Genexpression 2012.pdf - Chirurgie

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Anzahl verschiedener mRNA-Moleküle Typischerweise werden 20.000 – 30.000 Gene pro Zelle exprimiert. Dies führt zu 70.000 – 80.000 mRNA-Molekülen in einer Zelle. Die Gesamtzahl der RNA-Moleküle einer Zelle liegt bei 300.000 (mit tRNA und rRNA). mRNA-Expression % an Gesamt-mRNA Kopien/Zelle stark mittel schwach Unterschiede zwischen: Gene in Säugerzelle? mRNA-Moleküle? RNA-Moleküle gesamt? 25% 25% 50% ? Organen (mRNAs) 1.000-12.000 100-1.000
B A Differenzielle Hybridisierung Hybridisierungssignal proportional zur Sondenkonzentration Filter mit Gensonden A B C C RNA-Isolierung Autoradiographie Synthese markierter cDNA Hybridisierung RNA-Hydrolyse
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Cy3 DIGE: CyDye-Farbstoffe Carbozya
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DIGE: Sättigungsmarkierung > 90% d
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Automatisierte kinetische PCR aus r
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