Antioksidan Ajanların Deneysel Olarak Oluşturulan Akciğer Fibrozu ...
Antioksidan Ajanların Deneysel Olarak Oluşturulan Akciğer Fibrozu ...
Antioksidan Ajanların Deneysel Olarak Oluşturulan Akciğer Fibrozu ...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<strong>Antioksidan</strong> <strong>Ajanların</strong> <strong>Deneysel</strong> <strong>Olarak</strong> <strong>Oluşturulan</strong> <strong>Akciğer</strong> <strong>Fibrozu</strong><br />
Üzerinde Etkinliğinin Değerlendirilmesi<br />
B.Şahin 1 , M. Fayda 1 , S.Başkaya 3 , G. Kemikler 1 , N. Tenekeci 1 , V.Olgaç 1 , M. Soluk 1 ,<br />
S.Solakoğlu 2 , E.N.Oral 1<br />
1 İstanbul Üniversitesi Onkoloji Enstitüsü<br />
2 İstanbul Üniversitesi Tıp fakültesi Histoloji ve Embriyoloji A.B.D.<br />
3 Vakıf Gureba Eğitim Araştırma Hastanesi, Radyasyon Onkolojisi A.B.D
Amaç:<br />
Radyasyona bağlı<br />
“Pnömopati”<br />
Radyasyon Pnömoniti RT’ye bağlı<br />
N-asetil sistein NAC<br />
Fibrozis<br />
Süperoksit Dismutaz/Katalaz enzimleri kombinasyonu<br />
Rapamisin (Sirolimus)
Kerr, J.B., Chapter 11 Respiratory System In. Atlas of functional histology. Elsevier;1999.p. 212-224
Ufuk, M., .Toksikolojide Serbest Radikallerin Önemi. Yüzüncü Yıl Üniversitesi Vet. Fak. Derg, 2004. 15(1-2): p. s 91-96.
RADYASYONUN AKCİĞER ÜZERİNDE ETKİLERİ<br />
Strieter, R.M., Keeley, E.C., Hughes, M.A., Burdick, M.D. ve Mehrad, B., The role of circulating mesenchymal progenitor cells (fibrocytes) in the pathogenesis<br />
of pulmonary fibrosis. J Leukoc Biol, 2009. 86(5): p. 1111-8.<br />
Anscher, M.S., Kong, F.M., Andrews, K., Clough, R., Marks, L.B., Bentel, G. ve Jirtle, R.L., Plasma transforming growth factor beta1 as a predictor of radiation<br />
pneumonitis. Int J Radiat Oncol Biol Phys, 1998. 41(5): p. 1029-35.<br />
Phillips, R.J., Burdick, M.D., Hong, K., Lutz, M.A., Murray, L.A., Xue, Y.Y., Belperio, J.A., Keane, M.P. ve Strieter, R.M., Circulating fibrocytes traffic to the lungs<br />
in response to CXCL12 and mediate fibrosis. J Clin Invest, 2004. 114(3): p. 438-46.
RADYASYONUN AKCİĞER ÜZERİNDE ETKİLERİ<br />
Lamouille, S. ve Derynck, R., Cell size and invasion in TGF-beta-induced epithelial to mesenchymal transition is regulated by activation of the mTOR pathway.<br />
J Cell Biol, 2007. 178(3): p. 437-51.
