Sothink Glanda - Instituto Nacional de Pediatría

Banco de Sangre Código: CAL-01 

Instituto Nacional de Pediatría Nivel de Revisión: 03 

Fecha: 16 ENERO de 2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 

Página 1 de 5 

CAL-02-B 

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS 

Procedimiento de identificación de los 

Procesos necesarios para el sistema de gestión de la calidad 

Elaborado por: 

Nombre: 

Guillermo Escamilla 

Guerrero 

Firma: 

Fecha: 

16 enero 2012 

Revisado por: 

Nombre: 

M. Leticia Medina Macias 

Firma: 

Fecha: 

16 enero 2012 

Aprobado por: 

Nombre: 

Dinora V. Aguilar 

Escobar 

Firma: 

Fecha: 

16 enero 2012



Fecha: 26 de Agosto 2003 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de Grupos sanguíneos 

y Anticuerpos 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




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CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 



y Anticuerpos 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

26/08/03




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DESCRIPCION DEL PROCESO 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Una vez que al donador se le toma la muestra (Ver procedimiento CAL-43) se 

procede a caracterizarlo inmunohematológicamente abarcando los siguientes 

estudios: 

1. Grupo sanguíneo (Sistema ABO) 

2. Subgrupo sanguíneo (Sistema A) 

3. Grupo sanguíneo (Sistema Rho) 

4. Determinación del Du 

5. Fenotipo Rho (EeCc) 

6. Rastreo de Anticuerpos irregulares fuera de 

Sistema ABO (semipanel o panel completo) 

7. Hemolisinas 

8. Chequeo de grupo sanguíneo (Sistema ABO & 

Rho) 

son: 

Los métodos para realizar estos ensayos (a excepción de las Hemolisinas) 

Método semiautomático 

Tubo 

Gel 

Método automático 

Gel 

Las pruebas de aglutinación establecen: 

HEMOLISIS: Indica una reacción positiva para la 

unión Antígeno – anticuerpo. 

AGLUTINACION: la presencia del par Antígeno y/o 

Anticuerpo complementarios relevante. 

NO AGLUTINACIÓN la ausencia de cualquiera de 

ellos.




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CAL-02-B 



y Anticuerpos 

INTERPRETACION Y PONDERACIÓN DE LAS AGLUTINACIONES 

DESCRIPCION GRADO PONDERACION 

Hemolísis total Ht 

Botón completo, sobrenadante claro 4+ 12 

Botón grande con algunos agregados, fondo claro 3+ 10 

Botón fragmentado en varios grumos grandes, fondo 

turbio 

Botón fragmentados en numerosos grumos regulares, 

fondo turbio 

Botón fragmentado múltiples grumos pequeños, fondo 

muy turbio 

2+ 8 

1+ 5 

+/- 1 

Aglutinación no visible negativo 0 

1.- DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO 

La prueba consiste de dos etapas: 

Prueba directa o celular: eritrocitos estudiados 

desafiados contra antisueros comerciales de 

especificidad conocida 

Prueba inversa o sérica: suero estudiado desafiado 

contra eritrocitos de fenotipo conocidos




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y Anticuerpos 

Se realiza la centrifugación del tubo de muestra (etiquetado con el nombre y # del donador) para separar el Paquete 

eritrocitario y el plasma o suero. Una vez que se tiene la separación del concentrado eritrocitario y el plasma, este último se 

transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador). 

Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml aproximadamente de 

solución que contiene solución salina y solución de pHix + dos gotas de concentrado eritrocitario del donador 

(concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-5%) 

TUBO 1 

Agregar una gota 

de reactivo Anti-A 

(suero de color 

azul) 

TUBO 2 

Agregar una gota de 

reactivo Anti-B 


amarillo) 

PRUEBA DIRECTA 

en tubo 

Se realiza la prueba directa y la prueba inversa 

Para la prueba directa se requiere lo siguiente: 

Se identifican 4 tubos 

TUBO 3 


reactivo Anti-AB 

(suero incoloro) 

Adicionar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador 

TUBO T 

Agregar 2 gotas del 

plasma o suero del 

donador 

Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga a 3500RPM 

Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos y se hace la lectura macroscópica para observar si existe o no 

aglutinación 

Registrar resultados en el formato F-A-14-26




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TUBO A1 


celulas A1+ 2gotas del 

plasma del donador 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

PRUEBA INVERSA 

en tubo 

Marcar 4 tubos con las letras A1, A2, B y O 

Células de fenotipo conocido preparadas a una concentración del 2-5% 

TUBO A2 


celulas A2 + 2gotas del 


TUBO B 


celulas B + 2gotas del 


Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. 

Se realiza un ligera agitación para desprender el botón de celulas 

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación 

Registrar resultados en el formato F-A-14-26 

TUBO O 


celulas O + 2gotas del 

plasma del donador




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y Anticuerpos 

Formato F-A-14-26 que es llenado por el personal de área de donadores:




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GRUPO SANGUINEO 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Tabla 1 

Prueba Directa 

ANTIGENOS PRESENTES EN LOS 

ERITROCITOS 

ANTICUERPOS PRESENTES EN 

SUERO O PLASMA 

A A Anti - B 

B B Anti - A 

AB A y B - - - - - 

O ni A ni B 

INTERPRETACION 

Anti – A & Anti - B 

Prueba DIRECTA Prueba INVERSA 

GRUPO 

Tubo con Antisuero Tubo con céluas: 

Anti-A Anti-B Anti-AB Testigo A1 A2 B O 

A POST NEGT POST NEGT NEGT NEGAT POST NEGAT 

B NEGT POST POST NEGT POST POST NEGT NEGT 

AB POST POST POST NEGT NEGT NEGT NEGT NEGT 

O NEGT NEGT NEGT NEGT POST POST POST NEGT




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De forma Manual: 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

GRUPO SANGUIENO SABO 

EN GEL 



transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador). Y se puede introducir al equipo WADiana o realizarlo 

de forma manual. 

Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 1.0 ml de solución de DianaSol 1 

con 25 l de concentrado eritrocitario del donador (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%) 

DIRECTA 

MICROTUBOS 

1, 2, 3, 4, 5, y 6 

colocar 25 l de solución de 

eritrocitos del donante 

Se realiza la prueba directa y la prueba inversa 

Empleo de tira del DianaGel Donors/Donantes 

ver imagen 

Centrifugar en DianaFuge 

(ver imagen) 

Leer 

La lectura puede ser visual o en el DianaScanner (equipo WADiana) 

(ver imagen) 

Interpretación 

(Acorde a la imagen presentada) 


o mandar impresión 

INVERSA 

MICROTUBOS 

7 y 8 

colocar 50 l de eritrocitos 

reactivos (Serigrup Diana A1 y B) 

con 50 l del suero o plasma del 

donador




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y Anticuerpos 

# donador: 

Fecha: 

Iniciales y clave de quien realizó: 

A1 B 

S.ABO S.Rho AT INVERSA




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y Anticuerpos 

2. SUBGRUPOS SANGUINEOS (SISTEMA ABO) 

TUBO A1 

Agregar 1 gota del reactivo Anti-A1 Lectina 

Para realizar la prueba de Lectina A1 y H se requiere lo siguiente: 

Marcar 1 tubo con la letra A1 (Anti-A1) y otro con la letra H (Anti- H) 

Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador 

abla # 2 Subgrupo SABO 

TUBO H 

Agregar 1 gota del reactivo Anti-H 

Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. 

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación y se interpretan los resultados 





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3.- DETERMINACION DEL FACTOR Rh 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 



transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador). 

Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml de solución salina con 

amortiguador de Phix con dos gotas de concentrado eritrocitario del donador 


TUBO D 

agregar una gota del 

antisuero comercial 

Anti - D 

Agregar una gota de suspensión al 2-5% de eritrocitos del donador 

Centrifugar 45 segundos/3500RPM 

TUBO C 

Agregar una gota del reactivo 

Control Rh ó 

ALB 22% 

Leer resuspendiendo con movimiento suave el botón. Interpretación acorde a la aglutinación presente 

NO AGLUTINACION 

Rh neg (D-) 

GRUPO SANGUIENO Rho 

en tubo 

Marcar un tubo con la letra Rh (anti D) y otro con la letra C (control) 


AGLUTINACION 

Rh post (D+)




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4. Determinación del Du 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

SI la prueba Anti-D es NEGATIVA 

Los tubos marcados con D y C (provenientes de la Prueba RH) se incuban 15-30 minutos a 37 C 

Centrifugar e Interpretar 

Rh - (D-) 

Negativa 

Se lavan las celulas 3 veces con salina fisiologica. 

Se decanta la salina por completo en la última lavada 

Agregar una gota de suero de Coombs poliespecífico (anti IgG-C3d) 

Centrifugar e interpretar 

Negativa 

Positiva 


Positiva 

El resultado 

se considera 

Rh- y Du+ 

( para fines de 

transfusión se 

considera : 

donadores Rh+ 

receptores Rh- 

La determinación del grupo ABO en la tarjeta de Gel conlleva la 

determinación del anti D y el Du 

Los resultados de Rh negativo en gel se confirman con el Anti D Totem 

(anticuerpo policlonal dirigido contra las 6 fracciones del Antígeno D: I – VI) 

El resultado 


Rh+ ( D+)




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5. FENOTIPO Rho (EeCc) : 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Marcar la tarjeta con el número del donador que le corresponde 

Hacer un suspensión de los eritrocitos 2-3% (1ml de Diana-1 + 25 l de muestra) 

Añadir 25 microlitros de la suspensión de eritrocitos 2-3% en los microtubos que indican C, c, E, e 

(Ver imagen) 

Centrifugar en DianaFuge y leer manual (Tabla 3A, 3B, 3C) 

Registrar los resultados en el formato F-A-14-23 

Interpretación de fenotipo Rh 

Registro del donador 

Fecha: 

Iniciales y clave de quien 

realizó 


Fecha: 


realizó 

Fenotipo: CcE Fenotipo: CEe




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FORMATO F- A – 14 – 23 

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y Anticuerpos




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GENOTIPO 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Tabla 3B 

Fenotipo Rh 

REACCION SEROLOGICA ANTI 

FENOTIPOS 

D C c E e WIENER FISHER 

DCe/dce + + + - + R1r DCcee 

DCe/DCe + + - - + R1R1 DCCee 

DcE/dce + - + + + R2r DccEe 

DcE/DcE + - + + - R2R2 DccEE 

DCe/DcE + + + + + R1R2 DCcEe 

dce/dce - - + - + rr ddccee 

Dce/dce + - + - + R0r Dccee 

dCe/dce - + + - + r'r ddccee 

dCe/dCe - + - - + r'r' ddccee 

dcE/dce - - + + + r" r ddccee 

dce/dcE - - + + - r" r " ddccEE 

dCe/dcE - ++ + + + r' r" ddCcEe 

DCe/DCE + + - + + R1RZ DCCEe 

DcE/DCE + + + + - R2RZ DCcEE 

DCE/DCE + + - + - RZRZ DCCEE 

dCE/dCe - + - + + r y y' ddCCEe 

dCE/dcE - + + + - r y r" ddCcEE 

dCE/dCE - + - + - r y r y ddCCEE




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y Anticuerpos 

Tabla 3C 

Fenotipo Rh 

ANTI- FENOTIPO GENOTIPO PROBABLE 

D C E c e WIENER FISHER- RACE WIENER FISHER- RACE 

+ + - + + Rh1rh DCe R1r DC/dce 

+ + - - + Rh1Rh1 DCe R1R1 DC/dce 

- - - + + rhrh ce rr Dce/dce 

+ + + + + Rh1Rh2 DCcEe R1R2 DC/DcE 

+ - + + + Rh2rh DcEe R2r DcE/dce 

+ - + + - Rh2Rh2 DcE R2R2 Dce/DcE 

+ - - + + Rh rh Dce Ror Dce/dce 

- + - + + rh´rh Cce r´r dC/dce 

- - + + + rh´rh cEe r"r dce/dce




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y Anticuerpos 

6.- DETERMINACION DE ANTICUERPOS IRREGULARES FUERA DEL 

SISTEMA ABO (SEMIPANEL O PANEL COMPLETO) 

A todas las mujeres, personas politransfundidas y personas Rh negativos se les 

realiza la siguiente prueba:




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y Anticuerpos 

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES FUERA DE SISTEMA ABO, EMPLEANDO PANEL TRIO 

Se marcan los tubos con # del 1 al 3 con su respectivo duplicado y un tubo más con una T (testigo) y con su duplicado 

TUBO 1 

1 gota de Gamma Trio #1 + 2 

gotas de suero del donador 

TUBO 1’ 


gotas de suero del donador 

TUBO 2 


gota de suero del donador 

En cada tubo se coloca: 

TUBO 3 



Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos y se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. 

Las rpm estan establecidas en la centriifuga. 

Se realiza la lectura macroscópica en salina rapida y reportar si existe aglutinación (Ver tabla 3A) 

Se realiza el panel 

completo con las 

diluciones de los 

eritrocitos del IMSS 

del Banco Central 

de Sangre del 

Centro Medico 

Nacional Siglo XXI 

TUBO 2’ 



Los tubos #1, 2, 3 y T se incuban 22 C durante 60 minutos 

Se realiza la lectura macroscópica en frio para observar 

aglutinación (Ver tabla 4) y se desechan las muestras 

POSITIVO 

NEGATIVO 

TUBO 3’ 




Registrar 

resultados como 

Salina a 22 C 

en el formato 

F-A-14-23 

Ademas de 

Registar 

resultados como 

Salina Coombs y/ 

o CAGH en el 

formato 

F-A-14-23 

TUBO T 

1 gota De suspensión de 

eritrocitos del donador + 2 


TUBO T’ 

1 gota De suspensión de 

eritrocitos del donador + 2 


Los tubos # 1’, 2’, 3’ y T” se incuban a 37 C durante 

30-60 minutos 

Centrifugar 30 seg. Antes de realizar la lectura macroscópica 

para observar aglutinación 

Registrar resultados como Salina a 37 C 

en el formato F-A-14-23 

Se lava con solución salina con pHix y se centrifuga durante 

1minuto se realiza este procedimiento 3 veces (al decantar 

tener cuidado con el botón) en el último lavado decantar la 

salina por completo 

Agregar 1 gota de Anti-IgG-C3d 

Mezcle ligeramente, centrifuge y leer 

POSITIVO 

NEGATIVO 

Se realiza la Prueba confirmatoria o CAGH (adición de células 

sensibilizadas con anti D)




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Y la siguiente reacción en tarjeta: 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta en técnica liss-gel se requiere lo siguiente: 

Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 3 y un T( testigo) Las células se preparan empleando 10 l de eritrocitos con 1 

ml de solución Diana 2 

MICROTUBO 1 

Anadir 50 l de 

Gamma Trio 1 

MICROTUBO 2 


Gamma Trio 2 

MICROTUBO 1, 2, 3 y T 

Anadir 25 l de plasma del donador 

MICROTUBO 3 


Gamma Trio 3 

Incubar en Diana incubador durante 15min a 37 C 

Centrifugar en Diana fuge y leer (Tabla 4) 


Si es positivo se debe realizar el panel completo (10 -11 células del panel siglo XXI o comercial) 

MICROTUBO T 


eritrocitos del donador




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CEL 1 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta con técnica LISS-gel se requiere lo siguiente: 

Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 10 u 11 y un T( autotestigo) 

10 l EN CADA UNO DE LOS MICROTUBOS DE CADA UNA DE LAS CELULAS Y DEL TESTIGO 

Realizar una suspensión con 10 l de eritrocitos con 1 ml de DIANA 2 y adicionar a todos los microtubos 50microlitros 

CEL CEL 

CEL 2 CEL 3 CEL 4 CEL 5 CEL 6 CEL 7 CEL 8 CEL 9 

AT 

10 11 

MICROTUBO 1 al AutoTestigo 

Anadir 25 l de suero del donador 




La interpretación se realiza contra la CARTA PANEL 

Tabla 4 

Detección de Anticuerpos con reactivo Gamma TRIO 1, 2 y 3 

Escanear imagen de carta panel del: 

CARTA PANEL DEL TRIO 

CARTA PANEL DE SIGLO XXI 

CARTA PANEL DE PANEL DIANA




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y Anticuerpos 

7. HEMOLISINAS 

A las personas con grupo O se les realiza la siguiente prueba: 

Para realizar la prueba de Hemolisinas se requieren los tubos con células A1, A2, B y O de la prueba inversa y de el tubo 

AutoTestigo de la prueba directa 

Todos los tubos se incuban a 37 C/1hora y se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas 

en la centriifuga. 

Se realiza la lectura macroscópica para observar si existe o no hemolisis 

La Prueba es negativa cuando el líquido sobrenadante es de color claro y positiva cuando es de color rojizo 





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y Anticuerpos 

8.- Chequeo de Grupo sanguíneo (Sistema ABO & Rho) 

Se realiza la centrifugación del tubo PILOTO que se toma directamente de la bolsa de concentrado eritrocitario (etiquetado 

con el nombre y # del donador) para separar el Paquete eritrocitario y el plasma o suero. Una vez que se tiene la separación 

del concentrado eritrocitario y el plasma, este último se transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador). 


con 25 l de concentrado eritrocitario del donador (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%) 

DIRECTA 

MICROTUBTOS 

A, B, D, Ctrl 


eritrocitos del donante 

CONFIRMACION DEL GRUPO 

SANGUIENO SABO EN GEL 

Se realiza una prueba directa 

Empleo de tira del DianaGel Confirm 

(ver imagen) 


(ver imagen) 

Leer 

La lectura puede ser visual 

(ver imagen) 



Registrar resultados en la libreta de RECHEQUEO DE GRUPOS CAL-25-A 

y pegar la impresión 

MICROTUBOS 

Ctrl 

colocar 50 l 


donador




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# REGISTRO 

CAL-02-B 

FECHA DE 

REALIZACION 



y Anticuerpos 


Fecha: 


realizó 

Libreta RECHEQUEO DE GRUPOS CAL-25-A 

IMAGEN 

A B D Ctrl 

GRUPO 

DETECTADO 


Fecha: 


realizó 

GPO REPORTADO DISCREPANCIAS REPORTA




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CAL-02-B 



y Anticuerpos 

El formato F-A-14-26 se muestra a continuación:




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CAL-02-B 



y Anticuerpos 

El formato F-A-14-26 se llena de la siguiente manera: 

Anti-A: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 

que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique la tabla 3A). 

Anti-B: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


Anti-AB: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


Auto (Testigo): Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


GR A1: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


GR A2: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


GR B: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


GR O: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 


Lec. A1: Esta prueba se realiza solo en personas de grupo 

sanguíneo A. Se anota + si es positivo o – si es negativo y 

el número que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique 

la tabla 3A). 

Ant. H: Esta prueba se realiza solo en personas de grupo 

sanguíneo A. Se anota + si es positivo o – si es negativo y 

el número que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique 

la tabla 3A). 

Rh Anti-D: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 

que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique la tabla 3A).




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CAL-02-B 



y Anticuerpos 

T Auto: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número 

que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique la tabla 3A) 

Resultados 

Grupo: Escribir la letra del grupo donador. 

El formato F-A-14-23 muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



y Anticuerpos 


Fecha: Día, mes y año en que se esta realizando el 

análisis de la muestra. 

Registro: Se escribe el análisis que se esta realizando 

en este caso es Anticuerpos irregulares. 

# del donador: # que le corresponde al donador según la 

bitácora de ingresos y egresos. 

22 C: Temperatura a la que se realizo la prueba. 

37 C: Temperatura a la que se realizo la prueba. 

1: # de microtubo que se esta analizando. 

. Se anota + si es positivo o – si es negativo y 

el número que le corresponde del 1 al 4 

(Según lo indique la tabla 3A) 





. 





T: Testigo de la prueba. 

Se anota + si es positivo o – si es negativo y 



Conclusiones: Escribir las observaciones de los 

resultados obtenidos.




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Soluciones requeridas 

CAL-02-B 



y Anticuerpos 

La solución salina y pHix se compone de 1lt de solución salina isotónica y 10 ml 

de la solución pHix. 

La suspensión de eritrocitos se prepara con 2.5 – 3.0 ml aproximadamente de 

solución salina isotónica y pHix más 2 gotas de eritrocitos del donador. 

La solución Diana-1 es una solución salina para suspensiones de hematíes para 

técnicas en gel, se utiliza para la determinación de grupos sanguíneos, pruebas 

cruzadas y autocontrol , se debe conservar a 18-25 C. 

La solución Diana-2 Es una solución de baja fuerza iónica para suspensión de 

hematíes que facilita la unión de anticuerpo a los hematíes por reducirse la 

densidad de la nube de cationes alrededor de los mismos, favoreciendo la 

sensibilización , se conserva a 2-8 C. 

REGISTROS 

El Formato F-A-14-26 se debe almacenar 1año. 

El Formato F-A-14-23 se debe almacenar 1año. 

LISTA DE DISTRIBUCION 

Laboratorista: ____________________________________ 

Suplente: ____________________________________



Fecha: 23 de Octubre de 2003 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de Técnicas de Serología 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


. 

CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 



REVISIÓN 

0 

FECHA 

26/08/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



En este procedimiento de Serología se pueden encontrar pruebas de Rutina, 

Confirmatorias, seguimiento y para pacientes dentro del protocolo de Transplante de 

medula ósea. 

Dentro de las pruebas que se realizan de rutina y/o tamizaje en el laboratorio se 

encuentran: 

PRUEBAS DE TAMIZAJE 

ENSAYO PARA DETECCION DE: PRUEBA DE RUTINA 

Anticuerpos contra Chagas ELISA 

Anticuerpos contra Chagas HAI 

Antígeno de Superficie de Hepatitis B ELISA 

Anticuerpos contra HCV ELISA 

Anticuerpos contra HIV 1+2 ELISA 

Anticuerpos contra Sífilis VDRL o RPR 

Anticuerpos contra Brucela Antígeno Rosa de bengala 

En caso de salir reactivo la prueba de tamizaje, se procede con la realización de 

la prueba confirmatoria o suplementaria: 

PRUEBAS CONFIRMATORIAS 

MARCADOR CONFIRMATORIA 

CHAGAS HAI 2 - MERCAPTO ETANOL 

HBV NEUTRALIZACIÓN 

HCV INMUNOBLOT RIBA HCV 

HIV WESTERN BLOT HIV-1 

HIV WESTERN BLOT HIV-2 

SIFILIS TP-PA ELISA 

SIFILIS TP-PA HAI 

BRUCELA ANTIGENO BLANCO




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DESTINO 

FINAL DEL 

PRODUCTO 

CAL-02-B 

Reactivo 

2 a corrida 

(tubo y piloto) 

Reactivo 

PRUEBA 

CONFIRMATORIA 

Reactivo 



PROPUESTA DE UN ALGORITMO DE 

TRABAJO EN BANCO DE SANGRE 

Solicitar 2a muestra 

Se corre ELISA 

(1er & 2a MUESTRA) 

1 er CORRIDA DE MUESTRAS 

PARA MARCADORES 

SEROLOGICOS 

Negativo 

Negativo 

NEGATIVO 

Negativo 

REPORTE A 

DONADOR 

INDETERMINADO 

POSITIVO 

LIBERACION 

Y 

ASIGNACION




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS (ELISA) 

La enfermedad de Chagas es una infección provocada por un parásito llamado 

Tripanosoma cruzi. El diagnostico para esta enfermedad depende de la fase en que se 

encuentra la cual puede ir de una fase aguda a una fase crónica. Para el diagnostico de 

la fase crónica se utiliza entre otros métodos el de ELISA y para la fase aguda el HAI 

que serán los métodos que se explicaran en este procedimiento. 

El método de Ensayo inmunoenzimàtico (ELISA) para la determinación de anticuerpos 

contra el Tripanosoma cruzi se fundamenta en que la muestra del donador o paciente se 

diluye en el soporte en el que se encuentra inmovilizado el antígeno, si contiene 

anticuerpos específicos contra Tripanososma cruzi, se formara un complejo que se 

mantiene unido al soporte. La fracción que no se une se desecha por medio de lavados. 

Se agrega anticuerpos anti inmunoglobulina humana conjugados con peroxidasa, si se 

produjo la reacción en la primera etapa del proceso, se unirá el conjugado. Se realiza un 

segundo lavado para eliminar en anticuerpo conjugado que no se une. Se agrega el 

sustrato. Si existe unión con el conjugado aparece un color celeste y se detendrá la 

reacción con ácido sulfúrico, con lo que el color celeste vira al amarillo. La concentración 

de anticuerpos específicos es directamente proporcional al color de la reacción. 

El reactivo que utilizaremos para realizar la prueba es el CHAGATEST ELISA: 

Incluye una policubeta sensibilizada que contiene tiras 

removibles con pocillos que contienen antígenos 

citoplasmáticos y de membrana de Tripanosoma cruzi 

inmovilizados. 

Diluyente de muestra 

Buffer de lavado de placa 

Controles positivo y negativo 

Anti inmunoglobulina humana conjugado 

Solución de revelado 

Solución de paro




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CAL-02-B 



La muestra para esta prueba puede ser plasma o suero y de preferencia no se debe de 

utilizarse muestras lipemicas, hemolizadas o cualquier otra causa en la que la muestra 

se observe turbia. 

Cuando el análisis no se realiza el día de la extracción de la muestra se puede conservar 

la muestra durante 7 días a 2-10°C o congelada a –20°C, cuando la muestra se requiera 

guardar y descongelar de nuevo. 

Este procedimiento se lee a una longitud de onda primaria de 450nm (filtro de lectura), 

una longitud de onda secundaria de 620-650nm (filtro de referencia). 

Una vez que se inicia el análisis no debe de existir interrupciones, es importante que la 

muestra y los reactivos al ser colocados en los diferentes pocillos sean colocados en el 

seno del pocillo y que al dispensar se enjuague la pipeta para asegurar la 

homogenización. Los reactivos utilizados en esta prueba están listos para usar y solo al 

Buffer de lavado (5X) se le realiza una dilución 1+ 4 (ejemplo para preparar 1l: 200ml de 

buffer de lavado + 800ml de agua destilada). Ver el inserto al final del procedimiento).




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DETECCION DE ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS ELISA 

Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s) si se requiere. 

Se prende la Incubadora Abbott Commander y se pone a 37 C para cuando se necesite introducir la muestra. 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, bco, controles (los pocillos no se puden 

marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis (mapa de muestras). 

Se centrifugada la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el 

análisis ( la muestra puede ser plasma o suero) 

A todos los pocillo previamente identificado en la bitacora CAL- 26-A se les adiciona una alicuota de 200microlitros de diluyente de muestra 

incluyendo al blanco 

A los pocillos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 10 microlitros del suero o plasma y se homogenizan 

con la misma punta con que se esta colocando. 

Al pocillo identificado como control internos positivo se le colocan 10 microlitros del tubo marcado como control interno positivo y al pocillo 

marcado como control interno negativo se le adicionan 10 microlitros del tubo marcado como control interno negativo. 

A los 2 pocillos identificados como control positivo se les colocan 10 microlitros a cada uno del reactivo marcado como control positivo y al los 

3 pocillos marcados como control negativo se le adicionan 10 microlitros a cada uno del reactivo marcado como control negativo. 

Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta s (para evitar 

evaporaciòn). 

Se incuba la policubeta a 37 C durante 30 min. en la incubadora Abbott Commander, una vez que suena la alarma se saca la policubeta y se 

realiza el lavado en el Equipo Sanofi Diagnostics Pasteur LP 35 

Una vez terminado el lavado se decanta el remanente del lavado inviertiendo la policubeta y golpeàndola varias veces sobre papel 

absorbente, posteriormente agregar a todos los pocillos 1 gota (60microlitros) de conjugado a todos incluyendo al blanco y mezclar aplicando 

con suaves golpes en los laterales de la policubeta. 

Se incuba la policubeta a 37 C durante 30 min. en la incubadora Abbott Commander, una vez que suena la alarma se saca la policubeta y se 

realiza el lavado en el Equipo Sanofi Diagnostics Pasteur LP 35 

Una vez terminado el lavado se decanta el remanente del lavado inviertiendo la policubeta y golpeàndola varias veces sobre papel 

absorbente, posteriormente agregar a todos los pocillos 1 gota (50microlitros) de revelador A y una gota de revelador B y mezclar aplicando 

con suaves golpes en los laterales de la policubeta durante 10 seg. 

La policubeta se deja a Temperatura Ambiente durante 15-20MIN. 

Se agrega 1 gota (50 microlitros) de soluciòn Stopper (para detener la reacciòn) a todos incluyendo al blanco mezclar aplicando con suaves 

golpes en los laterales de la policubeta durante 10 seg. 

Leer a 450nm o bicromàtica a 450/ 620-650nm (el color de la reacciòn es estable durante 30min) o con el programa del equipo LP-400. 

Se interpretan los resultados y se guarda el reporte impreso en el Folder de Serologia Chagas y el mes en que se esta realizando el anàlisis y 

tambien en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A. 

CAL-02-B




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VALIDACIÓN DE LA CORRIDA 

CAL-02-B 



Si la corrida realizada no cumple con una o ambas de las siguientes condiciones se 

repite la corrida: 

Una lectura de al menos 2 de los 3 controles negativos que corregidas contra el 

blanco de reactivos deben ser menores o iguales a 0,150 D.O. 

Una lectura media de los controles positivos que corregida debe ser mayor o igual 

a 0,600 D.O. 

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 

Con instrumental óptico: 

La presencia o ausencia de Ac. Anti-T. cruzi se determina relacionando la absorbancia 

de la muestra respecto al valor Cut-off 

Cut-off = CN + 0,200 D.O. 

Donde CN: promedio de las lecturas del control negativo 

Zona de indeterminación: Cut-off +- 10% 

Muestras no reactivas: se consideran aquellas con absorbancia menores que el 

límite inferior de la zona de indeterminación. 

Muestra reactiva: se consideran aquellas con absorbancia mayores que el límite 

superior de la zona de indeterminación. 

Muestras indeterminadas: se consideran aquellas con absorbancia que caen 

dentro de la zona de indeterminación. Estas muestras deben ser ensayadas 

nuevamente. 

Interpretación visual: Si se opta por esta interpretación debe considerarse: 

No reactiva: muestra que no presenta una coloración mayor que los controles 

negativos. 

Reactiva: muestra que presenta una coloración netamente amarilla. 

Cuando se presentan colores tenues mayores que el control negativo se requiere de 

interpretación instrumental.




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ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS (HAI) 

La hemaglutinación indirecta (HAI), también llamada hemaglutinación reversa pasiva, se 

basa en la propiedad que tienen los anticuerpos del Tripanosoma cruzi de producir 

aglutinación específica en presencia de glóbulos rojos sensibilizados con los 

correspondientes antígenos. 

En el suero existen anticuerpos inespecíficos (heterófilos) que son capaces de aglutinar 

glóbulos rojos de distintas especies. Su presencia se investiga enfrentando el suero con 

los GR no sensibilizados. Los anticuerpos interferentes se eliminan mediante 

tratamientos con 2-mercaptoetanol que se utiliza en la Prueba confirmatoria. 

Para la realización de esta prueba solo se puede utilizar solo suero y se requiere que las 

muestras no se encuentren de preferencia lipemicas o hemolizadas. Si la muestra se 

resguardara antes de su análisis se conservara a 2-10 C durante no más de 72 Hrs. 

contadas a partir de la extracción o a –20 C para periodos mas largos de conservación. 

Los reactivos a utilizar en esta prueba no todos están listos para usar y es muy 

importante que sean preparados con las cantidades que indica el inserto CHAGATEST 

HAI y el tiempo que se considera son estables. (Ver el inserto al final del 

procedimiento). 

Cuando se presenten resultados en todas las diluciones reactivas o todas con ausencia 

de reactividad, puede ser indicio de autoaglutinación por la presencia de Anticuerpos 

heterofilos del antígeno HAI o deterioro de los reactivos.




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CAL-02-B 



Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s). 

Se marca la placa con dividiones de 4 pocillos 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos que requiera la 

bitacora para la correcta identificación del análisis. 

Se marca la placa con el numero de toma de muestra que le corresponde 


análisis ( la muestra solo puede ser suero). A todos los pocillo se les adiciona una alicuota de 25microlitros de diluyente de suero (Buffer) 

El diluyente del suero se prepara: 200 microlitros de solución proteica por cada 10 ml del buffer 

A los pocillos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 25microlitros del suero y se homogenizan con la 

misma punta con que se esta colocando. 

Se realizaran diluciones seriadas a partir del primer pocillo (½, ¼, 1/8, ….. etc). 

Se toma una alicuota de 25microlitros del primer pocillo del paciente y se pasa al segundo pocillo, se homogeniza y se toma una alicuota del 

segundo pocillo de 25 microlitros y se pasa al tercer pocillo y lo mismo para el cuarto pocillo (en el cuarto pocillo se toma la alicuota de 

25microlitros y se tira para que contenga el mismo volumen que los demas pocillos. Las diluciones seran de ½ para el primer pocillo, ¼ para el 

segundo pocillo y asi sucesivamente. 

Al pocillo identificado como control positivo y control negativo se les realiza el mismo proceso de dilucion. 

Una vez reconstituido y agitado el reactivo que contiene los GR no sensibilizados (control de heterofilia) se le adiciona 25microlitros a los 

pocillo que contienen la dilucion ½ y ¼ de todas las muestras y controles 

Y a los pocillo que contienen las diluciones 1/8 y 1/16 muestras y controles se les adiciona 25microlitros de Antigeno HAI o GR sensibilizados 

Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta 

(para evitar evaporaciòn). 

Se deja en reposo durante 90min (en un lugar donde no exista vibracion) 

Leer a partir de los 90min. Se puede aumentar la nitidez de lectura haciendolo sobre un espejo, ilumunando la placa desde arriba e 

interponiendo un papel blanco y traslùcido entre la policubeta y la fuente de luz. 

Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A.




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CAL-02-B 




No reactivo: presencia de un sedimento en forma de un botón o pequeño anillo de 

bordes regulares. 

Reactivo: formación de una película o manto que cubre el 50% o más del fondo de los 

pocillos. Si no se usan microdilutores la imagen del manto puede ser más pequeña. 

Cuando se observan resultados positivos y además se presenta manto en los pocillos 

de control de heterofilia (diluciones ½ y ¼), debe realizarse otra titulación con los sueros 

correspondientes pero previamente tratados con 2-ME o adsorbidos con GR no 

sensibilizados (el tratamiento elimina la reacción inespecífica). 

ANTIGENO DE SUPERFICIE DE HEPATITIS B (ELISA) 

Ensayo inmunoabsorbente enzimático para la detección del antígeno de superficie de la 

hepatitis B en suero o plasma humano. 

La prueba de anticuerpos frente al HBs Ag ELISA es un ensayo inmunoabsorbente 

enzimático de tercera generación para la detección del antígeno de superficie de la 

hepatitis B (HBs Ag). Es una prueba de preselección de muestras y herramienta 

diagnóstica ante una posible infección por hepatitis B. 

Se utilizan pocillos recubiertos con anticuerpos frente al HBs Ag como fase sólida. El 

técnica ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se fijan a la fase sólida 

pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo complementario marcado con una 

enzima capaz de actuar como substrato cromegénico. Al aplicar el substrato, la 

presencia de un antígeno o anticuerpo puede detectarse por el desarrollo de un producto 

final coloreado, el ELISA es utilizado para enfermedades infecciosas. 

El procedimiento se divide en dos etapas y se lleva a cabo en un micropocillo recubierto 

con anticuerpos frente al HBs Ag. El control de omisión de muestra (COM) es una 

característica de la prueba basada en la medición del cambio de densidad óptica ( DO) a 

405nm que se produce en los pocillos al añadir la muestra. Cambio que se observa 

también visualmente, cuando el diluyente de conjugado pasa de color azul a verde 

azulado al añadir la muestra.




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Etapas de la prueba: 

CAL-02-B 



En la primera 

Se añade al pocillo de ensayo el conjugado de trabajo, constituido por anticuerpos 

conjugados con HPR y diluidos en diluyente de conjugado de color azul. La microplaca 

se incuba y si la muestra contiene HBs Ag, éste se fija al pocillo recubierto de 

anticuerpos, y simultáneamente al conjugado para formar complejos inmovilizados, 

constituidos por anticuerpos- HBs Ag-conjugado. Las proteínas séricas o plasmáticas se 

eliminan en el siguiente paso de lavado. 

En la segunda etapa 

Se añade al pocillo un sistema de detección de enzimas compuesto por OPD y peróxido 

de hidrógeno. Si el conjugado se ha fijado a la muestra, el OPD se oxida bivalentemente 

la peroxidasa para formar un compuesto intermedio que, a su vez, se reduce, donante 

de iones hidrógeno. La forma oxidada de OPD resultante es de color naranja. Por último 

se añade ácido sulfúrico para detener la reacción. La intensidad de color depende de la 

cantidad de conjugado fijado que haya en el pocillo. La intensidad de color ésta en 

función de la concentración de HBs Ag que contenga la muestra, se mide con un lector 

de microplaca a 490 0 492nm. 

Precauciones 

Los reactivos se puede almacenar entre 2-8° C. 

No mezclar reactivos de lotes diferentes. 

Dejar reactivos a temperatura ambiente 30 min. antes de su empleo. 

Utilizar guantes y lavarse las manos al terminar. 

La preparación de los reactivos se observa en el inserto de la prueba anexada al final del 

procedimiento. 

Es importante que si utiliza plasma este recolectado con anticoagulante adecuado 

(heparina no) y que contenga la cantidad que se requiere para la muestra. Se puede 

utilizar suero. El suero o plasma se puede almacenar a 2 y 8 C durante un máximo de 7 

días, en congelación a –18 C o menos y no descongelar y congelar consecutivamente.




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CAL-02-B 



CRITERIOS DE ACEPTACION DEL SUBSTRATO EN BLANCO 

Se considera que una placa es válida con respecto al substrato en blanco si el valor de 

la absorbancia del pocillo correspondiente al substrato en blanco (pocillo 1A) es igual o 

mayor que –0,001 e igual o menor que 0,050. 

CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CALIBRADOR NEGATIVO 

Se considera que una placa es válida si al menos dos de los tres calibradores negativos 

cumplen con los siguientes criterios. 

Si uno de los tres valores control está fuera de estos límites, deberá 

volver a calcularse la media de los controles negativos (NCalx) en base 

a los dos valores de absorbancia aceptables de los calibradores. 

Los valores que estén entre –0,006 y 0,012, ambos incluidos, son 

válidas y deben redondearse a 0,000 para efectuar el cálculo. 

Determine la media de los valores de absorbancia del calibrador 

negativo (NCalx). 

La placa no será válida y deberá repetirse la prueba si dos o más de los 

tres valores control está fuera de los límites. 

CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CONTROL POSITIVO 

Los controles positivos son utilizados para verificar que los componentes del kit de la 

prueba tienen capacidad para detectar una muestra reactiva, siempre que el 

procedimiento de la prueba se haya seguido estrictamente. 

Se considera que una placa es válida únicamente cuando los valores de absorbancia 

respectivos a 490nm ó 492nm son iguales o mayores que el valor de corte, y cumple 

además los siguientes criterios:




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CAL-02-B 



El valor de absorbancia del control positivo es igual o mayor que 0,225 e igual o 

menor de 2,500. 

El valor de absorbancia del control positivo no difieren entre sí más de 0,230. 

Si uno cualquiera de estos valores controles está fuera de estos límites, el ensayo 

no se considera válido y deberá repetirse. 

CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CONTROL NEGATIVO 

El calibrador negativo y el control positivo deben cumplir los criterios de aceptación de 

control de calidad para que la microplaca se pueda considerar válida. 

CALCULO DE LOS VALORES DE CORTE (cut-off) 

Valor de corte = NCalx + 0,030 

Ejemplo: 

Control negativo Absorbancia 

1 0,001 

2 0,000 

3 0,002 

Absorbancia total= 0,003 

NCalx = Absorbancia total/ 3 = 0,001 

Valor de corte= 0,001 + 0,030 = 0,031




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CAL-02-B 



Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la muestra(s) que se van a 

utilizar para esta prueba. 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan el blanco, muestras y controles (los circulos no se 

pueden marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis. 


análisis ( la muestra que se utiliza puede ser suero o plasma ) 

Blanco 

Colocar 3 pocillos 

con Controles 

negativos 

Se enciende la incubadora Abbott Commander a 37 C 

La forma de colocarlos es asi: 


con controles 

positivos 

Colocar las 

muestras 

Colocar el Control 

interno negativo 


interno positivo 

Adicionar 50microlitros de Conjugado de Hepatitis B a todos los pocillos menos al blanco (7ml de diluyente de conjugado + 20microlitros de 

concentrado de conjugado) 

Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia y homogenizar con la punta que se adiciona. 

Colocar 150microlitros de 

cada muestra 

Colocar 150microlitros en el 

pocillo del Control interno 

negativo 



positivo 

Colocar en los 3 pocillos de 

Controles negativos 

150microlitros del control 

Colocar en 2 pocillos de 

Controles positivos 


Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 90min. 

Realizar los respectivos lavados (solución de lavado con 950ml de agua destilada+ 50ml de solución de lavado 20X) con el LP 35 SANOFI 

Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 6 ciclos) La forma de operar del equipo se describe al final del procedimiento. Quitar exceso de lavado 

con golpes sobre un papel. Se prepara la Solución Buffer-sustrato-OPD 

(1 pastilla de OPD + 6ml de Buffer) 

Adicionar 200microlitros deSolución Buffer-sustrato-OPD a todos los pocillos (incluyendo al blanco). Tapar la placa con una cubierta de metal 

si se tiene o en oscuridad e incubar a temperatura ambiente durante 30min. Al termino de la incubación se adicionan a todos 50microlitros de 

acido sulfurico 4N (para parar la reacciòn) 

Se realiza la lectura y se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A. y se guarda el registro impreso 

en el folder del mes y con el nombre de la prueba.




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CAL-02-B 




Las muestras con valores de absorbancia menores que –0,014 deben volver a 

ensayar una vez. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición se 

obtenga el mismo valor. 

Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte e igual o 

mayor de –0,014 deberán considerarse no reactivas. No es necesario repetir la prueba. 

Las muestras cuyo valor de absorbancia sea igual o mayor que el valor de corte 

se consideran inicialmente reactivas y deben volver a ensayarse por duplicado antes de 

proceder a su interpretación definitiva. 

Al volver a ensayar una muestra inicialmente reactiva, ésta se considera 

repetidamente reactiva al HBs Ag si una cualquiera de las determinaciones por 

duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el valor de corte. 

Después de volver a ensayar una muestra inicialmente reactiva, ésta se considera 

reactiva y el resultado es confirmado por neutralización con anti- HBs Humano, se 

considera la muestra como positiva al HBs Ag. 


no reactiva al HBs Ag si ambas determinaciones duplicadas son no reactivas y menor 

que el valor de corte e igual o mayor de –0,014.




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ANTICUERPOS CONTRA HCV (ELISA) 

CAL-02-B 



Este es un Inmunoensayo enzimático cualitativo para la detección de Anticuerpos frente 

al Virus de la Hepatitis C (anti- HCV) en suero o plasma humanos. 

En el Inmunoensayo enzimático (ELISA) se utiliza como fase sólida pocillos con un 

revestimiento de una combinación de antígenos recombinantes configurados del virus de 

la hepatitis C. El principio de la ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se 

fijan a la fase sólida pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo 

complementario marcado con una enzima capaz de actuar como substrato cromogénico. 

Al aplicar el substrato enzimático, la presencia sobre el antígeno o anticuerpo puede 

detectarse por el desarrollo de u producto final coloreado. El ELISA es utilizado para 

enfermedades infecciosas. 

El virus de la Hepatitis C es el agente causal de la mayoría si no es de todas, las 

hepatitis transmitidas por sangre y que no son del tipo A ni del tipo B. 


En la primera 

Se incuba una muestra diluida en el pocillo de pruebas durante un periodo determinado 

de tiempo. Si en la muestra existe anticuerpo reactivo frente a cualquiera de los tres 

antígenos, se formarán complejos de antígeno-anticuerpo en la superficie del 

micropocillo. Si no existe anti-HCV, no formarán dichos complejos. La etapa de lavado 

elimina las proteínas del suero o plasma que no se hayan unido. 

En la segunda etapa 

Se añade al micropocillo un anticuerpo monoclonal de rata conjugado con peroxidasa de 

rábano. El conjugado se une específicamente a la porción de la IgG humana de los 

complejos antígeno-anticuerpo. Si estos complejos antígeno-anticuerpo no se hallan 

presentes, el conjugado que no se ha unido se eliminará en la fase de lavado que ha de 

realizarse a continuación. 

En la tercera etapa 

Se añade al pocillo un sistema de detección de enzima compuesto de o-fenilendiamina 

(cromogénico) y peróxido de hidrógeno (sustrato). Si existe conjugado unido, el OPD se 

oxidará y dará lugar a un producto final coloreado. En esta reacción, la peroxidasa se




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CAL-02-B 



oxida de forma divalente mediante el peróxido de hidrógeno y forma un compuesto 

intermedio que, a su vez, se reduce a su estado inicial mediante interacción subsiguiente 

con el OPD donador de ión hidrógeno. Entonces, se añade ácido sulfúrico para paralizar 

la reacción. 

La intensidad de color depende de la cantidad de conjugado unido, está en función de la 

concentración de anti-HCV presente en la muestra. La intensidad de color se mide con 

un lector de micropocillos diseñado para cuantificar la absorbancia de la luz en un 

micropocillo. 

La preparación de los reactivos para este procedimiento se encuentra en el inserto al 

final del procedimiento. 

Se puede utilizar suero o plasma para realizar la prueba, se puede utilizar suero, incluido 

el recogido en tubos separadores de suero, o plasma recogido en EDTA, ACD, CPDA, 

CP2D, CPD y citrato de sodio al 4% y heparina. 

La muestra se puede almacenar entre 2-8 C hasta 7 días y si se requiere un 

almacenamiento prolongado, la muestra se congela a menos 18 C. Los pocillo que no se 

van a utilizar se almacenan entre 2-8 C en la bolsa de aluminio que se suministra, con 

desecante, sellada firmemente y se debe utilizar dentro de los 42 días siguientes a la 

apertura de la bolsa de aluminio. 






Los valores individuales de control negativo deben ser iguales o menores que 

0,0120 y mayores o iguales que –0,005. Si uno de los tres valores control se encuentra 

fuera de alguno de estos límites, recalcule el valor medio del control negativo en base a 

los dos valores controles aceptables. La placa no será válida y deberá repetirse la 

prueba si dos o más de los tres valores control están fuera de los límites.




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Ejemplo: 

CAL-02-B 



Determinar la media de los valores control negativo. 


1 0,005 

2 0,015 

3 0,010 


NCx = Absorbancia total/ 3 = 0,010 





Se considera que una placa es válida, si ambos controles positivos, si el valor de 

ambos controles positivos es mayor o igual al valor de corte “cutoff” dentro de la lectura 

del lector de placas 

Nota: los valores por encima del límite superior del rango soportado del lector de 

microplacas puede aparecer como “ OVER” o “ *** “ .




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CAL-02-B 



Adicionar 200microlitros de Soluciòn buffer- sustrato-OPD (1 pastilla de OPD en 6ml de Buffer sustrato) a todos los pocillos (incluyendo al 

blanco). Tapar la placa con una cubierta de metal o /y oscuridad se incuba a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a todos 

50microlitros de acido sulfurico 4N (para parar la reacciòn) 

Se realiza la lectura, se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A y a guarda el registro dentro del 

folder del mes y prueba correspondiente 


Valor de corte = NCx + 0,330 

Ejemplo: 


1 0,005 

2 0,015 

3 0,010




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Valor de la línea de corte = 0,010 + 0,330 = 0,340 



ensayar en un pocillo único. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición 

se obtenga el mismo valor o inferior a –0,025. 

Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte se 

consideran no reactivas. No es necesario repetir la prueba. 



proceder a su interpretación definitiva. 


repetidamente reactiva para anticuerpos a HCV si una cualquiera de las determinaciones 

por duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el valor de corte. 


no reactiva para anticuerpos HCV, si ambas determinaciones por duplicado son no 

reactivos, es decir menores que el valor de corte. 

ANTICUERPOS CONTRA HIV 1 + 2 (ELISA) 

Este es un Inmunoensayo enzimático cualitativo para la detección de Anticuerpos frente 

al Virus de Inmunodeficiencia humana de Tipos 1 y/o 2 (HIV-1 y HIV-2) en suero o 

plasma humanos. 

En el Inmunoensayo enzimático (ELISA) se utiliza como fase sólida pocillos con un 

revestimiento de una combinación de antígenos recombinantes HIV-1 y HIV-2. El 

principio de la ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se fijan a la fase sólida




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pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo complementario marcado con una 

enzima capaz de actuar como substrato cromogénico. Al aplicar el substrato 

enzimático, la presencia de un antígeno o anticuerpo puede detectarse por el desarrollo 

de un producto final coloreado. El ELISA es utilizado para enfermedades infecciosas. 

El síndrome de Inmunodeficiencia adquirida (SIDA) como el complejo relacionado con el 

(CRS) están causados por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 y tipo 2. 

HIV-1 y HIV-2 son similares pero distintos. 

Morfología y linfotropismo similar 

Modos de transmisión parecen ser idénticos. 

Los genomas de los virus exhiben aproximadamente un 60% de homología en 

genes conservados tales como gag y pol y un 30-40% de homología en genes menos 

conservados. 

Este método puede ser utilizado tanto para el estudio de donadores de sangre como 

para fines de diagnóstico. El ensayo utiliza una combinación de dos proteínas de 

envoltura recombinantes de HIV-1 y una proteína core recombinante de HIV-2. 


En la primera Etapa del procedimiento se diluye en diluyente de la muestra (color 

verde). La dispersión de la muestra o el control provoca un cambio de color evidente que 

puede monitorearse visualmente o mediante lecturas fotométricas a 610nm. A 

continuación la muestra o control diluidos se incuban en el pocillo del equipo durante un 

periodo de tiempo establecido. Si la muestra contiene un anticuerpo reactivo a alguno de 

los 4 antígenos, se formaran complejos antígeno-anticuerpo en la superficie del pocillo. 

Si no hay anti HIV-1 y/o anti-HIV-2, nose formarán los complejos. Las proteínas séricas o 

plasmáticas no fijadas se eliminarán en la siguiente fase de lavado. 

En la segunda etapa se añade al pocillo una mezcla de los 4 antígenos HIV-1 y 

HIV-2 recombinantes conjugados a peroxidasa de rábano. El conjugado se fija 

específicamente la porción inmunoglobulina anti-HIV-1 y/o anti-HIV-2 (IgG e IgM) de los 

complejos antígeno-anticuerpo. Si no existen complejos antígeno-anticuerpo, el 

conjugado no fijado se eliminará en el siguiente lavado.




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En la tercera etapa, se añade un sistema de detección de enzimas consistente en 

o-fenilenediamina y peroxido de hidrógeno. Si hay conjugado fijado, el OPD se oxidará 

produciendo una reacción de color anaranjado. Entonces se añade ácido sulfúrico para 

detener la reacción. 

La intencidada del color resultante depende de la cantidad de conjugado fjado y 

es, por lo tanto, una función de la concentración de anti- HIV-1 y/o anti-HIV-2 presente 

en la muestra. La intensidad del color se mide con un lector de microplacas diseñado 

para medir la absorbancia de luz de un pocillo. 

La preparación de los reactivos para este procedimiento se encuentra en el inserto al 

final del procedimiento. 

Se puede utilizar suero o plasma para realizar la prueba, se puede utilizar suero, incluido 

el recogido en tubos separadores de suero, o plasma recogido en EDTA, ACD, CPDA, 

CP2D, CPD y citrato de sódio al 4% y heparina. 

La muestra se puede almacenar entre 2-8 C hasta 7 días y si se requiere un 

almacenamiento prolongado, la muestra se congela a menos 18 C. 

Los pocillos que no se utilizan se deben de cerrar bien y darles 60 días de caducidad a 

2-8 C con desecante.




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Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la muestra(s) que se van a 

utilizar para esta prueba. Los reactivos se agitan sin formar burbujas. 


Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan el blanco, muestras y controles (los circulos no se 

pueden marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis. 



Blanco 


con Controles 

negativos 

La forma de colocarlos en la placa es asi: 


con controles 

positivos HIV1 y 

otro + HIV2 

Colocar las 

muestras 


interno negativo 

Adicionar 50microlitros de diluyente de muestra a todos los pocillos menos al blanco 

Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia y homogenizar con la punta que se adiciona. 


cada muestra 




Colocar en 1 de los pocillos 

de Controles positivos 


+HIV1 y en otro +HIV2 



negativo 



positivo 

Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 30min. 


interno positivo 

Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 5 ciclos) La forma de operar del equipo se 

describe al final del procedimiento. Quitar exceso del lavado con golpes sobre un papel. 

Adicionar 200microlitros de Conjugado a todos los pocillos (excepto al blanco). Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C 

durante 30min. Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur 

Adicionar 200microlitros de Soluciòn buffer- sustrato-OPD (1 pastilla de OPD en 6ml de Buffer sustrato) a todos los pocillos (incluyendo al 

blanco). Tapar la placa con una cubierta metalica o poner a oscuridad e incubar a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a 

todos 50microlitros de acido sulfurico 4N (para parar la reacciòn) incluyendo al blanco. 

Se realiza la lectura, se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A y se guarda el registro en el 

folder del mes y la Prueba correspondiente.




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Los valores individuales de control negativo deben ser iguales o menores que 

0,070 e iguales que –0,010. Las cifras entre 0,000 y –0,010, ambas inclusive, son 

válidas y deben redondearse a 0,000. Si uno de los tres valores control está fuera de 

estos límites, deberá volver a calcularse la media de los controles negativos (NCx) en 

base a los dos valores aceptables. La placa no será válida y deberá repetirse la prueba 

si dos o más de los tres valores control están fuera de los límites. 

Ejemplo: 

Determinar la media de los valores control negativo (NCx). 


0,005 

0,010 

0,015 







Se considera que una placa es válida, si ambos controles positivos (HIV-1 y HIV-2) 

satisfacen los siguientes criterios:




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El valor de absorbancia del control positivo HIV-1 es igual o mayor que 0,200 y 

está dentro del rango soportado por el lector de microplacas. 

El valor de absorbancia del control positivo HIV-2 es igual o mayor el corte del 

ensayo y está dentro del rango soportado por el lector de microplacas. 

Si uno cualquiera de estos valores controles está fuera de estos límites, el ensayo 

no se considera válido y deberá repetirse. 

Nota: los valores por encima del límite superior del rango soportado del lector de 

microplacas puede aparecer como “ MAS DE” o “ *** “ . 


Valor de corte = NCx + 0,125 

Ejemplo: 


1 0,005 

2 0,010 

3 0,015 



Valor de corte= 0,010 + 0,125 = 0,135 



ensayar en un pocillo único. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición 

se obtenga el mismo valor. 

Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte e igual o 

mayor de –0,025 deberán considerarse no reactivas. No es necesario repetir la prueba.




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proceder a su interpretación definitiva para posteriormente realizar la Prueba 

confirmatoria para definir si es positiva, indeterminada o negativa. 


repetidamente reactiva para anticuerpos a HIV-1 y/o HIV-2 si una cualquiera de las 

determinaciones por duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el 

valor de corte. 


no reactiva para anticuerpos a HIV-1 y/o HIV-2, si ambas determinaciones por duplicado 

son negativas, es decir menores que el valor de corte.




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ANTICUERPOS CONTRA SIFILIS (VDRL o RPR) 

Esta prueba es utilizada para detectar sífilis a través de una técnica aglutinación cuando 

existe presencia de Treponema pallidum, por medio de una reacción inmunológica color 

azul. 

El reactivo SYPAL-CB es una suspensión coloidal de cardilipina, colesterol y lecitina. La 

cardiolipina es extraída del corazón de la res y la lecitina del pollo. Para su conservación 

el almacenaje se realiza a una temperatura de 2 - 8 C y cuidando que el recipiente se 

encuentre bien cerrados y alejados de luz. 

Las tarjetas que contiene el kit no se introduce al refrigerador para evitar que se 

humedezcan. Se requiere atemperar los reactivos antes de utilizarlos (15-30°C)




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CAL-02-B 



El Técnico de Serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C el SYPAL-CB, los controles y la muestra(s). 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos que requiera la 

bitacora para la correcta identificación del análisis (si se considera necesario) si no se pueden marcar a un lado de la placa con el # de toma 

de muestra. 

Se centrifuga la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el análisis ( 

la muestra puede ser suero o plasma) 

En esta prueba se utiliza una placa de prueba SYPAL-CB a todos los circulos se les adiciona una alicuota de 50microlitros o 1 gota con 

pipeta desecha del suero del paciente, donador, etc.y se extiende con la misma pipeta desechable o punta. 

De igual forma se aplican los controles positivo y negativo 

A todos los circulos se les adiciona 1 gota de SYPAL-CB 

(con la punta especial que incluye el kit para la aplicacion de este reactivo) y se agita la placa en el agitador BAXTER ROTATOR V durante 

6 min. Leer a partir de los 6min. /100 RPM 

Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-26-B 

Cuando el Resultado es Negativo se reporta como Negativo, 

cuando el Resultado es Positivo se realizan diluciones seriadas para determinar el titulo y se realiza la confirmatoria 


Para realizar la lectura de la placa se agita manualmente por unos segundos (lo que 

aumenta el tamaño de los aglutinados) y se observa con luz fuerte y se continua 

agitando suavemente durante la lectura para distinguir cualquier microaglutinado. 

Una prueba se considera positivas si se obtiene grandes aglutinados (lo que 

depende de la cantidad presente de anticuerpos en el suero). 

Una prueba se considera negativa cuando la mezcla permanece homogénea.




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ANTICUERPOS CONTRA BRUCELA (ANTIGENO ROSA DE BENGALA) 

Para determinar la presencia de anticuerpos en el diagnostico de la Brucela de forma 

rutinaria en el laboratorio se realiza la siguiente prueba: 

Esta prueba es utilizada para el diagnostico de Brucelosis es de aglutinación rápida en 

placa es empleada para la detección temprana de aglutininas especificas de Brucilla 

( B. melitensis, B. abortus y suis). 

Para la realización de esta prueba solo se puede utilizar solo suero y se requiere que las 

muestras no se encuentren lipemicas o bemolizadas. Si la muestra se resguardara 

antes de su análisis se conservara a 2-8 C. 

El Técnico de Serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s). 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles (los circulos no se puden 

marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis. 

Se centrifuga la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el análisis ( 

la muestra solo puede ser suero) 

En esta prueba se utiliza una placa de prueba, la cual debe ser identificada, en donde a todos los circulos se les adiciona una alicuota de 30- 

40microlitros o una gota con pipeta desecha del suero del paciente, donador, etc. y a los controles positivo y negativo de reactivos internos. 

Se homogenizan dentro del circulo con la parte plana de la pipeta desechable una vez que se colocan. 

Se les adiciona a todos (incluyendo controles) 30microlitros o 1 gota del Antigeno Rosa de Bengala previamente homogenizado. 

Agitar la placa en el agitador BAXTER ROTATOR V durante 4 min. 

Leer a partir de los 4min. 

Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-26-B.




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RESULTADOS 

CAL-02-B 



La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se 

comenzó a mezclar. 

No aglutinación: cuando se presenta un suero negativo. 

Cualquier cantidad de aglutinación: presencia de anticuerpos específicos. Cuando se 

presenta un suero positivo. 

Como esta prueba es cualitativa cuando se tiene un resultado positivo debe ser confirma 

mediante una prueba cuantitativa para brucelosis como: aglutinación lenta estándar o 

aglutinación lenta en presencia de 2-mercaptoetanol. 

CONFIRMATORIA y/o SUPLEMENTARIAS 

CHAGAS ( HAI 2- BETA MERCAPTO ETANOL) 

La hemaglutinación indirecta (HAI), también llamada hemaglutinación reversa pasiva, se 

basa en la propiedad que tienen los anticuerpos del Tripanosoma cruzi de producir 

aglutinación especifica en presencia de glóbulos rojos sensibilizados con los 

correspondientes antígenos. 

Y de esta manera eliminar los anticuerpos inespecíficos (heterófilos) que son capaces de 

aglutinar glóbulos rojos de distintas especies (y dar falsos positivos). Su presencia se 

investiga enfrentando el suero con los Glóbulos Rojos no sensibilizados. Esta prueba se 

realiza para eliminar los anticuerpos heterófilos de las muestras con el tratamientos con 

2-mercaptoetanol.




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CAL-02-B 



El Técnico de Serlogia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s). 

Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos se pueden anotar en 

la placa o en la bitacora para la correcta identificación del análisis. Se realiza por duplicado en la misma placa. 


análisis ( la muestra solo puede ser suero) 

Se realiza una dilución 1:100 con 25ml de solución fisiologica + 25microlitros de 2- mercaptoetanol 

Se toma una alicuota de 25 microlitros de la muestra del donador, paciente, etc y de los respectivos controles + 25 microlitros de la dilución 

anterior, se homogenizan con la misma punta con que se esta colocando y se tapa con la cubierta adhesiva. 

Se incuba a 37 C durante 1 hr. 

Se les adiciona una alicuota de 25microlitros de diluyente de suero (Buffer) 

Se realizaran diluciones seriadas a partir del primer pocillo. 

Se toma una alicuota de 25microlitros del primer pocillo del paciente y se pasa al segundo pocillo, se homogeniza y se toma una alicuota del 

segundo pocillo de 25 microlitros y se pasa al tercer pocillo y lo mismo para el cuarto pocillo (en el cuarto pocillo se toma la alicuota de 

25microlitros y se tira para que contenga la misma cantidad que los demas pocillos. Las diluciones seran de ½ para el primer pocillo, ¼ para el 

segundo pocillo y asi sucesivamente. 

Al pocillo identificado como control positivo y control negativo se les realiza el mismo proceso de dilucion. 

Una vez reconstituido y agitado el reactivo que contiene los GR no sensibilizados (control de heterofilia) se le adiciona 25microlitros a los 

pocillo que contienen la dilucion ½ y ¼ de todas las muestras y controles 

Y a los pocillo que contienen las diluciones 1/8 y 1/16 muestras y controles se les adiciona 25microlitros de Antigeno HAI 

Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta s (para evitar 

evaporaciòn). 

Se incuba durante 60min en ABBOTT COMMANDER/ Se deja en reposo durante 90min (en un lugar donde no exista vibracion) 

Leer a partir de los 90min. Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A.




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HbsAg ELISA (NEUTRALIZACION) 

CAL-02-B 



Es una Prueba confirmatoria que detecta anticuerpos para la Hepatitis B en muestras 

reactivas en la ELISA para Antigenos de Hepatitis B. 

Es una técnica de neutralización en conjunto con métodos estándares en ELISA 

ORTHO-ANTICUERPOS. 

El Técnico del área de serologia enciende la incubadora ABBOTT COMMANDER para tenerla a la temperatura que se requiere al introducir las placas. 

TIRA CONTROL 

BLANCO 

3 CONTROLES NEGATIVOS 

2 CONTROLES POSITIVOS 

LA MUESTRA POR DUPLICADO 

Se divide la placa en dos partes que contienen cada una lo siguiente: 

TIRA PRUEBA 

2 CONTROLES POSITIVOS 

MUESTRAS POR DUPLICADO 

Una vez que se tienen vien identificados el contenido de cada pocillo se adiciona 50 microlitros de conjugado (conjugate diluent y antibody to hep. B 

sudpase antigen) EXCEPTO AL BLANCO 

TIRA CONTROL 

Se le adiciona 20 microlitros de Confirmatory control 

TIRA CONTROL 

A los 3 pocillos marcados para CONTROL NEGATIVO se le adiciona 

200microlitros de calibardor negativo a cada uno. 

A los 2 pocillos marcados para CONTROL POSITIVO se le adiciona 

200microlitros de calibardor positivo a cada uno. 

A los 2 pocillos marcados para MUESTRA Y MUESTRA DUPLICADO 

se le adiciona 200microlitros de la muestra. 

Se tapa la placa con el papel adherible y se incuba a 37 C durante 180 min. 

Se lava 6 veces con solución lavado en el SANOFI DIAGNOSTIC PASTEUR LP35. 

TIRA PRUEBA 

Se le adiciona 20 microlitros de Antibody hep. B surface antigen 

TIRA PRUEBA 

A los 2 pocillos marcados para CONTROL POSITIVO se le adiciona 

200microlitros de calibardor positivo a cada uno. 

A los 2 pocillos marcados para MUESTRA Y MUESTRA DUPLICADO 

se le adiciona 200microlitros de la muestra. 

Se adiciona 200microlitros del sustrato OPD (12ml de Buffer con 1 pastilla de OPD) a todos los pocillos y se incuba a temperatura ambiente en oscuridad 

durante 30 min. 

Se adiciona 50 microlitros de H2SO4 4N a todos los pocillos 

Leer a 492 con referencia de 620 en el equipo SANOFI DIAGNOSTIC PASTEUR LP 400




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CAL-02-B 




La absorbancia promedio de la muestra diluida o sin diluir es mayor o igual al valor 

Cutoff y la adición de anticuerpos al antígeno de Hepatitis B reduce la reactividad de la 

muestra en un 50% o más la Prueba se considera positiva. 

Cuando la absorbancia promedio de la muestra diluida o sin diluir es mayor o igual al 

valor Cutoff y la adición de anticuerpos al antígeno de Hepatitis B no reduce la 

reactividad de la muestra al menos un 50% la muestra es no neutralizable y se debe 

diluir al menos 1 a 10 y reinspeccionarse. 

Si la absorbancia de la muestra duplicada es menor al Cutoff de la muestra diluida y sin 

diluir se considera NO NEUTRALIZABLE. 

Para calcular el Cutoff se requiere sumar los valores resultantes de absorbancia de los 

3 controles negativos y dividirlos entre 3. Una vez que se tiene el valor promedio de los 

controles negativos se suma a un valor 0.050 y se obtiene el Cutoff. 

HCV (INMUNOBLOT RIBA HCV) 

La prueba CHIRON* RIBA* HCV 3.0 SIA es un inmunoensayo cualitativo in vitro para la 

detección de anticuerpos frente a proteínas individuales codificadas por el virus de la 

hepatitis C (anti- HCV) en suero o plasma humano donado por la transfusión o 

manufactura posterior. Los antígenos recombinantes utilizados son c33c y NS5 y dos de 

los péptidos sintéticos son c100p y 5-1-1p que proceden de regiones putativas de la 

nucleocápside viral. 

Esta prueba tiene 3 etapas: 

Primera etapa 

La muestra o el control del ensayo se diluye e incuba con la tira. Si muestra contiene 

anticuerpos específicos frente a HCV, éstos se fijarán a las correspondientes bandas de 

antígeno recombinante y/o péptido sintético de la tira. Los componentes séricos o 

plasmáticos no fijados se eliminarán por aspiración y lavado.




