21.07.2013 Views

E. coli

E. coli

E. coli

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

A NORMÁL BÉLFLÓRA<br />

ÉS JELENTŐSÉGE<br />

Dr. Dobay Orsolya


hypoaciditás<br />

↓<br />

baktériumok száma<br />

↑ ↑ ↑<br />

Coliform-ok =<br />

Enterobacteriaceae


http://mpicel.myweb.uga.edu


Vastagbél normál flórája<br />

• > 10 11 baktérium / g széklet !!<br />

• Túlnyomórészt obligát anaerobok ! (90-95%)<br />

– Bifidobacterium<br />

– Eubacterium - Fusobacterium<br />

– Bacteroides - Lactobacillus<br />

– Clostridium<br />

• Fakultatív anaerobok<br />

– Enterococcus<br />

> 400 species !!<br />

– Enterobacteriaceae<br />

• E. <strong>coli</strong>: csupán ~ 1% !


A normál bélflóra szerepe<br />

• Enzimtermelés<br />

– Ureáz, dezamináz, észteráz, …<br />

• Vitamintermelés<br />

– K vitamin, fólsav, thiamin (B1), riboflavin (B2), niacin<br />

(B3), pantoténsav (B5), …<br />

• Állandó antigén stimulus<br />

– Immunitás „ébren tartása”<br />

• Az epithel sejtek fizikai-kémiai megújítása<br />

• Perisztaltika elősegítése<br />

• Gáztermelés<br />

• Patogének távoltartása !!


Újszülöttek kolonizációja<br />

• A születés pillanatában: steril<br />

• Normál, hüvelyi szülésnél:<br />

– azonnali találkozás az anya flórájával<br />

• Császáros szülésnél:<br />

– késleltetett kolonizáció<br />

– esetleg a későbbiekben enterális és immunológiai<br />

problemák!<br />

• Befolyásoló tényezők:<br />

– az anya étkezési szokásai<br />

– anyatejes versus tápszeres táplálás<br />

– koraszülöttség, stb.<br />

• Kb. 1 éves korra a különbségek eltűnnek és hasonló<br />

lesz a normál felnőtt bélflórához.


A normál bélflóra egyensúlyának<br />

• Okok:<br />

felborulása<br />

– étkezési szokások megváltozása<br />

– széles spektrumú antibiotikum szedése<br />

• Következményei:<br />

– felszívódási zavarok<br />

– hypovitaminózis<br />

– perisztaltikus problémák<br />

– megnövekedett gázképzés<br />

• Antibiotikum hatására:<br />

– enyhe: hasmenés<br />

– súlyos: pszeudomembrános <strong>coli</strong>tis


Pszeudomembrános <strong>coli</strong>tis<br />

• Kórokozó: Clostridium difficile<br />

• „Antibiotic-associated infection” (AAD)<br />

• Toxintermelés<br />

• Láz, súlyos hasi panaszok<br />

http://img.medscape.com


GRAM- FAKULTATÍV<br />

ANAEROB PÁLCÁK<br />

ENTEROBACTERIACEAE<br />

„<strong>coli</strong>form-ok”


Normál flóra tagok<br />

(fakultatív patogének)<br />

• Escherichia <strong>coli</strong><br />

• Klebsiella spp.<br />

• Proteus spp.<br />

• Serratia spp.<br />

• Enterobacter spp.<br />

• Citrobacter spp.<br />

• Providencia spp.<br />

• Morganella spp.<br />

• …<br />

Enterobacteriaceae<br />

Obligát enterális<br />

patogének<br />

• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !<br />

• Salmonella<br />

• Shigella<br />

• Yersinia<br />

• Vibrio spp.<br />

• Helicobacter<br />

• Campylobacter


Enterobacteriaceae jellemzői<br />

• Gram negatív pálcák (2-4 µm)<br />

• Fakultatív anaerobok<br />

• Igénytelenül nőnek<br />

• Oxidáz negatívak<br />

• Elkülönítésük:<br />

– biokémiai reakciókkal<br />

– speciális táptalajokkal<br />

– szerológiával<br />

• O, K, H antigének


Az identifikáláshoz használt főbb<br />

biokémiai reakciók<br />

• Mikroszkóposan, táptalajon: TÚL EGYFORMÁK!<br />

• Cukorbontási reakciók:<br />

– laktóz<br />

– glükóz, maltóz, mannit, …<br />

• Fehérjebontással kapcsolatos reakciók:<br />

– Ureáz teszt<br />

– Indol teszt<br />

– H 2 S termelés<br />

• Automatizálás<br />

(pl. VITEK)


