MKMTR 1 (Z) MTR Antigens Blot - Milenia Biotec GmbH

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- 10 -Kitbestandteile, Lagerung und StabilitätKomponente Art.-Nr. Inhalt Vorbereitung Lagerung bei HaltbarkeitMTR Dot-Blot Streifen(MTR Dotblot Strips),Nitrozellulose-Streifenbeschichtet mit rekombinantenonkoneuralenAntigenen Ma-1, Ta undRecoverinMMTRDS 24 (8) gebrauchsfertig 2 - 8 °CVor Feuchtigkeitschützen!Zusammen mitTrocknungsmittelin dem RöhrchenaufbewahrenNicht mit denFingern anfassen!Bis zumVerfallsdatumMTR Kontroll-Seren(MTR Control Sera),NegativkontrollePositivkontrolleCut-off KontrolleMTR Enzym-Konjugat (MTREnzyme Conjugate),polyklonaler (Ziegen) antihu-IgGAntikörper, markiertmit alkalischer PhosphataseMTR Waschpuffer (MTRBuffered Wash Solution),Konzentrat (5x)Substrat-Lösung (SubstrateSolution),enthält 5-Brom-4-Chlor-3-Indolyl-Phosphat und 4-Nitro-BlautetrazoliumchloridMPMTR1/2/3MEMTRMWBMTRMSMTR1 Set3 Fl. à 100 µl2 (1) Fl.à 15 ml1 Fl.50 ml2 (1) Fl.à 15 mlEinweg-Inkubationswannen MMTRP 3 (1)Auswertebogen MTRA 1 (1)gebrauchsfertig 2 – 8 °C 30 Tage nachdemVerdünnenbzw. bis zumVerfallsdatumgebrauchsfertig 2 - 8 °C 30 Tage nachdemVerdünnenbzw. bis zumVerfallsdatumVor Gebrauchverdünnen: z.B.zu 10 mlWaschpuffer-Konzentrat40 ml dest.Wasserzugebengebrauchsfertig 2 - 8 °CVor Lichtschützen!2 - 8 °C 30 Tage nachdem Öffnen, 5Tage nach demVerdünnen,bzw. bis zumVerfallsdatum30 Tage nachdem Öffnenbzw. bis zumVerfallsdatumSicherheitsdatenblätter sind auf Anfrage erhältlich (siehe auch unter www.milenia-biotec.de).Erforderliche Hilfsm ittel Horizontal-Schüttler Wirbelmischer (Vortex) destilliertes Wasser Messzylinder für 250 ml; Plastikgefäße zur Aufbewahrung des Waschpuffers Mikropipetten für 10, 50 und 1000 µl Reaktionsgefäße zur Probenverdünnung Optional: Westernblot ProzessorMTR Antigens Blot (MKMTR)
- 11 -Probenentnahm e und -vorbereitungAls Probenmaterial können Serum und Plasma (EDTA, Citrat, Heparin) und Liquor cerebrospinalisverwendet werden.Alle Patientenproben sowie die im Kit befindlichen Kontrollen sind 1:100 endverdünnt; dazu wird beider Testdurchführung 10 µl Probe zu 1000 µl Wasch-Puffer gegeben. Liquor kann 1:2 verdünnteingesetzt werden.Für den Transport kann das Untersuchungsmaterial bis zu 24 Stunden bei Raumtemperatur gelagertwerden. Die Proben können gekühlt bei 2-8 °C bis zu 5 Tage aufbewahrt werden. Ist eine längereLagerung beabsichtigt, sollten die Proben aliquotiert und bei < -18 °C tiefgefroren werden. WiederholteEinfrier- und Auftauzyklen sind zu vermeiden.Hinw eise und Vorsichtsm assnahm enAlle Reagenzien dieser Testpackung dürfen ausschließlich zur in vitro-Diagnostik verwendet werden.Die Anwendung sollte durch Personal erfolgen, das speziell in Verfahren von in vitro-Diagnostikaunterrichtet und ausgebildet wurde. Die Einhaltung des vorgeschriebenen Protokolls zur Durchführungdes Tests ist unbedingt erforderlich.Untersuchungsmaterial von Patienten ist stets als potentiell infektiös einzustufen und sollten stets ineiner Sicherheitswerkbank weiterbearbeitet werden.M ethodik und TestprinzipDer MTR Antigens Blot Test ist ein Immunoassay im Dot-Blot-Verfahren zur qualitativen Bestimmungvon humanen IgG-Autoantikörpern gegen die neuronalen Antigene Ma-1, Ta und Recoverin. Dierekombinanten humanen Proteine von Ma-1, Ta und Recoverin sind auf einer Nitrozellulose-Membranan fixen Stellen aufgetragen; zusätzlich sind anti-human-IgG-Antikörper als Funktionskontrolleaufgetragen.Die unverdünnte Patientenprobe wird zu der Antigen-beladenen Trägermembran pipettiert. Währendder ersten Inkubation (90 Minuten) binden die in der Patientenprobe vorhandenen Autoantikörperentsprechend ihrer Antigen-Spezifität. Im nächsten Schritt werden ungebundene Serumbestandteileweggewaschen. Während der nächsten Inkubation (60 Minuten) werden die gebundenenImmunkomplexe mit anti-human-IgG, das mit alkalischer Phosphatase konjugiert ist, markiert.Überschüssiges Konjugat wird durch Waschen der Streifen entfernt. Schließlich werden dieImmunkomplexe sichtbar gemacht, indem sich durch Zugabe von farblosem Enzymsubstrat (BCIP)eine blaue Präzipitat-Linie bildet. Die Antikörper-Typen der Probe werden durch den Vergleich derPositionen mit denen der Referenzbanden auf der Auswerteschablone identifiziert.MTR Antigens Blot (MKMTR)
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