Superoksit Dismutaz (SOD) ve Katalaz<br />
• 1967 yılında Irwin Frodovich ve Joe McCord<br />
• Cu-Zn SOD<br />
• Fe-SOD<br />
• Mn-SOD<br />
• Ni-SOD<br />
• S. Delanian, 1994, Cilt fibrozu<br />
• Beckman, 1987, PEG + SOD (Yarı<br />
ömür 40 s. )<br />
Delanian, S., Baillet, F., Huart, J., Lefaix, J.L., Maulard, C. ve Housset, M., Successful treatment of radiation-induced fibrosis using liposomal Cu/Zn superoxide<br />
dismutase: clinical trial. Radiother Oncol, 1994. 32(1): p. 12-20<br />
Beckman, J.S., Minor, R.L., Jr., White, C.W., Repine, J.E., Rosen, G.M. ve Freeman, B.A., Superoxide dismutase and catalase conjugated to polyethylene<br />
glycol increases endothelial enzyme activity and oxidant resistance. J Biol Chem, 1988. 263(14): p. 6884-92
• 1960’larda üretilen ,<br />
• Mukolitik ajan<br />
• Parasetamol zehirlenmesi<br />
• Kontrast madde nefropatisi<br />
N-Asetil Sistein (NAC)<br />
• İdiopatik akciğer fibrozu (IPF)<br />
• Neal, RT sonrası<br />
Glutatyon (GSH)<br />
GSH , pnömoniti Ø<br />
Neal, R., Matthews, R.H., Lutz, P. ve Ercal, N., Antioxidant role of N-acetyl cysteine isomers following high dose irradiation. Free Radic Biol Med, 2003. 34(6):<br />
p. 689-95<br />
Meyer, A., Buhl, R., Kampf, S. ve Magnussen, H., Intravenous N-acetylcysteine and lung glutathione of patients with pulmonary fibrosis and normals.<br />
Am J Respir Crit Care Med, 1995. 152(3): p. 1055-60
• Rapa Nui<br />
Rapamisin (Sirolimus)<br />
• Streptomiçes Hygroscopius bakterisinden bir antifungal ajan<br />
olarak üretilmiştir.<br />
• Böbrek transplantasyonunda antifibrotik ajan<br />
• mTOR Complex 1 inhibe eder.<br />
• Rapamisin IL-2 yanıtını baskılayarak T ve B hücrelerinin<br />
aktivasyonunu engeller.<br />
• T hücrelerinin G1 hücre siklusu fazında duraklamasına ve<br />
apoptozlarına yol açar<br />
McAlpine, J.B., Swanson, S.J., Jackson, M. ve Whittern, D.N., Revised NMR assignments for rapamycin. J Antibiot (Tokyo), 1991. 44(6): p. 688-90<br />
Mita, M.M., Mita, A. ve Rowinsky, E.K., The molecular target of rapamycin (mTOR) as a therapeutic target against cancer. Cancer Biol Ther, 2003. 2(4 Suppl 1):<br />
p. S169-77.
Deney Hayvanları:<br />
Gereç ve Yöntem<br />
• 28 Eylül-9 Ekim 2009: Deney Hayvanları<br />
• 27 Ekim 2009 : Etik Kurul Onayı<br />
Kullanım Kursu<br />
• 24 adet, 6-8 haftalık W.Albino cinsi dişi sıçanlar kullanıldı.<br />
• 21±2 °C, 12 saat aydınlık - 12 saat karanlık<br />
• 4 gruba ayrıldı<br />
• PEG-SOD,PEG-Katalaz Grubu<br />
• N-Asetil Sistein Grubu<br />
• Rapamisin Grubu<br />
• Kontrol Grubu
Kimyasal Maddeler:<br />
Gereç ve Yöntem<br />
Anestezi: Ketamin Hidroklorur ve Xylazine<br />
1) Polietilen glikol ile kaplanmış<br />
2) N-Asetil Sistein (NAC)<br />
3) Rapamisin (Sirolimus)<br />
(Ketalar 50mgr/ml; Pfizer, Rompun 5mgr/ml; Bayer)<br />
superoksit dismutaz ve katalaz enzimleri<br />
(PEG-SOD 1mgr/flk ; Sigma, PEG-Katalaz 2 mgr/flk; Sigma )<br />
(Asist 300 mgr/ampül; Hüsnü Arsan)<br />
(Rapamune 1mgr/tb; Wyeth)
13 Gy<br />
NAC<br />
Kontrol<br />
Fibroz +<br />
SOD/Katalaz<br />
Rapamisin<br />
22 hafta
• RT Uygulaması:<br />
• Bir sıçanla BT simulasyon yapıldı.<br />
Yöntemler<br />
Co60, Saturn, Oncor , Clinac, Cyberknife planlamaları<br />
• Hedef alan sağ<br />
• SSD 78.5 cm<br />
• Yarı<br />
• Konus çapı<br />
kalınlık 1.5 cm,<br />
akciğer üst zon ( 1cm 2 )Doz Dağılım? Doz Hızı?<br />
1cm olarak ayarlandı<br />
• Tek fraksiyonda 13 Gy (1450 MU)<br />
yapıldı.
