Produzione di animali KO e transgenici come modelli di malattie
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Inserimento in <strong>animali</strong><br />
Per la produzione <strong>di</strong> <strong>animali</strong> knockout, il vettore <strong>di</strong> targeting viene utilizzato per<br />
mo<strong>di</strong>ficare cellule staminali embrionali (cellule ES) <strong>di</strong> topi agouti. agouti La selezione in<br />
presenza <strong>di</strong> G418 e GCV permette <strong>di</strong> ottenere una popolazione <strong>di</strong> cellule eterozigoti per<br />
il gene knocked out.<br />
Queste cellule vengono iniettate in blastocisti precoci prelevate da topi neri (aa). Si<br />
sviluppano topi chimerici, costituiti da cellule AAMm e da cellule aaMM, caratterizzati<br />
dal mantello bicolore. Questo chimerismo può coinvolgere anche i gametociti e<br />
determinare la formazione <strong>di</strong> gameti che portano la mutazione. L’incrocio con una<br />
femmina nera e normale per il gene che interessa permette <strong>di</strong> ottenere figli dal<br />
fenotipo agouti che portano la mutazione allo stato eterozigote.<br />
Scegliendo da questa progenie un maschio ed una femmina eterozigoti per<br />
la mutazione ci si aspetta <strong>di</strong> ottenere ¼ dei figli omozigoti mm.
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