Legfontosabb biokémiai különbségek<br />

E. <strong>coli</strong> Klebsiella Proteus Salmonella Shigella<br />

Glükóz + + + + -<br />

Laktóz + + - - -<br />

H2S - - + +* -<br />

Ureáz - + + - -<br />

Indol + -/+ + - +<br />

*S. typhi: lassabban


Eozin-metilénkék (EM) táptalaj:<br />

az enterálisok fő táptalaja<br />

• Szelektív: Gram pozitívokat nem engedi kinőni<br />

• Differenciáló: laktóz pozitivitás alapján<br />

Laktóz +<br />

Sötét lila telepek<br />

E. <strong>coli</strong>, Klebsiella<br />

Laktóz –<br />

Rózsaszín telepek<br />

pl. Proteus, Salmonella


Normál flóra tagok<br />

fakultatív patogének<br />

(extraintesztinális fertőzések)


A bél normál flóra tagok által okozott<br />

extraintesztinális fertőzések<br />

• Húgyúti fertőzések (UTI)<br />

• Sebfertőzések<br />

• Intra-abdominális fertőzések<br />

– cholecystitis, cholangitis<br />

– peritonitis<br />

– hasűri tályogok<br />

• Légúti fertőzések (RTI)<br />

• Szepszis, meningitis<br />

• Szemfertőzések<br />

Nozokomiális<br />

Nozokomi lis<br />

fertőzések!<br />

fert sek!


Húgyúti fertőzések<br />

• Enterális traktus és húgyutak fizikai közelsége<br />

• E. <strong>coli</strong> (80%), Proteus, Klebsiella<br />

• Cystitis vagy felszálló fertőzés<br />

• Katéter-asszociált


Intra-abdominális fertőzések<br />

• Vastagbél perforáció<br />

• Peritonitis<br />

• Cholecystitis<br />

• Ascites képződés<br />

Akut peritonitis.<br />

Gyulladás és<br />

ödéma.<br />

fertőzött hasűri<br />

dializátum


• E. <strong>coli</strong><br />

• Klebsiella pneumoniae<br />

• Klebsiella oxytoca<br />

• Enterobacter spp.<br />

Pneumonia<br />

bronchopneumonia lebenyes<br />

tüdőgyulladás


Enterobacteriaceae<br />

nozokomiális fertőzések<br />

• Igénytelenek (mindenhol könnyen túlélnek)<br />

• Multirezisztencia (ESBL !!!)<br />

– Gram negatív nozokomiális baktériumok leggyakoribb<br />

rezisztencia-mechanizmusa!<br />

– Sebfertőzések<br />

– Légúti fertőzések<br />

– Biofilm képzés (pl. katéter, kanül)<br />

– Szepszis


ESBL<br />

!!!<br />

• Extended spectrum beta-lactamases<br />

• Gyakran plazmidon kódolt (átadás egymás között!),<br />

de lehet kromoszomális is<br />

• „egyszerű” ESBL:<br />

– TEM, SHV, …<br />

– rezisztencia penicillinek és cephalosporinok ellen<br />

– Klebsiella, E. <strong>coli</strong><br />

• MBL:<br />

– Metallo- béta-laktamázok<br />

– Rezisztencia az összes β-laktám ellen (karbapenemek is)!<br />

– Klebsiella, Pseudomonas, Acinetobacter


Enterobacteriaceae által okozott<br />

• Mindig antibiogram !!<br />

• ESBL termelés termel s !!!<br />

fertőzések kezelése<br />

• β-laktám + enzimgátló kombináció<br />

• 3. gen. cephalosporinok<br />

• karbapenemek<br />

• aminoglikozidok<br />

• fluoroquinolonok<br />

• membránkárosító szerek !?


Escherichia <strong>coli</strong> fertőzések<br />

I. Húgyúti fertőzések (UTI)<br />

• Hólyag (cystitis) → vese (pyelonephritis), prosztata<br />

• UPEC = uropatogén E. <strong>coli</strong><br />

• Adhezinek (fizikai lemosódás ellen)<br />

Fázisváltás


Escherichia <strong>coli</strong> fertőzések<br />

II. Újszülöttkori meningitis<br />

• E. <strong>coli</strong> K1 = N. meningitidis B (75%)<br />

• E. <strong>coli</strong> K93 = Neisseria meningitidis A<br />

• E. <strong>coli</strong> K92 = N. meningitidis C<br />

• E. <strong>coli</strong> K100 = Haemophilus infl. b


E. <strong>coli</strong> diagnosztika<br />

• Mikroszkóposan: Gram – pálca<br />

• Tenyésztés:<br />

– egyszerű agaron<br />

– Eozin-metilénkék táptlajon (EM):<br />

• sötétlila telepek (laktóz +)<br />

• Biokémiai tulajdonságok:<br />

– Glükóz +, laktóz +, indol+, ureáz -, H 2S –<br />

• Antigén szerkezet:<br />

– O: 174<br />

– H: 55<br />

– K: 100 (meningitis!)