PEG-SOD ve PEG-Katalaz uygulamaları<br />
• PEG-SOD 1 mgr/kg , PEG-Katalaz 2 mgr/kg’dan<br />
intraperitoneal haftada bir, 3 kez verildi
N Asetil Sistein (NAC) uygulamaları<br />
• 300 mgr/kg’dan günaşırı olacak şekilde 3 hafta boyunca<br />
verildi.
Rapamisin Uygulamaları<br />
• 1 mgr’lik tabletler, phosal 50pg solüsyonu eritildi.<br />
• 3 hafta boyunca günaşırı 0.5 mgr/kg/gün dozundan verildi.
Kilo Takibi<br />
Hafta 22.hf 21.hf 20.hf 19.hf 18.hf 17.hf 16.hf 15.hf 14.hf 13.hf 12.hf 11.hf 10.hf 9.hf 8.hf 7.hf 6.hf 5.hf 4.hf 3.hf 2.hf 1.hf<br />
Kontrol<br />
SOD<br />
NAC<br />
Rapamisin<br />
201 205 204 210 200 201 199 204 201 197 196 197 196 193 187 180 188 185 173 174 169 164<br />
236 233 232 229 228 226 229 229 225 221 222 220 221 219 213 209 212 215 208 205 197 184<br />
218 223 211 225 215 213 216 218 219 215 214 211 204 196 193 187 202 204 197 184 180 176<br />
232 226 225 223 229 221 227 227 221 217 219 215 211 205 207 197 206 205 191 185 183 179<br />
214 211 210 214 217 210 209 209 207 208 205 206 210 203 205 200 198 196 189 179 174 172<br />
239 229 232 238 234 230 229 229 225 219 216 218 224 217 214 212 209 206 197 195 187 182<br />
208 209 209 202 204 211 205 203 201 199 197 195 199 201 189 184 187 184 179 174 176 163<br />
229 227 230 234 229 225 221 224 217 215 212 211 217 213 215 206 202 195 196 182 183 176<br />
225 223 219 223 227 216 215 211 209 206 202 206 209 200 201 203 198 197 185 184 178 172<br />
223 217 219 225 220 217 216 211 212 210 207 205 209 204 201 199 193 188 184 178 174 168<br />
199 201 199 210 203 207 197 198 196 195 197 196 203 201 191 185 185 187 183 170 165 161<br />
215 217 214 211 207 210 208 206 202 203 199 199 203 197 192 190 189 192 182 174 168 165<br />
218 216 217 216 209 212 210 208 206 204 199 198 209 198 196 194 192 194 182 177 172 167<br />
229 228 225 229 221 217 219 217 213 214 210 207 203 207 199 196 200 199 187 182 176 174<br />
214 213 208 205 208 210 209 209 208 206 205 202 205 201 198 193 196 188 187 188 178 170<br />
206 211 210 204 206 200 203 201 196 192 193 186 187 195 191 185 178 182 179 176 174 163<br />
213 213 211 220 213 211 208 208 204 205 204 201 204 198 195 189 193 187 185 183 179 168<br />
205 201 209 207 205 202 203 204 203 201 199 197 196 194 199 191 188 185 176 171 165 164<br />
228 226 228 223 227 221 220 221 219 217 215 217 223 213 211 216 212 189 188 183 180 181<br />
214 211 216 209 211 217 212 213 212 218 210 212 209 207 220 211 206 208 195 185 178 177<br />
226 223 218 223 220 220 219 217 213 216 213 215 211 217 212 207 209 210 199 189 185 179<br />
218 216 214 216 215 214 217 214 210 212 209 208 209 213 207 204 203 205 201 185 183 173
Ateş<br />
Takibi<br />
Haftalar 2. 4. 6. 8. 10. 12. 14. 16. 18. 20. 22.<br />
Kontrol 30,20 30,7 31,6 32,3 32,7 32,6 32,4 32,6 32,8 33 32,7<br />
