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©2004 Revista Iberoamericana de Micologi'a - ISBN: 84-607-3050-6
Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Para alcanzar el exito en el diagnostico micologico
es fundamental realizar adecuadamente la
recogida de la muestra, su transporte y procesamien-
to, la siembra de la misma en los medios idoneos y a
la temperatura adecuada, asf como la identificacion
e interpretacion correcta de los aislamientos.
A la hora de valorar un crecimiento fungico,
hay que tener siempre presente la necesidad de dife-
renciar un “aislamiento significativo” de otros debi-
dos a hongos contaminantes, ya que no es lo mismo
identificar una especie fungica que diagnosticar una
micosis.
En este Capftulo se detallan los fundamentos
y recomendaciones basicas del diagnostico micologico
y en los siguientes, las caracterfsticas especffi-
cas del procesam iento de cada m uestra segun el
origen anatomico de la misma.
3.1. Recogida de muestras
El diagnostico de las micosis comienza con
su sospecha clmica por lo que una adecuada obten-
cion de la muestra, a partir de la lesion, y su correcta
manipulacion, para mantener la viabilidad del
agente etiologico y evitar posibles contaminaciones,
son aspectos fundam entales que siem pre deben
tenerse en cuenta para la obtencion de un correcto
diagnostico micologico.
No debe olvidarse la importancia de etiquetar
y rellenar adecuadamente el volante de petition, de
forma que refleje claramente la sospecha clmica y
los factores predisponentes del paciente; destacan-
do, si los hubiera, la existencia de tratamientos que
pudieran interferir en el aislamiento del miceto.
3.1.2, Consejos generales para optimizar
la recogida de muestras
1. Debe disponerse de un protocolo de recogida de
muestras actualizado periodicamente.
2. Es necesario recoger las muestras asepticamente,
utilizando contenedores esteriles, remitirlas al
laboratorio antes de 2 h y sembrarlas lo antes
posible.
Antonio Rezusta Lopez
Aurora Sanchez Sousa
Joaquina Gil Tomas
Asociacion Espanola de M icologia
3. La muestra debe recogerse antes de instaurar el
tratamiento y siempre de la parte activa de la
lesion (cuando se sospecha una micosis pulmo-
nar es preferible una muestra respiratoria antes
que un hemocultivo).
4. Los hisopos deben ser evitados, siempre que el
tipo de lesion lo perm ita. Pero hay muestras
(conducto auditivo, faringe, vagina o cervix) que
no pueden ser recogidas de otra manera.
5. En el caso de heridas abiertas, drenajes o lesio-
nes superficiales, debe limpiarse la zona previa-
mente para evitar contaminaciones.
6. Las muestras de lesiones cerradas y abscesos
suelen ser de gran rendimiento. Deben ser aspi-
radas con jeringa y transferidas a un contenedor
esteril, prestando atencion a la recogida de gra-
nulos, si los hubiese.
7. El raspado de lesiones de piel y faneras puede
realizarse con distintos materiales; los mas utili-
zados son bistun, moqueta o cepillo.
8. En situaciones que requieran un estudio epide-
miologico, debe establecerse la necesidad de una
recogida de muestras ambientales, familiares o
de animales.
3.2. Transporte de las muestras
Las muestras deben ser transportadas en un
recipiente esteril, humidificado y a prueba de verti-
dos; sin embargo, las muestras dermatologicas pueden
transportarse en un recipiente seco (placa de
Petri, papel de fotografi'a negro, entre dos portas,
etc.) o, de forma ideal, sembrada directamente sobre
el medio de cultivo.
No deben introducirse en medios de transporte,
a no ser que sea facil retirar la muestra del
medio.
Los raspados corn eales y h em ocultivos
deben sembrarse directamente en el medio de cultivo
adecuado.
Las muestras, una vez obtenidas, deben sembrarse
lo antes posible despues de la recogida.
Aunque hay pocos estudios sobre el descenso de la

Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
viabilidad de los hongos a temperatura ambiente o
por la accion del hielo seco, es conocida la dificul-
tad de recuperar Rhizopus arrhizus en m uestras
demoradas y, tambien, la perdida de viabilidad de
algunos hongos por la desecacion, temperatura ele-
vada (>37 °C) o baja (

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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Tabla 3.1. Medios de cultivo basicos recomendados.
Micosis superficiales « Agar glucosado de Sabouraud (SDA) + cloranfenicol (SDAC)
Agar glucosado de Sabouraud + cloranfenicol + cicloheximida (Mycobiotic®,
Mycosel®)
Dermatophyte test medium (DTM), opcional
Ante la sospecha de Malassezia utilizar medio de Leeming (LNA) o de Dixon
modificado (mDixon), en el caso de pitiriasis no es necesario el cultivo para el
diagnostico
Para la deteccion de Candida en las muestras mucocutaneas, la utilizacion de
medios cromogenicos facilita la deteccion de cultivos mixtos, y la identificacion
rapida
Micosis subcutaneas * SDA, SDAC, Mycobiotic o Mycosel (MYC), Agar infusion cerebro-corazon (BHIA)
Micosis sistemicas * SDAC
* BHIA (Dimorficos)
* Agar de Staib (Cryptococcus)
- BHIA con antibacterianos e, incluso, con cicloheximida en muestras muy contami-
nadas (Dimorficos)
* LNA o mDixon (Malassezia)
Miscelanea « SDAC
(aspergilosis, mucormicosis, otomicosis)
detallan las caracterfsticas de las tecnicas de exa-
men microscopico mas utilizadas en Micologfa.
Las limitaciones y los problemas del examen
microscopico tambien deben ser tenidos en cuenta:
i) un examen negativo no excluye la infection;
ii) el examen microscopico puede originar falsos
positivos al confundirse ciertas estructuras con
elem entos fungicos (lin fo cito s lisados por
Cryptococcus neoformans en la tincion con tinta
china, fibras de colageno o del hisopo pueden
confundirse con elementos fungicos, gotas de
grasa con levaduras gemantes, etc);
iii) si la muestra es escasa, el cultivo debe ser priori-
tario.
El examen microscopico debe realizarse, al
menos, en todas las muestras con alta sospecha de
micosis; aunque lo ideal serfa realizarlo siempre que
fuese posible.
Las muestras para estudio micologico deben
ser examinadas tanto macroscopica como microsco-
picamente:
Observacion macroscopica
Antes de inocular los medios de cultivo y
realizar el examen microscopico, la muestra debe
ser examinada en busca de granulos, material caseo-
so, purulento, hemorragico o necrotico.
Asociacion Espanola de M icologia
Examen microscopico
La observacion microscopica se realiza con
bajo aumento, seguida de alto aumento en seco y, si
es necesario, con objetivo de inmersion. Las dos
formas observadas habitualmente son levaduras y/o
elementos miceliares.
Es aconsejable utilizar periodicamente con-
troles positivos y negativos y, si una tincion se
emplea ocasionalmente, deben emplearse siempre
controles que aseguren su correcta utilizacion.
Aunque es muy dificil identificar una especie
fungica por la morfologfa observada en el examen
microscopico directo de la muestra, algunas estructuras
pueden asociarse a ciertos generos o especies:
Levaduras
a. Celulas, con o sin gemas, de varios tamanos y
formas, posiblemente sean Candida spp. u hon-
gos dimorficos.
b. Celulas de pared gruesa, generalmente con una
gema de base amplia, podrfan corresponder a
Blastomyces dermatitidis.
c. Celulas de pared delgada con gemacion multiple
rodeando a la celula madre, posiblemente sean
Paracoccidioides brasiliensis.
d. Celulas rodeadas de una capsula grande, proba-
blemente corresponden a C. neoformans.
e. Celulas pequenas, de gemacion simple observadas
en tinciones especiales, posiblemente son
Histoplasma capsulatum.

Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
f. C elu las con p seudohifas: C andida spp.,
Geotrichum spp., o Trichosporon spp. Las dos
ultimas pueden mostrar artrosporas.
g. C elulas redondas de pared gruesa de varios
tamanos, algunas de las cuales (las mas grandes)
pueden contener esporas podrfan tratarse de
esferulas de Coccidioides immitis. Sin embargo.
Rhinosporidium seeberi tambien puede mostrar
esferulas grandes y endosporas.
Elementos miceliales
(con o sin otras estructuras asociadas)
a. Hifas no septadas, de pared gruesa, algunas de
las cuales pueden mostrar ramificaciones en 90°:
Rhizopus spp., Mucor spp., Absidia spp.
b. Hifas septadas, ramificadas, algunas en V, con o
sin cabezas de Aspergillus, posiblemente corres-
pondan a Aspergillus spp.
c. Hifas septadas, pigmentadas (marrones oscuras)
con o sin cuerpos esfericos, probablemente sean
de hongos dematiaceos.
d. Racimos de pared gruesa y oscura, con aparien-
cia de gemas, posiblemente pertenezcan a un
agente de cromomicosis.
e. Fragmentos de hifas con o sin esporas, con o sin
levaduras probablemente correspondan a derma-
tofitos o a M. furfur complex.
Las tecnicas mas habitualm ente utilizadas
para la observacion microscopica de las muestras se
resumen en la Tabla 3.2 y se comentan detallada-
mente en el Capftulo 14.
Tabla 3,2. T ecnicas de o b se rva cio n m icro sco p ica .
En fresco Tinciones
3.4. Medios de cultivo
El objetivo fundamental de la utilization de
los medios de cultivo es optimizar el crecimiento de
los microorganismos. El primer medio de cultivo
que perm itio el aislam iento de los germ enes en
medios artificiales fue el propuesto por Koch, en
1876, basado en el uso de gelatina. Posteriormente,
Frost en 1909 utilizo medios deshidratados y, en
1919, anadio agar, lo que proporciono un gran avan-
ce en el estudio de la microbiologfa.
La composicion basica de un medio incluye
nutrientes, agente solidificante (en los medios soli-
dos o semisolidos), pH adecuado y componentes
especfficos. En los medios de cultivo para el aislamiento
de hongos, los antimicrobianos se utilizan
con frecuencia, tanto para inhibir el crecimiento
bacteriano como el de otros hongos ambientales.
Atendiendo a su composicion, los medios de cultivo
puede ser generales, enriquecidos, selectivos, dife-
renciales y especializados:
A. Generales: El mas caracterfstico y clasico es el
agar glucosado de Sabouraud (SDA) y su equi-
valente en EEUU, el medio para mohos. Ambos
se utilizan frecuentemente para el aislamiento a
partir de la muestra y para la description de las
caracterfsticas de la mayorfa de los hongos.
B. Enriquecidos: Se utilizan especialm ente en
micosis sistemicas endemicas (histoplasmosis,
coccidioidomicosis, etc.), un ejemplo es la infusion
cerebro-corazon (BHI).
• KOH
KOH + tinta Parker, KOH + bianco calcofluor:
Uso general
* KOH + tinta Parker
• Giemsa: micetoma, histoplasmosis, coccidioidomicosis,
KOH + bianco calcofluor Pneumocystis, otras micosis cutaneas con exudado o pus
• Tinta china (Cryptococcus) • PAS: micetoma, coccidioidomicosis, onicomicosis
• Grocott: Pneumocystis
• Fontana Masson: Pneumocystis
• Inmunofluorescencia: Pneumocystis
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C. Selectivos: Son medios que favorecen el aisla-
miento de los microorganismos deseados impi-
diendo el de o tro s. L os com p o n entes mas
utilizados como agentes selectivos son antibac-
terianos (cloranfenicol, gentamicina, penicilina,
estreptomicina) y tambien inhibidores de hon-
gos, como la cicloheximida que es especialmen-
te util en las muestras cutaneas y respiratorias de
micosis sistemicas endemicas.
E. Diferenciales: Se utilizan para ayudar a la identification
del hongo basada en la apariencia de
este en dicho medio, merced a la adicion de
determinados componentes como por ejemplo
sustancias crom ogenas, o indicadores de pH
como en el DTM (que tambien es selectivo).
F. Especializados: Son aquellos medios que con-
tienen algun componente (Guizotia abyssinica)
d estin ad o a a isla r un agente co n creto
(Cryptococcus neoform ans) o a favorecer la
identification de ciertas especies (m edio de
Czapeck).
3.4.1. Preparacion de los medios de cuitivo
La buena calidad de los medios es indispensable
para conseguir el aislamiento y la identificacion
en Micologfa; por lo tanto, cuando se utilicen
medios comerciales es necesario tener en cuenta la
garantfa que aporta el proveedor y la calidad de la
distribution.
Cuando se prepara un medio deshidratado
deben seguirse rigurosamente las instrucciones del
fabricante, evitando errores en la forma de disolver-
lo o suspenderlo, en la temperatura y/o duration de
la esterilizacion, para preservar la calidad del pro-
ducto final. La esterilizacion en autoclave es mas
eficaz si se utilizan frascos de volumenes inferiores
a 500 ml; si se han utilizado imanes para la disolu-
cion, deben retirarse antes de introducir los medios
en el autoclave. Tambien hay que tener presente que
algunos antibioticos deben anadirse al medio una
vez esterilizado y a la temperatura adecuada, para
no ser desactivados por las altas temperaturas de la
esterilizacion.
3.4.2. Control de calidad
Para asegurar la correcta utilization de los
medios, debe controlarse periodicamente sus carac-
terfsticas mas importantes: apariencia, esterilidad,
pH y funcionamiento. El funcionamiento se puede
evaluar utilizando las cepas de control adecuadas
para cada medio. En este proceso se recomienda
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seguir las especificaciones del documento M22-A
del NCCLS en aquellos casos en los que esta esta-
blecido [3],
Los controles de calidad deben realizarse
tanto, a los medios elaborados en el laboratorio,
como a los medios comerciales ya preparados; en
este caso, es conveniente solicitar al fabricante los
controles a utilizar y los resultados para el lote
sum inistrado. En el Capftulo 18 de esta Gufa se
detallan todos los aspectos del control de calidad de
los medios de cuitivo.
3.4.3. Soporte de los medios de cuitivo
El soporte habitual para los medios de cuitivo
en Micologfa suele ser tubos de cristal o placas
de Petri (90 mm). La election depende del usuario;
autores como De Hoog y Guarro proponen el uso
habitual de placas excepto, por razones de seguri-
dad, en los casos de sospecha de histoplasmosis,
coccidioidomicosis, blastomicosis, paracoccidioido-
micosis e infecciones por Penicillium marneffei [4],
Si se utilizan tubos, deben incubarse en position
horizontal las primeras 24 h para que el inoculo
no se concentre en el fondo. Los tubos no deben ser
los habituales de Microbiologfa porque, en ellos, las
colonias no son faciles de aislar. Si los tubos utilizados
son de tapon de rosea, el cierre debe mantenerse
parcialm ente abierto para garantizar las mejores
condiciones atmosfericas.
Cuando se eligen placas, es conveniente que
contengan 40 ml de medio para evitar que se sequen
y deben sellarse con cinta adhesiva para que no se
abran involuntariamente. El precintado debe ser permeable
al aire, ya que cuando el aire circula libre-
mente se favorece la production de pigmento y la
superficie del agar se seca, permitiendo el desarrollo
de micelio aereo y esporas.
3.4.4. Almacenamiento
Los medios se deben guardar refrigerados a
2-8 °C. Para mejorar su conservation y prevenir la
desecacion, es aconsejable invertir las placas e
introducirlas en bolsas de plastico.
Las placas de Petri suelen conservarse en
buen estado unos tres m eses, m ientras que los
medios semisolidos o lfquidos en tubo de rosea se
conservan bien hasta seis meses. Sin embargo, cier-
tos medios, al contener sustancias inestables (antibioticos,
vitaminas, sangre, etc.), no se conservan en
buen estado tanto tiempo. Tambien hay que tener

Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
presente que algunos com ponentes de cierto s
medios pueden verse afectados por la luz, por lo que
estos medios deben almacenarse en contenedores
opacos.
Com o norm a g eneral, todos los m edios
deben utilizarse antes de la fecha de caducidad indi-
cada por el fabricante y, antes de su utilizacion,
deben atemperarse, durante unos minutos, a tempe-
ratura ambiente.
3.4.5. Eleccion de los medios de cultivo
Los medios mas utilizados en el cultivo de
hongos son: agar glucosado de Sabouraud, habitual-
mente con la modificacion de Emmons (SDA); agar
infusion cerebro-corazon (BHIA) con o sin sangre
de cordero al 5%, con o sin antibacterianos; agar
in h ib id o r p ara m ohos (M IA ); agar
M ycosel/M ycobiotic y agar glucosado de patata
(PDA). Sin embargo, los hongos tambien pueden
crecer en medios no selectivos, incluidos la mayorfa
de los medios bacteriologicos, si se incuban el tiem-
po suficiente.
La eleccion y el numero de medios a utilizar
estan condicionados por el coste, la disponibilidad y
las preferencias personales, pero siempre se deben
incluir medios con antibacterianos y sin ellos.
La incorporacion de cicloheximida, inhibidor
de muchos hongos considerados contam inantes,
ayuda especialmente en las micosis de la piel, aun-
que pueda inhib ir algunos patogenos fungicos
importantes; por ello, debe utilizarse siempre en
combination con otro medio sin cicloheximida.
El aislamiento de algun hongo puede verse
dificultado por otros factores como la acidification
del medio utilizado (para impedir el crecimiento de
bacterias) o, en el caso de Malassezia spp., la utilizacion
de gentamicina. [5]
Los medios mas em pleados en M icologfa
pueden agruparse en dos categories en funcion de su
utilidad: aislamiento e identificacion. Para el aislamiento,
la utilizacion de 3-4 medios practicamente
cubre todas las necesidades: SDA con/sin antimicro-
bianos (el mas utilizado en Europa y sustituido con
frecuencia en EE.UU. por M IA); un medio con
cicloheximida y agar infusion cerebro corazon, para
las micosis sistemicas endemicas.
Sin embargo, en ciertas situaciones es reco-
mendable la utilizacion de otros medios:
i) LNA, Dixon, o SDAC con aceite de oliva para el
aislamiento de Malassezia',
ii) medio cromogenico en las muestras de mucosas,
para facilitar el diagnostico de infecciones mixtas,
iii) medio para Cryptococcus, para facilitar su detec-
cion en muestras donde es frecuente el aisla-
miento de otras levaduras (muestras respiratorias).
Para la identificacion, puede ser necesario un
numero mayor de medios que dependera del numero
de muestras, las etiologfas mas probables en la zona
geografica, las posibilidades del laboratorio y el
nivel diagnostico esperable segun el tipo de centra.
3.4.6. Medios de cultivo mas utilizados
A continuation se detallan las principales
indicaciones, composition, forma de preparation y
los controles de calidad de los medios de cultivo
mas utilizados en el laboratorio de Micologfa clfni-
ca. Los m edios com erciales pueden p resentar
pequenas variaciones respecto a lo expuesto en los
cuadros.
3.4.7. Incubacion
La temperatura optima de crecimiento de la
m ayorfa de los hongos p ato g en o s es 30 °C.
Sin embargo, Sporothrix schenckii es una exception,
crece mas rapido a 27-28 °C.
Hay laboratories que utilizan la temperatura
ambiente en lugar de 30 °C, pero no es recomenda-
ble, ya que en los cambios de temperatura son notables
entre el dfa y de la noche en la mayorfa de los
laboratorios. La temperatura de 37 °C no se reco-
m ienda por dos razones principales: 1) m uchas
muestras contienen abundantes bacterias que crecen
muy bien a esta temperatura y 2) algunos hongos
crecen mal a esta temperatura o no crecen, especialmente
los hongos que infectan la piel [9],
No hay ventaja en incubar simultaneamente a
30 °C y a 37 °C. La tem peratura de 37 °C debe
reservarse para hongos dimorficos o algun hongo
que se desarrolle mejor a esta tem peratura [10].
Una estufa a 37 °C es tambien necesaria para verifi-
car la tolerancia a esta temperatura. Sin embargo,
utilizar 37 °C para el aislamiento del estadio levadu-
riforme de Histoplasma o Blastomyces no aporta
ventajas y, ademas, son morfologicamente indistin-
guibles de otras levaduras [9].
Si la estufa no esta humedecida, es conve-
niente poner un recipiente con agua cerca de las pla-
cas de cultivo. [10]. Los cultivos de hongos deben
incubarse durante 3-4 semanas antes de ser desecha-
dos. Los cultivos no deben desecharse cuando se
afsla un hongo, debe com pletarse el periodo de
incubacion [11]. Sin embargo, hay muestras que se
pueden elim inar a los 7 dfas de form a habitual
(orina y exudados de mucosas).
©2004 Revista Iberoamericana de Micologi'a - ISBN: 84-607-3050-6

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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar agua
Estimula la formacion de conidios. Recomendable para hifomicetes de pigmentacion oscura (dematiaceos) e incluso
para dermatofitos poco o nada esporulados. Favorece la esporulacion de hongos saprofitos.
Composicion
Agar 20 g
Agua destilada 1.000 ml
Preparacion
a) Calentar hasta disolver todos los componentes.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en placas de Petri.
d) De forma opcional, se pueden depositar fragmentos de papel esteril en la superficie del medio solidificado.
C o n tro l de calidad
Aspecto: solido transparente.
Microsporum canis: abundante produccion de macroconidios principalmente en la zona de contacto entre el agar agua y
los bordes del fragmento de colonia poco o nada esporulada.
Agar Czapek Dox*
Se utiliza en el cultivo de hongos saprofitos, especialmente Aspergillus spp. y Penicillium spp. Es el medio de referencia
para la identificacion de Aspergillus spp.
C o m posicion
Nitrato sodico (NOsNa) 3 g
Fosfato dipotasico (PO4K2H) 1 9
Sulfato magnesico (SOtMgJHUO) 0,5 g
Cloruro potasico (CIK) 0,5 g
Sulfato ferroso (SOiFe./hbO) 0,01 g
Sacarosa 30 g
Agar 15 g
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Calentar hasta disolver todos los componentes.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en placas de Petri.
C o n tro l de calidad
Apariencia: Ambar palido, solido trasparente.
pH final a 25 °C: 7,3 ± 0,2.
Aspergillus flavus: crece, colonia amarilla-verde.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Difco, Merck, Remel)
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Agar Dixon modificado (mDixon)
Utilizado en el cultivo de Malassezia spp. Puede modificarse anadiendo cloranfenicol o bien cloranfenicol y cicloheximida.
C om posicion
Extracto de malta 36 g
Peptona 6 g
Ox bile, desecada 20 g
Tween 40 10 ml
Glicerol 2 ml
Acido oleico 2 ml
Agar 12 g
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Calentar hasta disolver todos los componentes.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en placas de Petri.
C ontrol de calidad
Aspecto: Blanco amarillento, no muy solido.
pH final: 6,0
Malassezia restricts: Crece.
En el medio inhibidor:
M. restricts. Crece.
Aspergillus flavus: Inhibicion parcial o completa.
Staphylococcus epidermidis: Inhibicion parcial o completa.
Comprobar el crecimiento de las 7 especies.
Agar extracto de malta (MEA)*
Medio para el aislamiento y recuento de levaduras y hongos miceliares. Adecuado para la identificacion de zigomice-
tes, y especies de Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces, etc. Se han descrito varias formulaciones que incluyen el
extracto de malta y agar suplementados con peptonas, maltosa y/o dextrina y/o glicerol.
C o m posicion
Extracto de malta
Peptona
Glucosa
Agar
Agua destilada
P reparacion
a) Calentar hasta disolver todos los componentes.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Enfriar a 45 QC.
d) Dispensar en placas de Petri.
Importante: no recalentar.
C ontrol de calidad
Aspecto: ambar, transparente.
pH final: 5,6 ±0,1.
Aspergillus niger ATCC 9642: micelio bianco, conidias negras.
Candida albicans ATCC10231: buen crecimiento, colonias crema.
Si se desea ajustar el pH a 3,5, enfriar a 55gC anadir 2-3 ml de acido lactico al 10% a 100 ml de agar extracto de malta.
Una vez acidificado no se debe volver a calentar.
(*) Disponible comercialmente (Merck; Oxoid)
20 g
1 g
20 g
15 g
1.000 ml
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Fundamentos basicos para ei diagnostico micologico
Agar glucosado de patata* (PDA)
Es un medio utilizado para la estimulacion de la form ation de conidias, en la preparation de inoculos de hongos mice-
lia le s y en la e s tim u la c io n de p ro d u c c io n de p ig m e n to s : ro jo en T ric h o p h y to n ru b ru m , ro s a s a lm o n en
M icrosporum audouinii y amarillo en Microsporum canis. Se utiliza con frecuencia en microcultivos para observar las
caracteristicas morfologicas.
Composicion
Patata
Glucosa
Agar
Agua desionizada
Preparacion
a) Pelar las patatas, cortarlas en cubos y hervir en agua durante 1 h.
b) Filtrar con papel Whatman nQ 2, anadir la glucosa y el agar y hervir hasta disolver el agar completamente.
c) Ajustar el volumen a un litro.
d) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
C o n tro l de calidad
20 0 g
10 g
18 g
1.000 ml
Aspecto: incoloro o amarillo suave, medio solido, transparente o translucido.
pH final a 25 °C: 5,6 ± 0,2.
M. audouinii-. pigmento salmon en el reverso de la colonia.
T. rubrum: rojo intenso en el reverso de la colonia.
T. mentagrophytes: pigmento marron en el reverso.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, bioMerieux, Merck, Oxoid, Remel)
A g a r g lu c o s a d o d e S a b o u ra u d *
Medio poco utilizado ya que normalmente se usa la m odification de Emmons.
Puede no crecer Blastomyces dermatitidis.
C o m posicion
Peptona 10 g
Glucosa 40 g
Agar 15 g
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Mezclar los ingredientes y hacerlos hervir hasta su disolucion completa.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en tubos o placas (si se utilizan tubos de cristal, tambien se puede dispensar antes de esterilizar).
d) Solidificar en position inclinada.
M o d ific a tio n
Anadir cloranfenicol (50 mg/l).
C o n tro l de calidad
Aspecto: medio solido, ambar, transparente.
pH final a 25 °C: 5,6 ± 0,2.
Trichophyton mentagrophytes: crece.
Staphylococcus epidermidis: inhibition partial o total en el medio con cloranfenicol.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Fluka, Oxoid, Remel, Sigma)
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar glucosado de Sabouraud m odificado por Emmons* (SDA)
Es el medio estandar para el aislamiento, esporulacion y conservacion de muchos hongos. El cambio en el pH y la
concentration de glucosa favorece la esporulacion.
C om posicion
Peptona
Glucosa
Agar
Agua desionizada
P reparacion
a) Mezclar los ingredientes y hacerlos hervir hasta su disolucion completa.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en tubos o placas (si se utilizan tubos de cristal, tambien se puede dispensar antes de esterilizar).
d) Solidificar en posicion inclinada.
M o d ifica cio n (SOAC)
Anadir cloranfenicol (50 mg/l).
C ontrol de calidad
Aspecto: medio solido, ambar, transparente.
pH final a 25 °C: 7,0 ±0,2.
10 g
20 g
15 g
1.000 ml
Trichophyton mentagrophytes: crece.
Staphylococcus epidermidis: inhibicion parcial o total en el medio con cloranfenicol.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, bioMerieux, Fluka, Oxoid, Remel)
Agar harina de avena (OA)
Favorece la esporulacion. Recomendable para la identification de especies de Acremonium, Cladosporium, Fusarium,
Paecilomyces, Phialophora, Scopuiariopsis, etc. y para la obtencion de las formas teleomorficas asociadas.
C o m posicion
Harina de avena 30 g
S04Mg.7H20 1 g
PO4H2K 1,5 g
Agar 15 g
Agua destilada 1.000 ml
P reparacion
a) Hervir lentamente los 30 g de harina de avena en 1 I de agua durante 1 h.
b) Filtrar y ajustar el volumen del caldo a 1 I.
c) Anadir las sales y calentar hasta su disolucion.
d) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
e) Dispensar en placas de Petri.
C o n tro l de calidad
Aspecto: medio solido, blanquecino, opaco.
Fusarium solani: crecimiento rapido, colonia bianco amarillenta, mucosa en el centra.
Cladophialophora carrioni: crecimiento lento, colonia gris verdosa, pulverulenta.
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar harina de mai'z con Tween 80* (Corn Meal Agar, CMA)
Se utiliza en el cultivo y diferenciacion de especies de Candida basandose en las caracteri'sticas miceliales. El Tween
80 se incorpora para demostrar la formacion de clamidosporas. Si se le anaden 10 g de glucosa puede utilizarse en la
diferenciacion de Trichophyton rubrum y Trichophyton mentagrophytes basandose en la produccion de pigmento.
C o m posicion
Harina de maiz 40 g
Agar 20 g
Tween 80 3 ml
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Mezclar la harina de mai'z en agua.
b) Hervir a fuego lento durante 1 h.
c) Filtrar con gasa.
d) Medir y completar hasta 1.000 ml..
e) Esterilizara 121 "C durante 10 min. Filtrar.
f) Anadir el agar y el Tween 80 y calentar hasta disolver.
g) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
h) Dipensar en placas de Petri.
C o n tro l de calidad
Candida albicans produce clamidosporas.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Difco, Remel)
Agar infusion de cerebro corazon* (BHIA)
Puede utilizarse como medio enriquecido para aumentar los aislam ientos de Cryptococcus neoform ans a partir de
muestras esteriles como el LCR. Mantenimiento de la fase levaduriforme de algunas micosis sistemicas, ya sea con
sangre o sin ella. En general esta indicado para el aislamiento de una gran variedad de patogenos, incluyendo levaduras,
mohos y bacterias como Nocardia. Adicionado de sangre de camera al 10%, se utiliza para el aislamiento de todos
los hongos incluidos los dimorficos. Pueden anadirse antibacterianos (cloranfenicol y/o gentamicina) para convertirlo en
selectivo. En algunas ocasiones tambien puede adicionarse cicloheximida (facilita el aislamiento de Histoplasma capsu-
latum y Blastomyces dermatitidis).
P reparacion
a) Preparar de acuerdo con el fabricante.
b) Hervir los componentes hasta su completa disolucion.
c) Dispensar en matraces o tubos.
d) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
e) Enfriar en posicion inclinada, si se utilizan tubos.
C o n tro l de calidad
Aspecto: Ambar claro a semitransparente, sin precipitado (cuando no esta adicionado de sangre).
pH final: 7,4 ±0,2.
Neisseria meningitidis ATCC 13090: crecimiento aceptable a bueno.
Candida albicans: crece bien.
Sporothrix schenckii: conversion a levadura a 37 °C.
(*) Disponible comercialmente. Tambien puede utilizarse en forma de caldo (Becton Dickinson, Biomedic, Difco, Fluka.Oxoid)
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar inhibidor para mohos* (MIA)
Es un medio enriquecido con sales inorganicas, cloranfenicol y gentamicina. Se utiliza en el aislamiento de hongos sen-
sibles a la cicloheximida (Cryptococcus, zigomicetos, etc.) de muestras contaminadas. Permite el desarrollo de la mayo-
ria de los mohos y de las levaduras.
C om posicion
Triptona 3 g
Extracto de came 2 g
Dextrosa 5 g
Extracto de levadura 5 g
Almidon soluble 2 g
Dextrina 1 g
Cloranfenicol 0,125 g
Gentamicina 5 mg
Sal A 10 ml
Sal C 20 ml
Agar 17 g
Agua desionizada 970 ml
P re p a ra tio n
a) Calentar hasta disolver todos los componentes. Enfriar y ajustar el pH a 6,7.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en placas de Petri.
C o n tro l de calidad
Trichophyton mentagrophytes: Crece.
Staphylococcus epidermidis: Inhibicion parcial o completa.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson)
Sal A:
PO.HzNa 25 g
POtHNaz 25 g
H2O 250 ml
SO.1Mg.7 H2O 10 g
S04Fe.7H20 0,5 g
CINa 0,5 g
S04Mn.7H20 2 g
Agua desionizada 250 ml
Agar con leche, glucosa y purpura de bromocresol*
Puede utilizarse para la diferenciacion de Trichophyton rubrum y Trichophyton mentagrophytes. Trichophyton rubrum
melanoide secreta un pigmento que puede parecer alcalinizacion. El pigmento ti'pico de T. rubrum puede verse a traves
de la colonia, pero no a traves del medio. T. mentagrophytes granular puede necesitar 10 dias para originar un positivo
claro. Microsporum persicolor crece profusamente pero no alcaliniza.
C o m posicion
• Solucion A:
Leche desnatada en polvo
Purpura de bromocresol 1,6%
Agua desionizada
• Solucion B:
Glucosa
Agua desionizada
• Solucion C:
Agar
Agua desionizada
P reparacion
a) Preparar las soluciones A y B y esterilizar por separado a 115 °C durante 8 min.
b) Hervir la solucion C hasta disolver el agar completamente y esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Anadir las soluciones A y B a la C, mezclar, enfriar a 50 °C y ajustar el pH a 6,6 con acido clorhfdrico 1N.
d) Dispensar asepticamente en tubos y dejar enfriar en posicion inclinada.
C o n tro l de calidad
Aspecto: medio solido, azul cielo, opaco.
pH final a 25 °C: 6,6 ±0,1.
80 g
2 ml (diluido en etanol)
1.000 ml
40 g
200 ml
30 g
800 ml
T. rubrum: Crecimiento restringido y sin cambio de pH a los 7 dias a 25 °C.
T. mentagrophytes-. Crecimiento profuso y alcalinizacion a los 5 dfas a 25 °C.
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar Leeming & Notman (ALN)
Utilizado en el cuitivo de Malassezia spp. Puede modificarse anadiendo cloranfenicol o bien cloranfenicol y cicloheximida.
C om posicion
Peptona 10 g
Glucosa 5 g
Extracto de levadura 100 mg
Ox bile desecada 8 g
Glicerol 1 ml
Monoestearato de glicerol 500 mg
Tween 60 0,5 ml
Leche de vaca entera 10 ml
Agar 12 g
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Calentar todos los componentes (excepto la leche) hasta disolver correctamente.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Anadir la leche.
d) Dispensar en placas.
C o n tro l de calidad
Aspecto: Blanco amarillento, no muy solido.
Malassezia restricta: Crece.
En el medio inhibidor:
M. restricta: crece.
Aspergillus flavus: inhibicion parcial o completa.
Staphylococcus epidermidis: inhibicion parcial o completa.
Agar de Leonian modificado
Indicado para estimular la esporulacion en cepas que no esporulan o que presentan estructuras aberrantes.
C o m posicion
Maltosa 6,25 g
Extracto de malta 6,25 g
Extracto de levadura 1 g
KH2PO4 1,25 g
MgS04-7 H?0 0,625 g
Peptona 0,625 g
Agar 20 g
Agua destilada 1.000 ml
P reparacion
a) Calentar hasta disolver todos los componentes.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
c) Dispensar en placas de Petri.
C o n tro l de calidad
Aspecto: medio solido, transparente.
Aspergillus fum igatusa 37 °C: esporulacion caracteristica.
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar patata zanahoria (PCA)
Idoneo para estimular la esporulacion de hongos miceliares; muy indicado para la identificacion de hongos dematiaceos.
C o m posicion
Patata rallada
Zanahoria rallada
Agar
Agua
P re p a ra tio n
a) Lavar, pelar y rallar o trocear los vegetales y hervirlos lentamente en 11 de agua durante 1 h.
b) Filtrar y anadir al caldo el agar correspondiente.
c) Esterlizar a 121 °C durante 15 min.
d) Dispensar en placas de Petri o tubos.
C o n tro l de calidad
20 g
20 g
18 g
1.000 ml
Aspecto: medio solido, transparente o translucido.
Alternaria alternata: poco micelio y abundante produccion de conidios en cadenas.
Agar Sabouraud con ciclohexim ida y cloranfenicol* (MYC)
Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de hongos patogenos a partir de muestras muy contaminadas con
hongos saprofitos y bacterias. Se utiliza fundam entalmente en el aislamiento de dermatofitos y hongos dimorficos.
Inhibe algunas especies de hongos de interes medico (Candida no albicans, Aspergillus, Zygomycetes, Cryptococcus
neoformans, etc.).
C o m posicion
Se utilizan fundamentalmente Mycosel y Mycobiotic, ambos comercializados.
P reparacion
De acuerdo con las instrucciones, evitar manipular la cicloheximida.
C ontrol de calidad
Aspecto: Agar firme, amarillento, transparente.
Trichophyton mentagrophytes: Crece.
Aspergillus flavus: Inhibicion parcial o completa.
Staphylococcus epidermidis: Inhibicion parcial o completa.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Biomedics, Bio-Rad, Difco, Oxoid, Remel, Sigma)
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar de Staib (Guizotia abyssinica). Agar semillas de alpiste
Utilizado para aislar Cryptococcus spp. y Cryptococcus neoformans. C. neorformans es el unico que al metabolizar la
Guizotia abyssinica (alpiste), produce melanina originando un color marron oscuro. El cloranfenicol lo convierte en
medio selectivo. Tambien puede ser util en la diferenciacion de Candida dubiiniensis [6].
Composicion
Glucosa 10 g
Creatinina 0,78 g
Cloranfenicol 0,05 g
Difenilo (disuelto en 10 ml de etanol 95%) 100 mg
Guizotia abyssinica 70 g
Agar 20 g
Agua desionizada 1.000 ml
P reparacion
a) Moler las semillas y anadir 350 ml de agua.
b) Esterilizar en autoclave y filtrar.
c) Anadir agua hasta 1.000 ml.
d) Anadir el resto de los componentes excepto el difenilo.
e) Esterilizar a 121 °C 15 min. Enfriar a 45 °C.
f) Anadir el difenilo antes de dispensar el medio en las placas.
C ontro le s
C. neoformans y Cryptococcus spp.
A g a r T r ic h o p h y to n (1 a 7 )*
Son siete medios que se utilizan en la identificacion de especies de Trichophyton basandose en sus requerimientos
nutricionales. El crecimiento se valora desde el 1 al 4 (0 = no-crecimiento; 1 = crecimiento ligero; 2 = parcialmente esti-
mulado, pero inferior al control; 4 = crecimiento comparable con el control).
C o m posicion
Trichophyton agar #1:
• Trichophyton agar #5 = #1
Acidos casaminicos (libres de vitaminas) 2,5 g
+ acido nicotfnico (niacina) 2,0 mg
Glucosa
Fosfato monopotasico (PO4KH2)
Sulfato magnesico (S0

Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Agar urea de Christensen*
Se utiliza en la identification de algunos dermatofitos, especialmente Trichophyton rubrum de Trichophyton m entagrophytes,
y de aigunas levaduras (Cryptococcus neoformans).
C o m posicion
Peptona 1 g
Glucosa 1 g
CINa 5 g
PO-KHz 2 g
Rojo de fenol 12 mg
Agar 20 g
Agua desionizada 900 ml
Preparacion
a) Esterilizar los 900 ml de agar a 121 °C durante 15 min.
b) Anadir 100 ml de solution de urea (20% en agua, esterilizar por filtration) a 900 del medio enfriado a 50 °C.
c) Dispensar en tubos. Solidificar en position inclinada.
d) Tambien puede prepararse a partir Urea agar base (Christensen), que se esteriliza por filtration y se afiade al
agar esteril.
C o n tro l de calidad
Aspecto: Agar inclinado, naranja, trasparente.
pH final: 6,8 ± 0,2
T. mentagrophytes: ureasa positiva (rojo).
T. rubrum: ureasa negativa (naranja).
Cuando se usa para levaduras: C. neoformans (positiva) y Candida albicans (negativa).
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Biomedics, Difco, Fluka, Merck, Remel, Sigma)
CHROMagar Candida*
CHROMagar contiene diversos sustratos enzimaticos que estan unidos a compuestos cromogenicos. Cuando enzimas
especificas descomponen el sustrato, se produce color. Las colonias deben evaluarse a las 48 h. La siembra de muestras
directamente aumenta un 20% el numero de cultivos mixtos [7], Puede utilizarse para identificar levaduras aisladas
en otros medios no cromogenicos. Es interesante tambien su utilization para comprobar la pureza de las cepas en las
pruebas de sensibilidad. Permite la identification rapida de especies resistentes. Puede utilizarse en mucosas, heridas
con flora mixta, hemocultivos y orinas, especialmente. Es necesario seguir con rigor las condiciones establecidas por el
fabricante. Incubar a 35 °C, en camara humeda y en oscuridad, 48 a 72 h (no

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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
Dermatophyte test medium* (DTM)
Medio utilizado para el aislamiento de dermatofitos en muestras muy contaminadas, proporcionando una identificacion
presuntiva. Los dermatofitos producer) alcalinizacion, virando el medio de amarillo a rojo, algunas bacterias y hongos
tambien pueden producir alcalinizacion. El pigmento caracteristico de algunos dermatofitos no se puede identificar. La
cicloheximida inhibe muchos de los hongos saprofitos.
Composicion
Peptona 10 g
Glucosa 10 g
Agar 20 g
Solucion de rojo fenol 40 ml
CIH 0,8 M 6 ml
Cicloheximida 0,5 g
Sulfato de gentamicina 100 Mg/ml
Clortetraciclina 100 pg/ml
P reparacion
a) Mezclar la peptona, glucosa y agar en 1.000 ml de agua desionizada y hervir hasta disolver el agar.
b) Anadir 40 ml de la solucion de rojo fenol mientras se remueve (Solucion de rojo fenol: 0,5 g de Bacto-Phenol red
disolver en 15 ml de NaOH 0,1 N; completar hasta 100 ml con agua desionizada).
c) Ajustar el pH ahadiendo 6 ml de C!H 0,8 M mientras se remueve.
d) Disolver 0,5 g de cicloheximida en 2 ml de acetona y anadir al medio caliente mientras se remueve.
e) Disolver el sulfato de gentamicina en 2 ml de agua, anadir al medio mientras se remueve.
f) Esterilizar a 121 °C. Enfriar hasta unos 47 °C.
g) Disolver la clortetraciclina en 25 ml de agua desioinizada esteril. Anadir al medio mientras se agita.
h) Dispensar en placas o en tubos.
C o n tro l de calidad
Aspecto: Agar amarillo naranja, trasparente.
Trichophyton verrucosum: crece y alcaliniza.
Aspergillus flavus: inhibicion parcial o completa.
Staphylococcus epidermidis: inhibicion parcial o completa.
(*) Disponible comercialmente (Becton Dickinson, Fluka, Merck, Remel)
Medio de arroz
Se utiliza para la diferenciacion de cepas atfpicas de Microsporum audouinii y M icrosporum canis.
C o m posicion
Arroz bianco no enriquecido 8 g
Agua desionizada 25 ml
P reparacion
a) Mezclar los ingredientes en un matraz Erlenmeyer.
b) Esterilizar a 121 °C durante 15 min.
C o n tro l de calidad
Aspecto: granos de arroz cocido.
M. canis: presenta buen crecimiento, pigmento amarillo y esporulacion abundante.
M. audouinii: no presenta crecimiento o es escaso, coloracion marronacea.
Con asa micologica, transferir una pequena porcion del aislamiento al matraz con los granos esteriles.
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
3.5. Informe de los resultados
El diagnostico micologico no acaba con el
aislamiento y la identificacion del agente causal.
Finaliza cuando la information sobre el mismo llega
al conocimiento del medico responsable del pacien-
te. Esta ultima etapa del procedimiento diagnostico
no es menos importante que las anteriores, por lo
que debe cuidarse al maximo todos los detalles de la
misma.
3.5.1. Observacion microscopica
Debe informarse en el dfa ya que aporta una
importante ayuda al clfnico; sus pacientes pueden
salir de la consulta de dermatologfa con un diagnostico
presuntivo (dermatofitosis), que habra que con-
firm ar con el cu ltiv o . o d e fin itiv o (p itiria sis
versicolor). La tinta china en buenas manos (cripto-
cocosis) y la inmunofluorescencia (peumocistosis)
tambien son diagnosticas. Otras observaciones posi-
tivas permiten una orientation terapeutica (mucor-
m ico sis, asp erg ilo sis, etc.). Es recom endable
observar los examenes en fresco negativos al dfa
siguiente.
Este informe es fundamental en toda muestra
esteril y permite saber si la muestra posee suficiente
calidad.
El inform e oral es muy im portante para
la correcta valoracion de la muestra y contrastar la
eficiencia del laboratorio, ademas de adecuar la
relation con el clfnico. Todo inform e oral debe
seguirse de otro escrito, reflejando que existe un
informe oral previo.
3.5.2. Cultivo
El cultivo negativo se descarta, generalmen-
te, a las cuatro sem anas de incubacion, con las
excepcio n es c itad as en el tiem po de lectu ra.
La prolongation de la incubacion despues de tres
sem anas aporta poca in fo rm atio n adicional y,
dependiendo del sistema de lectura, puede suponer
una sobrecarga de trabajo que hay que valorar ade-
cuadamente en cada laboratorio [12].
Los cultivos positivos se inform an, de la
misma manera que la observacion microscopica, en
el momento en el que se disponga del crecimiento.
En los casos en los que hay que realizar aislamien-
tos repetidos (unas), al cuestionarse el significado
del hongo aislado, se informara de la misma manera.
En ambos casos, hay que valorar el beneficio
para el paciente y el esfuerzo en la localization del
clfnico responsable, por lo que la utilizacion del
correo electronico para este tipo de informes, ayuda
sensiblemente al establecimiento de una rapida y
fluida comunicacion entre el micologo y el clfnico.
En todo informe escrito debe figurar si se
trata de un informe provisional o definitivo. Para los
aislamientos realizados en Bacteriologfa y remitidos
a Micologi'a, debe establecerse un mecanismo que
garantice la correcta llegada del resultado al medico:
1. Si la numeration del laboratorio es unica, se rea-
lizaran inform es provisionales en los que se
refleje la trasferencia de la cepa.
2. Si la numeration es diferente, en el registro de
Micologia figurara que es una cepa recibida de
Bacteriologfa y su numero original.
En el informe debe figurar el resultado definitivo.
En el caso de ser positivo, debe incluir la
identificacion de la especia aislada y el estudio de
sensibilidad, si procede.
Cuando el significado es de dudosa interpretation
debe hacerse constar.
3.5.3. Informe telefonico
Por sus especiales caracterfsticas, en este tipo
de informes se deben seguir unas recomendaciones
especiales:
1. Cuando no sea posible contactar con el facultati-
vo solicitante, se intentara hablar con el responsable
o el jefe de servicio. No se dara nunca el
informe a una persona no cualificada.
2. Deben facilitarse siempre los datos que garanti-
cen que el informe corresponde al paciente sobre
el que se nos pregunta:
• Nombre del paciente
• Localization (habitation, centro de salud, etc.)
• Tipo de cultivo
• Fecha de recogida de la muestra
• Resultados
3 . En el registro del laboratorio debe anotarse:
• Dfa y hora de la llamada
• Nombre del medico que recibe la information
• Persona que proporciona la information
4. La persona que da el inform e debe seguir al
menos los siguientes pasos:
• Repetir el nombre del paciente
• Repetir la localization del paciente
• Informar el estado actual del estudio
La gestion de la information hay que adap-
tarla a las circunstancias de cada laboratorio y un
modelo podrfa ser el reflejado en la Figura 3 . 1.
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Referencias
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Fundamentos basicos para el diagnostico micologico
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Identificacion de otros hongos miceliares
Josepa Gene
Josep Guarro
13.1. Introduccion 13. 2. Zigomicetes
El aumento de pacientes con alteraciones en
su sistema inmunitario o la utilization de tecnicas
agresivas en la medicina modema, entre otros facto-
res, han propiciado en las ultimas decadas un considerable
incremento de las infecciones producidas
por microorganismos saprotrofos. Entre ellos cabe
citar numerosos hongos miceliares habitualmente
colonizadores de diferentes tipos de sustratos vege-
tales y frecuentes en el ambiente que rodea al hom-
bre (su elo , paredes h um edas, a ire ...). H ace
relativamente poco tiempo, cuando dichos hongos
eran aislados de muestras clmicas solfan ser consi-
derados como meros contaminantes. Sin embargo,
se ha demostrado reiteradam ente que muchos de
estos hongos son capaces de infectar al hombre.
Estos hechos deben ser considerados por los microbiologos
clfnicos, los cuales segun las evidencias
(historia clfnica del paciente, tipos de muestra, etc.),
no deben desestimar a los hongos ambientales sino
tenerlos en cuenta como posibles agentes responsa-
bles de infecciones en el hombre, especialm ente
aquellas especies cuyas cepas son capaces de crecer
a 35-37 °C.
Los hongos miceliares considerados patogenos
oportunistas para el hombre pertenecen princi-
palm ente al grupo de los zigom icetes y de los
hifomicetes. Su identificacion es fundamental no
solo para fines epidemiologicos o meramente cientf-
ficos, sino tambien por la diferente sensibilidad a los
antifungicos entre especies de un mismo genero.
Tambien es importante que la cepa identificada se
conserve en colecciones de cultivo de referenda,
dando la posibilidad de realizar investigaciones pos-
teriores o cualquier otra comprobacion necesaria. La
identificacion se basa principalmente en el estudio
de los caracteres morfologicos, macro y microscopi-
cos, del hongo en cultivo.
A continuation se describen los caracteres
morfologicos mas im portantes de algunas de las
especies mas comunes de hongos miceliares respon-
sables de infecciones humanas.
Asociacion Espanola de M icologia
Los zigomicetes se diferencian del resto de
hongos miceliares por presentar hifas anchas, rami-
ficadas, generalmente no septadas, y esporas sexua-
les denom inadas zigosporas (Figura 13.1). Las
infecciones ocasionadas por estos hongos son referi-
das como zigomicosis. Sin embargo, este termino es
muy amplio ya que incluye a zigomicetes que pertenecen
a dos grupos (ordenes) muy diferentes, los
entomoftorales y los mucorales. Los primeros son
hongos endemicos de pafses tropicales y subtropica-
les que suelen ocasionar micosis subcutaneas [1-3]
y que no vamos a tratar en este capftulo ya que es
diffcil encontrarlos en nuestro pais. Los mucorales,
en cambio, estan ampliamente distribuidos por las
diferentes areas geograficas del globo, y algunos de
ellos son capaces de ocasionar un amplio rango de
infecciones en el hombre [1-3]. Las infecciones ocasionadas
por estos hongos suelen denom inarse
mucormicosis [3,4]. El diagnostico precoz de estas
infecciones es esencial ya que evolucionan con rapi-
dez y su pronostico suele ser fatal. La identificacion
del genero o de la especie solo es posible con el cultivo
de las cepas.
13.2.1. Caracteres morfologicos basicos
y condiciones de cultivo
Las caracterfsticas morfologicas mas repre-
sentativas de los mucorales son su rapido crecimien-
to y su m icelio carente de septos, aunque estos
pueden estar presentes en hifas fertiles y en el micelio
vegetativo de cultivos viejos. Estos hongos generalm
en te solo d e sa rro lla n esp o ras asexuales
(esporangiosporas) a partir de hifas fertiles (espo-
rangioforos), ramificadas o no, en el interior de una
especie de vesfculas (esporangios), consistentes en
un ensan ch am ien to apical del esp o ran g io fo ro
(Figura 13.1). Otras estructuras con valor diagnostico
son la columela (prolongation esteril, a menudo
hinchada, del esporangioforo dentro del esporan-
gio), la apofisis (ligero hinchamiento en la parte apical
del esporangioforo, por debajo del esporangio),
los rizoides (estructura semejante a una rafz) y los
estolones (hifas aereas, no ramificadas, que conec-
tan los rizoides). El estudio de dichas estructuras es
util para diferenciar los generos mas frecuentes en
clfnica, tales como Absidia, Rhizopus y Saksenaea.

