CamSep 4 S

O MOŻLIWOŚCI ZASTOSOWANIA CHROMATOGRAFII
CIENKOWARSTWOWEJ DO BADANIA
CAŁKOWITEGO POTENCJAŁU ANTYOKSYDACYJNEGO
Magdalena TOMASZEWSKA 1 , Ewa SZAFRANIUK 1 , Paweł M. WANTUSIAK 1 ,
Paweł PISZCZ 1 , Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł K. ZARZYCKI 2
1 Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny, Wydział Nauk Ścisłych, Zakład Chemii Analitycznej,
ul. 3 Maja 54, 08-110 Siedlce, URL: dach.ich.uph.edu.pl, e-mail: psc1@onet.eu
2 Politechnika Koszalińska, Wydział Budownictwa i Inżynierii Środowiska,
Zakład Toksykologii i Bioanalityki, ul. Śniadeckich 2, 75-453 Koszalin, e-mail: pkzarz@wp.pl
Rodnik DPPH • stosowany jest do oznaczania właściwości antyoksydacyjnych próbek
biologicznych. Miarą całkowitego potencjału antyoksydacyjnego, CPA, (oznaczanego metodą
fotometryczną) jest zmniejszenie absorpcji, przy długości fali 517 nm, jego roztworu
po określonym czasie reakcji z próbką.
Mimo, że rodnik DPPH występuje w kilku formach (na różnych stopniach utlenienia)
nie opisano do tej pory metody ich rozdzielania. Celem pracy było: (i) opracowanie metody
rozdzielania różnych form DPPH za pomocą TLC, (ii) opracowanie nowej metody oznaczania
CPA, wykorzystującej analizę DPPH za pomocą TLC, (iii) zastosowanie opracowanej metody
do oznaczania CPA wyrobów mięsnych oraz (iv) fingerprint (odcisk palca) właściwości
antyoksydacyjnych mięs.
Przebadano różne możliwości rozdzielania chromatograficznego (komora wysycona
i niewysycona, układ faz normalnych i odwróconych, wpływ temperatury, składu fazy ruchomej
oraz wielokrotnego rozwijania). Do pomiarów wybrano następujące warunki chromatograficzne:
próbkę nanoszono na płytkę Silica gel 60 F 254S i modyfikowaną grupami oktadecylowymi RP-18
WF 254S, rozwijano w komorze wysyconej, w układzie heksan/aceton (1:0,254 v/v). Po wysuszeniu
płytkę skanowano przy użyciu skanera biurowego o 8 bitowej rozdzielczości skali szarości,
a następnie zamieniano plamki na piki (chromatogramy) przy użyciu programu komputerowego
ScionImage.
Praktycznie opracowaną technikę zastosowano do wyznaczania CPA różnych wyrobów
mięsnych. Jest ona dokładniejsza od fotometrycznej, gdyż pozwala na rozdzielanie ewentualnych
barwników obecnych w próbce mogących fałszować wyniki fotometryczne. Zaletą jej jest również
badanie kilku próbek jednocześnie. Wartość CPA mięsa zależy od czasu ekstrakcji próbek
i zastosowanego rozpuszczalnika. Najsilniejsze właściwości antyoksydacyjne wykazuje łosoś
wędzony i mięso wołowe, zaś najsłabsze - mięso wieprzowe.
46