AISLAMIENTO DE SECUENCIAS EXPRESADAS ... - cgiar

provenientes del patógeno, tales como la flagelina (Zipfel et al. 2004) y varios oligosacáridos,
incluyendo quitina. El reconocimiento por parte de la planta de estas moléculas resulta en la
inducción de varias vías de defensa en las plantas. El reconocimiento de tales inductores de
patógenos y plagas por la planta puede inducir a una muerte celular y de una manera general a
una reacción hipersensible y a la síntesis de moléculas antimicrobiales como las fitoalexinas
(Heath 2000). Por ejemplo, la volicitina (Schmelz et al. 2003) y la flagelina (Zipfel et al.
2004) activan las vías mediadas por JA y ET. La activación de estas vías resulta en la síntesis
de una variedad de proteínas PR que tienen un importante papel en respuesta de defensa. Una
de esas PR es la quitinasa, la enzima que cataliza la hidrólisis de los polímeros de quitina,
encontrados en las paredes celulares de hongos patogénicos y en el exoesqueleto de insectos y
nemátodos (Shibuya & Minami 2001). En el presente trabajo se aisló una secuencia similar a
quitinasa básica (CHIB ó PR-3) probablemente inducida por la vía del JA/ET. La aplicación
exógena en plantas de oligómeros de quitina purificados activan los genes PR y la síntesis de
fitoalexinas, y en trabajos con microarreglos se han obtenido un gran número de genes de
Arabidopsis inducidos por quitina (Shibuya & Minami 2001; Zhang et al. 2002). Varias
proteínas de ligación a quitina asociadas a membrana, presumiblemente receptores de quitina
han sido identificados en varias especies de plantas como la soya (Day et al. 2001) y arroz
(Kaku et al. 2006). En nuestro estudio se encontró una proteína de ligación similar al gen
BRH1 (BRASSINOSTEROID- RESPONSIVE RING-H2) el cual se ha encontrado que se
acumula por la presencia de quitina en Arabidopsis (Molnàr et al. 2002). Libault et al. (2007)
utilizando microarreglos de ADNc y RT-PCR encontraron 118 factores de transcripción en
Arabidopsis que respondían a la inducción por quitina. Una de las familias de estos factores
de transcripción mayormente representadas fue la AP2/ERE, lo cual indica que esta familia
está implicada en la respuesta de defensa de la planta y son específicamente inducidas por
quitina. Una secuencia similar a una isoforma de este factor de transcripción fue encontrada
en la librería sustractiva del presente trabajo, y otra fue diferencialmente expresada en el
Cassava Unigene Microarray (Tablas 6 y 7). También se encontró diferencialmente expresado
en los microarreglos el activador transcripcional MYC2 el cual tiene un dominio bHLH (basic
helix-loop-helix Zip). En estudios realizados por Lorenzo et al. (2004) se mostró que MYC2
tiene un papel central dentro de la vía de señalización de JA, regula la respuesta de defensa a
insectos y responde a la inducción por quitina. Sumado a esto, Lyou et al. (2008) demostraron
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