Klebsiella<br />

• Klebsiella pneumoniae<br />

– bél normál flóra<br />

– lebenyes tüdőgyulladás<br />

– húgyúti fertőzések<br />

– cholecystitis, cholangitis<br />

– sinusitis, otitis media<br />

• K. oxytoca: nozokomiális fertőzések<br />

• K. ozaenae: rhinitis


Klebsiella: nagy poliszacharid tok


Friedländer pneumonia<br />

Klebsiella fertőzések


Klebsiella diagnosztika<br />

• Mikroszkóposan: Gram – pálca<br />

• Tenyésztés:<br />

– Egyszerű agaron, mukoid telepek (tok!)<br />

– Kellemetlen, szúrós vizeletszagú tenyészet<br />

– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />

• sötétlila telepek (laktóz +)<br />

• Biokémiai tulajdonságok:<br />

– Glükóz +, laktóz +, ureáz +, indol -, H 2S –<br />

• Szerológia:<br />

– Tokduzzadási próba


ajzás -I<br />

Ureáz + → pH megnő → kőképzés<br />

Proteus<br />

Peritrich csillók<br />

csillófestés<br />

rajzás -II<br />

Tenyésztés:<br />

rajzás !!<br />

Biokémiai<br />

tulajdonságok:<br />

– Ureáz +<br />

– H 2 S +<br />

– Laktóz -


Vérvörös pigment<br />

Serratia marcescens


OBLIGÁT ENTERÁLIS<br />

PATOGÉNEK


Normál flóra tagok<br />

(fakultatív patogének)<br />

• Escherichia <strong>coli</strong><br />

• Klebsiella spp.<br />

• Proteus spp.<br />

• Serratia spp.<br />

• Enterobacter spp.<br />

• Citrobacter spp.<br />

• Providencia spp.<br />

• Morganella spp.<br />

• …<br />

Enterobacteriaceae<br />

Obligát enterális<br />

patogének<br />

• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !<br />

• Salmonella<br />

• Shigella<br />

• Yersinia<br />

• Vibrio spp.<br />

• Helicobacter<br />

• Campylobacter


Enterovirulens E. <strong>coli</strong><br />

• bizonyos E. <strong>coli</strong> törzsek entero-patogénné váltak<br />

• virulenciafaktorok plazmidon, fágon más obligát<br />

enterális patogénektől<br />

• EPEC - enteropatogén E. <strong>coli</strong><br />

• ETEC – enterotoxint termelő E. <strong>coli</strong><br />

• EHEC - enterohemorrágiás E. <strong>coli</strong><br />

• EIEC - enteroinvazív E. <strong>coli</strong><br />

• EAEC - enteroaggregatív E. <strong>coli</strong>


Enteropatogén E. <strong>coli</strong> - EPEC<br />

Elektronmikroszkópos felvétel: a humán<br />

bélhámsejtekhez való szoros, lokális<br />

megtapadás + a mikrobolyhok tönkretétele<br />

• erős tapadás a vékonybél<br />

epithel sejtjeihez<br />

• < 1 éves gyerekek<br />

• „dyspepsia <strong>coli</strong>”<br />

• bölcsődei járványok


Enterotoxint termelő E. <strong>coli</strong> - ETEC<br />

• Enterotoxin (LT) Vibrio<br />

cholerae–től plazmidon<br />

• „Utazók hasmenése”<br />

• Fejlődő országokban<br />

endémiás<br />

• Súlyos, vizes hasmenés<br />

• vékonybélben<br />

• kezelés: antibiotikumok,<br />

folyadékpótlás<br />

Egészséges sejtek (bal) és LT toxinnal<br />

kezelt sejtek (jobb). A letapadás<br />

megszűnik, a sejtek lekerekednek.


