ID-Karte “Reverse grouping with antibody screening” ID-Card ...

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ID-Karte “Reverse grouping with antibody screening”
Serumgegenprobe kombiniert mit Antikörpernachweis
Produkt-Identifikation: 50510
Einleitung
Reagenzien
Zuätzlich
benötigte
Reagenzien
Weitere
erforderliche
Materialien
Probenmaterial
Vorbereitung der
Blutprobe
Kontrollen
Testdurchführung
Die ABO-Blutgruppenbestimmung verlangt die Durchführung der Serumgegenprobe unter Verwendung
von Plasma oder Serum, um die Richtigkeit der ABO-Antigenbestimmung zu bestätigen.
Für die Serumgegenprobe verwendet man Erythrozyten mit bekannter ABO-Antigen-Spezifität, um das
Vorhandensein bzw. die Abwesenheit der Anti-A und Anti-B Isoagglutinine zu erkennen. Unterschiede
zwischen der Antigenbestimmung und der Serumgegenprobe erfordern weitere Untersuchungen.
Die ABO-Bestimmung sollte erst als vollständig betrachtet werden, wenn gleichzeitig ein
Antikörper-Suchtest durchgeführt wird.
Die ID-Karte “Reverse grouping with antibody screening” ist bestimmt zur Verwendung mit den
Testerythrozyten “ID-DiaCell ABO/I-II” oder “ID-DiaCell ABO/I-II-III”. Sie erlaubt eine einfache,
gleichzeitige Durchführung der Gegenprobe und des Antikörper-Suchtests (im indirekten
Antiglobulin-Test bei Raumtemperatur) und bietet dem Bedarf entsprechend folgende Kombinationen:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / EK-I-II” oder “A 1 -A 2 -B / DAT-I-II”.
ID-Karte “Reverse grouping with antibody screening”, enthält 3 Mikroröhrchen mit neutralem Gel und 3
Mikroröhrchen mit polyspezifischem Antihumanglobulinserum (Kaninchen-Anti-IgG und monoklonales
Anti-C3d, Zellinie C139-9) in der Gelmatrix.
Konservierungsmittel: < 0,1% NaN 3 .
Nicht in der Nähe von Hitzequellen, Klimaanlagen oder Lüftungsausgängen lagern.
Stabilität: siehe Verfallsdatum auf dem Etikett.
• ID-Diluent 2: Modifiziertes LISS zur Herstellung der Erythrozytensuspensionen.
• ID-DiaCell ABO / I-II (A 1 -A 2 -B-O / I-II), gebrauchsfertig
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A 1 -A 2 -B / I-II-III), gebrauchsfertig
(siehe diesbezügliche Packungsbeilage)
• ID-Dispenser
• ID-Pipetor
• ID-Tips (Pipetorspitzen)
• Suspensionsröhrchen
• ID-Arbeitsplatz
• ID-Zentrifuge 6, 12 oder 24
Für verlässliche Resultate sollte die Bestimmung mit frisch abgenommenen Proben durchgeführt
werden oder in Übereinstimmung mit lokalen Laborvorschriften für die Akzeptanz von Probenmaterial
erfolgen. Vorzugsweise sollte die Probengewinnung in den Antikoagulantien Citrat, EDTA oder CPD-A
erfolgen. Native Proben (kein Antikoagulanz) können auch verwendet werden.
Wird Serum anstelle von Plasma verwendet, sollte dieses vor Testansatz 10 Minuten bei 1500 g
zentrifugiert werden, damit keine störenden Fibrinreste in dem Testansatz gelangen.
a) Erythrozyten (für Eigenkontrolle oder DAT)
Eine 0,8%ige Erythrozytensuspension in ID-Diluent 2 wie folgt herstellen:
Diluent vor Gebrauch auf Raumtemperatur bringen.
1. 1,0 mL ID-Diluent 2 in ein sauberes Röhrchen pipettieren.
2. 10 μL Erythrozytenkonzentrat dazugeben, leicht mischen.
Die Erythrozytensuspension kann sofort verwendet werden.
b) Plasma oder Serum
Wird das Plasma oder Serum nicht unmittelbar nach dem Zentrifugieren verwendet, sollte es max. 48
Stunden bei 2-8 °C, danach bei -20 °C aufbewahrt werden.
Eine interne Qualitätskontrolle sollte in Übereinstimmung mit den gültigen Richtlinien zur
Qualitätssicherung mitgeführt werden.
Keine ID-Karten benutzen mit Anzeichen von Austrocknung, Luftblasen, beschädigter Versiegelung oder
Tropfen des Gels bzw. des Überstandes im oberen Teil der Mikrokammer oder auf der Unterseite der
Versiegelung.
Proben und Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur bringen und vorsichtig resuspendieren.
1. Die ID-Karte mit den Patienten- oder Spenderdaten beschriften.
2. Aluminiumfolie von den benötigten Mikroröhrchen in aufrechter Kartenposition entfernen.
3. 50 μL der Testerythrozyten in die entsprechenden Mikroröhrchen pipettieren.
4. 50 μL Serum oder Plasma des Patienten in alle Mikroröhrchen dazugeben.
5. Eine Inkubationszeit von 10 Minuten bei Raumtemperatur ist empfohlen (siehe Anmerkung 3).
6. ID-Karte 10 Minuten in der ID-Zentrifuge zentrifugieren.
7. Reaktionen ablesen und aufzeichnen.
Wird bei der Testkombination eine Eigenkontrolle durchgeführt, so ist wie folgt vorzugehen: 50 μL der
Erythrozytensuspension der Probe in das entsprechende Mikroröhrchen pipettieren und 50 μL
Serum oder Plasma der Probe dazugeben. Wird bei der Testkombination ein direkter Antiglobulintest
(DAT) durchgeführt, so ist wie folgt vorzugehen: 50 μL der Erythrozytensuspension der Probe in das
entsprechende Mikroröhrchen pipettieren (ohne Serum oder Plasma).
ID-Card “Reverse grouping with antibody screening”
Reverse grouping combined with antibody screening
Product-Identification: 50510
Introduction
Reagents
Additional
reagents
required
Further
materials
required
Sample material
Preparation of
blood sample
Controls
Test procedure
ABO blood group determination requires that reverse grouping using plasma or serum should be
carried out to confirm the accuracy of ABO red cell typing (forward grouping).
Reverse grouping uses red cell reagents of known ABO antigen specificity to indicate the presence
or absence of anti-A and anti-B isoagglutinins, the results of which determine the reverse group.
Discrepancies between forward and reverse grouping require further investigation.
Good laboratory practice dictates that ABO grouping is incomplete without a screening procedure to
detect the presence of irregular antibodies.
The ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” is used with the test cell reagents “ID-DiaCell
ABO/I-II” or “ID-DiaCell ABO/I-II-III”, allowing reverse grouping and antibody screening (indirect
antiglobulin test at room temperature) in an easy single test procedure. It provides following
combinations of test profiles, according to individual needs:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / ac-I-II” or “A 1 -A 2 -B / DAT-I-II”.
ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” consisting of 3 microtubes containing neutral gel
and 3 microtubes containing anti-human globulin serum (rabbit anti-IgG and monoclonal anti-C3d, cell
line C139-9) within the gel matrix.