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Segunda etapa 



La tira se incuba en presencia de un conjugado de anti- IgG humana de cabra, marcada 

con peroxidasa. El conjugado se fija a la porción de anti- IgG humana del complejo 

antígeno-anticuerpo. El componentes no fijados se eliminarán por decantación y 

posteriores pasos de lavado. 

Tercera etapa 

Se añade un sistema colorimétrico de detección enzimática compuesto por agua 

oxigenada y 4-cloro-1-naftol. Si el conjugado se fijo a la muestra, la reacción enzimática 

origina un producto de reacción de color azul-negro insoluble en cada banda específica 

de antígeno, péptido o control HCV. La reactividad de la muestra ante cada banda de 

antígeno se determina comparando visualmente la intensidad de la banda antigénica 

individual con la de las bandas de control interno de IgG humano alta y baja absorbidas 

en cada tira. 

Los reactivos se debe almacenar a 2 y 8 C. 

Leer en el inserto de la prueba anexado al final del procedimiento para conocer sobre las 

precauciones que se debe tener con los reactivos que incluye la prueba al igual que la 

preparación de los reactivos y soluciones 

CONTROL DE CALIDAD 

Los controles positivo y negativo se deben incluir en cada serie , independientemente el 

número de muestras o número de tiras utilizadas. 

Como controles internos en cada tira se incluyen dos niveles de IgG humana (nivel I, 

control bajo y nivel II, control alto). La reactividad de las bandas individuales de HCV se 

determina comparando la intensidad de cada banda con los controles internos de la tira 

IgG humana de nivel I y nivel II. 

Los resultados previstos de los controles positivo y negativo que incluye la prueba son: 

Las bandas del control interno IgG de nivel I y nivel II deben ser claramente 

distinguibles a simple vista en las tiras de control positivo y negativo, y el control 

IgG de nivel I debe ser evidentemente más claro que el control IgG de nivel II.




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La tira de control positivo debe mostrar una respuesta de 2+ o mayor para todas 

las bandas de antígeno y péptido del HCV. La respuesta en la banda SODh debe 

ser visible inferior al control IgG humano de nivel I. 

La tira de control negativo debe mostrar una respuesta a cada una de las bandas 

de antígeno del HCV y SODh que sea visiblemente inferior al control IgG humano 

de nivel I. 

Si los controles de la prueba incluidos no cumplen los criterios anteriores, la serie queda 

invalidada y debe repetirse.




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CAL-02-B 



El Técnico de Serologia escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, bco, controles (los 

tubos no se puden marcar y contienen una tira dentro de ellos que contiene un número) y los datos que requiera la bitacora para la correcta 

identificación del análisis. 


análisis ( la muestra puede ser plasma o suero) 

A todos los tubos previamente identificado en la bitacora CAL- 26-A se les adiciona una alicuota de 1ml de diluyente ( specimen diluent) 

A los tubos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 20 microlitros del suero o plasma y se homogenizan con 

la misma punta con que se esta colocando. 

Al tubo identificado como control negativo se le colocan 20 microlitros y al tubo marcado como control positivo se le adicionan 20 microlitros y 

se homogenizan con la misma punta con que se esta colocando. 

Se tapan y se colocan en agitación vertical a temperatura ambiente durante 4 horas. 

Se tira el liquido excedente teniendo cuidado con la tira que contiene y se adiciona 1ml del diluyente y se pone en agitación vertical durante 

30min a temperatura ambiente 

Preparo una solución de lavado WASH BUFFER CONCENTRATE (50X) con 450ml de agua destilada + 25ml de WASH BUFFER 

CONCENTRATE 

Decanto y pongo las tiras en la bandeja de reacción con 30ml aproximadamente de la solución de lavado que prepare en el paso anterior, 

este proceso de decantación y lavado lo realizo 3 veces 

Observo en el incerto cuanto conjugado debo agregar con respecto al número de tiras que tengo. 

El incerto indica por ejemplo que para una tira requiero 1ml de conjugado pero 

que cuando son menos de 10 tiras debo tomar a un así 10ml de conjugado 

Una vez adicionado en la bandeja de reacción el conjugado pongo en agitación durante 10- 12 min. y realizo lavados y decantaciones 3 veces 

como en lo hice anteriormente. 

Preparo una solución substrato de trabajo en la que depende el número de tiras que tengo. Ejemplo: cuando tengo de 3-10 tiras preparo 1.7ml 

de volumen de solución substrato con 8.5ml solución buffer del subtrato 

Es muy importante que no sepeguen las tiras. 

Agitar de 15 a 20 min a temperatura ambiente y decantar. 

Lavar con 60ml de agua destilada dos veces. 

Con pinzas colocar las tiras en un papel absorbente y retiro el exceso de agua. 

Dejar secar las tiras durante 30min en la oscuridad y a temperatura ambiente 

Leer resultdos antes de 3 hrs.




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La reactividad anti-HCV en una muestra se determina comparando la intensidad de cada 

banda de HCV con la intensidad de las bandas del control interno de IgG humana (nivel I 

y nivel II) de cada tira. La identidad de los anticuerpos se define por la ubicación 

especificada de la banda de HCV. 

La intensidad de las bandas de HCV se clasifica en función en función de la intensidad 

de los controles de IgG internos de la siguiente forma: 

Intensidad de la banda Puntuación 

Ausente NEGATIVO 

Menor que la intensidad de la banda control IgG de nivel I POSITIVO / NEGATIVO 

Igual a la intensidad de la banda control IgG de nivel I 1+ 

Mayor que la intensidad de la banda control IgG de nivel I y 

menor que la intensidad de la banda control IgG de nivel II 

Igual a la intensidad de la banda control IgG de nivel II 3+ 

Mayor que la intensidad de la banda control IgG de nivel II 4+ 

La interpretación NEGATIVA, INDETERMINADA o POSITIVA se basa en el patrón de 

reacción presente en la tira. Para interpretar las series como válidas deben utilizarse los 

siguientes criterios: 

2+




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CAL-02-B 



Patrón de la banda de antígeno Interpretación 

Ninguna banda de HCV presenta 

reactividad 1+ o mayor. 

O 

Sólo la banda de SODh presenta 


Una única banda de HCV presenta 


O 

La banda de SODh presenta reactividad 

1+ o mayor conjugadamente con una o 

más banda de HCV presenta reactividad 

1+ o mayor. 

Al menos dos banda de HCV presenta 


NEGATIVO 

INDETERMINADO 

POSITIVO 

Una intensidad de banda menor que el control IgG nivel I (es decir +/-) está por 

debajo del valor límite parta la reactividad en el ensayo. 

Solamente se puede hacer una interpretación POSITIVA de la tira en ausencia 

de reactividad de la banda de SODh (es decir +/-). 

Un resultado de la prueba POSITIVO indica la presencia de anti-HCV e infección 

previa o actual con HCV. Un resultado de la prueba INDETERMINADO indica que 

el anti-HCV puede no estar presente y que no se puede llegar a una conclusión 

sobre si existe infección por HCV. Dado que una reactividad de +1 o mayor con 

cualquiera de los antígenos codificados del virus HCV de la tira es una posible 

evidencia de infección previa o actual con HCV, todos los individuos clasificados 

INDETERMINADOS deben volver a someterse a la prueba durante un período de 

6 a 12 meses para verificar si se ha producido un aumento de la reactividad. Se 

recomienda que los INDETERMINADOS se vuelvan a someter a una prueba al 

cabo de 6 meses, usando una muestra obtenida en ese momento. 

Un resultado NEGATIVO que es REACTIVO por un procedimiento aprobado de 

escrutinio de anti-HCV, no excluye la posibilidad de infección con HCV. Las 

concentraciones de anti-HCV pueden no ser detectables en la infección inicial.




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HIV (WESTERN BLOT HIV 1 + HIV 2 

CAL-02-B 



Es una detección por electroinmunotransferencia de los anticuerpos anti-HIV 1 en suero 

o plasma humano para la confirmación de una respuesta anti-HIV 1y anti-HIV 2 positiva 

y para precisar la especificidad antigénica en el cuadro diagnóstico del SIDA. 

La calidad de los antígemos utilizados en estos test no permite eliminar absolutamente 

determinadas respuestas inespecíficas. 

En el cuadro diagnóstico del SIDA, es necesario para la caracterización de la infección 

por los virus HIV-1 ó HIV-2. 

Este test se basa en el principio del ELISA indirecto sobre una tira de nitrocelulosa que 

contiene todas las proteínas constituyentes del virus HIV-1, HIV 2 y un control interno 

anti-IgG. La banda del control interno se halla situada junto al extremo no numerado de 

la tira antes de la reacción p18 o p16 y permite validar la adición de la muestra y de los 

reactivos así como el buen desarrollo del método. 

El procedimiento de ensayo comprende las siguientes etapas: 

Rehidratación de las tiras de nitrocelulosa 

Incubación de las muestras a confirmar y sueros de control. 

Si están presentes los anticuerpos anti-HIV 1 o HIV 2 se unirán a las proteínas virales 

presentes sobre la tira de nitrocelulosa. 

Después del lavado, se incuban las tiras con anticuerpos anti IgG humanos 

marcados con fosfatasa alcalina. El conjugado se une a los anticuerpos anti-HIV 1 o 

HIV 2 fijados al soporte sólido. 

Después del lavado y eliminación del conjugado en exceso, la adición de solución de 

revelado permite evidenciar la actividad enzimática de los complejos ligados a la 

nitrocelulosa. 

La aparición de bandas coloreadas específicas permite reconocer la presencia de 

anticuerpos anti-HIV 1 o HIV 2 en el suero. 

IMPORTANTE 

No mezclar en un mismo ensayo diferentes lotes. 

Reactivos no caducos. 

Reactivos a temperatura ambiente antes de ser utilizados.




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CAL-02-B 



No tocar las tiras con las manos, utilizar pinzas. 

Utilizar los sueros de control en cada ensayo 

REACTIVO PARA RECONSTITUIR 

R2 Solución de lavado / diluyente 

Homogenizar la solución, diluir (1/5) en agua destilada (ejemplo: 30ml de solución de 

lavado + 120ml de agua destilada). Homogenizar cuidadosamente. 

Una vez reconstituido permanece estable durante un mes a +2 - 8 C. 

El equipo contiene 3 botes : 

Desechos con tapón rojo 

H20 destilada con tapón azul 

Solución de lavado (1/5) con tapón amarillo. 

VALIDACIÓN DE LOS RESULTADOS 

La banda del control interno anti-IgG debe ser de coloración fuerte. Permite validar la 

adición de la muestra y de los reactivos así como el buen desarrollo del método. La 

ausencia o la escasa intensidad de coloración de la banda del control interno anti-IgG 

indica ya sea la ausencia de depósito de la muestra o de los reactivos, o ya sea un 

incumplimiento del método.




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CAL-02-B 



El Químico del área de serologia enciende el equipo SANOFI DIAGNISTIC PASTEUR LS 12 con el interruptor que se encuentra en la parte de atras del 

lado derecho. 

En la pantalla se observa lo siguiente: 

L-S.12 - Version 6.07.2y- 

Selection Mode RUN = START 

EDIT=1 CONFIG=2 SERV=3 

Presionar START 

RUN: Select. Test: New LAV BLOT 

=1 =2 Valid= START Return= STOP 


Run= Check botte contents-Rack on 1 

Prime=3 Valid= START Return= STOP 

Verificar que la linea amarilla este endentro del bote del 

agua 

Presionar el # 3 

Una vez que termina se cambia la linea amarilla a el bote 

de solución de lavado 

Presionar el # 3 , apretar 3 veces el 3 para realizar 3 

lavados) 

Como los virus de HIV son similares son tratados igual 

Se acomodan las tiras en cada unos de los Rack de la 

siguiente forma: 

RACK 1 HIV 2 Control negativo 

RACK 2 HIV 2 Control positivo 

RACK 3 Muestra 

RACK 4 HIV 1 Control negativo 

RACK 5 HIV 1 Control positivo 

RACK 6 Muestra 


RUN: Number of strips 1st Rack:5 

=1 =2 Valid= START Return= STOP




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CAL-02-B 




Cambiar a 1 st Rack= 6 


RUN: Number of strips 2nd Rack:6 


Presionar el # 1 hasta llegar al 0 para que quede 

2nd Rack=0 


RUN: Put the rack (s) on the tray 

Valid= START Return= STOP 


RUN: New Lav Blot / Pha: 1: 



RUN: New Lav Blot 

Phase 1: Soaking strip 

Se agitan durante 5 min. 

RUN: New Lav Blot Valid= START 

Phase 2: Dispense 20microlitros of sample 

Abrir la tapa del equipo 

Adicionar 20 microlitros del control negativo WB1y 2 

y 20 microlitros del control positivo WB1 y 2. 

Adicionar 20 microlitros de la muestra 

Homogenizar con la punta de la pipeta cada una despues 

de adicionar 

RUN: New Lav Blot R3 

Negative Control serum 

Positive Control serum R4 

Presionar START




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CAL-02-B 



RUN: New Lav Blot R3 

Negative Control serum 

Positive Control serum R4 


RUN: New Lav Blot 2Hrs. 

Phase 3: Incubation of samples 

Se incuba 2 hrs con agitación. 


Phase 5:2nd wash of sample 

(3 veces) 

RUN: New Lav Blot Valid=START 

Phase 6: Dsipense 2.0ml de Conjugate RS 

2.0ml de conjugate 


RUN: New Lav Blot 60min. 

Phase 7: Incubation Conjugate R5 


Phase 8: 1st wash conjugate R5 


Phase 9: 2nd wash conjugate R5 

RUN: New Lav Blot Valid:START 

Phase 10: Dispense 2.0ml Substrate R6 

2ml de Colour developent solution R6 


RUN: New Lav Blot Reaction stop STOP 

Phase 11: Incubation substrate R6 Oh. Mn. S 

5min. Aprox. 

Presionar STOP 


Phase 12: 1st. Rinse Subtrate R6




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CAL-02-B 




Phase 12: 2st. Rinse Subtrate R6 


Phase 12: 3st. Rinse Subtrate R6 

RUN: New Lav Blot Valid:START 

Phase 13: End of test 


RUN: Begin a new test 

YES= START NO=STOP 

Presionar STOP 

RUN: Instrument cleaning.Put a Rack 

(1st pos.) Valid=START 

Return= STOP 


RUN: Conect R2 and H20 

Tubing to the H2O bottle 

Valid=START Return= STOP 


RUN: Instrument cleaning. 

RUN: Disconnect the R2 

and H2O tubing 



RUN: Dring instrument 

RUN: Descontamination 



0H mn-s 

0H mn-s




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CAL-02-B 



Colocar en un vaso de precipitado una solución de etanol 

al 30% e introducir al vaso las lineas amarilla y azul 

RUN: Inmerse both tube ends in 30% ethanol 



RUN: Descontaminating tubing 

-mn-s 

RUN: 30% ethanol contact 

OH--mn--s 

RUN: Connect R2 and H2O tubing to 

the H2O bottle 



RUN: Cleaning instrument 

3mn 

RUN: Disconnect the R2 and H2O 

tubing 



RUN: Drying instrument 

3mn 

RUN: End of decontamination 

Turn off the instrument




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CAL-02-B 




La presencia de anticuerpos anti-proteínas constitutivas del virus HIV 1 y HIV 2 en las 

muestras, se traduce por la aparición de bandas específicas coloreadas (azul-violeta). 

Su posición corresponde a las masas molares de las proteínas virales representadas en 

la tabla siguiente: 

HIV 1 

DETERMINA GEN NATURALEZA ASPECTO EN WESTERN 

CIÓN 

BLOT 

GP 160 ENV Glicoproteína precursora de 

la GP 110/120 y de la GP 41 

Banda nítida 

GP 110/ 120 ENV Glicoproteína de la envoltura Banda de bordes difusos 

P 68 POL Transcriptasa inversa Banda nítida 

P 55 GAG Precursora de proteínas 

internas 

Banda doble 


GP 41 ENV Glicoproteína 

transmembranal 

Banda difusa 


internas 

Banda nítida 

P 34 POL Endonucleasa Banda nítida 

P 24/ 25 GAG Proteína interna Banda nítida 

P 18 GAG Proteína interna A veces banda doble




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INTERPRETACIÓN NEW LAV BLOT 1 

CAL-02-B 



Utilizar el control positivo para identificar los anticuerpos revelados y verificar la 

presencia de la banda del control interno en cada tira. 

INTERPRETACIÓN PERFIL 

Positivo 2ENV +/- GAG +/- POL 

1ENV GAG POL 

Indeterminado GAG + POL 

GAG 

POL 

Negativo Ninguna banda Bandas no 

significativas 

La calificación de indeterminado puede ser por alguna de las alternativas siguientes: 

HIV 2 

Seroconversión 

HIV-2 

Reacción cruzada con otros retrovirus. 

DETERMINACIÓN GEN NATURALEZA ASPECTO EN 

WESTERN BLOT 

GP 140 ENV Precursor de GP 105 y GP 36 Banda + -difusa 

GP 105 ENV Glicoproteína de la envoltura Banda difusa 



internas 

Banda nítida 

GP 36 ENV Glicoproteína 

Banda difusa 

transmembranal 

P34 POL Endonucleasa Banda nítida 

P 26 GAG Proteína interna Banda nítida 

P 16 GAG Proteína interna Banda nítida




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INTERPRETACIÓN NEW LAV BLOT II 

CAL-02-B 



Utilizar el control positivo para identificar los anticuerpos revelados y verificar la 

presencia de la banda del control interno en cada tira. 

INTERPRETACIÓN PERFIL 

Positivo ENV + GAG + POL 

ENV + GAG 

ENV + POL 

Indeterminado GAG + POL 

GAG 

POL 

ENV 

Negativo Ninguna banda Bandas no significativas 

HIV (Ag P24 ELISA) 

VIRONOSTIKA HIV-I ANTIGEN 

El sistema microelisa VIRONOSTIKA HIV-I ANTIGEN es un enzimoinmunoensayo para 

detección cualitativa y cuantitativa del antígeno de la nucleocápside p24 del virus de la 

inmunodeficiencia humana del tipo 1 en suero, plasma o sobrenadante de cultivo celular 

humano. 

Es un inmunoensayo que se basa en el principio del sándwich. El anti-HIV-1 (humano) 

acoplado a la peroxidasa de rábano (HRP) sirve como conjugado, usando como sustrato 

a la tetrametilbencidina (TMB). Al concluir la prueba, el desarrollo de color sugiere la 

presencia del antígeno del HIV-1.




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TAMPON FOSFATO DILUIDO 

CAL-02-B 



Verificar la ausencia de cristales de sales en el tampón fosfato concentrado. Si se han 

formado cristales en la solución, volver a solubilizarlos calentando a 37 C hasta la 

disolución de los mismos. 

Diluir el tampón fosfato concentrado 1:25 con agua destilada o desionizada. Preparar 

50ml de tampón fosfato diluido, como mínimo, para cada tira microelisa empleada. 

El tampón fosfato diluido es estable durante dos semanas si se almacena a 2–8 C. 

SUSTRATO TMB 

Preparación del substrato TMB 

Número de pocillos Solución TMB Solución de peróxido de urea 

1-16 1ml 1ml 

17-32 2ml 2ml 

33-48 3ml 3ml 

49-64 4ml 4ml 

65-80 5ml 5ml 

81-96 6ml 6ml




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CAL-02-B 



El Químico de serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la 

muestra(s) que se van a utilizar para esta prueba. Los reactivos se agitan sin formar burbujas. 


Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan las muestras y controles (los circulos no se pueden 

marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis. 



Colocar 3 pocillos con Controles 

negativos 

La forma de colocarlos en la placa es asi: 

Colocar 1 pocillos con controles 

positivos 

Adicionar 25microlitros de disruptor a todos los pocillos 

Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia: 


cada muestra 




Colocar en 1 de los pocillos 

de Controles positivos 


Agitar ligeramente la placa y taparla con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 60min. 

Colocar las muestras 

Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 4 ciclos) La forma de operar del equipo se 

describe al final del procedimiento. Lavar con tampón fosfato diluido. Quitar exceso del lavado con golpes sobre un papel. 

Adicionar 100microlitros de Conjugado a todos los pocillos. Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 60min. Realizar 

los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 4 ciclos, lavar con tampón fosfato diluido) 

Adicionar 100microlitros de sustrato-TMB preparado a todos los pocillos. Incubar a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a 

todos 100microlitros de ácido sulfúrico 1mol/l (para parar la reacciòn) 

Se realiza la lectura a 450nm con referencia de 620nm, se interpretan los resultados y guarda el registro en el folder del mes de la Prueba 

correspondiente.




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RESULTADOS 

CAL-02-B 



Calificación de los valores de control negativo (CN) 

La absorbancia de cada pocillo de CN debe ser menor que o igual a 0,090 (longitud de 

onda doble) o 0,130 (longitud de onda única) y mayor que o igual a 0,000 (longitud de 

onda doble) o 0,040 (longitud de onda única). 

Eliminar los valores fuera de rango y determinar el valor de control negativo medio 

(CNx). Eliminar todo CN que no satisfaga los criterios siguientes, y volver a calcular el 

valor medio: 

Longitud de onda doble 

CN mayo o igual a 0,5x (CNx) 

CN menor o igual a 1,5x (CNx) 

Longitud de onda única 

CN mayo o igual a 0,8x (CNx) 

CN menor o igual a 1,2x (CNx) 

Si dos o más valores están fuera del intervalo, el ensayo no es válido y debe repetirse. 

Calificación de los valores de control positivo (CP) 

La absorbancia de cada pocillo de CP debe ser mayor que o igual a 0,960 (longitud de 

onda doble) o 1,000 (longitud de onda única). 

Valor cutoff 

Si el ensayo de prueba es válido, calcular el valor cutoff como sigue: 

Cutoff para suero y plasma = CNx + 0,070




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VIDAS HIV DUO (HIV4) 

CAL-02-B 



Es una prueba de screening para la infección por HIV automatizado en el sistema 

VIDAS, basado en la detección combinada del antígeno p24 de VIH-1 y las 

inmunoglobulinas G anti-VIH1 y anti-VIH2 en suero o plasma humano por una técnica 

ELFA. 

Los virus de inmunodeficiencia humana (VIH) son retrovirus ARN transmitidos 

principalmente por vías sexual, parenteral, perinatal y transplacentaria. Desde el 

aislamiento del VIH 1 en 1993 Y del VIH 2 en 1995, han sido caracterizadas numerosas 

variantes genéticas. 

El diagnóstico de una infección por VIH, se basa en la práctica normal en la 

detección de anticuerpos séricos anti-VIH por una técnica ELISA. 

Existe un periodo de 3 semanas y media entre la contaminación y la aparición de 

los primeros anticuerpos. 

Durante este periodo, el antígeno p24 esta presente en la mayoría de los 

pacientes infectados por VIH-1, sea cual sea su origen. 

La detección simultánea de la antigenémia p24 y de los anticuerpos anti-VIH-1 y 

anti-VIH-2 permite reducir el retraso existente entre la contaminación y el diagnóstico de 

la infección. Objetivo de VIDAS HIV DUO. 

Todas las etapas de la reacción están controladas por el sistema. El cono de uso único, 

sirve a la vez de fase sólida y de sistema de pipeteo El resto de los reactivos están 

listos para su uso y distribución en el cartucho. 

Primera reacción 

La detección de inmunoglobulinas G anti-VIH1 (también las del subtipo (grupo) O) y anti- 

VIH2, se realiza en la parte baja del cono, donde después de la etapa de dilución, la 

muestra es aspirada y expulsada varias veces de la parte inferior del cono. Esta 

operación permite a las IgG anti-VIH de la muestra unirse a los péptidos de síntesis gp 

41y/o subtipo (grupo) O y/o gp 36 fijados en el cono. Los componentes no ligados se 

eliminan en los lavados.




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CAL-02-B 



El conjugado anti-IgG humana marcado con fosfatasa alcalina se incuba ahora en el 

cono, en el cual se fija a las IgG anti-VIH. Los componentes no ligados se eliminan en 

los lavados. 

Segunda reacción 

Es la detección del antígeno p24 y se realiza en la parte alta. La muestra previamente 

diluida y los anticuerpos de conejo anti-p24 biotinilados son aspirados y expelidos en el 

cono. Durante la incubación del virus es lisado y los antígenos p24 liberados se unen 

por un lado los anticuerpos anti-p24 monoclonales de ratón fijados en la parte superior 

del cono, u por otro lado a los anticuerpos anti-p24 biotinilados. Los componentes no 

fijados son eliminados mediante estreptavidina conjugada con fosfatasa alcalina, cuyo 

exceso se elimina mediante lavados. 

Etapa final 

La etapa final de revelado se realiza simultáneamente en las dos partes y el substrato 

(4-metil-umbeliferil fosfato) se aspira y expele en el cono. La enzima presente en el 

conjugado cataliza la reacción de este substrato en un producto (4-metil umbeliferota) 

midiendo la fluorescencia emitida a 450nm. Esta es proporcional a la presencia de IgG 

anti-VIH y/o antígeno p24 presentes en la muestra. 

Al final de la prueba, los resultados son calculados automáticamente por el VIDAS en 

relación a un estándar, y posteriormente impresos. 

El cono es sensibilizado en el momento de la fabricación con 3 péptidos sintéticos 

( 1péptido env VIH-1, gp 41 + 1péptido env VIH-2, gp 36 + 1péptido específico VIH-1 

grupo O) y 3 anticuerpos monoclonales anti-p24. Los péptidos permiten la captura de 

las IgG anti-VIH 1 o anti-VIH 2 y los anticuerpos monoclonales el antígeno p24. 

La identificación de la prueba, el número de lote y la fecha de caducidad están indicadas 

sobre el cartucho en un código de barras y está compuesto de 10 pocillos. El primer 

pocillo tiene una parte precortada para facilitar la introducción de la muestra. El último 

pocillo es una cubeta que permite la lectura por fluorimetría. Los 8 pocillos intermedios 

contienen los diferentes reactivos necesarios para el análisis.




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Precauciones: 

CAL-02-B 



No utilizar reactivos después de la fecha de caducidad. 

No mezclar reactivos o consumibles de equipos diferentes. 

Utilizar guantes de látex de uso único sin talco (puede provocar falsos). 

Los reactivos y productos de se recomienda manipular con precaución. 

Los reactivos se conservan a 2-8 C. 

MUESTRA: 

Suero o plasma (EDTA, citrato, trombina, heparina de litio, gel de heparina de litio, 

oxalato) 

Las muestras que contienen partículas deberán centrifugarse. 

Se conservan a 2-8 C, 48 horas como máximo, sino congelar a –25 C. No congelar y 

descongelar. No descomplementar las muestras. 

CALIBRACION 

Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo, se efectúa a la llegada de cada 

nuevo lote, después de introducir las especificaciones del lote y se realiza cada 14 días. 

El estándar identificado como S1, será analizado dos veces y el valor debe encontrarse 

entre los límites de RFV fijados. Si no la media no será memorizada y se tendrá que 

repetir la calibración. 


Se incluye un control positivo y un control negativo en cada equipo, estos controles se 

debe utilizar cada vez que se utiliza un nuevo equipo con el fin de verificar la ausencia 

de alteraciones de los reactivos. Cada recalibración debe ser verificada con la ayuda de 

estos controles. 

Para que el aparato pueda verificar el valor de los controles, es necesario identificarlos 

mediante C1 y C2.




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CAL-02-B 



Si los valores obtenidos del control positivo se desvían del intervalo de confianza 

indicado en la etiqueta del frasco. Si el valor se desvía de los valores esperados, los 

resultados no pueden validarse. 

RESULTADOS 

La técnica se observa al final del procedimiento. 

Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente. 

El equipo efectúa dos medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada 

prueba: 

La primera tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta substrato antes 

de ponerse en contacto el substrato con el cono. 

La segunda se efectúa después de la incubación del substrato con la enzima 

presente en el cono. 

El cálculo del RFV es el resultado de la diferencia de las dos lecturas, apareciendo en la 

hoja de resultados. 

El RFV se interpreta por el sistema VIDAS de la siguiente forma: 

Valor del test = RFV paciente/ RFV calibrador 

El valor de la prueba y la interpretación se imprimen en la hoja de resultados. 

La interpretación en función del valor de la prueba es la siguiente: 

Valor del test Resultados 

Cuando el valor es menor a 0,25 Negativo 

Cuando el valor es menor o igual a 0,25 pero menor a 0,35 Positivo límite 

Cuando el valor es mayor o igual a 0,35 Positivo 


Las muestras cuyo valor sea inferior a 0,25 se consideran negativas dentro de los 

límites de las características del reactivo. En caso de sospecha de una primo-infección, 

los valores próximos a 0,25 deberán ser interpretados con prudencia.




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CAL-02-B 



Las muestras con valor superior o igual a 0,25 debe repetirse. 

Deben ser analizadas con una prueba ELISA en donde se detecta el Ag P24. 

Si resulta positivo se realiza una ELISA donde solo se detecta Ag P24. 

BRUCELA (ANTIGENO BLANCO) 

PRUEBA DE AGLUTINACIÒN LENTA EN PRESENCIA DE 2-MERCATOETANOL 

Esta es una técnica cuantitativa para la determinación de anticuerpos anti-Brucella de la 

clase IgG e IgA (Marcadores de infección activa). 

El antigeno que se utiliza es la cepa de B. Abortus. Al ponerse en contacto con los 

anticuerpos, estos van uniéndose entre si a las bacterias suspendidas desarrollando la 

reacción de aglutinación, de esta manera se van depositando en el fondo formando una 

malla visible. 

La molécula de 2-mercaptoetanol actúa sobre la cadena J de la molécula de IgM 

liberando las subunidades, mismas que pierden la capacidad de aglutinar, por lo que la 

reacción visible se debe fundamentalmente a la presencia de IgG e IgA. 

Para observar mejor la reacción se realiza la lectura frente a una fuente de luz. El titulo 

de cada muestra se determina tomando en cuenta la dilución más alta en donde se 

observa una reacción positiva. 

Reacción positiva: Formación de una malla de aglutinación en el fondo del pozo con 

clarificación del medio. 

Reacción negativa: Permanece la turbidez del medio y el fondo se aprecia un acumulo 

de células sedimentadas en forma de botón. 


Los resultados en esta prueba se consideran significativos desde títulos de 1/20, 

reflejando así una etapa activa de la infección.




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CAL-02-B 



El Químico de serologiamarca la placa a utilizar con los # del 1 al 12 y en el otro extremo con las 

letras A a la H. 

Diluir el diluyente para suero (2-Me) con SSI ( dilución 1:10) 

-Adicionar 180microlitros de esta solución en los pozos marcados como H 

-Adicionar 100microlitros en el resto de los pozos 

Adicionar 20microlitros de cada muestra de la siguiente manera: 

En los pozos 1H al 10H colocar la muestra problema 

En el pozo 11 H El Control positivo 

En el pozo 12 H Control negativo 

Para realizar las diluiciones se requiere: 

-Subir y bajar 3 veces con la pipeta para mezclar el suero 

-Tomar 100microlitros del pozo H y pasarlos al pozo G 

-Mezclar y pasar 100microlitros al pozo F se continua de la misma forma hasta llegar al pozo A. 

Después de mezclar se descartan 100microlitros de este último para igualar el volumen. 

PUNTA DIFERENTE PARA CADA MUESTRA 

Agitar el antígeno y diluir con SSI (diluir 1:10) 

Mezclar y colocar 100microlitros de esta suspensión a todos los pozos 

Cubrir la placa para evitar desecación e incubar a 37 C de 20-24 hrs. 

Leer la placa y anotar el resultado en la Bitácora de serologia CAL-13-A




ISBN: 978-968-9170-17-4 


TRANSPLANTE DE MEDULA OSEA 

CITOMEGALOVIRUS 

VIDAS CMV IgG (CMVG) 

CAL-02-B 



Diagnostico in vitro 

Determinación inmunoenzimàtica de IgG anticitomegalovirus (CMVG) en suero humano 

por tècnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación) 

El citomegalovirus forma parte de la familia de los herpes virus. 

Causa patologías graves tanto en niños como en adultos. 

Puede persistir durante años en la persona infectada 

Es causante de infecciones recurrentes 

Se puede transmitir a otros individuos. 

Existen casos de entre un 60 – 85% de la población infectada, la mayoría se tratan de 

casos asintomáticos. 

Entre el 1 -3% de los casos se da en mujeres embarazadas y en 1 caso de cada 2 la 

infecciòn se transmite al feto, siendo una infección asintomático. 

En 5% de los casos puede tener consecuencias graves como: 

Hepato especnomegália 

Hidrocefalia 

Micromegalia 

Partos prematuros. 

La muerte del feto es frecuente. 

En infecciones asintomáticas el 10% de los niños presentan secuelas neurosensoriales 

tales como: 

Sordera 

Ceguera parcial o total. 

Pude causar infecciones severas en personas inmunodeprimidas (infectadas por VIH o 

transplantados).




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CAL-02-B 



VIDAS CMV IgG es una tecnica automatizada que permite medir cuantitativamente las 

IgG anti CMV en suero humano. El principio de determinación asocia el método 

inmunoenzimático a una lectura final en fluorescencia (ELFA). 




La identificación del la prueba, el número de lote y la fecha de caducidad están indicadas 

sobre el cartucho en un código de barras. 

La identificación de la prueba, el número de lote, los parámetros de calibración y el título 

del calibrador, están indicados claramente y contenidos en un código de barras de la 

ficha de especificaciones adjuntas al equipo. 

Precauciones: 


Dejar reactivos a temperatura ambiente 30 min. antes de su empleo. 

Comprobar que el deshidratante contenido en la bolsa de los conos no cambia de color 

(pasa de azul al rosa). 

Homogenizar el cartucho con los calibradores, controles y muestras para una mejor 

reproducibilidad de los resultados. 

Utilizar guantes de látex de uso único sin talco. 

MUESTRA: 

Suero: 

No descomplementados 

No hemolizados 

No contaminados 

Se conservan 5 días a 2-8C, congelar a -20C. No congelar y descongelar 

sucesivamente.




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CALIBRACION 

CAL-02-B 



Se efectua mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada 









estos controles. Si los valores obtenidos de los controles se desvían de los valores 

esperados, los resultados no pueden validarse. 

RESULTADOS 

La técnica se puede observar al final del procedimiento. 

Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente y las 

concentraciones en IgG anti CMV del suero o controles son calculados por el equipo. 

Los resultados son expresados en Ua/ml respecto a una curva de calibración 

memorizada en el equipo. 

Umbral e interpretación de los resultados 

Valor (Ua/ml) Interpretación 

Menor a 4 Negativo 

Mayor o igual a 4 pero menor a 

6 Dudoso 

Mayor o igual a 6 Positivo 

Para valores entre 4 y 6, repetir la prueba.




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RESULTADOS FUERA DE LA CURVA 

CAL-02-B 



Las muestras con resultado mayor de 400 Ua/ml pueden ser diluidas al ¼ en suero 

fisiológico. Multiplicar el resultado por el factor de dilución para obtener el título de la 

muestra. Solo diluir las muestras cuyo título puro sea mayor a 400 Ua/ml. 

VALOR CRITICO 

Determina un aumento significativo del nivel de anticuerpos, equivalente a un aumento 

de 4 veces el título de anticuerpos. Este aumento indica que existe una infección activa, 

y se calcula como sigue: 

Valor crítico: Muestra convaleciente Ua/ml / muestra aguda Ua/ml 

Valor Crítico Interpertación 

Menor a 2 

Sin cambio 

anticuerpos. 

significativo del nivel de 

Valor crítico evocador de un aumento de 

anticuerpos. Una muestra suplementaria 

De 2 a 4 

deberá ser extraída y analizada entre 7 y 14 

días, y reestudiado con la primera para 

recalcular el valor crítico. 

Mayor a 4 

Aumento del 

significativo. 

nivel de anticuerpos muy 

Se recomienda repetir las muestras agudas y convalecientes en la misma lista de trabajo 

del VIDAS.




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VIDAS CMV IgM (CMVM) 

CAL-02-B 




Pra esta prueba no es recomendable utilizar plasma. 

Determinación cualitativa inmunoenzimática de IgM anti-citomegalovirus (CMVM) en 

suero humano por técnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación) 

El citomegalovirus forma parte de la familia de los herpes virus. 

Causa patologías graves tanto en niños como en adultos. 

Puede persistir durante años en la persona infectada 

Es causante de infecciones recurrentes 

Se puede transmitir a otros individuos. 

Existen casos de entre un 60 – 85% de la población infectada, la mayoría se tratan de 

casos asintomáticos. 

Entre el 1 -3% de los casos se da en mujeres embarazadas y en 1 caso de cada 2 la 

infecciòn se transmite al feto, siendo una infección asintomático. 

En 5% de los casos puede tener consecuencias graves como: 

Hepato-esplenomegalia 

Hidrocefalia 

Micromegalia 

Partos prematuros. 

La muerte del feto es frecuente. 

En infecciones asintomáticas el 10% de los niños presentan secuelas neurosensoriales 

tales como: 

Sordera o ceguera parcial o total. 

Pude causar infecciones severas en personas inmunodeprimidas ( infectados por VIH o 

transplantados). 

La detección de las I g M anti- CMV puede ser útil en el diagnóstico de las infecciones 

primarias recientes, particularmente en mujeres embarazadas.




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La detección de las IgM puede presentar resultados falsamente positivos debido al factor 

reumatoide, y resultados falsamente negativos debido a la presencia de IgG. Problemas 

que se evitan con la adsorción. 

El principio de determinación asocia el método inmunoenzimático a una lectura final en 

fluorescencia (ELFA). 




Una vez adsorbidas las IgG y el factor reumatoide, la muestra es aspirada y expulsada 

del interior del cono durante un tiempo determinado. Los anticuerpos IgM anti- CMV 

presentes en la muestra van a fijarse en el antígeno CMV fijado en la pared interne del 

cono. Las etapas de lavado eliminan los componentes no fijados. 

Un anticuerpo monoclonal anti-IgM humano marcado con fosfatasa alcalina es aspirado 

y expulsado dentro del cono y se va a fijar en las IgM anti- CMV humanas fijados en la 

pared del cono. La etapa de lasvado elimina los componentes no fijados. 

La etapa final de revelado, el substrato (4-metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y 

después expulsado en el cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis 

de este substrato en un producto (4-metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida es 

medida a 450nm. 


sobre el cartucho en un código de barras, el primer pocillo tiene una parte precortada 

para facilitar la introducción de la muestra. 

Precauciones: 

No utilizar reactivos después de la fecha de caducidad. 

No mezclar reactivos o consumibles de equipos diferentes. 

Utilizar guantes de látex de uso único sin talco (puede provocar falsos).




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MUESTRA: 

Suero: 

No descomplementados 



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sucesivamente. 

No sueros lipémicos, bemolizados o contaminados. 

CALIBRACION 

Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada 









estos controles. 

Para que el aparato pueda verificar el valor de los controles, es necesario identificarlos 

mediante C1 y C2. 

Si los valores obtenidos del control positivo se desvían del intervalo de confianza 

indicado en la etiqueta del frasco. Si el valor se desvía de los valores esperados, los 

resultados no pueden validarse. 

La técnica se puede observar al final del procedimiento.




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RESULTADOS 

CAL-02-B 



Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente. 

El equipo efectúa dos medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada 

prueba: 

La primera tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta substrato antes 

de ponerse en contacto el substrato con el cono. 

La segunda se efectúa después de la incubación del substrato con la enzima 

presente en el cono. 

El cálculo del RFV es el resultado de la diferencia de las dos medidas. Aparece en la 

hoja de resultados. 

El índice i de la prueba es calculado por el instrumento (es la relación entre la señal 

fluorescente encontrada para el suero a analizar con respecto a la señal memorizada del 

estándar). 


Indice Interpretación 

Una i menor a 0,70 Negativo 

Cuando i es menor o igual a 0,70 y pero menor a 0,90 Dudoso 

Cuando i es mayor o igual a 0,90 Positivo 

Para índices entre 0,70 y 0,90, repetir la prueba. 

Si la verificación vuelve a dar dudosa, se repite el análisis sobre un nuevo suero tomado 

entre 10 y 15 días más tarde.




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TOXOPLASMA 

VIDAS TOXO IgG II (TXG) 

CAL-02-B 




Determinación cuantitativa inmunoenzimática de las IgG anti-toxoplásmaticas en suero 

o plasma humano (anticoagulante permitido EDTA, heparina) por técnica ELFA (enzima 

LINKED flourecente validación) 

Ayuda a conocer el estado inmunitario. 

El Toxoplasma gondii, es un protozoario, parásito intracelular obligatorio, es un patógeno 

muy extendido en el hombre. Parásito cuyo huésped definitivo es el gato, se disemina en 

la naturaleza e infecta a numerosos mamíferos. 

Las afecciones en personas inmunocompetentes es discreto, pero las afecciones fetales 

así como en inmunocomprometidos puede ser muy severa. 

Mujeres O positivo antes de quedar embarazada, no transmiten el paràsito usualmente 

el parásito a su hijo. 

Mujeres O negativo, son susceptibles de ser infectadas en el curso del embarazo. 

La transmisión al feto ocurre durante la fase aguda de la enfermedad. 

La gravedad y frecuencia de la afectación fetal depende de: 

Fecha de la infección materna 

Virulencia de la cepa infectante 

Importancia del inóculo 

Calidad de la respuesta inmune de la madre. 

El diagnóstico de la infección se basa en la exploración biológica: búsqueda de 

inmunoglobulinas específicas (IgM e IgG). 

El diagnóstico de una infección aguda adquirida durante el embarazo se realiza 

poniendo de manifiesto una seroconversión, o por un aumento significativo del título de 

anticuerpos detectados en dos muestras secuénciales testadas en paralelo.




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El principio de determinación asocia el método inmunoenzimático sándwich en dos 

etapas con una lectura final en fluorescencia (ELFA). 




Todas las etapas de la reacción están controladas y son realizadas por el sistema. 

En a primera etapa la muestra se diluye, se aspira y expulsa del interior del cono 

durante un tiempo determinado. Los anticuerpos anti-T. gondii IgG presentes en la 

muestra van a fijarse en los antígenos de T. gondii fijado en el interior del cono. Las 

etapas de lavado eliminan los componentes no fijados. 

Las IgG de ratón monoclonales anti-IgG humanas conjugadas con fosfatasa alcalina son 

expulsadas y aspiradoas del interior del cono y se van a fijar en las IgG humanas fijados 

en la pared interna del cono. 

La etapa final de revelado, el substrato (4-metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y 

después expulsado en el cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis 

de este substrato en un producto (4-metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida es 

medida a 450nm. Proporcional a la concentración de anticuerpos presentes en la 

muestra. 

El cono esta sensibilizado con antìgeno toxoplásmatico de membrana y citoplásmico, 

cada cono está identificado por el código TXG. Se utilizan solo los conos necesarios y 

se deje el resto en la bolsa. 


sobre el cartucho en un código de barras, el primer pocillo tiene una parte precortada 

para facilitar la introducción de la muestra. El último pocillo es una cubeta que permite la 

lectura por fluorimetría. Los pocillos intermedios contienen los diferentes reactivos 

necesarios para el análisis. 

Precauciones: 

No usar reactivos después de la fecha de caducidad. 

No mezclar reactivos o consumibles de lotes diferentes.




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CAL-02-B 




Manejar cada reactivo con sumo cuidado. 

Homogenizar el cartucho con los calibradores, controles y muestras para una mejor 

reproducibilidad de los resultados. 

MUESTRA: 

Suero o plasma (EDTA, heparina) 





CALIBRACION 

Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo, se efectúa a la llegada de cada 











RESULTADOS 

La técnica se puede observar al final del procedimiento. 

Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente. El equipo 

realiza dos lecturas de fluorescencia en la cubeta óptica para cada prueba. La primera 

toma en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y al substrato. La segunda lectura 

se realiza después de la incubación del substrato en el cono. El cálculo de RFV es el




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resultado de la diferencia entre ambas lecturas y aparece en la hoja de resultados, se 

interpretan en Ul / ml. 


Título (Ul/ml) Interpretación 

Menor a 4 Negativo 

Mayor o igual a 4 pero menor a 8 Dudoso 

Mayor o igual a 8 Positivo 

RESULTADOS FUERA DE LA CURVA 

Las muestras con resultado mayor de 300 Ul/ml pueden ser diluidas al ¼ en el control 

negativo. 

Si el factor de dilución no se ha indicado en la lista de trabajo, multiplicar el resultado por 

el factor de dilución para obtener la concentración de la muestra. 

VIDAS TOXO IgM (TXM) 


Determinación inmunoenzimática de las IgM anti-toxoplásmaticas en suero humano por 

técnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación). Tras la inmunocaptura de las 

IgM del suero, las IgM antitoxoplásmaticas se detectan específicamente gracias a un 

inmunocomplejo marcado con fosfatasa alcalina. 

Ayuda a conocer el estado inmunitario. 

Los reactivos se conservan a 2-8 C y su fecha de caducidad esta indicada en el envase. 




Precauciones: 

No usar reactivos después de la fecha de caducidad.




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Los reactivos después de ser utilizados deben ser correctamente eliminados. 


Manejar cada reactivo con sumo cuidado y desecharlos adecuadamente. 

MUESTRA: 

Suero 





CALIBRACION 

Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada 











RESULTADOS 

La técnica se puede observar al final del procedimiento.




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CAL-02-B 



Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente y el l índice i 

de la prueba es calculado por el instrumento (es la relación entre la señal fluorescente 

encontrada para el suero a analizar con respecto a la señal memorizada del estándar). 


Indice Interpretación 

Una i menor a 0,55 Negativo 

Cuando i es menor o igual a 0,55 pero menor a 0,65 Dudoso 

Cuando i es mayor o igual a 0,65 Positivo 

Para índices entre 0,55 y 0,65, repetir la prueba. 

Si la verificación vuelve a dar dudosa, se repite el análisis sobre un nuevo suero tomado.




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CAL-02-B 



El equipo Mini VIDAS se enciende con el interruptor que se encuentra en la parte de abajo en la zona de en medio a un lado del cable de 

conexión 

Mini VIDAS BOOT R1.13 

MES DIA AÑO HORA: MINUTOS: SEG 

1992 bioMerieox Vitek, Inc. 

All Rights Reserved 

Booting ………….. 

Initializing 

Please wait …….. 

Se puede introducir el cartucho en cualquiera 

de los RAP de muestra A y B 

Se introduce el cartucho para que la zona con 

el punto verde se siga viendo. 

Inicializar sección …………………. 

Pantalla de estado ………………… 

Menú de calibración ……………….. 

Menú de resultados ……………….. 

Menú de utilidades ………………… 

Error codigo de barras: # 

Hora: día/mes/año 

Atención: Estandar de Prueba 

# caducidad 

Reporta cada estandar caducado 






Cuando se introduce un kit nuevo en la 

charola 

Dar click en Menú de calibración……... 

Lectura del lote …………………. 

Introd. Manual del lote patrón … 

Introd. Hoja manual TOS …..….. 

Lista de standares memorizado. 

Lista de lote patrón …………,…




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CAL-02-B 



Seleccionar 

Lista de standards memorizados…….. 

Se observa en la pantalla la prueba a realizar 

TXG………… 

TXM ……….. 

HIV4 ………. 

Buscando estandares 

Nombre de la Prueba 

Lote: # 

HR.: MIN.: SEG DIA/MES/AÑO 

Caducidad : HR:MIN:SEG DIA/MES/AÑO 

# : # 

BORRAR……... 

Como es un Kit nuevo se introduce la 

información 





Lista de lote patrón …………,… 

Seleccionar Lectura del lote ……………... 

Sección A ………….. 

Sección B …….……. 

Se pone la tarjeta de codigo de barras en la 

charola y se introduce en A o en B 

Por favor, espere ………. 

Si algun codigo de barras esta dañado manda 

el siguiente mensaje 

Error codigo de barras: # 

Hora: HR: MIN: SEG DIA/MES/AÑO 

Datos tarjeta MLE 

incorrectos 

Seleccionar 

Introd. Manual del lote patrón……... 

Lectura automática 

1/16| BORRAR………. 

DEFECTUOSO O # DE CODIGO DE 

BARRAS




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CAL-02-B 



A B C …………..Z + 

Se debe verificar todos para ver cual es que 

esta mal 

Cuando llego al 16 / 16 se da un regreso de 

pantalla 

Datos de lote incorrectos 

¿ Editar de nuevo? 

Seleccionar SI ………. 

SI ………. 

NO ………. 

Se observa la siguiente pantalla 





Lista de lote patrón …………,… 

Dar un regreso de pantalla a la principal 






Seleccionar Pantalla de estado ……….. 

A Disponible ………………….. 

B Disponible ………………….. 

Visualizar temp…………. 

Seleccionar 


Temperatura 

Bandeja Conos 

A: # # 

B: # # 

Imprimir ……………. 


A Disponible ………………….. 

B Disponible ………………….. 


A o B en la charola que se desea trabajar




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CAL-02-B 

1 

2 

3 



Sección A 

# de cartuchos que puedes utilizar 

COMENZANDO …………. 

Selecciono el # 1 

Posición A1 

Seleccionar el # 1 

Programas a utilizar 

CH2 

CHB 

CDA2 

CDB 

S ……….…… 

C……….……. 

Test ……….… 

Dilución …..… 

ID Muestra .... 

Se S ………… Se tienen 2 standares 

Introducir el número de estándar (1-4) 

Posición A1 

S1 S ……….…… 

C……….……. 

Test ……….… 



Seleccionar Test …………... 

Para seleccionarla moverte con las fechas 

Seleccionar el que se va a utilizar 

Por favor, esperar 


Posición A1 

S1 Programa utilizado S……...……... 

C……….……. 

Test ……….… 



Paso a la siguiente posición




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CAL-02-B 



Seleccionar C …….. 

e introducir # controles 

Selecciono ID Muestra ………………. 

Posición # ID 

Nombre completo Borrar ….…… 

…….……. 

A Z M1 ……….… 

M2…...……. 

Moverse con las flechas 

No da espacios 

Cuando ya no se desea colocar otra muestra 

se busca el simbolo de pantalla siguiente 

Por favor, esperar 

Seleccionar Test …………... 

Seleccionar Borrar …………... 

Borar configuración de la posición……… 

Borar configuración de la sección……... 

Seleccionar 

Borar configuración de la posición……... 

Posición A # 

S1 Programa utilizado S……...……... 

C……….……. 

Test ……….… 



Se observa lo que se programo: 

Sección A 

1 Nombre de la Prueba S1 

2 Nombre de la Prueba S2 

3 Control C1 

4 Control C2 

Nombre completo del donador o paciente 

COMENZANDO …………...




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CAL-02-B 

1: 

2: 

3: 



Los frascos de los reactivos 

VIDAS HIV DUO 

C1 Control + 

VIDAS HIV DUO 

C2 Control - 

VIDAS HIV DUO 

S1 Estandar 

Agitar en el vortex 

Adicionar 100microlitros del reactivo 

correspondiente y colocar el cartucho en el 

orificio que tiene suero o plasma, cerrar la 

puerta A o B. Presionar 

COMENZANDO……………. 

Aparece en la pantalla lo siguiente: 

ID Técnico 

Seleccionar el # corresspondiente al nombre 

del Químico que esta realizando la prueba 

Código de barras………… 

Disponible ……………….. 

Visualizar temperatura …... 

Comenzando ………… 



RUN ………… 



INICIAR EL PROCESO




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VIRUS DE EPSTEIN BAAR 

VIRONOSTIKA EBV VCA IgM e IgG 

CAL-02-B 



Es un enzimoinmunoensayo ELISA para la determinación cualitativa y semicuantitativa 

de anticuerpos IgM o IgG frente al Antígeno de la Cápside del Virus Epstein Barr en 

suero o plasma humano. Esta indicado como ayuda en el diagnóstico de infección por 

EBV primaria o reactivada. 

El virus Epstein Barr es el agente etiológico de la mononucleosis infecciosa (MI) e 

interviene en el linfoma de Burkitt y en el carcinoma nasofaríngeo. 

El péptido p18 VCA, una proteína marcadora específica del VCA recién definida única 

del EBV, se utiliza en el Vironostika EBV VCA IgM junto con un anticuerpo monoclonal 

específico de p18 VCA como conjugado. Péptido formado po 56 aminoácidos 

codificados por la secuencia de inicio de lectura BRRF3. Para IgG se utiliza anti-IgG 

humana de cabra como conjugado. Péptido, bien caracterizado, está formado por 56 

amonoácidos codificados por la secuencia de inicio de lectura BRRF3. 

En IgM la técnica se fundamenta en el principio de captura de anticuerpos, los pocillos 

se hallan recubiertos de anticuerpo monoclonal contra IgM humano que constituye la 

fase sólida. En IgG la técnica se fundamenta en el principio de sándwich, los pocillos se 

hallan recubiertos con péptidos sintéticos p18 EBV VCA que constituye la fase sólida. 

RESULTADOS CUALITATIVOS 

IgM 

Los cálculos deben efectuarse por separado para cada soporte de tiras. 

Validez de la prueba 

Abreviaturas: 

Cal I: Absorbancia del calibrador I 

Cal II: Absorbancia del calibrador II 

Cal IV: Absorbancia del calibrador IV 

1. Cal I debe ser menor a 0,300 

2. Determinar el valor medio de Cal II (Cal IIx) 

Cal II debe ser mayor o igual a 0,75 Cal IIx menor o igual y 1,25 Cal IIx




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IgG 

CAL-02-B 



Si un (máximo de un ) replicado de Cal II no cumple esta condición, eliminar el 

más externo, y volver a calcular Cal IIx para la calificación de los replicados Cal II 

restantes. 

3. Cal IV - Cal IIx debe ser mayor a 0,600. 

Un ensayo es válido si se cumplen los criterio indicados anteriormente. 

Valor cutoff 

Si el ensayo es válido, el valor del cuoff= Cal IIx. 

RESULTADOS 

Una muestra es reactiva para anticuerpos IgM contra EBV VCA si la absorbancia de 

la muestra es mayor o igual del valor del cutoff. 

Una muestra es no reactiva para anticuerpos IgM contra EBV VCA si la absorbancia 

es menor del valor del cutoff. 

Los cálculos deben efectuarse por separado para cada soporte de tiras. 

Validez de la prueba 

Abreviaturas: 

Cal I: Absorbancia del calibrador I 

Cal II: Absorbancia del calibrador II 

Cal IV: Absorbancia del calibrador IV 

1. Cal II debe ser menor a 0,250 

2. Determinar el valor medio de Cal II (Cal IIx) 

Cal II debe ser mayor o igual a 0,75 Cal IIx menor o igual y 1,25 Cal IIx 

Si un (máximo de un ) replicado de Cal II no cumple esta condición, eliminar el 

más externo, y volver a calcular Cal IIx para la calificación de los replicados Cal II 

restantes. 

3. Cal IV - Cal IIx debe ser mayor a 0,750. 

Un ensayo es válido si se cumplen los criterio indicados anteriormente. 

Valor cutoff 

Si el ensayo es válido, el valor del cuoff= Cal IIx.




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CAL-02-B 

RESULTADOS 



Una muestra es reactiva para anticuerpos IgG contra EBV VCA si la absorbancia de 

la muestra es mayor o igual del valor del cutoff. 

Una muestra es no reactiva para anticuerpos IgG contra EBV VCA si la absorbancia 

es menor del valor del cutoff.




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CAL-02-B 



El Técnico de Serologia escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, calibradores (los 

pocillos no se pueden marcar ) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis. 


análisis ( la muestra puede ser plasma o suero). Se realiza una dilución 1:101 en un tubo previamente marcado (1ml del diluyente de 

muestras +10microlitros de la muestra) se homogeniza con la misma punta y la deja la punta dentro del tubo 

De la placa e deja la primera tira para puros controles y empezando con la segunda tira se coloca 100microlitros simultaneamente en la placa 

para IgM y en la de IgG de la dilución de la muestra. 

Se corrobora que los reactivos para las IgG e IgM estan bien identificados y se procede a colocarlos en los respectivos pocillos 

Coloco en los pocillo 100microlitros de cada CALIBRADOR 

para IgM que contienen: 

CALIBRADOR 1: 5 U 


CALIBRADOR 3: 80U 


POR DUPLICADO CADA CALIBRADOR 

EJEMPLO: 

POCILLO 1 y 2 CALIBRADOR 1 




(por eso se deja una linea para calibradores) 

Tapo las placas con cinta ahesiva y se pone a incubar durante 1 hr. a 37 C 

Prepara una solución Buffer de fostatos 1:25 (480ml de agua destilada + 20ml de Buffer de fostatos) y con ella realizo el lavado. 

Lavo con el LP 35 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR (Programa 5 con 4 cliclos) 

CONJUGADO PARA IgM 

El conjugado que se va aprepar a continuación requiere como minimo 

10 min para su preparación por lo que se debe ´prepara con 

anterioridad para que se encusntre homogenizado a la hora de 

colocar en los pocillos. 

PREPARACION DEL CONJUGADO: 

En el frasco que contiene la solución de reconstituyente de conjugado 

adiciono 5ml de la solución reconstituyente de conjugado y pongo a 

agitar hasta que se encuentra homogeo. Cuando se encuentra 

totalmente resuspendido se agregan 100microlitros de conjugado. 

Tapo las placas con cinta ahesiva y se pone a incubar durante 1 hr. a 37 C 

Coloco en los pocillo 100microlitros de cada CALIBRADOR 

para IgG que contienen: 





POR DUPLICADO CADA CALIBRADOR 

CONJUGADO PARA IgG 

PREPARACION DEL CONJUGADO: 

Para dos tiras aproximadamente 

Se toman 2.5ml de diluyente de conjugado y se mezcla con 

50microlitros de conjugado, y se homegeniza y se agregan 

100microlitros de conjugado 

Lavo con el LP 35 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR (Programa 5 con 4 cliclos) 

Se adicionan 100microlitros de TMB y se deja a temperatura de entre 18-.22 C durante 30 min. y se para la reacción con 200microlitros de 

solución de acido sulfurico 1N 

Una hora despues se realiza la lectura aen el LP 400 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR a 450nm




ISBN: 978-968-9170-17-4 


EQUIPO MINI VIDAS 

CAL-02-B 



Se utiliza para realizar las siguientes pruebas: 

Elisa de 4ta Generación, detecta Ag p24 y Ac HIV-1/2 

En paciente con T.M.O. para Citomegalovirus y Toxoplasmosis.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



SANOFI DIAGNOSTICS PATEUR LP 35 

El equipo SANOFI DIAGNOSTICS PATEUR LP 35 se enciende con el interruptor que se encuentra en la 

El equipo tiene 3 botes: 1. Solución de lavado, 2. Agua destilada y 3. Desechos 

Primero se realiza el mantenimiento: 

En la pantalla se observa los siguiente: 

WASH? N/ 

WASH PARM? 

RIUSE? Y/ 

WASH? 

W/TEST NUM:01? 

Y/ 

WASH? 

W/CYCLES NUM: 04? 

Y/ 

WASH? 

W/STRIPS NUM:04? 

Y/ 

WO1/ CYC:4/ST:04? 

Y/ 

Se cambian las mangueras a la solución de lavado 

Lavado de la muestra 

WASH? 

W/TEST NUM:01? 

Y/ 

WASH? 

W/CYCLES NUM: 05? 

Y/ 

WASH? 

W/STRIPS NUM:04? 

Y/




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



ESPECTROFOTOMETRO SANOFI PASTEUR LP 400 

El Equipo SANOFI PASTEUR LP 400 se enciende con el interruptor que se encuentra en la parte del frente del 

equipo e inmediatamente checa los filtros. 

En la pantalla se observa los siguiente: 

SELF TEST REPORT 

ENTER 

LP 400 

(FAST) (START) (DATA) (ASSAY) (SETUP) 

Colocar la placa y presionar (DATA) 

DATA: SELECT DATA MANIP. FUNTION 

(IDENT) (LIST) (RECALC) ( DIR) (CLEAR) 

Presinar (IDENT) 

DATA/IDENT: ENTER ID KEYS/BARCODE 

PLATE ID: 

Se escribe la fecha como identificación y se presiona 

(ENTER) 

DATA/IDENT: SELECT ASSAY (NUM/CURSOS) 

ASSAY NR: 

Presionar el # asignado a la prueba que desea realizar 

que va del 1 al 7 

Se observa en la pantalla # - Prueba seleccionada 

presionar (ENTER) 

DATA/IDENT: ENTER ID KEYS/BARCODE 

FIRST SAMPLE ID: 

Seleccionar el # 1 y presionar (ENTER) 

DATA/IDENT: TOTAL NUMBER OF SAMPLES 

n: 

Seleccionar el # de pocillos que desea que se lean 

(sin contar blanco, controles internos y externos), 

Teclear el # y dar un (ENTER) 

DATA/IDENT: INCREMENT FOR SAMPLE ID 

I= 

# DE 

Seleccionar el # 1 y presionar (ENTER)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



IDENTIFICACION 

# SAMPLES PUT ON 1 PLATE (S) 

Presionar (ENTER) 

LP 400 

(FAST) (START) (DATA) (ASSAY) (SETUP) 

Presionar (START) 

START: SELECT PLATE W/ CURSOR 

Nr. 1-ID: Fecha que puse como identificación - 

identified 

Presionar (ENTER) 

START: PRINTOUT INMEDIATELY? 

(YES) (NO) 

Presionar (YES) 

MEASURING 

450 620 

PRINTING 

ASSAY # (# de prueba)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Incubadora ABBOTT COMMANDER 

La incubadora ABBOTT COMMANDER se enciende con el interruptor que se encuentra en la 

parte de atras del equipo 

Se presiona el botón que indica la temperatura que se desea y se observa que aparece en la pantalla 

Se indica en cual carril se pondra el soporte que contiene la prueba y se presiona el # 

La pantalla se pone en ceros para que se especifique el tiempo a los que desea suene la alarma 

Una vez que se introduce la prueba se presiona el # de carril donde se metio y empieza a correr el tiempo 

Una vez que pasa el tiempo especificado suena la alarma y se puede sacar la placa introducida 

La bitácora de Resultados de Serologia CAL-13-A debido a su tamaño no se muestra 

dentro de este procedimiento. 

La bitácora de Resultados de Serologia CAL-13-A se llena de la siguiente manera: 

Fecha: Día, mes y año en que se realizó la toma de 

muestra. 

No.: Número asignado en toma de muestra. 

Disponente: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s) del 

donador. 

Para la valoración de los siguientes datos se toma en cuenta las especificaciones 

que se encuentran en la NOM-003-SSA2-1993. 

Hematología 

Hto: Hematocrito el valor es obtenido del equipo Sysmex. 

Hb: Hemoglobina el valor es obtenido del equipo 

Sysmex. 

Leu: Leucocitos el valor es obtenido del equipo Sysmex. 

Plq: Plaquetas el valor es obtenido del equipo Sysmex. 

Prot: Se deja el espacio vació.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Sistema ABO 

CAL-02-B 



Se especifica en el recuadro correspondiente la letra(s) del grupo sanguíneo o se 

palomea. 

A, B, AB, O: Tipos de Grupo sanguíneo del Sistema A,B,O del 

donador . 

A1, H: Subgrupos sanguíneos de A cuando el donador 

es del grupo sanguíneo A. 

(Ver procedimiento CAL- 25) 

Se especifica en el recuadro correspondiente la palabra del factor sanguíneo o se 

palomea. 

Pos. Factor sanguíneo positivo. 

Neg. Factor sanguíneo negativo. Cuando el Rh es negativo 

se realiza la confirmación en el sistema DianaGel anti- 

D (Ver procedimiento CAL- 25) 

D Se especifica si es negativo (-) o positivo (+) . 

Los siguientes datos se toman del formato F-A-14-23: 

D, C, E, e, c: Se realizan por medio del sistema DianaGel anti-D 

(Ver procedimiento CAL-25), los resultados de la 

lectura del fenotipo se reportan como positivo(+) o 

negativo (-) en el cuadro correspondiente. 

SRr La resultados de la lectura del fenotipo se lee en 

CAL-13-B. 

RASTREO DE Abi FSABO 

Este análisis se realiza a: 

Todas las mujeres donadoras. 

Personas politransfundidas. 

Como rutina el análisis se realiza con el REAGENT RED BLOOD CELLS FOR 

ANTIBODY DETECTION




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Post. Cuando el análisis de rutina es positivo se debe de 

realizar una prueba más especifica con los reactivos 

que son surtidos por el Banco de Sangre del Instituto 

Mexicano del Seguro Social (presenta fecha de 

caducidad). Para resultados positivos se palomea el 

cuadro o se escribe la palabra positivo y se 

establece la especie del mismo 

(Ver procedimiento CAL- 25) 

Negt. Cuando el análisis de rutina es negativo se palomea 

el cuadro o se escribe la palabra negativo 

(Ver procedimiento CAL- 25). 

Ab Se deja el espacio vació. 

HEMOLISINAS 

Este análisis se realiza solo a Personas con grupo sanguíneo O (Ver Procedimiento 

CAL- 25) 

Negt. Se palomea el cuadro cuando es negativo. 

Post. Se palomea el cuadro cuando es positivo. 

SEROLOGIA BASICA 

Las Pruebas serólogicas siguientes son realizadas a todas las muestras de los 

donadores y son reportan como: 

Reactiva Se sella con esta leyenda cuando se considera que el análisis de la 

muestra presenta una probable infección. Se realiza la Prueba confirmatoria con 

la 1era muestra y una ELISA con la segunda muestra 


Negativo Se sella con esta leyenda cuando no presenta la enfermedad (Ver 

procedimiento CAL- 26).




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Serologia básica: 

CAL-02-B 



VIH Detecta la presencia de anticuerpos contra el virus de Síndrome de 

Inmunodeficiencia Adquirida. 

AgsHB Detecta la presencia del Antígeno de superficie de la 

Hepatitis B. 

HCV Detecta el anticuerpo para la Hepatitis C. 

BRUCELLA Detecta el anticuerpo para la Brucella. 

V.D.R.L. Detecta el anticuerpo contra el Treponema pallidum. 

CHAGAS Detecta el anticuerpo contra el Tripanosoma cruzi. 

Diferentes técnicas para realizar la detección: 

HAI 

ELISA 

Los siguientes análisis se realizan en los siguientes casos: 

Pacientes en tratamiento de medula ósea. 

Pacientes o donadores con solicitud de Médica. 

CMV Citomegalovirus 

IgM Inmunoglobulina M 

IgG Inmunoglobulina G 

TOXO Toxoplasma 

IgG Inmunoglobulina G 


EVB Virus Eimtein Barr 


IgG Inmunoglobulina G




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Pruebas confirmatorias: 

CAL-02-B 



WB I Para detectar anticuerpos para H.I.V.1 

WB II Para detectar anticuerpos para H.I.V.2 

RIB Para detectar anticuerpos para H.C.V. 

