TAIX_Uzimanje očnog tkiva

Explantation procedureCroatian Eye BankTAIEX Workshop on Quality Systemsin Ocular Tissue BankingZagreb, January 2013

• Collection 200 corneas in 2012• Waiting list around 150 (300) patients• Gap between demand and supply

First step:Order the collection set for ocular tissueType:1) For whole eye2) For corneaHow:RU-TST-0384 Narudžba, izdavanje i dostavasetova za uzimanje očnog tkiva

Narudžba setova

Content of the collection seta) Stiroporni spremnikb) Materijali c) Obrasci

MaterialsMersilkProteze zarekonstrukciju okaPPT i EDTAepruvetePosude zavlažnukomoruPovidon jodid 5%Alkohol 70%TobrexKompreseod gaze 5x5cmFiziološka otopinaa 30ml

FormsOZ-TST-0512 Izvješće o eksplantaciji očnog tkivaOZ-TST-0513 Ponuda očnog tkivaOZ-TST-0517 Zdravstveni upitnik darivatelja očnogtkivaOZ-TST-0523 Objašnjenje i pristanak obiteljidarivatelja očnog tkivaOZ-TST-0629 Izvješće o prijevozu i preuzimanjuočnog tkivaOZ-TST-0630 Lista korištenih materijala za uzimanjeočne jabučiceOZ-TST-0631 Lista korištenih materijala za uzimanjerožniceOZ-TST-0637 Set naljepnica za označavanje očnogtkiva

Eye care before donationRU-TST/290 Njega očiju mogućeg darivatelja očnog tkiva3.2.1. Njega očiju terminalnih bolesnikaRadi sprječavanja oštećenja i infekcije rožnice, ovim bolesnicima treba svakih 4-6 sati u oko stavljatiantibiotske kapi ili mast (Tobrex). Po potrebi oči treba ispirati s fiziološkom otopinom.3.2.2. Njega očiju nakon smrti3.2.2.1. Ispiranje s fiziološkom otopinom (Antibiotske kapi)3.2.2.2. Zatvaranje očnih vjeđaOdmah nakon smrtni treba potpuno zatvoriti očne vjeđe oba oka prstima. Treba paziti da ostanupotpuno zatvorene do eksplantacije. Ne treba koristiti instrumente jer mogu oštetiti vjeđe ilirožnicu. Ne treba koristiti ljepljive trake jer mogu iščupati trepavice.3.2.2.3. Povišeni položaj glaveGlava darivatelja, od smrti do eksplantacije, treba biti u povišenom položaju u odnosu na tijelo (15 0 do45 0 ). Time se sprječava nakupljanje tekućine u glavi što smanjuje:• krvarenje i nastanka modrica tijekom eksplantacije tkiva• edem lica što omogućava bolju rekonstrukciju očnih šupljina nakon enukleacija.3.2.2.4. Hlađenje tkivaHlađenje tijela usporava prirodnu razgradnju tkiva i smanjuje koncentraciju štetnih tvari nakon smrtikoje dodatno oštećuju tkiva. Zato je korisno i prije početka hlađenja cijelog tijela ili tijekommultiorganske transplantacije, stavljati vrećice napunjene manjom količinom usitnjenog leda nazatvorene očne kapke. Treba paziti da se pri tome ne ošteti ili smrzne rožnica.

Identification of donorRU-TST-0378 Eksplantacija očne jabučice• 3.2.3. Identifikacija darivatelja• Identifikacija darivatelja prije početka uzimanja tkiva važna je za osiguranjeslijedivosti uzetog tkiva.•• 3.2.3.1. Identifikacija multiorganskog darivatelja• Identifikacija multiorganskog darivatelja se potvrđuje imenom i prezimenom,datumom rođenja i matičnim brojem. Identifikaciju darivatelja trebaju provjeritidvije osobe. Postupak identifikacije dokumentira se na obrascu OZ-TST/0512Izvješće o eksplantaciji očnog tkiva.•• 3.2.3.2. Identifikacija darivatelja nekucajućeg srca• Identifikacija darivatelja nekucajućeg srca se potvrđuje imenom i prezimenom,datumom rođenja, matičnim brojem i oznakom postavljenom na tijelo kod prijemau odjel patologije (najčešće oznaka na palcu). Identifikaciju darivatelja trebajuprovjeriti dvije osobe. Postupak identifikacije dokumentira se na OZ-TST/0512.

