Jahresbericht 2012 - Forschungszentrum caesar

ForschungsberichteabCc[[[[B[[Abbildung 2: Organisation des Rhodospins in der intakten Membran. a. 3D-Rekonstruktion von Rhodopsin (pink) inder Disk-Membran. Einzelne Rhodopsinmoleküle werden durch die Mittelwertbildung sichtbar. Hier sind zwei Reihen vonRhodopsin-Dimeren gezeigt (rote Klammern). b, c. Virtuelle Schnitte durch das rekonstruierte Volumen aus a. b. Schnitt parallelzur Disk-Membran (Ebene B in a) zeigt zwei Reihen (rote Klammern) in denen die Rhodopsin-Dimere (rote Ellipsen) und sogardie einzelnen Rhodopsin-Moleküle sichtbar sind. c. Querschnitt durch eine Disk (Ebene C in a), beide Membranen sind sichtbar.In der oberen Membran sind Rhodopsin-Monomere (rote Ellipsen) erkennbar, die Dimere (rote Klammern) bilden.Druck (~2000 bar; zum Vergleich: der „normale“ Luftdruck beträgt1 bar) nicht ausdehnen. Stattdessen verwandelt es sich in eine glasartige,amorphe, viskose Flüssigkeit; das Gewebe bleibt dabei sehr guterhalten. Nach dem Einfrieren werden die Proben in 20-50 nm dünneScheibchen geschnitten und im Transmissions-Elektronenmikroskopuntersucht. Das Transmissions-Elektronenmikroskop liefert zunächstnur zweidimensionale Bilder. Nimmt man aber – ähnlich wie in dermedizinischen Computertomografie (CT) – Bilder aus verschiedenenRichtungen auf (Tomogramm), kann man die Einzelbilder später imComputer zu einer dreidimensionalen Darstellung des Schnitteszusammenfügen. Allerdings ist das Signal-Rausch-Verhältnis in Kryo-14Jahresbericht 2012