Preservative: < 0,1% NaN 3 .
Do not store near any heat, air conditioning sources or ventilation outlets.
Stability: see expiry date on label.
• ID-Diluent 2: modified LISS for red cell suspension.
• ID-DiaCell ABO / I-II (A 1 -A 2 -B-O / I-II), ready-to-use
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A 1 -A 2 -B / I-II-III), ready-to-use
(see related package insert)
• ID-Dispenser
• ID-Pipetor
• ID-Tips (pipetor tips)
• Suspension Tubes
• ID-Working table
• ID-Centrifuge 6, 12 or 24
For optimal results, the determination should be performed using a freshly drawn sample, or in
accordance with local laboratory procedures for sample acceptance criteria. Preferably, blood samples
should be drawn into citrate, EDTA or CPD-A anticoagulant. Samples drawn into plain tubes (no
anticoagulant) may also be used.
When the use of serum instead of plasma is required, the serum must be well cleared, by centrifugation
at 1500 g for 10 minutes, before use avoid fibrin residues, which may interfere with the reaction pattern.
a) Red cells (for autocontrol or DAT)
Prepare a 0,8% red cell suspension in ID-Diluent 2 as follows:
Allow the diluent to reach room temperature before use.
1. Dispense 1,0 mL of ID-Diluent 2 into a clean tube.
2. Add 10 μL of packed red cells, mix gently.
The cell suspension may be used immediately.
b) Plasma or serum
Where samples are not for immediate testing they should be stored at 2-8 °C after separation for a
maximum of 48 hours, thereafter at -20 °C.
A internal quality control should be included in accordance with the relevant guidelines of quality
assurance.
Do not use ID-Cards which show signs of drying, have bubbles, damaged seals, drops of gel or
supernatant in the upper part of the microtubes or on the underside of the aluminium foil.
Allow the test cell reagents and samples to reach room temperature before use and resuspend gently.
1. Identify the ID-Card with the unique patient or donor number/details as appropriate.
2. Remove the aluminium foil from as many microtubes as required by holding the ID card in the
upright position.
3. Pipette 50 μL of each test cell reagent into the appropriate microtubes.
4. Add 50 μL of the patient’s serum or plasma to each microtube.
5. An incubation for 10 minutes at room temperature is recommended (see remarks, point 3).
6. Centrifuge the ID-Card for 10 minutes in the ID-Centrifuge.
7. Read and record the results.
If the test combination is to include an autocontrol, pipette 50 μL of the sample red cell suspension
into the appropriate microtube and add 50 μL of the sample plasma or serum. If the test combination
is to include a direct antiglobulin test (DAT), pipette 50 μL of the sample red cell suspension into the
appropriate microtube (without adding plasma or serum).
Carte-ID “Reverse grouping with antibody screening”
Groupage sérique combiné à la recherche d’anticorps
Identification de produit: 50510
Introduction
Réactifs
Réactifs
supplémentaires
nécessaires
Matériaux
supplémentaires
nécessaires
Echantillons
Préparation de
l’échantillon
de sang
Contrôles
Méthode
Dans toute détermination de groupe sanguin ABO, l’épreuve sérique pratiquée à partir du plasma ou du
sérum est destinée à confirmer le groupage ABO des hématies (épreuve érythrocytaire).
L’épreuve sérique, utilisant des hématies-tests de spécificité antigénique ABO connue, détermine la
présence ou l’absence d’isoagglutinines anti-A ou anti-B. Toute discordance entre épreuve érythrocytaire
et épreuve sérique nécessitera des investigations supplémentaires.
Par ailleurs, de bonnes pratiques de laboratoire impliquent que tout groupage ABO soit complété par
une procédure de dépistage d’anticorps irréguliers.
La carte-ID “Reverse grouping with antibody screening” est utilisée avec les hématies-tests “ID-DiaCell
ABO/I-II” ou “ID-DiaCell ABO/I-II-III”, permettant la détermination du groupe sérique et la recherche
d’anticorps (test indirect à l’antiglobuline à température ambiante) en une seule procédure de test. Elle
offre des combinaisons de profils comme suit, répondant aux besoins individuels:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / ac-I-II” ou “A 1 -A 2 -B / TDA-I-II”.
Carte-ID “Reverse grouping with antibody screening”, constituée de 3 microtubes contenant du gel
neutre et 3 microtubes contenant du sérum antiglobuline humaine polyspécifique (anticorps de lapin
anti-IgG et anti-C3d monoclonal, lignée cellulaire C139-9) inclus dans le gel.
Conservateur: < 0,1% NaN 3 .
Ne pas stocker à proximité d’une source de chaleur, d’une climatisation ou une
sortie de ventilation.
Stabilité: voir la date de péremption sur l’étiquette.
• ID-Diluent 2: LISS modifié pour suspensions d’hématies.
• ID-DiaCell ABO / I-II (A 1 -A 2 -B-O / I-II), prêt à l’emploi
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A 1 -A 2 -B / I-II-III), prêt à l’emploi
(voir mode d’emploi correspondant)
• ID-Dispenser
• ID-Pipetor
• ID-Tips (cônes pour pipette)
• Tubes pour suspensions
• ID-Table de travail
• ID-Centrifuge 6, 12 ou 24
Afin d’obtenir des résultats fiables, la détermination devrait se faire sur du matériel fraîchement prélevé
ou conforme aux exigences du laboratoire auquel la demande d’analyses est adressée. L’échantillon
devrait être prélevé de préférence sur anticoagulant citrate, EDTA ou CPD-A. Du sang prélevé sans
anticoagulant (natif) peut également être utilisé.
Lorsque l’utilisation de sérum est préférable à celle de plasma, le sérum doit être obtenu par
centrifugation à 1500 g pendant 10 minutes pour éviter des résidus de fibrine qui pourraient interférer
avec la réaction.
a) Hématies (pour autocontrôle ou test direct à l‘antiglobuline)
Préparer une suspension d‘hématies à 0,8% dans ID-Diluent 2 en procédant comme suit:
Ramener le diluent à température ambiante avant utilisation.
1. Distribuer 1,0 mL d’ID-Diluent 2 dans un tube propre.
2. Ajouter 10 μL d‘hématies concentrées, mélanger doucement.
La suspension peut être utilisée immédiatement.
b) Plasma ou sérum
Si les échantillons ne sont pas testés immédiatement, ils devront être conservés après décantation à 2-8
°C. Pour une conservation supérieure à 48 heures, il est conseillé de les congeler à -20 °C.
Une contrôle de qualité interne devront être inclus en concordance avec les régulations valables pour
l’assurance de qualité.
Ne pas utiliser les cartes ID présentant des signes de desséchement, des bulles d‘air dans le gel, un
système de fermeture endommagé, des goutelettes de gel ou de surnageant sur les paroies supérieures
des micotubes ou sur la face interne de la languette d‘aluminium.
Ramener les réactifs à température ambiante avant utilisation.
1. Identifier la carte ID avec le numéro d’enregistrement unique du patient ou donneur / toutes
identifications pertinentes.
2. Décoller la languette d‘aluminium des microtubes nécessaires en tenant la carte ID en position
verticale.