CONFIRMATORIAS 

NEUTRALIZACIÓN Prueba confirmatoria para Hepatitis B. 

Ag BLANCO Prueba confirmatoria para Brucella 

MERCAP Prueba confirmatoria para Chagas 

TP/PA Prueba confirmatoria para Sifilis 

PBS. ESPECIALES 

Citometría Pruebas especificas de Control de calidad. 

CD34 Pruebas especificas de Control de calidad 

Carga viral Pruebas especificas de Control de calidad. 


OBSERVACIONES: Para escribir más información sobre el análisis de la muestra. 

REALIZO: Escribir la rubrica o poner el sello de las personas que llena la bitácora. 

Al finalizar el llenado de la bitácora el personal de Serología debe incluir el siguiente 

sello con la información que se le solicita para cada Enfermedad que fue analizada.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 



La Bitácora de resultados de Serologia CAL-13-A se guarda durante 1 año en 

archivo activo y 1 año en archivo muerto. 





Suplentes: ____________________________________ 

Suplentes: ____________________________________ 

Suplentes: ____________________________________




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de almacenamiento de los 

productos obtenidos de la Sangre Total 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Ninguno 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

15/08/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




Una vez que se ha llevado a cabo el fraccionamiento de la muestra (Ver 

procedimiento CAL-21) y etiquetado se requiere guardar cada uno de los 

productos de la siguiente manera para su adecuada conservación: 

PRODUCTO 

TEMPERATURA 

DE 

CONSERVACION 

Concentrado de Eritrocitos +1 a +6 C 

Concentrado de Eritrocitos leucorreducido prealmacenamiento +1 a +6 C 

Concentrado de Eritrocitos lavados (con solución salina al 0.9%) +1 a +6 C 

Concentrado de Plaquetas +20 a +24 C* 

Plasma fresco -18 C o menor ** 

Plasma envejecido -18 C o menor ** 

Crioprecipitado -18 C o menor ** 

Es recomendable irradiar las unidades de sangre y componentes sanguíneos 

celulares, con una dosis mínima de 1,500 cGy (1,500 rads) para reducir el riesgo 

de enfermedades injerto contra huésped, en los receptores que se encuentren en 

los casos siguientes: 

a) Fetos receptores de transfusiones intrauterinas; 

b) Exsanguineotransfusión en prematuros y en recién nacidos de peso 

corporal inferior a 1,000g; 

c) Pacientes seleccionados inmunocomprometidos; 

d) Receptores que han sido sometidos a trasplante de médula ósea; 

e) Receptores de unidades provenientes de familiares consanguíneos de 

primer grado.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




La sangre o componentes celulares irradiados puede ser aplicados a receptores 

inmunológicamente normales. Los CE irradiados después de 5 días se deben de 

lavar. 

La temperatura de los refrigeradores, congeladores e incubadoras que almacenan 

sangre, componentes sanguíneos, muestras o reactivos, se deberán registrar 

cuando menos cada ocho horas, aunque tengan graficador automático y un 

sistema de alarma audible. Los equipos sin indicador de temperatura, deberán 

tener en su interior un termómetro, en caso de refrigeradores y de utilizarse 

termómetros de laboratorio, el bulbo de éste deberá estar sumergido en glicerina 

al 10% y, tratándose de congeladores, en glicerina al 50%. 

La vigencia máxima del Concentrado de Eritrocitos y Concentrado de Eritrocitos 

pobre en leucocitos a partir de la recolección depende del sistema y del 

anticoagulante: 

Para sistemas cerrados son: 

ANTICOAGULANTE VIGENCIA MAXIMA 

Heparina 2 días 

ACD 21 días 

CPD 21 días 

CPDA-1 35 días 

ACD-SAGMANITOL 42 días 

CPDA-MANITOL 45 días 

Para sistemas abiertos, bajo condiciones de esterilidad (dentro de la campana 

de flujo laminar), la vigencia máxima será de 24 hrs conservándose entre +1 y 

+6 C y de 4hrs. si se conserva entre +20 y +24 C (Las unidades que se 

conservan en congelación mantienen el periodo de vigencia según el 

producto): 

La vigencia máxima del Concentrado de Eritrocitos lavados a partir de la 

recolección es de 4 hrs, a partir de su preparación.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Las plaquetas por fraccionamiento y por Aféresis podrán conservarse durante 5 

días a +20 y +24 C y agitación constante. 

El Plasma Fresco Congelado, el Plasma sin Factor tiene una duración de 1 año 

a –35° C 

El Plasma envejecido tiene una duración de 1 años a –18 C y entre +1 y +6 C 

de 26 días (con ACD o con CPD); 40 días (con CPDA ) 12 meses. 

El Plasma fresco tiene una duración de 12 hrs, una vez descongelado. 

El Crioprecipitado a –18 C o menor tiene una duración de 1 año y de 6 hrs, 

una vez descongelado. 

**El factor VIII de la coagulación que contiene el crioprecipitado se preserva 

mejor cuando el plasma fresco y crioprecipitado se conservan a temperatura de 

–30 C o menores. 

Los productos se acomodan por grupo, y orden numérico, del menor al mayor, de 

derecha a izquierda y del frente hacia atrás 

REGISTROS 

Los Registro de temperaturas se guardan durante 5 años en archivo activo y 5 

años en archivo muerto. 


Químico: __________________________ 

Químico: __________________________ 

Químico: __________________________




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Laboratorista: __________________________ 







Técnico laboratorista: __________________________ 


Auxiliar laboratorista: __________________________ 

Auxiliar laboratorista: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:



Fecha: 26 JULIO 2006 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

1. Se modifica titulo del 


2. 


Procedimiento de recepción y entrega 

de los productos en el laboratorio 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

15/08/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




La solicitud y la entrega de los diferentes productos se realiza de la siguiente 

manera: 

El formato A-13-14-07 es llenado por el Médico tratante que solicita el producto y 

se muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El formato A-13-14-07 es llenado por el Químico, Laboratorista, Técnico del 

Laboratorio, (ocasionalmente el Médico) del Banco de Sangre que recibe, procesa 

y asigna el producto solicitado:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El formato M-3-0-21 es llenado por el Médico tratante que solicita el producto y se 

muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




La bitácora CAL-28-A es llenada por el Médico tratante, enfermera, solicitante o 

mensajero que pide el producto, por su tamaño no se muestra. 

La bitácora CAL-28-B se llena de la siguiente manera: 

Fecha: 

Registro de la unidad: 

Nombre del donador: 

Producto: 

Grupo sanguíneo: 

Volumen que contiene 

la bolsa del producto: 

Quien realiza el estudio: 

Compatibilidad: 

# de entrada: 

Registro del paciente: 

Nombre del paciente: 

Grupo sanguíneo: 

Día, mes y año en que se realiza lo solicitado 

# que se indica como Unidad en el paquete o # de 

frascos que se entregan. 

Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del 

donador. 

Tipo de producto que se solicito (CP, CE, PFC, 

Albúmina, Factor VIII y IX. 

Tipo de sangre del donador (A, B, AB u O) y 

Factor Rh. 

Cantidad en unidades o mililitros que contiene 

la bolsa 

Personal del área de Inmunohematologia que 

realiza el estudio o la separación del producto, etc. 

El resultado que dio la prueba de compatibilidad 

# consecutivo solicitud el producto. 

# que fue designado por la institución en su 

credencial de afiliado. 

Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del 

paciente 

Tipo de sangre del donador (A, B, AB u O) y Factor 

Rh.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Servicio al que pertenece: 

Cama: 

Fecha: 

Hora: 

Volumen: 

Nombre: 

Nombre: 

# de egreso: 

REGISTROS 

CAL-02-B 




Área o servicio que solicito el producto. 

# de cama donde se encuentra el paciente. 

Día, mes y año en que se egresa el producto. 

Hora de egreso del producto. 

Cantidad que se le entrega de producto. 

Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s), 

clave o sello personal de la enfermera o mensajero 

que recibe el producto. 

Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s), 

clave o sello personal del Laboratorista, Químico, 

Técnico que entrega el producto. 

# consecutivo de entrega el producto (con la letra 

asignada según el turno). 

La bitácora CAL-28-A se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el 

archivo muerto. 

La bitácora CAL-28-B se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el 


El formato A-13-14-07 se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el 


El formato M-3-0-21 se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el 

archivo muerto.




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




Químico: __________________________ 

Químico: __________________________ 

Químico: __________________________ 







Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________ 

Suplentes: __________________________



Fecha: 10 junio 2011 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: IRMA GUTIERREZ 

Firma: 

Fecha: 27 JUNIO 2011 


Procedimiento para valoración de venas y somatometría 

Revisado por: 

Nombre: DRA. MARGARITA 

LETICIA MEDINA MACIAS 

Firma: 


Aprobado por: 

Nombre: DRA. DINORA 

AGUILAR ESCOBAR 

Firma: 

Fecha: 10 JUNIO 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Se agrega el sistema informático de 

banco de sangre y el sistema Kanban 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

10/06/2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Una vez que el donador ha sido registrado (Ver procedimiento CAL-20) se procede 

de la siguiente manera 

La Enfermera toma del Kanban ubicado en el área de recepción la 

ficha de identificación del donador M-3-0-23 ó M-3-0-10-a (Historia 

clínica en proceso manual) con número de control interno de 

ingreso a recepción 

De la ficha de identificación del donador M-3-0-23 observa el 

nombre completo del candidato a donador, lo llama y le indica que 

pase a la sala donde se le realizará la valoración de sus venas y 

somatrometría 

La enfermera solicita al candidato a donador se suba a la báscula 

para tener su peso, pregunta su estatura o lo mide y los registra en 

la parte inferior del formato M-3-0-23 ó M-3-0-10-a si es manual 

Pide descubra y extienda ambos brazos para valorar sus venas e 

indicar con una M el sitio de toma de muestra 

no 

El donador presenta alguna 

herida o tatuaje 

no 

¿El donador tiene mala 

calidad de venas? 

Pregunta y revisa si tiene algún dibujo, herida o tatuaje (menos de 1 año de 

realizado) NOM 003-SSA2-1993 

Se toma temperatura tensión Arterial (TA), Frecuencia Respiratoria 

(FR), Frecuencia Cardiaca (FC) 

Se registran los resultados en la parte inferior de el formato M-3-0-10-a ó en la 

Historia clínica M-3-0-10-b inciso L, cuando es proceso manual y firma de 

responsable. 

Observa si los valores se encuentran dentro de los límites establecidos 

por la especificaciones indicada en la norma NOM-003-SSA2-1993, 

ingresa estos datos al sistema informático de banco de sangre 

si 

Valores OK? 

Deja en el Kanban del área de toma de muestras la ficha de 

identificación con formato M-3-0-23, y la historia Clínica con 

formato M-3-0-10 sólo en proceso manual, para continuar con la 

Valoración médica (Ver Procedimiento CAL-40) 

no 

si 

si 

Se descarta al 

candidato como 

donador 

y se avisa a Trabajo 

social y al Médico 

para que le indique 

la causa del 

rechazo, el médico 

la anota en ficha de 

Identificación con 

formato M-3-0-23. 

Médico pasa a 

Trabajo social la 

ficha de 

Identificación con 


para que haga 

evaluación social y/ 

o reprogramación 

de cita




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La Ficha de Identificación del donante (M-0-3-0-23) en donde se registran los 

datos de enfermería se encuentra en la parte inferior en donde dice uso exclusivo 

de enfermería y se muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La ficha de identificación del donador (M-3-0-23) cuando el sistema es manual se 

muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Cuando el procedimiento es manual se registra en La Historia clínica de 

candidatos a donación M-3-0-10-b inciso L) EXPLORACION FISICA y se muestra 

a continuación.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



En el formato electrónico de historia clínica, se registran los datos de 

somatometría por el personal de enfermería y se muestra a continuación: 

El formato M-3-0-10-b se inciso L) EXPLORACION FISICA y el formato M-3-0-23 

se llenan de la siguiente manera: 

Peso: Cantidad en Kg que pesa el candidato a donar. 

Talla: La estatura que indica el candidato. 

FC: Frecuencia Cardiaca (Latidos por minuto) que presenta el 

candidato.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FR: Frecuencia Respiratoria (Respiraciones por minuto) que 

presenta el candidato (puede tomar la mitad del tiempo y 

calcularlo). 

T/A: Tensión Arterial que presenta el candidato. 

Temperatura: Temperatura que indica el termómetro colocado debajo del 

brazo izquierdo del candidato 

Nota: El formato M-3-0-23 debe estar lleno previamente por la recepcionista con 

los datos generales y el consentimiento informado firmado por el donador 

(Ver procedimiento CAL-20). En caso manual los candidatos a donar 

llenarán la ficha de identificación y la recepcionista revisará que los datos 

estén completos. 

REGISTROS 

M-3-0-23 Ficha de identificación del donante apto se debe almacenar en el archivo 

activo durante 5 años y en el archivo muerto 5 años. (NOM-003-SSA2-1993). 

Cuando es rechazado se almacena su registro por 3 meses (NOM-003-SSA2- 

1993). 

Sistema informático de banco de sangre.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Se modifica el flujo grama del proceso 

que se lleva a cabo en el Banco de 

Sangre 

REVISIÓN 

03 

FECHA 

16 ENERO 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





El Banco de sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo, la selección 

de los candidatos a donación, y posteriormente el procesamiento de la sangre bajo los 

estándares de calidad aplicables. 

El flujo grama de la operación que se lleva a cabo es el siguiente:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




EXTRACCIÓN DE 

SANGRE, 

(Flebotomía CAL-46) 

FRACCIONAMIENTO 

(CAL-21) 

LIBERACION: 

DETERMINACION DE 

GRUPO SANGUINEO Y 

ANTICUERPOS (CAL-25) 

SEROLOGIA (CAL-26) 

NAT (CAL-71) 

ALMACENAMIENTO 

(CAL-27) 

CITA PARA DONACIÓN (CAL-11) 

REGISTRO de los donadores (CAL- 

20) 

VALORACIÓN DE VENAS Y 

SOMATOMETRÍA ( CAL-30) 

ENTREGA DE 

COMPROBA 

NTE 

(CAL-31) 

PRUEBAS DE 

COMPATIBILIDAD (CAL-31) 

TOMA MUESTRA ( CAL-43) 

VALORACIÓN MÉDICA (CAL-40) 


SANGRE, 

(Aféresis CAL-50) 

LIBERACION: 

DETERMINACION DE 

GRUPO SANGUINEO Y 

ANTICUERPOS (CAL-25) 


NAT (CAL-71) 

ALMACENAMIENTO 

(CAL-27) 

ENTREGA DE PRODUCTOS 

(CAL-28 ) 


SANGRE, 

(RCSP CAL-52) 

LIBERACION: 

DETERMINACION DE GRUPO 

SANGUINEO Y ANTICUERPOS 

(CAL-25) 


CUANTIFICACION Y 

VIABILIDAD CELULAR 

(CAL-66) 

CRIOPRESERVACION 

(CAL-77)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Para cada proceso del diagrama anterior, existen procedimientos documentados que 

describen la forma de llevarlos a cabo (Ver lista maestra de documentos CAL-02-A) 

REGISTROS 

No existen registros asociados a este procedimiento



Fecha: 3 de Nov de 2003 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de control de sangre recibida 

de otros hospitales 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

ninguno 




REVISIÓN 

00 

FECHA 

03/11/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




La trabajadora social ó el personal del laboratorio del Banco de Sangre del INP, 

solicita vía telefónica a otro banco de sangre los hemocomponentes que se 

necesiten de acuerdo a la valoración por el médico adscrito o el jefe del servicio. 

Una vez que se consigue el apoyo de alguna institución, se elabora el formato 

F-A-14-29 (original y 2 copias), y se solicita al Servicio de Ambulancias que traiga 

los hemocomponentes. 

El personal del Banco del INP (Inmunohematología) entrega un recipiente 

adecuado para traslado de los hemocomponentes, así como el formato F-A-14-29 

al personal de ambulancias. 

El personal de ambulancias recoge los hemocomponentes en el banco de sangre 

de la institución otorgante, entregando el original y copia del formato F-A-14-29, 

el banco de sangre externo sella el acuse y entrega relación del producto o 

productos solicitados con el certificado de serología negativa. 

El personal del Banco de Sangre del INP recibe los hemocomponentes junto con 

una copia del formato F-A-14-29 revisa que los hemocomponentes traigan todos 

los datos requeridos como son: 

Nombre del donador 

Registro 

Grupo Rh 

Fecha de extracción 

Fecha de caducidad 

Volumen 

Evidencia de serología negativa 

El personal del laboratorio verifica el estado físico del producto recibido para 

determinar si éste se acepta o no (rechazando productos que no estén con una 

temperatura adecuada de transportación, hemolizados, lipémicos, el volumen 

debe corresponder al indicado en la etiqueta de la bolsa y debe traer una muestra 

piloto para realizar las pruebas serológicas aplicables). 

Si el producto cumple con los requisitos, se acepta, en caso contrario se regresa.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




En caso de aceptación se da ingreso en la Libreta de Ingresos y Egresos del 

Banco de Sangre del INP registrando la serologia y se toma la muestra piloto para 

realizar pruebas serológicas. 

El formato F-A-14-29 se muestra a continuación, (La copia se entrega al personal 

administrativo para que lo archive). 

Solicitud de: 

C. Dr. (a) __________________________. 

Director o Jefe del Banco de Sangre Del 

__________________________________ 

P R E S E N T E , 

Por este medio me permito solicitar a ustedes los siguientes productos: 

SANGRE TOTAL 

PAQUETE GLOBULAR 

c.c.p. Banco de Sangre 

F-A-14-29 

Instituto Nacional de Pediatría 

Insurgentes Sur 3700-C 

PLASMA FRESCO CONGELADO 

PLASMA RICO EN PLAQUETAS 

CONCENTRADOS PLAQUETARIOS 

GLOBULINA ANTIHEMOFÍLICA 

OTRAS SOLICITUDES: 

BANCO DE SANGRE 

PRODUCTOS SANGUINEOS 

México, D.F., a ____de ______________ de ______. 

POSITIVO 

NEGATIVO 

POSITIVO 

NEGATIVO 

POSITIVO 

NEGATIVO 

POSITIVO 

NEGATIVO 

POSITIVO 

NEGATIVO 

POSITIVO 

NEGATIVO 

A T E N T A M E N T E 

JEFE DEL BANCO DE SANGRE 

Folio:____________ 

O A B AB 

Agradeciendo de antemano su atención, aprovecho este para enviarle un cordial 

saludo.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




REGISTROS 

El formato F-A-14-29 se almacena por cinco años pasados los cuales se puede 

desechar.



Fecha: 12 enero 2012 



Procedimiento de citas para donación 

CAL-02-B 


Nombre: LIC. TS ANA 

MARÍA DORANTES CEH 

Firma: 

Fecha: 12 Enero 2012 

Revisado por: 

Nombre: DRA. MARGARITA 

LETICIA MEDINA MACÍAS 

Firma: 


Aprobado por: 

Dra. DINORA AGUILAR 

ESCOBAR 

Firma: 

Fecha: 12 Enero 2012





CAL-02-B 

CAMBIO 

1.- Se puntualizan los 3 tipos de cita. 

2.- Se modifica el tiempo de tolerancia 

en las citas para donar sangre en 

concordancia con el folleto. 

3.- Se puntualizan algunas 

excepciones de las personas que no 

pueden donar que no incluye el folleto 



REVISIÓN 

05 

FECHA 

12 Enero 2012






CAL-02-B 



El Personal de Trabajo Social del Banco de sangre del Instituto Nacional de 

Pediatría lleva a cabo el siguiente proceso para proporcionar una cita para 

DONACION a las personas que lo soliciten en base a los siguientes lineamientos: 

1.- Horarios para programación de cita para donación: Se programaran las citas a 

los familiares de los pacientes que acuden al Banco de Sangre en los siguientes 

horarios: 11:30 am y 12:30 pm. 

2.- Se otorgaran 200 minutos de tolerancia para recibir familiares de pacientes a 

programación de citas. 

3.- A su ingreso al Banco de Sangre el vigilante otorgará una ficha numerada para 

establecer el orden de ingreso. 

4.- La trabajadora social asignada al área de selección de disponentes atenderá a 

los familiares por grupos según el horario de ingreso al Banco de Sangre y les 

impartirá una plática de orientación y sensibilización para la donación de sangre. 

5.- El contenido de la plática impartida por la trabajadora social es el siguiente: 

5.1 Presentación 

5.2 Documentos necesarios para solicitar cita. 

5.3 Importancia de la donación de sangre segura. 

5.4 Promoción de la donación altruista 

5.5 Documentos que necesita tener el donador el día de su cita. 

5.6 Características físicas y de salud que debe reunir el candidato a donador. 

Se exceptúan a las personas sordomudas o que hablen un dialecto ya que implica 

dificultad para la comunicación con el personal que presta la atención y esto afecta 

la confiabilidad de los resultados.





CAL-02-B 



5.7 Beneficios de donar sangre (estudios de laboratorio como grupo sanguíneo y 

serología, un examen médico). 

5.8 Donación de sangre y/o aféresis 

5.9 Programación de citas 

La Trabajadora social solicita la Hoja de Hospitalización u orden de 

cirugía (Ver tabla A ) 

Llena el folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? Con los 

datos de la solicitud de donación 

y anota en la bitácora de citas CAL-11-A los datos solicitados 

ocupando el # de espacios de citas de donadores que les corresponda 

cubrir. 

En base a la situación social del paciente asigna el día de la cita , 

considerando diagnóstico y servicio donde se atiende al paciente . En 

el Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría se manejan 

tres tipos de citas: CITA ABIERTA, CITA PROGRAMADA y CITA 

PROGRAMADA DE URGENCIA (Ver abajo descripción de cada tipo 

de cita. 

Verifica con el solicitante los datos del paciente registrados en el 

folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? , confirma la cita 

para la donación y le indica leer el folleto Información importante para 

la donación sanguínea (Ver procedimiento 

CAL-20) para conocer los requisitos para ser donador. 

Le recuerda que debe traer los folletos el día de la donación , además 

de su identificación personal con fotografía y vigente . 

FIN





CAL-02-B 



TIPOS DE CITAS 

En el Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría se manejan tres 

tipos de citas: 

CITA ABIERTA. Trabajo Social asigna a familiares de pacientes con base en 

los siguientes criterios: 

a. Pacientes foráneos 

b. Diferimiento o rechazo en más de una ocasión de donadores 

c. Sin redes de apoyo 

El plazo para traer a sus donadores no será mayor a dos semanas. 

CITA PROGRAMADA (Cita que Trabajo Social asigna con una fecha y hora 

determinada). 

CITA PROGRAMADA URGENTE. Se solicitan más donaciones de acuerdo a 

los requerimientos del paciente, a pesar de haber cumplido con las dos 

donaciones. Deberán acudir a la brevedad posible (plazo no mayor a una 

semana) ya que se requieren de forma inmediata para cubrir las necesidades 

transfusionales del paciente. 

MANEJO DE PRÓRROGAS 

Trabajo Social del Departamento de Banco de Sangre proporciona prórrogas a los 

familiares de los pacientes cuando: 

1. Se adelanta fecha de cirugía. 

2. Se da a los familiares fecha inmediata para la cirugía del paciente (en las 

siguientes 24 hrs.) 

MANEJO DE CONDONACIONES 

Ver procedimiento CAL-63 para manejo de condonaciones por el Banco de 

Sangre





CAL-02-B 



IMÁGENES DE FORMATOS RELACIONADOS CON ESTE PROCEDIMIENTO 

El Folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre?





CAL-02-B 



Información importante para la donación sanguínea” También es entregada al 

donador, y se muestra a continuación:





CAL-02-B 


Procedimiento de citas para donación





CAL-02-B 



Tabla A. Donadores solicitados. 

SERVICIO EN QUE SE ATIENDE NO DE DONADORES 

AL PACIENTE 

SOLICITADOS 

Cirugía ambulatoria 1 

Cateterismo cardiaco 1 

Cirugía cardiovascular 4 ó más 

Estancia en áreas críticas 2 ó más 

Cirugía programada 2 

Hospitalización 2 

Transplante de Células 

Progenitoras Hematopoyéticas 

10 ó más 

Cirugía ambulatoria y cateterismo cardiaco: Se solicita una donación de 

sangre, esta se debe de realizar antes de la cirugía o el mismo día dependiendo 

el caso. SOLO EN ESTE CASO TRABAJO SOCIAL DEL BANCO DE SANGRE 

DA PRORROGAS PARA QUE SE CUBRA POSTERIORMENTE LA DONACIÓN, 

en caso de que la cirugía o cateterismo se haya realizado de manera urgente y se 

solicita realizar la donación un tiempo no mayor a una semana. 

Cirugía cardiovascular: Cirugía cardiovascular requiere 3 donadores de sangre 1 

de plaquetas el día de la cirugía, en caso necesario se solicita un mayor número 

de donadores según los requerimientos del paciente. 

Estancia en áreas críticas (Urgencias, Terapia Intensiva), Cirugía 

programada, Hospitalización: Se solicitan dos donaciones de sangre, con 

variaciones de acuerdo a los requerimientos del paciente. 

Trasplante de células progenitoras hematopoyéticas: Se solicitan 10 

donadores de plaquetas aptos quienes iniciarán el proceso de donación antes del 

trasplante y se programan de acuerdo a las necesidades del paciente y puede 

haber modificaciones de acuerdo a los requerimientos transfusionales del 

paciente.





CAL-02-B 



El folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? se debe llenar de la 

siguiente manera: 

DATOS DEL PACIENTE PROPORCIONADOS POR EL 

DONADOR: 

Nombre del paciente: Nombre completo del paciente para el que va a 

realizar la donación 

Número de expediente: Número de Expediente asignado por el INP 

(equivale al # de registro). 

Servicio: Especialidad en la que se esta tratando el 

paciente. 

Cama: # de cama en que se encuentra el paciente 

hospitalizado para quien se solicita la donación 

PARA USO EXCLUSIVO DEL BANCO DE SANGRE: 

Número de donadores: Número de donadores que se solicitan según sea 

el caso (Ver tabla A) 

Fecha de la donación: Fecha de la cita para asistir a la donación 

Hora de la cita: Hora de la cita para la donación 

La Bitácora de citas CAL-11-A contiene lo siguiente:





CAL-02-B 



BITÁCORA DE CITAS 

Fecha: 

No./Hora Nombre Registro Servicio #de 

donadores 

La Bitácora de citas CAL-11-A se llena de la siguiente manera: 

CAL-11-A 

Fecha Observaciones 

Fecha: Día, mes y año en que está citado el candidato a donador. 

No. / Hora: # consecutivo del día y hora de su cita. 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del paciente. 

Registro: # de registro del paciente asignado por el INP. 

Servicio: Especialidad donde se encuentra el paciente. 

# De donadores: # de donadores solicitados. 

Fecha: Día y mes en que se da la cita. 

Observaciones: Cualquier observación que se considere relevante.





REGISTROS 

CAL-02-B 



Bitácora CAL-11-A (Libreta programación de citas) se almacena en el archivo del 

área de recepción durante 1 año. 

Bitácora CAL-20-A (Registro de donadores) se almacena 3 meses después de que 

completa el llenado de todas sus hojas.



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: 

Dr. Ismael Hernández 

Montiel 

T.S. Ana María Dorantes 

Ceh 

Firma: 



Procedimiento de Entrega de resultados 

Revisado por: 

Nombre: 

Dra. Margarita Leticia 

Medina Macías 

Firma: 


Aprobado por: 

Nombre: 

Dra. Dinora V. Aguilar 

Escobar 

Firma: 

Fecha: 10 Enero 2012



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Se establece el mismo tiempo de 

entrega de resultados después de la 

donación de sangre y de aféresis 

Se actualiza el formato electrónico de 

entrega de resultados 

Se cambia plazo de almacenamiento 

en archivo activo y muerto de la 

Bitácora CAL-13-A 



REVISIÓN 

FECHA 

3 10/01/2012 

3 10/01/2012 

3 10/01/2012



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Una vez que al donador se le ha realizado el Sangrado o el Procedimiento de 

Aféresis (Ver Procedimiento CAL-46 o CAL-50) se le informa que podrá recoger 

los resultados del análisis de la muestra personalmente a los 8 días posteriores a 

la donación. El día de entrega de resultados se procede de la siguiente manera: 

La recepcionisa solicita identificación y fecha en que realizó donación de sangre (verifica que 

coincida la fotografía de la identificación, con la persona presente) y le pide que se registre en 

la bitacora de entrega de resultados CAL-13-A 

En el sistema de cómputo, la recepcionista ingresa apellidos para localizar Resultados de 

Serología (siempre que sean negativos), imprime los resultados, y sube con el químico para 

que los avale con su firma. 

De manera manual, La recepcionista, sube al laboratorio para copiar los datos de la libreta de 

Serología (siempre que sean negativos) al formato F-A-14-07; Procede a transcribirlos a 

máquina para que el químico los avale con su firma. 

SI 

La recepcionista detecta serología positiva en 

el sistema de cómputo o en la libreta de 

Serología, e informa al médico responsible y 

al químico de laboratorio 

Químico informa al médico 

responsible de Sero- 

Positivos 

La serología es 

positiva? 

Médico le solicita a Trabajo Social que localice al donador 

Trabajo social trata de localizar vía telefónica al donador para 

informarle la necesidad de una 2da. muestra para completar 

estudios (se realizan 3 llamadas en un lapso de 1 mes para 

tratar de localizar al donador en caso de no ser posible se 

canaliza el caso al Servicio de Epidemiología) 

Cuando el donador acude a 2da. Muestra por haber 

obtenido un resultado REACTIVO de su muestra 

El médico habla con el donador para comentar que se requiere 

otra muestra de su sangre para completar estudios, se toma 

2da, muestra y se da “Cita en una semana para entregar 

Resultados” 

En laboratorio se realiza la prueba de ELISA 

NO 

La recepcionista entrega resultados por escrito al donador . 

El donador firma de recibido en la bitacora de resultados 

CAL-13-A 

FIN



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Positivo: 

Cuando el análisis de la Prueba de rutina o tamizaje realizada a la 2da muestra 

es REACTIVA y la Prueba confirmatoria se encuentra dentro de los rangos 

considerados como POSITIVO, la muestra se determina como POSITIVA. 

Negativa: 

El resultado 

REACTIVO NEGATIVO 

puede ser 

Se realiza prueba confirmatoria 

de la cual podemos obtener los 

siguientes resultados 

Resultado 

INDETERMINADO 

Médico reporta como 

indeterminado, da cita en 

tres meses para otra 

muestra, se da seguimiento 

durante un año 

Brucella, chagas, 

VHC, VDRL, VHB 

Médico entrega resultados y 

refiere al donador a 

Epidemiología para que lo 

canalice a donde reciba 

atención. 

FIN 

Resultado 

POSITIVO 

Resultado 

NEGATIVO 

Cuando el análisis de la Prueba de rutina o tamizaje realizada a la 1era muestra 

es NEGATIVA dentro de los rangos considerados, la muestra se determina como 

NEGATIVA. 

VIH 

Médico refiere al donador a 

psicología para que sea 

sensibilizado, y el psicológo 

informa al médico cuando 

considera que el donador 

puede recibir la noticia. 

El médico en 

compañía del 

psicologo notifica el 

diagnóstico 

Médico notifica y explica 

posibles causas 

FIN



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Indeterminada: 

CAL-02-B 



Es cuando el resultado de la prueba No cumple con el 100% los criterios de 

interpretación. 

Opciones: 

PRIMERA MUESTRA SEGUNDA MUESTRA CONFIRMATORIA 

RESULTADO DE LA 

PRUEBA 

1era. Corrida: reactivo 

2da Corrida: reactivo 

(se corre tubo 

primario y tubo piloto) 

1era. Corrida: reactivo 

Reactiva 

Positiva 

Negativa 

Indeterminada 

Positiva 

Negativo 

Indeterminado (seguimiento 

del donador) 

2da Corrida: negativo 

Negativa 

1era. Corrida: 

negativo 

Negativa 

El formato de Entrega de Resultados F-A-14-07 se llena en la maquina de 

escribir de la siguiente manera: 

INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRÍA 


Resultado de los exámenes practicados al DONADOR: 

Nombre: 

Número de Registro: 

Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s) 

Número de la bitácora de egresos e ingresos. 

Grupo (ABO): Resultados obtenidos por medio del análisis de la 

muestra 

FACTOR RH (D): Resultados obtenidos por medio del análisis de la 

V.D.R.L., 

HUDDLESSON, 

ANTIGENO 

AUSTRALIA, 

muestra 

Resultados obtenidos en serología.



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


HEMOGLOBINA g.% 

y HEMATOCRITO: 

CAL-02-B 



Resultados obtenidos del equipo automatizado de 

biometría hemática. 

OTROS: Resultados de H.I.V.,CHAGAS y HEPATITIS C 

obtenidos en serología 

México, D,F., a: 

Clave, Nombre y 

Firma: 

Fecha en que se solicita el comprobante de donación. 

Del Jefe del Laboratorio o del químico responsable 

La Hoja de entrega de resultados F-A-14-07 que se obtiene del sistema 

informático de Banco de Sangre contiene lo siguiente: 



Donante: Nombre del donador 

Donación: No. De Unidad, Fecha 

Fenotipos: Resultado obtenidos por medio de análisis de la muestra 

Anticuerpos: Resultado obtenidos por medio de análisis de la muestra 

RESULTADOS ANALÍTICOS 

Hemoglobina Resultados obtenidos en el equipo automatizado de 

biometría hemática 

Hematocrito Resultados obtenidos en el equipo automatizado de 

biometría hemática 

Grupo Resultados obtenido por medio del análisis de la 

muestra del donador 

Rh Resultados obtenido por medio del análisis de la 


Hepatitis B Resultados obtenidos en serología 

Hepatitis C Resultados obtenidos en serología 

HIV 1-2 Resultados obtenidos en serología



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Sífilis Resultados obtenidos en serología 

Chagas Resultados obtenidos en serología 

Brucella Resultados obtenidos en serología 

NAT Hepatitis B Resultados obtenidos en Biología Molecular 

NAT Hepatitis C Resultados obtenidos en Biología Molecular 

NAT HIV Resultados obtenidos en Biología Molecular 

Proteínas Totales Resultados obtenido por medio del análisis de la 


Nombre y firma del Nombre y firma del Jefe del Laboratorio o del químico 

personal de laboratorio responsable



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de Entrega de resultados



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Fecha de 

solicitud de 

Resultados 

CAL-02-B 



BITÁCORA DE ENTREGA DE RESULTADOS CAL-13-A 

FORMA DE LLENAR LA BITÁCORA CAL-13-A: 

Fecha de solicitud 

de Resultados 

Nombre del 

Donador 


Donación 

Se anota la fecha en que acude el donador a 

solicitar resultados 


Fecha en que se realizó la donación 

NÚMERO UNIDAD Se anota el número de unidad que se le asignó 

Se entregaron 

Resultados 

Tipo de 

resultados 

Escritos 

Verbales 

Si:____ No:___ 

Causa _______ Se tacha el lugar que indique el tipo de resultados 

Si __ No: ____ 

Causa:____ 

entregados y la causa de este tipo de entrega de 

resultados 

Firma de Recibido Firma del donador de que recibió resultados 

Persona que 

entrega 


Donador 

OBSERVACIONES 


Donación 

NÚMERO 

UNIDAD 

Tipo de 

Resultados 

Escritos 

Verbales 

Se entregaron 

Resultados 

Si:_____ No:____ 

Causa: _________ 

Si:____ No:____ 

Causa:_________ 

Firma de 

Recibido 

Persona que 

entrega 

Nombre de quien integra resultados 

OBSERVACIONES 

Cualquier comentario acerca de si es reactivo, 

acude a segunda muestra, o dato importante del 

donador 

Nota: La Recepcionista entrega los resultados al donador en caso de que todas 

las pruebas serológicas sean negativas, de lo contrario el médico proporciona la 

información y plan a seguir al donador. 

___



Fecha: 10-01-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 



La Bitácora de Resultados CAL-13-A se guarda durante 1 año en archivo activo y 

5 años en archivo muerto.



Fecha: 7 Octubre 2009 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: Q.F.B. MARÍA 

TERESA FLORES 

CAMACHO 

Firma: 

Fecha:07 Octubre 2009 


Procedimiento de Calibración del CELLDYN RUBY 

Revisado por: 

Nombre: M en C GUILLERMO 

ESCAMILLA GUERRERO 

Firma: 

Fecha:14 Octubre 2009 

Aprobado por: 

Nombre: Dra. DINORA 

V. AGUILAR ESCOBAR 

Firma: 

Fecha: 

14 Octubre 2009

anco de Sangre Código: CAL-14 


Fecha: 7 Octubre de 2009 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Se actualiza procedimiento porque se 

cambió el equipo automatizado de 

Biometría Hemática 

REVISIÓN 

2 

FECHA 

7 Octubre de 2009




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Para poder realizar los análisis de la toma de muestra (Ver Procedimiento CAL- 

16) se requiere haber realizado una calibración previa del equipo CELLDYN 

RUBY para la que se procede de la siguiente manera:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CHECAR 

NUMERO DE 

LOTE Y 

FECHA DE 

CADUSIDAD 

SI 

PROC 

ESAR 

MUES 

TRA 

S 



FLUJOGRAMA PARA PROCESO DE CONTROLES 

VERIFICAR 

VALORES Y 

CURVA DE L- 

J 

PONER LOS 

TUBOS 15 

MIN A 

TEMPERATU 

RA 

AMBIENBTE 

NO 

INICIAR 

ASPIRA 

DO 

ROTAR LOS 

CONTROLE 

S CON LA 

MANO POR 

20 

SEGUNDOS 

PONER 

CONTROLES EN 

EQUIPO EN 

SISTEMA 

ABIERTO 

SELECSIONAN 

DO EL NIVEL 

DE CONTROL 

CHECAR 

CONTROLES Y 

REACTIVOS 

INVERTIR 

EL 

CONTROL 

Y ROTAR 

POR 20 

SEGUNDOS 

INVERTIR 

LOS 

CONTROL 

ES A LA 

DERECHA 

Y A LA 

IZQUIERD 

E CON LA 

MABNO 

POR 10 

SEG




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Las hojas de los resultados de la calibración se guardan en la carpeta CAL-14-A 

La carpeta CAL-14-A se llena de la siguiente forma: 

Fecha de calibración: Día, mes y año en que se realizo la 

calibración. (Impresa en la hoja de 

resultados. 

Control patrón de calibración usado: Indicar el lote y fecha de caducidad del 

control patrón de calibración. 

Persona que realiza la calibración: Nombre completo o sello de la persona 

que realiza la calibración. 

Nota 1: La Calibración se debe realizar todos los días antes de analizar las 

muestras. 

Nota 2: La bitácora se debe encontrar en el área de toma de muestra para su 

llenado. 

Nota 3: El control patrón de calibración tiene una fecha de caducidad pasada la 

cual se desecha y se cambia de control. 

REGISTROS 

La carpeta CAL-14-A se debe guardar durante al menos 1 año.



Fecha: 24 sep 2003 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de identificación de muestras 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:



Fecha: 7 de Octubre 2003 

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Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de Pruebas Inmunohematicas 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




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CAMBIO 

Se asigna el número de bitácoras de 

registro 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

7 de octubre 2003




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El Banco de sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo los siguientes 

procesos para proveer de sangre segura a los pacientes que la requieran: 

RECEPCION DE MUESTRAS 

GRUPO SANGUINEO (Sistema ABO & Rh) 

LECTINAS 

FENOTIPO (Rh & FSABO) 

COOMBS DIRECTO 

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES 

(COOMBS INDIRECTO) 

PRUEBA CRUZADA 

o OPCIONES DE TRANSFUSION 

RN 

TABLA DE NOM 

ALTGORITMOS: 

o PRUEBA CRUZADA INCOMPATIBLE 

o PRUEBA CRUZADA INCOMPLETA 

o REACCION TRANSFUSIONAL 

RPR / VDRL 

DESPLASMATIZAR PLAQUETAS 

LAVADO DE PAQUETES GLOBULARES 

SANGRE RECONSTITUIDA 

FILTRACION 

CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Y 

CELULAS 

ELUSION 

o ELU KIT 

o EGA KIT 

ADSORCION 

AGLUTININAS ANTI A & ANTI B




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Los métodos para realizar ensayos de aglutinación son: 

Método semiautomático 

Tubo 

Gel 

Método automático 

Gel 

Las pruebas de aglutinación establecen: 

HEMOLISIS: Indica una reacción positiva para la 

unión Antígeno – anticuerpo. 

AGLUTINACION: la presencia del par Antígeno y/o 

Anticuerpo complementarios relevante. 

NO AGLUTINACIÓN la ausencia de cualquiera de 

ellos. 

INTERPRETACION Y PUNTUACION DE LAS AGLUTINACIONES 

DESCRIPCION GRADO PUNTUACION 

Hemolísis total Ht 

Botón completo, sobrenadante claro 4+ 12 

Botón grande con algunos agregados, fondo claro 3+ 10 

Botón fragmentado en varios grumos grandes, fondo turbio 2+ 8 

Botón fragmentados en numerosos grumos regulares, fondo turbio 1+ 5 

Botón fragmentado múltiples grumos pequeños, fondo muy turbio +/- 1 

Aglutinación no visible negativo 0




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INTERPRETACION Y PONDERACIÓN DE LAS AGLUTINACIONES EN GEL 

NEGATIVO




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RECEPCION DE MUESTRAS 

Una vez que el Médico, enfermera o mensajero lleva la muestra a la ventanilla del laboratorio, el PERSONAL DE BANCO DE SANGRE, revisa que las 

muestras esten bien identificadas con el Nombre completo del paciente, registro, fecha y hora de toma de la misma; que la muestra sea la indicada 

para el analisis solicitado y que la solicitud tenga todos los datos requeridos. 

SI 

NO 

NO 

Se le indica al Médico, enfermera o mensajero que lleva la 

muestra anote en la Bitácora de Registro CAL-031-A los datos 

solicitados en el número consecutivo correspondiente. El 

PERSONAL DE BANCO DE SANGRE, asigna el número 

correspondiente a la entrada tomado de la Bitácora CAL-031-A 

en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original y copia) 

Discrepancia entre 

membrete de tubo 

con requisición 

Menor cantidad de 

la indicada 

1.- DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO 

Se retiene la muestra 

y la solicitud se rotula 

“MUESTRA MAL 

ETIQUETADA” 

Se solicita nueva 

muestra 

El PERSONAL DE BANCO DE 

SANGRE procede a centrifugar la 

muestra para trasvasar en tubos 

membretados con los datos del 

paciente, fecha y número de 

requisición, el plasma o suero y el 

paquete eritrocitario, para su 

distribución, almacenamiento o 

trabajo. 

La prueba consiste de dos etapas: 

Prueba directa o celular: eritrocitos problema 

desafiados contra antisueros comerciales de 

especificidad conocida 

Prueba inversa o sérica: suero problema desafiado 

contra eritrocitos de fenotipo conocidos




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Se realiza la centrifugación del tubo de muestra para separar el Paquete eritrocitario y el plasma o suero. 

Se rotula 2 tubos para la transferencia de suero y suspensión de eritrocitos (2-5%) con solucion salina amortiguada 

TUBO 1 

Agregar una gota 

de reactivo Anti-A 


azul) 

Marcar 4 tubos con los # del 1 al 3 y el cuarto con una T (testigo) 

TUBO 2 


reactivo Anti-AB 

(suero incoloro) 

PRUEBA DIRECTA 

en tubo 

Se realiza una prueba directa y una prueba complementaria llamada inversa 

Para la prueba directa se requiere lo siguiente: 

TUBO 3 


reactivo Anti-B 


amarillo) 

Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos del paciente a los cuatro tubos 

TUBO T 

Agregar 2 gotas del 

plasma o suero del 

paciente 

Se introducen en la centrifuga durante 15 a 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. Esta prueba se realiza 

a temperatura ambiente 

Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos y se hace la lectura macroscópica para aglutinación (Ver tabla 1) 

Registrar resultados en el / los formato A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27




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TUBO A1 


celulas A1+ 2gotas del 

plasma del paciente 

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PRUEBA INVERSA en tubo 

Marcar 4 tubos con las letras A1, A2, B y O 

Células de fenotipo conocido preparadas a una concentración del 2-5% 

TUBO A2 


celulas A2 + 2gotas del 


TUBO B 


celulas B + 2gotas del 


Se introducen en la centrifuga durante 15-30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. 

Se realiza una ligera agitación para resuspender las celulas 

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación (ver tabla 1) 

Registrar resultados en los formatos A-13-14-07; FA-14-23; F-A-14-27 

TUBO O 


celulas O + 2gotas del 

plasma del paciente




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GRUPO SANGUINEO 

GRUPO 

CAL-02-B 



Tabla 1 

Prueba Directa 

ANTIGENOS PRESENTES EN LOS 

ERITROCITOS 

ANTICUERPOS PRESENTES EN 

SUERO O PLASMA 

A A Anti - B 

B B Anti - A 

AB A y B - - - - - 

O ni A ni B Anti – A & Anti - B 

Prueba DIRECTA 

Tubo con Antisuero 


Anti-A Anti-B Anti-AB Testigo 

Prueba INVERSA 

Tubo con céluas: 

A1 A2 B O 

A POST NEGT POST NEGT NEGT NEGAT POST NEGAT 

B NEGT POST POST NEGT POST POST NEGT NEGT 

AB POST POST POST NEGT NEGT NEGT NEGT NEGT 

O NEGT NEGT NEGT NEGT POST POST POST NEGT




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con 25 l de concentrado eritrocitario del paciente (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%) 

DIRECTA 

MICROTUBOS 

A, B, AB, D,D` 


eritrocitos del PACIENTE 

GRUPO SANGUINEO Sitema ABO/Rh EN GEL 

Se realiza una prueba directa y una prueba complementaria llamada inversa 

Empleo de tira del DianaGel Donors/Donantes 

ver imagen 

AUTOTESTIGO 

TUBO Ctrl 

colocar 25 l de eritrocitos del 

donador y 50 l del suero o 

plasma del PACIENTE 


(ver imagen) 

Leer 

La lectura puede ser visual o en el DianaScanner 

(ver imagen) 



INVERSA 

MICROTUBOS 

A1; B 

colocar 50 l de eritrocitos 

reactivos (Serigrup Diana A1 y B) 


PACIENTE 

Registrar resultados en el formato F-A-14-26; F-A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-114-27 

o mandar impresión




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REGISTRO: 

# REQUISICION: 

Fecha: 

Clave de quien realizó: 

A1 B 

S.ABO S.Rho AT INVERSA




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TUBO A1 

Agregar 1 o 2 gotas del reactivo Anti-A1 Lectina 

Marcar 1 tubo con la letra A1 (Anti-A1) y otro con la letra H (Anti- H) 

TUBO H 

Agregar 2 gotas del reactivo Anti-H 

Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos (2-5%) del PACIENTE A CADA TUBO 

Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos 

SUBGRUPOS DE “A” 

Se introducen en la centrifuga durante 15-30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. 

Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos. 

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación 

Registrar resultados en los formatos FA13-14-07; FA-14-23; F-A-14-27 

Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos 

y se incuban durante 5 minutos aproximadamente a 

temperatura ambiente.




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Tabla # 2 Subgrupo “A”




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Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml de solución salina con 

amortiguador con dos gotas de concentrado eritrocitario del PACIENTE 


TUBO D 

agregar una gota del 

antisuero comercial 

Anti - D 

GRUPO SANGUIENO Rho en tubo 

Marcar un tubo con la letra Rh (anti D) y otro con la letra C (control) 

Agregar una gota de suspensión al 2-5% de eritrocitos del donador 

Centrifugar 15-30 segundos, la revolución esta predeterminada 

TUBO C 

Agregar una gota del reactivo 

Control Rh ó 

ALB 22% 

Leer resuspendiendo con movimiento suave el botón. Interpretación acorde a la aglutinación presente 

NO AGLUTINACION 

Rh neg (D-) 

AGLUTINACION 

Rh post (D+) 

Registrar resultados en los formatos F-A-14-26; F-Q-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27 

o mandar impresión 

NO 

AGLUTINACION




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SI la prueba Anti-D es NEGATIVA 

Los tubos marcados con D y C (provenientes de la Prueba RH) se incuban 15-30 minutos a 37 C 

Centrifugar e Interpretar 

Rh - (D-) 

Negativa 

Positiva 

Se lavan las celulas 3 veces con salina fisiologica, teniendo cuidado para resuspender las celulas por completo 

Se decanta la salina por completo en la última lavada 

Agregar una gota de suero de Coombs poliespecífico (anti IgG-C3d) 

Centrifugar e interpretar 

VALIDAR TECNICA CON CELULAS 

SENSIBILIZADAS 

Negativa 

Positiva 

Registrar resultados en los formatos: F-A-13-14-07; F-A- 

14-23; F-A-14-27 

El resultado 


Rh- y Du+ 

( para fines de 

transfusión se 

considera : 

donadores Rh+ 

receptores Rh- 

El resultado 


Rh+ ( D+) 

La determinación del grupo ABO en la 

tarjeta de Gel conlleva la determinación del anti D y su especie el Du 

Los resultados de Rh negativo en gel se confirman al desafiarlos con el Anti 

D Totem (anticuerpo policlonal dirigido contra las 6 fracciones del Antígeno 

D: I – VI)




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FENOTIPOS Rh 

Hacer un suspensión de los eritrocitos 2-3% (1ml de Diana-1 + 25 l de muestra) 

Añadir 25 microlitros de la suspensión de eritrocitos 2-3% en los microtubos que indican C, c, E, e 

(Ver imagen) 

Centrifugar en DianaFuge y leer manual o en el Diana scanner (Tabla 3A, 3B, 3C) 

Registrar los resultados en los formatos F-A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27 

Interpretación de fenotipo Rh 


Fecha: 


realizó 


Fecha: 


realizó 

Fenotipo: CcE Fenotipo: CEe




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FORMATO F- A – 14 – 23




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GENOTIPO 

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Tabla 2 

Fenotipo Rh 

REACCION SEROLOGICA ANTI 

FENOTIPOS 

D C c E e WIENER FISHER 

DCe/dce + + + - + R1r DCcee 

DCe/DCe + + - - + R1R1 DCCee 

DcE/dce + - + + + R2r DccEe 

DcE/DcE + - + + - R2R2 DccEE 

DCe/DcE + + + + + R1R2 DCcEe 

dce/dce - - + - + rr ddccee 

Dce/dce + - + - + R0r Dccee 

dCe/dce - + + - + r'r ddccee 

dCe/dCe - + - - + r'r' ddccee 

dcE/dce - - + + + r" r ddccee 

dce/dcE - - + + - r" r " ddccEE 

dCe/dcE - ++ + + + r' r" ddCcEe 

DCe/DCE + + - + + R1RZ DCCEe 

DcE/DCE + + + + - R2RZ DCcEE 

DCE/DCE + + - + - RZRZ DCCEE 

dCE/dCe - + - + + r y y' ddCCEe 

dCE/dcE - + + + - r y r" ddCcEE 

dCE/dCE - + - + - r y r y ddCCEE




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COOMBS INDIRECTO O RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES 

PANEL CASERO se les adiciona 5 microlitros de las células panel + 500 microlitros de la solución Diana sol 2 

(suspensión al 1%) y se homogenizan. EL PANEL COMERCIAL SE ADICIONA DIRECTAMENTE 

Se le realizan de 3 a 5 lavados al tubo que contiene los eritrocitos de la muestra problema. 

Se identifica la tarjeta de Diana Gel Coombs con los # del 1 al 10 y el AT (testigo) y se toma una alicuota de 50 

microlitros de cada tubo y se depositan en su respectivo microtubo + 25 microlitros del suero de la muestra problema 

Al microtubo marcado con la letra AT se le adiciona 50microlitros de la suspensión de eritrocitos problema 

previamente lavadas + 25 microlitros del suero problema. 

Se incuba en el equipo Diana Incubador a 37°C / 15min., transcurrido el tiempo se centrifuga en Diana Fuge y se 

interpretan los resultados con la CARTA PANEL CORRESPONDIENTE. 

RESULTADO es NEGATIVO: Se indica al reportar que los Anticuerpos irregulares FSABO. 

RESULTADO es POSITIVO: Se reporta como POSITIVO & ANTICUERPO DETECTADO CON PROBABLE 

ESPECIFICIDAD:….. 

Se anotan los datos y resultados de la prueba en la Bitácota de Estudios especiales CAL-31-B y se conserva el 

formato F-A-14-23 junto con el original del formato A-13-14-07. La copia del formato A-13-14-07 se le entrega al 

Médico residente o a la enfermera que lo solicite y se le pide que ponga los datos que se le solicitan y firme de 

recibido en la Bitácora de Entrega de resultados de estudios especiales CAL-31-C.




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Y la siguiente reacción en tarjeta con el PANEL TRIO: 

Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta en técnica liss-gel se requiere lo siguiente: 

Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 3 y un T( testigo) Las células se preparan empleando 5 l de eritrocitos con 0.5 ml de solución Diana 2 

MICROTUBO 1 


Gamma Trio 1 

MICROTUBO 2 


Gamma Trio 2 

MICROTUBO 1 

Anadir 25 l de plasma del PACIENTE 

MICROTUBO 3 


Gamma Trio 3 




Si es positivo se debe realizar el panel completo 

MICROTUBO T 


eritrocitos del 

PACIENTE




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Tabla 3 

CARTA PANEL TRIO 

Escanear imagen de carta panel del: 

TABLA 4 

CARTA PANEL DIANA 

CARTA PANEL DE SIGLO XXI




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COOMBS DIRECTO EN TUBO 

El concentrado eritrocitario se toma una alicuota y se realiza una suspensión al 2-5%, a la cual se le realizan 3 

lavados minimo con solución de cloruro de sodio al 0.9% (SSI), en cada lavado se centrifuga. se decanta y se repite el 

proceso de lavado. 

Una vez que se realizarón los lavados se decanta el exceso de solución y se adiciona SSI para obtener una solución 

al 5%. 

AGREGAR 1 GOTA DE LA DILUCION DE ERITROCITOS DEL PACIENTE Y 2 GOTAS DE SUERO DE COOMBS 

Se centrifugan los tubos y se leen anotando el resultado en el formato F-A-14-27 donde indica 22 °C en su respectiva 

dilución, 

Si el RESULTADO es POSITIVO se titula (diluyendo el suero de Coombs en forma doble seriada,)se reporta en los 

formatos A-13-14-07 y F-A-14-27 POSITIVO y la dilución 

Si el RESULTADO es NEGATIVO si la técnica fue realizada en tubo se continua con el llamado CAGHs (consumo de 

antiglobulina humana) es la prueba que se realiza para corroborar que se haya realizado bien la técnica anterior. 

Para realizar el CAGHs se adiciona una gota de células sensibilizadas a todos los tubos, se mezclan y centrifugan a 

SI ES POSITIVO SE VALIDA EL ENSAYO, SI ES NEGATIVO SE REPITE DESDE SU INICIO 








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RPR o VDRL 

El Químico de Inmunohematologia antes de iniciar la prueba lleva a temperatura de entre 15-30 C el REACTIVO Y 

SUS CONTROLES 

Procede a centrifugar la muestra para continuar con la separación del plasma y el concentrado eritrocitario. 

Se realiza la identificación de la placa: controles y muestra 

A los circulos que se van a ocupar se les adiciona una alicuota 1 A 2 gota del suero del paciente.y se extiende con la 

misma pipeta desechable o punta. 

De igual forma se aplica en los circulos correspondientes los controles positivo y negativo 

A todos los circulos se les adiciona 1 gota del REACTIVO 

Se homogeniza y se lleva a agitar la placa en el equipo BAXTER ROTATOR V durante 6 - 8 min. A 100 rpm. 

Realizar lectura macroscopica e interpretar, ausencia de aglutinación resultado negativo, presencia de aglutinación 

resultado positivo 

Se anota el resultado en la Bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia 

CAL-31-B y en el formato de solicitud A-13-14-07 original y copia, se entrega al personal que venga por los resultados 

la copia de la forma A-13-14-07 y se le pide que ponga los datos que se le solicitan y firme de recibido en la Bitácora 

de Entrega de resultados de estudios especiales CAL-31-C.




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COOMBS DIRECTO EN GEL 

El concentrado eritrocitario se toma una alicuota y se realiza una suspensión al 2-5%, a la cual se le realizan 3 

lavados minimo con solución de cloruro de sodio al 0.9% (SSI), en cada lavado se centrifuga. se decanta y se repite el 

proceso de lavado. 

Una vez que se realizarón los lavados se decanta el exceso de solución y se adiciona SSI para obtener una solución 

al 5%. 

AGREGAR 1 GOTA DE LA DILUCION DE ERITROCITOS DEL PACIENTE Y 2 GOTAS DE SUERO DE COOMBS 

Se centrifugan los tubos y se leen anotando el resultado en el formato F-A-14-27 donde indica 22 °C en su respectiva 

dilución, 

Si el RESULTADO es POSITIVO se titula (diluyendo el suero de Coombs en forma doble seriada,)se reporta en los 

formatos A-13-14-07 y F-A-14-27 POSITIVO y la dilución 

Si el RESULTADO es NEGATIVO si la técnica fue realizada en tubo se continua con el llamado CAGHs (consumo de 

antiglobulina humana) es la prueba que se realiza para corroborar que se haya realizado bien la técnica anterior. 

Para realizar el CAGHs se adiciona una gota de células sensibilizadas a todos los tubos, se mezclan y centrifugan a 

SI ES POSITIVO SE VALIDA EL ENSAYO, SI ES NEGATIVO SE REPITE DESDE SU INICIO 








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ANTIGENOS ERITROCITARIOS 

Se rotulan 2 tubos con los datos del paciente, una vez que la muestra se centrifuga y se separa el suero o plasma del 

tubo y en el otro se realiza una suspensión al 2-5% de globulos rojos. 

Se identifican 20 tubos con la sigla de cada uno de los antigenos a determinar 

Se coloca en cada tubo una gota de la suspensión de eritrocitos al 2-5% de la muestra problema + 1 gota del 

antisuero correspondiente (VER TABLA ANEXA 5) 

Se incuban de 15-20 min 

Cuando obtengo en Salina rápida un negativo se continua con una incubación de 15-30min. en la temperatura a la 

cual reacciona optimamente con su respectivo anticuerpo (MNSU 22 C, el resto a 37 C) al termino de la incubación se 

sacan los tubos se centrifugan a 3500RPM / 20-30 segundos y se toma tubo por tubo observando algun tipo de 

aglutinación. Se reporta todos los resultados obtenidos en el formato F-A-14-23. 








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S/4°C 

S/22°C 

S/37°C 

S/SC 

CAGH 

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TABLA 5: ANTIGENOS ERITROCITARIOS 

M N S s P Fy a Fy b K k Jk a Jk b Le a Le b Di a TIEMPO DE 

INCUBACION




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Una vez que el Médico residente o la enfermera lleva la muestra a la ventanilla del laboratirio el Químico revisa que la 

muestra este bien identificada (Nombre completo del paciente o familiar, hr. de toma de muestra y fecha de la toma, 

que la muestra sea la adecuada para el analisis que solicita y que la solicitud tenga todos los datos que se requieren. 

Una vez que el Químico verifica lo anterior le pide al Médico residente se anote en la Bitácora de Registro CAL-31-A y 

el Químico anota el # consecutivo en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original) y M-3-0-21 (original y 

copia) y el turno que le corresponde. Este procedimiento se realiza si el Médico del Banco de sangre lo considera 

adecuado por el diagnostico del paciente o por que no se tengan en existencia concetrados plaquetarios del grupo 

sanguineo del paciente. 

El procedimiento se realiza de igual manera para Pool de plaquetas, Feresis o Concentrado plaquetario 

La centrifuga se pone a temperatura de 22 a 24 C 

El producto a desplasmatizar se centrifuga a 1400rpm/10min a una temperatura de entre 22-24 C, una vez que 

concluye la centrifugación por medio del Conector esteril o puncionanado la bolsa con la espiga de la bolsa transfer, 

sosteniendo en la palma de la mano la bolsa que contiene el plasma y las plaquetas, se trasvaza el plasma en su 

totalidad a la nueva bolsa. 

A la bolsa que contienen las plaquetas se le deja una linea de aprox. 15 cm sellandola y desechando la bolsa que 

contiene el plasma 

A la bolsa que contiene las plaquetas por medio del conector esteril se le conecta un equipo de venoclicis para que 

por medio de el puncione una bolsa o frasco de solución salina fisiologica y se trasvasa la cantidad de solución 

adecuada o solicitada. 

Se sella la bolsa para separa la solución salina, se resuspenden las plaquetas y se coloca en agitación durante 

30min./100RPM/T.A. Con el formato M-3-0-21 copia y en la etiqueta indica que el producto fue desplamatizado. 

Se anotan los datos del donador y paciente en la Bitácota de Control de asignación de sangre CAL-31-D y se 

conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21. La copia del formato M-3-0-21 se le entrega 

al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el producto. Una vez que el Químico completa 

los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido en la Bitácora CAL-31-D y en el original del 


Una que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la fecha 

y hora en que se entrego el producto.




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DESPLAZMATIZACIÓN 








copia) y el turno que le corresponde.Este procedimeinto se realiza cuando el Médico solicita por medio del formato A- 

13-14-07 un paquete eritrocitario lavado o que el paquete a transfundir haya sido radiado 5 días antes o por que la 

patologia del paciente asi lo requiera. (Verificar si el paquete fue filtrado cuando fue fraccionado) 

Al Concentrado eritrocitariose le conecta por medio del Conector esteril la parte contraria a la espiga del equipo de 

venoclisis y la parte sobrante se desecha. La parte que queda libre que es donde se encuentra la espiga se une a la 

bolsa o frasco de solución salina y se deja de 100 a 150ml. 

Se sella la bolsa dejando aprox. de 5-10cm de linea en la bolsa del concentrado eritrocitario, homogeniza por medio 

de inversión. 

Se centrifuga colocando el paquete con los puertos de entrada hacia abajo a 3500RPM durante 10min. 

Una vez que finaliza la centrifugación se retira con sumo cuidado los vasos de la centrifuga y posteriormente el 

Concentrado eritrocitario lavado el que se cuelga en un tripie. 

Se identifica la bolsa transfer con los datos de la bolsa que contiene el CE a lavar y se prepara con 50-100ml de SSI la 

cual se une a CE lavado y se deja pasar el CE LAVADO a la bolsa transfer deteniendo la transferencia de CE antes 

de que la linea que divide el CE y el sobrenadante quede antes de 3cm de la base de los puertos. 

Una vez que se detiene la transferencia se sella la linea y se separa la bolsa que contiene el sobrenadante para 

desecharla 

Se homogeniza el CE y se refrigera hasta su solicitud 


conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21. La copia del formato M-3-0-21 se le entrega 

al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el producto. Una vez que el Químico completa 

los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido en la Bitácora CAL-31-D y en el original del 


Una que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la fecha 

y hora en que se entrego el producto.




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LAVADO DE PAQUETES 

ELUSION 

FILTRACION 

CAL-02-B 







el Químico anota el # consecutivo en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original y copia) y el turno que le 

corresponde. Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita o cuando el Médico del Banco de sangre lo 

considera necesario se realiza para pacientes que se cree tiene aloanticuerpo o autoanticuerpo. 

Se rotulan 2 tubos con los datos del paciente, una vez que la muestra se centrifuga a 3500RPM/8min. Se separa el 

plasma y se toma aprox. 1ml (varia según la cantidad de muestra extraída) del paquete de celulas 

LAVADO CON SSI 

Al tubo que contiene el paquete de celulas se le adiciona ¾ partes de SSI del tubo 

Centrifugar a 3500rpm/2min, decantar (3 lavados minimo). 

LAVADO CON SOLUCION DE LAVADO 

Solución de lavado dilución 1/10 (1ml de solución de lavado concentrado + 9ml de solución salina fisiologica) 

Al tubo que contiene el paquete de celulas lavadas con SSI se le adiciona ¾ partes de Sol. de lavado del tubo 

Centrifugar a 3500rpm/2min, decantar (4 lavados minimo). 

Después del último lavado se decanta totalmente la solución de lavado. 

Del paquete previamente lavado se toma una alicuota y se coloca en un tubo identificado y se adiciona la misma 

cantidad de sol. de elución 

Se realizan dos movimientos de inversión al tubo y se introduce a la centrifuga a 3500rpm/1min. se decantar 

(3 lavados minimo). 

Después del último lavado se decanta totalmente la solución de lavado y se adicionan 20 gotas de amortiguador 

(color azul) pH 7 

ELUIDO 

TARJETA 

Realizar una solución al 1% del panel de células del 

del SIGLO XXI 

Tomar una alicuota de 50microlitros de las solución 

anterior + 50 microlitros del ELUIDO 

Incubar durante 15min. en Diana Incubador 

Interpretar los resultados con la carta del panel 

TUBO 

Identificar 10 tubos 

Adicionar 1 gota de células panel del SIGLO XXI 

+ 

2 gotas del ELUIDO 

Incubar durante 15min. 

Lavadar con solución de lavado 1 vez 

Agregar 2 gotas de suero de Coombs a cada tubo 

Mezclar y centrifugar a 3500rpm/15-30seg 

Interpretar los resultados con la carta del panel




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CAL-02-B 








copia) y el turno que le corresponde. Este procedimiento se realiza si el Médico en la solicitud indica que se le realice 

filtración al producto solicitado 

Una vez que se le realizarón las pruebas de compatibilidad al producto y esta listo para ser filtrado 

Se selecciona el filtro por su capacidad y producto a filtrar y se identifica la etiqueta que trae la bolsa del equipo para 

filtrar con el nombre del donador, tipo de sangre, # de registro, volumen, fecha de extracción, fecha de caducidad y 

fecha en que se esta realizando la filtración. 

Se realiza la unión de la bolsa y el equipo de filtración con el TSCD SC-201A 

Se corta la parte sobrante y se abre la parte de la linea que se sello para dejar pasar el producto y el piloto de la bolsa. 

Se cuelga la bolsa en un tripie y se espera a que termine de pasar todo el producto 

Si no se va a requerir el total de la bolsa, se coloca la bolsa ( a donde se encuntra el producto filtrado) en la balanza y 

tomo solo la cantidad que requiero, procedo a sacar el aire de la bolsa y sello. Si se requiere todo el producto se 

espera a que se filtre todo, se saca el aire, se sella y se pesa para conocer el peso final. 


conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21(se especifica la cantidad que entrega). La 

copia del formato M-3-0-21 se le entrega al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el 

producto. Una vez que el Químico completa los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido 

en la Bitácora CAL-31-D y en el original del formato M-3-0-21. 

Una vez que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la 

fecha y hora en que se entrego el producto.




