linee guida per il controllo di qualita' e la standardizzazione in ... - SIV
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3 Criteri <strong>di</strong> adozione delle <strong>l<strong>in</strong>ee</strong> <strong>guida</strong><br />
Criteri <strong>di</strong> selezione e strumenti <strong>per</strong> <strong>la</strong> valutazione metodologica<br />
Le LLGG sono state sv<strong>il</strong>uppate adattando al<strong>la</strong> realtà italiana <strong>il</strong> documento CLSI MM13-A Collection,<br />
Transport, Preparation, and Storage of specimens for molecu<strong>la</strong>r Methods; Approved Guidel<strong>in</strong>e.<br />
Tale LG è stata valutata applicando i criteri dello strumento AGREE (Appraisal of guidel<strong>in</strong>es for research &<br />
Evaluation) (AGREE)<br />
Livello <strong>di</strong> prova e forza delle raccomandazioni<br />
Sul<strong>la</strong> base del<strong>la</strong> metodologia del GRADE, si è passati al<strong>la</strong> gradazione delle prove stesse e al<strong>la</strong> formu<strong>la</strong>zione<br />
delle raccomandazioni. In partico<strong>la</strong>re ogni raccomandazione è <strong>di</strong>st<strong>in</strong>ta <strong>in</strong> raccomandazione forte o debole.<br />
Raccomandazioni generali<br />
RACCOMANDAZIONI FORTI<br />
• Il <strong>la</strong>boratorio deve pre<strong>di</strong>sporre <strong>di</strong> una Istruzione O<strong>per</strong>ativa (IO) <strong>per</strong> <strong>la</strong> raccolta, <strong>il</strong><br />
trasporto e <strong>la</strong> conservazione dei campioni<br />
• Il me<strong>di</strong>co richiedente deve comp<strong>il</strong>are <strong>la</strong> scheda <strong>di</strong> richiesta esame ut<strong>il</strong>izzando <strong>il</strong> nome del<br />
paziente, N° identificativo, data <strong>di</strong> nascita, data e ora raccolta campione, <strong>di</strong> spe<strong>di</strong>zione,<br />
<strong>il</strong> tipo <strong>di</strong> campione, le notizie cl<strong>in</strong>iche più r<strong>il</strong>evanti. In <strong>la</strong>boratorio deve essere registrata<br />
<strong>la</strong> data <strong>di</strong> arrivo del campione e <strong>la</strong> tem<strong>per</strong>atura <strong>di</strong> conservazione<br />
• Non analizzare i campioni <strong>di</strong> sangue emolizzati, conge<strong>la</strong>ti<br />
• Ut<strong>il</strong>izzare come anticoagu<strong>la</strong>nte EDTA e ACD<br />
• Il DNA deve essere purificato prima <strong>di</strong> essere conge<strong>la</strong>to(Ut<strong>il</strong>izzare provette <strong>in</strong><br />
polyallomer)<br />
• Il DNA purificato può essere conservato a 2-8° <strong>per</strong> 26 settimane , 7 anni a -20° , e<br />
almeno 7 anni a -80°<br />
• Il prelievo <strong>di</strong> sangue <strong>per</strong> ricerca virus ad RNA deve essere eseguito con provetta<br />
contenente uno stab<strong>il</strong>izzante<br />
• Il campione <strong>di</strong> tessuto deve essere raccolto <strong>di</strong>rettamente <strong>in</strong> un contenitore contenente lo<br />
stab<strong>il</strong>izzante o <strong>in</strong> azoto liquido. In quest’ultimo caso <strong>il</strong> campione deve essere trasportato<br />
<strong>in</strong> ghiaccio secco e non deve essere sconge<strong>la</strong>to più volte prima dell’estrazione <strong>di</strong> RNA .<br />
Conservare a -80°<br />
RACCOMANDAZIONI DEBOLI<br />
In<strong>di</strong>care nel<strong>la</strong> scheda <strong>di</strong> richiesta esame:<br />
• <strong>la</strong> razza del paziente<br />
• <strong>il</strong> nome del<strong>la</strong> <strong>per</strong>sona che ha raccolto <strong>il</strong> campione<br />
Come campione uretrale ut<strong>il</strong>izzare tampone con punta <strong>in</strong> poliestere; come campione cervicale ut<strong>il</strong>izzare<br />
tampone con punta <strong>in</strong> poliestere e rayon, conservati e trasportati secondo prescrizione del<strong>la</strong> <strong>di</strong>tta<br />
produttrice.<br />
Ut<strong>il</strong>izzare una quantità <strong>di</strong> tessuto <strong>di</strong> 1-2 g e conge<strong>la</strong>rlo <strong>in</strong> azoto liquido. Se ciò non fosse possib<strong>il</strong>e<br />
trasportare <strong>il</strong> campione <strong>in</strong> ghiaccio. Tessuti ipocellu<strong>la</strong>ri richiedono una quantità maggiore <strong>di</strong> tessuto (se <strong>la</strong><br />
biopsia è rappresentata da un pezzo grosso <strong>di</strong> tessuto <strong>per</strong>ché ut<strong>il</strong>izzata <strong>per</strong> altri esami, avvolgere <strong>il</strong> tessuto<br />
L<strong>in</strong>ee <strong>guida</strong> <strong>per</strong> <strong>il</strong> <strong>controllo</strong> <strong>di</strong> qualità e <strong>la</strong> standar<strong>di</strong>zzazione <strong>in</strong> virologia<br />
Comitato <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o Società Italiana <strong>di</strong> Virologia<br />
Bozza rev. n° 2. Data emissione: 13/12/2011
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