3. Pipetter 50 μL de chaque hématies-test aux microtubes appropriés.
4. Ajouter 50 μL de plasma ou sérum du patient à chaque microtube.
5. Une incubation de 10 minutes à température ambiante est recommandée (voir remarque 3).
6. Centrifuger la carte-ID pendant 10 minutes dans l‘ID-Centrifuge.
7. Lire et noter les réactions.
Si un autocontrôle est inclus dans la combinaison, distribuer 50 μL de la suspension d’hématies de
l’échantillon au microtube approprié et ajouter 50 μL de sérum/plasma de l’échantillon. Si un test direct
à l’antiglobuline (TDA) est inclus dans la combinaison, distribuer 50 μL de la suspension d’hématies de
l’échantillon au microtube approprié (sans ajouter de sérum ou plasma).

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Interprétation des
résultats
Remarques
Limites
Bibliographie
A) Principe
Positif: Hématies agglutinées formant une ligne rouge à la surface du gel ou des
agglutinats dispersés dans le gel.
Négatif: Hématies en culot compact au fond du microtube.
B) Réactions de l‘épreuve sérique
Hématies-Tests Groupe sanguin
A 1 A 2 B O
négatif négatif + à ++++ négatif A
+ à ++++ ± à ++++ négatif négatif B
négatif négatif négatif négatif AB
+ à ++++ + à ++++ + à ++++ négatif O
Note: Pour être complet, un groupage ABO nécessite que l’épreuve érythrocytaire et l’épreuve sérique
soient parfaitement concordantes. En cas de différences, des investigations supplémentaires, seront
nécessaires.
C) Réactions de la recherche d’anticorps
- Des réactions négatives avec toutes les hématies-tests correspondantes indiquent l’absence
d’anticorps détectables.
- Des réactions positives avec une ou plusieures hématies-tests correspondante évoque la présence
d’anticorps irrégulier et des tests supplémentaires sont nécessaires pour préciser la spécificité de
l’anticorps.
- Lorsqu’on observe des réactions positives avec toutes les hématies-tests correspondantes, il
est souhaitable de pratiquer un autocontrôle et des investigations supplémentaires (Recherche
d’anticorps complète à 37 °C), (voir Remarques).
- Lorsqu’un microtube avec antiglobuline est utilisé pour un test direct à l’antiglobuline (TDA) et qu’il
révèle une réaction positive, des investigations supplémentaires sont nécessaires pour en élucider la
cause.
1. Un autocontrôle positif suggère la présence d’un autoanticorps; toutefois, des procédures adéquates
devront être effectuées pour éliminer la présence d’un alloanticorps sous-jacent, dans le
sérum/plasma du patient.
2. Un autocontrôle négatif avec une recherche d’anticorps positive indique la présence d’un
alloanticorps et des procédures d’identification d’anticorps devront être entreprises pour déterminer
la spécificité de l’anticorps.
3. Pour l’épreuve de groupage sérique une incubation d’un minimum de 10 minutes à 18-25 °C avant
centrifugation potentialisera la réaction et réduira le nombre de contrôles dus à des iso agglutinines
faibles.
4. Il est déconseillé de réaliser à température ambiante le dépistage d‘anticorps irrégulier cliniquement
important au cours de la grossesse et chez les receveurs.
a) Les cartes-ID présentant des bulles d‘air dans le gel ou des goutelettes dans la partie supérieur des
microtubes ou sur la languette métallique doivent être centrifugées avant utilisation.
b) Les conditions de réaction optimale peuvent varier considérablement d’un type d’anticorps à l’autre.
Par conséquent, une seule technique peut être insuffisante pour détecter tous les anticorps et une
procédure de test combiné devrait être appliquée.
c) Certains médicaments sont connus pour entraîner des tests positifs à l’antiglobuline humaine.
d) Des conditions pathologiques ont été également décrites comme provoquant des résultats positifs
au test à l‘antiglobuline humaine.
e) Des contaminations, bactériennes ou autres, du matériel utilisé peuvent provoquer des résultats
faussement positifs ou faussement négatifs.
f) Des résidus de fibrine dans la suspension d’hématies peuvent emprisonner quelques cellules non
agglutinées, formant ainsi une fine ligne rose à la surface du gel, alors que la plupart des hématies
sont dans le fond du microtube aprés centrifugation.
g) L’observation stricte des méthodes et l’emploi de l’équipement recommandé sont essentiels.
L’équipement doit être régulièrement contrôlé selon les procédures des BPL.
h) L’utilisation d’hématies-tests autres que les ID-DiaCell peut modifier l’aspect des réactions.
i) Des suspensions d’hématies trop concentrées ou trop diluées peuvent provoquer des résultats
aberrants.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Produits Carte-ID “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
24 x 12 . . . . . . REF 003017
60 x 12 . . . . . . REF 003016
112 x 12 . . . . . . REF 003015
Ces produits sont garantis quant à leurs propriétés et qualités stipulées sur l’étiquette et dans le mode
opératoire. Le fabricant décline toute responsabilité pour les cas où ces produits seraient employés ou
vendus à d’autres usages.
Interpretation
of results
Remarks
Limitations
Bibliography
A) Principle
Positive: Agglutinated cells forming a red line on the surface of the gel or agglutinates dispersed
in the gel.
Negative: Compact button of cells on the bottom of the microtube.
B) Reactions for reverse grouping
Test cell reagents Blood group
A 1 A 2 B O
negative negative + to ++++ negative A
+ to ++++ ± to ++++ negative negative B
negative negative negative negative AB
+ to ++++ + to ++++ + to ++++ negative O
Note: Full ABO typing requires that the forward (cell) group determination and reverse (serum/plasma)
group show concordance. Where there is a discrepancy, further investigation should be undertaken
to establish the cause and ascertain the true ABO-type. Reaction patterns other than those indicated
require further investigation.
C) Reactions for antibody screening
- Negative reactions with all antibody screening cells indicate the absence of detectable antibodies.
- Positive reactions with one or more antibody screening cells suggest the presence of irregular
antibodies, and further investigation is required to determine the antibody specificity.
- Where there are positive reactions with each antibody screening cell, it is advisable to perform an
autocontrol and to proceed to further tests (complete antibody screening at 37 °C), (see Remarks).
- Where an AHG-microtube was used to perform a DAT, and there is a positive reaction, further
investigation to elucidate the cause should be undertaken.
1. A positive autocontrol suggests the presence of an autoantibody; however, appropriate laboratory
procedures should be performed to exclude the possible presence of an underlying alloantibody in
the patient’s plasma/serum.
2. A negative autocontrol with positive antibody screening results indicates the presence of an
alloantibody and antibody identification procedures should be undertaken in order to determine the
specificity.
3. For reverse grouping, an incubation of at least 10 minutes at 18-25 °C prior to centrifugation will
enhance the reactions and minimise repeat testing due to weak isoagglutinins.
4. Antibody screening at room temperature is not recommended for detection of clinically important
antibodies in antenatal patients or transfusion recipients.
a) ID-Cards which show air bubbles in the gel or drops in the upper part of the microtubes and/or the
seal, must be centrifuged before use.
b) The optimal reaction conditions may vary considerably from one type of antibody to another.