Enterohemorrágiás E. <strong>coli</strong> - EHEC<br />

• „Shiga-like” toxin vagy Verotoxin<br />

Shigella–tól plazmidon<br />

• Súlyos, véres hasmenés; enteritis,<br />

láz nincs<br />

• HUS fejlődhet ki<br />

• Fertőzött marhahús + tej<br />

• Th: antibiotikum, folyadékpótlás<br />

EHEC (O157) által termelt Shiga-like<br />

toxin (Verotoxin) hatása Vero sejtekre.<br />

1982


Enteroinvazív E. <strong>coli</strong> - EIEC<br />

EIEC HeLa sejteket támad in vitro<br />

• teljes inváziós plazmid Shigellatól<br />

• Klasszikus vérhas !<br />

• Véres, nyákos hasmenés + láz<br />

• vastagbélben<br />

• Fertőződés:<br />

– közvetlen kontaktussal<br />

– kevésbé könnyen, mint a Shigella


Enteroaggregatív E. <strong>coli</strong> - EAEC<br />

• Megtapadás a vékonybél epithel<br />

sejtjeihez:<br />

baktériumok aggregációja<br />

• Súlyos, vizes hasmenés, gyakran<br />

krónikussá válik (>14 nap)<br />

→ elég magas letalitás!<br />

• Főleg gyerekek, főleg fejlődő<br />

országokban<br />

• Fejlett országok: utóbbi időben<br />

egyre több járvány<br />

• Csillók, fimbriák<br />

HEp-2 sejteken<br />

Bélhámsejt tenyészeten<br />

www.cdc.gov


SALMONELLA


Salmonella főbb jellemzői<br />

• Gram negatív, fakultatív<br />

anaerob pálca<br />

• Antigén szerkezet<br />

– O antigének: számos szerotípus<br />

(mozaik szerkezet)<br />

– H antigének: 2 típus (I és II fázis)<br />

– Vi antigén (=tok): biz. fajokban<br />

• Biokémiai tulajdonságok<br />

– H 2S termelés!<br />

– laktóz negatív<br />

O<br />

H<br />

Vi


Salmonella gazdaspektruma<br />

• Széles gazdaspektrum: ember + állatok<br />

– S. enteritidis<br />

– S. typhimurium<br />

• Egy állathoz adaptálódott:<br />

– pl. S. cholerasuis: sertés<br />

• Obligát humán patogén<br />

– S. typhi<br />

– S. paratyphi A, B, C<br />

ZOONÓZIS


Salmonella fajok új taxonómiai<br />

• S. enterica<br />

beosztása<br />

– 7 alfaj (I, II, IIIa, IIIb, IV, VI, VII)<br />

– csak az I. alfaj humán patogén<br />

• 1500 szerotípus<br />

• de csak 10-15 a gyakori<br />

• ezek a korábbi fajok, pl. S. enteritidis, S.<br />

typhimurium, S. typhi, stb.<br />

• S. bongori<br />

– állati kórokozók (fejletlenebb gerincesek)


Humán Salmonella fertőzések<br />

Gastroenteritis<br />

(=szalmonellózis)<br />

• fertőzött étel (zoonózis)<br />

• S. enteritidis, S. typhimurium<br />

• A baktériumok szaporodnak<br />

→ gyulladás → lokalizált<br />

fertőzés a bélben<br />

Hastífusz<br />

(=enterális láz)<br />

• Obligát humán patogén!<br />

• S. typhi, S. paratyphi A, B, C<br />

• A baktériumok szóródnak,<br />

mielőtt felszaporodva<br />

gyulladást váltanának ki →<br />

generalizált fertőzés


Salmonella gastroenteritis<br />

• Fertőzés forrása (~10 6 baktérium kell):<br />

– csirke- vagy kacsatojás<br />

– szárnyas vagy disznóhús<br />

Ha nem megfelelően<br />

hőkezelt !<br />

• Magyarországon:<br />

– Még ma is a bakteriális<br />

gastroenteritisek vezető<br />

oka!<br />

(~10.000 eset évente)<br />

– de: nem mindig kerül<br />

bejelentésre! (~10% ?)


Klinikai jellemzők<br />

• Lappangási idő: 14-48 óra<br />

• Fő tünetek:<br />

– hasmenés (lehet véres is), hőemelkedés<br />

– +/- hányás, szédülés, hasfájás<br />

• A fertőzés lehetséges kimenetele:<br />

– spontán gyógyulás 1 héten belül<br />

– komplikációk:<br />

• átmeneti bakteriémia tartós bakteriémia<br />

(gyerekekben, idősekben, immunszupresszáltakban)<br />

• fokális fertőzések (tüdő, agy, protézisek)<br />

– tünetmentes hordozás !


