VRB (Violet Red Bile Agar) Agar (Merck 1.01406) - mikrobiyoloji.org

VRB (Violet Red Bile Agar) Agar (Merck 1.01406)
Violet Red Bile Lactose (VRBL) Agar
ISO 4832 ve FDA Form 2400a 3/01 ile APHA ve IDF yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre
dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakteriler için selektif katı besiyeri
olarak kullanılır. VRBD Agar ile karıştırılmaması için VRBL (Violet Red Bile Lactose) adı ile de
anılır.
VRB Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın.
Bileşim
Peptone from meat 7,0 g/L; Yeast Extract 3,0 g/L; Lactose 10,0 g/L; NaCl 5 g/L; Ox Bile (Bile Salt
Mixture) 1,5 g/L; Neutral Red 0,03 g/L; Crystal Violet 0,002 g/L; Agar-agar 13,0 g/L
Etki şekli
Besiyeri bileşiminde bulunan safra tuzları ve kristal viyole başta Gram pozitifler olmak üzere refakatçi
floranın gelişimini inhibe ederken, laktoz pozitif bakterilerin varlığı pH indikatörü ile koloni renginin
kırmızıya dönüşmesi ve safra asitlerinin koloni etrafında çökelti oluşturması ile belirlenir. Dolayısıyla
30-32 ya da 35-37 o C'da 18-24 saat süren inkübasyondan sonra 1-2 mm çapında kırmızımsı bir
presipitat zonu ile çevrili kırmızı koloniler, Enterobacteriaceae familyasının laktoz pozitif üyeleri olan
koliform grup bakteriler olarak sayılır.
Enterokoklar ve koliform grup dışındaki Klebsiella türleri bu besiyerinde toplu iğne başı
büyüklüğünde küçük pembe koloniler oluştururlarken, laktoz negatif olan Enterobacteriaceae üyeleri
renksiz koloniler meydana getirirler. Laktozdan başka şeker içeren ve özellikle sıvı gıdaların doğrudan
ekiminde Enterobacteriaceae familyasının başka türleri atipik koloniler oluşturabilir. Atipik koloniler
Brilliant Green Bile (BGB) Broth (Merck 1.05454) besiyerine aşılanarak gaz oluşumu izlenmelidir.
MUG katkılı Fluorocult VRB Agar besiyerinde tipik kolonilerin E. coli olup olmadığı birkaç dakika
içinde ve standart VRB Agar besiyerindeki tipik kolonilerin E. coli olup olmadığı 2 saat içinde
Bactident E. coli ile MUG esaslı olarak hızlı bir şekilde belirlenebilir.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 39,5 g/L olacak şekilde damıtık su içinde karıştırılarak kaynatılır ve kaynama
başladıktan sonra en çok 2 dakika daha kaynama sıcaklığında tutulup, soğuyunca steril Petri kutularına
12,5'er mL dökülür. Bazı standartlarda dökme kültür ve/ veya 2. kat ilavesi önerilmektedir. Bu besiyeri
otoklavlanmaz. Sterilizasyon, kaynar su banyosunda besiyerini eritirken yapılmış olur. Mikrodalga
fırında kaynatılarak sterilize edilebilir. Sterilizasyon sonrası 25 o C'da pH'sı 7,4±0,2'dir. VRB Agar
besiyerinin aşırı ısıtılmasından kaçınılmalıdır. Aşırı ısıtma selektiviteyi azaltır. Kaynar su
banyosundaki ısıl işlem etkinliğinin sağlanması için besiyerinin 250 mL'den fazla hacimlerde
hazırlanmaması önerilir. Hazırlanmış besiyeri parlak ve karanlık kırmızı renklidir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 o C'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma
tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 12,6 L besiyeri (1012 adet Petri kutusu/12,5 mL ya da çift kat
çalışılıyorsa 843 adet Petri kutusu/15 mL) hazırlanır.

Kalite Kontrol
Test mikroorganizmaları
Ekim
(kob/mL)
% Geri
kazanım
Koloni
rengi
Çökelme
Escherichia coli ATCC 11775 10 3 -10 5 ≥ 30 kırmızı +
Salmonella gallinarum NCTC 9240 10 3 -10 5 ≥ 30 renksiz-kırmızımsı –
Shigella flexneri ATCC 29903 10 3 -10 5 ≥ 30 renksiz –
Yersinia enterocolitica ATCC 9610 10 3 -10 5 ≥ 30 renksiz –
Staphylococcus aureus ATCC 6538 > 10 5 ≤ 0,01
Micrococcus luteus ATCC 9341 > 10 5 ≤ 0,01
Lactococcus lactis ATCC 19435 > 10 5 ≤ 0,01
Bacillus cereus ATCC 11778 > 10 5 ≤ 0,01
Lactobacillus plantarum ATCC 14917 > 10 5 ≤ 0,01
Ürün Bilgileri
Ürün Adı Merck Kat. No Ambalaj
VRB Agar (Violet Red Bile Agar) 1.01406.0500 500 g
VRB Agar (Violet Red Bile Agar) 1.01406.5000 5 kg
Kaynaklar
American Public Health Association: Compendium of
Methods for the microbiological Examination of Foods. - 3 rd
ed. (1992).
American Public Health Association: Standard Methods for
the Examination of Dairy Products. - 15 th ed. (1995).
DAVIS, J.G.: Milk Testing - Dairy Industries Ltd., London,
1951.
Institut für Lebensmitteltechnologie und Verpackung der TU
München: Merkblatt 19: Bestimmung der Gesamtkeimzahl,
der Anzahl an Schimmelpilzen und Hefen und der Anzahl an
coliformen Keimen in Flaschen und vergleichbaren
enghalsigen Behältern. - Milchwiss., 29; 602-606 (1974). Escherichia coli ATCC 11775
Internationaler Milchwirtschaftsverband: Zählung coliformer Bakterien in Milch und
Milchprodukten. - Internationaler Standard FIL-IDF 73 A: 1985.
KLOSE, J.: Harmonisierung des Speiseeisrechtes in der EWG. - Süßwaren, 14; 778-780 (1968a).
KLOSE, J.: Entwurf einer Richtlinie zur Angleichung der Rechtsvorschriften für Speiseeis in den
Mitgliedsstaaten der EWG. Neufassung des Anhangs III zum Entwurf vom 19.12.1966. - Süßwaren,
14; 780-782 (1968b).