Consequently, one single test method may be insufficient to detect all antibodies and combined test
procedures should be applied.
c) Certain drugs are known to cause positive reactions in anti-human globulin procedures.
d) Some pathological conditions are also reported as causing positive reactions in anti-human
globulin procedures.
e) Bacterial or other contamination of materials used can cause false positive or false negative results.
f) Fibrin residues in the red cell suspension may trap non-agglutinated cells presenting a fine pink line
on top of the gel while most of the cells are on the bottom of the microtube after centrifugation.
g) Strict adherence to the procedures and recommended equipment is essential. The equipment should
be checked regularly according to GLP procedures.
h) Use of test cells other than the ID-DiaCells may modify the reaction patterns.
i) Too heavy or too weak red cell suspensions can cause aberrant results.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Products ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
24 x 12 . . . . . . REF 003017
60 x 12 . . . . . . REF 003016
112 x 12 . . . . . . REF 003015
These products are guaranteed to perform as described on the label and in the instruction sheet. The
manufacturer declines all responsibility arising out of the use or sale of these products in any way or for
any purpose other than those described therein.
Interpretation der
Ergebnisse
DiaMed SA, 1785 Cressier s/Morat, Suisse 0123 DiaMed AG, 1785 Cressier s/Morat, Switzerland 0123 DiaMed AG, 1785 Cressier s/Morat, Schweiz 0123
Anmerkungen
Einschränkungen
Literatur
A) Prinzip
Positiv: Agglutinierte Erythrozyten bilden eine rote Linie auf dem Gel oder sind im Gel verteilt.
Negativ: Kompaktes Erythrozytensediment am Boden des Mikroröhrchens.
B) Reaktionen für die Serumgegenprobe
Testerythrozyten Blutgruppe
A 1 A 2 B O
negativ negativ + bis ++++ negativ A
+ bis ++++ ± bis ++++ negativ negativ B
negativ negativ negativ negativ AB
+ bis ++++ + bis ++++ + bis ++++ negativ O
Bemerkung: Für ein gültiges Resultat müssen die Antigenbestimmung mit Testseren und die
Serumgegenprobe übereinstimmen. Bei Unstimmigkeit der beiden Verfahren ist die Blutgruppe nicht
festlegbar und weitere Abklärungen sind vorzunehmen.
C) Reaktionen im Antikörper-Suchtest
- Negative Reaktionen mit allen Antikörper-Suchtestzellen bedeuten Abwesenheit von nachweisbaren
Antikörpern.
- Positive Reaktionen mit einer oder mehreren Antikörper-Suchtestzellen zeigt die Anwesenheit
irregulärer Antikörper an. Weitere Untersuchungen zur Identifizierung sind vorzunehmen.
- Bei positiven Reaktionen mit allen Suchtestzellen sollte eine Eigenkontrolle durchgeführt werden
und weitere Untersuchungen sind vorzunehmen (kompletter Antikörper-Suchtest bei 37 °C), (siehe
Anmerkungen).
- Wo ein AHG-Mikroröhrchen benützt wurde, um einen DAT durchzuführen und dieser positiv reagiert,
sind weitere Untersuchungen vorzunehmen, um die Ursache aufzuklären.
1. Eine positive Eigenkontrolle kann das Vorhandensein eines Autoantikörpers anzeigen, jedoch
sollten Abklärungen vorgenommen werden, um die mögliche Anwesenheit eines versteckten
Alloantikörpers auszuschliessen.
2. Eine negative Eigenkontrolle mit positivem Antikörper-Suchtestzellenergebnis zeigt die Anwesenheit
eines Alloantikörpers an, der mit weiteren Testverfahren identifiziert werden sollte.
3. Eine Inkubation der Serumgegenprobe für mindestens 10 Minuten bei 18-25 °C vor der
Zentrifugation verbessert die Reaktionen und minimierte die Anzahl der Wiederholungen, die
aufgrund schwacher Reaktionsausfälle der Isoagglutinine evtl. getätigt werden müssen.
4. Ein Antikörpersuchtest bei Raumtemperatur ist nicht für die Erkennung von klinisch relevanten
Antikörpern im Rahmen der Schwangerschaftsvorsorge und des Transfusionswesens geeignet.
a) ID-Karten mit Luftblasen im Gel oder Tropfen im oberen Bereich der Mikrokammern und/oder
Versiegelung müssen vor Gebrauch zentrifugiert werden.
b) Die optimalen Reaktionsbedingungen können zwischen Antikörperarten sehr unterschiedlich sein.
Dementsprechend reicht ein einziges Testverfahren nicht immer aus, um alle Antikörper
nachzuweisen. Es sollten kombinierte Testverfahren angewendet werden.
c) Es ist bekannt, dass bestimmte Medikamente positive Reaktionen im AHG-Test hervorrufen können.
d) Einige Krankheitsbilder können positive AHG-Reaktionen hervorrufen.
e) Bakterielle oder andere Kontaminationen des verwendeten Materials können falsch positive oder
falsch negative Ergebnisse verursachen.
f) Fibrinreste in der Erythrozytensuspension können nicht-agglutinierte Erythrozyten verkleben, die
sich als feine rosa Linie auf der Geloberfläche darstellen, während die meisten Erythrozyten nach
Zentrifugation am Boden der Mikroröhrchen ein kompaktes Sediment bilden.
g) Striktes Befolgen der Anleitungen und Verwendung des erforderlichen Arbeitmaterials sind
unerlässlich. Das Arbeitsmaterial sollte regelmässig entsprechend der GLP-Richtlinien überprüft
werden.
h) Die Verwendung von anderen Testerythrozytenreagenzien als ID-DiaCell kann zu abweichenden
Reaktionen führen.
i) Zu starke oder zu schwache Erythrozytensuspensionen können abnormale Reaktionen hervorrufen.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Produkte ID-Karte “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
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60 x 12 . . . . . . REF 003016
112 x 12 . . . . . . REF 003015
Für diese Produkte wird nur Garantie übernommen, wenn sie gemäss den Angaben auf dem Etikett und
der Anwendungsvorschrift verwendet werden. Jegliche Verantwortung wird ausdrücklich abgelehnt,
wenn das Präparat für andere Zwecke gebraucht oder verkauft wird.

Italiano B003014 01.07 Español B003014 01.07 Português B003014 01.07
Scheda-ID “Reverse grouping with antibody screening”
Determinazione del gruppo indiretta combinata con lo
screening degli anticorpi
Identificazione prodotto: 50510
Introduzione
Reagenti
Altri
reagenti
occorrenti
Altri
materiali
occorrenti
Campioni
Preparazione
del campione
Controlli
Procedura
La determinazione completa dei gruppi sanguigni ABO è considerata attendibile solo se il risultato del
gruppo diretto è confermato dalla controprova sierologica.
La controprova sierologica utilizza eritrociti con specificità antigenica nota per gli antigeni ABO per
indicare la presenza o l’assenza di isoagglutinine anti-A o anti-B, le cui reazioni determinano il gruppo
indiretto. Eventuali discrepanze tra la determinazione diretta e la determinazione indiretta richiedono
ulteriori indagini.
