E. coli
E. coli
E. coli
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
A NORMÁL BÉLFLÓRA<br />
ÉS JELENTŐSÉGE<br />
Dr. Dobay Orsolya
hypoaciditás<br />
↓<br />
baktériumok száma<br />
↑ ↑ ↑<br />
Coliform-ok =<br />
Enterobacteriaceae
http://mpicel.myweb.uga.edu
Vastagbél normál flórája<br />
• > 10 11 baktérium / g széklet !!<br />
• Túlnyomórészt obligát anaerobok ! (90-95%)<br />
– Bifidobacterium<br />
– Eubacterium - Fusobacterium<br />
– Bacteroides - Lactobacillus<br />
– Clostridium<br />
• Fakultatív anaerobok<br />
– Enterococcus<br />
> 400 species !!<br />
– Enterobacteriaceae<br />
• E. <strong>coli</strong>: csupán ~ 1% !
A normál bélflóra szerepe<br />
• Enzimtermelés<br />
– Ureáz, dezamináz, észteráz, …<br />
• Vitamintermelés<br />
– K vitamin, fólsav, thiamin (B1), riboflavin (B2), niacin<br />
(B3), pantoténsav (B5), …<br />
• Állandó antigén stimulus<br />
– Immunitás „ébren tartása”<br />
• Az epithel sejtek fizikai-kémiai megújítása<br />
• Perisztaltika elősegítése<br />
• Gáztermelés<br />
• Patogének távoltartása !!
Újszülöttek kolonizációja<br />
• A születés pillanatában: steril<br />
• Normál, hüvelyi szülésnél:<br />
– azonnali találkozás az anya flórájával<br />
• Császáros szülésnél:<br />
– késleltetett kolonizáció<br />
– esetleg a későbbiekben enterális és immunológiai<br />
problemák!<br />
• Befolyásoló tényezők:<br />
– az anya étkezési szokásai<br />
– anyatejes versus tápszeres táplálás<br />
– koraszülöttség, stb.<br />
• Kb. 1 éves korra a különbségek eltűnnek és hasonló<br />
lesz a normál felnőtt bélflórához.
A normál bélflóra egyensúlyának<br />
• Okok:<br />
felborulása<br />
– étkezési szokások megváltozása<br />
– széles spektrumú antibiotikum szedése<br />
• Következményei:<br />
– felszívódási zavarok<br />
– hypovitaminózis<br />
– perisztaltikus problémák<br />
– megnövekedett gázképzés<br />
• Antibiotikum hatására:<br />
– enyhe: hasmenés<br />
– súlyos: pszeudomembrános <strong>coli</strong>tis
Pszeudomembrános <strong>coli</strong>tis<br />
• Kórokozó: Clostridium difficile<br />
• „Antibiotic-associated infection” (AAD)<br />
• Toxintermelés<br />
• Láz, súlyos hasi panaszok<br />
http://img.medscape.com
GRAM- FAKULTATÍV<br />
ANAEROB PÁLCÁK<br />
ENTEROBACTERIACEAE<br />
„<strong>coli</strong>form-ok”
Normál flóra tagok<br />
(fakultatív patogének)<br />
• Escherichia <strong>coli</strong><br />
• Klebsiella spp.<br />
• Proteus spp.<br />
• Serratia spp.<br />
• Enterobacter spp.<br />
• Citrobacter spp.<br />
• Providencia spp.<br />
• Morganella spp.<br />
• …<br />
Enterobacteriaceae<br />
Obligát enterális<br />
patogének<br />
• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !<br />
• Salmonella<br />
• Shigella<br />
• Yersinia<br />
• Vibrio spp.<br />
• Helicobacter<br />
• Campylobacter
Enterobacteriaceae jellemzői<br />
• Gram negatív pálcák (2-4 µm)<br />
• Fakultatív anaerobok<br />
• Igénytelenül nőnek<br />
• Oxidáz negatívak<br />
• Elkülönítésük:<br />
– biokémiai reakciókkal<br />
– speciális táptalajokkal<br />
– szerológiával<br />
• O, K, H antigének
Az identifikáláshoz használt főbb<br />
biokémiai reakciók<br />
• Mikroszkóposan, táptalajon: TÚL EGYFORMÁK!<br />
• Cukorbontási reakciók:<br />
– laktóz<br />
– glükóz, maltóz, mannit, …<br />
• Fehérjebontással kapcsolatos reakciók:<br />
– Ureáz teszt<br />
– Indol teszt<br />
– H 2 S termelés<br />
• Automatizálás<br />
(pl. VITEK)
Legfontosabb biokémiai különbségek<br />
E. <strong>coli</strong> Klebsiella Proteus Salmonella Shigella<br />
Glükóz + + + + -<br />
Laktóz + + - - -<br />
H2S - - + +* -<br />
Ureáz - + + - -<br />
Indol + -/+ + - +<br />
*S. typhi: lassabban
Eozin-metilénkék (EM) táptalaj:<br />
az enterálisok fő táptalaja<br />
• Szelektív: Gram pozitívokat nem engedi kinőni<br />
• Differenciáló: laktóz pozitivitás alapján<br />
Laktóz +<br />
Sötét lila telepek<br />
E. <strong>coli</strong>, Klebsiella<br />
Laktóz –<br />
Rózsaszín telepek<br />
pl. Proteus, Salmonella
Normál flóra tagok<br />
fakultatív patogének<br />
(extraintesztinális fertőzések)
A bél normál flóra tagok által okozott<br />
extraintesztinális fertőzések<br />
• Húgyúti fertőzések (UTI)<br />
• Sebfertőzések<br />
• Intra-abdominális fertőzések<br />
– cholecystitis, cholangitis<br />
– peritonitis<br />
– hasűri tályogok<br />
• Légúti fertőzések (RTI)<br />
• Szepszis, meningitis<br />
• Szemfertőzések<br />
Nozokomiális<br />
Nozokomi lis<br />
fertőzések!<br />
fert sek!