Identificacion de otros hongos miceliares
Figura 13.1. Dibujo esquematico de las estructuras fertiles de los zigomicetes.
La identificacion de genero en los mucorales
puede llevarse a cabo a partir de los cultivos prima-
rios de las muestras clfnicas sobre SDA (Capftulo
3). Sin embargo, para la identificacion de la especie
se requiere el uso de medios de cultivo mas especf-
ficos tales como agar glucosado de patata (PDA) o
agar extracto de m alta (M EA), incubando en la
oscuridad a 25 y a 35 °C, ya que hay especies que
son termofilas. Ambos medios se hallan comerciali-
zados y, tanto su composicion como elaboration, se
detallan en el Capftulo 3.
13.2.2. Description de las especies,
diagnostico diferencial y comentarios
Absidia corymbifera (Cohn) Sacc. & Trott
(Figura 13.2)
Colonias de crecimiento rapido a 37 °C, ocu-
pando toda la placa a los 4 dfas, algodonosas, de
color banco a pardo grisaceas. Estolones y rizoides
presentes. Esporangioforos desarrollandose a partir
de los estolones y entre los rizoides, solitarios o en
grupos, de hasta 450 pm de longitud, generalmente
ra m ific a d o s, con ap o fisis de form a conica.
Esporangios terminales, subesfericos o piriformes,
de 25-150 pm de diam etro, grisaceos; colum ela
hemiesferica, generalmente con una pequena protu-
berancia apical. Esporangiosporas lisas, esfericas u
ovales, 3-5 x 2.5-4 pm. Zigosporas usualm ente
ausentes.
Diagnostico diferencial
Se distingue de la otra especie descrita como
oportunista (A. coerulea), aunque mucho menos fre-
cuente, por crecer a 45-50 °C. A. coerula no crece a
37 °C y sus colonias presentan coloraciones azula-
das [5].
Comentarios
Es una especie de amplia distribution que se
afsla de suelo y material vegetal en descomposicion
[4,6]. Se ha considerado, despues de Rhizopus ory-
zae y R. rhizopodiformis, el tercer agente de zigomi-
cosis de mayor incidencia en clfnica [3], aunque
existe cierta controversia al respecto puesto que
Kwon-Chung & Bennett [2] o Larone [7], entre
otros, lo consideran como infrecuente. Se ha descri-
to como agente responsable de infecciones profun-
das en cereb ro , pulm on y rin o n , asf com o de
infecciones cutaneas [4, 5].
F igura 13.2. Absidia corymbifera. a: colonia sobre PDA a los 7 dfas
de cultivo a 37 °C; b: esporangioforos.
©2004 Revista Iberoamericana de Micologi'a - ISBN: 84-607-3050-6

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Identificacion de otros hongos miceliares
Rhizopus oryzae Went & Prins. Geerl
(Figura 13.3)
Colonias de crecimiento rapido a 37 °C que
ocupan toda la placa de Petri a los 4 dfas, inicial-
m ente b lan cas v o lv ien d o se gris p ard u scas.
Estolones y rizoides presentes. Esporangioforos no
ramificados, de hasta 2 mm de longitud, general-
mente agrupados formando verticilos en cuya base
se situan los rizoides; apofisis presente pero poco
evidente. Esporangios esfericos de 50-300 pm de
ancho, de color gris pardusco a negro; columela
subesferica, ocupando el 50-70% del esporangio.
Esporangiosporas grisaceas, estriadas longitudinal-
mente, angulares, subesfericas o elipsoidales, 6-8 x
4-5 pm.
F ig ura 13.3. Rhizopus oryzae. a: colonia sobre PDA a los 7 dias de
cultivo a 25 °C; b: esporangioforos con columela y rizoides en la
base; c: esporangiosporas.
Dicignostico diferencial
R. oryzae y R. rhizopodiformis son las especies
de mucorales mas frecuentes en clfnica. La pri-
mera no crece a 45 °C y sus esporas son angulares y
con estrfas longitudinales, mientras que R. rhizopodiform
is crece a 50 °C y sus esporas son mas o
menos esfericas y equinuladas. Otras especies de
Rhizopus oportunistas, tales como R. azygosporus,
R. microsporus, R. schipperae y R. stolonifer, son
mucho menos frecuentes [3,5].
Comentarios
R. oryzae se afsla frecuentemente a partir de
suelos, asf como de madera, de estiercol, plumas,
etc., generalmente en regiones de clima tropical y
subtropical, aunque tambien de regiones templadas
[6]. Es la especie mas comun del genero y a ella se
atribuyen la mayorfa de casos de mucormicosis des-
critas hasta la fecha, siendo la infection rinocerebral
la mas habitual [1,2,4,8],
Asociacion Espanola de M icologia
Saksenaea vasiformis Saksena
(Figura 13.4)
Colonias de crecimiento rapido a 37 °C, ocupando
toda la placa de Petri a los 4 dfas, algodono-
sas, b lancas. E sto lo n es y riz o id e s p resen tes.
Esporangioforos no ramificados, de hasta 60 pm de
longitud, solitarios. Esporangios en forma de bote-
11a, de pared equinulada, de hasta 50 pm de longitud,
de color gris pardusco; columela hemiesferica.
Esporangiosporas grises, lisas, elipsoidales o cilfn-
dricas, 3-4 x 2-2.5 pm.
F igura 13.4. Saksenaea vasiformis. Esporangioforos con rizoides.
Diagnostico diferencial
El mayor problema para la identificacion de
esta especie es que no suele esporular en los medios
de cultivo habituales. Para su fructification se reco-
m ienda realizar el procedim iento descrito por
Padhye & Ajello [9] y que, brevemente, consiste en
cortar asepticamente un fragmento de la colonia no
esporulada, de aproximadamente 1 cm2, y transferirlo
a una placa con 20 ml de agua destilada esteril
con 0,2 ml de una solution al 10 % de extracto de
levadura. Se sella la placa para evitar que sobresalga
el micelio y se incuba a 35-37 °C. El hongo suele
desarrollar los esporangioforos a partir de 5-7 dfas.
Comentarios
Se ha descrito como agente responsable de
infecciones principalmente cutaneas, aunque tambien
de osteomielitis, infecciones rinocerebrales e
infecciones diseminadas de pronostico fatal [3-5],
A continuation se incluye una clave dicoto-
mica para la identificacion de los generos de zigo-
micetes descritos como oportunistas para el hombre
y/o animales.

Identificacion de otros hongos miceliares
Clave de los generos de zigomicetes patogenos oportunistas
1 Micelio abundante. Las esporangiosporas son liberadas pasivamente (M ucorales)................................................................. 2
Micelio muy reducido o ausente. Las esporangiosporas son liberadas con fuerza (Entom oftorales)..................................9
2 Esporangios pequenos, con una sola espora o con pocas, formandose en zonas hinchadas del apice del esporangioforo
o de sus ra m a s ...................................................................................................................................................................................3
Esporangios grandes, con muchas esporas, formandose en el apice del esporangioforo o de sus ra m a s ...................... 4
3 Esporangios mas o menos esfericos, uniesporados........................................................................................ C unningham ella
Esporangios cih'ndricos o mazudos, con varias esporas dispuestas en hileras..................................... S yncephalastrum
4 Esporangioforos con a pofisis....................................................................................................................................................................5
Esporangioforos sin a p o fis is .................................................................................................................................................................. 7
5 Esporangios con la parte superior muy alargada. Esporangioforos solitarios.......................................................... Saksenaea
Esporangios esfericos, subesfericos o piriformes. Esporangioforos dispuestos en ve rticilo s................................................6
6 Esporangios esfericos. Esporas con estrias, usualmente muy o s c u ra s ...................................................................... R hizopus
Esporangios piriformes. Esporas lisas, palidas......................................................................................................................A b sid ia
7 Presencia de colum ela............................................................................................................................................................................... 8
Ausencia de colum ela......................................................................................................................................................... M ortierella
8 Rizoides presentes; term ofilos........................................................................................................................................ R hizom ucor
Rizoides ausentes; mesofilos o term otolerantes.................................................................................................................. M ucor
9 Colonias pulverulentas, con hifas septadas al envejecer. Esporangioforos alargados.
Zigosporas esfericas......................................................................................................................................................... C o n id io b olus
Colonias membranosas. Esporangioforos cortos, generalmente hinchados hacia el apice.
Zigosporas c o n ic a s ........................................................................................................................................................... B a sid io b o lu s
13.3. Hifomicetes
Los hifomicetes constituyen el grupo mas
numeroso de hongos microscopicos. Presentan una
gran diversidad y una amplia distribution. Ademas
de los derm atofitos (Capftulo 12) o patogenos
primarios para el hombre como son Blastomyces
dermatitidis, Histoplasma capsulatum, Coccidioides
immitis, Sporothrix schenckii o Penicillium marnef-
fei, entre otros, este grupo incluye el mayor numero
de especies oportunistas y las de mayor incidencia
en clmica (Capftulo 2). Muchos de estos hongos son
ascomicetes que en cuitivo solamente muestran su
fase asexual, reproduciendose a traves de la formation
de una gran cantidad de conidios.
13.3.1. Caracteres morfologicos basicos
y condiciones de cuitivo
La caracterfstica comun a todos ellos es la
presencia de hifas septadas. Las esporas o conidios
se desarrollan a partir de celulas conidiogenas que
suelen form arse en hifas soporte o conidioforos
(Figura 13.5), aunque tambien pueden desarrollarse
directamente sobre las hifas vegetativas (no diferen-
ciadas) del micelio. Los conidioforos pueden crecer
F igura 13.5. Dibujo esquematico de las estructuras fertiles de los
hifomicetes.
solitarios o agrupados. Si los conidioforos son cortos
y se agrupan formando estructuras similares a
cojines nos referimos a ellos como esporodoquios.
Por el contrario, si son largos y se agrupan formando
estructuras similares a arboles reciben el nombre
se sinemas. Las celulas conidiogenas pueden ser de
diferentes tipos. Se llaman fialides cuando tienen
forma de botella con un cuello largo y cilmdrico o
en forma de copa (collarete) y los conidios emergen
de su interior. Las anelides, a diferencia de las fialides,
presentan en su apice una serie de cicatrices
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

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Identificacion de otros hongos miceliares
anulares que son el resultado de la formacion suce-
siva de conidios. El cuello de las anelides aumenta
de longitud a medida que se forman los conidios, el
de las fialides no. Una celula conidiogena puede
tener, a su vez, mas de un punto (locus) de formacion
de conidios (polifialies o celulas conidiogenas
poliblasticas). Los conidios pueden formar masas
mucosas o disponerse en cadenas. Nos referimos a
cadenas acropetas cuando el conidio mas joven se
encuentra en el extremo libre -apical- de la cadena,
y a cadenas basfpetas cuando el conidio mas joven
se encuentra en la base de la cadena, en contacto
con la celula conidiogena. Para la observation de la
disposition de los conidios es util el examen de la
colonia mediante la lupa u observarla directamente
mediante el microscopio optico con los objetivos de
lOx o 20x. D eterm inadas especies desarrollan
estructuras de resistencia tales como esclerocios
(masa compacta de hifas de consistencia variable,
que suele desarrollarse en la superficie de un sustra-
to y que puede ser observada a simple vista) o clamidosporas
(espora asexual que suele originarse de
un segmento de hifa intercalar o terminal, suelen ser
pigmentadas, de pared gruesa y con la superficie
lisa u omamentada). La formacion de estas dos ultimas
estructuras se ve muy influenciada por las con-
diciones de cultivo de la cepa. El examen de todos
estos caracteres resulta imprescindible para la identification
tanto a nivel generico como espetifico de
estos hongos. Para tal finalidad, son de gran ayuda
las claves dicotomicas o las tablas comparativas que
se elaboran a partir de los caracteres mas relevantes
que distinguen generos y especies.
Aunque hoy en dfa algunas tecnicas de bio-
logfa molecular pueden ser de gran ayuda para el
diagnostico micologico, especialmente de patoge-
nos primarios, el cultivo todavfa es imprescindible
en muchos casos. En ch'nica es habitual utilizar
medios de cultivo ricos en nutrientes como SDA
(Capi'tulo 3) para el aislamiento de los hongos. Sin
embargo, el empleo de dichos medios no es reco-
mendable para la identificacion de la mayorfa de los
oportunistas ya que estimula la production de mice-
lio en detrimento de las estructuras esporulantes
im prescindibles para el reconocim iento de estos
hongos. Para favorecer la esporulacion, es util el
empleo de medios como PDA, el agar harina de
mafz (CMA) o agar harina de avena (OA) que apor-
tan fuentes de carbono distintas a la glucosa, o
incluso m edios de cultivo pobres en nutrientes
como agar patata-zanahoria (PCA) o agar agua con
fragmentos de papel de filtro esteril en la superficie
(Capftulo 3). Estos dos ultimos medios son princi-
palmente recomendables para estimular la esporulacion
de hifo m icetes con p ig m e n ta tio n oscura
(dematiaceos). Asf mismo, es obligado el uso de
MEA y/o agar Czapek Dox para la identificacion de
especies de generos como Aspergillus o Penicillium
(Capi'tulo 3). A pesar de que muchos de estos hongos
son capaces de crecer entre 30 y 37 °C, las con-
diciones mas adecuadas de incubation son a 25 °C
y en la oscuridad.
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13.3.2. Descripcion de las especies,
diagnostico diferencial y comentarios
Acremonium strictum W. Gams
(Figura 13.6)
C olonias de crecim iento m oderado (16-
23 mm PDA, 25 °C, 7 dfas), de color bianco a rosa
palido, inicialm ente aterciopeladas volviendose
algodonosas y con abundantes hifas formando fascf-
culos de donde emergen perpendiculares las celulas
conidiogenas (fialides). Los conidioforos a menudo
se reducen a una simple fialide larga y delgada que
se estrecha hacia el apice (subulada), de hasta 50 x
1,5-2 |im. Conidios formando masas mucosas en el
apice de las fialides, hialinos, lisos, elipsoidales o
cilmdricos, 3,5-6 x 1-2 |am. Clamidosporas ausen-
tes.
F ig ura 13.6. Acrem onium strictum. a: colonias sobre PDA a los
14 dias de cultivo a 25 °C; b: fialides y conidios.
Diagndstico diferencial
De entre las especies de Acremonium descri-
tas como oportunistas [5,10], A. strictum es muy
similar a A. kiliense. Esta ultima se diferencia prin-
cipalmente por la presencia de clamidosporas en el
micelio sumergido en el agar.
Comentarios
Es un hongo cosmopolita que suele encon-
trarse como colonizador de material vegetal en des-
composicion y en el suelo [6]. Se ha descrito como
agente responsable de infecciones diseminadas en
pacientes severam ente inm unocom prom etidos e,
incluso, causando infecciones cerebrales de pronos-
tico fatal en todos los casos [5,10], probablemente
debido a su elevada resistencia a los diferentes anti-
fungicos [11]. En la revision de alguna de las cepas
cli'nicas de casos ya publicados se ha comprobado
que las identificaciones eran incorrectas, lo que dis-
minuye el numero real de casos atribuidos a dicha
especie [10]. Ademas, la dificultad en su identification
queda patente en el reciente estudio molecular
de Novicki et al. [12], en el que, a traves del analisis
de diferentes fragmentos del ADN ribosomico de

