la cazurile selectate de AR in corelatie cu terapia aplicata.• A 3.4.- Izolarea pe bile magnetice a celulelor Treg din sangele periferic sau din suspensii celulare.• A 3.5.- Determinarea imunohistochimica a expresiei receptorilor de suprafata (CD4, CD25, Neuropilin 1,GITR) si a Foxp3 in celulele Treg in repaus sau activate, in cazurile de AR. Incadrarea profilului obtinut inbaza de date.• A 3.6 .- Imunofenotiparea unor factori reglatori serici si de micromediu tisular (TGF-beta, IL-2,IL-2R,OX40, CTLA4), cu rol in modularea comportamentului imunosupresor al celulelor Treg in AR .• A 3.7. - Diseminare rezultate intermediare prin comunicari/poster la manifestari stiintifice nationale siinternationale sau publicatii.

TINERI CERCETATORICo – 7; P1 – 3; P3 -2• Alina Georgescu – drd – tumori mamare la femei tinere• Simona Enache –drd – GIST• Florina Cionca –drd- Mutatii gena Kras• Maria Neagu biolog CS –drd• Diana Ene Teletin - biolog• Maria Comanescu – drd –tumori mamare triplu negative- finalizat 2010• Alina Nicolae – rezident anatomie patologica

INDICATORI DE REZULTATGenerali 2009-2010• 4. Număr de articole publicate în urma proiectelor- din care:a) în reviste indexate ISI: 2- 1 rez. Virchow Arch 2010,vol 457,nr.2 pag169- 1 rez. in Histopathology, volume: 57, pg 267 suppl. 1 2010b) în reviste indexate în alte baze de date internaţionale recunoscute :1 rez. Int Immunol Aug 2010, vol.22, suppl. 1, PP036-45 ISSN 0953-8178• 10. Numărul mediu de poziţii echivalente cu-normă întreagă pe proiect, din care:a) doctoranzi :4b) postdoctorat: 0,25• 11. Mobilităţi din care internaţionale -Lună x om = 0• 12. Valoarea investiţiilor în echipamente pentru proiecte - 0 Mii Lei• 13. Rata de succes în depunerile de proiecte 95%

INDICATORI DE REZULTATspecifici 2009-2010• Nr. metode pe baze moderne deinvestigatie in medicina:– 1 - optimizare citometrie in flux pentruidentificarea celulelor Treg Foxp3+ inmaterial proaspat;– 1 – identificare imunohistochimica specifica acelulelor Treg Foxp3+ in material arhivatinclus la parafina

Valorificari 2009 - 2010• Comunicari la manifestari stiintificeinternationale (prevazute in planul de realizare):– G.Manda, IV Neagoe, L Albulescu, V Preoteasa, AR Balanescu: Earlyimmune changes induced by leflunomide therapy in rheumatoidarthritis. 14 th Int Congr of Immunol.,Kobe, Jap, Aug 2010, Int ImmunolAug 2010, vol.22, suppl. 1, PP036-45 ISSN 0953-8178– Comanescu, M.,Ardeleanu, C. , Histopathological andimmunohistochemical assesment of the microenvironment of triplenegative breast cancers, HISTOPATHOLOGY Volume: 57 Pages:267-267 Supplement: Suppl. 1 Meeting Abstract: 740, OCT 2010– Georgescu, A. G. Mihaela, Stoicea, M. C., Andrei, F., Vasilescu, F.,Terzea, D., Mihai, M., Arsene, D., Enache, S., Cionca, F., Butur, G.,Ardeleanu, C. Stromal-tumor cell interactions in breast cancer in youngwomen, VIRCHOWS ARCHIV Volume: 457 Issue: 2 Pages: 169-170 Published: AUG 2010

Valorificari 2009 - 2010• Comunicari la manifestari stiintificenationale (prevazute in planul de realizare):– Manda G, Neagoe I V, Butur G, Iosif C, Ardeleanu C, Predeteanu D:Fenotipul limfocitelor si profilul citokinelor la pacienti cu artritareumatoida tratati cu agenti biologici: Al 6-lea Simpozion National dePATOLOGIE, 3-5 Noiembrie,2009, BUCURESTI, ISBN 978-973-708-443-9.– C.Ursaciuc, M.Surcel, R.Huica, D.Ciotaru, IR.Parvu, C.Ardeleanu,G.Butur, D.Predeteanu, M.Dobre, S.Sorca: Helper and regulatory T-lymphocyte evaluation during biologic and immunosuppressive therapyfor rheumatoid arthritis. Immunol and Clin Allergol Joint Meeting 28 Apr-1 May Sibiu, Romania, Abstr. P. 18, ISBN 978-973-88744-3-5

Valorificari 2009-2010• WORKSHOP - CARACTERISTICILEMICRMEDIULUI IN ARTRITA REUMATOIDA- Plan derealizare 2010– Determinarea celulelor Treg in sangele periferic lapacientii cu artrita reumatoida– Variabilitate imunologica in artrita reumatoida– Raspunsul imun celular in sinoviala din artritareumatoida– Terapia biologica in artrita reumatoida

ACTIVITATI 2011• Evaluarea profilului imun al micromediului cu accentasupra factorilor reglatori celulari si moleculari intumori epiteliale maligne si limfoame in cazuriarhivate si nou-aparute; corelatii cu nivelulraspunsului terapeutic.– Analiza componentelor celulare si matricialemicroambientale (subtipuri de limfocite T, MMP) in biopsiisau piese operatorii din tumori CDI, NSCLC, LMH si LMnH.– Determinare flow-citometrica in singele periferic a celulelorT-reglatoare (Treg) la cazurile selectate de CDI, NSCLC,LMH, LMnH.

ACTIVITATI 2011• Determinarea expresiei receptorilor de suprafata (CD4, CD25,Neuropilin1,GITR) si a Foxp3 in celulele Treg in repaus sau activate, intumorile selectate (CDI, NSCLC, LMH, LMnH).• Imunofenotiparea complexului de factori reglatori de micromediu tisular(TGF-beta, IL-2, IL-2R, OX40, CTLA4), cu rol in modulareacomportamentului imunosupresor al celulelor Treg in CDI, NSCLC, LMH,LMnH.• Stabilirea statusului functional al celulelor Treg (CD4+ CD25+FoxP3 +).• Evaluarea rolului prognostic si predictiv al profilului genic in AR, carcinoamesi limfoame in corelatie cu biomarkerii modularii raspunsului imun in cursulterapiei specifice.• Completarea bazei de date cu rezultatele obtinute si corelatii statistice.Diseminare rezultate prin comunicari la manifestari stiintifice nationale siinternationale. Publicatii.

ACTIVITATI 2011• SE VOR REALIZA TOATE ACTIVITATILE PREVAZUTE IN 2011 SIIN FUNCTIE DE BUGET SE VA STABILI NUMARUL DE CAZURILUATE IN STUDIU• ELEMENTELE DE NOUTATE SI ORIGINALITATE VOR FIMENTINUTE• BUGETUL DORIT ESTE CEL DIN CONTRACT SI VOM AJUSTACHELTUIELILE IN FUNCTIE DE FINANTARE, ASTFEL INCATREZULTATELE SA FIE CELE PRECONIZATE

BUGET INITIAL 2011- 840.000 leiCheltuieli de personalCheltuieli materiale si serviciiCheltuieli indirecte

Va multumesc!