Húgyúti fertőzések<br />
• Enterális traktus és húgyutak fizikai közelsége<br />
• E. <strong>coli</strong> (80%), Proteus, Klebsiella<br />
• Cystitis vagy felszálló fertőzés<br />
• Katéter-asszociált
Intra-abdominális fertőzések<br />
• Vastagbél perforáció<br />
• Peritonitis<br />
• Cholecystitis<br />
• Ascites képződés<br />
Akut peritonitis.<br />
Gyulladás és<br />
ödéma.<br />
fertőzött hasűri<br />
dializátum
• E. <strong>coli</strong><br />
• Klebsiella pneumoniae<br />
• Klebsiella oxytoca<br />
• Enterobacter spp.<br />
Pneumonia<br />
bronchopneumonia lebenyes<br />
tüdőgyulladás
Enterobacteriaceae<br />
nozokomiális fertőzések<br />
• Igénytelenek (mindenhol könnyen túlélnek)<br />
• Multirezisztencia (ESBL !!!)<br />
– Gram negatív nozokomiális baktériumok leggyakoribb<br />
rezisztencia-mechanizmusa!<br />
– Sebfertőzések<br />
– Légúti fertőzések<br />
– Biofilm képzés (pl. katéter, kanül)<br />
– Szepszis
ESBL<br />
!!!<br />
• Extended spectrum beta-lactamases<br />
• Gyakran plazmidon kódolt (átadás egymás között!),<br />
de lehet kromoszomális is<br />
• „egyszerű” ESBL:<br />
– TEM, SHV, …<br />
– rezisztencia penicillinek és cephalosporinok ellen<br />
– Klebsiella, E. <strong>coli</strong><br />
• MBL:<br />
– Metallo- béta-laktamázok<br />
– Rezisztencia az összes β-laktám ellen (karbapenemek is)!<br />
– Klebsiella, Pseudomonas, Acinetobacter
Enterobacteriaceae által okozott<br />
• Mindig antibiogram !!<br />
• ESBL termelés termel s !!!<br />
fertőzések kezelése<br />
• β-laktám + enzimgátló kombináció<br />
• 3. gen. cephalosporinok<br />
• karbapenemek<br />
• aminoglikozidok<br />
• fluoroquinolonok<br />
• membránkárosító szerek !?
Escherichia <strong>coli</strong> fertőzések<br />
I. Húgyúti fertőzések (UTI)<br />
• Hólyag (cystitis) → vese (pyelonephritis), prosztata<br />
• UPEC = uropatogén E. <strong>coli</strong><br />
• Adhezinek (fizikai lemosódás ellen)<br />
Fázisváltás
Escherichia <strong>coli</strong> fertőzések<br />
II. Újszülöttkori meningitis<br />
• E. <strong>coli</strong> K1 = N. meningitidis B (75%)<br />
• E. <strong>coli</strong> K93 = Neisseria meningitidis A<br />
• E. <strong>coli</strong> K92 = N. meningitidis C<br />
• E. <strong>coli</strong> K100 = Haemophilus infl. b
E. <strong>coli</strong> diagnosztika<br />
• Mikroszkóposan: Gram – pálca<br />
• Tenyésztés:<br />
– egyszerű agaron<br />
– Eozin-metilénkék táptlajon (EM):<br />
• sötétlila telepek (laktóz +)<br />
• Biokémiai tulajdonságok:<br />
– Glükóz +, laktóz +, indol+, ureáz -, H 2S –<br />
• Antigén szerkezet:<br />
– O: 174<br />
– H: 55<br />
– K: 100 (meningitis!)