Identificacion de otros hongos miceliares
varias cepas de A. strictum aisladas de infecciones
diseminadas, se demostro que practicamente todas
ellas podi'an pertenecer a especies diferentes.
Alternaria alternata (Fr.) Keissl.
(Figura 13.7)
Colonias de crecimiento rapido (50-70 mm,
OA, 25 °C, 7 dfas), verde olivaceas, algodonosas,
p u lv e ru le n ta s si estan m uy e sp o ru lad as.
Conidioforos cilmdricos, ocasionalmente ramifica-
dos, con 1-3 septos, de hasta 50 pm de longitud.
Conidios formando largas cadenas acropetas escasa-
mente ramificadas, pardos, septados longitudinal y
transversalm ente, paredes intensam ente rugosas,
ovoides o ampuliformes, 20-60 x 8-18 pm.
F igura 13.7. Alternaria alternata. a: colonia sobre OA a los 10 di'as
de cultivo a 25 °C; b: cadena acropeta de conidios.
Diagnostico diferencial
Se diferencia de A. infectoria, la otra especie
del genero de importancia clfnica, porque esporula
con mayor facilidad, sus conidios son de mayor
tamano, presentan septos tanto transversales como
longitudinales, suelen tener la pared rugosa y las
cadenas raramente se ramifican.
Comentarios
Es la especie mas comun del genero, coloni-
zadora de una amplia gama de sustratos, aislandose
con mucha frecuencia del suelo y cualquier sustrato
vegetal [6]. Es un contaminante comun del laboratorio.
Se ha descrito como agente causal de feohifomi-
cosis cutaneas y subcutaneas [5,8],
Alternaria infectoria Simmons
(Figura 13.8)
Colonias de crecimiento rapido (50-60 mm,
OA, 25 °C, 7 dfas), bianco grisaceas y algodonosas
debido a su escasa esporulacion. Conidioforos raramente
ram ificados, de hasta 85 pm de longitud.
Conidios en cadenas acropetas ramificadas, pardus-
cos. de pared lisa o ligeramente verrugosa, ovoides,
aunque tienden a deformarse y volverse tubulifor-
mes con una predominancia de septos transversales,
12-30 x 7-9 pm.
Figura 13.8. Alternaria infectoria. a: colonia sobre OA a los 10 dias
de cultivo a 25 °C; b: conidioforos no ramificados y una cadena
ramificada de conidios.
Diagnostico diferencial
Los conidios de A. infectoria se diferencian
de los de A. alternata por ser de menor tamano, su
pared es lisa o ligeramente verrugosa y predominan
los septos transversales. Ademas, suelen form ar
cadenas muy ramificadas. Para conseguir una buena
esporulacion se recomienda transferir uno o varios
fragmentos de la colonia creciendo en SDA o PDA
a placas con agar agua en las que previamente se
deposito en la superficie papel de filtro esteril de
aproximadamente 1 cm2. La esporulacion suele apa-
recer a partir de los 10-14 dfas de incubacion.
Comentarios
Es tambien un hongo ubicuo y, actualmente,
se cree que es la especie de Alternaria de mayor
incidencia en clfnica [5].
Aspergillus flavus Link
(Figura 13.9)
Colonias de crecimiento rapido (40-60 mm,
MEA, 25 °C, 7 dfas), verde amarillentas, pulverulentas
o granulosas, ocasionalmente algodonosas en
el centro o margen de la colonia. Conidioforos no
ramificados, generalmente de 400-800 pm de longitud,
terminados en una vesfcula mas o menos esferi-
ca a partir de la cual las fialides se diferencian
directamente (uniseriadas) o a partir de una celula
soporte denominada metula (biseriadas). Metulas y
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

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Figura 13.9. Aspergillus flavus. a: colonias sobre MEA a los 7 di'as
de cultivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con fialides
biseriadas y cadenas de conidios.
Identificacion de otros hongos miceliares
fialides dispuestas radialmente cubriendo toda la
vesi'cula. Conidios en cadenas basfpetas, verde ama-
rillentos, lisos o finam ente rugosos, esfericos o
subesfericos, de 3,5-4,5 pm . Puede desarrollar
esclerocios, aunque raramente a partir de aislados
clinicos.
Diagnostico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Aspergillus incluidas en el capftulo, ver Tabla 13.1.
Comentarios
Crece rapidam ente a 37 °C. Es un hongo
cosmopolita que se afsla con frecuencia del suelo,
asf com o de diferentes sustratos vegetales [6],
Frecuente contaminante de los cultivos en el labora-
torio. Junto con A. fumigatus constituyen las especies
de Aspergillus de mayor incidencia en clfnica.
Ambas son importantes agentes de infecciones pul-
monares principalmente en pacientes inmunocom-
prom etidos, especialm ente n eutropenicos. No
obstante, a diferencia de A. fumigatus, suele ser res-
ponsable de muchos mas casos de sinusitis y otitis
que de aspergilosis pulmonares [5,8,10].
Aspergillus fumigatus Fresen.
(Figura 13.10)
Colonias de crecimiento rapido (50-60 mm,
MEA, 25 °C, 7 di'as), verde azuladas, aterciopeladas
o pulv eru len tas, m argen blanquecino o beige.
Conidioforos de hasta 300 pm de longitud, uniseria-
dos, vesfculas hemisfericas. Las fialides ocupan las
2/3 partes de la parte superior de la vesfcula.
C onidios en cadenas, form ando una com pacta
columna sobre la vesfcula, verde grisaceos, finamente
rugosos, subesfericos, de 2,5-3 pm.
F ig ura 13.10. Aspergillus fumigatus. a: colonias sobre MEA a los
7 dias de cultivo a 25 °C; b: conidioforos con fialides uniseriadas y
cadenas de conidios.
Diagnostico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Aspergillus incluidas en el capitulo, ver Tabla 13.1.
La mayorfa de aislados crecen y esporulan bien a
45 °C. En ocasiones, pueden aislarse cepas que no
esporulan o presentan estructuras aberrantes que
confunden la identificacion. Para la confirm ation
Tabla 13.1. Diferencias morfologicas entre las especies de Aspergillus mas frecuentes en clinlca.
Especie Colonias Conidioforos Fialides Conidios
A. flavus verde amarillentas,
pulverulentas
o granulosas
A. fumigatus verde azuladas,
aterciopeladas
o pulverulentas
A. niger bianco amarillentas
volviendose negras,
granulosas
de longitud variable,
equinulados
uni- y biseriadas,
ocupando toda
la vesicula

Identificacion de otros hongos miceliares
del cultivo se puede inducir la esporulacion transfi-
riendo una portion de la colonia esteril a una placa
que contien e agar de L eo n ian m o d ificado
(Capftulo 3) incubando a 37 °C [13]. En el caso de
no tener exito, los aislados esteriles se pueden iden-
tificar a traves de exoantfgenos (Capftulo 14) o tec-
nicas moleculares especfficas [10].
Comentarios
Es una especie termofila, de amplia distribu-
cion en la naturaleza y se ai'sla de una gran diversi-
dad sustratos [6]. Tam bien es un contam inante
frecuente de los cultivos en el laboratorio. Es, de
entre los hongos miceliares, la especie de mayor
incidencia en clfnica y, por tanto, la que m ejor
conocemos en cuanto a su patologfa y patron epide-
miologico [5,8,10].
Aspergillus niger Tiegh.
(Figura 13.11)
Colonias de crecimiento rapido (55-70 mm,
MEA, 25 °C, 7 dfas), inicialmente de blancas a amarille
n ta s, v o lv ien d o se n eg ras, g ran u lo sas.
Conidioforos generalmente de unos 500 jam, pero
pueden alcanzar los 3 mm de longitud, biseriados,
vesfcula esferica. M etulas y fialides dispuestas
radialmente cubriendo toda la vesfcula. Conidios en
cadenas, pardo oscuros, densamente rugosos, esfericos
o subesfericos, de 3,5-5 ^im.
F igura 13.11. Aspergillus niger. a: colonias sobre MEA a los 7 dias
de cultivo a 25 °C; b: detalle del apice de un conidioforo con fialides
biseriadas y conidios.
Diagnostico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Aspergillus incluidas en el capftulo, ver Tabla 13.1.
Comentarios
Crece abundantemente a 37 °C. Esta especie
ubicua se afsla de una gran variedad de sustratos [6].
Es el hongo mas comun causante de otomicosis y,
mas raramente, agente de infecciones pulmonares y
aspergilosis alergicas [5,8,10],
Aspergillus terreus Thom
(Figura 13.12)
Colonias de crecimiento rapido (40-50 mm,
MEA, 25 °C, 7 dfas), inicialmente amarillentas, vol-
viendose de color pardo claro, de aterciopeladas a
pulverulentas. Conidioforos de hasta 250 |am de
longitud, biseriados, vesfcula subesferica. Metulas y
fialides ocupando 1/2 o las 2/3 partes de la parte
superior de la vesfcula. Conidios en cadenas, for-
mando una compacta columna sobre la vesfcula,
hialinos o amarillentos, lisos, esfericos o elipsoida-
les, de 2-3 |am. En las hifas sumergidas se suelen
desarrollar conidios solitarios, esfericos u ovoides y
de 4-6 |am de longitud, que nacen laterales sobre
cortas protuberancias.
F igura 13.12. Aspergillus terreus. a: colonias sobre MEA a los
7 dias de cultivo a 25 °C; b: parte apical de dos conidioforos con
fialides biseriadas y conidios.
Diagnostico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Aspergillus incluidas en el capftulo, ver Tabla 13.1.
Algunos aislados clfnicos, como consecuencia de un
estado de adaptation al huesped, presentan estructu-
ras aberrantes y practicamente no esporulan, y si lo
hacen solo producen conidios solitarios que nacen
directamente de las hifas del micelio. Dicha esporulacion,
asf como la apariencia de la colonia recuer-
dan a un im p o rtan te p ato g en o , B la sto m yces
dermatitidis [10]. Sin embargo, este ultimo al ser un
tfpico hongo dimorfico se diferencia claramente por
su crecimiento levaduriforme a 37 °C.
Comentarios
Crece abundantemente a 37 °C. Es una especie
de amplia distribution, pero es mas comun en
regiones tropicales y subtropicales que en las de
clima templado [6]. De las especies de Aspergillus
incluidas en este capftulo, A. terreus es la de menor
incidencia en clfnica, a pesar de ello se ha descrito
como agente productor de un amplio espectro de
infecciones [5,8,10],
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
Identificacion de otros hongos miceliares
Cladophialophora bantiana (Sacc.) de Hoog
(Figura 13.13)
Colonias de crecimiento moderado a lento
(15-20 mm, OA, 25 °C, 7 dias), aterciopeladas, pul-
verulentas en el caso de presentar buena esporulacion,
de colo r gris o liv aceo . No p resen ta
conidioforos manifiestos. Conidios naciendo direc-
tamente de las hifas del micelio, dispuestos en lar-
gas cadenas acropetas escasamente ramificadas, de
color oliva palido, lisos, elipsoidales o fusiformes,
4-10 x 2,5-5 jam.
Figura 13.13. Cladophialophora bantiana. a: colonia sobre OA a
las 3 semanas de cultivo a 25 °C; b: micelio de donde emergen
cadenas acropetas de conidios.
Diagnostico diferencial
Se diferencia claramente de C. carrioni por
la ausencia de conidioforos y por crecer a 40 °C.
Comentarios
Es una especie que presenta un claro tropis-
mo por el sistema nervioso central, siendo el principal
agente de in feccio n es cereb rales en areas
geograficas de clima templado [14], ocasionalmente
produce infecciones cutaneas y subcutaneas [5,8].
Cladophialophora carrionii (Trejos) de Hoog,
Kwon-Chung & McGinnis
(Figura 13.14)
Colonias de crecimiento lento (10-15 mm,
OA, 25 °C, 7 dias), aterciopeladas volviendose pul-
verulentas, de color gris olivaceo. Conidioforos
diferenciados, en cuyo apice se desarrollan cadenas
de conidios ram ificadas que se desarticulan con
cierta facilidad al ser m anipuladas. Conidios de
color oliva palido, lisos o ligeramente verrugosos,
fusiformes o limoniformes, 4-7 x 2-3 pm, general-
mente con cicatrices evidentes en los extremos.
C uando crece en m edios de cultivo pobres en
nutrientes suele desarrollar ademas celulas conidio-
genas similares a las que caracterizan los miembros
del genero Phialophora.
a
Asociacion Espanola de M icoiogia
Figura 13.14. Cladophialophora carrioni. a: colonia sobre OA a las
3 sem anas de cultivo a 25 °C; b: conidioforo con conidios.
Diagnostico diferencial
Se diferencia principalmente de C. bantiana
por no presentar crecimiento a 40 °C y por sus conidioforos
bien diferenciados.
Comentarios
Crece a 37 °C. Es uno de los agentes tfpicos
productores de cromoblastomicosis [1,2,10].
Cladosporium herbarum (Pers.) Link ex S.F. Gray
(Figura 13.15)
C olonias de crecim iento m oderadam ente
rapido (25-35 mm, OA, 25 °C, 7 dfas), aterciopeladas
volviendose pulverulentas, de color verde oliva
a verde oscuro. Conidioforos de hasta 250 pm de
longitud, ramificados especialmente hacia el apice,
con nodulos a lo largo del conidioforo que coinci-
den con los locus formadores de conidios. Conidios
en cadenas acropetas y ramificadas, pardos, general-
mente verrugosos, unicelulares, elipsoidales o sub-
cilfn d rico s, de 5-11 x 4-5 pm , con c icatrices
prominentes y mas oscuras que el resto del conidio,
pueden nacer de celulas soporte (ramoconidos) de
mayor tamano con uno o mas septos transversales,
de hasta 14x6 pm, que se separan del conidioforo
con mucha facilidad.
F igura 13.15. Cladosporium herbarum. a: colonia sobre OA a las
4 semanas de cultivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con
ram oconidios y cadenas acropetas de conidios.