A szalmonellózis diagnosztikája<br />

• Minta: széklet + ételmaradék<br />

• Gram-festés: Gram – pálca<br />

• Tenyésztés: szelektív szelekt v / differenciáló differenci táptalajok ptalajok !!<br />

– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />

• rózsaszín telepek (laktóz -)<br />

– Brillantzöld táptalaj<br />

– Bizmut-szulfit táptalaj<br />

– Salmonella-Shigella agar<br />

• Biokémiai tulajdonságok:<br />

– Glükóz +, laktóz -, H 2 S +, indol -, ureáz -<br />

• Szerológia:<br />

– O, H antigének (tárgylemez agglutináció)<br />

– Kaufmann-White antigén séma<br />

bizmut szulfit táptalaj<br />

H 2 S pozitivitás


Salmonella specifikus táptalajok<br />

Salmonella brillantzöld<br />

táptalajon (színtelen telepek);<br />

piros telepek = E. <strong>coli</strong><br />

Szelektivitás:<br />

Brillantzöld<br />

Salmonella bizmut-szulfit<br />

táptalajon (fekete telepek)<br />

Salmonella Salmonella-Shigella agaron<br />

(fekete közepű telepek)


Salmonella gastroenteritis kezelése<br />

• Folyadékpótlás – rendszerint elegendő<br />

• Antibiotikum:<br />

– Súlyos esetben kötelező (magas láz, szepszis)<br />

– Esetleg gyerekek, idősek esetében<br />

– Hordozást elősegítheti !<br />

– Ampicillin, fluoroquinolonok, 3. gen. cephalosporinok<br />

• Betegek elkülönítése<br />

• Negatív széklet 2 egymást követő napon<br />

• Tünetmentes ürítők követése


Hastífusz- patogenezis<br />

• Feko-orális fertőzés<br />

• Első 2 hétben: primér bakteriémia<br />

– a baktériumok az enterális makrofágokat<br />

fertőzik (a Peyer plakkokban)<br />

– ezek a mezenterális nyirokcsomókba<br />

szállítják őket keringés<br />

– tünetmentes fázis<br />

• Szaporodás a különböző (RES) szervekben<br />

– máj (Kupfer sejtek), epehólyag<br />

• Másodlagos bakteriémia<br />

– már nagyszámú baktérium van jelen!<br />

• A baktériumok visszakerülnek a<br />

vékonybélbe az epével<br />

– szaporodás a Peyer plakkokban<br />

– fekélyek, perforáció


Hastífusz - tünetek<br />

• Láz: fokozatosan nagyon magasra<br />

emelkedik („tifózus” állapot)<br />

• Hasmenés: NEM jellemző<br />

– esetleg véres lehet<br />

• Hepatosplenomegália<br />

• Kiütések a hasfalon és a mellkason<br />

• Vérképi elváltozások:<br />

– leukopenia<br />

– eosinophilia<br />

– lymphocytosis<br />

Mononukleáris sejtek és vörös<br />

vértestek a székletben. Trichrome<br />

festés. By courtesy of Dr. H.L. DuPont


Hastífusz előfordulása a világon


• Minta:<br />

Hastífusz diagnosztikája<br />

– széklet: csak a 2.-3. héten lesz pozitív<br />

– vizelet: a 2. héttől pozitív<br />

– vér: r: hemokultúra<br />

hemokult ra !!<br />

• Tenyésztés:<br />

– Eozin-metilénkék táptalajon (EM): rózsaszín telepek (laktóz -)<br />

– Brillantzöld vagy bizmut-szulfit táptalaj<br />

• Biokémiai tulajdonságok:<br />

– Glükóz +, laktóz -, H 2 S +, indol -, ureáz -<br />

• Szerológia:<br />

– O, H antigének<br />

– Gruber-Widal reakció


• Antibiotikumok!<br />

Hastífusz kezelése<br />

– ampicillin, TMP/SMX, ceftriaxon, fluoroquinolonok<br />

– chloramphenicol: csak korábban használták<br />

• Cholecystectomia ?<br />

– tartós hordozás ellen<br />

• Vakcina<br />

– (acetonnal) elölt baktérium: veszélyeztetetteknek<br />

– élő, attenuált: fejlesztés alatt


• Shigella fajok:<br />

– S. dysenteriae<br />

– S. flexnerii<br />

– S. boydii<br />

– S. sonnei (csak 1 szerotípus)<br />

• Nincs csilló, nincs tok<br />

– csak O antigén<br />

• Biokémiailag elég inaktív<br />

– laktóz -, H 2 S -, ureáz -<br />

Shigella<br />

több<br />

szerotípus<br />

• Obligát humán patogén<br />