Klebsiella<br />
• Klebsiella pneumoniae<br />
– bél normál flóra<br />
– lebenyes tüdőgyulladás<br />
– húgyúti fertőzések<br />
– cholecystitis, cholangitis<br />
– sinusitis, otitis media<br />
• K. oxytoca: nozokomiális fertőzések<br />
• K. ozaenae: rhinitis
Klebsiella: nagy poliszacharid tok
Friedländer pneumonia<br />
Klebsiella fertőzések
Klebsiella diagnosztika<br />
• Mikroszkóposan: Gram – pálca<br />
• Tenyésztés:<br />
– Egyszerű agaron, mukoid telepek (tok!)<br />
– Kellemetlen, szúrós vizeletszagú tenyészet<br />
– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />
• sötétlila telepek (laktóz +)<br />
• Biokémiai tulajdonságok:<br />
– Glükóz +, laktóz +, ureáz +, indol -, H 2S –<br />
• Szerológia:<br />
– Tokduzzadási próba
ajzás -I<br />
Ureáz + → pH megnő → kőképzés<br />
Proteus<br />
Peritrich csillók<br />
csillófestés<br />
rajzás -II<br />
Tenyésztés:<br />
rajzás !!<br />
Biokémiai<br />
tulajdonságok:<br />
– Ureáz +<br />
– H 2 S +<br />
– Laktóz -
Vérvörös pigment<br />
Serratia marcescens
OBLIGÁT ENTERÁLIS<br />
PATOGÉNEK
Normál flóra tagok<br />
(fakultatív patogének)<br />
• Escherichia <strong>coli</strong><br />
• Klebsiella spp.<br />
• Proteus spp.<br />
• Serratia spp.<br />
• Enterobacter spp.<br />
• Citrobacter spp.<br />
• Providencia spp.<br />
• Morganella spp.<br />
• …<br />
Enterobacteriaceae<br />
Obligát enterális<br />
patogének<br />
• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !<br />
• Salmonella<br />
• Shigella<br />
• Yersinia<br />
• Vibrio spp.<br />
• Helicobacter<br />
• Campylobacter
Enterovirulens E. <strong>coli</strong><br />
• bizonyos E. <strong>coli</strong> törzsek entero-patogénné váltak<br />
• virulenciafaktorok plazmidon, fágon más obligát<br />
enterális patogénektől<br />
• EPEC - enteropatogén E. <strong>coli</strong><br />
• ETEC – enterotoxint termelő E. <strong>coli</strong><br />
• EHEC - enterohemorrágiás E. <strong>coli</strong><br />
• EIEC - enteroinvazív E. <strong>coli</strong><br />
• EAEC - enteroaggregatív E. <strong>coli</strong>
Enteropatogén E. <strong>coli</strong> - EPEC<br />
Elektronmikroszkópos felvétel: a humán<br />
bélhámsejtekhez való szoros, lokális<br />
megtapadás + a mikrobolyhok tönkretétele<br />
• erős tapadás a vékonybél<br />
epithel sejtjeihez<br />
• < 1 éves gyerekek<br />
• „dyspepsia <strong>coli</strong>”<br />
• bölcsődei járványok
Enterotoxint termelő E. <strong>coli</strong> - ETEC<br />
• Enterotoxin (LT) Vibrio<br />
cholerae–től plazmidon<br />
• „Utazók hasmenése”<br />
• Fejlődő országokban<br />
endémiás<br />
• Súlyos, vizes hasmenés<br />
• vékonybélben<br />
• kezelés: antibiotikumok,<br />
folyadékpótlás<br />
Egészséges sejtek (bal) és LT toxinnal<br />
kezelt sejtek (jobb). A letapadás<br />
megszűnik, a sejtek lekerekednek.