29,60 29,9 30,7 31,2 31,6 32 31,9 32,1 32,2 32,1 32,5<br />
29,80 29,9 30,4 31,3 31,8 32,2 32,1 32,4 32,3 32,6 32,8<br />
30,40 30,5 30,9 32 32,1 32,5 32,3 32,2 32 32,1 31,9<br />
30,10 30,5 31,1 31,9 32,2 32,1 32,4 32 32,2 32,1 32,4<br />
SOD 30,2 30,3 30,5 30,8 31,1 30,8 30,4 30,4 30,2 30,1 29,9<br />
29,6 29,8 30,2 30,5 30,3 30,6 30,7 30,4 30,6 30,5 30,3<br />
30,1 30,2 30 30,1 30,4 30,7 30,3 30,6 30,5 30,7 30,6<br />
29,2 29,5 30,3 30,5 30,7 30,5 30,1 30,1 30,8 30,3 29,9<br />
30,6 30,5 30,7 30,8 30,9 31 31,3 30,9 31 30,8 30,7<br />
NAC 30,00 30,2 30,7 30,9 31,1 30,9 30,6 31,1 30,9 31 31,4<br />
30,10 30,4 30,8 31 30,8 30,9 31 31,2 31 30,6 30,5<br />
29,70 29,6 30,4 30,7 30,5 30,8 31,1 31,4 31,3 31,1 30,9<br />
29,50 29,9 30,8 31,1 31,3 31,2 30,9 30,7 30,6 30,8 30,7<br />
29,90 30,3 30,9 30,5 30,8 30,6 30,3 30,2 30,3 30,5 30,6<br />
30,20 30,6 30,6 30,9 30,8 31,2 30,9 30,6 29,9 30,7 30,3<br />
Rapamisin 29,70 30,3 31 31,8 32,1 32,3 32,5 32,7 32,1 32,5 32,6<br />
29,80 30,1 31,3 31,7 32,3 32,2 32,3 32,1 32,3 32,7 32,5<br />
30,30 30,3 31,7 31,4 31,9 32,5 32,7 32,4 32,6 32,8 32,7<br />
30,50 30,5 31,5 31,8 32,6 32,6 32,4 32,3 32,1 32,3 32,4<br />
29,70 30,7 30,9 32,3 32,6 32,4 32,7 32,8 32,7 32,4 32,2<br />
29,80 30,3 30,7 31 31,7 32,7 32,6 32,6 32,7 32,5 32,7
Kontrol Grubu Ateş Çizelgesi<br />
SOD Grubu Ateş Çizelgesi
NAC Grubu Ateş Çizelgesi<br />
Rapamisin Grubu Ateş Çizelgesi
Ateş/ Haftalar (Tüm Gruplar)
• 16. haftada BT değerlendirme<br />
BT ile Fibrozis Takibi
BT ile Fibrozis Takibi
• Diyafram elevasyonu<br />
• Kalbin RT lojuna doğru çekilmesi<br />
• Yoğunluk artışları<br />
BT ile Fibrozis Takibi<br />
ve fibrozis değerlendirildi<br />
Yok-grad 0<br />
Yama tarzında-grad 1<br />
Belirgin konsolidasyon-grad 2<br />
Birden fazla alanda yaygın-grad 3 olarak skorlandı<br />
Wiegman, E.M., Meertens, H., Konings, A.W., Kampinga, H.H. ve Coppes, R.P., Loco-regional differences in pulmonary function and density after partial rat lung<br />
irradiation. Radiother Oncol, 2003. 69(1): p. 11-9.
Kontrol grubu
PEG-SOD grubu
Rapamisin grubu
NAC grubu
BT ile Yoğunluk Analizi
Makroskopik İnceleme<br />
Kontrol NAC Rapamisin SOD
Makroskopik İnceleme<br />
Rapamisin
Makroskopik İnceleme<br />
Rapamisin
Patoloji - Kontrol Grubu -<br />
• Yaygın alanlarda inflamasyon<br />
bulguları , ödem ve inflamatuvar<br />
hücre infiltrasyonu<br />
• Alveolar septumda düzensizlikler,<br />
kalınlaşmalar<br />
• Alveolar boşluklarda eksudasyon ve<br />
konjesyon ile beraber yaygın bronş<br />
içerisinde inflamasyon hücreleri<br />
infiltrasyonu izlendi <strong>Akciğer</strong> parankiminde yoğun lenfosit<br />
plazma hücre infiltrasyonu<br />
ve fibrozis alanları.<br />
Bronş epitelinde çok katlı yassı epitel metaplazisi.