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CAL-02-B 



CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Y CELULAS 

El Químico del área de grupos realiza el Control de calidad de los hemoclasificadores y células reactivo que son las siguientes: 

Los hemoreactivos a utilizar son: 

-Anti-A 

-Anti-B 

-Anti-AB 

-Anti-A1 

-Anti-H 

-Anti-D 

-Albumina 22% o Control de Rh 

Las Células que se van a ocupar: 

-Globulos rojos A1 

-Globulos rojos A2 

-Globulos rojos B 

-Globulos rojos O 

-Eritrocitos sensibilizados 

-Eritrocitos no sensibilizados 

-Globulos rojos de fenotipo conocido 

(panel1-10) 

El Control de calidad se realiza con las células del C.M. Siglo XXI a las que se les realizan tres lavados previos a su uso con SSI (1 L. de 

solución CS + 10ml pHix) hasta ¾ partes del tubo, centrifugar a 3500/ 2min, decantar, agitar para resuspender las células En el último lavado 

decantar sin resuspender. De cada una de las células realizar una suspensión al 5%. Durante los lavados determinar la existencia de 

hemolisis y turbidez. 

Identificar 4 tubos con los # del 1 al 4 y con la letra A, 

4 tubos con la letra AB, 4 tubos con la letra B, 2 tubos con la letra A1 y 2 tubos con la letra H 

Adicionar 2 gotas de su respectivo reactivo a los 4 o 2 tubos 

Una vez que se adicionarón los reactivos se realiza lo siguiente: 

A los TUBOS 1 

Adicionar 1 gota de globulos 

rojos A1(lavados) 

A los TUBOS 2 


rojos A2(lavados) 

A los TUBOS 3 


rojos B(lavados) 

A los TUBOS 4 


rojos O (lavados) 

Centrifugar 3500rpm / 15-30seg. Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad 

Identificar 2 tubos como D Rh+ y D Rh- : 

A los 2 tubos adicionarle 2 gotas de Hemoclasificador D y al #1 adicionar 1 gota de globulos rojos R1r (células del panel C.M. Siglo XXI Rh 

positivas) y al # 2 adicionar 1 gota de globulos rojos rr (células del panel C.M. Siglo XXI Rh negativas) 

Identificar 2 tubos como albumina o control Rh: 

A los 2 tubos adicionarle 2 gotas de reactivo ALBUMINA o el Control Rh y al #1 adicionar 1 gota de globulos rojos R1r (células del panel C.M. 

Siglo XXI Rh positivas) y al # 2 adicionar 1 gota de globulos rojos rr (células del panel C.M. Siglo XXI Rh negativas)




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CAL-02-B 



Centrifugar 3500rpm / 15-30 seg. Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad 

Obsevar las especificaciones en la NOM- 017-SSA1-1993 

Observar Avidez en placa de as células del C.M. Siglo XXI A1, A2, B, de la siguiente manera: 

Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-A 

+ 

1gota de células A1 

Mezclar con un aplicador de madera y tomar el tiempo en que aglutina con un cronometro y registrarlo en la Bitácora 

Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-A 

+ 



Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-B 

+ 

1gota de células B 


Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-AB 

+ 




+ 




+ 

1gota de células B 


Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-D 

+ 

1gota de células con fenotipo R1r 


Obsevar las especificaciones de Avidez de la NOM- 017-SSA1-1993




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CAL-02-B 



Para realizar el Control de calidad del suero de Coombs se identifican 1 serie de 8 tubos cada una con las siguientes diluciones: 1/1 o sin diluir 

, ½, ¼, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64 y 1/ 128 

SERIE I 

Adicionar 1 gota de eritrocitos sensibilizados lavados 

Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-C3d-IgG 

+ 

1gota de células sensibilizadas 


Obsevar las especificaciones de Avidez de la NOM- 017-SSA1-1993 

Adicionar al tubo # 1 

1 ml de Anti-IgG,-C3d 

Adicionar al tubo #2 1ml de de Anti-IgG,-C3d + 1ml de SSI 

Homogenizar 

Al tubo #3 se le adiciona una alicuota de 1ml del tubo #2 y se homogeniza , 

Al tubo #4 se le adiciona una alicuota de 1ml del tubo #3 y se homogeniza 

Asi se continua hasta la dilución 1/128 

en la última dilución se desecha 1ml para que todos los tubos tengan la misma cantidad. 

Montar 2 SERIES de 8 tubos identificada con cada una de las diluciones. Se toma una alicuota de 0.1ml de la última dilución y se coloca en el 

últimos tubos de la SERIE I y IIy asi en todas las diluciones. 

A las SERIE I y II adicionarles lo siguiente: 

Se centrifugan 30seg / 3500rpm . 

Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad 

SERIE II 

Adicionar 1 gota de eritrocitos NO sensibilizados lavados 

En caso de obtener resultados negativos en cualquiera de las 2 series realizar consumo de antiglobulina humana para control de la técnica y 

reportar en la bitácora.




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ACTIVIDADES DE RUTINA 

CAL-02-B 



Anotar la temperatura de los refrigeradores 

Ordenar refrigeradores 

Sacar la lista de CE existente por # de registro, Fecha de caducidad y grupo. 

Sacar la lista para Centro Nacional 

Acomodar las plaquetas según lo siguiente: 

radiadas, cruzadas, próximas a caducar, disponibles. 

Sacar la lista de plaquetas cruzadas 

Tener el producto solicitado para cirugías e indicar la fecha en que se requiere 

Se ordenan las requisiciones A-13-14-07 por # y turno 

Se anota en egresos M-3-0-21 

Cotejar en entrega de guardia 

Lista de egresos y cancelados 

Verificar que el producto solicitado a las 24 hrs se encuentra todavía se 

reincorpora al stock




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CAL-02-B 



CAL-31- A BITACORA DE ESTUDIOS ESPECIALES DE 

INMUNOHEMATOLOGIA 

Fecha: Día, mes y año en que se esta realizando el estudio. 

Registro: #de registro del paciente. 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del paciente. 

Edad: Años que tiene en ese momento el paciente (opcional) 

Sexo: M (hombre) y F (mujer). 

Depto. y/o Servicio: Servicio de donde se solicita el estudio. 

Cama: # de cama donde se encuentra el paciente. 

Diagnostico: Diagnostico que da el medico. 

G: Gesta 

P: Partos 

A: Abortos 

Rhogam: Vacuna de Rh 

Transfusión: Si ha sido transfundido si o no 

Fecha: Fecha en fue transfundido 

EST. LAB. 

Bilis: Bilirrubinas 

HTO: Hematocrito 

HB: Hemoglobina 

RETIS: Reticulositos 

TP: Tiempo de protombina 

P/G: Peso (g) 

SABO 

Grupo: Grupo Sanguíneo del paciente. 

Subgrupo: Cuando el paciente es del grupo A se determina su subgrupo A1 o A2 

SRh 

D, DU, Rh Salino, C, c, E, e: Determinación de fenotipo de Rh




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CAL-02-B 



COOMBS 

IgG-C3d, IgG, C3, IgM, Titulo, Potencia: Determinación con el reactivo de 

Coombs Positivo o Negativo, su titulo y potencia. 

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES FSABO 

Suero: Tipo de muestra utilizada (suero) 

Eluido Adsorción: Tipo de muestra utilizada (eritrocitos) 

Positivo: Cuando se encuentra positivo 

Negativo: Cuando se encuentra negativo 

Especificidad: Probable Anticuerpo 

Titulo: Respuesta (en cruces) 

Potencia: Potencia encontrada. 

FENOTIPO 

P, M, N, S, s, Fya, Fyb, Jka, Jkb, Lea, Leb, K, k: Antígenos eritrocitarios con 

anticuerpos específicos. 

Día: Día en se realiza el estudio. 

RPR 

Positivo: Se marca con una X si es positivo 

Negativo: Se marca con una X si es negativo 

Titulo: Titulo encontrado en la prueba. 

Ab INMUNES 

Anti-A, Anti-B: Prueba de aglutininas o Sello, firma, rubrica del Químico que 

realizo el estudio. 

CAL- 31-E CONTROL DE CALIDAD 

Fecha: Día, mes y ano en que se realiza el control de calidad. 

Turno: Turno que esta realizando el control de calidad (M matutino, V vespertino, 

N nocturno, E especial) 

Reactivo: Hemoclasificado al que se le va a realizar el control de calidad..




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CAL-02-B 



Lote: de lote del hemoclasificado. 

Caducidad: Fecha en que caduca el hemnoclasificado. 

Marca: Nombre comercial que tiene el hemoclasificado 

Registro: # que tiene como registro el hemoclasificado. 

Color: Color que presenta el hemoclasificado. 

Aspecto: Aspecto transparente o turbio del hemoclasificado. 

A1, A2, B, O, R1r, rr, A1, A2, B, Rr: Resultados al realizar el control de calidad. 

Hemolisis: Negativa o positiva. 

Turbidez: Negativa o positiva 

Cel. Sensib.: Con dilucioneas del 1/1 al 1/128 y células sensibilizadas. 

Cel. no sensib: Con dilucioneas del 1/1 al 1/128 y células no sensibilizadas. 

CAGH: Consumo de antiglobulina humana. 

31-F ENTREGA DE GUARDIA 

Fecha: Día, mes y ano de entrega de turno. 

Req. Inicial: # de requisición inicial 

Req. Final: # de requisición final 

Turno: Turno que esta realizando el control de calidad (M matutino, V vespertino, 

N nocturno, E especial) 

Egreso: Numero de egreso inicial con que se recibe el turno. 

Ingreso: Numero de egreso final con que se recibe el turno. 

Cirugía con células: Nombre completo del paciente y registro. 

Productos liberados: Numero, tipo de producto y estado en que se encuentra 

(pendiente, liberados) 

Pacientes: Nombre del paciente y registro 

Refrigeradores: Si están en orden o no. 

Entrega: Firma o/y sello, rubrica del Químico(a) que entrega el turno. 

Recibe: Firma o/y sello, rubrica del Químico(a) que recibe el turno.




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CAL-02-B 



CAL-31-D CONTROL DE ASIGNACION DE SANGRE 

Fecha: Día, mes y ano en que asigna la sangre 

Registro: Numero de registro del donador (paquete). 

Nombre del donador: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del 

donador. 

Producto: Tipo de producto solicitado (CE, CP, etc ) 

GPR. Y Rh: Grupo sanguíneo y Rh del donador. 

Volumen: Volumen que contiene el paquete. 

Realizo Prueba: Químico que realiza la asignación del producto. 

Resultados: Compatible o no compatible. 

No. Solic.: Numero y turno de la solicitud. 

Proced.: ------------------- 

Observaciones: Cuando existe alguna especificación. 

Registro: Numero de registro del paciente. 

Nombre del receptor: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del 

paciente. 

GPO Y Rh: Grupo sanguíneo y Rh del paciente. 

Departamento y/o Servicio: Servicio que solicita el producto. 

Cama: Numero de cama en que se encuentra el paciente. 

Fecha ent.: Día, mes y ano en que se entrega el producto solicitados 

Hora entr.: Hora en que se entrega el producto solicitado. 

Volumen: Volumen real que se entrega. 

Recibió: Personal que recibe el producto. 

Entrego: Químico que entrega el producto. 

No. Salida: Numero que se le asigna de salida y turno. 

CAL -31-C ENTREGA DE RESULTADOS DE ESTUDIOS ESPECIALES 

Fecha: Día, mes y ano en que se realiza el estudio. 


Servicio: Departamento que solicita el estudio.




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CAL-02-B 



Nombre del paciente: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del 

paciente. 

Estudios solicitados: Prueba Que se solicita se realice 

Medico, Nombre, firma, clave: Rubrica o/y firma y clave del personal que recoge 

los resultados del estudio. 

CAL – 31- G RELACION DE PRODUCTOS ENVIADOS A RADIOTERAPIA 

Fecha: Día, mes y ano en que se lleva a radiología. 

Tipo de producto: Tipo de producto a radiar (CE, CP) 

Grupo: Grupo sanguíneo y Rh del producto a radiar. 

Registro: Numero de registro de los productos a radiar. 

Hora de entrega: Hora en que se entrega el producto a radiología. 

Hora de recoger: Hora en que se puede pasar a recogerlo. 

GRUPOS EN EL TURNO VESPERTINO 

Fecha: Día, mes y año en que se determino el grupo sanguíneo y Rh al donador. 

Muestra: # de registro del donador. 

Grupo: Grupo sanguíneo del donador. 

Rh: Fenotipo del donador. 

Observaciones: --------------------------- 

CAL- 31-I PRODUCTOS REGRESADOS 

Fecha: Día, mes y año en que se regresa el producto. 

Hora: Hora en que se regresa el producto 

Registro del producto: # del registro del producto que se regreso. 

Grupo: Grupo sanguíneo del producto devuelto. 


paciente. 

Registro del paciente: # de registro del paciente. 

Servicio: Departamento donde se devuelve el producto. 

Regresa: Personal que regresa el producto. 

Recibe: Químico que recibe el producto. 

Causa: Motivos por que el producto es devuelto.




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CAL-02-B 



CAL-31-J BITACORA DE ESTADISTICAS INMUNOHEMATOLOGICAS 

Fecha: Día, mes y año en que se realiza la estadística. 

M: Turno Matutino. 

V: Turno Vespertino. 

N: Turno Nocturno 

# REQ.: # de requisiciones. 

S ABO: # de Pruebas de grupos sanguíneos en el sistema ABO realizadas. 

SUB GRUPO: # de subgrupos realizados. 

S Rh: # de análisis para conocer el Rh 

Fenotipo: # de pruebas para conocer el fenotipo. 

Fenotipo otros: # de otras pruebas que se realizaron para conocer el fenotipo. 

C.D.: # de Coombs directo realizados. 

C.D. ESP.: # de Coombs directo especial realizados. 

Rastreo de Ab: # de Rastreo de Anticuerpos que se realizaron. 

Titulo de Ab: # de titulaciones de anticuerpos se realizaron 

Eluido: # de eluidos realizados. 

Adsorciones: # de adsorciones realizadas. 

Aglutininas A: # de aglutininas A se realizaron. 

Aglutininas B: # de aglutininas B se realizaron. 

RPR: # de Pruebas RPR se realizaron. 

C.E.: # de Concentrados Eritrocitarios entregados. 

C.P.: # de Concentrados plaquetarios entregados 

P.F.: # de Plasmas Frescos entregados. 

G.A.H.: 

F VIII: # de Factor VIII 

F IX: Factor IX 

ALB. HUMANA: Albúmina humana 

C.E. FRACC.: # de Concentrado Eritrocitario que se fraccionaron. 

C.P. FRACC.: # de Concentrado plaquetario que se fraccionaron. 

C.E. LAVADO: # de Concentrado Eritrocitario que se lavaron. 

C.E. FILTRADO: # de Concentrado Eritrocitario que se filtraron. 

C.E. REGRESADO: # de Concentrado Eritrocitario devueltos. 

P.F. REGRESADO: # de Plasma Fresco devuelto.




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CAL-02-B 



C.P. REGRESADO: # de Concentrados plaquetarios revueltos. 

VALORACIONES: Valoraciones realizadas. 

RESPONSABLE: Químicos responsables del turno. 

CAL-31-K PACIENTES CON PROBLEMAS DE TRANSFUSION 

Fecha: Día, mes y año en que se suscita el problema de transfusión. 

Reg. pte. : # del registro del paciente. 

Nombre pte.: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del paciente. 

Gpo: Grupo sanguíneo del paciente. 

Dx: Diagnostico especificado por el Médico. 

Gpo a trans: Grupo sanguíneo a transfundir. 

Observaciones: Cualquier observación que sea importante en cuanto a la 

transfusión realizada. 

CAL-31- L BITACORA DE SALIDA DE PRODUCTOS A OTROS BANCOS 

La libreta debe incluir el # de registro del producto a salir, el tipo de producto, el 

nombre completo del disponente, el volumen del paquete, el grupo sanguíneo y 

Rh y la fecha de extracción del producto junto con la de caducidad. 

Una vez que el Químico saca la relación le entrega una copia a la Secretaria para 

que llene el formato A-14-01 o F-A-14-01. 

REGISTROS 

Todas las Bitácora de este procedimiento se resguardan en archivo activo durante 

1 año y en archivo muerto 5 años.



Fecha: 3 Febrero-2010 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: Dr. Carlos E. Cob 

Sosa 

Firma: 

Fecha: 3-Febrero-2010 


Procedimiento para valoración médica 

Revisado por: 

Nombre: Dra. Margarita L. 


Firma: 

Fecha: 3-Febrero-2010 

Aprobado por: 

Nombre: Dra. Dinora V 

Aguilar Escobar 

Firma: 

Fecha: 3-Febrero 2010



Fecha: 3 Febrero 2010 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Se cambia formato de Historia Clínica 

y programa de cómputo 



REVISIÓN 

03 

FECHA 

03/02/10




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Una vez que al donador se le toman los datos de identificación, se imprime la 

Historia Clínica, el candidato a donador firma la carta de consentimiento 

informado, se registra en la Bitácora CAL-20 B, se valoran las venas, 

somatometría, signos vitales y toma de muestra (Ver procedimiento CAL-20, CAL 

20-B, CAL-30 y CAL-43) se procede de la siguiente manera:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El Medico toma del área de recepción la ficha de 

identificación del donador M-3-0-23 (y la Historia Cliníca M- 

3-0-10-a; sólo en caso de procedimiento manual) 

De la ficha de identificación del donador M-3-0-23 observa el nombre 

completo del donador, lo llama y le indica que pase al consultorio donde 

se le realizará la valoración medica 

El médico, supervisa que los parámetros de signos vitales 

registrados, por el enfermera, en la ficha de Identificación, esten 

dentro de las especificaciones marcadas por la NOM-003-1993, Así 

como también que los resultados de la biometría hemática que se 

realizó en el área de toma de muestras esté acorde con los 

parámetros que establece la NOM-003-1993. Posteriormente 

interroga, explora y elabora Historia Clínica (cuando el procedimiento 

es manual llena formato de Historia Clínica M-3-0-10-a), ó ingresa 

datos en el sistema de cómputo (Programa Winlab) 

Médico verifica datos de somatometría, signos vitales e ingresa, los 

parámetros emitidos de toma de muestra de la biometría hemática en el 

apartado del sistema de cómputo (Datos del Donante) y determina si el 

candidato cumple con los requerimientos para donar sangre. 

Si es Apto 

No Apto 

En el sistema de cómputo (en Datos del Donante) determina que el donador 

es aceptado para donar sangre y lo graba. Deposita en el buzón del área de 

Recepción la Histotia Clínica con la Biometría Hemática para que sea 

tomado por la recepcionista para asignar número de unidad, imprimir 

etiquetas y entregar todos estos documentos a la enfermera para continuar 

con el procedimiento de extracción de sangre total o de componentes 

sanguíneos por aféresis. (Ver Procedimiento CAL-43). 

El médico determina que el 

candidato no es apto para donar 

sangre y anota causa de rechazo 

en la Historia Clínica así como en 

el sistema de cómputo busca y 

graba la (s) causa (s) por la (s) 

cual(es)el donador NO ES APTO 

Médico informa causa(s) 

de la exclusión para donar 

sangre 

El Médico informa al 

personal de Recepción y 

Trabajo social para 

evaluación social y 

reprogramación de cita. 

Les entrega la Historia 

Clínica




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FICHA DE IDENTIFICACION DEL DONADOR




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento para valoración médica




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 



Bitácora de entrega y recepción de Historias Clínicas del donador de sangre y 

componentes sanguíneos.



Fecha: 12-Julio-2011 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


NOMBRE: DR. ISMAEL 

HERNÁNDEZ MONTIEL 

Firma: 

Fecha: 12-Juulio-2011 



Revisado por: 

NOMBRE: DRA. MARGARITA 

L. MEDINA MACÍAS 

Firma: 

Fecha: 13-Juliol-2011 

Aprobado por: 

NOMBRE: DRA. DINORA 


Firma: 

Fecha: 13-Julio- 2011



Fecha: 12 Julio 2011 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Se integra el sistema Kanban. 

Se anexa firma de la evaluación de la 

biometría hemática así como la 

impresión del formato de historia 

clínica electrónica M-3-0-10 a y b por 

el médico responsable. 

Se integra el CAL-64 Procedimiento 

de manejo de candidatos a donación 

No Aptos del área de selección de 

disponentes en este procedimiento, 

así mismo se da de baja en la lista 

maestra. 



REVISIÓN 

04 

FECHA 

08/04/11




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



El médico toma la hoja de Ficha de identificación del Kanban ubicado en el área 

de recepción y procede de la siguiente manera:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El Medico toma del Kanban ubicado en el área de valoración médica la ficha 

de identificación del donador M-3-0-10-(a y b) y el resultado de la biometría 

hemática (BH) en caso de procedimiento manual también se incluye la 

Historia Cliníca M-3-0-10-(a y b) 

De la ficha de identificación del donador M-3-0-10a el médico observa el 

nombre completo del donador, lo llama y le indica que pase al 

consultorio donde se le realizará la valoración medica. En caso de 

sistema manual los datos los toma de la Historia Clínica 

El médico, verifica que los parámetros de signos vitales registrados, 

por la enfermera, en la ficha de Identificación, estén dentro de las 

especificaciones marcadas por la NOM-003-1993, Así como también 

que los resultados de la biometría hemática que se realizaron en el 

área de toma de muestras estén acordes con los parámetros que 

establece la NOM-003-1993, y anota su nombre, clave y firma. 

Posteriormente interroga, explora y elabora la Historia Clínica, 

ingresa los datos en el sistema informático de banco de sangre ó 

cuando el procedimiento es manual llena formato de Historia Clínica 

M-3-0-10-(a y b). 

El médico emite el diagnóstico y determina si el candidato cumple con 

los requerimientos normativos para realizar la donación de sangre o de 

aféresis. 

Si el disponente es APTO ó NO APTO lo registra en el sistema 

informático de banco de sangre, si es Apto imprime la historia clínica; 

anota su nombre, clave y firma de responsable en la ficha de 

identificación (formato M-3-0-23) y en la historia clínica (formato M-3-0- 

10-a y b) y solicita la firma al disponente 

Si es Apto 

No Apto 

Deposita en el Kamban del área de Recepción la Ficha de Identificación, 

impreso de biometría hemática y la Historia Clínica para que en recepción 

se le asigne número de unidad e impresión de etiquetas para 

posteriormente colocar todos estos documentos en el Kamban del área de 

flebotomía ó aféresis según corresponda y proceder a la extracción de 

sangre total (Ver CAL-46) o de componentes sanguíneos por aféresis. (Ver 

Procedimiento CAL-50) 

El médico anota causa de rechazo 

en la ficha de identificación formato 

M-3-0-23 y en la Historia clínica en 

el formato M-3-0-10-(a y b) del 

sistema informático de banco de 

sangre (y manual) 

El médico informa al 

disponente la causa de 

rechazo 

El médico informa trabajo 

social y a recepción que 

el disponente no es apto, 

para posterior evaluación 

social y/o reprogramación 

de cita




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FICHA DE IDENTIFICACION DEL DONADOR M-3-0-23 (PROCEDIMIENTO 

MANUAL)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR M-3-0-10a 

(PROCEDIMIENTO MANUAL)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR M-3-0-10b 

(PROCEDIMIENTO MANUAL)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE (M-0-3-23) SISTEMA 

INFORMÁTICO DE BANCO DE SANGRE




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



HISTORIA CLÍNICA (SISTEMA INFORMÁTICO DE BANCO DE SANGRE)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento para valoración médica




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



En el caso de los candidatos a donación No Aptos: 

La ficha de identificación y/o la Biometría Hemática impresas, se archivan 

durante 3 meses como indica la NOM-003-SSA-1993 

La historia clínica permanece resguardada en el sistema informático de 

banco de sangre. 

En el sistema quedan registrados los candidatos a donación excluidos 

permanentemente que por no cumplir con los requisitos no serán aceptados como 

donadores en caso de solicitar nuevamente ser candidatos. 

REGISTROS 

Bitácora de entrega y recepción de Historias Clínicas CAL-50D se almacena en el 

archivo durante 3 meses. 

Bitácora CAL-20B (Registro de donadores), se almacena en el archivo durante 3 

meses. 

Ficha de Identificación (M-3-0-23) (Manual y sistema informático de banco de 

sangre), se almacena junto con la historia clínica. 

Historia Clínica M-3-0-10-(a y b) (Manual y sistema informático de banco de 

sangre). Cuando el donador es Apto dichos registros permanecen durante 5 años 

en archivo activo y 5 años en archivo muerto.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de solicitud y entrega de estudios 

en el laboratorio 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Ninguno 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

29/09/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





Los diferentes estudios que se realizan en el Área de Inmunohematologia del 

laboratorio se solicitan de la siguiente manera: 

El Médico tratante solicita al Área de Inmunohematologia los estudios con los siguientes documentos: 

-El formato A-13-14-07 original y copia donde indica los estudios que requiere 

-Y la muestra del paciente identificada (Registro y nombre completo del paciente, fecha y hora de toma de muestra) 

La muestra puede ser entregada en el Área de Inmunohematologia por el Médico tratante, Residente, personal paramédico y mensajeros 

El personal de Inmunohematologia revisa el original y la copia de los formatos que le entrega y verifica que coincida el nombre que tiene 

el formato A-13-14-07 y la muestra , tambien verifica que la muestra sea la adecuada para los estudios solicitados . Si la identificación de 

la muestra o el tipo de muestra no es la correcta se procede a retener la muestra y solicitar una nueva muestra identificada correctamente. 

El personal de inmunohematologia entrega los formatos al medico, enfermera o mensajero y le pide que anote en la bitácora de solicitud 

de productos CAL-28-A los datos que se le solicitan y asigna el # consecutivo del día y una inicial según el horario (M para matutino, V 

para vespertino, N para nocturno y E para sabado, domingo o dias festivos) en el formato A-13-14-07 . 

Solo en caso de duda se consulta con el Jefe de Laboratorio o con el Médico especialista 

NO 

Se cancela su realización, y se notifica al servicio solicitante 

El personal de inmunohematologia realiza las pruebas solicitadas 

SI 

Se esta de acuerdo con lo 

solicitado lo indica en el 

formato con un SI en la parte 

superior derecha 

Una vez que el personal de inmunohematologia realizo los estudios solicitados anota en la bitácora de estudios especiales CAL-42-A los 

datos que se le solicita y procede a anotar los resultados en el original y en la copia del formato A-13-14-07 y guardar en el folder de 

estudios especiales la copia del formato 

Cuando el Médico, enfermera o mensajero solicita los resultados se le indica anote en la Bitacora de entrega de resultados de estudios 

especiales CAL-42-B lo que se le solicita y firme de entregado y se le entregan la copia del formato A-13-14-07 con los resultados.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El formato A-13-14-07 es llenado por el Médico que solicita el producto y se 

muestra a continuación: 

La bitácora CAL-28-A es llenada por el Médico que solicita el producto y se 

muestra en el Procedimiento CAL-28. 

El formato A-13-14-07 que se entrega al laboratorio como solicitud del estudio 

contiene al frente en la parte superior izquierda un recuadro en blanco donde se 

plaquea el carnet o se le escriben los datos de la persona a la que se realizara el 

estudio. 

Cualquiera de los datos que no se encuentren en el formato A-13-14-07 y no sean 

esenciales para realizar el estudio se puede quedar el espacio vació o cancelar 

con una raya 

La bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia CAL-42-A debido a su 

tamaño no se muestra dentro de este procedimiento.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




La bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia CAL-42-A se llena 

de la siguiente manera: 

Fecha: Día, mes y ano en que se solicita el estudio. 

Registro: # asignado por el INP 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre del 

paciente o donador a quien se le solicita se le realicen 

los estudio. 

Edad: Se calcula de la fecha de nacimiento que contiene el 

carnet 

Sexo: M masculino y F femenino y puede ser obtenido del 

carnet. 

Depto. y/o servicio: Se encuentra en el formato A-13-14-07 

Cama: # de cama donde se encuentra el paciente 

Diagnostico: Se encuentra en el formato A-13-14-07 

Datos referentes a la madre 

G: # de gesta es el paciente 

P: # de parto es el paciente 

A: # de abortos 

RHOGAM: Vacuna anti-D 

Transfusión: Si existen transfusiones anteriores 

Fecha: Si existe alguna transfusión la fecha en que se le realizo 

Estudios de Laboratorio 

Bilis: Si se requiere este resultado para los estudios que se 

van a realizar debe ser incluido por el medico que 

solicita los estudios. 

HTO: Si se requiere este resultado para los estudios que se 



HB: Si se requiere este resultado para los estudios que se 


solicita los estudios.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




RETIS: Si se requiere este resultado para los estudios que se 



TP: Si se requiere este resultado para los estudios que se 



P/G: Si se requiere este resultado para los estudios que se 



SABO 

Grupo: Estudio que se puede solicitar al laboratorio. 

Subgrupo: Estudio que se puede solicitar al laboratorio. 

SRh 

D, Du, Rh salino, C, 

c, E, e: Estudios que se puede solicitar al laboratorio. 

Coombs 

IgG-C3d, IgG, C3d, 

IgM, Titulo, Potencia: Estudios que se puede solicitar al laboratorio. 

Rastreo de anticuerpos irregulares FSABO 

Suero, Eluido Absorción ( Positivo o Negativo), 

Especificidad, Titulo, Potencia: 

Estudios que se puede solicitar al laboratorio. 

Fenotipo 

P, M, N, S, s, Fya, 

Fyb, Jka, Jkb, Lea, 

Leb, K, k, Dia: Estudios que se puede solicitar al laboratorio. 

RPR 

Positivo, Negativo, 

Titulo: Estudios que se puede solicitar al laboratorio para el 

análisis de sífilis.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Ab inmunes 

Anti A y/o Anti B: Estudios que se puede solicitar al laboratorio para 

conocer la presencia de anticuerpos. 

La bitácora de Entrega de resultados de Estudios especiales de 

Inmunohematologia CAL-42-B se muestra a continuación: 

BITACORA DE ENTREGA DE RESULTADOS DE ESTUDIOS ESPECIALES DE INMUNO HEMATOLOGÍA 

Fecha Registro 


paciente 

Estudio 

solicitado 

CAL-42-B 

Personal que recoge el 

resultado 

Nombre/Firma/clave 

La bitácora de Entrega de resultados de Estudios especiales de 

Inmunohematologia CAL-42-B se llena de la siguiente manera: 

Fecha: Día, mes y año en que se realiza el estudio. 



paciente. 

Estudios solicitados: Prueba Que se solicita se realice 

Personal que recoge el resultado, Nombre, firma, clave: Rubrica o/y firma 

y clave del personal que recoge los resultados del estudio. 

REGISTROS 

El formato A-13-14-07 se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en 


La bitácora CAL-42-A se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en 


La bitácora CAL-42-B se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en 

archivo muerto.


Instituto Nacional de Pediatría ISBN: 978-968-9170-17-4 

Nivel de Revisión: 04 



Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de toma de muestra 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:






CAL-02-B 

CAMBIO 

Se modifica procedimiento con datos 

administrativos actualización del 

equipo automatizado de Biometría 

Hemática. 



REVISIÓN 

04 

FECHA 

07 de Octubre de 2009







CAL-02-B 



Una vez que al donador se le realiza la valoración DE SIGNOS VITALES Y 

SOMATOMETRIA (Ver procedimiento CAL-30), el Químico/Laboratorista del área de 

toma de muestras de Banco de Sangre toma la Ficha de Identificación del Donador 

(Formato M-3-0-23) del “Buzón de valoración del disponente”, que se encuentra en 

recepción y se procede de la siguiente manera:






CAL-02-B 


Procedimiento de toma de muestra

1 

2 

3 

4 

5 

6 

7 

8 

9 

0 

F-A-14-26 

No. DE 

UNIDAD 






CAL-02-B 



El formato F-A-14-26 se muestra a continuación: 

CLASIFICACION DE GRUPOS ABO Y Rh0 (D) 

ANTI-A ANTI-B ANTI- 

AB 



SUBGRUPOS DE A S-RH 

RESULTADOS 

AUTO GR-A1 GR-A2 GR-B GR-O LEC.-A1 ANTI-H ANTI-D CRho GRUPO Hto Hb LEUCO PLAQ RAiFSABO HORA REQ. HORA RES 

k






CAL-02-B 




Resultados: 

Hb (Hemoglobina): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY 

Hto (Hematocrito): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY 

LEUCO (Leucocitos):Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY 

PLAQ (Plaquetas): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY 

Nota 1: En el equipo CELL DYN RUBY se debe correr controles diariamente antes de 

su uso (Ver procedimiento CAL-14). 

Nota 2: Los tubos deben contener el nombre completo del paciente, número de registro, 

número de toma de muestra y fecha. 

REGISTROS 

F-A-14-26 Se debe almacenar en el archivo activo durante 5 años y en el archivo muerto 

5 años.




Fecha: 27 Junio del 2011 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 




Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




Fecha: 27 de Junio del 2011 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Se inserta el nuevo formato M-3-4-10 



REVISIÓN 

05 

FECHA 

27 de Junio del 2011







CAL-02-B 



Una vez que al donador se le realiza la valoración DE SIGNOS VITALES Y 

SOMATOMETRIA (Ver procedimiento CAL-30), el Químico/Laboratorista del área de 

toma de muestras de Banco de Sangre toma la Ficha de Identificación del Donador 

(Formato M-3-0-23) del “Buzón de valoración del disponente”, que se encuentra en 

recepción y se procede de la siguiente manera:






CAL-02-B 


Procedimiento de toma de muestra






CAL-02-B 



El formato M-3-4-10 se muestra a continuación: 

El formato M-3-4-10 se llena de la siguiente manera:






Resultados: 

CAL-02-B 



Hb (Hemoglobina): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados 

Hto (Hematocrito): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados 

LEUCO (Leucocitos):Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados 

PLAQ (Plaquetas): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados 

Nota 1: En el equipo Automatizado de Biometrías se debe correr controles diariamente 

antes de su uso (Ver procedimiento CAL-14). 

Nota 2: Los tubos deben contener el nombre completo del paciente, número de registro, 

número de toma de muestra y fecha. 

REGISTROS 

No asociados




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de separación y almacenamiento 

de muestras 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Ninguno 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

29/09/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




El Personal Auxiliar del laboratorio del Banco de sangre que se encarga de separar y 

almacenar las muestras analizadas lleva a cabo el siguiente proceso: 

De las muestras obtenidas en el área de sangrado (en enfermería) y que son utilizadas en el área de serologia se 

realiza la separación y almacenamiento de la muestra. 

Los tubos de sangre total (tapon rojo) se centrifugan en la centrifuga Hettich Eba8s, de 5 a 10 minutos, de 3500 a 

5500 rpm, y de 70 a 100% de potencia. 

Los tubos de biometría hemática (tapón morado) se separan en la centrifuga Sero-fuge durante 3 minutos a su 

máxima velocidad. 

Coloca las muestras separadas en una gradilla y las entrega al área de serología. 

Para realizar el almacenamiento: 

Se marca el criotubo (s) con el números de registro del día y/o Nombre completo del paciente o # del donador 

Se toma el tubo que contiene la muestra y se trasvasa al criotubo identificado con ese mismo # o Nombre, 

asegurandose solo pase el suero, se cierra y se coloca en una gradilla de unicel 

Una vez que se a terminado de vaciar todas las muestras, se saca la gradilla del refrigerador observando que sea la 

que contenga la última muestra colocada un día anterior. 

El Auxiliar de laboratorio marca las gradillas de unicel para poderlas guardar en el 

refrigerador con el # correspondiente visible para que sea posible identificarlas 

fácilmente y las coloca por # consecutivo. 

REGISTROS 

Una vez que se encuentran ordenadas se resguardan en el refrigerador a -70 C 

No existen registros asociados a este procedimiento




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de lavado del material 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 



REVISIÓN 

2 

FECHA 

27/07/2006




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



El Personal Auxiliar de laboratorio del Banco de sangre encargado del lavado de 

los diferentes tipos de material lleva a cabo el siguiente proceso: 

El Auxiliar del laboratorio prende el horno a una temperatura aprox. de 120º C. 

Se toman los diferentes botes de las áreas de Pruebas cruzadas y grupos sanguineos y se verifica que el material haya estado en 

contacto con la solución que contiene el bote. Si no es así se sumergen durante 10-15min. Aproximadamente para que se lleve a cabo 

la desactivación. 

El bote que contiene las pipetas se vacia en la tarja y se 

seleccionan 

-Las rotos: las separo o tiro al contenedor de material 

peligrosos. 

-Las que tienen presencia de contaminación las pongo al 

chorro del agua y las ordeno para que la punta de todas quede 

hacia el mismo lugar. 

-Las que presentan una contaminación mayor se ponen a 

remojar en una mezcla de agua/jabón/ cloro. 

El bote que contiene los tubos se vacia en la tarja y se 

seleccionan 

-Los rotos: se separan y tiran a una caja de cartón 

-Los que tienen presencia de contaminación los pone al 

chorro del agua y los talla con el escobillon uno por uno 

-Los que presentan una contaminación mayor se ponen a 

remojar en una mezcla de agua/jabón/ cloro 

Una vez que las pipetas o tubos contaminados se han remojando se enjuagan uno por uno 

(si se cree necesario) en el chorro del agua 

Si alguno de los tubos presentara algun tipo de marca con plumón se les talla con el sacate hasta borrarla en su totalidad . 

Cuando ya se tallarón se enjuagan con agua a presión, se sacuden y se unden en una charola que contiene agua destilada , hasta que 

se observe que no contienen jabón. 

Las pipetas se sacuden y se colocan boca a arriba en una canastilla y los tubos boca a bajo . 

Una vez que se termina el tiempo en la estufa se ponen los guantes adecuados y se saca la canastilla , se deja enfriar y se coloca el 

material en su lugar.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Nota: Observar que el material este en contacto con la mezcla agua/jabón/cloro 

antes de lavar. Si no fue así hundir durante 30-45 minutos aproximadamente para 

desactivarlos. 

REGISTROS 

No existen registros asociados a este procedimiento.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



INDICACIONES DEL LAVADO DE MATERIAL DEL EQUIPO VITROS ECiQ 

1. -Inactivar con alcohol etílico durante 30 minutos 

2. Enjuagar con agua de la llave 

3. Dejar en una mezcla de agua-jabón al 2 % por aproximadamente 15 

minutos. 

4. Enjuagar con abundante agua de la llave y posteriormente con agua 

destilada. 

5. Dejar boca-abajo para escurrir y secar. 

6. Colocar el material en el lugar correspondiente.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



TABLA PARA PREPARAR MEZCLA CLORO-AGUA AL 1:10 

LTS. AGUA ml CLORO VOL. FINAL 

0.900 100 1 LT 

1.800 200 2 LT 

4.5 500 5 LT 

9.0 1000 10 LT 

13.5 1500 15 LT 

TABLA PARA PREPARAR MEZCLA JABON-AGUA AL 2% 

REGISTROS 

LTS. AGUA ml JABON VOL. FINAL 

0.980 20 1 LT 

1.960 40 2 LT 

4.900 100 5 LT 

9.800 200 10 LT 

10.780 220 11LT 

11.760 240 12LT 





Fecha: 05 de Diciembre 2011 


CAL-02-B 


Nombre: Enf. Martha 

Concepción Jiménez Martínez 

Firma: 

Fecha: 1de diciembre 2011 


Procedimiento de Extracción Sanguínea 

Revisado por: 

Nombre: Dra. Margarita L. 


Firma: 

Fecha: 5 de diciembre 2011 

Aprobado por: 

Nombre: Dra. Dinora Aguilar 

Escobar 

Firma: 

Fecha: 5 de diciembre 2011



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 

CAMBIO 

Se detalla el procedimiento de 

asepsia 

Se ajusta el sistema para la toma de 

muestras para la determinación de 

grupo sanguíneo y serología. 

Se agrega la captura en la bitácora 

electrónica de cada donador. 



REVISIÓN 

FECHA 

08 5 de diciembre de 2011 

08 5 de diciembre de 2011 

08 

5 de diciembre de 2011



ISBN: 978-968-9170-17-4 




CAL-02-B 



Una vez que al candidato a donación se le ha realizado la toma de la muestra (Ver 

procedimiento 

CAL-43) y cumple con las especificaciones publicadas en el área se procede así: 

La Enfermera administrativa recibe del área de recepción la Historia clínica de candidatos a donación (cuando 

el procedimiento es manual, también el formato M-3-0-10-a y b), la Ficha de Identificación del donador, 

formato M-3-0-23, las etiquetas que salen del sistema de cómputo (en procedimiento manual se usa la etiqueta 

M-3-0-30), Y hoja de resultado de Biometría Hemática. 

De la Historia clinica de candidatos a donación observa el nombre completo del donador, lo llama y le 

indica que pase a la sala donde se le realizará recolección sanguínea. Verifica que coincida 

Identificación Oficial con el donador y los datos de la Historia Clínica 

Las enfermeras solicitan al donador le indique en que brazo le fue tomada la muestra, le pide se 

acomode en el reposet 

Se le muestra al donador que el material que se va a utilizar esta cerrado , esteril y nuevo. Se le dá a 

leer el folleto informativo: El que tenga un amor ….. Que lo cuide. 

Las Enfermeras verifican el nombre del donador de la Historia Clínica y Número de Unidad asignado, 

coloca las etiquetas en los tubos, lila para la determinación de grupo sanguíneo y rojo para la 

serología (ó transcribe los datos a las bolsas cuando el sistema es manual) 

La enfermera que realiza la flebotomía corrobora que los datos del donador sean correctos verificándolos con 

la identificación con fotografía. Coloca el torniquete en el brazo, identifica la vena en donde se realizará la 

flebotomía y realiza el procedimiento de asepsia en el siguiente orden: jabón antiséptico, iodopovidona y 

alcohol. Posteriormente realiza la flebotomía y se fija la línea al brazo con tela adhesiva, indica al donador 

abrir y cerrar el puño de la mano durante el tiempo que dure la extracción sanguínea. 

La pantalla y la alarma de la balanza indica el llenado adecuado de la bolsa (450 a 480 ml +/- el 10% 

dependiendo de la bolsa que esté en uso), automáticamente se cierra el sistema y no deja pasar más sangre, 

o se pinza la línea de extracción y se retira la aguja y la bolsa (se da máximo 10 minutos y si no se obtiene el 

volumen deseado retira la aguja y la bolsa). 

Las muestras sanguíneas se tomarán dependiendo de la bolsa que esté en uso al inicio o al final de la 

extracción, respectivamente. Primero se toma la muestra del tubo con el tapón color lila (grupo sanguíneo) y 

luego el tubo de tapón color rojo o amarillo (serología). 

Se pinza la línea y se retira la aguja, colocando inmediatamente una torunda de algodón seca, dando indicación 

al donador de que permanezca acostado con el brazo suavemente doblado sin hacer presión hasta que le den la 

indicación de levantarse. La enfermera que retiró la aguja sella y corta la línea de la misma así como la línea del 

vacutainer, depositando el material punzocortante en el contenedor de RPBI. Anota la hora de inicio y término 

del sangrado. Homogeniza la línea 2 veces y en el sellador dieléctrico se realizan las secciones para los pilotos 

para su uso en el laboratorio. Se coloca la bolsa en el refrigerador (Temperatura 1 a 6°C) para que el personal 

de laboratorio la traslade al mismo.



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



La enfermera da las indicaciones a los donadores de permanecer acostados aprox. 10 minutos. Coloca parche adhesivo 

en el sitio de la flebotomía y vendaje ligeramente compresivo en el área. Entrega etiqueta de autoexclusión al donador 

(ó talón en sistema manual) Para que de acuerdo a lo que leyó del folleto marque lo que considere si su sangre es 

segura “si o no”. Pregunta al donador como se siente: 

¿Se siente 

Si No 

bien? 

Le indica que se puede levantar y mantenga doblado el brazo durante 20 minutos más, deposite la etiqueta en el 

buzón y pase a tomar un refrigerio para posteriormente pasar a recepción y registrar su hora de salida, pedir su 

comprobante de donación con la trabajadora social (ver procedimiento CAL-19) , el cual se imprime del sistema de 

cómputo (o comprobante con formato M-3-0-25, cuando se emplea sistema manual). Despide al donador y da la 

gracias. 

La etiqueta (o talón, en procedimiento manual) de autoexclusión, permite al donador, 

informar si considera que su sangre es segura o no es segura 

La enfermera llena la Bitácora CAL-46 A 

(Disponentes y eventos adversos) con los datos 

de los donadores y coloca la etiqueta de 

autoexclusión en el ángulo superior izquierdo de la 

ficha de identificación del donador 

¿Mi sangre 

SI no 

es segura? 

Se suspende la extracción si estuviera en este 

proceso e inmediatamente se avisa al médico 

responsable del área quien dará indicaciones 

para el manejo del evento 

Las enfermeras registran la Autoexclusión y el Producto 

no Conforme por defecto de recolección en la bitácora 

CAL-46-B. 

Colocan la etiqueta de Producto No Conforme 

inmediatamente en la bolsa de sangre total (etiqueta 

fluorescente) ; Notifican al químico responsable y al 

personal de fraccionamiento para que le de el manejo 

de producto de conforme. 

Al final de la jornada, las enfermeras registran en la Bitácora 46-A los datos de todos los 

donadores del día y eventos adversos a la donación (en caso de que se presenten). Captura 

los datos en la bitácora electrónica de cada donador y entrega los documentos de los 

donadores efectivos al médico asignado.

FECHA 



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



VIGILANCIA MÉDICA 

En cuanto a la permanencia de los médicos en el área de selección de 

disponentes se determina lo siguiente: 

1. Durante el procedimiento de toma de muestra, extracción de sangre total y 

aféresis cualquier reacción adversa será atendida de manera inmediata por 

la persona que realiza el procedimiento. (enfermera o químico) 

2. La enfermera o químico, avisará al médico. 

3. Los médicos deben permanecer en el área, durante los procedimientos 

mencionados. 

4. cuando algún médico requiera ausentarse del área, avisará y encargará a 

otro médico para que esté pendiente de los donadores. 

BITÁCORAS Y FORMATOS RELACIONADOS A ESTE PROCEDIMIENTO 

CAL-46-A 

BITACORA DE DISPÓNENTES Y EVENTOS ADVERSOS A LA DONACIÓN 

Los rubros que contiene la Bitácora CAL-46-A, son los siguientes: 

Numero de 

Donadores 

Sexo HORA DE 

INICIO 

Femenino Masculino 

HORA DE 

TERMINO 

AUTOEXC 

LUSION 

No de 

UNIDAD 

OBSERVACIONES 

Y 

EVENTOS 

ADVERSOS A LA 

DONACIÓN 

ENFERMERA



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



BITÁCORA DE REGISTRO DE PRODUCTO NO CONFORME 

Los rubros que contiene la Bitácora CAL-46-B, son los siguientes: 

FECHA 

Numero de 

unidad 

NOMBRE 

DONADOR 

CAUSA DE LA NO 

CONFORMIDAD 

NOMBRE Y FIRMA DE 

ENFERMERA QUE 

ENTREGA 

NOMBRE Y FIRMA DE LA 

PERSONA DEL 

LABORATORIO QUE 

RECIBE 

Los datos que solicita la Bitácora son los siguientes: 

Fecha: se anota la fecha actual, del día en el se esta llevando a cabo el 

procedimiento 

Número de unidad: se anota el número que se asignó en toma de muestra y 

que se encuentra en el extremo superior derecho de la ficha de Identificación 

con formato M-3-0-23 

Nombre del Donador: se anota el nombre del donador que aparece en la parte 

superior de la Historia Clínica y que coincide con el número de unidad que 

tiene la etiqueta o talón de autoexclusión. 

Causa de la No Conformidad: Se detalla el motivo por el cual no cumple con 

los requisitos del producto. 

Nombre y firma de la Enfermera que entrega: Se anota el nombre y la firma de 

la enfermera quien detectó el producto no conforme. 

Nombre y firma del personal de laboratorio que recibe: Se anota el nombre y la 

firma de la persona del laboratorio que recibe el producto no conforme.



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Talón de autoexclusión se muestra a continuación: 

Talón del sistema informático de Talón sistema Manual 

Banco de Sangre 

El Talón de autoexclusión se debe llenar de la siguiente manera: 

DESPUES DE QUE HAYAS 

DONADO SANGRE, 

DEPOSITALO EN EL BUZON. 

MI SANGRE: 

SI ES SEGURA (Tacha aquí si consideras que tu 

sangre SI es segura) 

NO ES SEGURA (Tacha aquí si consideras que tu 

sangre NO es segura) 

No. DE REGISTRO: Número de unidad asignado 

consecutivamente y se encuentra 

en la bitácora de ingresos y 

egresos. 

Nota 1: El Personal del laboratorio debe recoger las muestras 

identificadas y el formato M-3-0-30 previamente lleno. 

Nota 2: Es importante revisar que la enfermera deje en 

recepción los formatos M-3-0-10-a y b, M-3-0-23, 

cupón de autoexclusión y el ticket de resultado de 

toma de muestra.



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Nota 3: En el Procedimiento CAL-19 se indica como llenar el 


Nota 4: La bolsa de recolección de sangre no debe contener 

burbujas mayores a 3mm de diámetro antes de ser 

utilizada. Y debe de contener el sello que indica 

PENDIENTE DE ESTUDIOS NO TRANSFUNDIR. 

Nota 5: 

Nota 6: 

Las unidades marcadas con autoexclusiones 

implican su destrucción al llegar a la sección de 

fraccionamiento 

ASEPSIA: En caso de que algún candidato a donar 

sangre refiera ser susceptible a algún componente 

que se utiliza para realizar al asepsia, previo a la 

venopunción, se modificará el procedimiento, 

eliminando la sustancia o solución a la que es 

susceptible. 

REGISTROS 

CAL-46-A Bitácora de control de disponentes. 

CAL-46-B.-La bitácora de control de autoexclusión 

y efectos adversos a la donación , CAL-46-B No tiene Caducidad. 

Cupón de autoexclusión se almacena en el archivo activo durante 5 años y en el 

archivo muerto 5 años.



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



ANEXO 1 

CARACTERISTICAS DE REFRIGERIO A DONADORES



ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 


Procedimiento de Extracción Sanguínea



Fecha: 31 de Julio 2003 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 


Procedimiento de Control de Calidad en los 

diferentes hemocomponentes procesados en el laboratorio 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Ninguno 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

31/07/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





En el área de Control de calidad aplicado a la sangre y sus componentes 

obtenidos en el Banco de sangre del INP se realizan las siguientes pruebas: 

A. CONCENTRADOS ERITROCITARIOS: 

Determinación de Biometría hemática: 

Conteo de leucocitos 

Hematocrito 

Hemoglobina 

Control Bacteriológico 

B. CONCENTRADOS PLAQUETARIO Y PLAQUETAFERESIS: 

Determinación de Biometría Hemática: 

Conteo de leucocitos 

Cuenta de plaquetas: 

Indices plaquetarios: 

ADP 

VPM 

Control Bacteriológico 

Determinación de pH 

C. PRODUCTOS LEUCORREDUCIDOS: 

Determinación de leucocitos residuales 

Determinaciones acorde al tipo de producto estudiado 

(Ver incisos A y B) 

D. PLASMA FRESCO CONGELADO: 

Determinación de Factores de Coagulación: 

Factor I 

Factor VIII 

Factor IX 

Determinación de proteínas totales




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




E. PLASMA DESPROVISTO DE FACTOR: 


Determinación de Factor IX 

Determinación de Proteínas Totales 

F. CRIOPRECIPITADOS: 


Determinación de Factor I 

Determinación de Factor VIII 

Este análisis se realiza en 8 productos (8 CE, 8 CP, 8 PFC, 8PSF, 8 GAH) de la 

población captada mensualmente y en todo producto anormal.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El Químico de Control de calidad toma al azar el 1% o 8 Unidades (lo que sea mayor ) de los Concentrados eritrocitarios del mes en cuestión 

obtenidos del refrigerador donde se resguardan para ser utilizados 

Se colocan las bolsas que contienen el CE en la campana de extracción y se Identifica un tubo por cada producto con el # de registro que 

presenta la bolsa que contiene el C.E. a analizar 

Se coloca la bolsa que contiene el CE en agitación aproximadamente de 10-15 min. con una velocidad de 100- 120 RPM ( es importante que 

la temperatura de la bolsa no suba demasiado). 

La bolsa contiene 2 lineas. la que fue utilizada para realizar la extracción de la sangre y la otra es la que unía a las demás bolsas. Esta última 

es la que se purga. 

La homogenización entre el CE que contiene la bolsa y el que se encuentra en la linea es muy importante por que esta linea sera la vía de 

extracción de la muestra. Se toma la punta de la linea de la bolsa con las pinzas de rodillo y se purga (se mueve la pinza en dirección de la 

bolsa, para dejar pasar todo el CE que contiene y sin quitar la pinza se agita la bolsa sosteniendola en la palma de la mano) este proceso de 

purga y agitación se realiza varias veces. 

Se utiliza el conector esteril ( TERUMO STERILE TUBING WELDER TSCD) para unir una bolsa de transferencia con el fin de evitar habrir el 

sistema y contaminarlo. 

BOLSA DE TRANSFERENCIA 

De la Bolsa de transferencia que contiene 

aproximadamente con 50 ml se toma una 

muestra para el estudio 

Se analizan las muestras en el Sysmex 

KX-21N observando los resultados obtenidos 

en la muestra y el tubo de leucocitos, 

hemoglobina y hematocrito. 

De la Historia clinica del donador se buscan 

los valores iniciales de leucocitos, 

hemoglobina y hematocrito para establecer la 

eficiencia del producto. 

Todos los datos obtenidos durante este 

proceso se escriben en la bitácora de Control 

de Calidad CAL-47-A y se anexa el ticket 

obtenido del Sysmex KX-21N y se escriben 

los datos indicados en la bitácora de Control 

de Calidad Bacteriológico CAL-47-B 

Los CE analizados se mandan al laboratorio 

de bacteriología junto con el formato M-3-1- 

06-a o el F-A-13-16-06 y 

la bitácora CAL-47-B para que el personal de 

bacteriología firme de recibido el producto. 

Los resultados de bacteriología son enviados 

al Jefe del banco de sangre y el Químico de 

control de calidad los pasa a la bitácora 

CAL-47-A 

CONTROL DE CALIDAD DEL CONCENTRADO ERITROCITARIO 

BOLSA ORIGINAL CON EL 

VOLUMEN REMANENTE: 

se envia al servicio de bacteriologia 

para su cultivo.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



diferentes hemocomponentes procesados en el laboratorio




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Curva de actividad para dosificación de FACTORES en el equipo ORGANON 

TEKNIKA COAG-A-MATE 

Muestra biológica: 

Reactivos: 

Material: 

Condiciones: 

Estándar liofilizado o 

Pool de plasmas citratados (mínimo 10) 

Sustrato liofilizado deficiente en factor VIII 

Sustrato liofilizado deficiente en factor IX 

Tromboplastina parcial activad 

Trombina 

Cloruro de clacio 0.025M 

Buffer veronal (Owren) 

Micropipetas de 50, 100, 200 y 1000 µl 

Cubeta de plástico para el equipo de coagulación 

Gradilla metálica en cubeta de hielo 

Sustratos, reactivos, controles y muestras de trabajo 

mantenerlos en baño de hielo 

Sistema de reacción a 37°C 

Nota: el pool de plasmas se obtiene de donadores, se recomienda que sean 

mujeres (mayor concentración de factor VIII y/o IX). 

En caso de no correr la curva el mismo día de la toma de muestra, se mantiene a - 

35°C hasta por un año.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CURVA DE ACTIVIDAD O CONCENTRACION 

Tubo 1(dilución 1/5) 

Se adiciona 800microlitros de Buffer + 200microlitros de la muestra 

Tubo 2 (dilución 1/10) 

Se adiciona 500microlitros de Buffer + 500microlitros de la muestra del Tubo 1 





se quitan 500microlitros después de homogenizar para que contenga la misma 

cantidad que los demás. 

Las diluciones utilizadas para la calibración de la curva de Fibrinogeno son las 

siguientes: 


Se adiciona 200microlitros de la estándar o control (≥360mg%) + 800microlitros de 

Tampón Owren 

Tubo 2 (dilución 1/10) 

Se adiciona 100microlitros de la muestra+ 900microlitros de Tampón Owren 


Se adiciona 100microlitros de la muestra + 1.9ml de Tampón Owren 


Se adiciona 100microlitros de la muestra+ 2.9ml de Tampón Owren 

Reactivos para reconstituir para la curva de Factor VIII, IX y Fibrinogeno: 

STA Factor IX se reconstituye en 1ml de agua destilada. 

Factor VIII Deficient plasma se reconstituye en 1ml de agua destilada. 

Trombina se reconstituye en 5ml de agua destilada. 

PTT Reagent se reconstituye 30min. antes de ser utilizado.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El Patrón de Fibrinógeno se reconstituye en 1ml de agua destilada. 

Coagulación 

La Prueba de coagulación se realiza para los siguientes productos: 

Al Plasma fresco congelado se le realiza Factor VIII, IX y Fibrinógeno. 

Al Plasma sin factor se le realiza Factor IX. 

A los Crioprecipitados se les realiza Factor VIII y Fibrinógeno.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CURVA DE CALIBRACIÓN




ISBN: 978-968-9170-17-4 


MUESTRA 

CAL-02-B 




Cuando la muestra que se va a analizar es un Crioprecipitado se reconstituye con 

15ml de solución salina todo el crioprecipitado, se agita durante 15minutos y se 

toma una alicuota y diluye con diluyente o tampón 1:5 o 1:10




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




A continuación se describe el manejo del Citometro:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 







ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 







ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El formato M-3-1-06-a se llena de la siguiente manera: 

En el recuadro vacío del lado superior izquierdo se anota el numero de la unidad 

que se encuentra en la etiqueta de la bolsa del producto. 

El grupo: Grupo sanguíneo del paquete. 

El tipo de producto: Hemoderivado enviado (CE, CP, Plasma, etc.) 

Servicio : Servicio que solicita el análisis “Banco de sangre”. 

Fecha: Día, mes y año en que se solicita el análisis. 

El formato F-A-13-16-06 se llena de la siguiente manera: 

Dependencia: Institución que requiere el análisis “ INP ” 

Servicio : Servicio que solicita el análisis “Banco de sangre”. 

Fecha: Día, mes y año en que se solicita el análisis. 

En el recuadro vacío del lado superior izquierdo se anota el número de la unidad 

que se encuentra en la etiqueta de la bolsa del producto. 

El grupo: Grupo sanguíneo del paquete. 

El tipo de producto: Hemoderivado enviado (CE, CP, Plasma, etc.) 

La bitácora de Control de calidad de Bacteriología CAL-47-A se llena de la 


Fecha: Día en que se realiza el control de calidad. 

Procedencia: Institución de donde se manda realizar el análisis. 

Registro: # Unidad 

Producto: Tipo de hemoderivado para analizar.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Anticoagulante: Anticoagulante que contiene la bolsa cuando se realiza el 

sangrado, se encuentra especificado en la etiqueta del hemoderivado. 

RPM : Velocidad a la que fue fraccionado el hemoderivado (Bitácora de 

fraccionamiento) 

T°C:Temperatura a la que fue fraccionado el hemoderivado (Bitácora de 


Fecha de caducidad del producto: Día, mes y año en que caduca el 

hemoderivado esta especificado en la etiqueta. 

Hemólisis: Cuando se realiza el conteo en los CE se requiere saber si el 

hemoderivado se encuentra hemolizado o no. 

pH: Cuando se realiza conteo en CP se requiere conocer el pH 

Peso bruto: Se requiere conocer el peso del hemoderivado (Bitácora de 


Volumen (ml): Se requiere conocer el volumen del (Bitácora de 


PLQ/microlitros: Cuando se realiza conteo en CP (ticket del Sysmex) 

PLQ/U: Cuando se realiza conteo en CP (Dilución) 

Leucocitos/microlitros: Cuando se realiza conteo en CP y CE (ticket del 

Sysmex) 

Leucocitos/U: Cuando se realiza conteo en CP y CE 

Hematocrito inicial: Cuando se realiza conteo en CE (ticket del Sysmex) 

Hematocrito final: Cuando se realiza conteo en CE (ticket del Sysmex) 

Control bacteriológico:.Resultados del cultivo en el Laboratorio de 

Bacteriología. 

Factor VIII %: Se obtiene % de actividad del factor de coagulación en Plasma 

y crioprecipitados 

Factor IX %: Se obtiene % de factor de coagulación del Plasma y 

crioprecipitados 

Fibrinógeno (mg/dl) Se obtiene la concentración en mg de Fibrinógeno en 

PFC y GAH. 

La bitácora de Control de BacteriologiaCAL-47-B se llena de la siguiente manera: 

Fecha: Día en que se realiza el control de calidad. 

Registro: # Unidad 

Producto: Tipo de hemoderivado para analizar. 

Grupo: Grupo sanguíneo del hemoderivado (etiqueta del producto)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del donador o 

paciente. 

Entrega: Nombre completo de la persona que esta solicitando el análisis. 

Recibe: Fecha en que recibe y firma de quien lo recibe. 

REGISTROS 

El formato F-A-13-16-06 se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en 


El formato M-3-1-06-a se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en 


La bitácora CAL-47-A se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en 


La bitácora CAL-47-B se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en 





Suplente: ____________________________________ 

Suplente: ____________________________________ 

Suplente: ____________________________________



Fecha: 23 de junio 2011 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: Dra. DORIS 

LORDMENDEZ JACOME 

Firma: 



Procedimiento de Aféresis 

Revisado por: 

Nombre: Dra. M. LETICIA 

MEDINA MACÍAS 

Firma: 

Fecha:23 de junio 2011 

Aprobado por: 

Nombre: Dra. DINORA 


Firma: 

Fecha:23 de junio 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

a) Se modifica el nombre de la 

bitácora CAL-46 B (Bitácora de 

registro de producto no 

conforme) 

b) Se agregan lineamientos 

incluyendo las características 

del producto conforme de 

Aféresis. 

c) Se agrega el formato Control 

diario de procedimientos de 

aféresis 



REVISIÓN 

04 

FECHA 

23 de junio 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El Instituto Nacional de Pediatría requiere la donación de plaquetas en el Banco de 

sangre para el diferente aporte transfusional que se lleva a cabo en el mismo, la 

cantidad de donadores al procedimiento de aféresis dependerá de la demanda en el 

Banco de Sangre.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El candidato a donador solicita a la Trabajadora social una cita para donar plaquetas 

Se presenta el donador el día de su cita, presentando su identificación oficial con fotografía y vigente, pasa a recepción en 

donde se registra (Ver procedimiento CAL-20); y se identifica el formato M-3-0-23 de acuerdo al procedimiento de aféresis que 

se vaya a realizar (PLAQUETAS, GRANULOCITOS, CÉLULAS TALLO) 

Se le realiza la valoración de venas y signos vitales (Ver procedimiento CAL-30), toma de muestra (Ver procedimiento CAL-43) y 

la valoración medica (Ver procedimiento CAL-40). 

Si el donador se encuentra apto el Médico le proporciona la información sobre el procedimiento y lo ingresa a la sala de Aféresis y 

solicita el número de unidad y las etiquetas correspondientes (Ver procedimiento CAL-20) pegando una etiqueta en la hoja de 

identificación y desprende otra para que entrega a trabajo social para que sea pegada en el comprobante de donación y anota en 

forma manual el motivo de la donación (control interno de trabajo social . Si por necesidades del servicio o por ser producto 

dirigido se programará una cita registrándose en la Bitácora de Citas de Aféresis CAL-50-B se le entrega recordatorio CAL-50-C 

de cita y se le dan indicaciones generales previas a la donación. 

no 

El médico entrega al área de 

enfermería la documentación 

correspondiente, para inicio del 

proceso de aféresis 

Cita 

programada 

Cuando el candidato acude a su cita de donación, el 

médico recaba la documentación con resultados en el 

área de Serología, y verifica resultado de marcadores 

serológicos 

Serologfía 

si no 

Negativa 

Si alguna(s) de las pruebas del candidato a 

donador presenta un resultado REACTIVO se 

descarta como donador y el área de Serología 

notifica al Medico para que se solicite 2da muestra 

para realizale la prueba confirmatoria, y una vez 

que se tiene el resultado se anexa la hoja de 

resultados en su documentacion y el Medico le 

informa el motivo de rechazo 

si




ISBN: 978-968-9170-17-4 




La Enfermera llama al candidato a donación por su nombre completo, le solicita su identificación y le 

indica que pase a la sala donde se le realizará el proceso, se le muestra el equipó que será utilizado y 

se abre en su presencia haciendo énfasis en que el equipo esta cerrado, estéril y es desechable. 

Se le pide al donador que pase al baño y regrese al área para iniciar la donación. 

Aproximadamente 30 minutos previos al inicio del procedimiento de aféresis, la enfermera o el médico 

encargado del procedimiento administrará de manera profiláctica 2 tabletas de carbonato de calcio 

(500mg/tab) por vía oral a cada donador. Se reforzará la información a los donadores sobre los 

síntomas iníciales de hipocalcemia por parte del personal médico y de enfermería para asegurar la 

comprensión de dicha información.* 

Se procede a instalación y purgado de equipo (cebado) (Ver manual del operador del separador en 

uso)l e inicia el proceso de donación de Aféresis registrando la información en la hoja de control de 

procedimientos de aféresis Bitácora CAL 50-A 

Al terminar el proceso de Aféresis, se toman signos Vitales y se colocan parches en las zonas de venopunción 

Se le entrega al donador el folleto “El que tenga un amor que lo 

cuide” y el talón de autoexclusión confidencial 

AUTOEXCLUSIÓN 

no 

Se le pide al donador pase al comedor para ingerir su refrigerio y al terminar pasar a trabajo 

social quien entrega el comprobante de donación y proporciona información del horario para 

recoger resultados de exámenes realizados. 

La Enfermera notifica 

al médico del área de 

aféresis, y se 

registra en la 

Bitácora CAL 46-B 

y se maneja como 

producto No 

conforme (ver 

procedimiento CAL- 

09 ) 

Al terminar de retirar el equipo la enfermera identifica las unidades del producto obtenidas (2 

bolsas), la ficha de identificación. Una de las etiquetas se pegan en la Bitácora CAL-50-a de 

la hoja que corresponde al procedimiento que se lleva a cabo 

NOTA: La identificación de las bolsas es provisional hasta la identificación final en Serología . 

(Ver CAL- 32 ) 

Se anota en cada una de las bolsas el número de Aferesis (obtenido de la bitacora CAL-50-A), la 

cantidad de concentrados plaquetarios (estimados por la máquina) y el volúmen. 

La enfermera lleva las bolsas del producto al área de Inmuno-Hematología – receptores. 

Se colocan en el refrigerador correspondiente y se avisa al personal del área. 

Se entrega al área de Serología la Historia clinica, la ficha de identificación, el talón de 

autoexclusión, los resultados de la biometría PRE. 