Enterohemorrágiás E. <strong>coli</strong> - EHEC<br />
• „Shiga-like” toxin vagy Verotoxin<br />
Shigella–tól plazmidon<br />
• Súlyos, véres hasmenés; enteritis,<br />
láz nincs<br />
• HUS fejlődhet ki<br />
• Fertőzött marhahús + tej<br />
• Th: antibiotikum, folyadékpótlás<br />
EHEC (O157) által termelt Shiga-like<br />
toxin (Verotoxin) hatása Vero sejtekre.<br />
1982
Enteroinvazív E. <strong>coli</strong> - EIEC<br />
EIEC HeLa sejteket támad in vitro<br />
• teljes inváziós plazmid Shigellatól<br />
• Klasszikus vérhas !<br />
• Véres, nyákos hasmenés + láz<br />
• vastagbélben<br />
• Fertőződés:<br />
– közvetlen kontaktussal<br />
– kevésbé könnyen, mint a Shigella
Enteroaggregatív E. <strong>coli</strong> - EAEC<br />
• Megtapadás a vékonybél epithel<br />
sejtjeihez:<br />
baktériumok aggregációja<br />
• Súlyos, vizes hasmenés, gyakran<br />
krónikussá válik (>14 nap)<br />
→ elég magas letalitás!<br />
• Főleg gyerekek, főleg fejlődő<br />
országokban<br />
• Fejlett országok: utóbbi időben<br />
egyre több járvány<br />
• Csillók, fimbriák<br />
HEp-2 sejteken<br />
Bélhámsejt tenyészeten<br />
www.cdc.gov
SALMONELLA
Salmonella főbb jellemzői<br />
• Gram negatív, fakultatív<br />
anaerob pálca<br />
• Antigén szerkezet<br />
– O antigének: számos szerotípus<br />
(mozaik szerkezet)<br />
– H antigének: 2 típus (I és II fázis)<br />
– Vi antigén (=tok): biz. fajokban<br />
• Biokémiai tulajdonságok<br />
– H 2S termelés!<br />
– laktóz negatív<br />
O<br />
H<br />
Vi
Salmonella gazdaspektruma<br />
• Széles gazdaspektrum: ember + állatok<br />
– S. enteritidis<br />
– S. typhimurium<br />
• Egy állathoz adaptálódott:<br />
– pl. S. cholerasuis: sertés<br />
• Obligát humán patogén<br />
– S. typhi<br />
– S. paratyphi A, B, C<br />
ZOONÓZIS
Salmonella fajok új taxonómiai<br />
• S. enterica<br />
beosztása<br />
– 7 alfaj (I, II, IIIa, IIIb, IV, VI, VII)<br />
– csak az I. alfaj humán patogén<br />
• 1500 szerotípus<br />
• de csak 10-15 a gyakori<br />
• ezek a korábbi fajok, pl. S. enteritidis, S.<br />
typhimurium, S. typhi, stb.<br />
• S. bongori<br />
– állati kórokozók (fejletlenebb gerincesek)
Humán Salmonella fertőzések<br />
Gastroenteritis<br />
(=szalmonellózis)<br />
• fertőzött étel (zoonózis)<br />
• S. enteritidis, S. typhimurium<br />
• A baktériumok szaporodnak<br />
→ gyulladás → lokalizált<br />
fertőzés a bélben<br />
Hastífusz<br />
(=enterális láz)<br />
• Obligát humán patogén!<br />
• S. typhi, S. paratyphi A, B, C<br />
• A baktériumok szóródnak,<br />
mielőtt felszaporodva<br />
gyulladást váltanának ki →<br />
generalizált fertőzés
Salmonella gastroenteritis<br />
• Fertőzés forrása (~10 6 baktérium kell):<br />
– csirke- vagy kacsatojás<br />
– szárnyas vagy disznóhús<br />
Ha nem megfelelően<br />
hőkezelt !<br />
• Magyarországon:<br />
– Még ma is a bakteriális<br />
gastroenteritisek vezető<br />
oka!<br />
(~10.000 eset évente)<br />
– de: nem mindig kerül<br />
bejelentésre! (~10% ?)
Klinikai jellemzők<br />
• Lappangási idő: 14-48 óra<br />
• Fő tünetek:<br />
– hasmenés (lehet véres is), hőemelkedés<br />
– +/- hányás, szédülés, hasfájás<br />
• A fertőzés lehetséges kimenetele:<br />
– spontán gyógyulás 1 héten belül<br />
– komplikációk:<br />
• átmeneti bakteriémia tartós bakteriémia<br />
(gyerekekben, idősekben, immunszupresszáltakban)<br />
• fokális fertőzések (tüdő, agy, protézisek)<br />
– tünetmentes hordozás !