• alacsony infektív dózis<br />

– 10 2 baktérium elég<br />

• A vérhas rhas (dizentéria)<br />

kórokozója<br />

• Shiga-toxin Shiga toxin-t termel<br />

– fehérjeszintézis gátlása<br />

– fekélyek a vastagbélben<br />

– főleg S. dysenteriae I-es<br />

típusa termeli


Vérhas - patomechanizmus<br />

Először az M sejteket fertőzik<br />

(a Peyer plakkokban)<br />

Innen az epithel sejteket<br />

oldalirányból tudják fertőzni<br />

Az M sejtekből kiindulva<br />

a makrofágokat is fertőzni<br />

tudják<br />

Gyulladás, citokin<br />

termelés → apoptózis<br />

Vastagbél<br />

Az elhalt makrofágokból<br />

kiszabadulva az epithel sejtek<br />

bazális felszínét is fertőzni tudják


Vérhas – klinikai jellemzők<br />

• Lappangási idő: néhány nap<br />

• Első tünet: hasmenés<br />

• Láz, görcsök (improduktív)<br />

• Széklet: véres, nyákos, gennyes<br />

– súlyos esetben: szövettörmelék is<br />

• Legsúlyosabb: S. dysenteriae<br />

– toxin termelés!<br />

• Gyakori komplikáció: HUS<br />

– hemolitikus uremiás szindróma<br />

• Betegség kimenetele:<br />

– rendszerint spontán gyógyul<br />

– hordozás alakulhat ki<br />

– reaktív arthritis<br />

• Egyéb vérhas kórokozók:<br />

– bakteriális: EIEC<br />

– amőbás: Entamoeba hystolytica<br />

Leukociták és vörös vértestek székletben


Különböző Shigella fajok közti különbség<br />

S. flexneri által okozott enyhe<br />

fertőzés.<br />

A kevés fehéres váladék fibrint és<br />

polymorphonukleáris leukocitákat<br />

tarrtamaz.<br />

Dr. R.H. Gilman felvétele.<br />

Halálos kimenetelű, S. dysenteriae<br />

I. típusa által okozott fertőzés,<br />

melyben pszeudomembrános<br />

<strong>coli</strong>tis alakult ki.<br />

Dr. R.H. Gilman and Dr. F. Koster felvétele.


Shigella (vérhas) diagnosztika<br />

• Natív széklet:<br />

– véres, nyákos, gennyes<br />

• Tenyésztés: szelektív szelekt v /<br />

differenciáló differenci táptalajokon ptalajokon !!<br />

– Eozin-metilénkék táptalajon (EM):<br />

rózsaszín telepek (laktóz -)<br />

– Salmonella-Shigella agar<br />

– Dezoxicholát-citrát táptalaj<br />

• Szerológia<br />

• Toxin kimutatás<br />

– Serény teszt<br />

– szövettenyészeten<br />

Serény teszt<br />

(keratoconjuntivitis nyúlban,<br />

Shigella fertőzés hatására)


Shigella specifikus táptalajok<br />

Salmonella-Shigella<br />

agar<br />

Dezoxicholát-citrát (DC)<br />

táptalaj. Shigella: színtelen<br />

(piros telepek = E. <strong>coli</strong>)


• Antibiotikumok<br />

Vérhas kezelése<br />

– a betegség idejének lerövidítése<br />

– hordozás megakadályozása (↔ Salmonella!)<br />

– TMP/SMX; fluoroquinolonok, 3. gen. cephalosporinok<br />

– ampicillin rezisztencia!<br />

• Szupportív kezelés:<br />

– folyadék- és sópótlás<br />

– görcsoldók adása nem javasolt<br />

• Vakcina:<br />

– kifejlesztés alatt<br />

HIGIÉNIA HIGI NIA !!!


Yersinia entero<strong>coli</strong>tica<br />

Akut bakteriális gastroenteritis<br />

• Elsősorban hűvös éghajlaton (Skandinávia!)<br />

• Forrás: fertőzött élelmiszer (hús, tej), ivóvíz<br />

• Főleg gyerekekben<br />

• Enterális tünetek, nyirokcsomó duzzanat<br />

• Általában 1-2 hétig tart<br />

• Krónikussá válhat<br />

Scanning elektronmikroszkópos felvétel: Peyer<br />

plakk 7 nappal Y. entero<strong>coli</strong>tica fertőzés után.


Obligát enterális patogének<br />

Enterobacteriaceae Egyéb<br />

• Enterovirulens E. <strong>coli</strong> !!<br />

• Salmonella<br />

• Shigella<br />

• Yersinia<br />

• Vibrio<br />

• Helicobacter<br />

• Campylobacter


VIBRIONACEAE<br />

Vibrio spp.<br />

Mindegyik obligát patogén !