Al terminar el procedimiento la enfermera registra la información en el sistema informático de 

CAL-02-B 

banco de sangre . 

si




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



*El contenido de la plática de información que deben impartir el personal médico y de 

enfermería sobre los potenciales síntomas iníciales de la hipocalcemia secundaria a 

efectos adversos por la anticoagulación con citrato son: 

Adormecimiento peribucal, vómitos, diarreas y menos frecuentemente contracturas. 

Se anexa a la Historia Clínica el siguiente control diario de procedimiento de aféresis: 

LINEAMIENTOS O POLÍTICAS: 

1.- La información adicional que se anexa a la hoja de identificación del donador no 

deberá eliminarse (desprenderse o borrarse). 

2.- La obtención de componentes celulares por métodos de aféresis deberán tener 

como propósito cubrir la deficiencia específica de dicho componente en un paciente. 

3. La realización de los procedimientos para la obtención de plaquetas, eritrocitos y 

plasma se justificara en base a las reservas y demandas de dicho componente para 

cubrir las necesidades de los pacientes. 

4.- Los procedimientos de aféresis para la obtención de leucocitos (granulocitos y/o 

células progenitoras hematopoyéticas deberá estar justificada por una solicitud de 

interconsulta del servicio y el médico del servicio responsable del tratamiento del 

paciente




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



5- Los donadores de componentes celulares obtenidos por aféresis deberán cubrir 

todos los requisitos normativos de selección. 

- Para plaquetas. 

Accesos venosos adecuados. 

Cuenta plaquetaria mínima de 150x10 3 

No ingesta de medicamentos que contengan acido acetilsaliciclio en 

las ultimas 72 h (única toma) o 7 días (tomas repetidas). 

- Para leucocitos (granulocitos, neutrófilos). 

Accesos venosos adecuados. 

Movilización 12 h previas al procedimiento con esteroides y/o factor 

estimulante de colonias). 

Por los menos dos cuentas leucocitarias con diferencial previas al 

procedimiento que permitan valorar la respuesta al estimulo de la movilización. 

Para eritrocitos (dobles rojos): 

Donador: Genero. Masculino. 

Peso: ≥ 65 Kg. 

Talla: ≥ 165 cm 

Hematocrito: ≥45% 

Grupo: Dependerá de las necesidades de pacientes y/o del 

faltante de las reservas del banco de sangre. 

Para plasma: 

Donador: genero: indistinto. 

Peso: ≥ 50 Kg. 

Proteínas séricas: ≥ 6 g/mL 

Dependerá de las necesidades del servicio. 

6.-Los concentrados de leucocitos y plaquetas obtenidos al final de cada procedimiento 

deberán cumplir con los siguientes requisitos para ser considerado como producto 

conforme: 

Componente: 

Leucocitos 

(Neutrófilos) 

Volumen (mL variable 

Cuenta celular mínima 1x10 10 neutrófilos




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Plaquetas 

CAL-02-B 



Volumen (mL) 200-250 mL 

Cuenta mínima de plaquetas 3.0x10 11 de plaquetas 

Plasma 

Células progenitoras 

450-750 mL Proteínas 60g/L 12 meses congelado 

FVIII 1UI/mL 

Fibrinógeno 160 mg/dL 

≥ 50 mL 

Para todos los componentes sanguíneos: 

≥ 2x10 6 /kg de peso de receptor de 

células CD34+ Hematopoyéticas 

(Alogenico) 

≥1.5x10 6 /Kg de peso receptor de células 

CD34+ 

(Autólogo) 

Integridad de los contenedores. 

Identificación de la unidad con: Nombre del donador 

Número de unidad/Número de aféresis. 

Fecha de obtención. 

Tipo de componente. 

Volumen. 

Talón de autoexclusión con respuesta SI ES SEGURA. (EXCEPTO DONADORES 

PEDIATRICOS)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



7.- Los componentes celulares obtenidos por aféresis que no cumplan con los criterios 

de conformidad deberán ser evaluados conjuntamente con el personal médico y de 

laboratorio de banco de sangre cuando el componente sean plaquetas, glóbulos rojos o 

plasma Y el coordinador de trasplantes cuando se trate de Células progenitoras 

hematopoyéticas, en base a los siguientes criterios: 

Cuando la dosis no sea la óptima se considerara la posibilidad de la realización 

de otro procedimiento para poder alcanzar la dosis sumando la dosis anterior. 

El volumen y la concentración de plaquetas sea equivalente como mínimo a un 

concentrado de Plaquetas obtenido de sangre total y en el caso de eritrocitos y/o 

plasma fresco pueda cubrir una dosis de 10 mL/Kg de peso. 

La Bitácora de Aféresis CAL-50-A se llena de la siguiente manera: 

Procedimiento: Anotar el procedimiento realizado: 

Plaquetaféresis 

Después de anotar el procedimiento poner A (significa Aféresis) / número consecutivo 

de la bitácora CAL-50-A / los dos últimos números del año. 

Fecha: Día, mes y año en que se realiza la aféresis. 

Equipo: Indicar el tipo de máquina usada. 

Flujo: Indicar el tipo de flujo usado para la aféresis: 

Continuo 

Discontinuo 

I. DATOS DEL RECEPTOR 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y 

Nombre(s) del paciente que requiere el 

producto. 

Cama: # de la cama donde se encuentra 

hospitalizado el paciente. 

Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del paciente que va a recibir el 

producto. 

Diagnostico: Diagnostico principal del paciente para el que 

se realiza la donación.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


II. DATOS DEL DONADOR 

CAL-02-B 




Nombre(s) del donador. 

Edad: # de años que tiene el donador al momento 

de realizar el procedimiento. 

Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del donador 

Parentesco: Relación que existe entre el paciente y el 

donador (Amistad, familiar, etc). 

Peso El peso del donador expresado en Kg 

H.I.V., H.C.V., HbsAg, R.P.R, BRUCELLA, OTROS. 

Resultados de las pruebas realizadas al 

donador por el Laboratorio del Banco de 

sangre tomado de la Historia Clínica. 

Nombre y firma de quien realizo las Pruebas 

Sello o firma de quien realizo el análisis de las 

pruebas. 

III. DATOS DEL PROCEDIMIENTO 

Hora de inicio: Hora en que se inicio el procedimiento. 

Hora de terminación: Hora en que se finalizó el procedimiento 

Responsable: Nombre y firma de la enfermera que realiza 

el procedimiento. 

Otros datos que se registran en la bitácora CAL-50-A anotados por la enfermera 

durante el procedimiento: 

TIEMPO 

** 

VELOCIDAD 

DE 

SANGRE * 

VELOCIDAD 

DE 

PLASMA * 

VOLUMEN 

DE 

SANGRE * 

VOLUMEN 

DE 

PLASMA * 

GOTAS DE 

ACD ** 

SIGNOS VITALES 

Y OBSERVAC. ***




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



*. Obtenidos directamente de la máquina. 

**. Al momento de llenar el registro. 

***. Se registran antes, durante y después del procedimiento. 

Volumen procesado de sangre: Cantidad de sangre que se proceso al finalizar 

el procedimiento, obteniendo este dato 

directamente de la máquina, referido como 

END-POINT. 

Anticoagulante: Cantidad de anticoagulante que se utilizo 

durante el procedimiento. 

Solución salina: Cantidad de solución salina que se utilizo 

durante el procedimiento 

NOTA: La enfermera que realizo el procedimiento calcula las cantidades de Solución 

salina y Anticoagulante mediante la inspección visual de las bolsas; resta al volumen 

inicial marcado en las bolsas el volumen contenido en las bolsas al final del 

procedimiento (Las bolsas son graduadas). 

IV. RESULTADOS 

Volumen de la cosecha: Dato que es obtenido por la enfermera al 

pesar cada bolsa que contiene el producto y 

restarle el peso de la bolsa vacía (40 ml) 

DATOS DE 

BIOMETRIA HEM. 

PLAQUETAS 

LINFOCITOS 

GRANULOCITOS 

HEMATOCRITO 

OTROS 

MUESTRA 

PRE 

MUESTRA 

POST 

MUESTRA DE LA 

COSECHA COSECHA FINAL




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Datos obtenidos de: 

CAL-02-B 



Muestras del Donador (PRE Y POST) Equipo automatizado de biometría 

hemática 

Muestra de la Cosecha Área de Control de Calidad 

Cálculo de la cosecha final Médico que supervisa el procedimiento 

Nombre y firma del Médico que Firma de quien realizó el 

realizo el procedimiento: análisis de la cosecha final . 

La Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se muestra a continuación: 

FECHA Y 

HORA 

DONADOR PACIENTE 

NOMBRE TELEFONO 

FECHA DE 

ESTUDIO 

PROCEDIMIE 

NTO 

NOMBRE 

MOTIVO DE 

LA 

DONACIÓN 

La Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se llena de la siguiente manera: 

OBSERVACI 

ONES 

DONADOR 

Fecha y hora: Día, mes y año de la cita de donación. Y 

Hora y minutos en que se da la cita de 

donación. 

Nombre : Apellido paterno, Apellido materno y 

Nombre(s) del donador. 

Teléfono: # telefónico del donador. 

Fecha del estudio: Día, mes y año en que se le realizo los 

estudios de Serologia. 

PACIENTE 

Procedimiento: Procedimiento a realizar 


Nombre(s) del paciente.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Motivo de la donación: Diagnostico por el que el Médico justifica el 

procedimiento de plaquetaféresis. 

Observaciones: Anotar cualquier observación relacionada al 

procedimiento (Cancelado, Suspendido, 

Reprogramado, No acudió donador, etc.) 

El recordatorio de cita de aféresis CAL-50-C es el siguiente: 

Favor de permitir el paso al 

Sr. (a): Nombre completo del candidato a donar plaquetas. 

DONADOR (B) DE PLAQUETAS 

El día: Fecha de cita de donación. 

A las: Horario de la cita de donación. 

Fecha de Estudio: Fecha en que se tomaron muestras para estudio. 

Al reverso deberá contener la siguiente información:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Indicaciones. 

El día anterior a la cita: 

No comer de preferencia alimentos con grasa 

No tomar bebidas alcohólicas con un mínimo de 72 hrs previas a la 

donación. 

No tomar medicamentos con un mínimo de 72 hrs previas a la 

donación. 

Cenar sin grasa y no tomar leche 

Aseo Corporal 

Dormir como mínimo 6 horas 

El día de la cita: 

Puede tomar jugo y fruta 

Usar ropa holgada y con manga corta. 

La Bitácora de Entrega y Recepción de Historias clínicas CAL-50-D se llena de la 


Fecha: Día, mes y año en que se entregan las 

Historias clínicas al personal de grupos. 

# de Historias Clínicas Totales: # final de Historias clínicas del día (donación 

de sangre total) 

Intervalo de Unidades: # de Unidad inicial y # de Unidad final. 

# de Plaquetas: # de donadores de plaquetas del día.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Firma de quien entrega: Firma del Médico que entrega al personal de 

grupos la bitácora. 

Firma de quien recibe: Firma del personal de grupos que recibe y 

verifica que se encuentren el # de Historias 

clínicas que se especifican en la bitácora. 

Observaciones: Comentarios con respecto a la entrega de la 

documentación. 

Nota 1: Se requiere de 2 venas gruesas para que se lleve a cabo la Aféresis. 

Nota 2: Existen 3 maquinas Separadoras de células sanguíneas TRIMA para realizar el 

procedimiento de aféresis de plaquetas. 

*Nota 3: Si las plaquetas se necesitan para una urgencia, se realiza la Aféresis sin 

tener los resultados de las Pruebas serológicas, pero no se liberan las plaquetas hasta 

que se tienen los resultados de las mismas. 

NOTA: ENTREGA DE RESULTADOS DE SEROLOGIA Y COMPROBANTE DE 

DONACIÓN LO REALIZA EL MÉDICO COORDINADOR O LA ENFERMERA Y 

SOLICITA QUE FIRMA LA BITACORA DE REGISTRO DE ENTREGA DE 

RESULTADOS. 

FECHA: En que recibe los resultados 

NOMBRE: Del donador de aféresis 

FIRMA: Del donador de aféresis 

COMENTARIOS: Comentarios que el donador quiera aportar




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 



Control de procedimientos de Aféresis CAL-50-A clínicas se almacenan durante 5 años 

en archivo activo y 5 años en archivo muerto. 

Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se almacena durante 3 meses después de que 

se termina el llenado de la última hoja. 

Recordatorio de cita de aféresis CAL-50-C se anexa a la historia clínica. 

Bitácora de Entrega y Recepción de Historias clínicas CAL-50-D, se almacena durante 

3 meses después de que se termina el llenado de la última hoja. 

El CAL-50 A y las Historias clínicas se archivan durante 5 años en archivo activo y 5 


Bitácora CAL-50-G De entrega de resultados




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Ninguno 

REVISIÓN 

0 

FECHA 

24/09/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



Una vez que al candidato a donar se le realizo la valoración médica (Ver 

procedimiento CAL-40) y fue considerado apto en el área de toma de muestra sale 

impresa la etiqueta para la Biometría Hemática. De donde se toma el Nombre 

completo del donador y se corrobora con el de la Ficha de identificación del 

candidato y se escribe en la Hoja de toma de muestra F-A-14-26 posteriormente 

se pega la etiqueta en el tubo para la Biometría. 

La Etiqueta de identificación es la siguiente: 

Nombre completo del candidato a donador: 

Fecha: 

No. Toma: 

Nombre de la Prueba: 

Número de Toma de muestra: 

La Etiqueta contiene los siguiente datos: 

Nombre completo del candidato a donador:Apellido paterno, Apellido materno y 

Nombre (s) del donador. 

Fecha: Día, mes y año en que se toma la 

muestra 

No. de Toma: Número de candidato a donador, es 

consecutivo y el Químico lo escribe 

a mano 

No. de Toma de muestra: Número que se le asigna en Toma 

de muestra. 

Fecha: Día, mes y año en que se toma la 

muestra.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 






Fecha: 27 Junio 2011 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de Uso del Equipo Automatizado de Biometría Hemática 


Nombre: Q.F.B. MARÍA 

TERESA FLORES 

CAMACHO 

Firma: 

Fecha: 7 DE OCTUBRE DE 

2009 

Revisado por: 

Nombre: M en C 

GUILLERMO ESCAMILLA 

GUERRERO 

Firma: 

Fecha: 14 DE OCTUBRE 

2009 

Aprobado por: 



Firma: 

Fecha: 14 DE 

OCTUBRE 2009




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Se actualiza procedimiento y se 

cambia nombre por Uso del 

Equipo Automatizado para 

Biometrías Hemática, se 

modifican valores de leucocitos 

REVISIÓN 

3 

FECHA 

27 de junio de 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Una vez que el candidato a donador ha sido valorado por el personal de 

enfermería (Ver Procedimiento CAL-30), se calibra el equipo Automatizado de 

Biometría Hemática (Ver Procedimiento CAL-14), se le toma la muestra de sangre 

(Ver Procedimiento CAL-43) y posteriormente se realiza el análisis 

correspondiente de la siguiente manera: 

El equipo Automatizado de Biometría Hemática se usa para el procesamiento de 

la biometría hemática para determinar los niveles de plaquetas, hematocrito, 

hemoglobina, etc. En muestras de sangre. El equipo permite obtener resultados 

casi inmediatos y con ello decidir si las condiciones de la sangre son las 

adecuadas para llevar a cabo la donación. 

El equipo Automatizado de Biometría Hemática se opera de la siguiente manera: 

TOMA DE MUESTRA




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



EL QUÍMICO Y/ O 

LABORATORISTA ENCIENDE EL 

EQUIPO AUTOMATIZADO DE 

BIOMETRÍA HEMÁTICA 

Verificar Niveles de Reactivos, 

de Bote de Desechos ( RPBI) e 

Hojas de impresión 

Introducir Controles Bajo, 

Normal y Alto verificar que 

estén dentro del rango 

especificado y checar la curva 

de L J 

Tomar ficha de identificación 

de Donador ( M-3-0-23) del 

Buzón de Valoración de 

Disponentes ubicado en área 

de recepción 

Anotar # de registro y nombre 

en el formato M-3-4-10). 

Colocar etiqueta emitida por 

recepción en tubos lila para 

BH (2), y tubo rojo si es mujer




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Llamar al Donador por su Nombre, 

verificando su identidad con su 

credencial de elector o documento 

oficial con fotografía 

Realizar asepsia de la zona a 

puncionar, aplicar 

Torniquete y puncionar en 

el antebrazo seleccionado 

Colocar el tubo de Biometría 

Hemática en el Rack o de 

forma manual según sea el 

caso en el equipo de 

Automatizado de Biometría 

Anotar resultados de BH en 

formato M-3-4-10), anexar hoja 

en la ficha de identificación de 

donador y se coloca en buzón 

de valoración Médica 

Pegar las etiquetas con el # de 

Unidad emitidas por recepción 

correspondientes a cada tubo de 

Donador cuando este ha sido 

aceptado




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



SELECCIONAR 

ADMINISTRA- 

DOR 

SI 

SELECCIONAR 

SISTEMA 

CERRADO 

EXPLORADOR 

PONER 

MUESTRAS EN 

RACK 

DONADOR 

SELECCIONAR 

ICONO DE 

MUESTREADOR 

AUTOMÁTICO DE 

MUESTRAS E 

INICIAR 

ANALIZADOR DE BIOMETRÍA HEMÁTICA 

ENCENDER 

ANALIZADOR 

CHECAR EL 

BACKGROUND 

Y METER 

CONTROLES 

EN MODO 

ABIERTO 

PONER 

CONTROLES 

TECLEAR QC 

(CAL) 

BAJO 

MEDIO 

ALTO 

RESULTADO 

IMPRESO CHECAR 

CON TABLA DE 

VALORES 

QUE VIENE EN 

LAOS CONTROLES 

OBSERVAR 

PUNTOS EN 

GRÁFICAS DE L-J Y 

VERIFICAR QUE 

ENTREN EN EL 

RANGO 

OBSERVAR RESULTADOS 

EN PANTALLA E IMPRESO 

VACIAR RESULTADOS AL 

FORMATO M-3-4-10 

ENGRAPAR RESULTADO 

EN HISTORIA 

SELECCIONAR 

ICONO 

MUESTREADO 

R CON EL 

NUMERO DE 

LOTE DE 

CADA 

CONTROL 

INICIAR 

NO 

REPETIR PROCESO 

Y/O 

VERIFICAR 

REACTIVOS 

Y/O 

CAMBIO DE 

CONTROLES




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La aceptación o rechazo de un donador en cuanto a los valores en la Biometría 

Hemática se debe de basar en la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2- 

1993 “Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines 

terapéuticos”. 


DEPARTAMENTO DE BANCO DE SANGRE 

Altitud sobre el 

nivel del mar. 

VALORES MÍNIMOS PARA FLEBOTOMÍA EN DISPONENTES 

ALOGÉNICOS. 

Género. 

Masculino. Femenino 

Hemoglobina. Hematocrito. Hemoglobina. Hematocrito. Leucocitos Plaquetas 

0 a 1500 m. 13.5 g/dL. 41 a 56% 12.5 g/dL. 38 a 50% 

1501 o más. 14.5 g/dL. 44 a 56% 14.0 g/dL. 40 a 50% 

4.0 a 12.0 

x10 3 μL. 

La tabla de valores debe permanecer a la vista del personal que realiza las biometrías hemáticas para su consulta. 

Autorizado. 

Dra. Dinora Aguilar Escobar. 

Jefe del Banco de Sangre, I.N.P. 

150 a 450 

x10 3 μL. 

Bibliografía: 

Proyecto de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-253-SSA1-2009 para la disposición de sangre humana y sus 

componentes con fines terapéuticos 

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2-1993 para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines 

terapéuticos. 

Ruiz Argüelles, Guillermo J. Fundamentos de hematología 4ª edición, México, Editorial Médica Panamericana, 2009.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Esta tabla debe encontrarse a la vista del personal que realiza las biometrías 

hemáticas para que siga dichos criterios. 

Bibliografía 

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2-1993 

La información que contiene la hoja de resultados es la siguiente: 

LEU Leucocitos totales/microlitros 

ERI Eritrocitos 

HB Hemoglobina 

HTC Hematocrito 

VCM Volumen Corpuscular Medio 

HCM Hemoglobina Corpuscular Medio 

CCMH Concentración Media de Hemoglobina Corpuscular 

IDE Ancho de Distribución Eritrocitaria (Desviación Estándar 

PLT Plaquetas 

MPV Volumen Plaquetario Medio 

IDP Ancho de Distribución Plaquetaria 

LIN % Porciento de Linfocitos 

MON % Porciento de Monocitos 

GRA % Porciento de Neutrofilos 

LIN # Linfocitos totales 

MON # Monocitos totales 

GRA # Número de Neutrofilos 

Nota 1: Los valores que se toman en cuenta para la donación son Hemoglobina, 

Hematocrito, Leucocitos y Plaquetas. Los Histogramas de WBC, RBC y PLT son 

para observar gráficamente los valores de dichas células.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



REGISTROS 

Los Resultados que se observan en la hoja de resultados se reportan en el 

formato M-3-4-10 y se engrapan en las formas M-3-0-23 se debe guardar durante 

5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: LIC. TS ANA 

MARIA DORANTES CEH 

Firma: 

Fecha:7 JUNIO 2011 


Procedimiento de entrega del comprobante de donación 

Revisado por: 

Nombre: DRA. 

MARAGARAITA LETICIA 

MEDINA MACÍAS 

Firma: 


Aprobado por: 



Firma: 

Fecha: 9 JUNIO 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Se actualiza formato del comprobante 

de donación de acuerdo al sistema 

informático de banco de sangre 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

9/06/2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Una vez que el donador ha realizado la donación de sangre o aféresis y ha ingerido su 

refrigerio (Ver Procedimientos CAL-46 y CAL-50) se le solicita anote en la bitácora 

de Registro de entrada y salida de donadores CAL-20-A su hora de salida y su firma, 

sobre la misma línea en la que se registró al inicio de la donación, se le entrega su 

Comprobante de donación, indicándole que venga por sus resultados de Serología y 

Hematología en 8 días y personalmente (a partir de la fecha en que realizó la 

donación), con una identificación con fotografía y vigente. El comprobante de donación 

tiene una vigencia de 3 meses. 

El formato de Comprobante de Donación de Sangre M-3-0-25 (manual) se muestra a 

continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El formato de Comprobante de donación de Sangre M-3-0-25 (manual) se llena de la 


Nombre del donador: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s) 

del donador. 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s) 

del paciente. 

Registro número: Número de registro que el INP asigna al 

paciente. 

Servicio: Área del INP donde fue solicitada la donación. 

Fecha: Fecha en que se entrega el comprobante de 

donación. 

Nombre: Nombre de la Trabajadora Social. 

Clave: Clave de la Trabajadora Social. 

Firma: Firma de la Trabajadora Social. 

Numero de unidad: Número de unidad asignado en recepción una 

vez que el donador se considera APTO. 

Hora: En que se entrega el comprobante. 

El formato de Comprobante de donación de Sangre que se realiza en el sistema 

informático del banco de sangre se muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de entrega del comprobante de donación




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El formato de Comprobante de donación de Sangre que se realiza en el sistema 

informático de banco de sangre contiene lo siguiente: 

No. Unidad: Número de unidad asignado en recepción una 

vez que el donador se considera APTO. 

Fecha y Hora: Fecha y hora en que se imprime el 

comprobante de donación. 

Donador: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s) 

del donador. 

Nombre del paciente: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s) 


Registro No.: Número que el INP asigna al paciente. 

Nombre: Nombre de la Trabajadora Social que autoriza 

Clave: Clave de la Trabajadora Social que autoriza 

Firma: Firma de la Trabajadora Social que autoriza. 

REGISTROS 

Comprobante de donación de sangre (manual) M-3-0-25. 

Comprobante de donación en el sistema informático de banco de sangre M-3-0-25



Fecha: 5 de Enero 2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: Mireya López 

Mejía 

Firma: 

Fecha: 5 de Enero de 2012 


Procedimiento de Registro a Disponentes 

Revisado por: 

Nombre: Dra. Margarita 


Firma: 

Fecha: 5 de Enero de 2012 

Aprobado por: 

Nombre: Dra. Dinora V. 


Firma: 

Fecha: 5de Enero de 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

Se homogeniza el término 

donador en todo el 

procedimiento en donde se 

menciona. 

Se ajusta el diagrama de 

proceso 

REVISIÓN 

06 

FECHA 

5 de enero 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



El departamento de Banco de Sangre lleva a cabo el registro diario de los 

candidatos a donación que acuden a estudiarse, así mismo se encarga de hacer 

un registro de todos los candidatos para llevar a cabo su rastreabilidad. 

El día de la donación el candidato a donador presenta el folleto ¿Cómo solicitar 

una cita para donar sangre? (Ver procedimiento CAL-11) para continuar de la 

siguiente manera:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El candidato a donador muestra el folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? y la identificación con 

fotografía vigente al oficial en turno como pase de entrada al Banco de Sangre y este entrega un portagafete y una 

ficha con numeración consecutiva, se les solicita portar el gafete durante su permanencia en el Banco de sangre 

La Trabajadora Social da una plática de inducción y sensibilización sobre los factores de riesgo y el proceso de donación para todos 

los candidatos a donadores y sobre la importancia de que la sangre donada sea segura (Ver anexo 2) y/o se les presenta un video 

informativo. 

Les proporciona una copia del consentimiento informado para que la lean y analicen su contenido ya que posteriormente si está n de 

acuerdo lo firmarán o se aclaran dudas al respecto. 

SI 

Si se corrobora la cita pasa al área de 

recepción para su registro. 

TS evalúa la situación del donador para decidir si le programa cita por no 

estar registrado ese día o lo acepta. Registra en la bitácora de citas CAL- 

11-A en el rubro de observaciones los datos que la bitácora solicita 

haciendo el señalamiento correspondiente para indicar que fue aceptado 

para su valoración el mismo día. En caso necesario programa una nueva 

cita para la donación y la registra en dicha bitácora (esto para efectos de 

trazabilidad). 

La recepcionista solicita el portagafete con su identificación oficial y el folleto ¿Cómo solicitar una cita? Para donador de 

sangre, para registrar sus datos personales en el sistema informático de banco de sangre , se imprime la ficha de 

identificación que incluye la carta de consentimiento informado (M-3-0-23) , se le solicita al disponente que firme el 

consentimiento informado si es que está de acuerdo o si tiene dudas se indica que pase a trabajo social . . Posteriormente 

se le devuelve el gafete con la identificación dentro y se le indica que pase a la sala de espera. 

Se le indica al donador que espere a que sea llamado para la valoración de venas y somatometría (Ver 

procedimiento CAL-30). 

La ficha de identificación se coloca en el Kanban de toma de signos vitales. 

FIN 

NO




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FORMATOS RELACIONADOS CON ESTE PROCEDIMIENTO 

FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE M-3-0-23 se muestra a 

continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El formato M-3-0-23 se llena de la siguiente manera: 

Nombre: Nombre, Apellido paterno y Apellido materno del candidato a 

donar. 

Parentesco: Relación que existe entre el candidato a donar y el paciente. 

Edad: Años que tiene el candidato. 

Fecha de nacimiento: Día, mes y año en que nació el candidato. 

Sexo: Indicar el sexo del candidato: Masculino (Hombre) y Femenino 

(Mujer) 

Estado Civil: Indicar el estado civil del candidato: Soltero (a), 

Casado (a), Unión Libre, Viudo, Divorciado. 

Escolaridad: Indicar hasta que grado de escolaridad curso el candidato: 

Primaria, Secundaria, Preparatoria o equivalente, Universidad, 

etc. 

Ocupación: Actividad que realiza el candidato. 

Domicilio, municipio, código postal: Lugar donde vive actualmente el candidato. 

Teléfono: Número telefónico donde se pueda localizar al candidato 

(casa, oficina, caseta telefónica, etc.). 

Tipo de donación: Se especifica si la donación es: 

o Familiar: Donación que se realiza para un paciente familiar (Padre, 

Madre, Hermano, Primo, Amigo, etc.). 

o Altruista: Donación que no se realiza para un paciente específico. 

o Autóloga: Donación que se la realiza para si mismo. 

o Dirigida: Donación que se realiza específicamente para un paciente. 

o Aféresis: Donación de plaquetas, Leucocitos, Granulocitos, Plasma y 

Eritrocitos. 

Nombre del paciente: Nombre, Apellido paterno y Apellido materno del paciente 

(este dato y los siguientes los puede encontrar en el folleto 

¿Cómo solicitar una cita para donar sangre?) 

No. de expediente: Número que fue asignado para el paciente por el Instituto 

Nacional de Pediatría (corresponde al # de registro). 

PLATICA DE INDUCCION AL DONADOR 

OBJETIVO: Sensibilizar e informar sobre los procesos a los cuales se someterá el 

disponente y la importancia de la seguridad sanguínea. 

1.- Introducción 

Nombre de la trabajadora social en el Banco de Sangre. 

Importancia del consentimiento informado. 

Registro en Bitácora.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



2.- Describe los procesos: 

Descripción del proceso de donación y probable tiempo de estancia. 

Importancia de la sangre segura. 

-Documentos necesarios para el registro en el área de recepción. 

-Importancia de los datos personales para la ficha de identificación. 

-Valoración por el personal de enfermería. 

-Toma de muestra por el personal de laboratorio. 

-Valoración médica. 

-Extracción de sangre total o procedimiento de aféresis. 

Importancia de ingerir el lunch posterior a la donación. 

Entrega de comprobante de donación. 

Acudir por los resultados de sus estudios. 

Registro en Bitácora. 

Video Informativo. 

La bitácora CAL-20-A se muestra a continuación: 

No. Nombre 

Donador 

Nombre 

Paciente 

BITÁCORA DE REGISTRO DE DONADORES 

CAL-20-A 

Hora 

Entrada 

Hora 

Salida 

Firma Unidad Observaciones 

Efectivos 

Rechazados 

Estudiados para Aféresis 

Procedimientos Aféresis




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La bitácora CAL-20-A se llena de la siguiente manera: 

No. 

Nombre 

Donador 

Nombre 

Paciente 

Número consecutivo en que se van anotando los 

donadores 

Nombre del candidato a donación de sangre 

Nombre del paciente para el que viene a ser 

donador 

Hora Entrada Hora en que se están registrando 

Hora Salida 

Hora en que sale el donador y ya se le entregó 

comprobante 

Firma Firma de que recibió comprobante de donación 

Unidad 

No. de unidad que se asignó siempre que haya 

sido donador 

Observaciones Motivo de rechazo o diferido, etc. 

Efectivos Número de donadores efectivos que pasaron donar 

Rechazados 

Estudiados 

para Aféresis 

Procedimientos 

Aféresis 

Número de donadores que no fueron aceptados 

para donar 

Cantidad de donadores que se estudiaron para 

procedimiento de Aféresis 

Número de procedimientos realizados




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



FORMATO CAL-20-B CONTROL DE REGISTRO DE DONADORES 

INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRIA 


CONTROL DEL REGISTRO DE DONADORES 

FECHA:______________ UNIDAD DE INICIO________________ ULTIMA 

UNIDAD_________ 

1 

En este formato el personal de recepción registra: 

1. Subraya el número de donador que ya ingresó en el sistema de cómputo 

2. Anota si algún donador salió diferido, la causa del mismo, información que 

permite conocer qué área rechazó al donador. 

3. El número de unidad que le asigna a los donadores aceptados. 

4. Señala los candidatos a donación que van a ser estudiados para aféresis. 

5. Anota los donadores de aféresis y el número de unidad que les 

corresponde. 

6. Así mismo se registra el número de unidad de inicio y el último número de 

unidad asignado del día. 

REGISTROS 

13 

25 

CAL-20-B 

La bitácora CAL-20-A se almacena durante 1 año. 

La Bitácora CAL-20-B se almacena en el archivo durante 3 meses. 

M-3-0-23 (Ficha de Identificación) que incluye el Consentimiento informado del 

candidato a donador, se almacena en archivo activo 5 años y en archivo muerto 5 

años, en los donadores aptos (Ver CAL-40 Procedimiento de valoración médica). 

En los donadores diferidos durante 3 meses. 

Sistema informático de banco de sangre. 

37




ISBN: 978-968-9170-17-4 


ANEXO 1.- 

CAL-02-B 



MANUAL DEL MANEJO 

DEL SISTEMA DE 

CÓMPUTO PARA EL 

ÁREA DE RECEPCIÓN




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de Registro a Disponentes




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 






ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 






ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

+ 






ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





Fecha: 24 Feb 2004 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 


ANUAL DE PROCEDIMIENTOS 

Procedimiento de Fraccionamiento 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

1. Se incluye procedimiento 

alterno en sistema de 

fraccionamiento. 

2. Se incluye nuevo formato 

electrónico en la captura de 

datos 



REVISIÓN 

1 

FECHA 

24/02/04




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Una vez que el donador ha sido sangrado (Ver procedimiento CAL-46) se procede de la 


El personal de Fraccionamiento checa el estado en que se encuentran cada uno de los equipos que 

utiliza para realizar el proceso y anota los resultados en la bitacora de estado de los equipos 

CAL-21-A. 

Toma del área de sangrado las Bolsas con la ST recolectada al igual que los formatos M-3-0-30 y 

los lleva al área de fraccionamiento. El Paquete de Bolsas de muestra contiene: 4 Bolsas. 

Una de las bolsa madre contiene la Sangre Total con 63-65 ml de anticoagulante (ACD), otra bolsa 

contienen el aditivo (100 ml de SAG-MANITOL o ADSOL), un filtro leucorreductor para concentrado 

eritrocitario y las dos bolsas satelites vacias 

En el área de fraccionamiento se anota en la bitácora de fraccionamiento CAL-21-B los siguientes 

datos: Fecha del día de análisis y Fecha de caducidad de cada concentrado (CE, CP, PCF 

y GAH cuando se realiza). 

De cada una de las muestras se anotan en la bitácora CAL-21-B los siguientes datos: # que le 

corresponde al donador, Peso Bruto del sistema (ST-PB = Bolsa madre con 63-65 ml de 

anticoagulante + 450 +/- 10% de sangre más la bolsa con el aditivo (100ml), un filtro leucorreductor 

rara concentrado eritrocitario y las dos bolsas satelites); sexo del donador, Peso Neto (ST-PN = PB 

menos la suma de la Bolsa Madre con 63-65 ml de anticoagulante con bolsa de aditivo con dos bolsas 

satelites) y volumen (V-ST= PN/1.054 o1.057) 

Se pesa en una balanza granataria de 2 platos un paquete de bolsas y su peso se equilibra con otro 

paquete de bolsas adicionando cualquier objeto de material similar al de las bolsas hasta que el peso 

sea el mismo. Todo lo que se encuentre en el plato se cada brazo se mete a un vaso de centrífuga. 

El peso en la centrífuga debe estar equilibrado para que el proceso se realice correctamente. 

Para introducir las bolsas al vaso de la centrífuga y no sean maltratadas por el mismo movimiento, se 

acomodan de la siguiente manera: coloque en la mesa las bolsas satelite y la del aditivo, despues las 

lineas de todas las bolsas, forme un “taco” enrrollando las bolsas con las líneas dentro de ellas (para 

protección). Para introducirlas en el vaso de la centrifuga: se coloca la bolsa madre con las costuras 

de la bolsa alineadas con las muescas de sostén del vaso, a continuación meter el “taco” al frente de 

la bolsa madre. 

Se revisa que las zonas de conectores para equipos de transfusion estén sin sangre para evitar 

contaminación (dar pequeños golpes a los pilotos hasta que ya no tengan sangre), se le coloca una 

pinza en la linea que se uso para la extracción de la sangre y se introduce el vaso en la centrifuga 

verificando que se oriente la bolsa madre hacia la flecha y el “taco” hacia las paredes de la 

centrífuga.,el filtro queda orientado hacia la parte externa de la centrifuga soportado por la zona media 

con la boca del vaso Se procede a centrifugar 

(Ver procedimiento CAL-23) 

Una vez que se termina la centrifugación, se saca el vaso de la centrifuga. Las 4 Bolsas se retiran del 

vaso con sumo cuidado para evitar que el plasma se vuelva a mezclar con el 

concentrado eritrocitario (CE) 

Se revisa que la zona para conectores de equipo de transfusion esten limpios y se transfiere el plasma 

rico en plaquetas(PRP) a una bolsa satelite, se sella en la línea que une a la bolsa madre (sellador 

dielectrico. (Ver Procedimiento CAL-24) 

Al finalizar la extracción del plasma se tienen pinzas colocadas en la bolsa que contiene el plasma rico 

en plaquetas (PRP) y en la bolsa satelite si se considera necesario. Se cuelga en el tripié la bolsa que 

contiene el aditivo, se rompe el broche de la bolsa de SAG-MANITOL para que pase atraves del 

filtro (funciona para purgar el filtro). Se invierte el sistema para filtrar el concentrado eritrocitario (con 

cuidado, evitando que pasen burbujas de aire). Se dejan colgadas en un tripie hasta que se termina el 

proceso de filtración 

Cuando se termina de adicionar el aditivo se procede a la quema de las lineas con el 

TUBE SEALER ACS-152 TERUFLEX. Pimero se sella la linea que sale de la bolsa que contiene el 

Concentrado Eritrocitario una vez separados, se agita para ayudar a la homogenización del CE y el 

aditivo y se pesa.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El peso bruto del Concentrado Eritrocitario se anota en CAL-21-A en la columna de PB - CE y 

posteriormente se resta el peso de la bolsa al valor del CE para obtener el PN-CE. El volumen del CE 

se obtiene dividiendo el valor ( PN / 1.093 ) y se apunta en la bitácora CAL-21-A los resultados, se 

verifica que se encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CE, el volumen de CE y la caducidad (acorde al 

anticoagulante empleados) y esta se pega en la bolsa e introduce en el refrigerador a 4° C cuando el 

procedimiento es manual . 

La Bolsa de PRP y la bolsa satelite se pesan para introducir y equilibrar con pesos iguales y no perder 

la estabilidad que requiere la centrifuga para su uso adecuado (Ver Procedimiento CAL-23). Se 

acomodan en pares de la siguiente manera para evitar que se rompan en la centrifuga: se coloca en la 

mesa primero la bolsa satelite vacia y sobre ella la que contiene el plasma, cuando se introducen en 

los vasos de la centrifuga las lineas deben quedar detrás de las bolsas. Una vez en el vaso se le 

quitan las pinzas a las dos bolsas. 

Al termino del centrifugado se sacan los vasos de la centrifuga y se procede a retirar con sumo 

cuidado las bolsas de PRP. Se transfiere a una bolsa satelite vacia la mayor cantidad de plasma 

dejando un remanante de 40-60ml para reconstituir el botòn de plaquetas (CP) (con un volumen de 

40 a 60 ml) y el PF (volumen de 150-180 ml) en el T-ACE o en su defecto empleando el sistema 

manual (plancha para desplasmatizar) (Ver Procedimiento CAL-22) 

El Concentrado Plaquetario se pesa y se anota el Peso Bruto en la bitácora CAL-21-A en la columna 

PB-CP, en la columna PN-CP el valor del Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-CP el 

Volumen (V= PN/1.028), los que se anotan en CAL-21-A .Se verifica que los valores obtenidos se 

encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993. 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CP, el volumen de CP y la caducidad (5 días) y esta se 

pega en la bolsa, Se mantienen en el incubador entre 20-24 ° C cuando el procedimiento es manual . 

Se continua con el pesado e identificación de PF: el PB se anota en la bitácora CAL-21-A en la 

columna PF-PB, en la de PN-PF el Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-PF el 

Volumen (V= PN/1.028). Se verifica que los valores obtenidos se encuentren dentro de los valores 

especificados en la NOM-003-SSA2-1993. 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras PCF, el volumen de PCF y la caducidad (1 año) y esta se 

pega en la bolsa e introduce en el CONGELADOR con rangos de -30 a -70 ° C cuando el 


A los productos obtenidos en este proceso como son: CE, CP y PCF se les debe anotar con un 

plumon y pegar una etiqueta con su respectivo grupo sanguineo obtenido de la bitácora de serología 

CAL-26-A cuando el procedimiento es manual. 

El Personal de fraccionamiento anota en la Bitàcora de producto radiado CAL-21-D la fecha, tipo de 

producto, # de registro y el auxiliar de laboratorio antes de entregar el producto anota la hora de 

recepcion y solicita anote su Nombre y firma quien lo recibe y al finalizar la radiaciòn de quien entrega 

el producto , una vez que el producto se recoge de radiaciòn se coloca en las condiciones 

especificadas para su posterior identificaciòn. 

Al finalizar el proceso se registra en CAL-21-A el número de donadores, el número de ST, CP, CE, 

PCF y GAH obtenidos, el nombre o sello y firma del personal que realizo el fraccionamiento. Se 

ingresan datos de volumen y fracciones al sistema de computo TESI. 

SI 

SI 

SI 

NO 

NO 

NO 

Se procede a 

desechar la muestra y 

se registra el motivo 

en la bitácora 

CAL-21-A y en la 

Bitácora de Bajas 

CAL-21-C. 

Se procede a desechar 

la muestra y se registra 

el motivo en la bitácora 


Bitácora de Bajas CAL- 

21-C. 


desechar la 

muestra y se 

registra el motivo 




CAL-21-C.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El personal de Fraccionamiento checa el estado en que se encuentran cada uno de los equipos que 

utiliza para realizar el proceso y anota los resultados en la bitacora de estado de los equipos 

CAL-21-A. 

Toma del área de sangrado las Bolsas con la ST recolectada al igual que los formatos M-3-0-30 y 

los lleva al área de fraccionamiento. El Paquete de Bolsas de muestra contiene: 4 Bolsas. 

Una de las bolsa madre contiene la Sangre Total con 63-65 ml de anticoagulante (ACD), otra bolsa 

contienen el aditivo (100 ml de SAG-MANITOL o ADSOL) y las dos bolsas satelites vacias 

En el área de fraccionamiento se anota en la bitácora de fraccionamiento CAL-21-B los siguientes 

datos: Fecha del día de análisis y Fecha de caducidad de cada concentrado (CE, CP, PCF y GAH 

cuando se realiza). 

De cada una de las muestras se anotan en la bitácora CAL-21-B los siguientes datos: # que le 

corresponde al donador, Peso Bruto del sistema (ST-PB = Bolsa madre con 63-65 ml de 

anticoagulante + 450 +/- 10% de sangre más la bolsa con el aditivo (100ml) y las dos bolsas satelites); 

sexo del donador, Peso Neto (ST-PN = PB menos la suma de la Bolsa Madre con 63-65 ml de 

anticoagulante con bolsa de aditivo con dos bolsas satelites) y volumen (V-ST= PN/1.054 o1.057) 

Se pesa en una balanza granataria de 2 platos un paquete de bolsas y su peso se equilibra con otro 

paquete de bolsas adicionando cualquier objeto de material similar al de las bolsas hasta que el peso 

sea el mismo. Todo lo que se encuentre en el plato se cada brazo se mete a un vaso de centrífuga. El 

peso en la centrífuga debe estar equilibrado para que el proceso se realice correctamente. 

Para introducir las bolsas al vaso de la centrífuga y no sean maltratadas por el mismo movimiento, se 

acomodan de la siguiente manera: coloque en la mesa las bolsas satelite y la del aditivo, despues las 

lineas de todas las bolsas, forme un “taco” enrrollando las bolsas con las líneas dentro de ellas (para 

protección). Para introducirlas en el vaso de la centrifuga: se coloca la bolsa madre con las costuras 

de la bolsa alineadas con las muescas de sostén del vaso, a continuación meter el “taco” al frente de 

la bolsa madre. 

Se revisa que las zonas de conectores para equipos de transfusion estén sin sangre para evitar 

contaminación (dar pequeños golpes a los pilotos hasta que ya no tengan sangre), se le coloca una 

pinza en la linea que se uso para la extracción de la sangre y se introduce el vaso en la centrifuga 

verificando que se oriente la bolsa madre hacia la flecha y el “taco” hacia las paredes de la centrífuga. 

Se procede a centrifugar 

(Ver procedimiento CAL-23) 

Una vez que se termina la centrifugación, se saca el vaso de la centrifuga. Las 4 Bolsas se retiran del 

vaso con sumo cuidado para evitar que el plasma se vuelva a mezclar con el concentrado eritrocitario 

(CE) 

Se revisa que la zona para conectores de equipo de transfusion esten limpios y se transfiere el plasma 

rico en plaquetas(PRP) a una bolsa satelite, se sella en la línea que une a la bolsa madre (sellador 

dielectrico. (Ver Procedimiento CAL-44) 

Al finalizar la extracción del plasma se tienen pinzas colocadas en la bolsa que contiene el plasma rico 

en plaquetas (PRP) y en la bolsa satelite si se considera necesario. Se cuelga en el tripié la bolsa que 

contiene el aditivo, se rompe el broche de la bolsa para dejarlo pasar al CE. 

Cuando se termina de adicionar el aditivo se procede a la quema de las lineas con el 

TUBE SEALER ACS-152 TERUFLEX. Pimero se sella la linea que sale de la bolsa que contiene el 

Concentrado Eritrocitario una vez separados, se agita para ayudar a la homogenización del CE y el 

aditivo y se pesa.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El peso bruto del Concentrado Eritrocitario se anota en CAL-21-B en la columna de PB - CE y 

posteriormente se resta el peso de la bolsa al valor del CE para obtener el PN-CE. El volumen del CE 

se obtiene dividiendo el valor ( PN / 1.093 ) y se apunta en la bitácora CAL-21-B los resultados, se 

verifica que se encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CE, el volumen de CE y la caducidad (acorde al 

anticoagulante empleados) y esta se pega en la bolsa e introduce en el refrigerador a 4° C cuando el 


La Bolsa de PRP y la bolsa satelite se pesan para introducir y equilibrar con pesos iguales y no perder 

la estabilidad que requiere la centrifuga para su uso adecuado (Ver Procedimiento CAL-23). 

Se acomodan en pares de la siguiente manera para evitar que se rompan en la centrifuga: se coloca 

en la mesa primero la bolsa satelite vacia y sobre ella la que contiene el plasma, cuando se introducen 

en los vasos de la centrifuga las lineas deben quedar detrás de las bolsas. Una vez en el vaso se le 

quitan las pinzas a las dos bolsas. 

Al termino del centrifugado se sacan los vasos de la centrifuga y se procede a retirar con sumo 

cuidado las bolsas de PRP. Se transfiere a una bolsa satelite vacia la mayor cantidad de plasma 

dejando un remanante de 40-60ml para reconstituir el botòn de plaquetas (CP) (con un volumen de 

40 a 60 ml) y el PF (volumen de 150-180 ml) en el T-ACE o en su defecto empleando el sistema 

manual (plancha para desplasmatizar) (Ver Procedimiento CAL-22) 

El Concentrado Plaquetario se pesa y se anota el Peso Bruto en la bitácora CAL-21-A en la columna 

PB-CP, en la columna PN-CP el valor del Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-CP el 

Volumen (V= PN/1.028), los que se anotan en CAL-21-A .Se verifica que los valores obtenidos se 

encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993. 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CP, el volumen de CP y la caducidad (5 días) y esta se 

pega en la bolsa, Se mantienen en el incubador entre 20-24 ° C cuando el procedimiento es manual . 

Se continua con el pesado e identificación de PF: el PB se anota en la bitácora CAL-21-A en la 

columna PF-PB, en la de PN-PF el Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-PF el 

Volumen (V= PN/1.028). Se verifica que los valores obtenidos se encuentren dentro de los valores 

especificados en la NOM-003-SSA2-1993. 

Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras PCF, el volumen de PCF y la caducidad (1 año) y esta se 

pega en la bolsa e introduce en el CONGELADOR con rangos de -30 a -70 ° C cuando el 


A los productos obtenidos en este proceso como son: CE, CP y PCF se les debe anotar con un 

plumon y pegar una etiqueta con su respectivo grupo sanguineo obtenido de la bitácora de serología 

CAL-26-A cuando el procedimiento es manual. 

El Personal de fraccionamiento anota en la Bitàcora de producto radiado CAL-21-D la fecha, tipo de 

producto, # de registro y el auxiliar de laboratorio antes de entregar el producto anota la hora de 

recepcion y solicita anote su Nombre y firma quien lo recibe y al finalizar la radiaciòn de quien entrega 

el producto , una vez que el producto se recoge de radiaciòn se coloca en las condiciones 

especificadas para su posterior identificaciòn. 

Al finalizar el proceso se registra en CAL-21-A el número de donadores, el número de ST, CP, CE, 

PCF y GAH obtenidos, el nombre o sello y firma del personal que realizo el fraccionamiento. Se 

ingresan datos de volumen y fracciones al sistema de computo TESI. 

SI 

SI 

SI 

NO 

NO 

NO 


desechar la 

muestra y se 

registra el motivo 




CAL-21-C.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

Separar PG 

Se pasa el PG a la 

bolsa de ADSOL y 

se sella 

Se conceta el filtro 

al PG. Por 

gravedad se filtra 

y almacena 



SISTEMA ALTERNO EN BOLSA 

TERUMO 

RECOGER DEL AREA DE SANGRADO EL PRODUCTO OBTENIDO 

(SANGRE TOTAL) 

Se pesa el Sistem y se ingresa en la Cal 21-B 

(en sistema de computo) 

Colocar en las camisas de la centrifuga la ST y balancear por peso 

Centrifugar 1800 rpm/10 min 

aproximadamente 

Pesar e ingresar 

en el SISTEMA 

SEPARA EL CP. 

PESAR 

Separar PRP 

CENTRIFUGAR 

3500 RPM /15 

MIN 

SEPARA EL PFC. 

PESAR




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



El formato de identificación de productos sanguíneos, M-3-0-30 se muestra a 

continuación: 

El formato M-3-0-30 se llena de la siguiente manera para cada producto: 

Nombre del donador: Nombre y apellido completo 

Fecha y hora de caducidad: Fecha en que caduca el producto. 

Producto: Tipo de producto: ST, CE, CP, PCF. 

Volumen: Cantidad en ml que se obtuvo del producto.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La bitácora de estado de los equipos CAL-21-A se muestra a continuación: 

BITÁCORA DE ESTADO DE LOS EQUIPOS 

Fecha: Observaciones 

Nombre o sello del Químico de Fraccionamiento 

Centrifuga DAWONDAMON/IEC DIVISION 

Temperatura 

RPM 

Tiempo 

Limpieza 

Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 

Temperatura 

RPM 

Tiempo 

Limpieza 

Centrifuga BECKMAN J6-MC 

Temperatura 

RPM 

Tiempo 

Limpieza 

Limpieza del Extractor de plasma 

Funcionamiento y limpieza de Equipo T-ACE 

La bitácora CAL-21-A se llena de la siguiente manera: 

Fecha: 

Nombre o sello del Químico 

de Fraccionamiento: 

Día, mes y año de uso del equipo. 

CAL-21-A 

Nombre(s), Apellido Paterno y Materno 

Centrifuga DAWON/IEC 

Anotar una paloma en el caso de que el 

DIVISION,Centrifuga SORVALL equipo se encuentre en buen estado 

General-Purpose RC-3 y 

antes de su uso y una X en caso 

Centrifuga BECKMAN J6-MC contrario. 

:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Temperatura: 

RPM: 

Tiempo: 

Limpieza del extractor de plasma: 

Funcionamiento y limpieza del 

equipo T-ACE: 

CAL-02-B 



Realizar pruebas a diferentes 

temperaturas y anotar una paloma en el 

caso de que el equipo se encuentre en 

buen estado antes de su uso y una X en 

caso contrario. 

Realizar pruebas a diferentes 

revoluciones por minuto y anotar una 

paloma en el caso de que el equipo se 

encuentre en buen estado antes de su 

uso y una X en caso contrario. 

Realizar pruebas a diferentes tiempos y 

anotar una paloma en el caso de que el 

equipo se encuentre en buen estado 

antes de su uso y una X en caso 

contrario. 

Si el equipo se encuentra limpio anotar 

una paloma y en caso contrario una X. 

Si el equipo funciona y se encuentra 

limpio anotar una paloma y en caso 

contrario una X.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



La bitácora de fraccionamiento CAL-21-B se muestra a continuación: 

No. 

La bitácora de bajas CAL-21-B debido a su tamaño no se muestra dentro de este 


La bitácora CAL-21-B se llena de la siguiente manera: 

No.: 

REGIS 

TRO 

REGISTRO: 

SEXO: 

ST CE 

BITACORA DE FRACCIONAMIENTO 

PB-ST PN-ST SEXO VOL PB-PG PN-PG V PF-PB PF-PN PF-V CP-PB CP-PN CP-V 

PF 

# de bitácora de Ingresos y egresos. 

# de unidad 

CP 

H. 

EXTR 

H. F. 

Masculino (M).- Densidad: 1.057 

Femenino (F).- Densidad: 1.054 

CAL-21-B 

T. FIL. 

delta T. FIL. INI 

FIN DIF




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



ST-PB: Peso (gr) del sistema de sangrado: la bolsa 

madre con 63-65 ml de anticoagulante más la 

sangre de la flebotomia (450 gr +/-10%), la 

bolsa con el aditivo y las dos bolsas satelites. 

ST-PN: Es la diferencia de peso entre el ST-PB 

y la suma de la bolsa madre con 63-65 ml de 

anticoagulante más la bolsa con 100 ml de 

aditivo más las dos bolsas satelites 

ST-V: Es el PN entre la densidad de la sangre 

(Masculino 1.057 o Femenino 1.054) 

CE-PB: Peso del Concentrado eritrocitario más la 

bolsa 

CE-PN: PB-CE menos el peso de la bolsa 

contenedora (47gr para el sistema que 

actualmente empleamos) 

VOL: PN entre1.093 (densidad del CE) 

CP: Peso del Concentrado plaquetario más la 

bolsa. 

PN: Peso del CP menos 25 que es el peso 

la bolsa 

VOL: 

h. extraccion: 

H. F. 

Es el PN entre 1.028 (densidad del CP) 

Hora de extracción 

Hora de termino del sangrado




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



delta Diferencia entre inicio y término del sangrado 

Tfil ini. Hora de inicio de la filtración 

prealmacenaminto 

Tfil fi Hora de término de la filtración 

prealmacenamaiento 

Dfilt Diferencia entre inicio y término del proceso 

de filtración 

NOMBRE O SELLO: Nombre(s), Apellido Paterno, Apellido 

Materno del Químico de Fraccionamiento que 

realizo el proceso. 

FIRMA: Firma del Químico, Laboratorista, Técnico o 

Auxiliar de laboratorio que realizo el 

Fraccionamiento 

La bitácora de bajas CAL-21-C debido a su tamaño no se muestra dentro de este 


La bitácora de bajas CAL-21-C se llena de la siguiente manera: 

Se marca con una paloma o una X el motivo de la baja. 

Fecha: Día, mes y año de baja del producto. 

Registro: # de bitácora de ingresos y egresos 

Nombre: Apellido Paterno, Apellido materno y 

nombre(s) 

Vol: Volumen desechado en ml o UI. 

Tipos de productos: 

ST: Sangre Total 

CE: Concentrado eritrocitario




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



PF: Plasma fresco. 

PE: Plasma envejecido 

PSF: Plasma sin factor 

CP FERESIS: Concentrado plaquetario obtenido por aféresis 

abierta o cerrada. 

CP: Concentrado plaquetario 

CR: Crioprecipitado 

CAUSAS DE BAJA 

6.7.1 Marcadores Infecciosos: 

VIH: Virus de Inmunodefiencia adquirida 

VBH: Hepatitis B 

VCH: Hepatitis C 

VDRL: Sifilis 

CHAG: Chagas 

BRUC: Brucela 

CMV: Citomegalovirus 

OTROS: Estudios específicos solicitados. 

Otros motivos de baja: 

672AUTOEX.: Autoexclusión 

673 CAD.: Caducidad 

674 Def. conserv.: Deficiente conservación 

675 Def. recolec.: Deficiente recolección 

676 Roto: Sistema Roto (Bolsa, linea, etc) 

677 Cont. erit/Hem.: Contaminación de Eritrocitos y/o Hemólisis. 

678 Lipem.: Lipemico 

679 Cont./Pic.: Picado (Bolsa, linea, etc) 

Control de Calidad: Utilizado en estudios de Control de calidad 

Nombre: Nombre Completo o sello del Químico, 

laboratorista, técnico o auxiliar de laboratorio 

que dio de baja el producto




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Nota 1: El uso de guantes para el proceso de fraccionamiento es obligatorio. 

Nota 2: El funcionamiento y la limpieza de los equipos deben ser revisados por el 

Químico de Fraccionamiento antes de iniciar el proceso. 

Nota 3: Se puede utilizar la bolsa vacía para recolectar el PCF o la bolsa que contenía el 

aditivo, tomando en cuenta la variación de peso entre cada bolsa para los cálculos. 

Nota 4: La temperatura de los refrigeradores es muy importante para el almacenamiento 

adecuado de los diferentes tipos de muestras. 

Nota 5: Se debe tener la calibración y revisión continua de balanzas, del equipo T-ACE 

y centrifugas. 

REGISTROS 

La bitácora CAL-21-A se debe almacenar 1año. 

La bitácora CAL-21-B se guarda 5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto. 

La bitácora CAL-21-C se guarda 5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de operación 

del equipo T-ACE 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 




REVISIÓN 

0 

FECHA 

24/09/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




Durante el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento CAL-21) 

se puede realizar la separación utilizando el Extractor de plasma (Ver 

procedimiento CAL-24) o por medio del Equipo T-ACE la siguiente manera: 

Verifique en el manometro que se encuentra en la parte de atras baja del equipo que la presion este en 5. (1) 

Encienda el equipo con el interruptor (2) que se encuentra en la parte de atras del equipo. 

Oprima MENU en el panel de control (3) para seleccionar el programa que desea 

Oprima SCROLL (4) para seleccionar el No del programa 

Oprima STOP (5) y aparece la siguiente pantalla: 

PROGRAMME 5 

PRP 

phase:05 

Colocar la bolsa que contiene el plasma previamente centrifugado en frente de la puerta (7) dentro de dos 

piezas de metal (6). 

Colocar la bolsa satelite vacia en la balanza (8) que le corresponde 

La linea que sale de la bolsa que contiene el plasma se coloca dentro de los clamps marcados con numeros y 

de acuerdo al diagrama siguiendo siempre la linea marcada. (9) , (10), (11). 

(marcado en el equipo en color rojo) 

Cerrar la puerta y el equipo indicara que se puede comenzar y la pantalla sera la siguiente: 

BREAK CLICK-TIPS 

AND PUSH “START” 

Y en el panel de control se observa que el foco del STOP (5) se prende y el del START (12) empieza a 

parpadear 

Oprimir START (12) para iniciar y las pantallas que se observan son las siguientes: 

PROGRAMME 5 PRP 

P:08 

plasma (g): 


phase:09 

sealing head 1 


phase:09 

sealing head 2 


close tubing with 

plastic clamps 

and push STOP 

Escuchara el sonido de alarma y en el panel observara el foco del MENU (3) encendido y el STOP (5) 

parapadeando y se escucha como sellan los clamps las líneas de plástico e indica que a terminado el 

procedimiento

(13) 

(7) 

(6) 

(2) 

(10 Y 11) 




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Equipo T-ACE 

CAL-02-B 




Se abren los clamps 

Se ponen los dedos del lado izquierdo de los clamps 1 y 2 (13) y el sobrante de linea se desecha en el bote 

correspondiente. 

Quitar la bolsa que contiene el PCF y despues la que contiene el plasma teniendo cuidado al sacar las lineas 

de los clamps 

(1) 

4 Obstructores y Cabezales selladores de Alta frecuencia 

Balanzas (8) 

1 Pantalla Digital y un Fácil 

Panel de Control (3), (4) ,(5) y (12) 

Motor Regulador de Flujo y un 

1 Detector (9) 

12 Detectores de Presión 

1 Lector de Código de Barras 

Universal




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Nota 1: Se requiere el mantenimiento periódico del equipo. 

Nota 2: Mantener limpia el área de los clamps. 

Nota 3: Realizar la inspección diaria para conocer el estado del equipo. 

REGISTROS 

No existen registros asociados con este procedimiento.

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Se anexa procedimiento de manejo 

para la centrifuga SERO - FUGE 



Procedimiento general de operación 

de centrifugas 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

27/02/04 

Una vez que el donador ha sido sangrado (Ver procedimiento CAL-46) se procede 

a realizar el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento 

CAL-21) en el que se realizan varias centrifugaciones de la siguiente manera:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Centrifuga DAMON/IEC DIVISION 

CAL-02-B 




La centrifuga DAMON/ IEC DIVISION se prende con el interuptor que indica MAINWER (1). 

Al encender el equipo se ilumina al mismo tiempo el foco naranja que se encuentra arriba del la palabra 

anterior y el foco verde donde indica STOPPED (2). 

Se establecen las RPM (3) y la Temperatura (4) especificas para cada producto a centrifugar 

(Ver Tabla CAL-23-A) 

Se abre la tapa de la centrifuga con la palanca que se encuentra en la tapa, la que se giran a la izquierda y se 

jala hacia arriba. 

Se sacan los vasos de centrifuga 

Se introduce la muestra a centrifugar en el vaso (previamente pesada y corroborado que los vasos paralelos 

tendran el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga). 

Se introducen los vasos que contienen las muestras a la centrifuga 

Una vez adentro los 4 vasos de la centrifuga se cierra la puerta y se jala hacia la derecha la palanca. 

Se pone el tiempo que se requiere según la muestra introducida.(5) 

Se aprieta START (6) y se puede observar que ha iniciado la centrifugación cuando el foco verde que dice 

STOPPED (2) se apaga. 

Pasado el tiempo de la centrifugación se enciende el foco verde STOPPED (2) lo que indica que ha terminado 

de centrifugar y se pueden sacar los vasos de la centrifuga.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 

La centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 se prende con el interuptor que dice MAIN SWITCH ON 

(encender) y OFF (apagar) (1) , cuando la enciendes se prende el foco naranja que dice MAIN POWER (2) 

Se establecen las RPM (3) y la Temperatura (4) especificas para cada producto a centrifugar 

(Ver Tabla CAL-23-A) 

La tapa de la centrifuga se abre jalando la palanca hacia arriba 



tienen el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga). 

Se incorporan los vasos que contienen las muestras a la centrifuga 

Se cierra la puerta de la centrifuga 

Se pone el Tiempo (5) que se requiere según la muestra introducida. 

Se aprieta START (6) y se prende el foco naranja (7) que indica el inicio de la centrifugación. 

Una vez terminada la centrifugación se pueden sacar los vasos de la centrifuga.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Centrifuga BECKMAN J6-MC 

CAL-02-B 




La centrifuga BECKMAN J6-MC se prende con el interuptor (1) y se observa al encender que se prende un 

foco naranja donde dice MAIN POWER (2) 

Para introducir las condiciones se siguen los siguientes pasos: 

Para poner las RPM se presiona el boton que dice SPEED (3) teclee el valor y presione ENTER/RECALL (4) 

para que se fije el dato que metio 

Para introducir el tiempo se presiona el boton que dice TIME (5) teclee el valor y presione ENTER/RECALL 

(4) para que se fije el dato que metio 

Para introducir el valor de la temperatura presione de el boton TEMP (6) teclee el valor y presione ENTER/ 

RECALL (4) para que se fije el dato que metio. Los valores especificados para cada producto se encuentran 

en la Tabla CAL-23-A. 

La tapa de la centrifuga se abre empujando la palanca hacia abajo y jalando la tapa. 

La tapa de los vasos se abre jalandola hacia arriba y se coloca en la parte interna de la tapa de la centrifuga. 



tengan el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga). 

Se incorporan los vasos que contienen las muestras a la centrifuga 

Se pone la tapa de los vasos verificando que entre totalmente y posteriomente se cierra la puerta de la 

centrifuga 

Se presiona PROGRAM RECALL (7) para verificar que las condiciones. Se presiona START (8) y se prende el 

foco verde que indica el inicio de la centrifugación. 

Al termino del tiempo suena la alarma y cambia de START (8) a STOP (9) 

Se pueden sacar los vaso de la centrifuga.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




SERO - FUGE 

El personal de banco de sangre recibe los tubos para su 

separación en tubos 12 x 75mm 

Se colocan los tubos con volumen similar en cotraposición 

La SERO FUGE es una centrífuga de velocidad constante (3400 rpm 

aproximadamente) y con tiempo variable. 

El timer que se localiza en la parte frontal se gira en dirección a las manecillas del 

relog y se ubica en el timpo deseado. 

Al término del tiempo la centrífuga se detiene en automático. 

Destapar y sacar los tubo. 

La tabla CAL-23-A se muestra a continuación: 

Sangre Total Plaquetas 

Centrifuga DAMON/IEC DIVISION 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C 

Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C 

Centrifuga BECKMAN J6-MC 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Nota 1: Se requiere el mantenimiento y la calibraron periódica de las balanzas. 

Nota 2: Mantener sin golpes y limpios los vasos de la centrifuga. 

Nota 3: Realizar la inspección diaria de los equipos de trabajo. 

Nota 4: Las centrifugas DAMON/IEC DIVISION y la SORVALL General-Purpose 

RC-3 contienen 4 vasos para centrifugar y la BECKMAN J6-MC tiene 6 vasos. 

REGISTROS 

No existen registros asociados con este procedimiento




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de operación del 

extractor de plasma 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 




REVISIÓN 

0 

FECHA 

24/09/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 




Durante el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento CAL-21) 

se utiliza el extractor de plasma de la siguiente manera: 

Para realizar la extracción del plasma se requiere introducir la bolsa que contiene el Concentrado eritrocitario 

y el Plasma previamente separados por la centrifugación en el Extractor de plasma. 

Para introducir la bolsa se baja la palanca (1) que se encuentra en la tapa (2) que ejercera la presión y se 

atora en el gancho (3) que se encuentra en la base del extractor, una vez introducida la bolsa se suellta la 

palanca de la tapa girando el gancho a la derecha y se inicia la presión sobre la bolsa. 

Se coloca una pinza en la línea que va a la bolsa vacía que esta sola y se rompe el seguro de la linea principal 

de la bolsa que contiene el producto para dejar salir el plasma. 