A szalmonellózis diagnosztikája<br />
• Minta: széklet + ételmaradék<br />
• Gram-festés: Gram – pálca<br />
• Tenyésztés: szelektív szelekt v / differenciáló differenci táptalajok ptalajok !!<br />
– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />
• rózsaszín telepek (laktóz -)<br />
– Brillantzöld táptalaj<br />
– Bizmut-szulfit táptalaj<br />
– Salmonella-Shigella agar<br />
• Biokémiai tulajdonságok:<br />
– Glükóz +, laktóz -, H 2 S +, indol -, ureáz -<br />
• Szerológia:<br />
– O, H antigének (tárgylemez agglutináció)<br />
– Kaufmann-White antigén séma<br />
bizmut szulfit táptalaj<br />
H 2 S pozitivitás
Salmonella specifikus táptalajok<br />
Salmonella brillantzöld<br />
táptalajon (színtelen telepek);<br />
piros telepek = E. <strong>coli</strong><br />
Szelektivitás:<br />
Brillantzöld<br />
Salmonella bizmut-szulfit<br />
táptalajon (fekete telepek)<br />
Salmonella Salmonella-Shigella agaron<br />
(fekete közepű telepek)
Salmonella gastroenteritis kezelése<br />
• Folyadékpótlás – rendszerint elegendő<br />
• Antibiotikum:<br />
– Súlyos esetben kötelező (magas láz, szepszis)<br />
– Esetleg gyerekek, idősek esetében<br />
– Hordozást elősegítheti !<br />
– Ampicillin, fluoroquinolonok, 3. gen. cephalosporinok<br />
• Betegek elkülönítése<br />
• Negatív széklet 2 egymást követő napon<br />
• Tünetmentes ürítők követése
Hastífusz- patogenezis<br />
• Feko-orális fertőzés<br />
• Első 2 hétben: primér bakteriémia<br />
– a baktériumok az enterális makrofágokat<br />
fertőzik (a Peyer plakkokban)<br />
– ezek a mezenterális nyirokcsomókba<br />
szállítják őket keringés<br />
– tünetmentes fázis<br />
• Szaporodás a különböző (RES) szervekben<br />
– máj (Kupfer sejtek), epehólyag<br />
• Másodlagos bakteriémia<br />
– már nagyszámú baktérium van jelen!<br />
• A baktériumok visszakerülnek a<br />
vékonybélbe az epével<br />
– szaporodás a Peyer plakkokban<br />
– fekélyek, perforáció
Hastífusz - tünetek<br />
• Láz: fokozatosan nagyon magasra<br />
emelkedik („tifózus” állapot)<br />
• Hasmenés: NEM jellemző<br />
– esetleg véres lehet<br />
• Hepatosplenomegália<br />
• Kiütések a hasfalon és a mellkason<br />
• Vérképi elváltozások:<br />
– leukopenia<br />
– eosinophilia<br />
– lymphocytosis<br />
Mononukleáris sejtek és vörös<br />
vértestek a székletben. Trichrome<br />
festés. By courtesy of Dr. H.L. DuPont
Hastífusz előfordulása a világon
• Minta:<br />
Hastífusz diagnosztikája<br />
– széklet: csak a 2.-3. héten lesz pozitív<br />
– vizelet: a 2. héttől pozitív<br />
– vér: r: hemokultúra<br />
hemokult ra !!<br />
• Tenyésztés:<br />
– Eozin-metilénkék táptalajon (EM): rózsaszín telepek (laktóz -)<br />
– Brillantzöld vagy bizmut-szulfit táptalaj<br />
• Biokémiai tulajdonságok:<br />
– Glükóz +, laktóz -, H 2 S +, indol -, ureáz -<br />
• Szerológia:<br />
– O, H antigének<br />
– Gruber-Widal reakció
• Antibiotikumok!<br />
Hastífusz kezelése<br />
– ampicillin, TMP/SMX, ceftriaxon, fluoroquinolonok<br />
– chloramphenicol: csak korábban használták<br />
• Cholecystectomia ?<br />
– tartós hordozás ellen<br />
• Vakcina<br />
– (acetonnal) elölt baktérium: veszélyeztetetteknek<br />
– élő, attenuált: fejlesztés alatt
• Shigella fajok:<br />
– S. dysenteriae<br />
– S. flexnerii<br />
– S. boydii<br />
– S. sonnei (csak 1 szerotípus)<br />
• Nincs csilló, nincs tok<br />
– csak O antigén<br />
• Biokémiailag elég inaktív<br />
– laktóz -, H 2 S -, ureáz -<br />
Shigella<br />
több<br />
szerotípus<br />
• Obligát humán patogén<br />