• 3.2.4. Fizički pregled darivatelja•• 3.2.4.1. Fizički pregled tijela darivatelja• Prije uzimanja tkiva treba učiniti detaljan fizički pregled tijela darivatelja. Bolnički transplantacijskikoordinator ili liječnik član eksplantacijskog tima je odgovoran za dokumentiranje svih važnihanatomskih nalaza na OZ-TST/0512. Posebno treba obratiti pažnju na kožu, ožiljke, ubode igala,veličinu limfnih čvorova, tetovaže, pearcing i sl.• Ako se fizičkim pregledom nađu promjene koje nisu prethodno opisane u medicinskojdokumentaciji, ne može se nastavit s postupkom eksplantacije dok se ovi nalazi ne razjasne.•• 3.2.4.2. Pregled oka• Prije enukleacije član eksplantacijskog tima mora in situ pregledati stanje orbitalnog iparaorbitalnog tkiva, te prednjeg segmenta oka. Treba isključiti: infekcije (mukopurulentni iscjedak,precipitati, pustule), kongenitalne i stečene anomalije rožnice, traumu i intraokularnu kirurgiju.Promatra se stanje rožničnog epitla (edem, defekti, zamućenja), strome (edem, zamućenje)endotela i eventualnih nabora descemeta, te stanje prednje očne sobice (dubina i sadržaj).• Ako se pregledom oka nađu promjene koje utječu na kvalitetu i sigurnost rožnice, postupakuzimanja tkiva se obustavlja.

• 3.2.5. Priprema za eksplantaciju•• 3.2.5.1. Dezinfekcija očnih vjeđa• Otvoriti vjeđe i isprati oči s 50-ak mL fiziološke otopinom radi uklanjanja sluzi i stranih čestica. Očistiti lice oko očiju, korijennosa, kožu iznad vjeđa i obrve gazom namočenom alkoholom. Paziti da se ne dotakne rožnica.•• 3.2.5.2. Dezinfekcija očne jabučice• Kapnuti u oči nekoliko kapi 5% otopine providon jodida pazeći da se ne kapa direktno na rožnicu. Pričekati 2 minute. Ispratioči s 20 mL fiziološke otopine.• Kapnuti u oči nekoliko kapi antibiotske otopine (Tobrex). Zatvoriti vjeđe do početka enukleacije.• Po potrebi sterilnom gazom obrisati tekućinu s lica. Prekriti lice sterilnim kompresama tako da oči ostanu dostupne.• Promijeniti rukavice.•• 3.2.5.3. Priprema sterilnog polja• Pripremiti set instrumenata za enukleaciju i kirurško pokrivanje lica. Na sterilnu površinu iz transportnog spremnika izvaditipotrošne materijale za uzimanje tkiva, dezinfekciju kože lica i očnih jabučica prije uzimanja i rekonstrukciju očnih jabučicanakon uzimanja tkiva.• Prije uporabe provjeriti eventualna oštećenja sterilnih posuda u koje će se staviti očne jabučice nakon eksplantacije.Oštećena posuda se ne smije koristiti za uzimanje tkiva.•• 3.2.5.4. Priprema vlažne komore• Pripremiti dvije sterilne posude sa zatvaračem. U sterilnu posudu treba staviti devet zgužvanih sterilnih gaza 5x5 cm 2 tako daposuda bude puna do 1/2. Gazu natopiti s 10 mL fiziološke otopine kako bi se osigurali uvjeti vlažne komore kako jeprikazano u prilogu 1.