Vibrio cholerae jellemzői<br />

• Gram negatív hajlott pálca<br />

• Fakultatív anaerob<br />

• Mozgásképes (flagellum!)<br />

• Kataláz +<br />

• Oxidáz+<br />

• Halofil (sókedvelő)


V. cholerae típusok<br />

toxintermelő nem toxintermelő<br />

O139 O1<br />

Ogawa<br />

klasszikus El Tor<br />

Inaba<br />

(szerotípusok)<br />

(„biotípusok”)<br />

Hikojima<br />

(szerotípusok)


Kolera patomechanizmus<br />

• Forrás: ivóvíz (>10 8 ), élelmiszer<br />

– Dr. John Snow, Snow 1854, London: térképen<br />

bejelölte a halálos eseteket <br />

meghatározta a fő forrást = utcai kút a<br />

Broad Street-en! miután leszerelték a<br />

nyelét, a halálos esetek száma hirtelen<br />

lecsökkent<br />

• Kolera toxin: AB típusú<br />

– konstitutív cAMP termelés ionok<br />

hiperszekréciója (Na + , K + , Cl - , HCO 3 - )<br />

– a baktérium maga soha nem megy be a<br />

sejtekbe


Rizslészerű hasmenés<br />

- akár 25 l/nap !<br />

Kolera<br />

Kolera ágy


Kolera pandémiák<br />

• 1817-től 6 ismert pandémiát regisztráltak<br />

• 7. pandémia: 1961 óta, Ázsiából (O1, El Tor)<br />

– 1970-es, 80-as évek: Európa, Afrika, Ausztrália<br />

– 1991: Dél-Amerika<br />

• 8. pandémia (?): 1992, India (O139)<br />

– gyorsan terjedt Európába, Amerikába


Kolera diagnosztika<br />

• Tünetek, anamnézis<br />

• Mikroszkópos:<br />

– Sötét látóteres mikroszkóppal székletből<br />

– Gram-festés<br />

• Tenyésztés:<br />

– TCBS táptalaj<br />

• Biokémiai reakciók<br />

• Szerológia<br />

– O1, O139 agglutináció<br />

• Molekuláris módszerek<br />

V. cholerae TCBS táptalajon


• Letalitás:<br />

– kezeletlenül<br />

• klasszikus: 60%<br />

• El Tor: 15-30%<br />

– kezelt: 1%<br />

• ORT (orális rehidrációs terápia):<br />

– glükóz: 20 g/l<br />

– NaHCO 3: 2,5 g/l<br />

– NaCl: 3 g/l<br />

– KCl: 1,5 g/l<br />

Kolera terápiája<br />

• Antibiotikumok:<br />

– Ciprofloxacin, doxycyclin • Folyadékpótlás i.v.


Kolera profilaxis<br />

• Megfelelő higiénia !!<br />

• Betegek elkülönítése<br />

• Kolera védőoltások:<br />

– Inaktivált (elölt) baktérium<br />

– Per os vakcinák:<br />

• lokális immunitást vált ki (IgA)<br />

• elölt baktérium + toxoid (B alegység)<br />

• élő, attenuált<br />

– csak 50-60% védettség !<br />

– csak rövid időre ad védettséget (néhány<br />

hónap)


Kapcsolat a kolera és a CF között?<br />

• CFTR: a klorid- (valamint a<br />

kísérő víz) szekrécióhoz<br />

szükséges transzporter mind a<br />

bélben, mind a tüdőben<br />

• CFTR inhibitorok<br />

alkalmasak a bélben is a<br />

folyadékszekréció<br />

megállítására (kolera esetén)<br />

• CF heterozigóták rezisztensek<br />

a kolera toxinra?<br />

Fig. 1 Schematic of the secretory cells in the<br />

small intestine (intestinal crypt cells), the<br />

chemicals that regulate their secretory processes,<br />

and some of the transport proteins involved. The<br />

second messengers Ca2+ and cAMP are the<br />

links between the membrane receptors on the<br />

basolateral side and the effects on transport on<br />

the apical side of these cells. CFTR, cystic<br />

fibrosis (CF) transmembrane conductance<br />

regulators.