• alacsony infektív dózis<br />
– 10 2 baktérium elég<br />
• A vérhas rhas (dizentéria)<br />
kórokozója<br />
• Shiga-toxin Shiga toxin-t termel<br />
– fehérjeszintézis gátlása<br />
– fekélyek a vastagbélben<br />
– főleg S. dysenteriae I-es<br />
típusa termeli
Vérhas - patomechanizmus<br />
Először az M sejteket fertőzik<br />
(a Peyer plakkokban)<br />
Innen az epithel sejteket<br />
oldalirányból tudják fertőzni<br />
Az M sejtekből kiindulva<br />
a makrofágokat is fertőzni<br />
tudják<br />
Gyulladás, citokin<br />
termelés → apoptózis<br />
Vastagbél<br />
Az elhalt makrofágokból<br />
kiszabadulva az epithel sejtek<br />
bazális felszínét is fertőzni tudják
Vérhas – klinikai jellemzők<br />
• Lappangási idő: néhány nap<br />
• Első tünet: hasmenés<br />
• Láz, görcsök (improduktív)<br />
• Széklet: véres, nyákos, gennyes<br />
– súlyos esetben: szövettörmelék is<br />
• Legsúlyosabb: S. dysenteriae<br />
– toxin termelés!<br />
• Gyakori komplikáció: HUS<br />
– hemolitikus uremiás szindróma<br />
• Betegség kimenetele:<br />
– rendszerint spontán gyógyul<br />
– hordozás alakulhat ki<br />
– reaktív arthritis<br />
• Egyéb vérhas kórokozók:<br />
– bakteriális: EIEC<br />
– amőbás: Entamoeba hystolytica<br />
Leukociták és vörös vértestek székletben
Különböző Shigella fajok közti különbség<br />
S. flexneri által okozott enyhe<br />
fertőzés.<br />
A kevés fehéres váladék fibrint és<br />
polymorphonukleáris leukocitákat<br />
tarrtamaz.<br />
Dr. R.H. Gilman felvétele.<br />
Halálos kimenetelű, S. dysenteriae<br />
I. típusa által okozott fertőzés,<br />
melyben pszeudomembrános<br />
<strong>coli</strong>tis alakult ki.<br />
Dr. R.H. Gilman and Dr. F. Koster felvétele.
Shigella (vérhas) diagnosztika<br />
• Natív széklet:<br />
– véres, nyákos, gennyes<br />
• Tenyésztés: szelektív szelekt v /<br />
differenciáló differenci táptalajokon ptalajokon !!<br />
– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />
rózsaszín telepek (laktóz -)<br />
– Salmonella-Shigella agar<br />
– Dezoxicholát-citrát táptalaj<br />
• Szerológia<br />
• Toxin kimutatás<br />
– Serény teszt<br />
– szövettenyészeten<br />
Serény teszt<br />
(keratoconjuntivitis nyúlban,<br />
Shigella fertőzés hatására)
Shigella specifikus táptalajok<br />
Salmonella-Shigella<br />
agar<br />
Dezoxicholát-citrát (DC)<br />
táptalaj. Shigella: színtelen<br />
(piros telepek = E. <strong>coli</strong>)
• Antibiotikumok<br />
Vérhas kezelése<br />
– a betegség idejének lerövidítése<br />
– hordozás megakadályozása (↔ Salmonella!)<br />
– TMP/SMX; fluoroquinolonok, 3. gen. cephalosporinok<br />
– ampicillin rezisztencia!<br />
• Szupportív kezelés:<br />
– folyadék- és sópótlás<br />
– görcsoldók adása nem javasolt<br />
• Vakcina:<br />
– kifejlesztés alatt<br />
HIGIÉNIA HIGI NIA !!!
Yersinia entero<strong>coli</strong>tica<br />
Akut bakteriális gastroenteritis<br />
• Elsősorban hűvös éghajlaton (Skandinávia!)<br />
• Forrás: fertőzött élelmiszer (hús, tej), ivóvíz<br />
• Főleg gyerekekben<br />
• Enterális tünetek, nyirokcsomó duzzanat<br />
• Általában 1-2 hétig tart<br />
• Krónikussá válhat<br />
Scanning elektronmikroszkópos felvétel: Peyer<br />
plakk 7 nappal Y. entero<strong>coli</strong>tica fertőzés után.
Obligát enterális patogének<br />
Enterobacteriaceae Egyéb<br />
• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !!<br />
• Salmonella<br />
• Shigella<br />
• Yersinia<br />
• Vibrio<br />
• Helicobacter<br />
• Campylobacter
VIBRIONACEAE<br />
Vibrio spp.<br />
Mindegyik obligát patogén !