• 3.2.6. Eksplantacija očne jabučice• Ponovo oprati ruke i staviti sterilne rukavice. Očno tkivo treba uzeti aseptičnom tehnikom na način da jemikrobiološka kontaminacija svedena na najmanju moguću mjeru.•• 3.2.6.3. Uzimanje očne jabučice• Najjednostavniji i najčešći postupak počinje odvajanjem limbusa rožnice od spojnice očne jabučice u cijelojcirkumferenciji. Spojnicu duboko subminirati, dok se ne pokažu hvatišta ravnih ekstaokularnih mišića. Mišićnomkukicom proći ispod samog mišića, a mišić presjeći na inserciji. Hvatište lateralnog ravnog mišića ostaviti neštoduže, kako bi se pincetom moglo čvrsto fiksirati i držati prilikom vađenja očne jabučice. Redoslijed hvatanja ipresijecanja mišića nije bitan. Nakon odvajanja svih očnih mišića od njihova hvatišta, zatvorenim škarama zapresijecanje vidnog živca, ući između spojnice i očne jabučice prema vidnom živcu. Škare otvoriti, očnu jabučicupovući naprijed i odrezati vidni živac nekoliko milimetara od očne jabučice. Prerezati kosi mišići.•• 3.2.6.4. Stavljanje očne jabučice u vlažnu komoru• Očnu jabučicu položiti u prethodno pripremljenu vlažnu komoru tako da je rožnica okrenuta prema gore kako jeprikazano u prilogu 1. Oko jabučice saviti gazu tako da bude fiksirana (slika 1). To će spriječiti oštećenje rožnicetijekom prijevoza. Gazu oko očne jabučice treba namočiti s dodatnih 10 mL fiziološke otopine pazeći da mlazotopine ne teče direktno po rožnici. Na očnu jabučicu kapnuti nekoliko kapi Torbexa. Paziti da rožnica nije ukontaktu niti s jednom površinom niti nakon zatvaranje posude (poklopac!). Zatvoriti posudu.•• 3.2.7.Označavanje posude s očnom jabučicom• Označavanje posude s tkivom mora osigurati sljedivost od uzimanja tkiva do primjene.• Posudu s tkivom označiti odgovarajućom naljepnicom iz OZ-TST/0673 Seta naljepnica za označavanje očnog tkiva.Točnost označavanja posude s očnom jabučicom mora provjeriti druga osoba.

Stiroporni spremnikPosudica s tkivom(desno i lijevo)Obrasci

• 3.2.9. Rekonstrukcija očne jabučice• Nakon eksplantacije treba očistiti lice mokrom kompkesom i rekonstruiratiočne šupljine na način da se fizički izgled darivatelja ne promjeni.• Očna šupljina darivatelja rekonstruira se protezom za očnu jabučicu koja senalazi u setu za eksplantaciju. Vjeđe zalijepiti za protezu a prije nego li seljepilo osuši pažljivo ih priljubiti. Vjeđe se eventualno mogu sašijuproduženim šavom (konac 4,0). Vjeđe treba pažljivo priljubiti te zašitizajedno ispod linije trepavica kako bi se postigao što prirodniji izgled.•• 3.2.10. Čuvanje očne jabučice do prijevoza• Do prijevoza u Očnu banku, posudu s tkivom treba čuvati na +4 0 C jer je natoj temperaturi metabolička aktivnost endotelnih stanica najmanja.• Ako se očekuje da će prijevoz započeti brzo, posude s tkivom mogu seodmah staviti u transportni spremnik kako je opisano u RU-TST/0375Pakiranje i prijevoz tkiva iz donorske bolnice u Očnu banku.