Secondo una buona prassi di laboratorio la determinazione ABO è incompleta senza uno screening che
rilevi la presenza di anticorpi irregolari.
La scheda ID “Reverse grouping with antibody screening”, utilizzata in abbinamento ai reagenti
cellulari “ID-DiaCell ABO/I-II” o “ID-DiaCell ABO/I-II-III”, consente di eseguire la determinazione del
gruppo indiretto e uno screening degli anticorpi (test indiretto dell’ antiglobulina a temperatura
ambiente) in un’unica semplice procedura, offrendo le seguenti combinazioni di profili di analisi
secondo le esigenze individuali:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / ac-I-II” o “A 1 -A 2 -B / DAT-I-II”.
Scheda ID “Reverse grouping with antibody screening” con 3 microprovette contenenti gel neutro e 3
microprovette contenenti siero dell’antiglobulina umana (anti-IgG di coniglio e anti-C3d monoclonale,
linea cellulare C139-9), nella matrice del gel.
Conservante: < 0,1% NaN 3
Non conservare vicino a fonti di calore, impianti di condizionamento o
griglie di ventilazione.
Stabilità: vedere la data di scadenza sull‘etichetta.
• Diluente ID 2: LISS modificata per la preparazione di sospensioni eritrocitarie.
• ID-DiaCell ABO / I-II (A1-A2-B-O / I-II), pronti all’uso
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A1-A2-B / I-II-III), pronti all’uso
(consultare la relativa scheda tecnica)
• Dispensatore ID
• Pipettatore ID
• Puntali ID (puntali per pipettatore)
• Provette per sospensione
• Stazione di lavoro ID
• Centrifuga ID 6, 12 o 24
Per ottenere risultati attendibili, si consiglia di eseguire la determinazione su un campione fresco o
conforme alle procedure del laboratorio per i criteri di accettazione dei campioni. I campioni devono
essere prelevati preferibilmente in citrato, EDTA o CPD-A. Si possono comunque usare anche campioni
prelevati in provette normali (senza anticoagulante).
Se si richiede l‘uso di siero invece che di plasma, il siero deve essere ben chiarificato mediante
centrifugazione a 1500 g per 10 minuti prima dell‘uso per evitare ogni residuo di fibrina che possa
interferire con il pattern di reazione.
a) Eritrociti (per autocontrollo o DAT)
Preparare una sospensione di eritrociti allo 0,8% in ID-Diluent 2 nel modo seguente:
Prima dell‘uso portare il diluente a temperatura ambiente.
1. Pipettare 1,0 mL di ID-Diluent 2 in una provetta pulita.
2. Aggiungere 10 μL di emazie concentrate, mescolare delicatamente.
La sospensione può essere usata immediatamente.
b) Siero o plasma
I campioni che non devono essere analizzati immediatamente vanno conservati a 2-8 °C dopo la
separazione per un massimo di 48 ore, successivamente a -20 °C.
Si consiglia di includere sempre controlli noti positivi e negativi in conformità alle direttive vigenti in
materia di garanzia di qualità.
Non utilizzare ID-Cards che mostrano segni di disidratazione, bolle, pellicole danneggiate, gocce di gel o
surnatante nella parte superiore delle microprovette o sotto la copertura di alluminio.
Prima dell‘uso portare le emazie testo e i campioni a temperatura ambiente, quindi risospendere
delicatamente.
1. Identificare in modo appropriato la Scheda ID con il corrispondente numero e/o i dati relativi al
paziente o al donatore.
2. Rimuovere la copertura di alluminio dalle microprovette da utilizzare, tenendo la ID-Card in posizione
verticale.
3. Pipettare 50 μL di ciascuna emazie testo di prova nella microprovetta corrispondente.
4. Aggiungere ad ogni microprovetta 50 μL del plasma o siero del paziente.
5. Si raccomanda di incubare per 10 minuti a temperatura ambiente (vedere note, punto 3).
6. Centrifugare la scheda ID per 10 minuti nella centrifuga ID.
7. Leggere e annotare le reazioni.
Se la combinazione del test prevede un autocontrollo, pipettare 50 μL della sospensione di eritrociti
ottenuta dal campione nella microprovetta corrispondente e aggiungere 50 μL del plasma o siero del
campione. Se la combinazione del test prevede un test diretto dell’antiglobulina (DAT), pipettare
50 μL della sospensione di eritrociti ottenuta dal campione nella microprovetta corrispondente (senza
aggiungere plasma o siero).
Tarjeta ID “Reverse grouping with antibody screening”
Determinación del grupo sanguíneo mediante prueba
inversa, combinada con detección de anticuerpos
Identificacíon del producto: 50510
Introducción
Reactivos
Reactivos
adicionales
necesarios
Otros
materiales
necesarios
Muestras
Preparación de la
muestra de sangre
Controles
Realización de
la prueba
La determinación del grupo sanguíneo ABO requiere realizar una prueba inversa con plasma o suero
para confirmar los resultados obtenidos en la prueba hemática (prueba directa).
La prueba inversa precisa hematíes reactivo, con una especifidad antigénica ABO conocida para indicar
la presencia o ausencia en el plasma o en el suero de isoaaglutininas anti-A y/o anti-B. Las discrepancias
detectadas en la determinación del grupo sanguíneo ABO entre las pruebas directa (hemática) e inversa
(sérica) requieren una investigación adicional.
Según las prácticas cirrectas de laboratorio, la determinación del grupo ABO debe ser completado con
und méthodo sisemático de detección de anticuerpos irregulares.
La tarjeta ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” se usa con los hematíes reactivo
“ID-DiaCell ABO/I-II” o “ID-DiaCell ABO/I-II-III”, permitiendo la determinación en un único proceso, del grupo
sanguíneo mediante prueba inversa y la detección de anticuerpos (prueba de antiglobulina indirecta a
temperatura ambiente) en un único procedimiento sencillo irregulares (prueba de antiglobulina indirecta PAI) a
temperatura ambiente. Según las necesidades de cada usuario pueden estudiarse distintos perfiles analíticos:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / ac-I-II” o “A 1 -A 2 -B / DAT-I-II”.
Tarjeta ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” con 3 microtubos que contienen gel neutro
y 3 microtubos que contienen suero antiglobulina humana (anti-IgG de conejo y anti-C3d monoclonal,
línea celular C139-9) en el interior de la matriz de gel.
Conservante: < 0,1% NaN 3 .
No almacenar en las proximidades de fuentes de calor, aire acondicionado o
ventilación.
Estabilidad: véase fecha de caducidad en la etiqueta.
• ID-Diluent 2: solución de LISS modificada para suspensión de eritrocitos
• ID-DiaCell ABO / I-II (A 1 -A 2 -B-O / I-II), listo para usar
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A 1 -A 2 -B / I-II-III), listo para usar
(véase el prospecto correspondiente)
• ID-Dispenser
• ID-Pipetor
• ID-Tips (puntas para pipetas)
• Tubos de suspensión
• ID-Working table (superficie de trabajo)
• ID-Centrifuge (centrífuga) 6, 12 o 24
Para un resultado óptimo, la determinación debe realizarse con una muestra recién extraída, o
cumpliendo la normativa local del laboratorio en cuanto a criterios de aceptabilidad de las muestras.