Vibrio cholerae jellemzői<br />
• Gram negatív hajlott pálca<br />
• Fakultatív anaerob<br />
• Mozgásképes (flagellum!)<br />
• Kataláz +<br />
• Oxidáz+<br />
• Halofil (sókedvelő)
V. cholerae típusok<br />
toxintermelő nem toxintermelő<br />
O139 O1<br />
Ogawa<br />
klasszikus El Tor<br />
Inaba<br />
(szerotípusok)<br />
(„biotípusok”)<br />
Hikojima<br />
(szerotípusok)
Kolera patomechanizmus<br />
• Forrás: ivóvíz (>10 8 ), élelmiszer<br />
– Dr. John Snow, Snow 1854, London: térképen<br />
bejelölte a halálos eseteket <br />
meghatározta a fő forrást = utcai kút a<br />
Broad Street-en! miután leszerelték a<br />
nyelét, a halálos esetek száma hirtelen<br />
lecsökkent<br />
• Kolera toxin: AB típusú<br />
– konstitutív cAMP termelés ionok<br />
hiperszekréciója (Na + , K + , Cl - , HCO 3 - )<br />
– a baktérium maga soha nem megy be a<br />
sejtekbe
Rizslészerű hasmenés<br />
- akár 25 l/nap !<br />
Kolera<br />
Kolera ágy
Kolera pandémiák<br />
• 1817-től 6 ismert pandémiát regisztráltak<br />
• 7. pandémia: 1961 óta, Ázsiából (O1, El Tor)<br />
– 1970-es, 80-as évek: Európa, Afrika, Ausztrália<br />
– 1991: Dél-Amerika<br />
• 8. pandémia (?): 1992, India (O139)<br />
– gyorsan terjedt Európába, Amerikába
Kolera diagnosztika<br />
• Tünetek, anamnézis<br />
• Mikroszkópos:<br />
– Sötét látóteres mikroszkóppal székletből<br />
– Gram-festés<br />
• Tenyésztés:<br />
– TCBS táptalaj<br />
• Biokémiai reakciók<br />
• Szerológia<br />
– O1, O139 agglutináció<br />
• Molekuláris módszerek<br />
V. cholerae TCBS táptalajon
• Letalitás:<br />
– kezeletlenül<br />
• klasszikus: 60%<br />
• El Tor: 15-30%<br />
– kezelt: 1%<br />
• ORT (orális rehidrációs terápia):<br />
– glükóz: 20 g/l<br />
– NaHCO 3: 2,5 g/l<br />
– NaCl: 3 g/l<br />
– KCl: 1,5 g/l<br />
Kolera terápiája<br />
• Antibiotikumok:<br />
– Ciprofloxacin, doxycyclin • Folyadékpótlás i.v.
Kolera profilaxis<br />
• Megfelelő higiénia !!<br />
• Betegek elkülönítése<br />
• Kolera védőoltások:<br />
– Inaktivált (elölt) baktérium<br />
– Per os vakcinák:<br />
• lokális immunitást vált ki (IgA)<br />
• elölt baktérium + toxoid (B alegység)<br />
• élő, attenuált<br />
– csak 50-60% védettség !<br />
– csak rövid időre ad védettséget (néhány<br />
hónap)
Kapcsolat a kolera és a CF között?<br />
• CFTR: a klorid- (valamint a<br />
kísérő víz) szekrécióhoz<br />
szükséges transzporter mind a<br />
bélben, mind a tüdőben<br />
• CFTR inhibitorok<br />
alkalmasak a bélben is a<br />
folyadékszekréció<br />
megállítására (kolera esetén)<br />
• CF heterozigóták rezisztensek<br />
a kolera toxinra?<br />
Fig. 1 Schematic of the secretory cells in the<br />
small intestine (intestinal crypt cells), the<br />
chemicals that regulate their secretory processes,<br />
and some of the transport proteins involved. The<br />
second messengers Ca2+ and cAMP are the<br />
links between the membrane receptors on the<br />
basolateral side and the effects on transport on<br />
the apical side of these cells. CFTR, cystic<br />
fibrosis (CF) transmembrane conductance<br />
regulators.
Vibrio parahemolyticus<br />
• Nyers / nem átsült tengeri ételek –<br />
90% osztriga! (távol-keleti konyha)<br />
– hasmenések vezető kórokozója Japánban<br />
– spontán gyógyuló, de súlyos<br />
gastroenteritis<br />
– enterotoxin<br />
– lappangási idő ~ 24 h<br />
• Sebfertőzést is okozhat tengervízben<br />
(szaporodni képes, ha a víz >20 o C!)<br />
– A Katrina Hurrikánt követően, 22 vibrio<br />
sebfertőzést találtak, ebből 3-at V.<br />
parahaemolyticus okozott és 2 beteg<br />
meghalt!<br />
TCBS táptalajon
SPIRÁLIS, SPIR LIS, HAJLOTT GRAM<br />
NEGATÍV NEGAT V PÁLC P LCÁK<br />
• Helicobacter<br />
• Campylobacter
Spirális, hajlott Gram - pálcák<br />
• mikroaerofil (5-7% O 2, 5-10% CO 2)<br />
• csillós<br />
• kataláz +, oxidáz +<br />
Helicobacter<br />
• Ureáz +<br />
Campylobacter<br />
• Termofil: 42 o C
Helicobacter pylori -<br />
gyomorfekély<br />
csilló (motilitás!), adhezinek, ureáz +<br />
túlél a gyomorban<br />
gastritis, hypochlorhydria<br />
krónikus gastritis<br />
H. pylori a gyomor<br />
nyálkahártyán, SEM
Helicobacter pylori - gyomorrák<br />
• Nobel-díj, 2005: Barry J. Marshall és J.<br />
Robin Warren<br />
• “A Helicobacter pylori valamint a<br />
gyomorfekélyben játszott szerepének<br />
felfedezéséért .”
