GELOSE AU VERT BRILLANT ET ROUGE DE ... - Terres de l'Yonne

GELOSE AU VERT BRILLANT ET ROUGE DE PHENOL
(selon Kristensen)
GELOSE AU VERT BRILLANT ET ROUGE DE PHENOL ............................................................................1
(selon Kristensen) ..........................................................................................................................................1
1 DOMAINE D’APPLICATION ...................................................................................................................1
2 MICRO-ORGANISMES MIS EN EVIDENCE ..........................................................................................1
3 COMPOSITION (pour 1 Litre) ET ROLES DES CONSTITUANTS .........................................................1
4 PRINCIPE ...............................................................................................................................................1
5 MODALITES D’UTILISATION .................................................................................................................2
5.1 ENSEMENCEMENT............................................................................................................................2
5.2 INCUBATION.......................................................................................................................................2
6 MODALITES DE LECTURE....................................................................................................................2
7 ASPECTS DU MILIEU ............................................................................................................................2
7.1 ASPECT DU MILIEU NEUF STERILE ................................................................................................2
7.2 ASPECT DU MILIEU NEUF APRES INCUBATION ............................................................................2
1 DOMAINE D’APPLICATION
Analyses microbiologiques en hygiène alimentaire et analyses médicales
2 MICRO-ORGANISMES MIS EN EVIDENCE
Espèces de Salmonella à l’exception de Salmonella Typhi
3 COMPOSITION (pour 1 Litre) ET ROLES DES CONSTITUANTS
Tryptone 5 g Elément nutritif, source de carbone et d’azote
(acide aminé = facteur de croissance)
Peptone pepsique de viande 5 g Elément nutritif, source de carbone et d’azote
(acide aminé = facteur de croissance)
Lactose 10 g Elément nutritif, source de carbone et d’énergie
Saccharose 10 g Elément nutritif, source de carbone et d’énergie
Chlorure de sodium 5 g Asuure l’isotnie
Rouge de phénol 80 mg Indicateur de pH
Vert brillant 12.5 mg Inhibiteur des micro-organismes Gram +
Agar agar bactériologique 13.5 g Agent gélifiant
4 PRINCIPE
L’inhibition de la flore Gram positif et de la plupart des germes Gram négatif est due à la présence de vert brillant.
Le milieu contient deux glucides : lactose et saccharose pour lesquels la fermentation de l’un ou l’autre ou des deux se
traduit par un abaissement de pH, provoquant l’apparition de colonies colorés en jaune-vert en présence de
l’indicateur de pH, le rouge de phénol. Les salmonelles produisent des colonies incolores à rôsatres.
En raison de son pouvoir inhibiteur élevé, ce milieu permet la mise en œuvre d’un inoculum fortement élevé.
Fiche technique – Gélose Kristensen – Typhaine Turgis 1

5 MODALITES D’UTILISATION
5.1 ENSEMENCEMENT
Ce milieu s’ensemence en strie et avec quadrant.
5.2 INCUBATION
Une incubation de 24 h et de 48h à 37°C est nécessaire.
6 MODALITES DE LECTURE
L’aspect des colonies est le suivant :
Colonies incolores à rosées, lisses, entourées de zones rouges dans le milieu : Salmonella lactose/saccharose
négatif à l’exclusion des Salmonella Typhi et Paratyphi.
Pas de croissance ou très faible : Shigella
Colonies jaunes à verdâtres, entourées de zones jaune-vert dans le milieu : Escherichia coli, Citrobacter,
Klebsiella, Enterobacter (lactose/saccharose positif)
Culture totalement ou presque totalement inhibées : Bactéries à Gram positif
7 ASPECTS DU MILIEU
7.1 ASPECT DU MILIEU NEUF STERILE
La gélose est initialement de couleur orange, à pH 7 et 25°C
7.2 ASPECT DU MILIEU NEUF APRES INCUBATION
Des colonies plates, brillantes et lisses, présentant un halo
jaune. Les bactéries correspondantes ont utilisé les sucres.
Il s’agit probablement d’E.coli, de Citrobacter ou encore
d’Enterobacter
Une gélose qui vire au rose, ce qui montre une forte
alcalinisation ; des colonies incolores à rosées, lisses et
brillantes
Il ne peut s’agir que de Salmonella
Fiche technique – Gélose Kristensen – Typhaine Turgis 2