Patoloji - NAC Grubu -<br />
• <strong>Akciğer</strong> dokusunda hasar belirgin<br />
olarak daha az bulunmuştur.<br />
• Fibrin , kollajen depositleri yer yer<br />
izlenmektedir.<br />
• Ödem ve inflamasyon hücre<br />
infiltrasyonları daha az<br />
bulunmuştur.<br />
• Alveolar boşluklarda eksudasyon,<br />
epitel dökülmesi ve hücre<br />
infiltrasyonları belirgin olarak daha<br />
az bulunmuştur<br />
Yer yer septumlarında hiperemik<br />
damarlar içeren korunmuş<br />
akciğer alveolleri, peribronşioler ve<br />
perivaskuler alanda hafif fibrozis ve<br />
inflamasyon hücreleri infiltrasyonu
Patoloji - Rapamisin Grubu -<br />
• Alveolar boşluklarda eksudasyon ile<br />
beraber yaygın inflamasyon hücre<br />
infiltrasyonları görüldü.<br />
• Alveolar septumda kalınlaşma,<br />
harabiyet, tip I hücrelerde azalma<br />
izlendi.<br />
• Yaygın fibrinoid nekrozlar, damar<br />
çeperlerinde kalınlaşmalar, artmış<br />
kollajen depositleri.<br />
• RT sonrası akciğer dokusunda<br />
harabiyette belirgin artış<br />
Alveol boşluklarında yoğun inflamasyon<br />
hücreleri ve çevresinde yoğun fibrozis
Patoloji - SOD Grubu -<br />
• İnflamasyon, ödem daha az<br />
• <strong>Akciğer</strong> dokusu harabiyeti NAC<br />
grubuna benzemekle beraber kontrol<br />
ve rapamisin gruplarına göre belirgin<br />
azdır<br />
• Alveol boşluklarında eksudasyon,<br />
konjesyon bulunmamaktadır<br />
Kalınlaşmış alveol septumlarında<br />
hiperemik damarlar<br />
hafif akciğer ödemi
Patoloji<br />
Patolojik Bulgu Skor Kontrol SOD NAC Rapamisin<br />
Ödem 1 - 3 4 -<br />
2 4 2 2 3<br />
3 1 - - 3<br />
İnflamasyon 1 - 1 2 -<br />
2 1 2 3 -<br />
3 4 2 1 6<br />
Fibrozis 1 - 1 3 -<br />
2 2 4 3 3<br />
3 3 - - 3<br />
Nekroz 0 4 4 4 1<br />
1 1 1 2 5<br />
Metaplazi 0 4 5 5 5<br />
1 1 - 1 1<br />
Damar Kln. 1 - 2 4 -<br />
2 4 3 2 6<br />
3 1 - - -<br />
Fib.Nekroz 0 1 1 -<br />
1 5 4 5 6<br />
Kollajen 1 - 2 4 -<br />
2 3 3 2 3<br />
3 2 - - 3
Elektron Mikroskopisi - Kontrol -
Elektron Mikroskopisi - Rapamisin -
Elektron Mikroskopisi -NAC -
Elektron Mikroskopisi - SOD -
Sonuç<br />
Sonuç olarak<br />
• NAC ve SOD’un RT sonrası akciğer fibrozunu önlemedeki koruyucu<br />
etkisi bu çalışmada klinik, radyolojik ve histopatolojik olarak<br />
gösterilmiştir.<br />
• Rapamisinin, RT’ye bağlı akciğer fibrozunu önlemekte yetersiz kaldığı<br />
görülmektedir. Rapamisin sonrası artan intertisyel pnömonitin<br />
açıklanabilmesi için ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.
Teşekkürler
Change language