Helicobacter diagnosztika<br />
• Endoszkóp (biopszia)<br />
• Direkt kenet:<br />
– ezüst impregnáció<br />
– Giemsa festés<br />
• Tenyésztés: szelektív táptalajon<br />
(Skirrow), 3-6 napig<br />
• Biokémiai tesztek (ure ureáz + !!!)<br />
• Szerológia: ELISA<br />
– negatív IgG kizárja a fertőzést<br />
– konfirmálás: Western blot<br />
Helicobacter ELISA (IgG, IgA)<br />
Helicobacter<br />
Western blot<br />
ezüst impregnáció
Radioaktív urea kilégzési teszt
Helicobacter eradikáció<br />
• Kombinált terápia 2 hétig<br />
• Proton-pumpa gátlók (PPI)<br />
• Antibiotikumok<br />
– Clarithromycin + metronidazol<br />
– Amoxicillin + metronidazol<br />
– Doxycycline + metronidazol<br />
• Bizmutsók
Faj<br />
C. jejuni<br />
C. <strong>coli</strong><br />
C. fetus*<br />
C. lari<br />
C. upsaliensis<br />
Campylobacter fajok<br />
Rezervoár<br />
szárnyas, sertés,<br />
tehén, nyúl<br />
sertés, szárnyas,<br />
tehén, birka<br />
tehén, birka<br />
szárnyas, kutya,<br />
macska, majom,<br />
ló<br />
kutya, macska<br />
* főleg immunkomprimáltakban<br />
Betegség<br />
gastroenteritis, sepsis,<br />
meningitis, Guillain-Barré<br />
sepsis, gastroenteritis,<br />
meningitis<br />
sepsis, gastroenteritis,<br />
endocarditis, meningitis<br />
gastroenteritis, sepsis<br />
gastroenteritis, sepsis,<br />
tályogok<br />
Gyakoriság<br />
gyakori<br />
közepes<br />
közepes<br />
ritka<br />
gyakori?
Campylobacter fertőzések<br />
• Forrás:<br />
– nem kellően hőkezelt hús (zoonózis!)<br />
• alacsony infektív dózis: 10 2 baktérium elég!<br />
– nem pasztőrözött tej<br />
– emberről-emberre: fekális-orális (ritka)<br />
• Lappangási idő: 1-2 nap<br />
• Tünetek:<br />
– véres, nyákos széklet<br />
– láz<br />
– erős hasi görcsök<br />
• Kimenetele:<br />
– spontán gyógyulás<br />
– komplikációk:<br />
• szisztémás fertőzés<br />
• Guillain-Barré szindróma
Enterális fertőzések Magyarországon, 2006<br />
• Egyéb:<br />
– Calicivirus<br />
– Rotavirus<br />
– ismeretlen kórok<br />
(n=58147)<br />
Egyéb<br />
71,0 %<br />
Salmonella<br />
16,8 %<br />
Campylobacter<br />
11,7 %<br />
Shigella<br />
0,16 %<br />
Az USA-ban: Campylobacter > Salmonella + Shigella
Campylobacter diagnosztika<br />
• Minta:<br />
– széklet<br />
– hemokultúra, liquor<br />
– étel !<br />
• Tenyésztés<br />
– 42 o C !<br />
– mikroaerofil<br />
– speciális táptalajok<br />
• Biokémiai identifikálás<br />
Campylo-agar<br />
Mikroaerofil<br />
tenyésztés
Campylobacter fertőzések kezelése<br />
• Szupportív terápia<br />
– Folyadék- és sópótlás<br />
• Antibiotikumok<br />
– súlyos gastroenteritis esetén:<br />
• erythromycin, azithromycin, doxycyclin,<br />
ciprofloxacin, amoxicillin/klavulánsav<br />
– szisztémás fertőzésben:<br />
• karbapenem, aminoglikozid, chloramphenicol<br />
• Élelmiszer higiénia !