Identificacion de otros hongos miceliares
Diagnostico diferencial
Se diferencia de las otras dos especies mas
frecuentes del genero y tam bien descritas como
oportunistas, C. cladosporioides y C. sphaerosper-
mum, por el color, ornamentation e incluso forma
de los conidios. C. cladosporioides posee los coni-
dios de color verde palido y lisos, mientras que los
de C. sphaerosperm um son predom inantem ente
esfericos.
Comentarios
No crece a 37 °C. Cosm opolita. Se suele
encontrar colonizando material vegetal en descom-
posicion [6]. Es uno de los hongos tfpicos contami-
nantes de laboratorio. Su implication en clfnica es
cuestionable, aunque se ha descrito como agente
responsable de infecciones cutaneas y queratitis
[5,15],
Curvularia lunata (Waskker) Boedijn
(Figura 13.16)
Colonias de crecimiento rapido (45-50 mm,
OA, 25 °C, 7 dfas), algodonosas, grises o pardo
negruzcas. Conidioforos no ramificados, a menudo
marcadam ente sinuosos hacia el apice. Conidios
pardo olivaceos, septados transversalmente (3 sep-
tos), obovoides o anchamente mazudos, 20-30 x 8-
12 pm, curvados.
F igura 13.16. Curvularia lunata. a: colonia sobre OA a los 14 dias
de cultivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con conidios.
Diagnostico diferencial
C. g e n ic u la ta , la seg u n d a e sp ecie de
Curvularia de importancia clfnica, se diferencia por
tener los conidios de mayor tamano (18-37 x 8-14)
y predominantemente con 4 septos.
Comentarios
Colonizador comun de material vegetal en
descom posicion. Es la especie de Curvularia de
mayor incidencia en clfnica. Se ha descrito como
agente responsable de casos de sinusitis y queratitis,
aunque tambien ocasionando infecciones cutaneas,
subcutaneas y sistemicas [5,8].
Exophiala dermatitidis (Kano) de Hoog
(Figura 13.17)
C olonias de crecim iento restringido (14-
18 mm, PDA, 25 °C, 14 dfas), levaduriformes, lisas
y de color pardo a negro pardusco, aunque pueden
volverse ligeramente filamentosas con el tiempo;
con un pigmento pardo oscuro que difunde por el
agar. Celulas levaduriformes abundantes, subesfericas
u ovales. Celulas conidiogenas anelfdicas, inter-
calares, laterales o terminales con uno o varios locus
conidiogenicos relativam ente anchos. C onidios
m ucosos, subhialinos o de color pardo palido,
subesfericos o elipsoidales, 2,5-4 x 2-3 pm. Pueden
observarse tam bien fialides sim ilares a las de
Phialophora spp., de donde nacen conidios, elipsoidales
o cilfndricos, que suelen ser mas pequenos que
los anteriormente descritos.
F igura 13.17. Exophiala dermatitidis. a: colonia sobre PDA a las
4 semanas de cultivo; b: celulas levaduriform es y celulas conidiogenas
produciendo conidios.
Diagnostico diferencial
La diferenciacion microscopica de las especies
de Exophiala es diffcil por su gran parecido
morfologico, aunque E. dermatitidis se puede reco-
nocer por la production de pigmento difusible, por
presentar locus conidiogenicos mas anchos que el
resto de especies y por ser, de las especies descritas
como oportunistas, la unica que crece a 40 °C; solo
algunas cepas de E. lecani-corni crecen debilmente
a dicha temperatura. No obstante, para confirmar la
identificacion se deberfa recurrir a las pruebas bio-
qufmicas; E. dermatitidis no asimila nitrato, nitrito,
creatina ni creatinina como fuentes de nitrogeno
[16]. Cabe destacar que el perfil del genero en cuan-
to a especies ha variado considerablemente en estos
ultimos anos a rafz de los diversos estudios sobre
biologfa m olecular que se han llevado a termino
principalmente a partir de cepas clfnicas [17-20].
Comentarios
C rece b ien a 40 °C. Es la esp ecie de
Exophiala que se afsla con mayor frecuencia en clfnica.
Presenta predilection por el sistema nervioso
central, siendo el principal agente de infecciones
cere b rale s en el E x trem o O rien te [14].
Ocasionalmente se ha descrito como agente causan-
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
te de queratitis e infeceiones subcutaneas despues
de traumatismos [5,7,8].
Identificacion de otros hongos miceliares
Fonsecaea pedrosoi (Brumpt) Negroni
(Figura 13.18)
Colonias de crecimiento lento (18-25 mm,
PDA, 25 °C, 14 dfas), verde o gris oscuras a negruz-
cas, aterciopeladas, pulverulentas cuando esporulan
a los, aproximadamente, 14 dfas. Conidioforos erec-
tos, ramificados, con zonas terminales o intercala-
res, ligeram ente hinchadas, de donde em ergen
cortas proyecciones (dentfculos) que dan lugar a los
conidios. Los conidios a su vez pueden formar cortas
cadenas acropetas que, en conjunto, recuerdan la
conidiacion de Cladosporium. El hecho de presentar
un maximo de 3 o 4 conidios por cadena y la presencia
de dentfculos prom inentes a lo largo del
conidioforo, la diferencian de cualquier miembro de
Cladosporium. Los conidios que derivan de estas
estructuras son lisos, subhialinos o pardo claro,
ovoides, 2-6 x 1,5-3 pm . A dicionalm ente, este
hongo puede tambien desarrollar conidios a partir
de fia lid e s sim ilares a las de P h ia lo p h o ra
verrucosa.
a
F ig ura 13.18. Fonsecaea pedrosoi. a: colonia sobre OA a los
14 dias de cuitivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con
denticulos produciendo conidios; c: detalle del collarete de una
fialide con un conidio en su interior.
Diagndstico diferencial
F. compacta, la otra especie del genero des-
crita como oportunista aunque con mucha menos
frecuencia, se diferencia de F. pedrosoi por crecer y
esporular mas lentamente (un mfnimo de 4 sema-
nas), sus conidios son subesfericos y sus cadenas se
desarticulan con dificultad [7,15].
Comentarios
Crece a 37 °C. Se afsla con relativa frecuencia
de material vegetal y del suelo de regiones con
clima tropical. Constituye uno de los principales
agentes de crom oblastom icosis en los pafses de
Latinoamerica. Tambien se ha descrito produciendo
queratitis, feohifomicosis subcutaneas y en un caso
de absceso cerebral [5,15].
Asociacion Espanola de M icologia
Fusarium oxysporum Schltdl.
(Figura 13.19)
Colonias de crecimiento rapido (65-70 mm,
PDA, 25 °C, 7 dfas), algodonosas, con areas de
color bianco mezcladas con zonas de color purpura,
pudiendo aparecer en la superficie del agar masas
mucosas de color anaranjado formadas por conidios
largos y septados (m acroconidios) que nacen de
esporodoquios. Conidioforos cortos, ramificados o
no, naciendo de hifas aereas o de esporodoquios.
Fialides cortas, de 8-14 pm de longitud, naciendo de
conidioforos del sustrato que producen macroconidios,
o de hifas aereas produciendo predominante-
m ente co n id io s p equenos y u n icelu ares
(microconidios), en forma de botella o mas o menos
cilfndricas. Macroconidios en masas mucosas, de 4-
5 septos, ligeramente curvados, fusiformes, 20-45 x
3-4,5 pm. Microconidios en masas mucosas, gene-
ralmente unicelulares, pueden ser ligeramente curv
ados, e lip so id a le s o cilfn d ric o s, de 5-12 x
2,5-4 pm. Clamidosporas terminales e intercalares,
lisas o verrugosas de hasta 12 pm de ancho.
F ig ura 13.19. Fusarium oxysporum. a: colonias sobre PDA a los
7 dias de cuitivo a 25 °C; b: fialides del micelio aereo produciendo
microconidios.
Diagndstico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Fusarium incluidas en este capftulo, ver Tabla 13.2.
Comentarios
Puede crecer a 37 °C. Es una especie de
amplia distribution, comunmente aislada de suelo y
se ha descrito tambien como patogena de plantas
[6]. Es la especie de Fusarium mas frecuentemente
descrita como agente de onicomicosis en humanos,
aunque tambien se ha descrito en casos de queratitis
pero su incid en cia es m ucho m enor que la de
F. solani. Raramente se ha asociado a infecciones
cutaneas y diseminadas [5,10],

Tabla 13.2. Diferencias morfologicas entre las especies de Fusarium mas frecuentes en clfnica.
Especie Colonias Fialides de
hifas aereas
F. oxysporum algodonosas,
blanquecinas con
zonas de color
purpura palido
F. solani lanosas,
blanquecinas con
zonas pupura palido,
volviendose pardo
claro o rojizo
F. verticlllioldes algodonosas
o pulverulentas,
micelio aereo
blanquecino,
micelio sumergido
de color violaceo
Fusarium solani (C. Mart.) Sacc.
(Figura 13.20)
Colonias de crecimiento rapido (65-70 mm,
PDA, 25 °C, 7 dfas), generalmente lanosas, de color
bianco o crema, tambien de color pardo claro, pardo
rojizo m ezcladas con zonas de color purpura e,
incluso, pueden presentar (aunque raram ente en
cepas clfnicas) masas mucosas verde azuladas for-
madas por macroconidios que nacen de esporodo-
quios. C onidioforos de esporodoquios cortos,
ramificados; conidioforos de hifas aereas generalmente
no ramificados, muy largos, reducidos a una
simple fialide mas o menos cilfndrica, de hasta 40 x
2-3 |im, en cuyo apice se suele encontrar un conidio
no desprendido. Macroconidios en masas mucosas,
hialinos, mayormente con 3 septos, ligeramente cur-
vados, fusiformes pero con extremos mas o menos
redondeados, 28-50 x 4-6 |im. M icroconidios en
masas mucosas, hialinos, lisos, generalmente unice-
lulares, pueden ser ligeramente curvados, elipsoida-
les o su b cilfn d rico s, de 7-16 x 2 ,5 -4 ,5 pm .
Clam idosporas term inales e intercalares, lisas o
verrugosas, parduscas, de hasta 10 pm de ancho.
Diagnostico diferencial
Para diferenciarlo de las otras especies de
Fusarium incluidas en este capftulo, ver Tabla 13.2.
Cabe destacar que a partir de los recientes estudios
moleculares realizados principalmente con cepas no
clfnicas queda patente que se trata de una especie
muy heterogenea y que bajo esta denomination se
cortas (< 14 pm long.),
laterales,
cilfndricas o en
forma de botella
muy largas (< 40 pm long.),
cilfndricas,
a menudo con un
conidio adherido
en el apice
Conidios Clamidosporas
macroconidios
usualmente de
4-5 septos,
con extremos picudos;
microconidios en
masas mucosas
macroconidios
usualmente de
3 septos, con
extremos romos;
microconidios en
masas mucosas
subuladas (< 32 pm long.) macroconidios
usualmente de
3-5 septos,
con extremos picudos;
microconidios en
largas cadenas
presentes
presentes
ausentes
Figura 13.20. Fusarium solani. a: colonias sobre PDA a los 7 dias
de cultivo a 25 °C; b: fialides del micelio aereo produciendo microconidios.
incluyen mas de 25 entidades que muy bien pueden
considerarse especies diferentes [21,22],
Comentarios
Puede crecer a 37 °C. Cosmopolita. Se afsla
a partir de una amplia gama de sustratos y, al igual
que F. oxysporum, es un fitopatogeno importante
[6], En humanos es la especie de Fusarium que se
afsla con mayor frecuencia, siendo el agente mas
comun de queratitis, asf como de infecciones cuta-
neas y diseminadas en individuos inmunocompro-
m etidos, especialm ente pacientes neutropenicos
[5,8,10],
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
Fusarium verticillioides (Sacc.) Nirenberg
(Figura 13.21)
Colonias de crecim iento muy rapido (80-
90 mm, PDA, 25 °C, 7 dfas), algodonosas o pulve-
rulentas, m icelio aereo de color bianco, m icelio
inmerso en el medio de cultivo de color violaceo.
Conidioforos que nacen de hifas aereas generalmen-
te consistentes en simples fialides subuladas, de
hasta 32 fim de longitud, productoras de microconi-
dios; conidioforos del sustrato ramificados, agrupa-
dos fo rm an d o esp o ro d o q u io s en donde se
diferencian los macroconidios (raros en cepas clfni-
cas). Macroconidios en masas mucosas, hialinos,
con 3-5 septos, rectos o falciformes, 20-55 x 2,5-
4 |jm. M icroconidios en cadenas (pueden formar
m asas m ucosas si crecen en m edios rico s en
nutrientes o por un exceso de humedad), unicelula-
res, hialinos, lisos, mazudos y generalmente con la
base plana, de 7-12 x 2,5-3,5 |am. Clamidosporas
ausentes.
F ig ura 13.21. Fusarium verticillioides. a: colonias sobre PDA a
los 7 dias de cultivo a 25 °C; b: fialide con conidio; c: cadena de
conidios desarticulada.
Diagndstico diferencial
Para diferenciarla de las otras especies de
Fusarium incluidas en este capftulo, ver Tabla 13.2.
Comentarios
Puede crecer a 37 °C. F. verticillioides junto
a F. oxysporum son, despues de F. solani. las especies
del genero mas comunmente descritas como
agentes de infecciones cutaneas y diseminadas en
pacientes severam ente inm unocom prom etidos.
Tambien se ha aislado, aunque raramente, en infecciones
subcutaneas de pacientes inmunocompeten-
tes y en queratitis [5,10],
Paecilomyces lilacinus (Thom) Samson
(Figura 13.22)
C olonias de crecim iento m oderadam ente
rapido (40-50 mm, PDA, 25 °C, 14 dfas), de color
rosa palido a vinaceo, de flocosas a pulverulentas.
Conidioforos de hasta 500 urn de longitud, rugosos,
portadores de un compacto grupo de ramas hacia el
apice, en cuyos extremos se desarrollan grupos (ver-
Identificacion de otros hongos miceliares
Asociacion Espahola de M icologia
ticilos) de fialides. Fialides de base mas o menos
hinchada y cuello largo (lageniformes), 7-10 x 2,5-
3,5 |am. Conidios en largas cadenas divergentes,
subhialinos, unicelulares, elipsoidales o fusiformes,
2-3 x 2-2,5 |jm, lisos o ligeramente equinulados.
Clamidosporas ausentes.
F ig ura 13.22. Paecilom yces lilacinus. a: colonias sobre PDA a
los 7 dias de cultivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con
fialides y conidios.
Diagndstico diferencial
Podrfa confundirse con P. marquandii des-
crita tam bien com o oportunista, aunque m ucho
menos frecuente. No obstante, los conidioforos de
esta ultima especie son lisos, desarrolla clamidosporas
y el reverso de las colonias es amarillento.
Comentarios
Es una especie ampliamente distribuida y se
afsla comunmente del suelo, insectos y de material
vegetal [6]. Hasta la fecha, se han descrito un total
de ocho especies de Paecilomyces como oportunistas
para el hombre [5], pero las dos mas frecuentes
son P. lilacinus y P. variotii. El espectro de infecciones
es similar en ambas especies. P. lilacinus es
un agente comun de sinusitis, aunque tambien se ha
descrito como agente de queratitis, bursitis, endocarditis,
micosis cutaneas y subcutaneas; los casos
de infection diseminada o neumonfa siempre se dan
en individuos severamente inmunocomprometidos
[5,8],
Paecilomyces variotii Bainier
(Figura 13.23)
Colonias de crecim iento muy rapido (70-
80 mm, PDA, 25 °C, 7 dfas), inicialmente blancas y
flocosas, volviendose de color amarillo verdoso o
amarillo pardusco y pulverulentas. Conidioforos de
hasta 200 (am de longitud, lisos, repetidam ente
ramificados, con ramas dispuestas en verticilos o
irregularmente distribuidas, portadoras de 2-7 fialides.
Fialides lageniform es, de base elipsoidal o
cilfndrica, 9-18 x 2,5-4 |im . Conidios en largas
cadenas divergentes, amarillentos, uniceluares, elip-
soidades o mazudos, 3-6,5 x 1,5-3,5 |jm, a menudo

Identificacion de otros hongos miceliares
con extremos truncados, lisos. Clamidosporas abun-
dantes en cultivos viejos, esfericas o subesfericas, 4-
8 pm de ancho, color pardo, lisas o ligeramente
verrugosas.
F igura 13.23. Paecilomyces variotii. a: colonias sobre PDA a los
7 dias de cultivo a 25 °C; b: parte apical de un conidioforo con
fialides y conidios.
Diagnostico diferencial
Es una especie similar a la fase conidial del
ascomicete Thermoascus crustaceus. La diferencia
entre ambos hongos radica principalmente en que
este ultimo siempre se desarrolla junto a la forma
sexual y nunca presenta clamidosporas. A diferencia
de P. lilacinus, las cepas de P. variotii son capaces
de crecer a 45-50 °C, por eso se define como un
hongo termofilo [5,10].
Comentarios
Es de amplia distribution y se afsla del aire y
de una gran variedad de sustratos tales como suelo,
aguas polucionadas, madera, papel, etc. [6], Se ha
descrito como agente responsable de infecciones
muy diversas, tanto en animales como en el hombre
[5,8],
Phaeoacremonium parasiticum (Ajello, Georg &
Chin C Wang) W. Gams, Crous & Wingfield
(Figura 13.24)
C olonias de crecim iento m oderado (25-
30 mm, PDA, 25 °C, 14 dfas), inicialmente blanque-
cinas y con escaso micelio aereo, volviendose de
color pardo grisaceo y aterciopeladas, excepto el
m argen que sigue siendo de color blanquecino.
Conidioforos escasamente ramificados, a menudo
son muy simples y estan formados por una sola
celula conidiogena (fialide). Fialides de longitud
variable, mas o menos cilmdricas o subuladas, 15-
45 x 2-3 pm, con un collarete tubular en el extremo,
la base de la fialide suele tener la pared mas gruesa
y presenta incrustaciones. Conidios acumulandose
en masas mucosas, unicelulares, lisos, hialinos, elip-
soidales o cilfndricos, 2,5-6 x 1-2 pm, a menudo
curvados.
F igura 13.24. Phaeoacremonium parasiticum. a: colonias sobre
PDA a los 14 dias de cultivo a 25 °C; b: fialides produciendo
conidios.
Diagndstico diferencial
P. aleophilum, P. inflatipes, P. parasiticum y
P. ru b rigenum son las cuatro esp ecies de
Phaeoacremonium descritas hasta la fecha como
oportunistas [23], siendo las dos ultimas morfolo-
gicam ente m uy sim ilares. Podem os d istin g u ir
a P. rubrigenum por el color rojizo del reverso
de sus colonias y porque es una especie que crece
escasamente a 37 °C. P. parasiticum crece bien a
dicha temperatura y sus colonias no producen ese
pigmento.
Comentarios
Anteriormente conocida como Phialophora
parasitica. Se describe como hongo fitopatogeno
importante, aunque tambien es agente responsable
de numerosos casos de infecciones en el hombre,
principalmente subcutaneas [5,7]. De hecho, es la
especie de Phaeoacremonium que se afsla mas fre-
cuentemente en clfnica.
Phialophora verrucosa Medlar
(Figura 13.25)
C olonias de crecim iento m oderadam ente
lento (18-20 mm, PDA, 25 °C, 14 dfas), gris oliva-
ceas y flocosas, volviendose negruzcas y lanosas
con el tiempo. Fialides generalmente solitarias, cre-
ciendo perpendiculares sobre las hifas vegetativas,
lisas, de color pardo, en forma de botella, raramente
cilmdricas, 8-24 x 3-4 pm, con un collarete promi-
nente mas ancho (3-4,5 pm) que largo (2,5-3,5 pm)
y mas oscuro que el resto de la fialide. Conidios en
masas mucosas sobre las fialides, lisos, subhialinos,
ovoides o elipsoidales, 2,5-5 x 1,5-3 pm.
Diagnostico diferencial
P. verrucosa es morfologicamente muy similar
a P. americana. La principal diferencia entre
ambas estriba en la forma del collarete de la fialide,
que es mas largo que ancho (3,5-5 x 2-3 pm) en la
ultima especie.
©2004 Revista Iberoamericana de Micologi'a - ISBN: 84-607-3050-6