Preferiblemente, las muestras de sangre deben recogerse utilizando citrato, EDTA o CPD-A como
anticoagulante. También es posible utilizar muestras recogidas en tubos sin anticoagulante.
Cuando sea necesario emplear suero en vez de plasma, el suero debe someterse a una centrifugación a
1500 g durante 10 minutos antes de su uso, para evitar la presencia de residuos de fibrina que podrían
interferir con el patrón de reacción.
a) Eritrocitos (para autocontrol o prueba de antiglobulina directa)
Prepare una suspensión de eritrocitos al 0,8% en ID-Diluent 2 del modo siguiente:
Deje que el diluyente alcance la temperatura ambiente antes de utilizarlo.
1. Pipetee 1,0 mL de ID-Diluent 2 en un tubo limpio.
2. Añada 10 μL de eritrocitos concentrados y agite suavemente.
La suspensión de eritrocitos puede utilizarse inmediatamente.
b) Suero o plasma
Cuando las muestras no vayan a analizarse inmediatamente deben conservarse a 2-8 °C después de la
separación durante un máximo de 48 horas, y después a -20 °C
Deben incluirse muestras positivas y negativas conocidas de acuerdo con las normas de garantía de
calidad aplicables.
No usar las ID-Tarjetas que muestren signos de desecación, burbujas en el gel, sellado defectuoso,
gotas de gel o de sobrenadante en la parte superior de los microtubos o en la superficie interior del
aluminio de sellado.
Deje que los eritrocitos reactivo y las muestras alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos y
resuspéndalos cuidadosamente.
1. Identificar la ID-Tarjeta con el número o nombre de identificación del donante o del paciente.
2. Retirar la lámina de sellado sólo de los microtubo que se vayan a utilizar manteniendo la ID-Tarjeta
en posición vertical.
3. Pipetee 50 μL de cada hematíe reactivo en el microtubo bien identificado.
4. Añada 50 μL del suero o plasma del paciente a cada microtubo.
5. Se recomienda una incubación de 10 minutos a temperaura ambiente (ver observaciones, apartado 3).
6. Centrifugue la tarjeta ID-Card durante 10 minutos en la ID-Centrifuge.
7. Lea y registre los resultados.
Si el perfil analítico incluye un autocontrol, pipetee 50 μL de la suspensión de eritrocitos de la muestra
en el microtubo correspondiente y añada 50 μL del plasma o suero de la muestra.
Si el perfil analítico incluye un prueba de antiglobulina directa (PAD), pipette 50 μL de la suspensión de
eritrocitos de la muestra en el microtubo correspondiente (sin añadir ni plasma ni suero).
Card-ID “Reverse grouping with antibody screening”
Prova reversa combinada com pesquisa de anticorpos
Identificação do produto: 50510
Introdução
Reagentes
Reagentes
adicionais
necessários
Outros
materiais
necessários
Amostras
Preparação da
amostra de sangue
Controlos
Procedimento
do teste
A determinação do grupo sanguíneo ABO exige a realização da prova reversa com plasma ou soro, a
fim de confirmar a exactidão do grupo sanguíneo ABO (prova directa).
A prova reversa utiliza reagentes eritrócitos-teste de especificidade antigénica ABO conhecida para
indicar a presença ou ausência de isoaglutininas anti-A e anti-B, cujos resultados determinam a prova
reversa. As discrepâncias entre as provas eritrocitária e sérica requerem investigação complementar.
A boa prática laboratorial determina que a grupagem ABO está incompleta sem um procedimento de
pesquisa para detectar a presença de anticorpos irregulares.
O Card-ID “Reverse grouping with antibody screening” é utilizado com os eritrócitos-teste “ID-DiaCell
ABO/I-II” ou “ID-DiaCell ABO/I-II-III”, permitindo a prova reversa e o pesquisa de anticorpos (teste de
antiglobulina indirecto à temperatura ambiente) num procedimento de teste único e simples. Permite as
seguintes combinações de perfis, segundo as necessidades individuais:
“A 1 -A 2 -B-O / I-II”, “A 1 -A 2 -B / I-II-III”, “A 1 -A 2 -B / ac-I-II” ou “A 1 -A 2 -B / TAD-I-II”.
Card-ID “Reverse grouping with antibody screening” consistindo em 3 microtubos contendo gel neutro
e 3 microtubos contendo soro de antiglobulina humana (anticorpos anti-IgG de coelho e anti-C3d
monoclonal de coelho, clone C139-9) no gel.
Conservante: < 0,1% NaN 3 .
Não conservar perto de qualquer fonte de calor ou de ar condicionado nem de
saídas de ventilação.
Estabilidade: ver prazo de validade no rótulo.
• ID-Diluent 2: LISS modificada para suspensão de eritrócitos.
• ID-DiaCell ABO / I-II (A1-A2-B-O / I-II), prontos a usar
• ID-DiaCell ABO / I-II-III (A1-A2-B / I-II-III), prontos a usar
(ver folheto informativo correspondente)
• ID-Dispenser
• ID-Pipetor
• ID-Tips (pontas para pipetador)
• Tubos de Suspensão
• ID-Working table
• ID-Centrifuge 6, 12 ou 24
Para obtenção dos resultados ideais, a determinação deve ser realizada numa amostra
recentemente colhida, ou em conformidade com os critérios de aceitação do procedimento laboratorial
local. As amostras de sangue devem, de preferência, ser colhidas em anticoagulante citrato, EDTA ou
CPD-A. Também é possível utilizar amostras colhidas em tubos limpos (sem anticoagulante).
Sempre que for preferível utilizar soro em vez de plasma, o soro deve ser bem limpo por
centrifugação a 1500 g durante 10 minutos antes de ser utilizado, a fim de evitar resíduos de fibrinas
que poderiam interferir com o padrão da reacção.
a) Eritrócitos (para autocontrolo ou TAD - teste de antiglobulina directo)
Prepare uma suspensão de eritrócitos a 0,8% em ID-Diluent 2 do seguinte modo:
Antes de utilizar, deixe o diluente atingir a temperatura ambiente.
1. Dispense 1,0 mL de ID-Diluent 2 num tubo limpo.
2. Adicione 10 μL de concentrado de eritrócitos, misture suavemente.
A suspensão de eritrócitos pode ser utilizada de imediato.
b) Soro ou plasma
No caso das amostras não serem testadas de imediato, deverão ser conservadas a 2-8 °C após
decantação no máximo durante 48 horas; Por mais tempo -20 °C.
Amostras positivas e negativas conhecidas devem ser incluídas em conformidade com as directrizes
relevantes para controlo da qualidade.
Não usar Cards-ID que tenham sinais de secagem, bolhas, selos danificados, gotas de gel ou
sobrenadante na parte superior dos microtubos ou na parte de baixo da película de alumínio.
Antes de utilizar, deixe os eritrócitos-teste e as amostras atingirem a temperatura ambiente e volte
suspender suavemente.
1. Identifique o Card-ID com o número ou dado únicos do doente ou dador, conforme os casos.
2. Retirar a película de alumínio de todos os microtubos necessários segurando o Card-ID na posição
vertical.