Dejando un poco de plasma aproximadamente 1cm y finalizada la separación se coloca una pinza en la linea 

que va al plasma y se quita la usada en la toma de muestra (si concidera que sea necesario poner una pinza 

en la bolsa vacia) 

Extractor de plasma:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 




No existen registros asociados con este procedimiento



Fecha: 03 Dic 2003 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 




Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

Ninguno 



REVISIÓN 

00 

FECHA 

03/Dic/03




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 



El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva acabo la valoración 

médica de los pacientes para los que solicitan productos del Banco.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

Se recibe muestra 

y solicitud 

Se notifica la 

Médico adscrito al 


para su valoración 

El Médico revisa: 

Nombre del paciente 

Servicio Solicitante 

Cama 

Fecha de última transfusión 

Diagnóstico 

Hb/Hto 

Peso del paciente 

Causa de la Urgencia (si existe) 

Depués de realizar la valoración 

clínica del paciente, se pone una 

nota en la solicitud con los 

cambios a efectuar en: 

A).- los productos solicitdos 

B).- dosis 



VALORACION CLINICA DEL 

PACIENTE 

SOLICITUD A-13-14-07 

Se recibe solicitud de producto sanguíneo en ventanilla de sección de 

Inmunohematología del Banco de Sangre. Se revisa 

SI 

NO 

OK 

ok 

SE ACEPTA 

SI 

Se realiza una 

anotación con la 

palabra SI en el 

ángulo superior 

derecho de la 

solicitud 

SI 

NO 

NO 

NO SE RECIBE 

muestra ni solicitud 

Se procede a realizar la 

valoración clínica de 

acuerdo a los productos 

sanguíneos solicitados, 

revisando al paciente así 

como su expediente clínico 

Se da la solicitud al 

personal de laboratorio 

para la asignación del 

producto solicitado




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 



Formato A 13-14-07.- se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en archivo 

muerto




ISBN: 978-968-9170-17-4 

Página: 1 de 18 

CAL-02-B 


PROCEDIMIENTO DE RECOLECCIÓN DE CÉLULAS PROGENITORAS 

HEMATOPOYÉTICAS DE SANGRE PERIFÉRICA 


Nombre: Dra. Doris 

Lordméndez Jácome 

Firma: 


Revisado por: 

Nombre: Dra. M. Leticia 


Firma: 


Aprobado por: 

Nombre: Dra. Dinora V. 


Firma: 

Fecha: 8 de Julio 2011




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

Se elimina la sección de 

cuantificación de células tallo (CD 

34+) por citometría, ya que esto 

se describe en otro procedimiento 

(CAL-66 Citometría). 

Se agrega el diagrama de flujo de 

este procedimiento. 

Se agregan lineamientos 

incluyendo las características del 

producto conforme de Aféresis. 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

08-07/11




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El donador/paciente acude a su cita se registra en el área de recepción presentando su identificación con fotografía y vigente, si 

es menor de edad acude con el padre o tutor y se identifica el formato M-3-0-23 con la leyenda CÉLULAS TALLO) 

La enfermera toma del Kanban de recepción la ficha de identificación y llama al donador para toma de signos vitales, 

somatometría y toma de muestra de biometría hemática la cual es procesada por el quíco encargado del área de toma de 

muestra. 

El médico toma del Kanban de recepción la ficha de identificación con resultado de la biometría hemática y realiza la historia 

clínica (Ver procedimiento CAL-40). Lo ingresa a la sala de Aféresis y solicita el número de unidad y las etiquetas 

correspondientes (Ver procedimiento CAL-20) pegando una etiqueta en la hoja de identificación y se procede a realizar la 

recolecciónm de células tallo. 

Se procede a instalación y purgado de equipo (cebado) (Ver manual del operador del separador en uso) e inicia el proceso de 

recolección de células tallo conectando el equipo desechable instalado en el separador al catéter del donado/paciente con 

técnica estéril*, registrando la información en la hoja de control de procedimientos de aféresis Bitácora CAL 50-A. 

Se administra gluconato de calcio y solución salina (1gr./10 Kg) en infusión continua en la línea de retorno como profilaxis para 

prevenir la toxicidad por citrato. 

Al terminar el proceso de recolección de células tallo se toman signos Vitales y se desconecta el equipo desechable 

de las líneas del cateter, se cierran las líneas del mismo dejándose heparinizados.( con técnica estéril). 

Se le proporciona un refrigerio y al terminar se envía al servicio de trasplantes para seguir indicaciones y se 

programa para una segunda recolección al día siguiente (solo en caso de no haberse obtenido la dosis terapéutica). 

Al terminar de retirar el equipo la enfermera identifica las unidades del producto obtenidas (2 bolsas), 

la ficha de identificación. Una de las etiquetas se pegan en la Bitácora CAL -50-a de la hoja que 

corresponde al procedimiento que se lleva a cabo 

NOTA: La identificación de las bolsas es provisional hasta la identificación final en Serología . (Ver 

CAL- 32 ) 

Se anota en cada una de las bolsas el número de Aferesis (obtenido de la bitacora CAL-50-A), y el 

volúmen. 

La enfermera lleva las bolsas del producto al área de Inmuno -Hematología – receptores. Se colocan 

en el refrigerador correspondiente y se avisa al personal del área . 

Se entrega al área de Serología la Historia clinica, la ficha de identificación, el talón de 

autoexclusión, los resultados de la biometría PRE. 

Al terminar el procedimiento la enfermera registra la información en el sistema informático de banco 

de sangre .




ISBN: 978-968-9170-17-4 


1.-PROPOSITO: 

CAL-02-B 




Obtener células progenitoras de sangre periférica de donadores alogénicos o 

autólogos en cantidades terapéuticas que garanticen el injerto satisfactorio de las 

mismas en los pacientes que lo reciban. 

2.-ALCANCE: 

Desde la aceptación del paciente en protocolo de Trasplante de células progenitoras 

hematopoyéticas de sangre periférica (TCPH-SP), el estudio/valoración del donador 

alogénico o autólogo en el banco de sangre, control de la movilización de CPH, hasta la 

recolección de las CPH por medio de procedimientos de aféresis. 

PERSONAL INVOLUCRADO Y RESPONSABILIDADES. 

- COORDINADOR DEL COMITÉ DE TRASPLANTE DE CÉLULAS PROGENITORAS 

HEMATOPOYÉTICAS. 

Informar a miembros del comité sobre los pacientes aceptados para el protocolo de 

trasplante de células progenitoras hematopoyéticas. 

Elaborar solicitudes para estudios a realizar en Banco de Sangre (BS). (Ver 

procedimiento de elaboración de solicitudes de estudios en BS). 

Administrar estimulo al donador para movilización. 

Solicitar unidades de CPH-SP para su infusión. 

- JEFE DEL DEPARTAMENTO DE BANCO DE SANGRE. 

Enlazar las actividades del BS con la coordinación del comité de TCPH. 

Coordinar actividades relacionadas a la recolección en el Banco de sangre. 

Solicitar apoyo para la criopreservación de las CPH-SP si no se dispone del recurso en 

el BS. 

- COORDINADOR (A) DE LA UNIDAD DE AFERESIS. 

Informar y orientar al familiar, sobre el proceso de recolección de CPH-SP y 

apoyo transfusional peri trasplante 

Recoger, verificar los resultados de los estudios realizados e informar al jefe del 

departamento, al coordinador del comité de TMO sobre los resultados de los estudios 

realizados en BS. 

Programar los procedimientos de recolección de CPH-SP 

Supervisar los procedimientos de recolección de CPH-SP.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Informar a la jefatura de BS y a la Coordinación del comité de TCPH sobre cualquier 

eventualidad de los procedimientos. 

Coordinar con el laboratorio de BS la existencia de componentes sanguíneos dirigidos 

para los pacientes en caso de utilizarse durante el procedimiento de 

recolección. 

JEFE DEL LABORATORIO DEL BANCO DE SANGRE. 

Coordinar la realización de los estudios de los donadores y/o pacientes en protocolo de 

TCPH. 

Proporcionar de manera oportuna, a la coordinación de aféresis los resultados de los 

estudios de laboratorio realizados a los donadores, pacientes en protocolo de TCPH. 

Coordinar la realización del control de la movilización en sangre periférica de los 

donadores (BH, cuantificación de células mononucleares (CMN) y/o CD34+) 

Coordinar la realización del control de calidad a las cosechas de CPH-SP obtenidas en 

los procedimientos de recolección. 

Mantener bajo resguardo las CPH y supervisar la adecuada conservación de las CPH- 

SP obtenidas. 

Proporcionar las unidades de CPH-SP cuando se lo soliciten. 

RECEPCION. (Ver CAL-20 Procedimiento de registro a disponentes) 

Ingresar datos personales del donador en el sistema e imprimir etiquetas para 

identificación de tubos de muestras de sangre y asignar número de unidad. 

ENFERMERA. 

Valora accesos venosos, somatometría y signos vitales de los candidatos a donadores 

de CHP-SP (Ver CAL- 30 valoración de venas y somatometría). 

Realiza procedimiento de recolección de células (Ver Manual Operativo del separador 

celular) 

QUIMICO 

Procesar muestra de sangre para BH (Ver CAL-16 Uso del equipo automatizado de 

Biometría Hemática) y cuantificación de CD34. 

3.-DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO. 

Se realiza en 4 fases que son: 

1.- Presentación de pacientes al programa de Trasplante de medula ósea (TMO). 

Se realizan reuniones quincenales en donde se comentan los casos (Ver Minutas).




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




2.- Estudio de donador, donador/paciente en banco de sangre (Ver Cal-25 

Procedimiento de grupo sanguíneo y anticuerpos y Cal-26 Procedimiento de serología). 

Valoración en la unidad de aféresis. 

Se realiza valoración clínica del donador de acuerdo a edad: 

A) Mayores de edad solicita cita a TMS de BS para estudio como donador 

habitual. 

B) Si es menor de edad llena historia clínica de disponentes de sangre, se toman 

signos vitales y somatometría y se valora la utilización de concentrado 

eritrocitario para el cebado del equipo desechable del separador celular. 

Se programa procedimiento de acuerdo a características específicas de cada donador. 

Se proporciona al padre o tutor o al donador la carta de consentimiento bajo 

información donde se describen las características del procedimiento: como, donde y 

quien lo realiza y quien supervisa, preparación (movilización), duración y frecuencia, 

efectos adversos y posibles complicaciones; y solicita su firma de autorización para la 

realización del mismo. (Ver Carta de consentimiento bajo información). 

3.- Movilización. 

Inicia 4 días antes del inicio de la recolección con la administración de citocinas, 

quimioterapia, citocinas/quimioterapia y/o radioterapia, según protocolo de TMO. 

El donador o paciente/donador acude al servicio de oncología para la administración 

del estimulo cada 24 h incluyendo los días de recolección de CPH-SP. 

Simultaneo a la administración del estimulo, se toma una muestra de sangre en tubo de 

BH para el control de la movilización, de acuerdo a el incremento de la formula blanca 

(leucocitos totales, % y total de CMN).y se envía al BS el tubo con la muestra de 

sangre para el conteo de células CD34+. 

4.- Recolección de células hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica. 

El donador acude al BS al 4º ó 5º día del inicio de la movilización, presenta la solicitud 

de BH y CD34+. 

La recepcionista ingresa la información en el sistema, le proporciona la hoja ficha de 

identificación de donador (M-3-0-23) la cual ha identificado con la leyenda células tallo, 

y solicita la firme el donador o el padre /tutor. 

La recepcionista solicita al familiar o al donador se anote en la Bitácora de 

Disponentes Atendidos (CAL-46-B), y pase a la sala de espera. 

La enfermera toma la hoja de identificación del Kanban ubicado en la zona de 

recepción. Lo llama para tomar signos vitales. Nota: Si no tenemos resultado de




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




biometría hemática y cuenta de CD34 previas, se tomarán en ese momento las 

muestras correspondientes. 

Pide al donador o al familiar que lleve al menor de edad que acudan a tomar un 

desayuno ligero. 

El químico procesa la citometría hemática y entrega el resultado a la enfermera y/o 

médico y posteriormente se realiza la cuantificación de células CD34+. 

El médico encargado del procedimiento valora los resultados de la biometría hemática 

y de la cuantificación de CD34+ si se tienen disponibles del día anterior y decide la 

realización o no del procedimiento de acuerdo a lo programado de acuerdo a las 

características clínicas del donador valoradas previamente. 

La enfermera procede instalar el equipo desechable en el separador celular según las 

instrucciones del Manual del operador. 

El médico supervisa permanentemente el procedimiento, las condiciones clínicas del 

paciente y da instrucciones si se presentan problemas técnicos y/o clínicos 

relacionados con el paciente. 

Nota: La conección y desconección de las líneas del catéter al equipo desechable 

deberá realzarse utilizando técnicas de asepsia y antisepsia y se tomarán las muestras 

pre y post procedimiento necesarias para el control del mismo (biometría hemática, 

hemocultivo, tiempos de coagulación, etc.). 

Al finalizar el procedimiento la enfermera o el médico solicita al área de recepción las 

etiquetas de identificación de unidades y documentación, y las pega en las bolsas de 

recolección de CPH, plasma, bitácora, historia clínica y hoja de identificación. 

La enfermera entrega el o los productos obtenidos al área de inmunohematología para 

su almacenamiento hasta que se soliciten para su infusión. 

LINEAMIENTOS O POLÍTICAS: 

1.- La información adicional que se anexa a la hoja de identificación del donador no 

deberá eliminarse (desprenderse o borrarse). 

2.- La obtención de componentes celulares por métodos de aféresis deberán tener 

como propósito cubrir la deficiencia específica de dicho componente en un paciente. 

3.- Los procedimientos de aféresis para la obtención células progenitoras 

hematopoyéticas deberá estar justificada por una solicitud de interconsulta del servicio 

y el médico del servicio responsable del tratamiento del paciente.




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CAL-02-B 




4.- Los donadores de células hematopoyéticas obtenidas por aféresis deberán cubrir 

los requisitos normativos: 

Accesos venosos adecuados (preferentemente catéter venoso central) 

Estudios de inmunohematología (grupo ABO, Rh), antígenos eritrocitarios, aglutininas 

en caso específicos (incompatibiloidad mayor) 

Estudios de serología del donador: VIH, HB, AgsHB, Brucella, Chagas, CMV IgM. 

Consentimiento informado. 

Control de movilización con biometría hemática y/o cuantificación de células CD34+. 

Células progenitoras 

≥ 50 mL 

≥ 2x10 6 /kg de peso de receptor de 

células CD34+ Hematopoyéticas 

(Alogénico) 

≥1.5x10 6 /Kg de peso receptor de células 

CD34+ 

(Autólogo) 

Para el producto final: 

Integridad de los contenedores. 

Identificación de la unidad con: Nombre del donador 

Número de unidad/Número de aféresis. 

Fecha de obtención. 

Tipo de componente. 

Volumen. 

5.- El producto final que no cumpla con los criterios de conformidad deberá ser 

evaluado conjuntamente con el personal médico y de laboratorio de banco de sangre y 

el coordinador de trasplantes, en base a los siguientes criterios: 

Cuando la dosis no sea la óptima se considerara la posibilidad de la realización 

de otro procedimiento para poder alcanzar la dosis sumando la dosis anterior.




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CAL-02-B 




DESCRIPCIÓN DEL LLENADO DE LA BITÁCORA CAL-50-A (Control de 

procedimientos de Aféresis) 

Una vez firmada la carta de consentimiento bajo información ya sea para disposición 

Alogénica o Autóloga (Ver Anexo 1 y Anexo 2) se procede a realizar la recolección de 

células progenitoras hematopoyéticas de sangre periférica. 

Registrándose la información en la bitácora CAL 50 A (Control de procedimientos de 

aféresis), que contiene la siguiente información: 

HOJA DE CONTROL DE PROCEDIMIENTOS DE AFÉRESIS 

M-3-4-06 a 

No. De Aféresis: Con la letra A para identificar que es procedimiento de aféresis, el 

número consecutivo del procedimiento, se inicia el No. 1 con el primer procedimiento 

del año y finaliza el 31 de diciembre, y el año en curso. 

No. De Unidad: Asignado por el sistema informático de banco de sangre en forma 

consecutiva. 

Procedimiento: Según el componente(s) que se va(n) a obtener. 

Fecha: Día, mes y año en que se realiza la recolección. 

Equipo: Elegir las opciones (Abierto o Cerrado). 

Flujo: Establecer si es continuo o discontinuo 

Máquina: Se refiere al separador que se utiliza. 

Cámaras: NA (No aplica) 

I. DATOS DEL RECEPTOR. 

Nombre: Apellido paterno, apellido materno y nombre (s) 

Registro: No. de registro otorgado por el INP 

Cama: En caso de que el paciente se encuentre hospitalizado, se anotará el número 

de cama correspondiente. 

Grupo sanguíneo: Se anotará solo si se tiene disponible. 

Edad: En años 

Sexo: Se refiere a género femenino ó masculino.




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CAL-02-B 




II. DATOS DEL DONADOR 

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del donador. 

Edad: # de años que tiene el donador al momento de realizar el procedimiento. 

Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del donador 

Parentesco: Relación que existe entre el paciente y el donador (Amistad, familiar, etc). 

Peso: En kilogramos. 

SEROLOGIA: Se refiere a los resultados de los siguientes exámenes: 

- H.I.V. 

- H.C.V. 

- AgS HB 

- R.P.R. 

- BRUCELLA 

- OTROS 

Nombre y firma del químico que realizó las pruebas: El químico anota su nombre y 

firma. 

III. DATOS DEL PROCEDIMIENTO 

Hora de inicio: Hora en que se inicio el procedimiento. 

Hora de terminación: Hora en que se finalizó el procedimiento. 

Nombre y Firma de la enfermera que realiza el procedimiento 

Otros datos que se registran en la bitácora CAL-50-A anotados por la enfermera 

durante el procedimiento: 

TIEMPO ** 

VELOCIDAD DE 

SANGRE(ml/min) 

* 

VELOCIDAD DE 

PLASMA 

(ml/min)* 

VOLUMEN 

DE 

SANGRE (ml) * 

VOLUMEN 

DE 

PLASMA (ml)* ACD (ml)** 

SIGNOS VITALES 

Y OBSERVACIONES *** 

PRE 

TRANS POST




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CAL-02-B 




*. Obtenidos directamente de la máquina. 

**. Al momento de llenar el registro. 

***. Se registran antes, durante y después del procedimiento. 

Volumen procesado de sangre: Cantidad de sangre que se proceso al finalizar el 

procedimiento, obteniendo este dato directamente de la máquina. 

Anticoagulante: Cantidad de anticoagulante que se utilizo durante el procedimiento. 

Solución salina: Cantidad de solución salina que se utilizo durante el procedimiento 

IV. RESULTADOS 

Volumen de la cosecha: 

C.P. Estimados: 

Dato que es obtenido por la enfermera al 

pesar cada bolsa que contiene el producto y 

restarle el peso de la bolsa vacía (40 ml) 

El cálculo que se realiza para programar la 

plaquetaféresis. 

DATOS DE BIOMETRIA 

HEMATICA MUESTRA PRE MUESTRA POST MUESTRA DE LA COSECHA COSECHA FINAL 

PLAQUETAS 

LINFOCITOS 

GRANULOCITOS 

HEMATOCRITO 

OTROS 

Nombre y firma del médico que supervisó el procedimiento: El médico anota su nombre 

y firma. 

M-3-4-06 b 

Reacciones adversas durante el procedimiento: (RAP) 

Presentó RAP: Se anota afirmativa o negativamente




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CAL-02-B 




Tipo de RAP: Se anota el tipo de reacción presentada. 

Medidas Tomadas: Se anota el manejo que se dio a la reacción. 

Observaciones: Se anota algún comentario adicional si es que existiera. 

Fallas técnicas durante el procedimiento: (FTP) 

Tipo de falla: Se anota las características de la falla técnica que hubo durante el 


Medidas tomadas: Se anotas las acciones tomadas para tratar de resolver la falla. 

Observaciones: Se anota algún comentario adicional si es que existiera. 

ESPACIO LIBRE PARA ADHERIR ETIQUETA DEL EQUIPO. 

ANEXO 1: CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION (Autólogo) 


DEPARTAMENTO BANCO DE SANGRE 

PROGRAMA DE RECOLECCIÓN DE CELULAS PROGENITORAS 

HEMATOPOYETICAS 

(Autólogo) 

CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION. 

México, D.F A día mes año- 

Yo NOMBRE DEL PADRE O TUTOR acepto que mi hijo (a) NOMBRE Y APELLIDOS 

DEL PACIENTE de edad en años y meses de edad, con número de registro ---------done 

células hematopoyéticas progenitoras obtenidas de sangre periférica a través del 

método de aféresis, para que le sean transfundidas, ya que se encuentra en el 

protocolo de trasplante de células hematopoyéticas progenitoras y quién tiene el 

diagnóstico -------------------------------------------------. Se me explicó que el procedimiento 

de aféresis consiste en la extracción de sangre del organismo a través de un equipo 

plástico, desechable y de uso único. Inmediatamente al salir la sangre del organismo 

es mezclada con un anticoagulante con la finalidad de que no se coagule. Por medio 

de un equipo de centrifugación integrado a la máquina que separará de la sangre las 

células hematopoyéticas progenitoras con una pequeña cantidad de sangre y plasma 

que le sirve para su conservación, el resto de la sangre ya mezclada con el 

anticoagulante es retornada a su organismo.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Todo esto requiere que antes del procedimiento haya cubierto varios requisitos que 

son: 

a) Acudir a una valoración de su estado de salud actual, realizada por el médico 

tratante, y los servicios interconsultados por el mismo, incluyendo banco de sangre 

En el banco de sangre le realizaran: 

estudios para conocer su grupo sanguíneo ABO Y Rh, antígenos eritrocitarios, y todas 

las pruebas que se consideren necesarias para evitar o disminuir posibles 

complicaciones inmunohematológicas como consecuencia de transfusiones previas y/o 

secundarias al trasplante. 

b) Pruebas para la detección de infecciones que puedan trasmitirse por medio de 

la sangre, y que de estar presente en su organismo de manera latente puedan 

reactivarse como consecuencia de la baja de defensas que presentará durante el 

trasplante y que garanticen su seguridad, la del personal que trabaja con su sangre y 

de la persona (s) que se encuentra (n) atendiéndola(o). 

c) Valoración de sus signos vitales. 

La aplicación de un medicamento (factor estimulante de colonias) durante 4-6 días 

previos a la realización del procedimiento para la obtención de las células 

hematopoyéticas progenitoras, con el propósito de movilizarlas de la medula ósea 

hacia la periferia y puedan ser separadas de esta mediante el procedimiento en 

cantidad suficiente para alcanzar la cantidad necesaria (dosis terapéutica). 

Puede presentar efectos adversos a la administración del medicamento (factor 

estimulante de colonias) como seria: dolor óseo (huesos), escalofríos, elevación leve 

de la temperatura corporal (menor de 38 grados C) dolor de cabeza (cefalea) los cuales 

son leves y ceden generalmente con la administración de medicamentos que calmen 

el dolor o controlen la fiebre, si a pesar de estos persisten las molestias, se considerara 

la suspensión del procedimiento. 

d) Toma de muestras para la realización de estudios de laboratorio (biometría 

hemática) que se consideren necesarios para valoración de la respuesta a la 

aplicación del que sirvió para movilizar las células. 

Pueden ser necesarios 2 o más procedimientos de recolección de células 

hematopoyéticas para alcanzar la dosis que mí paciente requiera. 

Se me informó también que: 

- El procedimiento será realizado por una enfermera especialista en el manejo de la 

máquina y por un médico que supervisará la realización del mismo. Para asegurar una 

buena tolerancia del procedimiento tomarán constantemente sus signos vitales:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, tensión arterial, temperatura y llevaran un 

registro de la 

Cantidad de sangre procesada, la cantidad de anticoagulante administrado y el tiempo 

en que se realiza. 

Puede presentar efectos adversos como son: dolor y/o moretones al momento o 

después de las punciones y en el sitio de las mismas, por efecto del anticoagulante 

las molestias pueden ser: adormecimiento de los labios u hormigueo en diferentes 

partes del cuerpo, ocasionalmente mareos, vómito, mismas que serán atendidas de 

manera inmediata por el médico supervisor del Banco de sangre, quién dará las 

instrucciones pertinentes para corregir estos efectos o suspender el procedimiento si 

considera conveniente por ser de riesgo para el paciente continuarlo. 

Existe el riesgo excepcional de que la máquina deje de funcionar por una falla de la 

corriente eléctrica, esto no condiciona riesgo ya que el equipo cuenta con dispositivos 

de seguridad para estas situaciones y que son implementadas por el personal al cargo 

de las mismas. 

Existe un riesgo mínimo (1:10,000) de muerte secundaria al procedimiento. 

Se me recomendó que después del procedimiento debo mantener a mi paciente en 

reposo relativo y no realizar actividades intensas. 

He recibido información amplia sobre el procedimiento de donación de células 

hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica, con respuesta a todas mis 

preguntas y estoy satisfecho(a) con la explicación. Por ello acepto que mi hija(o) done 

las células hematopoyéticas progenitoras por el método de aféresis, enterado de los 

beneficios y de los riesgos de la realización de este procedimiento, liberando de toda 

responsabilidad al personal médico y paramédico del Banco de Sangre. 

ATENTAMENTE 

Nombre Madre o tutor del paciente) ----------------------------------- Firma___________________ 

Coordinador (a) de Aféresis---------------------------------------------Firma_____________________ 

Responsable del Banco de Sangre------------------------------------------ Firma____________________ 

Testigo--------------------------------------------------------------------------Firma___________________




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CAL-02-B 




ANEXO 2: CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION (Alogénico) 

Alogénico 


DEPARTAMENTO BANCO DE SANGRE 

PROGRAMA DE RECOLECCIÓN DE CELULAS HEMATOPOYETICAS 

PROGENITORAS. 

CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION. 

México, D.F A día de mes de año 

Yo NOMBRE DEL DONADOR (A) acepto donar células hematopoyéticas progenitoras 

obtenidas de sangre periférica para que mi parentesco NOMBRE Y APELLIDOS DEL 

PACIENTE de 1edad en año y meses, (del paciente) con número de registro ------- 

(del paciente) a través del método de aféresis, para que le sean transfundidas, ya que 

se encuentra en el protocolo de trasplante de células hematopoyéticas progenitoras y 

quién tiene el diagnóstico de diagnostico del paciente. 

Se me explicó que el procedimiento de aféresis consiste en la extracción de sangre del 

organismo a través de un equipo plástico, desechable y de uso único. Inmediatamente 

al salir la sangre del organismo es mezclada con un anticoagulante con la finalidad de 

que no se coagule. Por medio de un equipo de centrifugación integrado a la máquina 

que separará de la sangre las células hematopoyéticas progenitoras con una pequeña 

cantidad de sangre y plasma que le sirve para su conservación, el resto de la sangre ya 

mezclada con el anticoagulante es retornada a mi organismo. 

Todo esto requiere que antes del procedimiento haya cubierto varios requisitos que 

son: 

Acudir a una valoración de mi estado de salud actual, realizada por el médico tratante, 

y los servicios interconsultados por el mismo, incluyendo banco de sangre 

En el banco de sangre me realizaron: 

a) estudios para conocer mi grupo sanguíneo ABO Y Rh, antígenos eritrocitarios, y 

todas las pruebas que se consideren necesarias para evitar o disminuir posibles




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




complicaciones inmunohematológicas como consecuencia de transfusiones previas y/o 

secundarias al trasplante. 

b) Pruebas para la detección de infecciones que puedan trasmitirse por medio de la 

sangre, y que de estar presente en mi organismo de manera latente puedan reactivarse 

como consecuencia de la baja de defensas que presentará durante el trasplante y que 

garanticen su seguridad, la del personal que trabaja con su sangre y de la persona (s) 

que se encuentra (n) atendiéndola(o). 

Valoración de sus signos vitales. 

La aplicación de un medicamento (factor estimulante de colonias) durante 4-6 días 

previos a la realización del procedimiento para la obtención de las células 

hematopoyéticas progenitoras, con el propósito de movilizarlas de la medula ósea 

hacia la periferia y puedan ser separadas de esta mediante el procedimiento en 

cantidad suficiente para alcanzar la cantidad necesaria (dosis terapéutica). 

Puede presentar efectos adversos a la administración del medicamento como seria: 

dolor óseo (huesos), escalofríos, elevación leve de la temperatura corporal (menor de 

38 grados C) dolor de cabeza (cefalea) los cuales son leves y ceden generalmente con 

la administración de medicamentos que calmen el dolor o controlen la fiebre, si a pesar 

de estos persisten las molestias, se considerara la suspensión del procedimiento. 

- Toma de muestras para la realización de estudios de laboratorio (biometría hemática) 

que se consideren necesarios para valoración de la respuesta a la aplicación del que 

sirvió para movilizar las células. 

Pueden ser necesarios 2 o más procedimientos de recolección de células 

hematopoyéticas para alcanzar la dosis que el paciente requiere. 

Se me informó también que: 

- El procedimiento será supervisado por una enfermera especialista en el manejo de la 

máquina y por un médico que supervisará la realización del mismo. Para asegurar una 

buena tolerancia del procedimiento tomarán constantemente mis signos vitales: 

frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, tensión arterial, temperatura y llevaran un 

registro de la cantidad de sangre procesada, la cantidad de anticoagulante 

administrado y el tiempo en que se realiza. 

Puedo presentar efectos adversos como son: dolor y/o moretones al momento o 

después de las punciones y en el sitio de las mismas, por efecto del anticoagulante 

las molestias pueden ser: adormecimiento de los labios u hormigueo en diferentes 

partes del cuerpo, ocasionalmente mareos, vómito, mismas que serán atendidas de 

manera inmediata por el médico supervisor de Banco de Sangre, quien dará las




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




instrucciones pertinentes para corregir estos efectos o suspender el procedimiento si 

considera conveniente por ser de riesgo para el paciente continuarlo. 

Existe el riesgo excepcional de que la máquina deje de funcionar por una falla de la 

corriente eléctrica, esto no condiciona riesgo ya que el equipo cuenta con dispositivos 

de seguridad para estas situaciones y que son implementadas por el personal al cargo 

de las mismas. 

Existe un riesgo mínimo (1:10,000) de muerte secundaria al procedimiento. 

Se me recomendó que después del procedimiento debo mantenerme en reposo relativo 

y no realizar actividades intensas. 

He recibido información amplia sobre el procedimiento de donación de células 

hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica, con respuesta a todas mis 

preguntas y estoy satisfecho(a) con la explicación. Por ello acepto donar las células 

hematopoyéticas progenitoras por el método de aféresis, enterado de los beneficios y 

de los riesgos de la realización de este procedimiento, liberando de toda 

responsabilidad al personal médico y paramédico del Banco de Sangre. 

ATENTAMENTE 

Nombre Madre o tutor del paciente) ----------------------------------- Firma___________________ 

Coordinador (a) de Aféresis---------------------------------------------Firma_____________________ 

Responsable del Banco de Sangre------------------------------------------ Firma____________________ 

Testigo--------------------------------------------------------------------------Firma___________________




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 




Bitácora de Aféresis CAL-50-A 

Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B 

El CAL-50 A y las Historias clínicas se almacenan durante 5 años en archivo activo y 5 

años en archivo muerto.



Fecha: 3-mayo-2004 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de la Técnica de Coombs Directo 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

NINGUNO 

REVISIÓN 

00 

FECHA 

3-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo estudios especiales 

como el de Coombs Directo 

COOMBS DIRECTO 

TÉCNICA DIANAGEL D.C. Scan 

Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita por medio del 

formato A-13-14-07 señalando el Coombs Directo, o cuando el Médico del 

banco de sangre o el personal mismo lo considera adecuado por el 

dignóstico del paciente. 

Se realiza la centrifugación del tubo que contiene la muestra del paciente 

para separar el Paquete eritrocitario. Se recomienda lavarlo una vez. 

Preparar una suspensión de hematíes al 1 % (1 mililitro de Diana Sol 2 más 10 

microlitros del paquete eritrocitario). 

De esta suspensión de eritrocitos se agregan 50 microlitros a cada uno de los 

pozos de la tarjeta, que deberá estar previamente identificada con los datos del 

paciente. 

Centrifugar en la centrífuga Dianafuge. 

Leer e interpretar los resultados. 

NEGATIVO 

Registrar resultado en el 

Formato A-13-14-07, y en 

Bitácora CAL-31-B de 

Estudios Especiales 

POSITIVO 

Identificar si es por complemento o 

por una IgG. Se requiere titularlo 

para poder reportarlo en el 

Formato A-13-14-07 y en la libreta 

de Estudios Especiales




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

FORMATO.- A-13-14-07 

CAL-02-B 



Bitácora.- CAL-31-B.-De Estudios Especiales




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 




Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO 

NINGUNO 

REVISIÓN 

00 

FECHA 

3-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




El Laboratorio del Banco de Sangre lleva a cabo un protocolo especial para la técnica 

de Coombs en Neonatos. 

Determinación de antígenos del sistema ABO, Rh y prueba de Coombs Directo 

en recién nacidos con el DianaGel Neonatal 2D. 

Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita por medio del 

formato A-13-14-07 señalando el Coombs Directo, o cuando el Médico del 

banco de sangre o el personal mismo lo considera adecuado por el diagnostico 


Se realiza la centrifugación del tubo que contiene la muestra del paciente para 

separar el Paquete eritrocitario. Se recomienda lavarlo una vez. 

Preparar una suspensión de hematíes al 1 % (1 mililitro de Diana Sol 2 más 10 

microlitros del paquete eritrocitario). 

De esta suspensión de eritrocitos se agregan 50 microlitros a cada uno de los 

pozos de la tarjeta, que deberá estar previamente identificada con los datos del 

paciente. 

Centrifugar en la centrífuga Dianafuge. 

Leer e interpretar los resultados. 

NEGATIVO 

Registrar resultado en la 

Formato A-13-14-07, y 

Bitácora CAL-56-A de 

Estudios Especiales 

POSITIVO 

Identificar si es por complemento o por una 

IgG. Se requiere titularlo, y realizar un 

eluido para identificar el posible anticuerpo 

pegado a los eritrocitos y así poderlo 

reportaren el formato A-13-14-07 y en la 

libreta de Estudios Especiales




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

FORMATO A-13-14-07 

CAL-02-B 



Bitácora CAL-56-A.- De Estudios Especiales




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de la Técnica para 

Anemia Hemolítica en el Recién Nacido 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 

NINGUNO 




REVISIÓN 

00 

FECHA 

10-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





ENFERMEDAD HEMOLIÍTICA DEL RECIEN NACIDO (EHRN) 

La EHRN es un proceso inmunológico que afecta al feto y al recién nacido, y se 

caracteriza por un cuadro de anemia hemolítica inmune debido a la incompatibilidad 

entre el grupo sanguíneo de la madre y el de su descendiente. 

Clasificación de la EHRN según la causa desencadenante: 

1. EHRN debido a sensibilización a otros antígenos del sistema Rh-Hr: D, C, E, c, e. 

2. EHRN por incompatibilidad con el sistema ABO. 

3. EHRN causada por la sensibilización a otros antígenos: Kell, Duffy, Kidd, Diego, etc. 

ENFERMEDAD HEMOLÍTICA DEL RECIEN NACIDO 

EXAMENES DE LABORATORIO DEL BANCO DE SANGRE PARA SU 

DETERMINACIÓN 

RECIEN NACIDO (RN) 

Determinación del Sistema ABO y Rh-Hr 

(fenotipos completos del sistema). 

Coombs Directo (CD) 

RN: grupo A, B, AB y Rh positivo. 

CD positivo o negativo. 

Madre: O positivo, RAI negativo. 

Probable incompatibilidad por Sistema ABO 

Titular el CD del RN si es positivo. 

Realizar un eluido para Sistema ABO. 

MADRE 

Determinación del Sistema ABO y Rh-Hr 

(fenotipos completos del sistema). 

Rastreo de Anticuerpos Irregulares (RAI) 

RN: grupo A, B, AB, O, y Rh positivo 

CD positivo o negativo. 

Madre: O negativo, RAI positivo o negativo. 

Probable incompatibilidad por sistema Rh-Hr 

Titular el CD del niño si es positivo. 

Realizar un eluido para Ac irregulares 

fuera de Sistema ABO.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




En caso de que se requiera exanguinotransfusión el RN seleccionar la sangre 

de acuerdo con la tabla CAL-57-A 

REGISTROS 

No existen registros




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de la Técnica de Prueba Rápida 

para Coombs Directo 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

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Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

NINGUNO 

REVISIÓN 

00 

FECHA 

24-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo pruebas rápidas en 

tubo para Coombs Directo, la cual está indicada en: 

a. Todos los mcasos de anemia o enfermedad hemolítica del recién nacido. 

b. Estudios de la sangre de pacientes con anemia hemolítica. 

c. Reacciones hemolíticas transfusionales. 

PRUEBA RÁPIDA EN TUBO 

La muestra de los eritrocitos del paciente en estudio, deberá obtenerse en un tubo 

de Biometría Hemática 

Se centrifuga la muestra y se separan los eritrocitos. 

En un tubo de ensayo se vierten aproximadamente 0.5 ml de eritrocitos, o una 

cantidad menor, dependiendo del tamaño de la muestra; se lavan 3 veces con 

solución salina fisiológica. Un minuto a 3000 rpm. 

Después de cada lavada se retira con cuidado la solución salina fisiológica. 

Se prepara una suspensión aproximadamente al 2% en salina fisiológica de los 

eritrocitos lavados. 

En un tubo de ensayo se coloca una gota de suero Anti- Humano (Coombs), 

poliespecífico (IgG-C3d), y se le añade una gota de la suspensión al 2% de las 

células lavadas 

Centrifugar durante 20 segundos a 3000 rpm (velocidad máxima de una Sero- Fuge). 

Agitar el tubo suavemente para suspender el concentrado de eritrocitos y 

observar perfectamente si hay presencia de aglutinación.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




Una prueba negativa se reconocerá por la suspensión homogénea de todas las 

células. 

Una prueba positiva mostrará eritrocitos aglutinados visibles macroscópicamente. 

REGISTROS 

Registrar resultados en el 

Formato A-13-14-07, (ver forma de 

llenado en proc. CAL-42) Y 

Bitácora CAL-31-A de Estudios 

Especiales (Ver forma de llenado 

en el procedimiento CAL-31) 

Formato A-13-14-07.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 


Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 





ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 


Procedimiento de la Técnica DE Elución por Calentamiento 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de la Técnica de Elución por Calentamiento 

CAMBIO 

NINGUNO 

REVISIÓN 

00 

FECHA 

18-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Procedimiento de la Técnica de Elución por Calentamiento 


El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo la técnica de 

ELUCIÓN POR CALENTAMIENTO (Landsteiner y Miller) 

1. Lavar el volumen de células con un exceso de salina por 6 veces. Después del 

último lavado, conservar una alícuota de salina para investigar anticuerpos 

libres. Si persisten, significa que los lavados no han sido suficientes y deben 

practicarse lavados adicionales hasta que el residuo de salina no muestre 

anticuerpos. 

2. Después del último lavado, empaquetar bien las células y agregarle igual 

volumen de albúmina bovina al 6%. La cual se prepara mezclando 2 ml de 

albúmina al 30% para 8 ml de salina, o 3 ml de albúmina al 22% para 8 ml de 

salina. Mezclar bien. 

3. Llevar al baño María a 56ºC durante 10 minutos, mezclando periódicamente. 

4. Centrifugar a altas velocidades por 5 minutos. 

5. Separar el sobrante rosado en un tubo aparte e identificado adecuadamente. 

Este método ofrece buenos resultados para eluir anticuerpos anti – A y anti – B, 

pero no es recomendable para otros anticuerpos. 

Registrar el resultado en el 

Formato A-13-14-07, Ver forma de llenado 

en proc. CAL-42) y Bitácora CAL-31-A de 

Estudios Especiales (Ver forma de llenado 

en el procedimiento, CAL-31) 

REGISTROS 

Formato A-13-14-07.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 


Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 





ISBN: 978-968-9170-17-4 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de la Prueba de Coombs Directo 

para Titular Eritrocitos Problema Positivos. 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 




CAMBIO 

NINGUNO 

REVISIÓN 

00 

FECHA 

25-mayo-2004




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 





El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo la Prueba de 

Coombs para titular eritrocitos problemas positivos. 

PRUEBA DE COOMBS DIRECTO PARA TITULAR ERIOTROCITOS PROBLEMA POSITIVOS. 

MATERIAL.- 

1. Sangre problema anticoagulada con EDTA (eritrocitos problema) 

2. Eritrocitos sensibilizados con IgG (testigo positivo de Coombs) 

3. Eritrocitos no sensibilizados (testigo negativo de Coombs) 

4. Suero de Coombs poliespecífico IgG-C3d 

Preparación de los eritrocitos.- 

a. Se requieren 3 tubos de 12 X 75 mm, en uno de ellos se coloca 1 gota de eritrocitos problema, en 

otro 1 gota de testigo positivo de Coombs, y en el tercero 1 gota de testigo negativo de Coombs. 

b. Lávelos con Solución Salina Fisiológica (SSF) tres veces, llenando el tubo. 

c. Resuspéndalos al 2.5% con SSF (25 microlitros de eritrocitos en 1 ml de SSF) 

Preparación de la dilución del suero de Coombs.- 

1. Numere 4 series de tubos de 10 X 75 mm o de 12 X 75 mm del 1 al 8. 

2. La serie 1 se utilizará para hacer la dilución del Suero de Coombs, en los tubos No 1 y 2, se 

colocan 8 gotas de suero de Coombs. 

3. A partir del tubo 2 hasta el No 8, coloque 8 gotas de Solución Salina Fisiológica. 

4. Mezcle el contenido del tubo No 2 y pase 8 gotas al tubo No 3 y así sucesivamente hasta el No 8 

donde se descartan 8 gotas. 

5. Del tubo No 8 , pasar con una pipeta limpia m2 gotas a los tubos 8 de la serie 2, 8 de la serie 3, 8 

de la serie 4. 

6. Pase el tubo No. 7, 2 gotas a los tubos 7 de la serie 2, 7 de la serie 3, 7 se la serie 4, y así 

sucesivamente hasta los tubos No 1 de la serie 2, 1 de la serie 3, 1 de la serie 4. 

7. Con una pipeta limpia se pone una gota de los eritrocitos problema a todos los tubos de la serie 2. 

1 gota de eritrocitos sensibilizados a todos los tubos de la serie 3 y una gota de eritrocitos no 

sensibilizados a la serie 4. 

8. Mezcle cuidadosamente cada serie. 

9. Centrifugue todos los tubos a 3000 rpm durante 20 segundos. 

10. Lea cuidadosamente cada uno de los tubos, comenzando del tubo No 8 al No 1. 

11. Los resultados positivos se reportan en cruces, 4+ para el más positivo, 1+ para el menos positivo. 

12. El título se reporta de acuerdo a la dilución que resulte más elevada.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


REGISTROS 

CAL-02-B 




Registrar resultado en el 

Formato A-13-14-07, (ver forma de 

llenado en proc. CAL-42) y Bitácora 

CAL 31-A de Estudios Especiales 

(Ver forma de llenado en el 

procedimiento CAL-31) 

Formato A-13-14-07.- Se almacena en Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 


Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5 





ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Lic. TS Ana María Dorantes 

Ceh 

Firma: 

Fecha: 

10-enero-2012 


Procedimiento para manejo de Condonaciones 

Firma: 

Revisado por: 

Dra. Margarita Leticia 


Fecha: 

10-enero-2012 

Aprobado por: 


Escobar 

Firma: 

Fecha: 

10-enero-2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



CAMBIO REVISIÓN FECHA 

Se elimina el inciso 3 de los 

requisitos para la condonación 

Se establece tiempo de 

resguardo del formato A-14-33- 

A 

01 

10-enero-2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


DESCRIPCIÓN DEL PROCESO 

CAL-02-B 



Dentro del Instituto Nacional de Pediatría se solicitan donaciones de sangre, según 

el manual de procedimientos del Departamento de Trabajo Social (Ver Manual de 

Procedimientos de Trabajo Social para la donación de sangre y procedimiento CAL-11, 

del Banco de Sangre) y lleva a cabo la condonación de sangre para los pacientes que 

lo ameriten. Dichas propuestas de condonación se llevan a cabo en Trabajo Social del 

Banco de Sangre y en Trabajo social de Hospitalización, y son autorizados por la 

Trabajadora Social del Banco de Sangre y por el Jefe del Departamento del Banco de 

Sangre o quien este a cargo del departamento. 

CONDONACIONES EN EL BANCO DE SANGRE 

El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo condonaciones 

de donación de sangre cuando la situación socio-económica de los pacientes lo amerite 

y bajo las siguientes situaciones: 

1. Cuando son pacientes que forman parte de algún protocolo de investigación. 

2. Cuando el paciente este bajo protección institucional. 

3. Por diagnóstico conocido del paciente y/o de los padres. 

Dicha determinación se basa en el estudio social del área de Trabajo Social del 

Banco de Sangre y es autorizado por el Jefe del Departamento del Banco de 

Sangre. 

Si el Jefe del Departamento autoriza la Condonación de Sangre, La Trabajadora 

Social realiza el llenado del Formato de Condonación A-14-33-A, (ver abajo) y 

entrega a los padres la parte correspondiente y se queda en el Banco de Sangre la 

parte que registra la condonación realizada, así mismo se acompaña de una breve 

descripción del motivo de condonación. 

El Formato de Condonación A-14-33-A, es almacenado por el Banco de Sangre en 

el archivo del área de recepción. 

La Trabajadora Social de Hospitalización da indicaciones a los padres del paciente 

para que pase a Trabajo Social del Banco de Sangre y entregue el motivo social 

para sugerir que se condone la donación de sangre y/o documento que ampara la 

protección institucional del paciente.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Notifica al jefe del Departamento de Banco de Sangre y llena el Formato de 

Condonación con clave A-14-33-A, esto con la finalidad de que El Banco de Sangre 

lleve un registro y evidencia de las condonaciones que se realizan en el Instituto. 

Llenado del Formato de Condonación A-14-33-A, la Trabajadora Social del Banco 

de Sangre, lo pasa a autorización con el Jefe del Departamento, o el responsable 

del Departamento que se encuentre en ese momento. 

FORMATOS RELACIONADOS A ESTE PROCEDIMIENTO 

Formato A-14-33-A 

INSTITUTO NACIONAL DE 


PEDIATRÍA 

BANCO DE 


SANGRE No 


Nombre del Paciente:________ 

paciente:_______________________ 

Reg:______ Servicio:______ 

Reg.___ Servicio:___Cama:____ 

Cama_______ 

Se condonó Sangre: Se condonó sangre: 

1Donación ( ) 2 

1Donación ( ) 2 Donaciones ( ) Donaciones ( ) 

Motivo:_______________________ 

____________________________________ JEFE DEL BANCO DE SANGRE 

A-14-33-A




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 



Forma de Llenar el Formato A-14-33-A 

Nombre del Nombre del paciente para el que se solicita la 

Paciente: 

donación 

Número de expediente que tiene el paciente en el 

Registro: 

INP 

Servicio para el que le estan solicitando la 

Servicio 

donación sangre 

Cama en la que esta hospitalizado niño, o referir 

Cama: 

si es externo 

Se condonó sangre: 

1Donación ( ) 2 

Donaciones ( ) 

Tachar en el espacio correspondiente a la 

cantidad de donaciones condonadas 

Motivo: 

Describir brevemente la razón por la que se 

decide condonar la donación de sangre 

REGISTROS 

A-14-33-A se almacena en el Banco de Sangre, en el archivo del área de Recepción, 

durante 5 años. 

ANEXO 1.- MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE TRABAJO SOCIAL, AUTORIZADO 

INSTITUCIONALMENTE

Banco de Sangre Código: CAL- 65 



ISBN: 978-968-9170-17-4 



Nombre: Pilar Sánchez S. 

Firma: 

Fecha: 

02 Enero 2012 

CAL-02-B 

PROCEDIMIENTOS DE CARGA VIRAL 

VHC Y VIH-1 

Revisado por: 

Nombre: Guillermo Escamilla 

Firma: 

Fecha: 

02Enero 2012 

Aprobado por: 

Nombre: Dinora Escobar 

Firma: 

Fecha: 

02 Enero 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAMBIO 

CAL-02-B 

CAMBIO DE EQUIPO COBAS 

AMPLICOR A TAQ MAN 


VHC Y VIH-1 

REVISIÓN 

01 

FECHA 

02 ENERO 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 



CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Después de que las muestras de los pacientes que resultaron positivas, al Virus de 

Inmunodeficiencia Humana (VIH-1) ó al Virus de la Hepatitis C, se continuará el seguimiento 

clínico con determinaciones de la carga viral de manera periódica solicitándola al Banco de 

Sangre. 

OBTENCION DE LA MUESTRA (CAL-76) Y CENTRIFUGACION DE LA MISMA 

Campana de Flujo Laminar 

OBTENER ALICUOTA DE 550 uL DE PLASMA (de ser posible dos ), IDENTIFICAR Y 

GUARDAR EN EL CONGELADOR DE -20 C A -80 C A 


PROCESO DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS 

Software AMPLINK / Equipo Taq Man 

CREACION DE SERIE ANALITICA 

Software AMPLINK / Equipo Taq Man 

AMPLIFICACION Y DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS 

Software AMPLILINK 

VALIDACION DE RESULTADOS Y GENERACION DE ARCHIVO (RESPALDO 

ELECTRONICO) 

IMPRESIÓN DE RESULTADOS Y DESCARGAR AL SIBS (Sistema Informático de Banco de 

Sangre) 

LOS REPORTES IMPRESO GENERADOS SE GUARDAN 5 AÑOS EN ACTIVO Y 5 AÑOS 

EN ARCHIVO MUERTO




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Carga viral del Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) 

La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1, para uso con el sistema de alta pureza (HPS) es una 

prueba in vitro de amplificación del ácido nucleico para la determinación cuantitativa de ARN 

del virus de inmunodeficiencia humana de tipo 1 (HIV-1) 1 en plasma humano con EDTA, 

utilizando el kit para ácido nucleico vírico del sistema de alta pureza para la preparación 

manual de las muestras y el analizador COBAS® Taq Man® 48 para la detección y 

amplificación automática. 

La prueba está indicada para usarse conjuntamente con la presentación clínica y otros 

marcadores analíticos de progreso de la enfermedad para el tratamiento clínico de los 

pacientes infectados por HIV-1. La prueba puede utilizarse para evaluar la prognosis del 

paciente mediante la medición de la concentración de referencia (antes de iniciar el 

tratamiento) de ARN del HIV-1 o para controlar los efectos de la terapia antirretrovírica 

mediante la medición de los cambios en las concentraciones de ARN del HIV-1 en plasma 

en el curso del tratamiento antirretroviral. 

La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1 no está indicada para utilizarse para detectar la 

presencia de HIV-1 en sangre o hemoderivados ni como prueba diagnóstica para confirmar la 

existencia de una infección por HIV-1. 

Utiliza la tecnología PCR para lograr una sensibilidad máxima y un intervalo dinámico para la 

detección cuantitativa del ARN del HIV-1 en plasma anticoagulado con EDTA. 

La prueba puede cuantificar el ARN del HIV-1 en un intervalo de 47 - 10.000.000 copias/ml. 

Una copia de ARN del HIV-1 es equivalente a 1,7 UI basándose en el estándar de la OMS 

(Código NIBSC 97/656). 

NOTA: Para mayor información consulta el inserto




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Principios del ensayo 

CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1 está basada en tres procesos principales: 

1. Preparación manual de las muestras para obtener el ARN del HIV-1 

2. Transcripción reversa automática del ARN del objetivo para generar un ADN 

complementario (ADNc). 

3. Amplificación simultánea del ADNc del objetivo con iniciadores complementarios 

específicos del HIV-1, y la detección de sondas de detección oligonucleótidas marcadas con 

dos colorantes fluorescentes que permiten la determinación cuantitativa del producto 

amplificado del objetivo del HIV-1 (amplicón) y del ARN del estándar de cuantificación del 

HIV-1, que se procesa, amplifica y detecta simultáneamente con la muestra.( Ver inserto) 

Obtención de la muestra y centrifugación: 

Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-76 de 

recolección y toma de muestras de pacientes. 

En este proceso se utilizan únicamente muestras con EDTA. 

La sangre obtenida con EDTA se puede almacenar a una temperatura de 2 a 28°C hasta 6 

hrs. a partir de su obtención. 

Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes mediante 

centrifugación a 800-1600g por 20 minutos a temperatura ambiente. Separar e identificar el 

plasma en tubos de rosca en (uno ó dos) alícuotas de 550 µL y almacenar de -20°C a -80°C 

en caso de no ser usado de inmediato. 

Para mayor información referirse a la pagina 11 del inserto)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS PARA MUESTRAS Y CONTROLES PARA VIH-1 

1) Descongelar las muestras. 

2) Preparar los siguientes reactivos:. 

a) Inhibitor Removal Buffer (IRB) 

No Test 

IRB 

(negro) 

(mL) 

Etanol 

(mL) 

12 test 8.25 5 

24 test 16.5 10 

48 test Todo 20 

Mezclar por inversión (5 a 10 veces) 

b) Wash Buffer 

No Test 

Wash 

Buffer 

(azul) (mL) 

Etanol 

(mL) 

12 test 5 20 

24 test 10 40 

48 test Todo (20) 80 

Conservar a 15-25 C 

Estabilidad 30 días 




c) Elution Buffer (ELB). Incubar a 70°C. 75 ul por muestra 

No Test ELB (mL) 

12 test 5 

24 test 10




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

d) Isopropanol en tubo Falcon 


VHC Y VIH-1 

e) CAR (Blanco) f) PK (Magenta) 

Para 24 tests: 0,5 ml ELB en 

frasco CAR. Mezclar por 

inversión y vortex. 

Conservar a -20°C hasta 28 días. 

3) Vórtex a muestras, controles y QS. 

No Test 

Isopropanol 

(mL) 

12 test 5 

24 test 10 

Para 24 tests: 5 ml ELB en frasco 

PK. Mezclar por inversión y 

vortex. 


4) Tener Lysis Rack blanco listo con marca orientación de primera 

muestra y N de rack. 

5) Preparar la Lysis Binding Working Solution en tubo Falcon agregando los 

reactivos en el siguiente orden. Cuando se agrega el QS y PK mezclar 

inversión (no vortex). 

Reactivo 12 Test 24 Test 

Lysis Binding 7 mL 14 mL 

CAR RNA 140 µL 280 µL 

HIV-1 QS 84 µL 168 µL 

PK 1.4 mL 2.8 mL 

6) Agregar inmediatamente 625 μl de la Lysis Binding Working Solution 

preparada en cada well del Lysis Rack (blanco).




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

7) Agregar 500 μl de muestra y controles a sus respectivos wells del 

Lysis Rack. Vortex el Rack 10 seg. 

8) Incubar el Lysis rack a 50 C – 10 minutos en baño de agua (5 cm 

altura de agua). 

9) Secar el Rack y centrifugar 20 sec a 4600 g. 

10) Agregar 350 μl de isopropanol a cada well (1 por vez). Mezclar el Rack por inversión y luego vortex 10 seg. 

11) Centrifugar 20 sec a 4600 g. 

12) Preparar el Filter Tube Rack (amarillo) con su Waste Rack. 

Colocar las marcas de orientación y N de Rack. 

13) Transferir 750 μl de cada well al well correspondiente del Filter 

Tube rack (amarillo) con su Waste Rack ajustado. Tener en cuenta las 

marcas de muestras. 

14) Centrifugar 2 min a 4600 g. 

15) Transferir el remanente de cada well del Lysis rack (blanco ) a su 

correspondiente well en el rack amarillo. Descartar el Lysis Rack 

blanco. 

16) Centrifugar 2 min a 4600 g.» Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo. 

17) Abrir los wells con el gripper. Agregar 400 μl del IRB preparado por la pared del well sin tocar la pared. 


19) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer preparado por la pared del well sin tocar. 

20) Centrifugar 2 min a 4600 g. » Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo. 

21) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer por 

la pared del well sin tocar. 

22) Centrifugar 3 min a 4600 g. Descartar el Waste Rack. Colocar Elution Rack (base azul). 

23) Abrir los wells con el gripper. Agregar 75 μl de ELB a 70 C a 

cada well (en el centro del filtro sin tocarlo). 

24) Incubar 3 min a Temp amb. 

25) Centrifugar 3 min a 4600 g. » Descartar el Filter Tube Rack (amarillo) y poner el Cover Rack (azul). Respetar 

las marcas de orientación. 

26) Utilizar 50 μl del eluido para la PCR. Agregar a los K-tubes con 

la MMX de trabajo. Mezclar por pipeteo 3 veces , evitando la 

formación de burbujas. Estabilidad eluido en el Rack: 2 horas a 4-30 C 

27) Iniciar la PCR dentro de 1hora de agregadas las muestras a la 

MMX de trabajo.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

21)Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer por 


22) Centrifugar 3 min a 4600 g. Descartar el Waste Rack. Colocar Elution Rack 

(base azul). 

23)Abrir los wells con el gripper. Agregar 75 μl de ELB a 70 C a 



25) Centrifugar 3 min a 4600 g. » Descartar el Filter Tube Rack (amarillo) y poner el 

Cover Rack (azul). Respetar las marcas de orientación. 



formación de burbujas. Estabilidad eluido en el Rack: 2 horas a 4-30 


MMX de trabajo. 

C




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Preparación de Master Mix (MMX) 

CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

1) Sacar los reactivos de la MMX de la heladera y estabilizar a Temperatura 

ambiente 30 minutos. Proteger de la luz. Limpiar los K-carriers y K-carrier holders 

con isopropanol 70%. 

2) Colocar el K-carrier (gradilla) en el K-carrier Holder. 

3) Colocar los K-tubes en el K-carrier sin tocar las paredes del tubo. 

Posiciones obligatorias: 1-2-5-20-23-24 

4) Preparar la MMX de trabajo: 

Reactivo 

12 tests 

En tubo 1,5 

ml 

5) Destapar los K-tubes con el destapador y colocar las tapas en su gradilla. 

6) Agregar 50 μl de la MMX preparada a cada K-tube. 

24 tests 

En vial MMX 

HIV-1 MMX (μl) 700 Todo el vial de HIV-1 MMX 

CTM Mn 2+ (μl ) 85 170 

Mezclar por inversión. No usar vortex. 

Usar dentro de las 2 horas de preparada (proteger de la luz). 

Agregar 50 µL del eluído de muestras y controles a cada K-tube mezclar por pipeteo 3 veces 

sin producir burbujas. 

Llevar al equipo de PCR.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Software Amplilink/Taq Man 

CAL-02-B 

Encender: 

CPU 

Monitor 

Impresora 

Pestaña 

Service 

Due 

Perform 

Siga las 

instrucciones 

4) Ingresar la 

identificación de 

las muestras 

Star 


VHC Y VIH-1 

Usuario:_____ 

Pasword_____ 

Icono System 

Al finalizar: 

Done 

5) Escoger el 

Test 

Introducir al termociclador 

el K-Carrier con ayuda de 

transportador 

Escritorio 

Icono 

AMPLILINK 

Encender el 

Equipo 

Taq Man 

Creación de Serie Analítica 

6) Save 

Open 

2) Pestaña 

K-Carrier 

3) New 

1)Icono 

Orders 

Icono System




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Cálculo de resultados 

CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

RESULTADOS 

El analizador COBAS® TaqMan® 48 determina de forma automática la concentración de ARN 

del HIV-1 para la muestra o el control. La concentración de ARN del HIV-1 se expresa en 

copias/ml. El factor de conversión entre copias/ml de HIV-1 y unidades internacionales UI/ml 

es de 0,6 copias/UI, utilizando el material de referencia de la OMS para el HIV-1B 97/65635. 

El analizador COBAS® TaqMan® 48: 

• Determina el valor umbral del ciclo (Ct) para el ARN del HIV-1 y el ARN del estándar de 

cuantificación del HIV-1. 

• Determina la concentración de ARN del HIV-1 basándose en los valores Ct del ARN del HIV- 

1 y el ARN del estándar de cuantificación del HIV-1, así como los coeficientes de calibración 

específicos de cada lote. 

• Determina que las concentraciones calculadas en copias/ml para el HIV-1 L(+)C y HIV-1 

H(+)C se encuentran dentro de los intervalos asignados. 

Validación de la serie 

Compruebe la ventana de resultados del software AMPLILINK o la impresión en busca de 

avisos y comentarios para asegurarse de que la serie es válida. 

La serie es válida si no aparecen avisos para los controles 

La serie no es válida si aparece alguno de los siguientes avisos en los controles




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Si la serie no es válida, repita toda la serie incluyendo la preparación de las muestras y los 

controles, transcripción reversa, amplificación y detección. 

Interpretación de resultados: 

Para obtener una serie válida, compruebe cada una de las pruebas por si presentan avisos o 

comentarios en la impresión de resultados. Interprete los resultados de la siguiente manera: 

Una serie válida puede incluir resultados de muestras válidas y no válidas dependiendo de si 

los avisos y/o los comentarios se obtienen para las muestras individuales. 

Los resultados de las muestras se interpretan de la siguiente manera: 

NOTA: Las muestras por encima del intervalo del ensayo también pueden producir un resultado no 

válido con un aviso “QS_INVALID“. Si se desean resultados cuantitativos, la muestra original 

debería diluirse con plasma humano con EDTA negativo para la presencia de HIV-1 y repetirse la 

prueba. Multiplique el resultado notificado por el factor de dilución. 

Nota: Para mayor información referirse al Inserto y al Manual. 

Anotar los resultados en la bitácora CAL-65-A




ISBN: 978-968-9170-17-4 


VALIDACION DE RESULTADOS 

CAL-02-B 

Usuario:___ 

Pasword___ 

3) Número de 

K-Carrier 

(doble click) 

4) Revisar 

RESULTADOS 

11) En barra de 

menús 

File 

12) Shut Down 


VHC Y VIH-1 

1)Icono Results 


Review 

5) Revisar 

RESULTADOS 6) Accept 

10) Apagar el equipo 

(Interruptor lado 

Izquierdo) 

9) Close 

13) Cerrar 

Windows 

7)Yes 

8) Ir a System 

Open 

Retirar el K-Carrier




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Carga viral del Virus del Hepatitis C (VHC) 

La prueba está indicada para su uso conjunto con la presentación clínica y otros indicadores 

de laboratorio como una ayuda en la evaluación de la respuesta vírica frente al tratamiento 

antivírico a través de la determinación de cambios en los niveles séricos o plasmáticos de 

ARN del HCV. Datos recientes parecen indicar que las variaciones tempranas en los niveles 

de ARN de HCV en suero/plasma pueden pronosticar respuestas a largo plazo del tratamiento 

con interferón1. 

El virus de la hepatitis C está considerado como el principal agente etiológico responsable del 

90 al 95% de los casos de hepatitis post-transfusional no A y no B. El HCV es un virus ARN 

monocatenario de sentido positivo con un genoma de aproximadamente 10.000 nucleótidos 

que codifican 3.000 aminoácidos. Como virus transportado en sangre, el HCV es transmisible 

a través de la sangre y los productos hemoderivados. La adopción más o menos generalizada 

de medidas de detección sistemática del HCV en sangre ha reducido de forma considerable el 

riesgo de hepatitis asociado a las transfusiones. 

La prueba puede cuantificar el ARN del VHC en un intervalo de 25 – 391, 000,000 UI/ml en 

plasma conservado en EDTA y suero 

Principios del ensayo 

La prueba COBAS® Taq Man® HCV, v2.0 se basa en tres procesos principales: (1) 

preparación manual de las muestras para obtener el ARN del HCV; (2) transcripción reversa 

automática del ARN diana para generar un ADN complementario (ADNc); (3) amplificación 

mediante PCR del ADNc diana utilizando primers complementarios específicos del HCV, y 

detección simultánea de sondas oligonucleótidas marcadas con doble marcador fluorescente 

escindido que permiten la determinación cuantitativa del producto amplificado de la diana del 

HCV (amplicón). Ver Inserto




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Obtención de la muestra y centrifugación: 

CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-76 de 

recolección y toma de muestras de pacientes. 

En este proceso se utilizan muestras con EDTA ó suero. 

La sangre obtenida con se puede almacenar a una temperatura de 2 a 28°C hasta 6 hrs. a 

partir de su obtención. 

Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes mediante 

centrifugación a 800-1600g por 20 minutos a temperatura ambiente. Separar e identificar el 

plasma en tubos de rosca en (uno ó dos) alícuotas de 550 µL y almacenar de -20°C a -80°C 

en caso de no ser usado de inmediato. 

Para mayor información referirse a la pagina 13 del inserto)




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS PARA MUESTRAS Y CONTROLES PARA VHC 

1) Descongelar las muestras. 

2) Preparar los siguientes reactivos:. 

a) Inhibitor Removal Buffer (IRB) 

No Test 

No Test 

IRB 

(negro) 

(mL) 

Etanol 

(mL) 

12 test 8.25 5 

24 test 16.5 10 

48 test Todo 20 


b) Wash Buffer 

Wash Buffer 

(azul) (mL) 

Etanol (mL) 






c) Elution Buffer (ELB). Incubar a 70°C. 75 ul por muestra 

No Test ELB (mL) 

12 test 5 

24 test 10 

Agua 

desionizada(mL) 

12 test 5 12.5 7.5 

24 test 10 25 15 

48 test Todo (20) 50 30




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CAL-02-B 

d) Isopropanol en tubo Falcon 


VHC Y VIH-1 

e) CAR (Blanco) f) PK (Magenta) 

Para 24 tests: 0,5 ml ELB en 

frasco CAR. Mezclar por 

inversión y vortex. 


3) Vórtex a muestras, controles y QS. 

No Test 

Isopropanol 

(mL) 

12 test 5 

24 test 10 

Para 24 tests: 5 ml ELB en frasco 

PK. Mezclar por inversión y 

vortex. 


4) Tener Lysis Rack blanco listo con marca orientación de primera 

muestra y N de rack. 

5) Preparar la Lysis Binding Working Solution en tubo Falcon agregando los 

reactivos en el siguiente orden. Cuando se agrega el QS y PK mezclar 

inversión (no vortex). 

Reactivo 12 Test 24 Test 

Lysis Binding 7 mL 14 mL 

CAR RNA 140 µL 280 µL 

HCV QS 56 µL 112 µL 

PK 1.4 mL 2.8 mL 

6) Agregar inmediatamente 625 μl de la Lysis Binding Working Solution 

preparada en cada well del Lysis Rack (blanco).




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VHC Y VIH-1 

7) Agregar 500 μl de muestra y controles a sus respectivos wells del 

Lysis Rack. Vortex el Rack 10 seg. 

8) Incubar el Lysis rack a 50 

altura de agua). 

9) Secar el Rack y centrifugar 20 sec a 4600 g. 

C – 10 minutos en baño de agua (5 cm 

10) Agregar 250 μl de isopropanol a cada well (1 por vez). Mezclar el Rack por 

inversión y luego vortex 10seg. 

11) Centrifugar 20 sec a 4600 g. 

12) Preparar el Filter Tube Rack (amarillo) con su Waste Rack. 

Colocar las marcas de orientacióny N de Rack. 

13) Transferir 750 μl de cada well al well correspondiente del Filter 

Tube rack (amarillo) con su Waste Rack ajustado. Tener en cuenta las 

marcas de muestras. 


15) Transferir el remanente de cada well del Lysis rack (blanco ) a su 

correspondientewell en el rack amarillo. Descartar el Lysis Rack 

blanco. 