©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
a
F igura 13.25. Phialophora verrucosa, a: colonia sobre PDA a los
14 dias de cultivo a 25 °C; b: fialides con collarete manifiesto.
Comentarios
La m ayorfa de las cepas crecen a 37 °C.
Es uno de los principales agentes productores de
cromoblastomicosis y ocasionalmente se ha descrito
en casos de feohifomicosis y micetomas [2,5,8].
Identificacion de otros hongos miceliares
Scedosporium apiospermum (Sacc.) Sacc.
(Figura 13.26)
C olonias de crecim iento m oderadam ente
rapido (35-40 mm, PDA, 25 °C, 7 dfas), blancas y
algodonosas, pero a medida que aumenta la esporulacion
se vuelven de color gris o gris pardusco.
Celulas conidiogenas (anelides) mas o menos cilfn-
dricas, desarrollandose directam ente sobre hifas
indiferenciadas o a partir de conidoforos escasa-
m ente ram ificados. Conidios acum ulandose en
masas mucosas sobre las anelides o solitarios y sesi-
les desarrollandose de las hifas del micelio, lisos, de
color pardo amarillento, ovales o elipsoidales, 5-12
x 4-6,5 pm, con la base anchamente truncada.
F ig ura 13.26. Scedosporium apiosperm um . a: colonia sobre PDA
a los 14 dias de cultivo a 25 °C; b: anelides produciendo conidios.
Diagnostico diferencial
Se distingue de la otra especie del genero,
S. prolificans, porque los conidios de esta ultima
son ovoides y sus anelides presentan una base mas o
m enos hinchada. Cabe destacar que en algunas
cepas esta form a conidial se desarrolla junto a
la fase sexual del hongo, Pseudallescheria boydii.
Asociacion Espanola de M icologia
Esta se caracteriza por desarrollar cuerpos fructffe-
ros (ascomas) a los 7-10 dfas de incubation, esfericos
(50-250 pm ), negruzcos, que al rom perse
emergen esporas pardo amarillentas, lisas y elipsoidales,
6-8,5 x 3,5-5,5 pm. En otras cepas, tambien
ocasionalmente, S. apiospermum se desarrolla junto a
otra forma conidial, Graphium. Esta se caracteriza
por el desarrollo de conidioforos largos, erectos, de
color marron y ramificados hacia el apice, los cuales
se van agrupando formando sinemas en cuyo apice se
acumulan los conidios mucosos. Los conidios de esta
estructura suelen ser mas o menos cilfndricos o mazu-
dos y suelen ser mas delgados (4-12 x 2-4 pm).
Comentarios
Todas las cepas crecen bien a 37 °C y la
mayorfa tambien a 40 °C. Es un hongo telurico, de
amplia distribution. Las cepas clfnicas raramente
desarrollan la fase sexual. Su epidemiologfa es similar
a la de Aspergillus fumigatus, afectando princi-
palmente a pacientes neutropenicos o tratados con
corticosteroides. El hongo tiene una marcada predilection
por el sistema nervioso central, aunque pre-
senta un amplio espectro de infecciones que pueden
afectar tejido subcutaneo, huesos, pulmones, etc.
[2,5,8,24],
Scedosporium prolificans (Hennebert & B.G.
Desai) E. Gueho & de Hoog
(Figura 13.27)
C olonias de crecim iento m oderado (18-
23 mm, PDA, 25 °C, 7 dfas), de color verde grisa-
ceo, generalmente mucosas, a menudo con micelio
aereo algodonoso y blanquecino en el centro.
Conidioforos cortos, generalmente ramificados, con
mas de una celula conidiogena (anelide) por rama.
A nelides creciendo solitarias de las hifas o en
pequenos grupos de las ramas de los conidioforos,
en forma de botella, a menudo con un largo cuello
con cicatrices anulares poco evidentes, 10-30 x 2,5-
5 pm. Conidios en masas mucosas, lisos, subhiali-
nos o de color pardo olivaceo, ovoides, 4,5-8 x
3-6 pm. Pueden desarrollarse tambien conidios sesi-
les sobre las hifas indiferenciadas que suelen ser
mas oscuros y mas hinchados.
Figura 13.27. Scedosporium prolificans. a: colonias sobre PDA a
los 14 dias de cultivo a 25 °C; b: conidioforos con anelides produciendo
conidios.

Identificacion de otros hongos miceliares
Diagnostico diferencial
Se diferencia de S. apiospermum por la mor-
fologfa de las celulas conidiogenas y de los conidios
(ver diagnostico diferencial de S. apiospermum).
Comentarios
Todas las cepas crecen bien a 37 °C y la
mayorfa tambien a 40 °C. Es un hongo emergente
cuyo reservorio todavfa es incierto. Se ha aislado de
suelos de maceta, de invernaderos [5] y en nuestro
laboratorio hemos aislado cepas de S. prolificans a
partir de muestras de suelo procedentes de jardines
publicos (datos no publicados). Por lo que podemos
suponer que, al igual que su congenere, es un hongo
colonizador de suelos principalmente ricos en materia
organica. El espectro de infecciones es similar al
de S. apiosperm um ; sin embargo, se asocia mas
comunmente a osteomielitis y artritis en humanos y
animales [24]. En nuestro pais y en Australia se han
descrito numerosos casos de infecciones disemina-
das, principalmente en pacientes inmunocomprome-
tid o s. La m ayoria de casos de in feccio n es
localizadas se han descrito en los EE UU [25].
Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bainier
(Figura 13.28)
C olonias de crecim iento m oderado (42-
46 mm, PDA, 25 °C, 14 dfas), de color beige con
margen blanquecino, de aspecto pulverulento si la
esporulacion es abundante. Conidioforos general -
mente cortos pero ram ificados, con mas de una
celula conidiogena (anelide) por rama. Anelides
creciendo solitarias de las hifas o en pequenos
grupos de las ramas de los conidioforos, cilmdricas
o en forma de botella, 10-25 x 3-5 |am, con un cue-
llo con cicatrices anulares manifiestas. Conidios for-
m ado larg as caden as b asfp etas, su b h ialin o s,
inicialmente lisos volviendose marcadamente verrugosos,
subesfericos, con la base anchamente trunca-
da, 5-8 x 5-7 pm.
F igura 13.28. Scopulariopsis brevicaulis. a: colonia sobre PDA
a los 14 dfas de cultivo a 25 °C; b: conidioforos con anelides
produciendo conidios en cadena.
Diagnostico diferencial
Las dos especies del genero que mas comunm
ente se afslan en clinica son S. brevicaulis y
S. brumptii, aunque esta ultima con mucha menos
frecuencia. Las colonias de S. brumptii se caracteri-
zan por ser de color gris oscuro y crecer lentamente.
S. brumptii podrfa confundirse con S. prolificans.
Sin embargo, los conidos dispuestos en cadenas y el
aspecto pulverulento de las colonias son los caracte-
res principales que diferencian S. brum ptii de
S. prolificans.
Comentarios
Crece a 37 °C. Es una especie de amplia distribution,
la mas comun del genero. Se afsla de una
gran variedad de sustratos (suelo, madera y material
vegetal en general, insectos m uertos, estiercol,
papel, etc.) [6], Es uno de los principales agentes de
onicomicosis no dermatofftica. A su vez, se ha descrito,
aunque esporadicam ente, como agente de
endocarditis, queratitis y de infecciones invasoras
tanto en individuos inm unocom petentes com o
inmunocomprometidos [5,24].
A continuation se incluye una clave dicoto-
mica para la identificacion de los generos de hifomi-
cetes m as fre c u e n tem e n te aislad o s com o
oportunistas para el hombre.
©2004 Revista Iberoamericana de Micoiogia - ISBN: 84-607-3050-6

©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
Identificacion de otros hongos miceliares
Clave dicotomica de los generos de hifomicetes oportunistas mas frecuentes en clrnica
1 Colonias de colores oscuros (verde o pardo oscuro, n e g ru z c a s ).................................................................................................2
Colonias de otros colores......................................................................................................................................................................13
2 Colonias no m ucosas................................................................................................................................................................................ 3
Colonias mucosas, al menos cuando son jovenes. Celulas conidiogenas anelidicas.
Conidios unicelulares, hialinos o subhialinos................................................................................................................ E xophiala
3 Conidios dispuestos en ca d e n a s ...........................................................................................................................................................4
Conidos en otra disposicion...................................................................................................................................................................9
4 Conidios unicelulares y/o con solo septos transversales................................................................................................................. 5
Conidos con septos trasversales y longitudinales, grandes, parduscos, de base mas ancha que el apice . . A lte rn a ria
5 Crecen a 37 °C o a temperaturas superiores......................................................................................................................................6
No crecen a 37 °C. Conidioforos ramificados. Cicatrices conidiales muy marcadas y a menudo mas oscuras .. C la d o sp o riu m
6 Conidioforos no ramificados, con un hinchamiento apical (vesi'cula). Conidios esfericos y
muy ornamentados...............................................................................................................................................................A s p e rg illu s
Conidioforos y conidios con otras c a ra cte ristica s........................................................................................................................... 7
7 Conidos formando cadenas acropetas..................................................................................................................................................8
Conidos formando cadenas basipetas, naciendo de anelides.........................................................S co p u la rio p sis
8 Cadenas conidiales cortas (maximo 3-4 conidios), no ramificadas, junto a conidios solitarios y
naciendo de denticulos agrupados en el apice de las ramas de un conidioforo o intercalares......................... Fonsecaea
Cadenas de conidos largas, generalmente ramificadas; dentfculos a u s e n te s .....................C ladophialophora
9 Conidos unicelulares y pequenos (< 15 pm long.).......................................................................................................................... 10
Conidos septados transversalmente, de gran tamano (> 15 pm long.), muy curvados o solo ligeramente. . C urvularia
10 Conidos solitarios naciendo sobre denticulos prominentes agrupados en el apice de las ramas del
conidioforo o intercalares, tambien pueden formar cadenas c o rta s ........................................................................ Fonsecaea
Conidos formando masas mucosas en el apice de las celulas conidiogenas.........................................................................11
11 Celulas conidiogenas con collarete manifiesto (fialide). Conidos pequenos (< 6 pm lo n g .) ................................................12
Celulas conidiogenas sin collarete, y con un largo y estrecho cuello (anelides),
especialmente manifiesto al envejecer el hongo. Conidos mas grandes (> 6 pm lo n g .)............................S cedosporium
12 Collarete abierto, en forma de copa y generalmente mas oscuro que el resto de la fialide.
Fialide en forma de b o te lla .............................................................................................................................................. P hialophora
Collarete cih'ndrico. Fialide larga, cilfndrica, subulada (estrechandose hacia el apice)
o lageniforme (base ligeramente hinchada), con paredes engrosadas hacia la base........P haeoacrem onium
13 Conidos de un solo tip o ......................................................................................................................................................................... 14
Conidios de dos tipos (macro y microconidos). Macroconidios largos, septados transversalmente
y ligeramente curvados; microconidios unicelulares o con pocos s e p to s ................................................................. Fusarium
14 Conidios en ca d e n a ................................................................................................................................................................................ 15
Conidos en masas m u c o s a s ...............................................................................................................................................................18
15 Conidioforos no ramificados, terminados en una ve sicu la ......................................................................................... A s p e rg illu s
Conidioforos ramificados, si no lo estan generalmente consisten en una celula conidiogena +/- c ilin d ric a ...................16
16 Conidioforos ramificados, en forma de pincel. Colonias de color beige, lilaceas o blanquecinas.
Cadenas de conidios bastante persistentes..................................................................................................................................... 17
Conidioforos poco o nada ramificados. Colonias de blanquecinas a violaceas. Cadenas conidiales
desarticulandose con mucha facilidad................................................................................................................................ F usarium
17 Conidos esfericos o subesfericos, naciendo de anelides de cuello ancho y generalmente con
cicatrices anulares evidentes................................................................................................................... S co p u la rio psis
Conidos elipsoidales o cilmdricos, naciendo de fialides con cuello largo y estrecho,
y base generalmente h in c h a d a ...................................................................................................................................P aecilom yces
18 Conidos naciendo de fialides largas, cilfndricas o subuladas, que emergen perpendiculares
de las hifas del micelio. Conidios pequenos (< 6 pm long.) .......................................................................................................19
Conidos naciendo de anelides y de mayor tamano (> 6 pm long.)................................................. S cedosporium
19 Colonias siempre de colores palidos (rosadas, amarillentas, blanquecinas, etc.)............................................. A crem onium
(ver tambien Fusarium)
Colonias que oscurecen al e n v e je c e r........................................................................................................... P haeoacrem onium
Asociacion Espahola de M icologia

Referencias
Identificacion de otros hongos miceliares
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©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