3. Pipete 50 μL de suspensão de cada eritrócito-teste para os microtubos apropriados.
4. Adicione 50 μL de soro ou plasma do doente a cada microtubo.
5. Recomenda-se uma incubação de 10 minutos à temperatura ambiente (ver observações, ponto 3).
6. Centrifugue o Card-ID durante 10 minutos na ID-Centrifuge.
7. Leia e anote os resultados.
No caso da combinação do teste incluir um autocontrolo, pipete 50 μL de suspensão de eritrócitos da amostra
para o microtubo apropriado e adicione 50 μL de plasma ou soro da amostra.
No caso da combinação do teste incluir um teste de antiglobulina directo (TAD), pipete 50 μL de suspensão de
eritrócitos da amostra para o microtubo apropriado (sem adicionar plasma nem soro).

Português B003014 01.07 Español B003014 01.07 Italiano B003014 01.07
Interpretação
dos resultados
Observações
Limitações
Bibliografia
A) Princípio
Positivo: Eritrócitos aglutinados formando uma linha vermelha à superfície do gel ou
aglutinados dispersos no gel.
Negativo: Botão compacto de eritrócitos no fundo do microtubo.
B) Reacções da prova reversa
Eritrócitos-Teste Grupo sanguíneo
A 1 A 2 B O
negativo negativo + a ++++ negativo A
+ a ++++ ± a ++++ negativo negativo B
negativo negativo negativo negativo AB
+ a ++++ + a ++++ + a ++++ negativo O
Nota: Uma grupagem ABO completa implica que as determinações da prova directa (eritrócitos) e da
prova reversa (soro/plasma) indiquem concordância. Em caso de discrepância, devem ser realizadas
investigações suplementares para definição da causa e determinação do verdadeiro tipo ABO. Os
padrões de reacção diferentes dos aqui indicados necessitam de investigações suplementares.
C) Reacções da pesquisa de anticorpos
- As reacções negativas com todos os eritrócitos de pesquisa de anticorpos indicam ausência de
anticorpos detectáveis.
- As reacções positivas com um ou mais eritrócitos de pesquisa de anticorpos sugerem a presença de
anticorpos irregulares, sendo necessárias investigações suplementares para determinar a
especificidade do anticorpo.
- Sempre que se verifiquem reacções positivas com todos os eritrócitos de pesquisa de anticorpos, é
aconselhável a realização de um autocontrolo e de investigações complementares (pesquisa
completa de anticorpos a 37 °C), (ver Observações).
- Sempre que for utilizado um microtubo com AGH para realizar um TAD (teste de antiglobulina
directo ) e se verifique uma reacção positiva, devem ser realizadas investigações suplementares para
esclarecer a causa.
1. Um autocontrolo positivo sugere a presença de um auto-anticorpo; no entanto devem ser realizados
os procedimentos adequados para excluir, a possível, presenca de um alo-anticorpo subjacente no
plasma/soro do doente.
2. Um autocontrolo negativo com resultado positivo do pesquisa de anticorpos indica a presença de
um alo-anticorpo, devendo realizar-se procedimentos de identificação do anticorpo a fim de
determinar a sua especificidade.
3. Para a prova reversa uma incubação de, pelo menos, 10 minutos a 18-25 ºC antes da centrifugação
potenciará as reacções, minimizando a repetição de testes devida às isoaglutininas fracas.
4. O despiste de anticorpos a temperatura ambiente não se recomenda para detecção de anticorpos
clinicamente importantes em grávidas nem doentes a transfundir.
a) Os cards-ID que tenham bolhas de ar no gel ou gotas na parte superior dos microtubos e/ou no
segmento de alumínio devem ser centrifugados antes de usar.
b) As condições ideais de reacção podem variar consideravelmente de um tipo de anticorpo para outro.
Por conseguinte, um único método de teste pode revelarse insuficiente para detectar todos os
anticorpos, devendo combinar-se diferentes procedimentos de teste.
c) É sabido que certos fármacos desencadeiam reacções positivas em testes de antiglobulina humana.
d) Também foram descritos alguns estados patológicos como origem de reacções positivas em testes
de antiglobulina humana.
e) A contaminação, bacteriana ou outra dos materiais utilizados pode causar resultados falsamante
positivos ou falsamente negativos.
f) Resíduos de fibrinas na suspensão de eritrócitos podem reter eritrócitos não aglutinados, formando
assim uma fina linha cor-de-rosa à superfície do gel, ao passo que a maior parte dos eritrócitos
migra para o fundo do microtubo após centrifugação.
g) O cumprimento estrito dos procedimentos e a utilização do equipamento recomendado são
essenciais. O equipamento deve ser verificado regularmente em conformidade com os
procedimentos de BPL.
h) A utilização de eritrócitos-teste diferentes de ID-DiaCells pode alterar os padrões de reacção.
i) Suspensões de eritrócitos demasiado concentradas ou demasiado diluidas podem provocar
resultados errados.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Produtos Card-ID “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
24 x 12 . . . . . . REF 003017
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112 x 12 . . . . . . REF 003015
Estes produtos são garantidos quanto ao seu comportamento funcional, tal como descrito no rótulo e
no folheto informativo. O fabricante declina toda a responsabilidade decorrente da utilização ou venda
destes produtos para fins diferentes dos aí descritos.
Interpretación de
los resultados
Observaciones
Limitaciones
Bibliografía
A) Principio
Positivo: La hematíes aglutinados forman una línea roja sobre la superficie del gel o están
repartidos en el gel.
Negativo: Sedimento compacto de hematíes en el fondo del microtubo.
B) Reacciones para la prueba inversa
Eritrocitos reactivo Grupo sanguíneo
A 1 A 2 B O
negativo negativo + a ++++ negativo A
+ a ++++ ± a ++++ negativo negativo B
negativo negativo negativo negativo AB
+ a ++++ + a ++++ + a ++++ negativo O
Nota: La determinación completa del grupo ABO exige una concordancia entre los resultados de la
prueba directa (en eritrocitos) y la prueba inversa (en suero/plasma). En caso de discrepancia debe
realizarse un estudio adicional para averiguar la causa y determinar el verdadero grupo ABO. Cualquier
patron de reacción distinto a los indicados exigen una investigación ulterior.
C) Reacciones para detección de anticuerpos
- Las reacciones negativas con todos los eritrocitos en la determinación de anti-cuerpos indican la
ausencia de anticuerpos detectables.
- Las reacciones positivas con uno o más de los hematíes usados para l detección de anticuerpos
sugieren la presencia de anticuerpos irregulares, lo que exige un estudio adicional para determinar
la especificidad de los mismos.
- Si aparecen reacciones positivas con todos los hematíes incluidos en la detección de anticuerpos, es
recomendable realizar un autocontrol y efectuar pruebas complementarias (detección completa de
anticuerpos a 37 °C), (véase el apartado “Observaciones”).
- Si se ha empleado un microtubo con antiglobulina humana (AHG) para realizar una prueba de
antiglobulina directa y existe una reacción positiva debe investigarse la causa.
1. Un autocontrol positivo sugiere la presencia de un autoanticuerpo; no obstante, deben realizarse
estudios analíticos complementarios para descartar la posible presencia de un aloanticuerpo
subyacente en el plasma/suero del paciente.