16) Centrifugar 2 min a 4600 g.» Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo. 

17) Abrir los wells con el gripper. Agregar 400 μl del IRB preparado por la pared del 

well sin tocar la pared. 


19) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer preparado por la 

pared del well sin tocar. 

20) Centrifugar 2 min a 4600 g. » Reemplazar el Waste Rack poruno nuevo. 




(base azul). 









CAL-02-B 



C




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 




(base azul). 











C




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Preparación de Master Mix (MMX) 

CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

1) Sacar los reactivos de la MMX de la heladera y estabilizar a Temperatura 

ambiente 30 minutos. Proteger de la luz. Limpiar los K-carriers y K-carrier holders 

con isopropanol 70%. 

2) Colocar el K-carrier (gradilla) en el K-carrier Holder. 

3) Colocar los K-tubes en el K-carrier sin tocar las paredes del tubo. 

Posiciones obligatorias: 1-2-5-20-23-24 

4) Preparar la MMX de trabajo: 

Reactivo 

12 tests 

En tubo 1,5 

ml 

5) Destapar los K-tubes con el destapador y colocar las tapas en su gradilla. 

6) Agregar 50 μl de la MMX preparada a cada K-tube. 

24 tests 

En vial MMX 

HIV-1 MMX (μl) 700 Todo el vial de HIV-1 MMX 

CTM Mn 2+ (μl ) 85 170 

Mezclar por inversión. No usar vortex. 

Usar dentro de las 2 horas de preparada (proteger de la luz).




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

Encender: 

CPU 

Monitor 

Impresora 

Pestaña 

Service 

Due 

Perform 

Siga las 

instrucciones 

4) Ingresar la 

identificación de 

las muestras 

Star 


VHC Y VIH-1 

Usuario:_____ 

Pasword_____ 

Icono System 

Al finalizar: 

Done 

5) Escoger el 

Test 

Introducir al termociclador 

el K-Carrier con ayuda de 

transportador 

Escritorio 

Icono AMPLILINK 

Encender el 

Equipo 

Taq Man 

Creación de Serie Analítica 

6) Save 

Open 

2) Pestaña 

K-Carrier 

3) New 

Usuario:_____ 

Pasword_____ 

1)Icono 

Orders 

Icono System




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

RESULTADOS 

Cálculo de los resultados 

El analizador COBAS® Taq Man® 48 determina automáticamente el título del ARN del 

HCV para la muestra o el control. El título del ARN del HCV se expresa en unidades 

internacionales (UI)/ml según el segundo estándar internacional de la OMS para ensayos 

NAT de ARN del HCV (código NIBSC 96/798). 

El analizador COBAS® Taq Man® 48: 

• Determina el valor de ciclo umbral (Ct) correspondiente al ARN del HCV y al ARN del 

estándar de cuantificación del HCV. 

• Determina el título del ARN del HCV según los valores Ct para el ARN del HCV y el ARN 

del estándar de cuantificación del HCV y los coeficientes de calibración específicos del 

lote. 

• Determina si las UI/ml calculadas para HCV L(+)C, v2.0 y HCV H(+)C, v2.0 están dentro 

de los intervalos asignados. 

Validación de la serie analítica 

Compruebe la ventana de resultados del programa AMPLILINK o la impresión de los 

posibles avisos y comentarios para asegurarse de que la serie es válida. 

La serie será válida si no aparecen avisos para los controles de HCV . 

La serie no es válida si aparece cualquiera de los avisos siguientes para los controles de 

HCV :




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


VHC Y VIH-1 

Si la serie no es válida, repítala por completo incluyendo los pasos de preparación de las 

muestras y los controles, transcripción reversa, amplificación y detección. 

Interpretación de los resultados: 

Para determinar si una serie es válida, compruebe los posibles avisos o comentarios 

asociados a cada muestra en la impresión de los resultados. Interprete los resultados de la 


Una serie válida puede incluir resultados de muestras tanto válidos como no válidos según 

los avisos o comentarios asociados con cada una de las muestras. 

Los resultados de las muestras se interpretan como se indica a continuación: 

NOTA: Las muestras por encima del intervalo del ensayo también pueden producir un resultado no 

válido con un aviso “QS_INVALID“. Si se desean resultados cuantitativos, la muestra original 

debería diluirse con plasma humano con EDTA negativo para la presencia de HIV-1 y repetirse la 

prueba. Multiplique el resultado notificado por el factor de dilución. 

Nota: Para mayor información referirse al Inserto y al Manual.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

Usuario:___ 

Pasword___ 


K-Carrier 

(doble click) 

4) Revisar 

RESULTADOS 

11) En barra de 

menús 

File 

12) Shut Down 

REGISTROS 


VHC Y VIH-1 

1)Icono Results 


Review 

5) Revisar 

RESULTADOS 6) Accept 

10) Apagar el equipo 

(Interruptor lado 

Izquierdo) 

9) Close 

13) Cerrar 

Windows 

7)Yes 

8) Ir a System 

Open 

Retirar el K-Carrier 

La bitácora CAL-65-A Se debe almacenar en el archivo activo durante 5 años y en el 

archivo muerto 5 años.



Fecha: 01 Noviembre 2011 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



CUANTIFICACION DE 

CELULAS TALLO (CD 34+) POR CITOMETRIA 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:





CAL-02-B 




CAMBIO 

En la calibración y lectura en el equipo 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

01/11/11






CAL-02-B 




Cuantificar el número de células CD 34+ y determinar el porcentaje de viabilidad 

de las mismas en la cosecha de células Células Tallo recolectadas por aféresis 

para el Protocolo de Transplante de Médula. 

PROCESO: 

1. Recepción de muestra: 

a. Biometría Hemática 

b. Cosecha 

2. Cuantificación de cantidad de leucocitos empleando citometría en equipo 

de Biometría Hemática 

3. Ajuste del número de células: ≤ 10,000 µl 

4. Preparación de muestra acorde a inserto 

5. Antes de usar el citómetro de Flujo, se recomienda: 

a. Proceso de lavado largo 

b. Calibración 

c. Usar en cada corrida un control normal (ver viabilidad)





CAL-02-B 




A.- Preparación de muestras para conteo de células CD34+





CAL-02-B 




B.- Lavado previo al uso del equipo 

CVE: BDIS 

REVISAR 

PRESION 

Cambiar de 

VENT-TANK CHANGE 

A 

VENT-RUN 

DILUYENTE : LLENAR 

MAX ¾ 

DESECHOS: VACIAR 

ENCENDER 

ANALIZADOR (LO + 

PRIME ; OBSSERVAR 

BURBUJAS) 

CPU 

MONITOR 

IMPRESORA 

EQUIPO 

RUN HI 

MONITOR 

RUN 

RUN 

ESPERAR A QUE 

TERMINE EL 

LAVADO DONE 

LAVADO 

LOADER 

MANAGER 

COLOCAR LOS TUBOS 

EN EL RACK COMO SE 

INDICA 

EN LAS POSICIONES: 

39.. FAC’S CLEANE 

40. FAC’S RINSE 

COLOCAR EL RACK 

EN EL EQUIPO 

FILE 

MAINTENANCE 

TEST OPTION 

ESCOGER 

LONG 

O 

SHORT 

CLEAN 

QUIT





Realizar Calibración 

CAL-02-B 



CELULAS TALLO (CD 34+) POR CITOMETRIA





CAL-02-B 




Llevar las muestras al equipo para proceder a su lectura 

PANTALLA 

PRINCIPAL 

MOVER 

LOS 

TUBOS 

CON EL 

CONTROL 

ADOR 

M,ANUAL 

CITOMETRO 

CYTOMETER 

INTRUMENTS 

SETTINGS 

ACQUISITION 

CONTROL 

SET UP 

CD34 

Plantillas 

ISHAGE 

EQUI 

PO 

RUN HI 

(Doble Click) 

JALAR LA 

CALIBRACIO 

N L.N.W 

OPEN 

ACQUI 

RE 

APARECE EL 

ULTIMO 

RESULTADO 

OBTENIDO 


EN EL ORDEN QUE 

SE INDICA. Y EN LAS 

POSICIONES 

38. H 2 O 




EN EL EQUIPO 

PAUSE 

COUNTER S 

DESKTOP 

ABORT 

CD34 

ACQUIRE 

PESTAÑA 

ACQUIRE 

FAC’STATION BD FILES 

CHECAR QUE EN 

THRESHOLD ESTE 

SELECCIONADO FL 1 Y 

ESTE EN UN RANGO DE 

350-360 

ACQUISITION 

CONTROL 

SET UP 

CONECTAR 

CITOMETRO 

PRESIONAR 

LA TECLA COMAND 

( Y SIN SOLTAR 

PRESIONAR 1, 2 Y 3 

DESPUES DE 

5 MIN 

AL FINALIZAR LA CORRIDA REALIZAR UN 

LAVADO LARGO (LONG) DEL EQUIPO. 

INTRUMENT 

S SETTINGS 

PAU 

SE 

DONE 

DON´T 

SAVE 

ACQUIRE 

PARAMETERS 

DESCRIPTION 

INGRESAR LOS 

DATOS DEL 

PACIENTE 

Calib.File.LNW 

SAVE 

SET 

IMPRIMIR 

RESULTAD 

OS 

QUIT CELL QUEST





Resultados 

CAL-02-B 




Obtención de resultados impresos en automático ó vaciar en el formato 

REGISTROS 

NOMBRE 

Muestra: 

CD 34+ viables 

CD34+ total 

CD 45+ viables 

CD45+ total 

Perlas 

G6 

G7 

Dilución 

Cuenta total 

CD 34+/µl 

CD34+/Kg paciente 

Ningún registro asociado 

LOTE____________ 

(Células CD34+ viables) / (# perlas) X (# perlas en el tubo) / (50 µl muestra) X dilución 

Viabilidad de 34+: (CD 34+ viables)(100) / CD34+ Viabilidad de 45+: (CD 45+ viables)(100) / CD45+ 

PERLAS BOLSA 

_________________ 

PESO: _______


Nombre: 

Firma: 

Q.F.B. JUDITH 

RODRIGUEZ HERNANDEZ 

Fecha: 

CAL-02-B 




AGLUTININAS INMUNES 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

M. en C. GUILLERMO 


Fecha: 

Código: CAL- 68 


Fecha: 26 de Marzo 2008 


Aprobado por: 

Nombre: 

Firma: 

DRA. DINORA 


Fecha:





CAMBIO 

CAL-02-B 



REVISIÓN 

FECHA





OBJETI VO 

CAL-02-B 



Cuantificar la concentración de un Ac presente en una muestra de suero con fines terapéuticos, de 

investigación y en la elaboración y control de calidad de los reactivos. 

MATERIAL Y EQUIPO 

Suero en estudio, hematíes conteniendo el Ag correspondiente al Ac a titular, pizeta con SSF, 

guantes quirúrgicos, programador o gradilla, lápiz graso, pipeta de Pasteur de igual calibre, bulbo 

de goma, tubos de ensaye 12 x 75 mm, termoblock temperatura variable (37, 56 a 70° C), 

termómetro, centrifuga, antiglobulina humana (Coombs). 

METODO 

A.- Titulación de Ac anti "A" y anti "B" naturales. Realizar titulo de Ac naturales del sistema 

ABO, según grupo sanguíneo: 

Si es grupo "0" titular anti "A" y anti "B" 

Si es grupo "A" titular anti "B" 

Si es grupo "B" titular anti "A" 

1. Utilizar guantes quirúrgicos 

2. Obtener el suero en estudio 

3. Realizar diluciones doble seriadas (solución salina / suero problema) según se requiera. 

4. Colocar 100 µl de solución salina a partir del tubo número 1. Añadir 100 µl de suero. 

5. Mezclar y pipetear el contenido del tubo 1 y transferir 100 µl al tubo 2, asi 

sucesivamente hasta la dilución deseada. 

6. Se preparan tres series: para aglutininas A, aglutininas B y un testigo 

7. A la primer serie se le agregan 50 µl de eritrocitos A, a la segunda 50 µl de eritrocitos B 

y a la tercera: 50 µl de eritoctios O. 

8. Mezclar y centrifugar a tiempo y revoluciones (30” / 3500 RPM) . 

9. Leer y anotar resultados en cruces, tubo en mano en formato correspondiente.





CAL-02-B 

INTERPRETACION DE RESULTADOS 



A1/2 A1/4 A1/8 A1116 A1/32 A1/64 A1/128 A1/256 A1/512 A1/102 

4+ 4+ 3+ 2+ 1+ 1/2+ 

B1/2 B1/4 B1/8 B1/16 B1/32 B1/64 B1/128 B1/256 B1/512 B1/102 

4+ 4+ 3+ 3+ 2+ 1+ 1/2+ 

Resultado del titulo anti "A" y anti "B" 

Anti "A" 64 

Anti "B" 128 

B. Titulación de anti "A" y anti "B" inmunes 

Técnica para neutralizar el suero: 

1. Utilizar guantes quirúrgicos. 

2. Neutralizar el suero en estudio, utilizar una dilución de 1/4, 3 gotas de solución salina 

fisiológica mas 1 gota de suero en estudio; adecuar esta proporción para obtener mayor 

numero de gotas. ya que se debe comprobar si ocurrió a no la neutralización de los 

anticuerpos naturales, utilizando pipetas de Pasteur o agregar a los tubos 1/2 de cada hilera 

cuatro gotas del suero en estudio con pipeta de Pasteur o automatizada 

3. Incubar el contenido de la dilución preparada de entre 56°C a 70°C por 30 minutos. 

4. Retirar el contenido de la dilución neutralizada del baño de Maria y dejar reposar por 10 

minutos. 

5. Marcar dos tubos 12 x 75 mm como A y B. 

6. Agregar a cada tubo 2 gotas de suero, posiblemente inactivado. 

7. Al tubo A agregar eritrocitos "A," y al tubo "B" agregar eritrocitos B. 

8. Mezclar y centrifugar a tiempo y velocidad establecida. 

9. Leer y observar aglutinación. 

10. Repetir los pasos 6, 7, 8, 9 y 10, si da negativo demuestre que los anticuerpos naturales han 

sido neutralizados, procediendo a investigar anticuerpos inmunes. 

11. Colocar dos tubos anteriores previamente neutralizados a 37°C por 30 a 60 minutos. 

12. Lavar ambos tubos cuatro veces con SSF, y añadir dos gotas de suero de Coombs, mezclar y 

centrifugar. 

13. Leer y anotar resultados en cruces, tubo en mano en formato correspondiente. Si hay 

aglutinación existe presencia de anticuerpos inmunes, proceder a realizar titulación.





Interpretación: 

CAL-02-B 



Si se observa aglutinación, la neutralización ha sido insuficiente, se debe incubar el tubo con el 

contenido de la dilución preparada durante 10 min. a 56°C a 70°C para que se termine de 

neutralizar. 

B.1 Título del suero 

1. Identificar dos (2) hileras de tubos 12 x 75 mm, con la letra A 1 /2, A 1 /4 hasta A 1 / 

1024 y proceder igualmente con la hilera B 

2. Agregar a cada hilera un tubo adicional con Al 1, 1311. 

3. 3. Colocar en ambas hileras excepto en el tubo numero 11, cuatro gotas de SSF con 

pipeta de Pasteur. 

4. Añadir a los tubos Al /2 y B 1 /2, cuatro gotas de suero en estudio, previamente 

neutralizada. 

5. Mezclar y pipetear el contenido del tubo A1/2 y transferir cuatro gotas al tubo A1/4 y 

así sucesivamente hasta el tubo numero 11. 

6. Repetir el paso numero 5 con la hilera B. 

7. Agregar a la hilera A, excepto en el tubo numero 11, una gota de hematíes "A1". 

8. Agregar a la hilera B, excepto en el tubo numero 11 una gota de hematíes "B". 

9. Mezclar e incubar ambas hileras en baño Maria a 37° C durante 30 a 60 min. 

10. Lavar todos los tubos, de ambas hileras con SSF por cuatro veces consecutivas 

resuspendiendo en cada lavado, con una pequeña alícuota de SSF. 

11. Agregar a cada tubo dos gotas de reactivos antiglobulina humana (Coombs). 

12. Centrifugar a tiempo y revoluciones establecidas. 

13. Leer, desprendiendo suavemente el botón celular, observando hemólisis o aglutinación, 

comenzando de la mas alta dilución (1/2) a la menor sobre una fuente de luz. 

14. 14. Anotar los resultados en cruces, tubo en mano en el formato correspondiente. 

lnterpretación de resultados 

A1/2 A1/4 A1/8 A1/16 A1/32 A1/64 A1/128 A1/256 A1/512 A1/1 

4+ 4+ 3+ 2+ 1+ 1/2+ 

*12 

12 

10 

8 

5 

B1/2 B1/4 B1/8 B1/16 B1/32 B1/64 B1/128 B1/256 B1/512 B1/1 

4+ 4+ 3+ 3+ 2+ 1+ 1/2+ 

*12 12 10 10 8 5 2 Sc 

Titulo ' Score 

Anti A = 64 Anti A = 49 

2 

Sc





TÉCNICA ALTERNA 

Técnica del 2- -mercaptoetanol 

CAL-02-B 



La prueba es de utilidad en la investigación serológica en la investigación de enfermedad hemolítica del 

recién nacido, donde sólo las IgG son capaces de atravesar la placenta. Se emplea esta técnica también 

el la demostración de anti-A y anti-B no neutralizables. 

Los anticuerpos de naturaleza IgM al ser tratados con 2- -mercaptoetanol sufren la ruptura de los 

puentes de disulfuro en su molécula afectandose así su función o actividad serológica. Bajo condiciones 

similares, las IgG no sufren daño. 

Método: 

1. Adicione 1 ml de suero problema a una solución recién preparada del 2- - 

mercaptoetanol 0.1 M en buffer a pH 7.4. 

2. Se prepara un control con suero normal en forma similar 

3. Incubar los tubos a 37°C durante 2 horas. 

4. Dialice durante la noche buffer pH 7.4. o aplique método pertinente a fín de eliminar el 

reactivo 2- -mercaptoetanol 


En titulación no se observa mucha diferencia entre el suero tratado del no tratado. Aquellas 

muestras que contienen mezcla de IgG/IgM muestran una disminución sensible al ser reducidas con el 

2- -mercaptoetanol.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 


Nombre: GUILLERMO 


Firma: 

Fecha: 


Limpieza y manejo de RPBI 

Revisado por: 

Nombre: MARGARITA 

LETICIA MEDINA MACIAS 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por: 

Nombre: DINORA 


Firma: 

Fecha:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 

CAMBIO 


LIMPIEZA Y MANEJO DE RPBI 

REVISIÓN 

FECHA




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



En este procedimiento se describen los métodos de limpieza que se utilizan en las 

diferentes áreas y la metodología para la recolección de los residuos peligrosos 

biológicos infecciosos, los materiales, equipos y utensilios a emplear en cada 

actividad, así como la asignación de responsables a realizar dicho procedimiento, 

la frecuencia con que se debe realizar. 

TECNICAS DE LIMPIEZA / DESINFECCIÓN APLICABLES 

La descripción de las actividades para la limpieza de las áreas y su supervisión se 

desglosan en el formato CAL-70-A y este se publica en cada una de las áreas 

para que sean del conocimiento de todo el personal y puedan ser consultadas por 

los mismos cada vez que sea necesario. 

Una vez que el personal asignado para la limpieza conozca la descripción de ésta 

actividad, deberá realizarla conforme a lo descrito y para ello será monitoreado 

por: 

A. Planta Baja: Jefa de enfermería. 

B. Laboratorio: Jefe del Laboratorio. 

a. Turno matutino: auxiliar asignado 

b. Turno vespertino: auxiliar asignado 

c. Turno nocturno: personal de guardia nocturna 

d. Turno especial: auxiliar de turno 

El reporte de cada turno en el área de laboratorio se remite a la jefatura del 

laboratorio para elaborar reporte de informe semanal que será entregado a la 

jefatura del Departamento de Banco de Sangre 

El formato CAL-70-A se muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



FE C HA 

NOMBR E DE L S UPE R VIS OR 

TURNO 

MATUTINO 

VE S PE R TINO 

NOC TUR NO 

E S PE C IAL 

AR E A 

BANC O DE S ANGRE 

C ONC E PTO M R B M R B M R B M R B 

FR E C UE NC IA 

LIMPIE ZA Y DE S INFE C C ION DIAR IA TR APE ADO 

C ONTINUO 

PIS OS Y MUR OS 

PR ODUC TOS GE R MIC IDA - J ABON NE UTR O 

MAQ. LAVADOR A/AC C S C E PILLOS DE R AIZ, 

INS TR UME NTOS C R UC E TAS , R E C OGE DOR , C UBE TAS , 

TR APE ADOR E S MANGO GR IS 

FR E C UE NC IA LIMPIE ZA DIAR IA Y LAVADO C ADA OC HO DIAS 

PUE R TAS 

PR ODUC TOS 

INS TR UME NTOS 

GE R MIC IDA - DE S E NGR AS ANTE 

E S C ALE R A, FR ANE LA, GR IS , C UÑAS DE 

MADE R A, C UBE TA, ATOMIZADOR 

FR E C UE NC IA LIMPIE ZA Y DE S MANC HADO DIAR IO 

VIDR IOS 

PR ODUC TOS 


DE S E NGR AS ANTE 

ATOMIZADOR , C R UC E TA, FR ANE LA GR IS , 

C UBE TA, C E PILO 

FR E C UE NC IA LIMPIE ZA DIAR IA Y LAVADO C ADA OC HO DIAS 

MUE BLE S DE OFIC INA 

PR ODUC TOS 


DE S E NGR AS ANTE 

ATOMIZADOR , FIBR A DE NY LON, FR ANE LA 

GR IS 

E QUIPO ME DIC O 

FR E C UE NC IA 

PR ODUC TOS 


LIMPIE ZA DIAR IA (S UPE R VIS ION DE L 

PE R S ONAL ME DIC O) 

GE R MIC IDA-DE S E NGR AS ANTE 

FR E C UE NC IA LAVADO DIAR IO Y TR APE ADO C ONTINUO 

S ANTIAR IOS 

PR ODUC TOS 


GE R MIC IDA-DE S E NGR AS ANTE 

ATOMIZADOR , FR ANE LA R OJ A, FIBR A NY LON, 

GUANTE S DE HULE , C UBE TA, C UBR E BOC A 

FR E C UE NC IA TR APE ADO Y BAR R IDO UNA VE Z POR TUR NO 

E S C ALE R AS 

PR ODUC TOS 


GE R MIC IDA 

TR APE ADOR MANGO GR IS , DOS C UBE TAS , 

C R UC E TA 

R E C OLE C C ION DE BAS UR A TR E S VE C E S POR TUR NO 

R E C OLE C C ION DE R PBI DOS VE C E S POR DIA 

C OME NTAR IOS : 

TOTAL 

M MALO 

R R E GULAR 

B BUE NO 

S UPE R VIS ION DE L IMPIE ZA 

El formato CAL-70-A se elabora de acuerdo a las necesidades de las áreas del 

laboratorio de la siguiente manera: 

ÁREA: Se escriben las diferentes áreas del Banco de Sangre que 

se deben limpiar y/o desinfectar. 

FRECUENCIA: Se indica la frecuencia con la que se debe realizar la 

actividad mencionada 

CAL-70-A




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



PRODUCTOS: Se lista los productos necesarios para realizar la limpieza 

y/o desinfección del área en cuestión 

INSTRUMENTOS: Se lista los instrumentos y/o materiales necesarios para 

realizar la limpieza y/o desinfección del área en cuestión 

M: Malo, calificación de la actividad 

R: Regular, calificación de la actividad 

B Bueno, calificación de la actividad 

FECHA: Fecha en que se realiza la supervisión 

NOMBRE DEL 

SUPERVISOR: Nombre de la persona encargada de la supervisión 

TURNO: Turno en que se realiza la supervisión, cruzar el espacio 

adecuado 

RESPONSABLES: Se indica quien o quienes van a ser los responsables de 

llevar a cabo la actividad mencionada. 

COMENTARIOS: Anexar comentarios extras, si es necesario 

TOTAL: Puntaje total de columnas M, R y B 

Es responsabilidad de los jefes de laboratorio elaborar el programa mensual 

de limpieza y verificar que las actividades se realicen. 

Importante: 

El material de limpieza de cada área incluyendo las soluciones debe 

guardarse limpio y seco en el lugar asignado, para evitar un uso indebido 

en otras áreas. 

No se debe dejar equipo de limpieza fuera de los lugares asignados para 

ello.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



Las precauciones a seguir para el manejo de los químicos de limpieza y 

sanitización serán las descritas por el proveedor cada producto. 

MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO INFECCIOSOS 

1. IDENTIFICACIÓN DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO- 

INFECCIOSOS 

Clasificación. 

Se deben clasificar los residuos peligrosos biológico infecciosos (RPBI) que se 

generan en el laboratorio, así como el nivel de establecimiento que le corresponde 

al mismo de acuerdo con lo que indica la norma NOM-087- ECOL-SSA1-2002. 

2. ENVASADO DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO- 

INFECCIOSOS 

Los contenedores para RPBI se clasifican de acuerdo al tipo de RPBI y los 

mismos deben de cumplir con lo requerimientos especificados en la NOM-087- 

ECOL-SSA1-2002. 

TIPO DE RESIDUOS 

ESTADO 

FISICO 

1 Sangre Líquidos 

2 Cultivos y cepas de agentes 

infecciosos 

3 Patológicos 

4 Residuos no anatómicos 

Sólidos 

Sólidos 

Líquidos 

Sólidos 

Líquidos 

5 Objetos punzocortantes Sólidos 

ENVASADO COLOR 

Recipientes 

herméticos 

Bolsas de 

polietileno 


polietileno 

Recipientes 

herméticos 


polietileno 

Recipientes 

herméticos 

Recipientes 

rígidos 

polipropileno 

Rojo 

Rojo 

Amarillo 

Amarillo 

Rojo 

Rojo 

Rojo




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



Durante el envasado, los RPBI no deben mezclarse con ningún otro tipo de 

residuos municipales o peligrosos. 

Los contenedores de los diferentes tipos de RPBI deben de cumplir con las 

siguientes especificaciones: 

a) Contenedores para residuos sólidos (bolsas de polietileno) 

Las bolsas deberán ser de polietileno color rojo de calibre mínimo 200 y 

color amarillo calibre mínimo 300 , impermeables 

Los materiales utilizados deberán estar libres de metales pesados y cloro, 

mientras que los colorantes deberán ser fisiológicamente inocuos. 

Resistentes. 

Destruibles por medios fisicoquímicos. 

Etiquetados con la leyenda “Peligro, residuos sólidos biológico infecciosos” 

y con el símbolo universal de riesgo biológico. 

b) Contenedores para residuos punzocortantes. 

Deben ser rígidos 

De polipropileno color rojo 



Resistentes a fracturas y perdidas del contenido al caerse. 

Destruibles por medios físicos. 

Esterilizables. 

Resistencia a la penetración en todas partes. 

Tener tapa con y sin separador de agujas. 

Abertura para depósito con dispositivo para cierre seguro. 

Etiquetados con la leyenda “Peligro, residuos punzocortantes biológico 

infecciosos” y con el símbolo universal de riesgo biológico. 

Una vez llenos los recipientes no deben ser abiertos o vaciados.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



c) Contenedores herméticos para residuos líquidos. 

Deben ser rígidos. 

Herméticos. 

De polipropileno color rojo o amarillo 



Resistentes a fracturas y perdidas del contenido al caerse. 

Destruibles por medios físicos. 

Etiquetados con la leyenda, “Peligro, residuos peligrosos líquidos biológico 

infecciosos”. 

Marcados con el símbolo universal de riesgo biológico. 

A continuación se muestra el símbolo universal de riesgo biológico 

3. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE INTERNO. 

El manejo interno del material de residuos biológico – infeccioso, será exclusivo 

del área de Intendencia, utilizando el equipo de protección que se les ha asignado 

(bata, guantes, lentes protectores y cubrebocas). 

Estos pasos comprenden la recolección de las diferentes áreas de laboratorio del 

material residuo biológico infeccioso, el área de almacenamiento temporal y su 

transporte por personal capacitado al lugar de su eliminación. 

Para la recolección interna se siguen las siguientes normas:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



Los residuos nunca deben ser compactados. 

Las bolsas y contenedores recolectados deben estar llenos al 80% de su 

capacidad y no más. 

Una vez cerrados los contenedores estos no deben ser abiertos. 

Se utilizaran carritos para uso exclusivo de residuos biológico infecciosos. 

Los carritos deberán ser lavados y desinfectados diariamente. 

La persona que realiza esta labor deberá contar con equipo de protección 

personal individual. 

Se deben utilizar las rutas de evacuación diseñadas y señaladas con los 

símbolos que marcan el manejo de RPBI. 

TRANSPORTE INTERNO 

1. El personal responsable recolectara diariamente todos los depósitos de RPBI 

sólidos, identificándolos. 

2. Se deberá identificar a simple vista que los RPBI se encuentren clasificados 

debidamente, informando cualquier anomalía detectada al responsable en 

turno. 

3. El recorrido se llevara a cabo con las máximas precauciones y utilizando 

siempre el material de protección asignado. 

4. La ruta de RPBI podrá identificarse por flechas de color verde y las siglas RPBI 

así como el símbolo universal de RPBI. 

5. El transporte se realizara hasta el Almacén temporal, este deberá contar con 

los señalamientos indicados de manejo de Precaución RPBI, así como el 

símbolo universal de RPBI. 

4. ALMACENAMIENTO TEMPORAL DE RPBI 

A. Destinar un área exclusiva para el almacenamiento temporal de los RPBI y 

debe de cumplir con las características establecidas en el punto 6.3.5 de la 

norma NOM-087- ECOL-SSA1-2002, excepto para los establecimientos 

incluidos en el nivel 1. 

B. El Almacén temporal deberá contar con un candado de seguridad al cual solo 

tendrán acceso el personal asignado. 

C. Este solo será abierto para el depósito y transporte externo de RPBI por la 

empresa contratada para su eliminación.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



D. El periodo de almacenamiento temporal esta sujeto al nivel del establecimiento, 

como sigue: 

Nivel I: Máximo 30 días 

Nivel II: Máximo 15 días 

Nivel III: Máximo 7 días 

E. Los residuos patológicos, humanos o de animales (que no estén el formol) 

deben conservarse a temperatura de refrigeración no mas de 4°C 

5. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE EXTERNO. 

El transporte externo y la disposición final de los RPBI será efectuado por una 

empresa contratada para este propósito, misma que se encuentra autorizada para 

este fin por SERMANAT y en cumplimiento de la NOM-087-ECOL-SSA1-2002 

para la disposición final de RPBI. 

La empresa en el momento de la recolección emite un reporte de la cantidad de 

RPBI recolectados, la cual es firmada por el responsable de laboratorio en turno. 

Se encuentra establecida y actualizada una bitácora de la gestión de los residuos 

biológico-infecciosos a fin de evaluar el desempeño de la gestión, así como para 

mostrar el cumplimiento de la normatividad. 

6. ACCIDENTE CON RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICOS INFECCIOSOS. 

Se debe entender como accidente con residuos peligrosos biológico infecciosos 

los siguientes: 

Punciones y cortaduras. 

Salpicaduras con residuos líquidos. 

Inhalación de gases producidos por los escurrimientos. 

Derramamientos, caídas o fracturas de bolsas y contenedores.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



a) En el caso de derrames. Se debe estar en posibilidad de descontaminar y 

limpiar el sitio contaminado. Para ello se puede emplear una solución de cloro 

inorgánico al 0.5 por ciento que representa una dilución de 1:10 del blanqueador 

doméstico habitual; el cual tiene actividad esporicida, tuberculocida, inactiva 

bacterias vegetativas, es fungicida y virocida. Se sugiere consultar al experto en 

control de agentes infecciosos y la exclusión del movimiento de personas en el 

área durante el proceso de desinfección y de limpieza. 

Se debe disponer de un paquete de materiales de desinfección que incluya: 

el desinfectante 

el material absorbente de líquidos 

las bolsas rojas para contener los materiales de limpieza 

el equipo de seguridad para la protección de los trabajadores de limpieza. 

Se deben establecer procedimientos para la contención y limpieza de derrames 

que incluyan: 

Salida inmediata del área para prevenir exposición 

Determinación de si ocurrió exposición. 

Identificación del residuo derramado. 

Restricción de acceso al área. 

Proporcionar el equipo de protección para limpieza. 

Rociado de los materiales derramados con el desinfectante. 

Remoción del material derramado. 

Desinfección, enjuague y limpieza del área. 

Disposición de los materiales de desinfección y limpieza. 

Remoción del equipo de protección. 

Lavado extenso de manos y piel expuesta. 

Reemplazo de los materiales usados del paquete. 

b) Incidentes de exposición: El seguimiento adecuado y estricto de los 

procedimientos que atiendan los casos de exposición de trabajadores durante el 

manejo de los RPBI como resultado de un derrame o salpicadura, podrán 

minimizar las complicaciones que deriven de ello. El seguimiento pos exposición 

es requerido para atender oportunamente cualquier infección. 

Para ello es importante el uso y seguimiento del material de protección 

proporcionado y el seguimiento estricto de los puntos tratados en este manual de 

procedimientos.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-70 



Para el personal a cargo se deberán seguir los siguientes pasos: 

Evaluación médica posterior a la exposición. 

Documentar como ocurrió el accidente. 

Identificar y documentar la fuente de sangre o muestra contaminada que 

causó el accidente. 

Notificar al empleado los resultados de las pruebas y que se hagan las 

recomendaciones pertinentes. 

Obtener el consentimiento del empleado, para hacer la determinación del VIH 

y VHB; tan pronto como sea posible documentar los resultados del análisis. 

Si el empleado no da el consentimiento para el análisis serológico, conservar 

la muestra de sangre y convencerlo de la necesidad de realizar las pruebas.






Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 

PRUEBA DE ACIDOS NUCLEICOS (NAT) 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha:



Fecha: 11-Enero-2012 


CAMBIO 

CAL-70 

1. Se incluye trabajo no conforme 

2. Se incluye formato CAL-71-a 

3. Se incluye bitácora de trabajo 

CAL-71-b 

4. Se incluye formato CAL-71-c 

PROCEDIMIENTO 


REVISIÓN 

01 

FECHA 

11/01/2012





OBJETIVO GENERAL 

Resumen: 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


La realización del tamizaje de las muestras de plasma de los donadores en 

forma de pool para la detección del Virus de la Hepatitis C(VHC), el Virus de 

inmunodeficiencia Humana (VIH) y el Virus de la Hepatitis B (VHB) 

El VHC está considerado como el principal agente etiológico responsable del 90% al 

95% de los casos de hepatitis postransfusional no A no B. El VHC es un virus ARN 

monocatenario de sentido positivo con un genoma de aproximadamente 10,000 

nucleótidos que codifican 3 000 aminoácidos. Como es un virus transportado por la 

sangre, el VHC puede ser transmitido por la sangre y los productos sanguíneos. 

Los ensayos serológicos han conseguido reducir en gran medida la transmisión, pero no 

se ha eliminado por completo 

El virus de la hepatitis B (HBV) está considerado como uno de los principales agentes 

etiológicos causantes de la hepatitis crónica, aguda, cirrosis y carcinoma hepatocelular. 

El virus HBV es un virus ADN circular parcialmente bicatenario con un genoma de 

aproximadamente 3200 bases que contiene cuatro marcos de lectura abiertos 

solapantes que codifican todas las proteínas víricas. Como virus transportado en sangre 

el HBV es transmisible, con un riesgo más alto que el HCV y el HIV, a través de la 

sangre y los productos hemoderivados. 

El virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) es el agente etiológico del síndrome de 

Inmunodeficiencia adquirida (SIDA). La infección por el HIV puede transmitirse por 

contacto sexual, exposición a sangre o productos sanguíneos infectados o por 

transmisión de la madre infectada al feto. Dentro de las tres a seis semanas a partir de la 

exposición al HIV, los individuos infectados generalmente desarrollan un síndrome 

agudo, breve, caracterizado por síntomas de tipo gripal y asociado con valores elevados 

de viremia en la sangre periférica.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


El ARN del HIV puede determinarse cuantitativamente en el plasma utilizando las 

técnicas de amplificación del ácido nucleíco, entre ellas la reacción en cadena de la 

polimerasa (PCR). 

La prueba COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR, versión 1.5, usa la técnica de la PCR 

para lograr un máximo de sensibilidad y de límites dinámicos para la detección 

cuantitativa del ARN del HIV-1 en plasma anticoagulado con EDTA o ACD. 

PRINCIPIOS DEL ENSAYO 

La prueba consta de cuatro procesos principales para HBV: preparación de la muestra; 

amplificación del DNA objetivo usando iniciadores complementarios específicos para el 

HBV; hibridación de los productos amplificados con sondas oligonucleótidos especificas 

para los objetivos; detección de los productos amplificados fijados a las sondas mediante 

determinación colorimétrica. 

Para el caso del HIV y HCV la prueba se basa en cinco procesos principales: 

preparación de la muestra; transcripción reversa del RNA objetivo para generar ADN 

complementario(ADNc),amplificación por PCR del ADNc objetivo usando iniciadores 

complementarios específicos para cada marcador; hibridación de los productos 

amplificados con sondas oligonucleótidas especificas para los objetivos y por ultimo 

detección de los productos amplificados fijados a las sondas mediante determinación 

colorimétrica.





CAL-70 

PROCESO GENERAL 

PROCEDIMIENTO 


OBTENCION DE LA MUESTRA Y CENTRIFUGACION DE LA MISMA 

Software DATA SCREEN 

FORMACION VIRTUAL DE POOLS Y EMISION DE ETIQUETAS Y LISTA 

Software AT WIN / Equipo HAMILTON 

FORMACION FISICA DE POOLS Y PLACA DE ARCHIVO 


PROCESO DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS 

Software AMPLINK / Equipo COBAS 

AMPLIFICACION Y DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS 

Software AMPLILINK 

VALIDACION DE RESULTADOS Y GENERACION DE ARCHIVO 

(RESPALDO ELECTRONICO) 


OBTENCION DE ARCHIVOS PARA INTERPRETACION DE RESULTADOS 

Y EXPORTACION AL SIBS (Sistema Informático de Banco de Sangre) 

LOS REPORTES IMPRESO GENERADOS SE GUARDAN 5 AÑOS EN ACTIVO Y 5 AÑOS 

EN ARCHIVO MUERTO





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


OBTENCION DE LA MUESTRA Y CENTRIFUGACION 

Se pueden utilizar muestras con EDTA, CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A y citrato de sodio 

al 4%. Siga siempre las instrucciones del fabricante de los tubos de muestras. 

Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-43 para 

la obtención de muestras de donadores. 

En este proceso se utilizan muestras con EDTA. 

La sangre obtenida con EDTA se puede almacenar a una temperatura de 2 a 30°c 

(máximo 72 hrs) a partir de su obtención. 

Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes 

mediante centrifugación a 1600g por 20 minutos. 

TRABAJO NO CONFORME: 

Se considera trabajo no conforme muestra con: 

1. Lipemia 

2. Hemolisis 

3. Volumen insuficiente 

4. Discrepancia en la identificación 

5. No se haya tomado la muestra 

En estos casos se tomara un piloto del producto plaquetario o se le llamara al donador 

para la toma de la muestra; se realiza la observación en la bitácora de trabajo CAL-71-b.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 



FORMACION VIRTUAL DE POOLES DE 6 DONADORES, EMISION DE ETIQUETAS 

Y LISTA DE TRABAJO 

Se ingresa a Data Screen siguiendo los pasos: 

1. Encienda la computadora que contiene el software Amplilink. 

2. Encienda el equipo Hamilton. 

3. Encienda la computadora que contiene el software Data Screen y ATwin. 

4. Etiquete los tubos de donadores de acuerdo al sistema de laboratorio. 

5. Para abrir el software de Data Screen dar doble clic sobre el icono que se encuentra 

en la computadora. 

6. Escriba su nombre de usuario (INP)y contraseña (INP) para ingresar al sistema. 

7. Dar clic sobre la opción muestras x 6





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


8. Para crear una nueva placa de archivo que contendrá nuevos pools, dar clic en la 

opción” Nuevo”. 

9. Teclear el código de la placa de archivo que se utilizara (código predeterminado). Este 

número está compuesto de los últimos cinco dígitos que conforman la etiqueta para 

placas de archivo. 

10. Elegir el número de pools que se desea realizar en la opción “No de posiciones” 

11. A continuación aparecerán en la pantalla el número de tubos correspondientes al 

número de pools que se desea realizar.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


12. Pasar por el escáner los tubos de los donadores que formaran parte de un solo pool 

y colocarlos en el primary rack en la posición que indica en la pantalla de la 

computadora. 

13. cuando todos los tubos han sido escaneados, las imágenes de los tubos de pools 

deberán aparecer con los puntos de amarillo, lo cual indica que la posición ha sido 

ocupada por un donador.





14. Dar clic en el botón de grabar. 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


15. Cuando el archivo es grabado la opción código será activada. Dar clic en códigos 

para imprimir las etiquetas que identificaran a los pools.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


16. Pegar las etiquetas de los pools sobre dos tubos Sarstedt. 

17. Llenar los datos y pegar las etiquetas en la hoja de trabajo (CAL- 71 a). 

CAL-71a 

18. Dar click en listados para imprimir el listado de todos los donadores a estudiar.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 

PRUEBA DE ACIDOS NUCLEICOS (NAT)





19. Salir de Data Screen. 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


Software AT WIN / Equipo HAMILTON 

FORMACION FISICA DE POOLS Y PLACAS DE ARCHIVO 

1. . Colocar el primary rack en el equipo Hamilton. 

2. Entrar al software dando doble clic en el icono AT Win, escribir su usuario asignado y su 

contraseña (ADMIN para ambos casos). 

3. Colocar en la placa primaria los tubos de los donadores (tubos primarios) del renglón 

A al F y del 1 al 10, los tubos Sarstedt en el región H del 1al 10 identificados con sus 

respectivas etiquetas. 

4. Colocar la placa de archivo, identificada con sus respectivas etiquetas. 

5. Asegurarse que estén colocadas las suficientes puntas para trabajar. 

6. Realizar el Boot Run que sugiere el sistema dar clic en Yes 

7. Posteriormente ir al menú de Execute y dar clic en la opción Run Next Method si 

se quiere seguir usando el mismo método en caso contrario dar Reset Method 

(esto borrará el anterior y se podrá elegir otro método deseado). 

8. Aparecerá la pantalla, en la parte inferior izquierda encontrara el icono Reduce el 

cual oprimirá encaso de no realizar los 12 pools (si trabaja solo 10 pools), de lo 

contrario oprimirá el icono START y el sistema se iniciará a trabajar. 

9. Si eligió el icono Reduce aparecerá otra ventana donde tendrá que elegir (dar 

click) los renglones que no serán procesados, estos cambiarán a color gris y 

posteriormente oprimirá el icono Reduce.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


10. Regresará a la ventana inicial, en este momento oprimirá START y el equipo 

iniciará a trabajar. 

11. Al terminar la corrida aparecerá una ventana pidiendo escanear automáticamente 

o manualmente la identificación de los donadores o pools que no leyó el escáner 

del equipo Usted eligirá la opción manual y aceptar. Usted leerá con el escáner 

estos números. 

Con esto termina el proceso de obtención de pooles. Ir a la campana de flujo laminar. 

Cualquier duda consultar el manual del equipo. 

CAMPANA DE FLUJO LAMINAR 

PROCESO DE EXTRACION DE ACIDOS NUCLEICOS 

El proceso de extracción puede ser de dos formas: 

Pre-PCR Preparación de múltiples muestras. 

Pre-PCR Preparación de muestras individuales (Proceso que usará en caso de 

que algún pools fuese positivo se haría la apertura para la identificación 

individual de la muestra positiva).





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






Diagrama del Equipo Cobas 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


Preparación de reactivos para el equipo COBAS 

Se preparan reactivos: 

Específicos 

Genéricos





Reactivos Especificos 

Reactivos Genéricos 

CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 






CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


VALIDACION DE RESULTADOS 

Revisar los resultados generados en los Cobas, por cada control y muestra el equipo 

genera dos resultados uno detecta el virus humano (H) y el otro detecta el control interno. 

NUMERO 

DEL 

ANILLO 

NUMERO DE 

POSICION EN EL 

ANILLO 

MUESTRA (S) O 

CONTROL(C) 

NC= control negativo 

PC= control positivo 

M0JXRZA= nombre del pol 

RESULTADO 


DEL RESULTADO 

CONTROL HIV HCV HBV 

HIH AII ACH ACI ABH ABI 

- CN - + - + - + 

+ CP + + + + + + CORRIDA 

VALIDADA 

- CN + + + + + + 

+ CP - + - + - + 

Cualquier otro resultado la corrida se invalida (se repite el proceso)





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


PROCEDIMIENTO DE CONTROL DE CALIDAD 

1. Por cada prueba se deben procesar al menos un control Multiprep (-) y uno (+), y para 

cada control su correspondiente control interno. 

Para que el Control Negativo sea válido, la Absorbancia a 660 nm para el MP (-) 

C debe ser < 0.1 y la obtenida para el control interno MP IC asociado ≥ 0.2. 

Para que el Control Positivo sea válido, la Absorbancia a 660 nm para el MP (+) 

C debe ser < 0.1 y la obtenida para el control interno MP IC asociado ≥ 0.2. 

Control 

Negativo 

Control 

Positivo 

Resultado para: 

HCV HIV-1,HBV 

Resultado para CI (HCV, HIV- 

1,HBV) : 

A660 A660 Comentario A660 Comentario 





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


INTERPRETACION DE RESULTADOS: 

Resultados para HCV 

A660 Comentario 

Resultados para CI 



< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ARN del HCV 

< 0.2 NEGATIVE < 0.2 INVALID 

Resultado no válido, repita el todo procedimiento 

para la muestra no válida 

≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ARN del HCV 

Resultados para HIV-1 





< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ARN del HIV-1 


Resultado no válido, repita el todo procedimiento 

para la muestra no válida 

≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ARN del HIV-1 

Resultados para HBV 





< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ADN del HBV 


Resultado no válido, repita el procedimiento para 

la muestra no válida 

≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ADN del HBV 

Nota: para información más detallada consultar los insertos correspondientes.





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


VALIDACION, INTERPRETACION Y EXPORTACION DE RESULTADOS





CAL-70 

PROCEDIMIENTO 


Terminado este proceso se procederá de forma manual o automática (interfaz) el ingreso de los 

resultados al SIBS. 

Documento asociado CAL-43 

CAL-71-c



Fecha:01 Noviembre 2011 


Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-70 



CUANTIFICACION DE SUBPOBLACIONES 

LINFOCITOS 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:





CAL-70 



LINFOCITOS 

CAMBIO 

Diagramas de flujo 

REVISIÓN 

1 

FECHA 

01/11/11





Introducción 

CAL-70 



LINFOCITOS 

El monitoreo de pacientes de diagnóstico conocido es llevado a cabo por la 

conjugación de la determinación de subpoblaciones de linfocitos CD4+; CD8+; 

CD3+ & CD 45+ y determinando el porcentaje de ellos, así mismo, establecer el 

radio CD8+/CD4+. 

Principio de estudio 

Anticuerpos monoclonales conjugados con diferentes cromógenos con 

especificidad conocida se desafían con células de fenotipo desconocido a fin de 

establecer la presencia o ausencia con el empleo de citometría de flujo de los 

marcadores CD 4+, CD8+, CD45+ y CD3+ 

Responsabilidades 

Jefe del Dpto 

Jefe del Lab. 

Medico de 

B.S. 

Químico 

Laboratorista 

Auxiliar 

Material…….. 

a) Tubos trucount 

b) Pipeta semiautomática (25 µl, 50 µl, 1000 µl) 

c) Puntas para pipeta semiautomática





Tipo de muestra: 

CAL-70 

a) Biometría hemática 

PROCESO: 



LINFOCITOS 

6. Recepción de muestra: 

a. Biometría Hemática 

7. Cuantificación de cantidad de leucocitos empleando citometría con equipo 

para Biometría Hemática 

8. Preparación de muestra acorde a inserto 

9. Antes de usar el citómetro de Flujo, se recomienda: 

a. Proceso de lavado largo 

b. Calibración 

c. Usar en cada corrida un control





CAL-70 



LINFOCITOS 

A.- Lavado previo al uso del equipo 

CVE: BDIS 

REVISAR 

PRESION 

Cambiar de 


A 

VENT-RUN 


MAX ¾ 


ENCENDER 



BURBUJAS) 

CPU 

MONITOR 

IMPRESORA 

EQUIPO 

RUN HI 

MONITOR 

RUN 

RUN 

ESPERAR A QUE 

TERMINE EL 

LAVADO DONE 

LAVADO 

LOADER 

MANAGER 


EN EL RACK COMO SE 

INDICA 

EN LAS POSICIONES: 




EN EL EQUIPO 

FILE 

MAINTENANCE 

TEST OPTION 

ESCOGER 

LONG 

O 

SHORT 

CLEAN 

QUIT





B.- Realizar Calibración 

CAL-70 



LINFOCITOS 

CALIBRACION (DIARIO O EN CADA USO DEL 

INSTRUMENTO) 

3) Ir A: 

1) PREPARAR DOS TUBOS CON: 

A) 1 mL de Fac´s Flow 

B) 3 mL de Fac´s Flow 

Mezclar suavemente las microesferas 

CALIBRITE y añadir una gota (invertir 

completamente el vial) como se 

indica en la siguiente tabla 

2) Mezclar por inversión . 

NOTA: Es necesario revisar el 

inserto para mayor detalle y en 

caso de alguna modificación. 

ICONO DE FAC´COMP 

INGRESAR NOMBRE DEL USUARIO 

FAC´S FROM 

INGRESAR Y/O VERIFICAR CADA UNO 

DE LOS # DE LOTE 

DE LA SEGUNDA COLUMNA DE LA 

CAJA DEL CALIBRADOR (ETIQ. 

NARANJA) Y DEL APC ( ETIQ. VERDE) 

EN EL CARRUSEL PONER LOS TUBOS 

sin tapón EN LAS SIGUIENTES 

POSICIONES: 

1. TUBO A 

2. TUBO B 

39. FAC´S CLEAN 

40. FAC´S RINSE 

EN SOFTWARE : 

RUN 

CLEAN 

QUIT





CAL-70 



LINFOCITOS 

C.- Preparación de muestras para conteo de células CD4+ 

PANTALLA 

PRINCIPAL 

ID Rack 

Ingresar # 

del Rack 

COLOCAR LOS 

TUBOS EN EL 

ORDEN QUE 

SE INDICA. Y 

EN LAS 

POSICIONES 

39.. FAC’S 

CLEANE 


COLOCAR EL 

RACK EN EL 

EQUIPO 

Assign 

Rack 

BARRA 

IZQUIERDA 

CD4/CD8 (AUTOMATICO) 

CD 4 (Un solo 

tubo) 

LINFOS T / B 

(cuando son 

tres tubos) 

ICONO 

WORLIST 

MANAGER 

ACEPTAR RUN 

MULTISET 

OPERADOR 

INGRESAR 

LOS 

DATOS DE 

LAS 

MUESTRAS 

EQUIPO 

RUN HI 

ACEPTAR 

SKIP FAC’S 

COMP (Si ya se 

realizó la 

calibración 

previamente) 

EQUIPO 

Checar que en 

el recuadro 

derecho este 

Multiset 

ACEPTAR 

AL FINALIZAR LA CORRIDA DEL 

PROGRAMA SE REALIZA EN 

AUTOMATICO UN LAVADO DEL 

EQUIPO.





PANTALLA 

PRINCIPAL 

CAL-70 

FAC’S COMP 

LAUNCH SKIP 

FAC’S COMP 

QUIT 

Continue 

Lot IDs 

SUBIR EL 

SEGUNDO TUBO 

P/CD8 

ACQUIRE 

SUBIR EL 

SEGUNDO TUBO 

P/CD19 

Absolute Counts 

Bead 

ACQUIRE 

BARRA 

IZQUIERDA 

# lote 

# De Perlas 

ACQUIRE 



LINFOCITOS 

ACEPTAR 

SAVE 

SUBIR EL 

PRIMER TUBO 

P/CD4 

COPIAR 

RESULTADOS 

Data Source 

ICONO 

MULTISET 

CD4/CD8 (MANUAL) 

From Cytometer:Aquisition with Analysis 

Entry Level NamePrefix 

Sample name viewReports 

Until “Next” Button Pressed 

ACCEPT 

MOVER LOS 

TUBOS CON EL 

CONTROLADOR 

MANUAL 

AGITAR 

PRIMERO 

QUIT 

Don´t Save 

OPERADOR 

PANTALLA SET UP 

INTRODUCIR 

NOMBRE.FECHA 

Ejemp.: 

SOLIS.020508 

EQUIPO 

RUN HI 

Automatics Saving Option 

Data Files 

Fac´station: USUARIOS. banco sangre 2 

Laboratorio 

Physician Report 

ACEPTAR 

Summary Report 

Use Date Generated File Name 

Export Document 

Use Date Generated File Name 

Sample ID 

# registro 

COLOCAR LOS TUBOS EN 

EL ORDEN COMO SE 

INGRESARON 

(CD4-CD8-CD19). Y EN LAS 

POSICIONES 



COLOCAR EL RACK EN 

EL EQUIPO 

Location 

Location 

Location 

Location 

Location 

# Muestra 

AL FINALIZAR LA CORRIDA DEL PROGRAMA SE 

REALIZAR UN LAVADO LARGO DE FORMA 

MANUAL. 

EQUIPO 

Abri---USUARIOS--banco 

sangre2--- 

MAYO 2008 

SELECCIONAR 

MAYO 2008 

SELECCIONAR 

MAYO 2008 

CAMBIAR LA FECHA SI PERDER 

LA TERMINACION 

020508.sum 

CAMBIAR LA FECHA SI PERDER 

LA TERMINACION 

020508.exp 

Panel 

Linfos T CD4,CD8 y 

Linfos B 

RUN TEST





Resultados 

CAL-70 



LINFOCITOS 

Obtención de resultados impresos en automático ó vaciar en el formato





CAL-70 

REVISAR 

PRESION 



MAX ¾ DE SOL FAC´S 

RINSE 


ENCENDER 

EL EQUIPO 

RUN HI 

ESPERAR POR 

20 MIN. 

APAGAR EL EQUIPO 

REGISTROS 

Ningún registro asociado 



LINFOCITOS 

DESCONECTAR LA 

TUBERIA QUE VA AL 

FILTRO Y CONECTAR 

LA TUBERIA 

BLANCA(DEL FAC´S 

FLOW) 

EL EL TUBO DE LA 

CANULA 3 ML DE AGUA 

DESIONIZADA 

REVISAR 

PRESION 



MAX ¾ DE SOL FAC´S 

FLOW 


LAVADO EXHAUSTIVO 

EL EL TUBO DE LA 

CANULA 3 ML DE FAC´S 

RINSE 

DESPRESURIZAR 



MAX ¾ DE AGUA 

DESIONIZADA 


ENCENDER 



BURBUJAS) 

CPU 

MONITOR 

IMPRESORA 

ENCENDER 

EL EQUIPO 

RUN HI 

ESPERAR POR 

15 MIN. 

APAGAR EL EQUIPO 

PANTALLA 

PRINCIPAL





Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

CAL-02-B 



Procedimiento de recolección y toma de 

muestras de pacientes 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Revisado por: 

Nombre: 

Firma: 

Fecha: 

Aprobado por:

Banco de Sangre Código: CAL 76 




CAL-02-B 

CAMBIO 




REVISIÓN 

FECHA






CAL-02-B 




Para el Banco del Instituto Nacional de Pediatría, una muestra primaria es una muestra de 

sangre tomada a un paciente o a un candidato a donar para ser enviada o tomada en el 

Banco de Sangre y la cual está destinada para practicarle un examen en el laboratorio del 

mismo. 

Se le conoce como muestra primaria debido a que es la muestra de la cual se parte para 

generar alícuotas para practicar los exámenes 

La toma de muestra primaria se efectúa por personal del Banco de Sangre especialista en 

toma de muestra en base a lo especificado en la solicitud de trabajo. 

Para la toma de muestra primaria se toman en cuenta las siguientes consideraciones: 

Nombre de la prueba para la que se toma la muestra primaria 

Condiciones en las que se debe presentar el paciente previas a la toma de muestra 

Tipo y cantidad a tomar de la muestra primaria, con descripciones de los contenedores 

de la misma y cualquier aditivo necesario. 

El horario más adecuado para la toma de muestra, si se requiere 

La información clínica, autorización y/o consentimientos cuando se requiera 

Las condiciones de preservación de la muestra primaria 

Los requisitos de acondicionamiento de la muestra 

Los detalles de transportación desde los sitios de toma de muestra hasta las áreas 

analíticas 

Los criterios de aceptación para las muestras primarias. 

MATERIAL 

- Tubos tipo vacutainer con anticoagulante (EDTA y citrato) y sin anticoagulante. 

- Guantes 

- Torundas con alcohol 

- Agujas estériles de calibre 20 y 21 

- Jeringas de 5 y 10 ml 

- Agujas tipo vacutainer





CAL-02-B 




- Camisas para tubo vacutainer 

- Ligaduras 

- Gradillas 

- Contenedor para desechos punzo-cortantes 

- Mezclador para biometría. 

PROCEDIMIENTO 

1. Solicitar al paciente o donador una identificación con fotografía y corroborar los 

datos con los de la solicitud y etiqueta y colocarla en el tubo. 

2. El personal de laboratorio solicita al paciente y/o donador que tome asiento en la 

silla de toma de muestra, y selecciona la vena asignada para puncionar. 

NOTA 

En caso de observar alguna lesión dérmica como datos de múltiples venopunciones (que 

podría ser sospechoso de antecedente de administración de drogas intravenosas, 

donación reciente), huellas de rascado (que podría ser sospechoso de reacción alérgica 

activa o proceso infeccioso local), o dermatitis local (condicionada por infecciones virales 

como herpes, verrugas), lo informará al médico que valorará al candidato a donador para 

aceptación o rechazo de acuerdo a su criterio. 

3. El personal encargado de tomar la muestra se coloca guantes para la toma de 

muestra, realiza la asepsia, en un área de 5 cm. aproximadamente en zona de 

punción, realizando una limpieza vigorosa de arriba hacia abajo sin invertir el 

orden, utilizando jabón/ alcohol/isodine dejando secar, se liga inmediatamente y no 

se vuelve a tocar el área ya preparada para la punción, inmediatamente después 

se realiza la punción de la vena. 

MÉTODO 1 CON JERINGA: 

1. Ligar el brazo e introducir la aguja en la vena, para que el sangrado sea más rápido, 

se le pide al paciente o donador que apriete el puño y que no mueva ni doble el brazo. 

2. Quitar la ligadura antes de retirar la jeringa, pidiendo al paciente o donador que abra 

su puño.





CAL-02-B 




3. Al retirar la aguja, colocar una torunda con alcohol en el sitio de punción presionando 

gentilmente, pidiendo al paciente o donador que mantenga su brazo doblado de 3 a 5 

minutos. 

4. Trasvasar puncionando la parte central del tapón, vaciar primero las muestras en los 

tubos que contienen anticoagulante y después las muestras en los tubos sin 

anticoagulante. 

5. Desechar la aguja o jeringa directamente en el contenedor sin taparla. 

NOTA: Por ningún motivo se deben tomar muestras solo con aguja, en caso de pacientes 

pediátricos se debe solicitar apoyo al servicio de pediatría. 

MÉTODO II VACUTAINER: 

1. La aguja para el vacutainer es especial ya que se fija a la camisa en forma de tornillo. 

2. Al pinchar la vena lo único que se sujeta es la camisa, para así tener un apoyo al 

introducir los tubos en la camisa. se toman primero las muestras que no requieran 

anticoagulante y después las que requieren de éste, sacar el tubo sin retirar la aguja 

de la vena, en caso de muestras con anticoagulante, colocarla en el mezclador de 

biometrías. Procurar no hacer movimientos bruscos para evitar lastimar al paciente o 

donador. así mismo nunca se saca la aguja sin haber retirado el tubo totalmente. 

3. Al terminar de tomar la última muestra se retira la ligadura y pedir al donador o 

paciente que abra el puño, retirar la aguja y presionar la vena gentilmente con una 

torunda de algodón con alcohol indicándole que mantenga el brazo doblado de tres a 

cinco minutos aproximadamente. 

4. La aguja se desecha en un envase rígido de plástico (contenedor) que no ofrezca 

ningún peligro.





CAL-02-B 




TIPOS DE PRUEBAS, TUBOS EN LOS QUE SE RECOLECTA LA SANGRE Y 

VOLUMEN REQUERIDO 

TUBOS PARA 

RECOLECTAR LA 

MUESTRA 

Tubo morado 

(anticoagulante EDTA) 

Tubo rojo (sin 

anticoagulante) o Tubo 

dorado 

TIPO DE PRUEBA 

Biometría Hemática 

Grupo sanguíneo 

NAT 

CD4/CD8 

CARGA VIRAL 

SEROLOGIA 

VOLUMEN 

REQUERIDO 

(ml) 

6 

4-6 

4-6 

4-6 

4-6 

4-6 

TEMPERATURA 

Las muestras se conservan a temperatura ambientes mientras 

se pasan al laboratorio para su análisis 

Una vez que el especialista en toma de muestras obtiene la muestra primaria, la identifica 

de manera única (ID para donadores o nombre del paciente) incluyendo la identificación 

de quién tomó la muestra, la fecha y hora de la toma.





CAL-02-B 




Nota: Cualquier desviación a las condiciones pre analíticas para la obtención de una 

muestra adecuada para análisis, se debe informar al donador y/o paciente y en su 

caso repetir la toma, o anotarse en la solicitud. 

Los materiales empleados par la toma, son desechados en los contenedores que les 

corresponda según lo marca la norma NOM-087 aplicable a los residuos peligrosos 

biológico – infecciosos. 

Las muestras son inspeccionadas por el personal que las recibe y en caso de ser 

aceptadas para su procesamiento se ingresan en la bitácora y en el sistema de 

informático del laboratorio. Las que no cumplen los criterios de inspección se tratan como 

PRODUCTO NO CONFORME. 

La temperatura de almacenamiento dependerá del tipo de estudio a realizar: 

Área de red fría de 1 a 6 ºC, -18°C o menor en refrigeradores, congeladores o 

ultra congeladores. 

Área de temperatura ambiente 

TRASNPORTE DE MUESTRAS 

Es responsabilidad del personal del Banco de Sangre el transporte hasta el área de 

laboratorio del Banco de Sangre de las muestras tomadas en las secciones de: 

a) Toma de Muestras perteneciente al Laboratorio Central 

b) Toma de Muestras del Banco de Sangre 

c) Sección de flebotomía del Banco de Sangre 

procederán de la siguiente forma: 

Usando hieleras de plástico o unisel, el personal coloca las muestras previamente 

tapadas e identificadas, en la gradilla que se encuentra dentro de la hielera. 

La hielera es propiedad del Banco de Sangre, por lo que está identificada como:





CAL-02-B 




Los recipientes secundarios deben llevar las etiquetas de: 

Riesgo biológico 

Riesgo secundario (según caso) 

Datos del laboratorio al que van referidos 

Datos de orientación 

Señal de orientación





CAL-02-B 




NOTA: Para la recepción de muestras es necesario el uso de guantes. 

Quien recibe los contenedores de las muestras verifica que estén bien cerrados. 

1. Revisa que se encuentren a la temperatura correspondiente. 

2. Revisa que las muestras estén correctamente identificadas. 

3. Revisa el correcto llenado de la solicitud de cada muestra. 

De detectar anomalías en esta inspección no se recibirán las muestras afectadas. 

INSPECCION DE LA MUESTRA 

El personal Químico/Técnico que recibe de muestras primarias, lleva a cabo la inspección 

de las mismas según el estudio solicitado tomando como base los siguientes criterios de 

aceptación: 

a) Tipo de muestra: 

El tipo de muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a realizar.





b) Volumen: 

CAL-02-B 




El volumen de muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a 

realizar. Una cantidad excedente o deficiente puede provocar problemas para la 

realización del (los) examen(es) por lo que en este caso se procede a consultar con el 

encargado de realizar al(s) prueba(s). 

c) Contenedor 

El contenedor en el que se recibe la muestra debe cumplir con lo indicado en la 

especificación del estudio a realizar . 

d) Aditivo 

El aditivo de la muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a 

realizar. 

e) Temperatura de transportación y preservación de la muestra 

La temperatura a la que se recibe la muestra debe cumplir con lo indicado en la 

especificación del estudio a realizar. 

f) Identificación de la muestra 

Las muestras deben estar identificadas por lo menos con el nombre del paciente, el cual 

debe coincidir con el nombre que aparece en la solicitud de estudios. 

Si alguna muestra no cumple con los criterios definidos en la especificación del estudio a 

realizar y/o no está identificada, no se recibe en el laboratorio y se le informa al cliente la 

razón de ello. 

Si la muestra cumple con los criterios, se recibe en el laboratorio, con la solicitud 

correspondiente y se registra su entrada en la bitácora y en el sistema de informática del 

laboratorio (SIL)-. 

REGISTROS 

F-A-14-26



Fecha: 02- enero-2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Nombre: 

EBC Ma. Teresa de Lourdes 

Flores Camacho 

Firma: 


PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN 

Revisado por: 

Nombre: 

M. en C. Guillermo Escamilla 

Guerrero 

Firma: 


Aprobado por: 

Nombre: 


Escobar 

Firma: 

Fecha: 2 Enero 2012



Fecha: 02-enero- 2012 

ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 

CAMBIO 


1. Modificación de crioprotectores 

2. Requisitos de recepción de 

Células Tallo 

3. Se incluye flujograma de 

preparación de equipo para el 

proceso. 

4. Se incluye flujograma de 

RECEPCIÓN Y PROCESO 

5. Se incluye manejo de PNC 

REVISIÓN 

FECHA 

01 2 de enero 2012




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


ABREVIATURAS 

CPH Células Progenitoras Hematopoyéticas 

CPHSP Células Progenitoras Hematopoyéticas de Sangre Periférica 

SP Sangre periférica 

MO Médula Ósea 

CMN Células Mononucleares 

ºC Grados Centígrados Celsius 

DMSO Dimetilsulfoxido 

NaCl Cloruro de Sodio 

N2L Nitrógeno Líquido 

U. V. Ultra violeta 

BH Biometría Hemática 

Hb Hemoglobina 

Hto Hematocrito 

EDTA Anticoagulante, Etilendiaminotetraacético disódico 

Kg Kilogramo 

μl Microlitro 

SSF Solución Salina Fisiológica al 0.9% 

Dx Diagnostico clínico 

Tx Tratamiento




ISBN: 978-968-9170-17-4 


Propósito y Alcance 

CAL-02-B 

1.1 Propósito 


Criopreservar las Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH) obtenidas mediante 

procedimientos de Aféresis y en el quirófano; conservando su viabilidad, esterilidad y 

funcionalidad. 