Napomena: ispuniti i predati vozaču(odgovorna osoba u transportu)

• Contacts:tel.: 01-2388-78201-2388-783mob.: 091-4920-451fax: 01-2376-016email: ocna.banka@kbc-zagreb.hr

Broj eksplantiranih rožnica po bolnicama u 2012.godini (N=193)744021 214 6 8210528; 4%Udio eksplantiranih rožnica pobolnicama u 2012. godini (N=193)10; 5% 5; 3% 2; 1%2; 1%KBC Zagreb4; 2%6; 3%40; 21%KBC Sestre milosrdnice21; 11%KBC Osijek21;11%74; 38%KBC RijekaKBC Split

Sources of eye tissue in 2012 (N 193)MOD; 131; 68%NHBD;62; 32%NHBDMODSources of eye tissue in UCC Zagreb in2012 (N 40)Sources of eye tissue in UCC Zagreb in2012 (N 74)MOD; 14;35%NHBD; 26;65%MOD; 38;51%NHBD;36;49%

Postmortalni interval eksplantiranih rožnica darivateljanekucajućeg srca u 2012. godini (N=62)> 24 h8%< 8 h3%8,5-16 h31%16,5-24h58%

Facillity• Administrative area• Processing Area– 1 C grade room– 1 B grade room• Instrument cleaning/decontamination• Storage area• Slit lamp biomicroscopy / specular

Layout of Eye Bank

OrganisationMedical DirectorTransplant co-ordinator(organs+ 1 MD in training)Retrivalteam(ophtalmologist intreaningBiologist (1)Tehnicians (2)

Evaluation of hospital death during two periodsin University Clinical Hospital Zagreb (2012)PeriodOrgan transplant “Tissue coordinator”coordinators(March-May) (September-October)Hospital death 446 229Detected donors 65 (15%) 106 (45%)Rejected 58 103Donors 7 (1.5%) 3 (1%)

Reasons of donors rejection (2012)AbsolutecontraindicationPeriodMarch-May September-OctoberN % N %27 45 33 32Relative contraindication 12 21 0 0Ocular contraindication 14 24 47 46Death >24 hours 2 3 10 10Family refuse 0 - 7 63 1 6 6Organizational (body release forfuneral, realization of donation > 24 h, transplantcoordinators not available…)Total 58 100 103 100

Ocular contraindication (47 donors; 94 corneas)(period September-October 2012)Reason of rejection N %Lids are not closed 44 46Central or diffuse cloudiness of cornea 18 18Scars in optical zone 14 14Epitel defects 10 11Edema and folds of Descement membrane 6 6Gerontoxon 3 3Contamination 2 2Total 94 100

O-ti dan: broj +vijabilnost,prijenos u CARRY-CHKTRANSPLANTACIJAUzimanje tkiva1. HK – TISSUE-CTISSUEChemokultura (HK)2. HK – TISSUE-C*3-HK- CARRY-C**-7-6-5-4-3-2-10123456789101112131415161718192021222324252627280+1+2+3+4POSTUPAK ČUVANJA ROŽNICE OD UZIMANJA DO TRANSPLANTACIJE (dani)Evaluacija tkiva:-Biomikroskop-Spekularnimikroskop-NemamikrobiološkekontroleČuvanje na +4 0 C(maksimalno 7 dana)Inkubacijarožnice uantibiotskommediju(najmanje 3dana)Čekanje mikrobiološkog nalaza(najmanje 7 dana)Čuvanje na +31 0 C (maksimalno 28 dana)OVO RAZDOBLJE MOŽE BITI RAZLIČITODUGO(do 30 dana nakon stavljanja u kulturu)Čuvanje:- prva 24 sata na+31 0 C-do 5 dana nasobnojEUSOL-C TISSUE-C CARRY-C*HK – hemokultura** Faza-II (minimalna inkubacija 24 sata prije izdavanja za transplantaciju; kada je moguće treba pričekati da se 2. HK inkubiraju najmanje 48 sati)*** Faza-III (kada je moguće dobro je pričekati inkubaciju 3. HK 24 sata)