Absidia coerulea 13-2
Absidia corymbifera 13-2
Acremonium kiliense 13-5
Acremonium strictum 13-5
Acropeta, cadena 13-5
Affirm VPIII® 14-20
Agar agua
Agar con leche, glucosa y purpura
3-7
de bromocresol 3-12
Agar Czapek Dox 3-7
Agar Staib 3-15
Agar Dixon modificado 3-8
Agar extracto de malta 3-8
Agar glucosado de patata 3-9, 12-9
Agar glucosado de Sabouraud
Agar glucosado de Sabouraud modificado
3-9
por Emmons 3-10
Agar harina de avena 3-10
Agar harina de mafz 3-11, 11-4
Agar infusion de cerebro corazon 3-11
Agar inhibidor para mohos 3-12
Agar Leeming & Notman
Agar Sabouraud con cicloheximida
3-13
y cloranfenicol 3-14
Agar Leonian modificado 3-13
Agar SDA-MUAG® 11-7
Agar patata zanahoria 3-14
Agar semillas de alpiste 3-15
Agar Trichophyton® 3-15
Agar urea de Christensen 3-16
Agentes biologicos 17-1
Agua, agar 3-7
Albicans ID2® 11-7
Alpiste, agar semillas de 3-15
Alternaria alternata 13-6
Alternaria infectoria 13-6
Anelide 13-4
Anticuerpos antimicelio 14-14
Antifungicos 15-1
API 20 C AUX® 11-12
API ID 32C® 18-7
Apofisis 13-1
Argentica, tincion 5-8, 14-5
Arroz, medio de 3-17, 12-9
Artritis fungica 6-6
Artroconidias 11-4
Ascoma 13-15
Aspergillus flavus 8-3,13-6
Aspergillusfumigatus 2-13, 8-3, 13-7
Aspergillus niger 8-3,13-8
Aspergillus terreus 13-8
Aspergiloma pulmonar 14-13, 14-17
Aspergilosis broncopulmonar alergica 14-13, 14-17
Aspergilosis invasora 14-11
Aspergilosis pulmonar 5-4, 5-6, 5-7
Aspergilosis sistemica 2-13
Aspirado traqueal 5-3
Aspirado traqueal, cuitivo de 5-10
Aspirados oculares 10-2
ATB Fungus® 16-4
ATCC 18-3, 18-4, 18-6, 18-7, 18-10
Auxacolor® 11-11
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6 ■Indice alfabetico de materias
Asociacion Espanola de M icologia
Auxonograma 11-10
Avena, agar harina de 3-10
Azul Alamar 16-1
BacT/Alert® 6-1
BACTEC 9240® 6-1
BactiCard Candida® 11-8, 18-7
Balanitis 2-7, 7-1, 7-2, 7-5
Basfpeta, cadena 13-5
(1 -^3)-B-D-glucano 14-18
Bichro-latex albicans® 11-16
Biolog YT MicroPlate® 11-14
Biologia molecular 14-18
Biopsia 6-7
Biopsia esofagica 9-1
Biopsia gastrica 9-3
Biopsia pleural 5-5
Biopsia pulmonar 5-5
Biopsia pulmonar, cuitivo de 5-10
Biopsia transbronquial 5-4
Bioseguridad ambiental 19-1
Bioseguridad laboral 17-1
Blanco de calcofluor 14-3
Blastoconidias 11-4
Blastomicosis 2-10
Blastomicosis pulmonar 5-7
Blastomyces dermatitidis 2-10, 5-7
Blastoschizomyces 11-4
Blefaritis 10-1
Bolsa colectora 7-3
Broncoaspirado, cuitivo de 5-10
Brum-Buisson, tecnica de 10-5
Cabinas de seguridad biologica 17-5
Calcofluor, bianco de 14-3
Candida albicans Screen® 11-9
Candida albicans 8-1, 10-1, 10-5, 11-3, 11-4,
11-5, 11-7, 11-8, 11-16, 14-14
Candida dubliniensis 8-1, 11-5, 11-14
Candida glabrata 11-5
Candida ID® 11-7
Candida krusei 11-5, 11-16
Candida krusei ATCC 6258 15-7, 18-8
Candida parapsilosis ATCC 22019 15-7, 18-8
Candida tropicalis 11-5, 11-7
Candidiasis cutanea 2-3
Candidiasis del panal 2-3
Candidiasis eritematosa aguda 8-1
Candidiasis gastrointestinal 2-6
Candidiasis hiperplasica 8-1
Candidiasis mucocutanea cronica 2-7
Candidiasis sistemica 2-13
Candidiasis vaginal 7-5
Candiduria 7-3, 7-5, 7-6, 7-7, 7-8
CandiSelect® 11-7
Cateter de Tenckhoff 10-6
Cateter intravascular 10-5
Cateter peritoneal 10-7
Cateterismo vesical 7-3
Cavidad oral 8-1
CECT 18-10

Cepas de referencia 15-12, 18-10 Difusion en agar 16-4
Cepillado bronquial 5-3 Difusion en discos 16-8
Cepillado esofagico 9-1 Dilution en agar 16-7, 16-8
Cepillado protegido 5-4 Dimetil sulfoxido (DMSO) 4-5
Cerebro corazon, agar infusion de 3-11 Dixon (modificado), agar 2-1, 3-8
CHROMagar Candida® 3-16, 11-5, 16-7
Cistitis 7-1
Cladophialophora bantiana 13-9 Ectotrix, infection tipo 12-8
Cladophialophora carrionii 13-9 Emmons, agar glucosado de Sabouraud
Cladosporium cladosporioides 13-10 modificado por 3-10
Cladosporium herbarum 13-9 Endoftalmitis 10-1
Cladosporium sphaerospermum 13-10 Endotrix, infection tipo 12-8
Clamidosporas 11-4, 12-3, 13-5 Epidermophyton 12-1
CMI (ver Concentracion minima inhibitoria) Epidermophyton floccosum 12-1, 12-5
Coccidioides immitis 2-11,5-7 Eritrasma 4-6
Coccidioidomicosis 2-11 Escamas, recogida de 4-2
Colorante de Cohen 4-5 Esclerocio 13-5
Colorante de Kane 4-5 Esofagitis 2-6
Columela 13-1 Esofagitis candidiasica 9-1
Collarete 13-4 Esporangio 13-1
Comision de Infecciones 19-6 Esporangioforo 13-1
Comision de Obras 19-6 Esporangiospora 13-1
Concentracion minima inhibitoria 15-1, 15-6, 15-7, Esporodoquio 13-4
15-9, 15-11, 15-12, Esporotricosis 2-7
16-2, 16-5, 16-8, 18-8 Esputo 5-3
Conductos lacrimales 10-2 Esputo inducido 5-3
Conidio 13-4 Esputo, cultivo de 5-10
Conidioforo 13-4 ESP® 6-1
Conidiogena, celula 13-4 Estolon 13-1
Conjuntivitis 10-1 Estomatitis 8-2
Contention, niveles de 17-2 Etest® 16-5, 16-8
Contrainmunoelectroforesis 14-17 Examen en fresco 5-6
Control de calidad 18-1 Examen microscopico 3-3, 14-1
Control de calidad, cepas de 15-7, 18-10 Exophiala dermatitidis 13-10
Control de calidad extemo 18-9 Exophiala lecani-corni 13-10
Controles microbiologicos 19-3 Extracto de malta, agar 3-8
Controles microbiologicos ambientales 19-7 Exudado anal 7-2
Coomassie, tincion de 14-16 Exudado balanoprepucial 7-2
Criptococosis 2-11, 8-3 Exudado conjuntival 10-2, 10-3
Criptococosis pulmonar 5-8, 5-9 Exudado uretral 7-2
Cromogen Albicans® 11-7 Exudado vaginal 7-2
Cromomicosis 2-8 Exudado vulvar 7-2
Crypto-LA Test® 14-8
Cryptococcus neoformans 2-11, 11-9, 14-8
Cuerpos extranos 10-2 Favus 12-2, 12-8
Curvularia geniculata 13-10 Fenol-oxidasa 11-10
Curvularia lunata 13-10 Feohifomicosis cutanea 2-8
Czapek Dox, agar 3-7 Fialide 13-4
Filamentacion precoz 11-1
Filtros HEPA 17-5, 17-6, 19-2,
D-arabinitol 14-18 19-3, 19-5, 19-8
Dacriocistitis 10-1, 10-3 Fluoroplate Candida® 11-7
Dentfculos 13-11 Foliculitis 2-1,2-3
Dermatitis seborreica 2-1 Fongiscreen 4H® 11-15
Dermatofitos 12-1 Fonsecaea compacta 13-11
Dermatofitos, conservation 12-10 Fonsecaea pedrosoi 13-11
Dermatofitosis 2-2 Fungemia 2-1
Dermatophyte test medium® 3-17 Fungitec G® 14-19
Desinfectantes 17-8 Fungitest® 16-3
Detection de anticuerpos 14-12 Fusarium oxysporum 13-11
Detection de antfgeno 14-8, 14-10 Fusarium solani 13-12
Dialisis peritoneal continua ambulatoria 10-6 Fusarium verticillioides 13-13
©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6

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Indice alfabetico
Galactomanano 14-11 Lfquido pleural 5-5, 6-6
Galena ID 32C® 11-12 Lfquido sinovial 6-6
Geotrichum 11-3 Lisis-centrifugacion 6-2, 6-3, 6-7
Gestion de residuos 17-9
Giemsa, tincion de 5-8, 14-5
Glositis 8-2 M27-A 15-1, 15-8
Gomori-Grocott, tincion de 5-8 M38-P 15-10, 15-12
Gomori-Grocott modificada, tincion de 14-5 Macroconidios 12-3, 13-11
Graphium 13-15 Macrodilucion, hongos filamentosos 15-12
Gram, tincion de 5-8, 14-4 Macrodilucion, levaduras 15-8
Maki, tecnica de 10-5, 10-6
Malassezia 2-1, 11-18
Harina de avena, agar 3-10 Malassezia furfur 2-1, 11-18
Harina de mai'z, agar 3-11, 11-4 Malassezia globosa 2-1, 11-18
Heces, cultivo 9-3 Malassezia obtusa 2-1, 11-18
Hemocultivo 6-1 Malassezia pachydennatis 11-18
HEPA (ver Filtros) Malassezia restricta 2-1, 11-18
Hidroxido potasico 14-2 Malassezia slooffiae 2-1, 11-18
Hifas 11-3 Malassezia sympodialis 2-1, 11-18
Hipopion 10-2 Malassezia spp., fungemia por 6-5
Histoplasma capsulatum 2-9, 6-7 Malta, agar extracto de 3-8
Histoplasmosis 2-9, 8-2 Manano 14-10
Histoplasmosis pulmonar 5-6, 5-10 Material biologico, almacenamiento de 17-11
Material biologico, transporte de 17-11
Medios cromogenicos 11-5
Identificacion de levaduras 11-1 Medios de cultivo 3-4
Incubation 3-6 Medula osea 6-7
Informe de los resultados 3-18 Meningitis 6-5
Infusion de cerebro corazon, agar 3-11 Metula 13-6
Inhibidor para mohos, agar 3-12 M iction espontanea 7-2
Inmunoelectroforesis 14-17 Micetoma 2-9
Inmunofluorescencia indirecta 14-6 Micosis orales 8-1
Intertrigo 2-3 Micosis sistemicas 2-12
Isolator® 6-2 Micosis subcutaneas 2-7
Micosis superficiales 2-1, 4-1
Microconidios 12-3, 13-11
Jugo duodenal 9-2 Microdilucion, hongos filamentosos 15-10
Jugo gastrico 9-2 Microdilucion, levaduras 15-1
Microsporum 12-1
Microsporum canis 12-1, 12-5
KOH (ver Hidroxido potasico) Microsporum gypseum 12-1, 12-5
Krusei-color® 11-16 Microsporum audouinii 12-5
Monofluo Kit P. carinii® 14-7
MOPS 15-1
Lactofenol de Amman 4-5 Moqueta de Mariat 4-2
Lageniforme, fialide 13-13 Mucormicosis 2-14, 8-3
Lavado broncoalveolar 5-4 Mucormicosis pulmonar 5-6
Lavado broncoalveolar, cultivo de 5-10 Muestras respiratorias 5-3
Lavado bronquial o broncoaspirado 5-3 Muguet 2-5, 8-1
Lavado nasofaringeo 5-3 Murex C. Albicans® 11-9
Leche diluida 11-5 MYCO/F LYTIC® 6-2
Leche, glucosa y purpura de bromocresol, Mycosis-IC/F® 6-2
agar con 3-12
Leeming & Notman, agar 2-1,3-13
Lengua pilosa negra 2-6 Neumocistosis pulmonar 5-6, 5-8
Lentes de contacto 10-2 Nitrato-reductasa 11-9
Leonian modificado, agar de 3-13 Normas de seguridad 17-1, 17-12
Levaduras lipofilas, identificacion 11-18
Limpieza, procedimientos de 19-3
Lfquido cefalorraqufdeo 6-5 Obras en el hospital 19-5
Lfquido de dialisis 10-7 Observacion directa 14-2
Lfquido pericardico 6-6 Onicomicosis 4-4
Lfquido peritoneal 6-6 Onicomicosis candidiasica 2-3
Asociacion Espanola de M icologia

Onicomicosis negra
Orina
Otomicosis
Indice alfabetico
2-4
7-2
8-1, 8-3
Paecilomyces lilacinus 13-13
Paecilomyces marquandii 13-13
Paecilomyces variotii 13-13
Paracoccidioides brasiliensis 2-11,5-7
Paracoccidioidomicosis 2-11, 8-2
Patata, agar glucosado de 3-9, 12-9
Patata zanahoria, agar de 3-14
Phaeoacremonium parasiticum 13-14
Phialophora verrucosa 13-14
PCR 14-19
Pelo, perforation del 12-9
Pelos, recogida de 4-3
Pelos, vision directa 4-6
Perionixis 2-3
Peritonitis 10-6
Peritonitis fungica 6-6
Phaeoacremonium rubrigenum 13-14
Phaeoannellomyces werneckii 2-2
Phialophora americana 13-14
Phialophora parasitica 13-14
Pie de atleta 12-2
Piedra blanca 2-2
Piedra negra 2-2
Piedraia hortae 2-2
Pielonefritis 7-1
Pitiriasis versicolor 2-1
Platelia Aspergillus 14-11
Platelia Candida Ab/Ac/Ak 14-13
Platelia Candida Ag 14-10
Pleomorfismo 12-11
Pneumocystis carinii 14-7
Polifialide 13-5
Procesamiento de las muestras 3-2
Protesis 10-8
Protesis articular 10-8
Protesis valvular 10-8
Prototheca 11-5
Pseudallescheria boydii 13-15
Puncion pulmonar 5-5
Puncion vesical 7-3
Puncion-aspiracion transtraqueal 5-4
Puntos de corte 15-7
Queilitis angular 2-6, 8-1
Queratitis 10-1
Ramoconidos 13-9
Rapid Yeast Identification® 11-14, 18-7
RapID Yeast Plus System® 11-14, 18-7
Raspado corneal 10-2, 10-3
Recogida de muestras 3-1
Residuos infecciosos 17-9
Residuos quimicos 17-10
Rhizopus arrhizus 8-3
Rhizopus oryzae 13-3
Rhizopus rhizopodiformis 13-3
Riesgos biologicos 17-12
Riesgos no biologicos 17-12
Rinosinusitis fungica 8-1
Rizoide 13-1
RPMI 1640 15-1
Sabouraud, agar glucosado de 3-9
Sabouraud con cicloheximida y
cloranfenicol, agar 3-14
Sabouraud modificado por Emmons,
agar glucosado de 3-10
Saksenaea vasiformis 13-3
Scedosporium apiospermum 13-15
Scedosporium prolificans 13-15
Scopulariopsis brevicaulis 13-16
Scopulariopsis brumptii 13-16
Scytalidium 2-3
SDA-MUAG®, agar 11-7
Seguridad, normas de 17-1, 17-12
Seguridad biologica 17-1, 17-3
Seguridad biologica, cabinas de 17-5
Sensibilidad antifungica 15-1
Sensititre YeastOne® 16-1, 16-8
Sindrome de Gougerot-Carteaud 2-1
Sinema 13-4
Sinusitis 8-3
Sistemas de ventilation 19-1
Sonda de ADN 14-20
Sonda vesical 7-3
Sporothrix schenckii 2-7
Staib, agar de 3-15
Subulada, fialide 13-5
Tecnica de Ouchterlony 14-16
Tejidos 6-7
Thennoascus crustaceus 13-14
Tincion argentica 5-8, 14-5
Tincion de Coomassie 14-16
Tincion de Giemsa 5-8, 14-5
Tincion de Gram 5-8, 14-4
Tinea barbae 2-3, 12-2
Tinea capitis 2-3, 12-2
Tinea corporis 2-3, 12-2
Tinea cruris 2-3, 12-2
Tinea facei 12-2
Tinea favosa (favus) 12-2
Tinea imbricata 12-2
Tinea manuum 2-3, 12-2
Tinea pedis 2-3, 12-2
Tinea unguium 2-3, 12-2
Tinta china 5-8, 14-2
Tina negra 2-2
TOC, medio de 11-3, 11-5
Tracto urinario, infection del 7-1, 7-2, 7-5
Transporte de las muestras 3-1
Trichophyton 12-1
Trichophyton agar® 3-15, 12-10
Trichophyton mentagrophytes 12-1, 12-5
Trichophyton rub rum 12-1, 12-5
Trichophyton schoenleinii 12-5
Trichophyton tonsurans 12-1, 12-5
©2004 Revista Iberoamericana de Micoiogia - ISBN: 84-607-3050-6

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©2004 Revista Iberoamericana de Micologia - ISBN: 84-607-3050-6
Trichophyton verrucosum
Trichophyton violaceum
Trichosporon
Trichosporon beigelii
Tubo germinal
Indice alfabetico
12-5
12-5
11-4, 11-9
2-2
11-1
Uni-Yeast-Tek® 11-11
Unas, recogida de 4-4
Unas, vision directa 4-7
Urea de Christensen, agar 3-16
Ureasa, prueba de la 11-9, 12-8
Uretritis 7-2, 7-5, 7-7
Verticilos
Vital®
Vitek®
Vitek 2®
Vulvovaginitis
Asociacion Espanola de M icologia
13-13
6-1
11-13, 18-7
11-14
2-6, 7-1, 7-2, 7-7
Wood, lampara/luz de 4-1,12-8
Zanahoria, agar de patata 3-14
Zigomicosis 2-14
Zigospora 13-1