1.2 Alcance 

Todos los usuarios podrán seguir este procedimiento para la criopreservación y el 

trasplante de CPH. 

2. Responsables 

Personal Responsable del Cumplimiento de este Documento 

Puesto Departamento 

Jefe del Laboratorio 


Personal adscrito al Laboratorio 

Banco de Sangre




ISBN: 978-968-9170-17-4 


3. Introducción 

3.1 Antecedentes 

CAL-02-B 


La logística de trasplantes de Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH) 

incluye en la mayoría de casos, una etapa de criopreservación a temperaturas de — 

196°C y en condiciones óptimas garantizan su almacenamiento durante el tiempo que 

sea necesario, con la mínima pérdida de sus capacidades de autorregulación y 

diferenciación. Las técnicas de congelación más extendidas utilizan DMSO como 

crioprotector para optimizar la viabilidad y funcionalidad de las células reduciendo la 

proporción de agua congelada y la deshidratación intracelular durante el proceso de 

congelación. 

La presencia del crioprotector hace que las suspensiones celulares 

descongeladas sean hipertónicas y como las células responden importando y 

exportando agua frente a un cambio de osmolaridad, el retorno a condiciones 

isotónicas puede resultar en la superación de los límites mecánicos de las membranas 

plasmáticas por una entrada masiva de agua al citoplasma (choque osmótico). Este 

fenómeno es de especial importancia durante la reconstitución y manipulación de 

células descongeladas debido a que la membrana celular es un conjunto de lípidos y 

proteínas organizados que por debajo de los 20°C pierde fluidez, limitando su 

resistencia y por tanto su capacidad de respuesta osmótica. 

3.2. Condiciones generales para la preservación de la ultra estructura y función 

celular 

La resistencia al frío –y al congelamiento – depende de un gran número de diferentes 

factores. En primer lugar el descenso repentino de la temperatura puede tener un 

efecto adverso en ciertas células: una forma de CHOQUE TÉRMICO, que puede ocurrir 

tanto por arriba y por debajo del punto de congelamiento. También, la FORMACIÓN DE 

CRISTALES DE HIELO, dentro y fuera de las células pueden acarrear un gran DAÑO 

FÍSICO.




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Otra consecuencia de la formación del hielo es un cambio del medio ambiente 

extracelular, en donde el congelamiento del agua tiene como resultado un 

INCREMENTO EN LA CONCENTRACIÓN DE SALES de la solución, elevándose a un 

nivel específico que corresponde al punto. 

Un incremento tal en la concentración de los electrolitos permite la DESHIDRATACIÓN 

CELULAR. Es de notar que las células que son más resistentes, son las mismas que 

son más resistentes en bajar su temperatura. 

3.3 Choque térmico 

El choque térmico puede ocurrir cuando ciertas células son enfriadas demasiado 

repentinamente, incluso en la ausencia de cristalización. El rango crítico oscila entre + 

15 ºC y 0 ºC, aunque también puede ocurrir entre 0 ºC y - 80 ºC. El choque térmico 

comienza en la membrana como un resultado de: 

● Contracción diferencial de varios componentes de la membrana 

● Rompimiento mecánico 

● Cambios conformacionales en la topografía de la membrana 

El daño infligido no es dependiente significativamente del perfil CATIONICO en el fluido 

extracelular, sin embargo, el perfil ANIÓNICO es mucho más importante. Los aniones 

más importantes, desde el menos dañino al más dañino, son el acetato, cloruro, nitrato, 

yoduro y sulfato. 

El choque térmico pude ser minimizado por: 

● Agentes crioprotectores 

● La presencia de ciertos fosfolípidos (fosfatidil serina) 

● Enfriamiento lento 

● Acondicionamiento previo en medios de alta concentración de sales 

3.4 Umbral de deshidratación 

La mayoría de las células de los vertebrados son susceptibles incluso a una 

deshidratación parcial (tanto a una temperatura normal o baja). Dependiendo del tipo 

celular específico y de la especie, las células no pueden tolerar la pérdida de más del 

20 al 80% de su línea basal de contenido de agua, estableciéndose así un límite del 

umbral de deshidratación, en el cual las estructuras celulares sufren un daño 

irreversible. La correlación entre la resistencia de las células a la deshidratación y su




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


resistencia a las bajas temperaturas es un reflejo de los efectos en el balance iónico. 

Esto es, el incremento en la concentración de sales que acompaña a la cristalización es 

el responsable de los efectos más dañinos. 

El incremento en la concentración de sales induce la precipitación de proteínas 

dañando la estructura lipoproteína de la membrana. Al mismo tiempo, la cristalización 

de los amortiguadores electrolíticos puede inducir grandes cambios del pH. El 

incremento en la concentración de ciertos iones y compuestos tiene efectos tóxicos en 

el interior celular. 

El congelamiento también puede afectar la naturaleza coloidal del medio intracelular, 

un efecto que puede ser reversible o irreversible. El sistema coloidal puede separase 

en dos fases distintas con moléculas de agua asociadas, siendo eliminadas de las 

macromoléculas orgánicas de tal manera que posteriormente se agregan y se vuelven 

vitrificadas. 

3.5 Velocidad de congelamiento y calentamiento 

El método ideal del congelamiento y la velocidad óptima de enfriamiento dependen de 

varios factores conflictivos, muchos de los cuales son pobremente entendidos. Las 

condiciones ideales son a menudo determinadas por pruebas de ensayo y error, dando 

como resultado protocolos, en donde se establece la velocidad del enfriamiento; sí la 

temperatura debería de ser disminuida en intervalos de tiempo; qué agente 

crioprotector es empleado; etc. El objetivo es prevenir el choque térmico, los efectos 

adversos de la excesiva concentración de sales, y el daño al medio coloidal de la 

célula. En las velocidades de enfriamiento para uso rutinario, la CRISTALIZACIÓN y el 

INCIO (SEEDING) siempre comienzan en el compartimiento extracelular. Esto significa 

que el balance osmótico de la célula es perturbado, provocando una deshidratación 

inicial. Una vez que el hielo ha empezado a formarse, un factor importante, con 

respecto en mantener la viabilidad durante la subsecuente congelación, es el 

VELOCIDAD DEL CAMBIO DE TEMPERATURA. Esto determina: 

● La extensión del tiempo de las células durante el punto eutéctico, por ejemplo, el 

tiempo transcurrido en que son expuestas a una alta concentración de sales 

● La velocidad de congelamiento intracelular 

● El tamaño y la forma de cualquier cristal de hielo formado. 

Si el enfriamiento es lento, el crecimiento de los cristales de hielo en el compartimiento 

extracelular es de tal manera que las células se contraen y son expuestas a altas 

concentraciones de sales. Subsecuentemente, la fase líquida se congela a la




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temperatura eutéctica. Si el enfriamiento es muy rápido, el agua en el interior de las 

células forma pequeños cristales de forma irregular que son relativamente inestables. 

Si las células son descongeladas subsecuentemente muy lentamente, estos cristales 

se agregarán a una forma más grande, formando cristales más estables, los cuales 

pueden causar daño. El incremento en la concentración de sales que acompaña al 

proceso de congelamiento causa contracción celular, y si continúa por encima de cierto 

umbral, permite la permeabilización de iones en la membrana. Por ello, la VIABILIDAD 

CELULAR depende de la velocidad de enfriamiento. La MAYOR SOBREVIDA a una 

cierta velocidad disminuirá conforme esta velocidad se incrementa. La VELOCIDAD 

IDEAL es disminuyendo lentamente la temperatura, que permita a las células perder 

suficiente agua para prevenir el congelamiento intracelular prematuro. Sin embargo, si 

la velocidad es demasiadamente lenta, las células serán expuestas a altas 

concentraciones de sales por un largo periodo de tiempo. Además, el rango ideal de 

enfriamiento depende del VOLUMEN CRÍTICO de las células que es definido por: 

● La permeabilidad de la membrana celular al agua 

● El área de la superficie de la membrana 

● La superficie de la célula a su radio de volumen. 

En resumen, podría decirse que la más simple explicación por el cual una velocidad 

ideal de enfriamiento existe para ello, es porque la viabilidad celular depende de dos 

factores conflictivos, los cuales dependen de la velocidad del reenfriamiento. 

El factor principal que causa la perdida de la viabilidad es la formación de cristales de 

hielo intracelularmente, y especialmente la agregación de estos cristales durante el 

descongelamiento. A una velocidad lenta de enfriamiento la alta concentración de sales 

resultante ejerce efectos adversos cuando el agua intracelular –que tiene un alto 

potencial químico- difunde hacia el exterior celular y se congela en el compartimiento 

extracelular. 

Los PORCENTAJES MÁS ALTOS DE SOBREVIDA son obtenidos en una variedad de 

velocidades de enfriamiento referida como la ZONA DE TRANSICIÓN, en el cual el 

efecto de ambos mecanismos es mínimo. 

3.6 Fenómeno a temperaturas bajas 

Hay un gran consenso de información acerca de los cambios biofísicos y bioquímicos 

que ocurren en las células vivientes en temperaturas inferiores a los 0 ºC. Se puede 

concluir que, a no ser que la temperatura de almacenamiento sea demasiada baja, 

algunas células continuarán viviendo y su tiempo de sobrevida dependerá de su radio 

metabólico residual que será lentamente desacelerado a una mayor o menor extensión.




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A temperaturas entre 0 ºC y - 40 ºC, que no es lo suficientemente baja para la 

preservación eficientemente de ciertos tipos celulares, la difusión procede y esto puede 

modificar el balance iónico en el medio. A temperaturas más bajas, estas soluciones de 

electrolitos son solidificados en eutéticos. 

La estructura cristalina del hielo puede cambiar también (con el crecimiento de cristales 

o recristalización) resultando en un serio daño físico a estructuras biológicas 

importantes. 

3.7 Preservación a temperaturas bajas 

En el mundo de los seres vivos, la temperatura de -70 ºC es considerada el umbral de 

temperatura más bajo en el cuál ningún proceso vital esta permitido. Cuando se 

contempla el almacenamiento a largo o muy largo plazo, temperaturas por debajo de 

este umbral deben de ser empleadas. 

Muchos investigadores, conservan células almacenadas en la presencia de algún 

agente crioprotector (por ejemplo, Dimetilsulfoxico [DMSO] o glicero, HES, Albúmina), 

para prevenir cualquier daño, al momento en que son almacenadas a temperaturas 

inferiores de -130 ºC. En al práctica, es difícil creer que cualquier proceso dañino puede 

ocurrir todavía a esta temperatura que corresponde en la cual el agua se vuelve 

vitrificada. Algunas células particularmente lábiles, pueden necesariamente 

almacenarse a temperaturas extremadamente bajas de -196 ºC, como es el caso del 

NITROGENO LIQUIDO (N2L). 

3.8 Medición de la Temperatura 

Debido a que la velocidad de congelamiento y descongelamiento pueden tener un 

mayor impacto en la viabilidad de las células y tejidos, deben de ser medidas en una 

forma cuantitativa. La mejor manera de realizarlo es generar una curva completa que 

describa el proceso de congelamiento y descongelamiento. Para esto, lo siguiente 

puede ser determinado: 

● El enfriamiento antes de que el congelamiento inicie (1) 

● El tiempo de super-enfriamiento (*) y sus parámetros (2) 

● El inicio de la cristalización y la duración de la meseta de la fase de transición (3) 

● El rango en el cual la temperatura desciende después de la fase de transición (4)




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Esta curva es referida como el PERFIL DE LA TEMPERATURA del sistema en 

consideración y puede ser normalizada a una referencia medible para su fácil 

manipulación. El parámetro más posible de estimar el rango de enfriamiento, es el 

tiempo en que la temperatura cae desde 5 ºC, (al punto en el cual la mayor parte del 

cambio de fase o eutéctico procede, con su correspondiente liberación del calor latente 

de fusión) hasta -50ºC. Sobre este rango, la temperatura tiende a volverse lineal en 

función del tiempo. Ver figura 1. 

(*) SUPER-ENFRIAMIENTO: Durante el proceso de congelamiento, el superenfriamiento 

constituye una fase importante y crítica del perfil de temperatura. En 

términos prácticos, la manera en que una solución es enfriada por debajo de su punto 

de congelación puede determinar cómo ocurrirá el inicio de la formación de cristales de 

hielo y por ende la forma de cristalización. 

Figura 1. Perfil de la temperatura durante el proceso de congelamiento controlado. 

3.9 Agentes crioprotectores 

Congelamiento 

ideal 

Incremento en la 

velocidad de enfriamiento 

Las causas principales de la destrucción celular son la formación de hielo intracelular, y 

la exposición a altas concentraciones de sales. El éxito durante el congelamiento 

depende en mantener un volumen de agua suficiente en la fase líquida, tanto en los 

compartimientos intracelular y extracelular, para mantener los electrolitos en solución. 

El INICIO y la subsecuente CRISTALIZACIÓN pueden ser inhibidas por la inactivación




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del punto del potencial de condensación por medio de un ENVENENAMIENTO 

QUÍMICO. Los agentes usados para este fin son capaces de unirse a las moléculas del 

agua a través de puentes de hidrógeno y son referidos como CRIOPROTECTORES, 

son muy diversos en estructura química pero todos actúan de la misma manera. 

Cualquiera que sea su estructura, todos son muy solubles en agua y por su capacidad 

de formar puentes de hidrógeno con las moléculas de agua, disminuyen el punto de 

congelamiento de cualquier solución en la cual son incluidos. 

La segunda propiedad importante de estos agentes es de que no son tóxicos a las 

células. La toxicidad en este caso es más difícil redefinir a consecuencia de 

condiciones externas, tan opuestas a la naturaleza de producto en sí mismo. En la 

práctica, la toxicidad depende de la concentración del agente crioprotector, la tonicidad 

del medio, y de cómo las células están en contacto con el agente. Las otras variables 

que determinan la extensión a la cual un aditivo en particular será capaz de proteger 

las células de un sistema biológico dado dependen de factores tales como el peso 

molecular del compuesto y su habilidad de atravesar la membrana celular. 

En términos generales los agentes crioprotectores modulan las propiedades 

eutécticas de una solución de tal manera que la cantidad de hielo formado y en 

consecuencia, la concentración de sales es reducida. Por disminuir el punto de 

congelamiento del fluido extracelular, ellos inhiben el flujo de agua intracelular, 

previniendo así la disminución del volumen celular a su mínimo volumen crítico. Por 

reducir la retracción celular, estos agentes atenúan la hiperconcentración del fluido 

intracelular y por ello inhiben la precipitación de las proteínas. 

En la práctica, una solución salina isotónica (9 gramos de NaCl por litro) en la 

presencia de 1% de DMSO alcanzará una concentración de 50 g/L a una temperatura 

de -5 ºC. En la presencia de 5% de DMSO, esta concentración no será alcanzada 

hasta que la temperatura haya descendido a -20 ºC y a una concentración de 10% de 

DMSO no se alcanzará hasta los -50 ºC. 

La cantidad del daño inducido en las células durante el congelamiento depende de dos 

factores conflictivos, y ambos dependen de la velocidad de enfriamiento: a velocidades 

que son demasiado lentas, altas concentraciones de sales serán generadas, ya 

velocidades que son demasiado rápidas, el hielo se formará en el interior de las 

células. La máxima viabilidad es obtenida por el enfriamiento a una velocidad en la 

zona de transición en el cual el efecto combinado de ambos mecanismos es 

minimizado.




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Como regla general, el agente crioprotector parece proteger a las células a velocidades 

de enfriamiento lento en el cual el daño asociado con los EFECTOS DE SOLUCIÓN 

predominan. Basadas en observaciones empíricas, se ha demostrado que el resultado 

de incrementar la concentración de un agente crioprotector (por ejemplo, glicerol o 

DMSO) en la suspensión celular siendo enfriada a diferentes velocidades, es trasladar 

el radio óptimo más inferior acoplado con un incremento del rango general de 

sobrevida, y se ha documentado que los problemas asociados con el congelamiento 

intracelular no son afectados por la presencia del agente crioprotector. 

Con referencia a la idea de la zona de transición descrita anteriormente, se pude decir 

que el agente crioprotector presente durante el congelamiento, traslada la zona entera 

en la dirección de rangos más bajos por disminuir el umbral asociado con el daño 

causado por la combinación de las altas concentraciones de sales y del hielo 

intracelular. 

4. Instrucciones y procedimiento 

Los factores críticos en este procedimiento son: 

La suspensión celular: 

o La suspensión inicial de una muestra de CPH obtenida de sangre 

periférica movilizada no debe de exceder de 2-3 x 10 7 células/ ml. 

El medio crioprotector: 

o El medio crioprotector puede variar, se recomienda que contenga una 

fuente nutritiva (albúmina humana, suero o plasma), en una concentración 

final del 10%. 

o El agente crioprotector de elección es el DMSO a una concentración final 

del 10%. 

o Se parte de una solución crioprotectora con DMSO al 20%. Se mezclan 

un volumen de cosecha de CPH con uno de solución crioprotectora. La 

concentración final del DMSO será 10%. 

NOTA: La adición del DMSO debe de realizarse lentamente y a 

una temperatura de 4 ºC. 

o Una vez terminada la mezcla, se transfiere a una bolsa de congelamiento 

de material plástico no lipofílico (poliolefina/ o teflón-kapton) para evitar el 

daño a las membranas celulares, y además debe de ser lo 

suficientemente resistente a bajas temperaturas (-196 ºC).




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o La bolsa se introduce en un soporte de aluminio que mantenga 

comprimidas ambas superficies, proporcionando así un espesor y forma 

homogénea de la muestra que facilite un correcto intercambio de calor. 

El programa de congelamiento: 

o El programa de congelación puede variar, pero en términos generales 

debe incluir primero una fase de estabilización a una temperatura de 4 ºC, 

seguida de un descenso constante de la misma a un ritmo de 1-2 ºC/min. 

En el momento previo al punto eutéctico, se debe de inducir un descenso 

prolongado de la temperatura de la cámara para compensar la liberación 

del calor latente de fusión e inducir el proceso de nucleación. Una vez 

superada la fase de transición, el ritmo de enfriamiento debe de 

permanecer constante entre 1-2 ºC/min. 

El sistema de almacenamiento: 

o Las células congeladas pueden almacenarse en un contenedor de N2L, en 

su fase líquida, donde la temperatura se mantiene constante a –196 ºC. 

Si la muestra se mantiene en la fase gaseosa, la temperatura puede 

oscilar entre –100 ºC y –140 ºC. 

NOTA: El tiempo máximo de almacenamiento bajo estas 

condiciones se desconoce con exactitud (pero se han llegado a 

reinfundir productos almacenados durante 15 años, con resultados 

satisfactorios). 

4.1 Observaciones 

El dimetilsulfoxido es potencialmente tóxico para las células en temperaturas por arriba 

de 0 ºC, por ello la adición del DMSO y los pasos subsecuentes deben de realizarse lo 

más rápido posible y todo el procedimiento, tanto en la preparación de los reactivos, 

como en la preparación de las muestras biológicas se deben de mantener a una 

temperatura de 4 ºC y con asepsia en la campana de flujo laminar. 

En el laboratorio se han realizado experimentos de criopreservación usando la prensa 

para la bolsa criogénica, incluida en el equipo CryoMed Freezeer, el casete de aluminio 

(canister), y los sensores de temperatura, superficial o dentro de la muestra, con lo cual 

hemos observado que el proceso se ve afectado por estas configuraciones y por tal 

motivo es necesario elegir el programa adecuado al momento de criopreservar las CPH 

según la manera que se elija al congelar las muestras.




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4.2 Material y equipo requerido para criopreservar CPH 

1. Bata quirúrgica 

2. Cubre bocas 

3. Gorro quirúrgico 

4. Guantes estériles 

5. Campos estériles 

6. Tijeras inoxidables estériles 

7. Pinzas inoxidables estériles (Rocher) 

8. Gasas estériles 

9. Torundas de algodón (jabón, alcohol, isodine) 

10. Alcohol isopropilico al 70% 

11. Desinfectante (glutaraldehído, fenol al 5%, o formaldehído) 

12. Isodine 

13. Frascos estériles (100 ml) o matraz Elermeyer de 250 ml 

14. Probeta graduada estéril (100 ml) 

15. Acopladores para toma de muestras (Sampling Site Couplers, Fenwal 4C-2405) 

16. DMSO estéril (Sigma, Cat D-2650) o USP (Sigma, Cat. D-1435) 

17. Jeringas desechables estériles de 5, 10, y 20 ml 

18. Agujas estériles del No, 18 G 

19. Bolsa criogénica de 250 ml (OriGen, Cryostore, Cat. CS 250n) 

20. Casete de aluminio (Canister) para bolsa criogénica a 4º C 

21. Equipo para congelamiento controlado CrioMed Freezer 

22. N2L a baja presión (22 PSI dewars) 

23. Guantes criogénicos 

24. Frascos para hemocultivo y de hongos/micoplasma (pediátricos, 1-3 ml) 

25. Tubos para Biometría Hemática (BH) 

26. Hielo fräppe 

27. Refrigerantes envueltos en papel 

28. Azul Tripano al 0.4% 

29. Cubre y porta objetos 

30. Microscopio óptico 

31. Sellador dieléctrico 

32. Bolsas para desechos 

33. Etiquetas de identificación 

34. Crioviales estériles 

35. Campana de Flujo Laminar 

36. Depósito para almacenamiento con N2L, Cryoplus 2 

37. Formato del material necesario para criopreservar CPH (Formato I)




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38. Formato de registro del procedimiento para criopreservar CPH (Formato II) 

39. Marcos metálicos (Racks) numerados 

40. Diagrama del sitio de almacenamiento en el depósito de N2L. 

41. Pipetas automáticas de 200 y 1000 μl 

42. Puntas para pipetas automáticas de 200 y 1000 μl 

43. Solución Salina Fisiológica 

4.3 Espécimen a criopreservar 

● Células progenitoras hematopoyéticas (alogénicas o autólogas) movilizadas de 

sangre periférica y obtenidas mediante aféresis. 

● Médula ósea autóloga obtenida en quirófano. 

Si es necesario, la suspensión celular es primero concentrada en forma manual o por 

una técnica automatizada (seguir el procedimiento apropiado). 

4.4 Procedimientos previos a la criopreservación de CPH 

4.4.1 Realizar la limpieza y desinfección de la campana de flujo laminar. 

4.4.2 Realizar la esterilización con Luz ultravioleta (U.V.) del material que no se puede 

esterilizar con vapor usado en la campana de Flujo laminar (por ejemplo, bolsas 

criogénicas, DMSO, tubos de BH, etc.), dejar 15 minutos dentro de la campana de flujo 

laminar y encender la lámpara de luz U.V. Colocar un letrero que indique que la luz 

U.V. está encendida. 

4.4.3 Solicitar el plasma del paciente (aprox. 100 ml) obtenido durante la aféresis al 

equipo de enfermería y mantenerlo a 4 ºC. 

4.4.4 Rotular las bolsas criogénicas y el casete de aluminio (canister). 

4.4.4.1 Colocar una etiqueta de identificación en la porta-etiqueta de la bolsa 

criogénica. Sellar con el sellador dieléctrico en varios puntos la portaetiqueta 

sin sellarlo completamente. 

4.4.4.2 La información de la etiqueta debe contener: 


No. de unidad o identificación (por ejemplo, expediente) 

Fecha




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Producto celular (por ejemplo, CPHSP alogénica, MO o CPHSP autóloga 

reducida), si es autóloga: SOLO PARA USO AUTOLOGO 

No. de secuencia de la bolsa criogénica, (por ejemplo, 1 de 3) 

4.4.4.3 Apartar las bolsas criogénicas hasta que se necesiten. 

4.4.4.4 Rotular una bolsa criogénica como bolsa control y apartarla hasta su uso. 

4.4.4.5 Rotular los frascos de cultivo, BH y crioviales con la información del paciente. 

4.4.4.6 Rotular el casete de aluminio (canister) con una etiqueta con la información 

de paciente. 

4.4.4.7 Verificar el nivel de N2L. Abrir la válvula del N2L, y encender el equipo de 

congelamiento y elegir el programa que va ser utilizado. 

4.4.4.8 Colocar el casete de aluminio (canister) en el congelador hasta su uso. 

4.4.4.9 Anotar el número de lote, la fecha de caducidad y la casa comercial del DMSO 

y de las bolsas criogénicas en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE 

CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II). 

4.5 Procedimiento para criopreservar 

4.5.1 Pesar la bolsa que contienen las CPHSP al terminar su recolección. Restar el 

peso de la bolsa vacía (bolsa transfer de 600 ml de equipo CobeSpectra = 32 g; bolsa 

de recolección de equipo CS-3000 = 25 g) y dividir el resultado entre la densidad 

específica de las CPH (d= 1.066) para obtener el volumen aproximado de la cosecha 

de CPH. Con este valor se puede calcular la cantidad de bolsas criogénicas que serán 

necesarias para la criopreservación de CPHSP. 

Ejemplo, Peso de la bolsa con CPHSP = 133 g 

Peso de la bolsa transfer de 600 ml = 32 g 

- __________ 

101 g CPHSP 

÷ 

Densidad específica de las CPHSP = 1.066 g/ml 

__________ 

94.74 ml de CPHSP




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En la siguiente tabla se muestran el volumen mínimo y máximo permitido al 

criopreservar CPH en las bolsas criogénicas de diferentes capacidades (Nota. Los 

datos fueron tomados de las bolsas Cryostore de Origen Biomedical, pero se puede 

aplicar a cualquier bolsa con las mismas dimensiones y capacidades). 

Código del 

Producto 

Volumen, a 

congelar 

Min - Max 

Volumen 

Nominal 

Largo, 

cm 

Ancho, 

cm 

CS 50 10 a 20 50 11.4 7.6 

CS 250 30 a 70 250 15.2 12.7 

CS 500 55 a 100 500 19.0 12.7 

Tomando en cuenta la capacidad de las bolsas criogénicas, el volumen de CPH se 

dividiría en 3 bolsas criogénicas con un volumen de 31.58 ml (más un volumen igual de 

solución crioprotectora con DMSO al 20%). 

4.5.1.1 Si el volumen de la cosecha es mayor a 140 ml, el volumen deberá ser 

reducido, según el protocolo establecido en el Servicio de Medicina 

Transfusional. 

4.5.2 Si el volumen de la cosecha es igual o menor a 140 ml, colocar la bolsa dentro de 

la campana de flujo laminar. Realizar la asepsia de uno de los puertos de entrada y 

colocar un acoplador de toma de muestra en el puerto y realizar su asepsia 

correspondiente. Si no se cuenta con dicho acoplador, realizar la asepsia del tubo de 

recolección de la bolsa de CPH para puncionarlo con una jeringa con aguja del calibre 

18 G. En este momento se puede realizar la asepsia de los puertos de entrada de las 

bolsas criogénicas y de los frascos de hemocultivo. De igual forma, realizar la asepsia 

de un extremo de tubo de la bolsa del plasma para poder tomar el volumen indicado 

para preparar la solución crioprotectora. 

4.5.3 Usando una jeringa de 5 ml con aguja del calibre 18G retirar 2 ml de la 

suspensión celular y depositar 1 ml en un tubo de BH (Tubo morado con EDTA), 

rotulado previamente. Realizar el recuento celular en el equipo CellDyn 3500 y 

determinar el número de células Mononucleares en la muestra. Inocular 1 ml de la




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suspensión celular a un frasco de hemocultivo, rotulado previamente como precongelamiento 

o pre-DMSO. 

4.5.4 Tomar las jeringas de 20 ml con aguja del calibre 18G y llenar completamente a 

un volumen de 20 ml cada una. Usar las jeringas necesarias para recolectar el volumen 

total de CPHSP. La última jeringa contendrá menos de 20 ml. 

4.5.5 Tapar la aguja con su capuchón cuidadosamente y retirar la aguja de la jeringa 

(desechar la aguja en un contenedor de punzo cortantes). Unir cada jeringa a una bolsa 

criogénica. Dispensar la suspensión celular hacia la bolsa, dejando la jeringa unida. 

Comenzar con la bolsa criogénica # 1. 

4.5.6 Repetir el procedimiento con las otras jeringas y bolsas criogénicas como en el 

paso 4.5.4. 

4.5.7 Anotar el volumen de cada bolsa criogénica en el formato del REGISTRO DEL 

PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II). 

4.5.8 Dispensar a la bolsa control un volumen igual al de la bolsa de CPH con mayor 

cantidad de la solución control (se puede utilizar plasma). 

4.5.9 Colocar las bolsas criogénicas entre los refrigerantes e incubar durante 30 

minutos. 

4.5.10 Calcular la cantidad de la mezcla crioprotectora (plasma autólogo con DMSO al 

20%) para que al ser mezclada 1:1 con las CPH su concentración final sea del DMSO 

al 10%. 

4.5.10.1 Volumen de cosecha de CPH + volumen bolsa control = volumen de 

solución crioprotectora + 10 ml de excedente. Ejemplo: 70 ml para CPH + 20 ml 

para la bolsa control = 100 ml de solución crioprotectora (90 ml para bolsas + 10 ml 

excedente). Por lo tanto se prepara de Solución crioprotectora = 80 ml de plasma 

+ 20 ml DMSO. 

En la siguiente tabla se muestran los cálculos de diferentes volúmenes de solución 

crioprotectora:




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Valores de DMSO-Plasma para la medición exacta del DMSO al 20% 

Volumen Total (ml) = DMSO + Plasma 

5 1 4 

10 2 8 

15 3 12 

20 4 16 

25 5 20 

30 6 24 

35 7 28 

40 8 32 

45 9 36 

50 10 40 

55 11 44 

60 12 48 

65 13 52 

70 14 56 

75 15 60 

80 16 64 

85 17 68 

90 18 72 

95 19 76 

100 20 80 

105 21 84 

110 22 88 

115 23 92 

120 24 96 

125 25 100 

130 26 104 

135 27 108 

140 28 112 

145 29 116 

150 30 120 

160 32 128 

170 34 136 

180 36 144 

190 38 152 

200 40 160 

250 50 200 

300 60 240




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4.5.10.2 Anotar el volumen de la solución crioprotectora de cada bolsa criogénica en 

el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN DE 

CPH (Formato II). 

4.5.10.3 Anotar el volumen total de cada bolsa en el Formato del REGISTRO DEL 


Volumen Total = volumen de CPH + volumen de solución crioprotectora. 

4.5.11. Colocar un reloj con alarma a los 30 minutos y otro a los 20 minutos. 

4.5.12 A la alarma de los 20 minutos preparar la solución crioprotectora. Con la probeta 

estéril medir la cantidad del plasma autólogo frío (a 4 ºC) y depositarlo en un frasco 

estéril en hielo. Con una jeringa de 20 ml tomar la cantidad necesaria de DMSO y 

adicionar al plasma mezclando perfectamente para evitar desnaturalizar las proteínas 

del plasma debido a la reacción exotérmica. 

4.5.13. Iniciar el programa correspondiente del congelador programable y permitir que 

se enfríe a 4 ºC. 

4.5.14 A la alarma de los 30 minutos tomar con una jeringa de 20 ml la cantidad 

necesaria de la solución crioprotectora. Retirar la jeringa vacía de la suspensión de 

CPH, y en su lugar colocar la jeringa de la solución crioprotectora: Secuencialmente y 

con prontitud adicionar la solución crioprotectora en cada bolsa criogénica, empezando 

con la bolsa control y posteriormente a las bolsas con las CPH, mezclar perfectamente 

las células. Usar el émbolo de la jeringa para retirar la mayor cantidad posible de aire y 

tomar aproximadamente 2.5 ml de la mezcla. Colocar 0.5 ml en un criovial rotulado, 1 

ml en el tubo de BH, rotulado previamente como post-DMSO, para corroborar su 

viabilidad. Mantener el tubo a 4 ºC. Inocular 1 ml de la mezcla en el frasco de 

hemocultivo, rotular como post-DMSO. 

4.5.15 Sellar la línea de la bolsa criogénica que contiene la jeringa tres veces con un 

sellador dieléctrico. Cortar con unas tijeras en medio de la línea sellada y desechar la 

línea unida y la jeringa. Secar rápidamente cada bolsa criogénica y colocarlas adentro 

del casete de aluminio (canister) previamente enfriado a -20 ºC; por ejemplo, colocar la 

bolsa #1 en el casete (canister) #1. Cuando corte la línea sea cuidadoso en no dejar 

cualquier gota de CPH en el área de sellado. Las células en un extremo abierto de la




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línea después del sellado debe de ser evitado a causa de que puede contaminar el N2L 

en el tanque de depósito. Ver observaciones para otras opciones para congelar las 

bolsas criogénicas usando una prensa para congelamiento del equipo CryoMed 

Freezer. 

4.5.16 Colocar los casetes de aluminio (canister) y el criovial en la cámara de 

enfriamiento. Distribuir individualmente los casetes de aluminio (canister) en una 

gradilla metálica para que se lleve a cabo el proceso en las mismas condiciones el 

congelamiento. 

4.5.19 Coloque la bolsa control dentro de un casete de aluminio (canister) e inserte el 

sensor de la temperatura en uno de los puertos de muestreo. Tener cuidado de no 

dejar aire para evitar un registro inadecuado del proceso de congelamiento. Cerrar con 

cuidado el casete de aluminio (canister) para evitar maltratar el sensor de la 

temperatura, y colocarlo en la gradilla metálica. Ver observaciones para otras 

opciones para congelar las bolsas criogénicas usando una prensa para 

congelamiento del equipo CryoMed Freezer. 

4.5.20 Cerrar la puerta de la cámara de enfriamiento y oprimir el botón de RUN del 

equipo. Registrar el programa utilizado para el congelamiento controlado y el tiempo de 

inicio en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE 

CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II). 

4.5.21 Al final del proceso de congelamiento presionar el botón STOP para silenciar la 

alarma del equipo. Registrar el tiempo final en el Formato del REGISTRO DEL 


4.5.22 Abrir la puerta de la cámara de enfriamiento, remover los casetes de aluminio 

(canister) y el criovial de las CPH y colocarlos en el depósito de almacenamiento con 

N2L en la fase de líquida o de vapor. Anotar el No. del marco metálico (rack), el lugar 

en el marco metálico (rack), la fase de almacenamiento de N2L, y el sitio dentro del 

depósito de N2L en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE 

CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II), según el siguiente diagrama:




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Esquema de la localización dentro del contenedor de N2L:




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Esquema de la localización dentro del marco metálico (Rack): 

4.5.23 Imprimir la gráfica del registro de temperatura y rotular con la identificación del 

paciente. La carta de congelamiento será parte del registro permanente del proceso. La 

gráfica del congelamiento no deberá mostrar un cambio inusual o inesperado en la 

temperatura. La curva apropiada del calor latente de fusión deberá de estar por debajo 

de 0ºC. 

4.5.24 Cerrar la puerta de la cámara de enfriamiento y accionar el botón de 

calentamiento (warm) para descongelar la cámara. Al terminar, retirar la bolsa control y 

almacenarla a -20 ºC y apagar el equipo de congelamiento. 

4.5.25 Limpiar la campana de flujo laminar y tirar todo el material desechable en las 

bolsas correspondientes. 

4.6 Procedimiento para determinar el No. De CMN de las CPH 

4.6.1 Encender el equipo para Biometría Hemática. 

4.6.2 Evaluar los controles alto, normal y bajo, y establecer si el equipo no muestra 

valores fuera del rango para dichos controles. Si algún valor está por afuera de estos 

rangos será necesario calibrar el equipo según el manual del usuario.




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4.6.3 Procesar por duplicado la muestra rotulada como pre-DMSO que se obtuvo de la 

cosecha de CPH. Si los valores están por encima del rango de detección del equipo 

diluir la muestra de CPH 1:10 con SSF. Obtener el promedio de los valores y 

reportarlos en el formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE 

CRIOPRESERVACIÓN DE CPH 

4.6.4 Calcular el No. De CMN presentes en la muestra y la dosis / Kg de peso, como 

sigue: 

Leucocitos Totales = valor de leucocitos obtenido del Cell-Dyn (K/μl) x 1000000 x 

Dilución (si se realiza) x Volumen de la cosecha. 

CMN Totales = % de Linfocitos Cell-Dyn + % de Monocitos Cell-Dyn ÷ 100 x Leucocitos 

Totales. 

Dosis de CMN/Kg = CMN totales ÷ peso del donador. 

Anotar los resultados en el formato del REGISTRO DEL 


4.7 Procedimiento para determinar la viabilidad celular de las CPH 

4.7.1 Material requerido: 

1. Portaobjetos 

2. Microscopio óptico 

3. Pipeta automática de 50 μl 

4. Puntas para pipeta automática 

5. Tubos de ensayo de 12 x 75 mm 

6. Cámara de Neubauer 

7. Cubreobjetos para cámara de Neubauer 

4.7.2 Reactivos 

Azul de Tripano al 0.4 % 

4.7.3 Procedimiento 

4.7.3.1 Verificar que el material este completamente limpio. 

4.7.3.2 Rotular un tubo de ensaye de 12 x 75 mm con el nombre Donador y CPHcosecha 

Donador.




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4.7.3.3 Rotular otro tubo de ensaye de 12 x 75 mm con el nombre del Donador y CPH 

post-DMSO. 

4.7.3.4 Adicionar a cada tubo 50 μl de la CPH de la cosecha y de la muestra post- 

DMSO, respectivamente. 

4.7.3.5 Adicionar en cada tubo 50 μl de la solución de Azul Tripano al 0.4% y mezclar 

perfectamente. 

4.7.3.6 Adicionar la muestra en la cámara de Neubauer y contar el número de células 

vivas y muertas con el microscopio óptico (40X). En caso de no mtener marcador de 

viabilidad o anticuerpo monoclonal 7 ADD. 

4.7.3.7 Reportar el porcentaje de viabilidad de las muestras. 

4.8 Limpieza y asepsia de la campana de flujo laminar 

Debido a que las CPH son recolectadas en un ambiente “abierto” y porque muchos de 

los pasos de su procesamiento no pueden ser realizados en un sistema completamente 

cerrado, hay numerosas oportunidades para la contaminación con microorganismos. 

Por esto, se debe asumir un método estricto de asepsia que deberá de ser realizado en 

el área de trabajo dentro de la campana de flujo laminar. Cultivos bacterianos y de 

hongos deberán de ser realizados en las diferentes etapas del procesamiento para 

determinar si cualquiera de las técnicas y/o materiales en uso están comprometiendo la 

pureza del las CPH. 

4.8.1 Material y equipo requerido 

1. Solución de limpieza Dextran-Hipoclorito de Sodio 

2. Solución desinfectante PRESEPT (Code Nr. SPW50, Johnson & 

Johnson). Disolver una tableta de 5 g en 3 litros de agua. 

4. Alcohol al 70% 

5. Fenol al 5 % 

6. Guantes desechables 

7. Cubrebocas 

8. Lentes de Protección. 

9. Gasas estériles




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4.8.2.1 Encender la luz de la campana de flujo laminar y realizar la limpieza de la 

superficie del piso, techo y paredes de la campana con la solución de Dextrán- 

Hipoclorito de Sodio. 

4.8.2.2 Realizar la desinfección de las cuatro paredes de la campana con la solución 

PRESEPT. 

4.8.2.3 Humedecer las gasas estériles con etanol al 70 % y pasar por toda el área de 

trabaja dentro de la campana. 

4.8.2.4 Con la ayuda de las gasas estériles desinfectar toda el área de la campana con 

la solución de Fenol al 5 %. Dejar actuar por 15 minutos. 

4.8.2.5 Encender el motor de la campana y dejar durante 30 minutos como mínimo. 

Posteriormente encender la luz U.V. y dejar actuar durante 15 minutos. Colocar un 

letrero indicando que la luz U.V. está encendida. 

4.8.2.6 Apagar la Luz U.V. A partir de este momento se puede trabajar en la campana 

de flujo laminar, procurando evitar salirse del área estéril, así como también, evitar 

movimientos bruscos para no provocar flujo de aire hacia el interior de la campana. 

4.9 Verificación de la esterilidad del proceso 

Mantener la esterilidad es una consideración importante en el procesamiento y 

criopreservación de las CPH. Se ha reportado contaminación en pacientes que han 

recibido trasplantes alogénicos y autológos. Los microorganismos identificados fueron 

flora normalmente encontrada en la piel. 

La contaminación puede ocurrir durante la colección de las CPH y en varias etapas 

durante el procedimiento. La disponibilidad de sistemas semicerrados de recolección 

reduce oportunamente la contaminación, sin embargo la esterilidad debe de ser 

monitoreada con cultivos bacterianos y de hongos. La identificación del organismo 

y su sensibilidad debería de ser realizada en los cultivos que resultaran positivos. 

Aunque el mayor propósito de esta prueba es la protección del paciente, también 

suministra información epidemiología útil acerca de las actividades de laboratorio y del 

trasplante en general.




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4.10 Procedimiento para descongelar CPH criopreservadas 

Las CPH criopreservadas son descongeladas en un baño maría a 37 – 40 ºC 

inmediatamente antes de infundirlas y administrarlas a través de un catéter central. Es 

posible diluir y/o lavar las CPH antes de la infusión en orden de remover el DMSO, pero 

esta operación es rara vez realizada. Aunque la infusión de DMSO ha sido asociada 

con cierta toxicidad incluyendo nauseas, vómitos, rubor, incremento en la frecuencia 

cardiaca y presión sanguínea, y elevación de las transaminasas en suero, muchos 

investigadores creen que la manipulación de las CPH descongeladas pueden resultar 

en la pérdida celular inaceptable. Las CPH pueden ser tanto infundidas directamente 

de la bolsa a través de un equipo de administración, o removidas de la bolsa con una 

jeringa e inyectada hacia la línea central. 

4.10.1 Material necesario 

Baño María 

Cronómetro 

Agua estéril 

Solución de limpieza Dextran-Hipoclorito de Sodio 

Solución desinfectante PRESEPT (Code Nr. SPW50, Johnson & Johnson) 

Disolver una tableta de 5 g en 3 litros de agua. 

Alcohol al 70% 

Fenol al 5 % 

Refrigerantes 

Tubos de vidrio de 12x75 mm 

Frascos para Hemocultivo y Hongos 

Microscopio Óptico 

Porta y cubre objetos 

Azul de tripano al 0.4% 

Campos quirúrgicos 

Contenedor de N2L portátil 

Ropa quirúrgica 

Gasas estériles 

Tijeras estériles 

Acoplador para toma de muestra 

Jeringas desechables estériles de 10 y 20 ml 

Agujas estériles del calibre 18 G 

Torundas de alcohol e isodine




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Guantes estériles 

Cubrebocas 


4.10.2 Procedimientos previos para descongelar las CPH 

4.10.2.1 Localizar en el depósito de almacenamiento de N2L las bolsas criogénicas con 

las CPH correspondientes al paciente que va a ser reinfundido. Verificar perfectamente 

que los datos de las bolsas concuerden con los datos del paciente que se va a 

transfundir, 

4.10.2.2 Determinar la cantidad de CMN y/o células CD34 de cada bolsa criogénica. 

4.10.2.2 Transferir los casetes de aluminio (canister) de la fase líquida a la fase 

gaseosa del depósito de N2L, por lo menos 12 horas antes de la reinfusión. 


4.10.3.1 Realizar la limpieza del Baño María con la solución de Dextran-Hipoclorito de 

sodio. 

4.10.3.2 Realizar la desinfección del Baño María con la solución desinfectante 

PRESEPT con la ayuda de gasas estériles. 

4.10.3.3 Realizar la asepsia del Baño María con una solución de Fenol al 3 %. Dejar 

actuar por espacio de 30 minutos. 

4.10.3.4 Cubrir el Baño María con un campo quirúrgico y trasladar el baño a pie de 

cama del paciente al que se van a reinfundir las CPH. 

4.10.3.5 Localizar las CPH criopreservadas y acomodar las bolsas de mayor a menor 

concentración de CPH en el depósito de N2L portátil, el cual contiene N2L Trasladar el 

contenedor al área donde se llevará a cabo la reinfusión. 

4.10.3.6 En el área donde se llevará a cabo la reinfusión, conectar el Baño María a una 

toma de corriente eléctrica. Adicionar agua estéril al baño y dejar que alcance la 

temperatura de 40 ºC. Adicionar al un antiséptico. 

4.10.3.7 A la indicación del Médico responsable, seleccionar la primera bolsa con 

mayor concentración de CPH del contenedor portátil de N2L y verificar una vez más los




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datos de identificación de la bolsa y del paciente. Introducir la bolsa al Baño María y 

con una leve agitación dejar que se descongele aproximadamente 1 minuto y 50 

segundos. Este tiempo puede variar según el volumen de las CPH y de las 

características de la bolsa criogénica. NOTA: No descongelar completamente las 

CPH, sino hasta el punto en que se note la apariencia de una moneda de 10 

pesos en el centro de la bolsa. 

4.10.3.8 Retirar la bolsa criogénica del Baño María y colocarla entre dos refrigerantes. 

Realizar la asepsia de uno de los puertos de entrada con las torundas de alcohol e 

isodine e insertar el equipo de transfusión para su reinfusión en el paciente. Otra opción 

sería, colocar un acoplador de toma en el puerto de entrada y con la ayuda de una 

jeringa de 20 ml con aguja del calibre 18 G, tomar las CPH e iniciar la reinfusión en 

alguna de las líneas de soluciones que tenga el paciente. 

4.10.3.9 Vigilar los signos vitales y reacciones que pudiera presentar el paciente. 

4.10.3.10 Realizar el mismo procedimiento, pasos 4.10.3.6 a 4.10.3.8, para cada una 

de las bolsas criogénicas restantes. 

4.10.3.11 En cada una de las bolsas realizar la asepsia de una esquina y cortar con las 

tijeras estériles un extremo de las bolsas. Tomar el sobrenadante remanente de las 

CPH para realizar los cultivos bacterianos (hemocultivo y hongos) y la viabilidad de las 

CPH después de descongelarlas. El DMSO es toxico para las CPH a temperaturas 

mayores de 4 º, por tal motivo, conservar todas las muestras en los refrigerantes. 

Requisitos de recepción de Células Tallo 

Una vez que llega la bolsa de recolección el área de criopreservación deberá de 

traer: 

1.- Nombre del Donador 

2.-Nombre de Paciente 

3.- Número de la unidad asignada 

4.- Volumen de obtenido 

5.- Equipo en donde fue recolectada 

6.- Marca de la bolsa de recolección 

7.- Fecha de caducidad 

8.- Número de Lote 

9.- Tubo de biometría hemática previa a la recolección




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10.- Resultado de la biometría Hemática 

11.- Resultado de CD 34, CD 45 y 7 ADD 

12.- Resultado de Serología 

o Nota estos requisitos son indispensables para la separación automática y 

manual 

METODO MANUAL PARA LA REDUCCIÓN DE VOLUMEN 

Este método lo usaremos en caso que el Sepax no pueda ser utilizado debido a que 

tenemos mayor volumen de muestra que rebase las especificaciones del fabricante. 

Es muy importante pesar la bolsa de recolección vacía y llena 

En la campana de flujo laminar previa limpieza con alcohol al 70% e irradiación de 15 a 

20 min llevar la bolsa de recolección para limpiar toda la bolsa especialmente las líneas 

Poner el acoplador a la bolsa de recolección (jeringa de 60 mí de preferencia) se extrae 

un volumen y se vacía en tubos Falcon de 50 ml, estériles, se tapa y se centrifuga por 

15 min a 4 ° C a 3500 RPM. 

En la campana, abrir la tapa de tubo Falcon extraer el Plasma dejando alrededor de 5 

ml. Dar pequeños golpecitos para despegar las células de la pared del tubo y 

resuspender con un poco de plasma, tratando de recuperar el mayor número de células 

posibles . Con una jeringa de 60 0 20 ml y aguja lila (16 G) se pasan las células a la 

bolsa de criopreservación a través de la línea de la bolsa (pueden ser más bolsas 

dependiendo del volumen que tengamos) de 250 ml y poner en el refrigerador. 

Prepa en un tubo Falcon de 50 ml la solución Crioprotectora 

DMSO al 10 % -------------------------------------------------10 ml 

HEST (Hidroxietilalmidon) si es al 10 %…………….……30 ml 

Albúmina Humana al 20% o 25%--------------------------10 ml 

En el caso que el HEST sea del 6% ------------------------35ml




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Albúmina Humana del 20% o 25% -----------------------5 ml 

Poner en el refrigerador la solución de DMSO por 15 minutos a 4°C, pues este debe 

estar frío a la hora de ponerlo a las células 

Encender el congelador minutado el cual deberá contener una sensor y a falta de este 

una bolsa con la mezcla de DMSO como control y en cuanto llegue a una Temperatura 

de 4°C 

En lo que el congelador minutado llega a la Temperatura deseada se prepara la 

Cosecha en la campana de flujo laminar con las solución crioprotectora la cual debe 

ser agregada poco a y en frio mezclando al mismo tiempo que se va adicionando 

lentamente. 

Eliminar el aire y burbujas con una jeringa de la criobolsa, conservando 1.5 ml de 

muestra, 500µl en un tubo criovial debidamente identificado y el resto de divide para 

realiza hemocultivos viabilidad con citometria o azul de tripan 

Se sella la bolsa con un sellador automático el cual también debe estar limpio y cerca 

de la campana de flujo laminar 

REACTIVOS PARA CRIOPRESERVACION 

INSUMOS 

La siguiente lista son reactivos indispensables para realizar la criopreservación de 

Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH), procedentes de Sangre Periférica, 

Medula Ósea y Cordón Umbilical 

1.- Dimethyl Sulfoxide (DMSO) grado clínico Sigma –Aldrich 

2.- Hidroxietil almidon al 10% (HES) PISSA Fresniere 

3.- Seroalbumina Humana al 20 % 

4.- Etanol al 70% (desinfectante) 

MATERIAL PARA CRIOPRESERVACION 

1. Bolsas de 250ml Congelación Cryostoic Biomedica 

2. Acopladores ( Sampling Site Copler ) ( en caso de no tener suplir con llave de 

tres vias) Baxter




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3. Sepax Cell Separetion Kitt Biosafe 

4. Crioviales de Nitrógeno liquido de 2ml Labcon 

5. Tubo Falcon de 50 ml 

6. Jeringas (propulsor o perfusor) DE 60 ml 

7. Jeringas de 20 ml 

8. Agujas Insyde 14 G 1.7 sin 2.1x45mm 

9. Agujas 16 G 1 ½ 

10. Pipetas de plástico de 25 ml estéril 

11. Bolsas Estériles para descongelación ( syplog ) 

12. Pipetas con filtro desechables de 10 ml 

13. Puntas para 200 µl 

14. Puntas desechables para 1000 µl 

15. Cubre bocas 

16. Guantes Estériles 

17. Guante manejo de temperaturas extremas (bajas) 

EQUIPO 

1. Congelador Programable 

2. Tanque de almacenaje 

3. Cajas y Marcos para almacenar bolsas y criobiales 

4. Placas de Presión 

5. Campana de Bioseguridad Clase II 

6. Pipetor Automático 

7. Sellador Automático 

8. Tanques de Nitrógeno Líquido 

9. Balanza Digital 

10. Pinzas de Rodillo 

11. Sellador dieléctrico 

12. Conector estéril




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LIMPIEZA Y 

DESINFECCIONJ DEL 

AREA BLANCA DE 

PROCESAMIENTO 

VERIFICAR Y LIMPIAR CON 

ALCOHOL AL 70% EL 

CONGELADOR MINUTADO, 

TENER LOS CANESTER A 

OCUPAR LIMPIOS Y SECOS 

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PREPARACION DE EQUIPO PARA EL PROCESO 

VERIFICAR QUE LAS BOLSAS 

CRIOPROTECTORAS TENGAN 

BUENA CADUCIDAD Y EL 

CASO DE USO DE SEPAX 

LIMPIARLO 

LIMPIEZA DE CAMPANA DE FLUJO LAMINAR 

COMO SE MENSIONA EN ESTE MANUAL EN EL 

PUNTO 4.8.2 

COLOCAR EL MATERIAL 

REQUERIDO PARA EL 

PROCESO EN LA CAMPANA Y 

COMO JERINGAS GASAS 

TUBOS SELLADOR ETC. DEJAR 

15 MIN CON UV 

CHECAR QUE HAYA 

SUFICIENTE NITROGENO PARA 

TODO EL PROCESO DE 

CONGELACION 

LIMPIEZA Y DESINFECCION DE 

CENTRIFUGA REFRIGERADA




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RECEPCION Y PROCESO 

LA BOLSA OBTENIDA DE CELULAS PROGENITORAS HEMATOPOYETICAS, YA SEA 

DE MEDULA OSEA O SANGRE PERIFERICA DEBERA SER ENTREGADA CON NUMERO 

DE UNIDAD ASIGNADA POR EL BANCO DE SANGRE, RESULTADOS DE SEROLOGIA, 

NOMBRE DE EL DONADOR, NOMBRE DE RECEPTOR, PESO DEL RECEPROR, EDAD, 

VOLUMEN DE LA COSECHA, BIOMETRIA HEMÁTICA , VOUMEN OBTENIDO, 

NOMBRE DE EQUIPO UTILIZADO PARA SU OBTENCION Y RECUENTO DE CD 34 Y 

VIABILIDAD 

UN TUBBO DE BH CON MUESTRA DE LA COSECHA 

ROTULAR FRASCOS DE HEMOCULTIVO, CRIOVIALES, CON NUMERO DE 

UNIDAD Y NOMBRE 

OBTENER EL PESO DE LA BOLSA VACIA Y DE BOLSA LLENA PARA 

CALCULAR EL VOLÚMEN REAL DE LA COSECHA 

L 

MEZCLAR BIEN LAS CELULAS CON MOVIMIENTO SUAVE ASI COMO 

TAMBIEN LAS LÍNEAS DE LA BOLSA CON AYUDA DE PINZAS, PONER UN 

CAMPO ESTÉRIL EN LA CAMPANA DE FLUJO LAMINAR Y LIMPIAR BIEN LAS 

VÍAS, DE ESTAS DARLE UN PILOTO A CITOMETRIA Y OTRO 

PARABACTERIOLOGIA 

SI EL PROCESO SE VA A REALIZAR DE FORMA MANUAL PONER EL 

ACOPLADODR A LA BOLSA DE RECOLECION Y CON JERINGA DE 60 ML DE 

PEREFERENCIA EXTRAER TODO EL VOLÚMEN Y VACIAR A 2TUBOS FALCON 

ESTÉRILES DE 50 ML, TAPAR Y CENTRIFUGAR POR 15 MINUTOS A 4 ° C SIN 

FRENO 

SACACAR CON MUCHO CUIDADO LOS TUBOS FALCON Y LLEVARLOS A 

LA CAMPANA DE FLUJO LAMINAR, EXTRAEER EL PLASMA Y PASARLO A 

OROS TUBOS FALCON ESTÉRILES. 

MEDIR EL VOLÚMEN DE CÉLULAS QUE NOS QUEDARON CON JERINGA




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PONER EN LA CAMPANA LAS BOLSAS CRIOPROTECTORAS LIMPIARLAS 

CON ALCOHOL 

CON JERINGAS DE 20 ML EXTRAEER TODAS LAS CELULAS DE LOS TUBOS 

FALCON, PONER UN POCO DE PLASMA PARA DEJAR LO MENOS POSIBLE 

DE CELULAS EN EL TUBO, CONECTAR A LA LINEA HEMBRA DE LA BOLSA 

DE CRIOPRESERVACION Y TRASVASARLAS A LA BOLSA. 

RETIRAR LAS JERINGAS Y CERRAR LA LÍNEA 

ES IMPORTANTE TOMAR EN CUENTA EL VOLÚMEN QUE SE TIENE Y 

REPARTIRLO EN LAS BOLSAS QUE SEAN NECESARIAS TOAMDO EN 

CUENTA EL VOLUMEN QUE SE AÑADIRÁ DE SOLUCION 

CRIOPROTECTORA DE MANERA QUE NO VAYAN A QUEDAR MUY LLEAS 

PUES SE CORRE EL RIESGO DE QUE SE ROMPAN A LA HORA DE 

CRIOPRESERVAR O DESCONGELAR 

PREPARAR LA SOLUCION CRIOPROTECTORA EN HIELO O EN UN MEDIO QUE 

ESTÉ A 4 ° C 

Prepa en un tubo Falcon de 50 ml la solución crioprotectora 

DMSO al 10 % -------------------------------------------------10 ml 

HEST (Hidroxietilalmidon) si es al 10 %…………….……30 ml 

Albúmina Humana al 20% o 25%--------------------------10 ml 

En el caso que el HEST sea del 6% ------------------------35ml 

Albúmina Humana del 20% o 25% -----------------------5 ml




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ENCENDER EL CONGELADOR MINUTADO EN UTILIZANDO EL PROGRAMA # 6 PARA QUE 

LLEGUE A UNA TEMPERATURA DE – 4 °C, MIENTRAS SE PREPARA LA SOLUCION Y SE 

ENFRIA 

PONER EN EL REFRIGERADOR LOS TUBOS CON LA SOLUCION DE DMSO POR 15 MIN A 4 °C 

PUES DEBE DE ESTAR FRIO A LA HORA DE PONERLO A LAS CÉLULAS 

SUPONIENDO QUE SE OBTIENEN 2 BOLSAS CON 25 ML DE CÉLULAS CADA UNA SE 

ADICIONARAN 25 ML DE SOLUCION CRIOPROTECTORA A CADA BOLSA 

SE PONEN LAS BOLSAS DE LAS CÉLULAS ENTRE 2 BOLSAS DE GEL CONGELDO 

PARA ADICIONAR LENTAMENTE CON UNA JERINGA LA SOLUCION 

CRIOPROTECTORA LENTAMENTE Y MOVIENDO LAS BOLSAS SUAVEMENTE PARA 

MEZCLAR, SE ADICIONAN DE 2EN 2 ML HASTA TERMIAR LA SOLUCION SIEMPRE 

MEZCLANDO 

LAVAR LAS JERINGAS SIN DESCONECTAR CON LA MUESTRA DE TAL MODO QUE 

EN LAS LÍNEAS NO QUEDE SOLO SOLCION. 

CON LA MISMA JERINGA Y LAS CÉLULAS YA MEZCLADAS DEJAR ALRREDEDOR DE 

5 ML DE MUESTRA PARA PONER: 

EN 4 CRIOVIALES PONER 500 MICROLITORS DE MUESTRA, UNO PARA CITOMERIA, 

3 PARA CRIOPRESERVAR, DOS JUNTO CON LAS BOLSAS Y OTRO PARA CONTROL 

LOS OTROS 3 ML VACIAR EN FRASCO DE HEMOCULTIVO 

DAR A EL AREA DE CTOMETRIA UN CRIOVIAL O TUBO CON LA MUESTRA PARA 

QUE REALICE DETERMINACI0N DE CD 34 Y VIAVILIDAD PARA ASI OBTENER EL 

VUMERO FINAL DE CELUALS A CRIOPRESERVAR ASÍ COMO CONTOL DEL 

MANEJO CON LOS CRIOPROTECTORES




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ANTES DE DESCONECAR LAS JERINGAS SACAR TODO EL AIRE DE LAS BOLSAS DE 

TAL MANERA QUE NO QUEDE NADA DE AIRE DENTRO Y SEGUIR MANTENIENDOLAS 

EN FRIO 

YA LISTO EN CONGELADOR PONER LAS BOLSAS EN LAS PRENSAS PARA 

CONGELAR JUNTO CON UN CRIOBIAL PROCURANDO QUE EL SENSOR DE 

EL EQUIPO QUEDE ENTRE UNO DE LAS PRENSAS PARA QUE MIDA LA 

TEMPERATURA REAL DE CONGELACION DE LA BOLSA Y TAMBIEN 

PONER LOS 3 CRIOVIALES EN EL CONGELADOR HASTA QUE TERMINE EL 

PROCESO A LOS – 80°C 

SACAR Y DESPEGAR CON CUIDADO LAS BOLSAS, COLOCARLAS EN LOS 

CANESTER RESPECTIVOS JUNTO CON EL CRIOVIAL QUE DEBE ESTAR LO 

MAS FRIO POSIBLE 

EL CRIOVIAL DE CONTROL PONERLO EN LA CAJA DE CONTROLES 

PONER EL CANESTER EN EL PORTACANESTER E INTRODUCIRLO EN EL 

TANQUE DE CRIOPRESERVACION QUE ESTARÁ A – 196 °C 

LLENAR LA HOJA DE REGISTRO CON TODOS LOS DATOS TANTO DE 

UBICACIÓN EN EL TANQUE, BH, CONTEO CELULAR, CD34, VIAVILIDAD 

NOMBRE Y EDAD DE PACIENTE DIAGNOSTICO PESO FECHA DE PROCESO 

TAMBIEN SE DEBE TENER EL REGISTRO EN ELECTRONICO LA 

UBICACIÓN EN EL TANQUE CON FECHA Y NOMBRE 

Todos los datos que resultan de este procedimiento se concentran en la Bitácora CAL- 

77-A, que se muestra a continuación:




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


Bitácora CAL-77-A HOJA DE REGISTRO DE CÉLULAS TALLO 

CRIOPRESERVADAS 

NUM DE UNIDAD --------------- FECHA PROCESO: ___________________ 

TIPO DE TRANSPLANTE ------------------------------------------------- 

NOMBRE DE RECEPTOR---------------------------------------------------------------- NUM. DE EXPEDIENTE ------------- 

EDAD DE RECEPTOR------------------------------------- PESO DE RECEPTOR--------------------------- 

NOMBRE DE DONADOR---------------------------------------------------- PARENTESCO----------------------------- 

DIAGNOSTICO ---------------------------------------------------------------------- 

GRUPO SANGUINEO DONADOR------------------- 

GRUPO SANGUINEO RECEPTOR-------------------------- 

SEROLOGIA 

HCV-------------- AgSHB ----------------- SIFILIS----------------- BRUCELLA-------- 

HIV---------------- CMV-IgM------------------- CHAGAS----------- 

NAT: HIV:-_________ HCV:_____________ HBV:__________ 

LEUCOCITOS TOTALES = WBC K/min L X 1000 X VOL DE BOLSA-------------------------------- 

DOSIS DE LEUCOS = LEUCOCITOS TOTALES X 10 8 / Kg DE DONADOR ------------------------------------ 

CMN% = LINFOCITOS% + MONOCITOS % ----------------------------------------------------- 

DOSIS DE CMN = CMN% X LEUCOCITOS TOTALES X 10 8 / Kg / 100 --------------------------------------------




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CD 34 Cel / µl ------------------------------------ 

VIABILIDAD ------------------------------------- 

CAL-02-B 


DOSIS DE CD 34 X DILUCION X 1000X VOL / PESO DE RECEPTOR =--------------------X 10 6 

VOL STEM CELLS CONCENTRADAS EN mL. -------------------------------------------------------- 

VOL SOL. CRIOPRESERVADORA-------------------------------------------------------------------- 

VOL TOTAL DE BOLSA CRIOPRESERVADA------------------ 

POSICION DE CRIOVIALES--------------------------------- 

´POSICION DE BOLSA EN TANQUE ----------- 

CULTIVO BACTERIOLOGICO: 

HEMOCULTIVO PRE CRIOPRESERVACION----------------- 

HEMOCUTIVO POS CRIOPRESERVANTES---------------------- 

VIABILIDAD POS DMSO----------------- 

VIABILIDAD POST- DESCONGELACION-------------------- 

FECHA DE DESCONGELACION Y ENVIO: ______________ 

CD 34--------------------- 

REALIZO ------------------------------




ISBN: 978-968-9170-17-4 


CAL-02-B 


PRODUCTO NO CONFORME 

Producto no conforme debido a mala operación o mal manejo del producto durante el 

proceso 

REGISTROS 

Producto entregado con bolsa rota, fuga en las líneas 

Mal sellado de líneas 

Células tallo para Trasplante Alogénico con células CD 34+ < 2 x 10 6 / Kg de 

peso de receptor. 

Células tallo para Trasplante Autólogo con células CD 34+ < 1.5 x 10 6 / Kg 

de peso del receptor 

Bitácora CAL-77-A hoja de registro de células tallo criopreservadas

NUM DE UNIDAD --------------- FECHA 

PROCESO:_______________________ 

TIPO DE TRANSPLANTE ------------------------------------------------- 

NOMBRE DE RECEPTOR---------------------------------------------------------------- NUM. DE 

EXPEDIENTE ------------- 

EDAD DE RECEPTOR------------------------------------- PESO DE 

RECEPTOR--------------------------- 

NOMBRE DE DONADOR---------------------------------------------------- -PARENTESCO--- 

-------------------------- 

DIAGNOSTICO ---------------------------------------------------------------------- 

GRUPO SANGUINEO DONADOR------------------- 

GRUPO SANGUINEO RECEPTOR-------------------------- 

SEROLOGIA 

HCV-------------- AgSHB ----------------- SIFILIS----------------- BRUCELLA------- 

- 

HIV---------------- CMV-IgM------------------- CHAGAS----------- 

NAT: HIV:-_________ HCV:_____________ HBV:__________ 

LEUCOCITOS TOTALES = WBC K/min L X 1000 X VOL DE BOLSA---------------------------- 

---- 

DOSIS DE LEUCOS = LEUCOCITOS TOTALES X 10⁸ / Kg DE DONADOR ----------------- 

------------------- 

CMN% = LINFOCITOS% + MONOCITOS % ----------------------------------------------------- 

DOSIS DE CMN = CMN% X LEUCOCITOS TOTALES X 10 ⁸ / Kg / 100 ----------------------- 

--------------------- 

CAL-02-B

CD 34 Cel / µl ------------------------------------ 

VIABILIDAD ------------------------------------- 

DOSIS DE CD 34 X DILUCION X 1000X VOL / PESO DE RECEPTOR =--------------------X 

10⁶ 

VOL STEM CELLS CONCENTRADAS EN mL. ------------------------------------------------------- 

- 

VOL SOL. CRIOPRESERVADORA-------------------------------------------------------------------- 

VOL TOTAL DE BOLSA CRIOPRESERVADA------------------ 

POSICION DE CRIOVIALES--------------------------------- 

´POSICION DE BOLSA EN TANQUE ----------- 

CULTIVO BACTERIOLOGICO: 

HEMOCULTIVO PRE CRIOPRESERVACION----------------- 

HEMOCUTIVO POS CRIOPRESERVANTES---------------------- 

VIABILIDAD POS DMSO----------------- 

VIABILIDAD POST- DESCONGELACION-------------------- FECHA DE 

DESCONGELACION Y ENVIO:______________ 

CD 34--------------------- 

REALIZO ------------------------------ 

CAL-02-B

Sothink Glanda - Instituto Nacional de Pediatría

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