Vibrio parahemolyticus<br />

• Nyers / nem átsült tengeri ételek –<br />

90% osztriga! (távol-keleti konyha)<br />

– hasmenések vezető kórokozója Japánban<br />

– spontán gyógyuló, de súlyos<br />

gastroenteritis<br />

– enterotoxin<br />

– lappangási idő ~ 24 h<br />

• Sebfertőzést is okozhat tengervízben<br />

(szaporodni képes, ha a víz >20 o C!)<br />

– A Katrina Hurrikánt követően, 22 vibrio<br />

sebfertőzést találtak, ebből 3-at V.<br />

parahaemolyticus okozott és 2 beteg<br />

meghalt!<br />

TCBS táptalajon


SPIRÁLIS, SPIR LIS, HAJLOTT GRAM<br />

NEGATÍV NEGAT V PÁLC P LCÁK<br />

• Helicobacter<br />

• Campylobacter


Spirális, hajlott Gram - pálcák<br />

• mikroaerofil (5-7% O 2, 5-10% CO 2)<br />

• csillós<br />

• kataláz +, oxidáz +<br />

Helicobacter<br />

• Ureáz +<br />

Campylobacter<br />

• Termofil: 42 o C


Helicobacter pylori -<br />

gyomorfekély<br />

csilló (motilitás!), adhezinek, ureáz +<br />

túlél a gyomorban<br />

gastritis, hypochlorhydria<br />

krónikus gastritis<br />

H. pylori a gyomor<br />

nyálkahártyán, SEM


Helicobacter pylori - gyomorrák<br />

• Nobel-díj, 2005: Barry J. Marshall és J.<br />

Robin Warren<br />

• “A Helicobacter pylori valamint a<br />

gyomorfekélyben játszott szerepének<br />

felfedezéséért .”


Helicobacter diagnosztika<br />

• Endoszkóp (biopszia)<br />

• Direkt kenet:<br />

– ezüst impregnáció<br />

– Giemsa festés<br />

• Tenyésztés: szelektív táptalajon<br />

(Skirrow), 3-6 napig<br />

• Biokémiai tesztek (ure ureáz + !!!)<br />

• Szerológia: ELISA<br />

– negatív IgG kizárja a fertőzést<br />

– konfirmálás: Western blot<br />

Helicobacter ELISA (IgG, IgA)<br />

Helicobacter<br />

Western blot<br />

ezüst impregnáció


Radioaktív urea kilégzési teszt


Helicobacter eradikáció<br />

• Kombinált terápia 2 hétig<br />

• Proton-pumpa gátlók (PPI)<br />

• Antibiotikumok<br />

– Clarithromycin + metronidazol<br />

– Amoxicillin + metronidazol<br />

– Doxycycline + metronidazol<br />

• Bizmutsók


Faj<br />

C. jejuni<br />

C. <strong>coli</strong><br />

C. fetus*<br />

C. lari<br />

C. upsaliensis<br />

Campylobacter fajok<br />

Rezervoár<br />

szárnyas, sertés,<br />

tehén, nyúl<br />

sertés, szárnyas,<br />

tehén, birka<br />

tehén, birka<br />

szárnyas, kutya,<br />

macska, majom,<br />

ló<br />

kutya, macska<br />

* főleg immunkomprimáltakban<br />

Betegség<br />

gastroenteritis, sepsis,<br />

meningitis, Guillain-Barré<br />

sepsis, gastroenteritis,<br />

meningitis<br />

sepsis, gastroenteritis,<br />

endocarditis, meningitis<br />

gastroenteritis, sepsis<br />

gastroenteritis, sepsis,<br />

tályogok<br />

Gyakoriság<br />

gyakori<br />

közepes<br />

közepes<br />

ritka<br />

gyakori?


Campylobacter fertőzések<br />

• Forrás:<br />

– nem kellően hőkezelt hús (zoonózis!)<br />

• alacsony infektív dózis: 10 2 baktérium elég!<br />

– nem pasztőrözött tej<br />

– emberről-emberre: fekális-orális (ritka)<br />

• Lappangási idő: 1-2 nap<br />

• Tünetek:<br />

– véres, nyákos széklet<br />

– láz<br />

– erős hasi görcsök<br />

• Kimenetele:<br />

– spontán gyógyulás<br />

– komplikációk:<br />

• szisztémás fertőzés<br />

• Guillain-Barré szindróma


Enterális fertőzések Magyarországon, 2006<br />

• Egyéb:<br />

– Calicivirus<br />

– Rotavirus<br />

– ismeretlen kórok<br />

(n=58147)<br />

Egyéb<br />

71,0 %<br />

Salmonella<br />

16,8 %<br />

Campylobacter<br />

11,7 %<br />

Shigella<br />

0,16 %<br />

Az USA-ban: Campylobacter > Salmonella + Shigella


Campylobacter diagnosztika<br />

• Minta:<br />

– széklet<br />

– hemokultúra, liquor<br />

– étel !<br />

• Tenyésztés<br />

– 42 o C !<br />

– mikroaerofil<br />

– speciális táptalajok<br />

• Biokémiai identifikálás<br />

Campylo-agar<br />

Mikroaerofil<br />

tenyésztés


Campylobacter fertőzések kezelése<br />

• Szupportív terápia<br />

– Folyadék- és sópótlás<br />

• Antibiotikumok<br />

– súlyos gastroenteritis esetén:<br />

• erythromycin, azithromycin, doxycyclin,<br />

ciprofloxacin, amoxicillin/klavulánsav<br />

– szisztémás fertőzésben:<br />

• karbapenem, aminoglikozid, chloramphenicol<br />

• Élelmiszer higiénia !

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!