2. Un autocontrol negativo con resultados positivos en la detección de anticuerpos indica la presencia
de un aloanticuerpo, y debe iniciarse un estudio completopara identificar y determinar las
especificidad del anticuerpo.
3. En el grupo inverso o grupo sérico, una incubación de al menos 10 minutos a temperatura ambiente
(18-25 ºC) antes de centrifugar, favorece la reacción y minimiza el número de repeticiones por
presencia de isoaglutininas débiles.
4. El escrutinio de anticuerpos a temperatura ambiente no es recomendable para detectar anticuerpos
clínicamente significativos en pacientes neonatales o receptores de una transfusión.
a) Las ID-Tarjetas que muestren burbujas de aire en el gel o gotas en la parte superior de los
microtubos y/o de la lámina de sellado, deben ser centrifugadas antes de usarlas.
b) Las condiciones óptimas de reactividad pueden variar considerablemente de un anticuerpo a otro.
Por consiguiente, un método único de trabajo puede ser insuficiente para detectar todos los
anticuerpos. Deberan incluise en el estudio técnicas analíticas combinadas que permitan detectar
todos los anticuerpos.
c) Se sabe que algunos fármacos dan lugar a reacciones positivas en pruebas de antiglobulina humana.
d) También se ha referido que algunos estados patológicos pueden provocar reacciones positivas en
este tipo de pruebas.
e) La contaminación de los materiales empleados, bacteriana o de otro tipo, puede provocar falsos
positivos o falsos negativos.
f) Los restos de fibrina en la suspensión de eritrocitos pueden atrapar los hematíes no aglutinados, de
modo que aparezca una fina línea rosada en la parte superior del gel mientras que la mayoría de los
eritrocitos se encuentran en el fondo del microtubo tras el centrifugado.
g) Es esencial atenerse estrictamente a los procedimientos y equipos recomendados. El equipo debe
comprobarse periódicamente según la normativa de prácticas de laboratorio correctas (GLP).
h) El uso de eritrocitos reactivos que no sean “ID-DiaCell” puede modificar los patrones de reacción.
i) Las suspensiones de eritrocitos demasiado concentradas o demasiado diluidas pueden dar lugar a
resultados aberrantes.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Productos Tarjeta ID-Card “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
24 x 12 . . . . . . REF 003017
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Se garantiza que estos productos se comportarán según lo descrito en la etiqueta y en la hoja de
instrucciones. El fabricante declina toda responsabilidad en caso de que los productos se utilicen o
vendan para cualquier otro uso diferente de los allí descritos.
Interpretazione
dei risultati
DiaMed AG, 1785 Cressier s/Morat, Suíça 0123 DiaMed AG, 1785 Cressier s/Morat, Suiza 0123 DiaMed AG, 1785 Cressier s/Morat, Svizzera 0123
Note
Limitazioni
Bibliografia
A) Principio
Positivo: Gli eritrociti agglutinati formano una linea rossa sul gel o sono distribuiti nel gel.
Negativo: Bottone compatto di eritrociti sul fondo della provetta.
B) Reazioni eazioni per la determinazione del gruppo indiretto
Reagenti eritrocitici Gruppo sanguigno
A 1 A 2 B O
negativa negativa + a ++++ negativa A
+ a ++++ ± a ++++ negativa negativa B
negativa negativa negativa negativa AB
+ a ++++ + a ++++ + a ++++ negativa O
Nota: Per essere completa, la tipizzazione ABO richiede una perfetta concordanza fra la determinazione diretta
(eritrociti) e la determinazione indiretta (siero/plasma). In caso di discrepanze, si raccomanda di eseguire ulteriori
test per stabilirne la causa e accertare la corretta tipizzazione.
C) Reazioni per screening degli anticorpi
- Reazioni negative con tutte le emazie testo per lo screening indicano l’assenza di anticorpi rilevabili.
- Reazioni positive con uno o più emazie testo per lo screening indicano la presenza di anticorpi
irregolari; si dovranno eseguire ulteriori test per stabilire la specificità degli anticorpi.
- In caso di reazioni positive con tutte le emazie testo per lo screening, si consiglia di eseguire un
autocontrollo ed ulteriori test (screening degli anticorpi completo a 37 °C), (vedere Note).
- Se è stata utilizzata una microprovetta AHG per eseguire un DAT e si ottiene una reazione positiva,
dovranno essere eseguiti ulteriori test per chiarirne la causa.
1. Un autocontrollo positivo indica la presenza di un autoanticorpo, tuttavia si raccomanda di eseguire
un’adeguata procedura di laboratorio per escludere l‘eventuale presenza di un alloanticorpo nel
plasma/siero del paziente.
2. Un autocontrollo negativo con reazioni positive allo screening degli anticorpi indica la presenza di un
alloanticorpo, pertanto dovranno essere eseguite procedure di identificazione degli anticorpi per
accertarne la specificità.
3. Per il gruppo indiretto, un‘incubazione minima di 10 minuti a 18-25 °C prima della centrifugazione
rinforza le reazioni e minimizza le ripetizioni dovute alle isoagglutinine deboli.
4. La ricerca anticorpi a temperatura ambiente non è raccomandata per la rilevazione di anticorpi
clinicamente significativi in gestanti o in pazienti candidati alla trasfusione.
a) Le ID-Cards che mostrano bolle d’aria nel gel o gocce nella parte superiore del micropozzetto e/o sul
foglio di alluminio, devono essere centrifugate prima dell’uso.
b) Le condizioni di reazione ottimali possono variare considerevolmente da un tipo di anticorpo
all’altro. Ne consegue che un singolo procedimento di prova risulta insufficiente per rilevare tutti gli
anticorpi, pertanto dovranno essere applicate procedure di prova combinate.
c) E‘noto che certi medicinali possono causare reazioni positive nei test all’antiglobuline umana.
d) Anche alcune condizioni patologiche possono causare reazioni positive nei test all’antiglobuline
umana.
e) Contaminazioni batteriche o di altro tipo del materiale utilizzato possono essere causa di risultati
falsamente negativi o positivi.
f) Eventuali residui di fibrina nella sospensione di eritrociti possono aderire alle emazie non agglutinate
e farle apparire come una una sottile linea rosa sulla superficie del gel, mentre la maggior parte degli
eritrociti dopo la centrifugazione forma un bottone compatto sul fondo della provetta.
g) È indispensabile seguire scrupolosamente le istruzioni e impiegare il materiale di lavoro
raccomandato. Il materiale di lavoro deve essere controllato regolarmente secondo le direttive GLP.
h) L‘impiego di emazie testo diverse da ID-DiaCells può influire sui pattern di reazione.
i) Una sospensione di eritrociti troppo concentrata o troppo diluita può causare reazioni anomale.
1. Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; a new way to detect red cell antigen-antibody
reactions. Transfusion 1990; 30: 109-113.
Prodotti Scheda ID “Reverse grouping with antibody screening” 4 x 12 . . . . . . REF 003014
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Si garantiscono per questi prodotti le prestazioni descritte sull‘etichetta e nel foglio di istruzioni. Il
produttore declina ogni responsabilità derivante dall‘uso improprio o dalla vendita di questi prodotti per
scopi diversi da quelli qui descritti.