COLIPA Test in vitro: Foto stabilità dei filtri UV - CheLab

FotostabilitàPerché?Cos’è?Dove?fotostabilitàQuando?Come?

FotostabilitàLa fotostabilità è una proprietà di un filtrosolare o di una miscela di filtri che indica lacapacità di mantenere inalterato il propriopotere protettivo anche durante lungheesposizioni al sole.COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

FotostabilitàPer capire se intervengono cambiamenti inaccettabili nelpreparato dal punto di vista del potenziale tossico o dellecaratteristiche organolettiche, chimico-fisiche o funzionaliPer raccogliere informazioni utili per lo sviluppo formulativoCome test di conferma (per scheda di sicurezza e/o predizionedi shelf life)COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Raccomandazione Europea22 settembre 2006Criteri per la valutazione dell’efficacia minima di unprodotto solare:Utilizzo di metodi normati e riproducibiliDare la preferenza a prove in vitroTenere conto della fotodegradazione del prodottoCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

FotostabilitàSi utilizza una sostanza chimica nuova che assorbe nella regione UVo di cui non si conosce la fotostabilitàNon si conosce quali interazioni chimiche potrebbero intercorrerecon le altre sostanze presenti nel preparatoIl preparato è destinato a subire stress luminosi durante la propriashelf-life‣ Non si usa un packaging opaco alla luceCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

FotostabilitàMateria prima (esposizione diretta o in contenitori diquarzo)Il preparato (esposizione diretta o in contenitori diquarzo)COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Questioni praticheQuante ore di prova in un apparecchiatura da laboratorio equivalgono a un anno diesposizione all’aperto o dietro ad una finestra?E’ COMPLICATISSIMO DA CALCOLARE, se si tiene conto che:la radiazione solare naturale e quella artificiale di una lampada allo xeno sono simili, manon ugualicondizioni climatiche e geografiche contribuiscono alla variabilità della luce solarenaturaleil periodo di inizio della prova naturale (in estate maggior insolazione che in inverno)porterà risultati diversiCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

inizioCARTA DI FLUSSODEI TEST DI FOTOSTABILITA’Cambio formulativoSIEsposizione direttaNOcambiambiamentiaccettabili?SIfineCambio packagingSINOEsposizioneimballaggio riempitocambiambiamentiaccettabili?NOriformulareo cambiare packagingSIfine

COLIPAMETHOD FOR THE IN VITRO DETERMINATION OFPHOTOSTABILITY OF UV FILTERS IN COSMETICPRODUCTS - Dicembre 2003Final draft version approved by the COLIPA programCommittee “product Management”COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Principio del MetodoDeterminare analiticamente laconcentrazione dei filtri UV prima e dopol’esposizione ad una dose controllata diradiazione UV proveniente da una definitae calibrata sorgente: “standard sun”COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Strumentazione Utilizzata:HPLCIl COLIPA ritiene che l’utilizzo dell’ HPLC, per quantificare laconcentrazione dei filtri, prima e dopo l’esposizione ai raggi UV, siauno strumento inequivocabile per stabilire la foto-stabilità dei filtriqualora il test venga associato anche ad altre metodologie perstabilire l’efficacia dei filtri come ad esempio in vivo SPF test inaccordo con il COLIPA International Sun Protection Factror testmethod.COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Procedimento⇒ Simulare le condizioni di utilizzospalmare accuratamente il prodotto in opportuno substratonella concentrazione di 2 mg/cm 2 analogamente al test inVIVOesporre al SUN TEST rispettando le proporzioni di rapportoUV-A / UV-B previste dal COLIPAestrazione del prodotto dal substrato mediante opportunosolventeAnalisi HPLC del campione prima e dopo l’irradiazioneCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Dose UVDOSE UV = 250 kJ/m 2 di UVR.è sufficiente per dimostrare l’instabilità dei filtri solari all’interno diformulazioni solariè equivalente a 5 MED o a 81 minuti sotto il sole allo zenit.è costante ed indipendente dal fattore di protezione indicato inetichetta al fine di sottoporre tutti i campioni alle stesse condizioniCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

fotostabilitàHPLCcampione non irradiatomAUDAD1 B, Sig=285,4 Ref=400,100 (FUV04_10\356_1.D)4003002005.979Area: 1826.171000mAU4000 2 4 6 8 10 12 14 16DAD1 E, Sig=311,4 Ref=460,100 (FUV04_10\356_1.D)13.473Area: 8829.05min30020010000 2 4 6 8 10 12 14 16minCromatografia liquida: B3 e OMC

FotostabilitàHPLCcampione irradiatomAUDAD1 B, Sig=285,4 Ref=400,100 (FUV04_10\356_2A.D)4003002005.963Area: 1410.161000mAU0 2 4 6 8 10 12 14 16DAD1 E, Sig=311,4 Ref=460,100 (FUV04_10\356_2A.D)min40030013.318Area: 4676.2320010011.875Area: 965.36800 2 4 6 8 10 12 14 16minCromatografia liquida: B3 e OMC

FotostabilitàUPLC-UVsperimentazione CHELABConfronto tra prodotto irradiato – non irradiato ⇒ è ben visibile il prodotto di degradazione

FotostabilitàTOFsperimentazione CHELABTOF full scan Confronto tra prodotto irradiato – non irradiato ⇒ è ben visibile il prodotto di degradazione

FotostabilitàTOFsperimentazione CHELABTOF estrapolazione dello ione [OMC-H + ] ⇒ entrambi i picchi sono caratterizzati dallo stesso ione

FotostabilitàTOFsperimentazione CHELABTOF determinazione del valore di massa accurata del prodotto di degradazione nel campione irradiato

FotostabilitàTOFsperimentazione CHELABTOF determinazione del valore di massa accurata del filtro UV nel campione non irradiato

Fotostabilitàsperimentazione CHELABformulazione: può influenzare la fotostabilità?50%degradazione percentuale45%40%35%30%25%20%15%10%5%0%40,1%29,9%25,1%9,9% 10,4%1,0%1 2 3BMDMOMCformulazioneLa concentrazione iniziale dei 2 filtri nelle 3 formulazioni è identica

Fotostabilitàsperimentazione CHELABpresenza di altri filtri: come influenza la fotostabilità?70,0%60,0%degradazione percentuale OMC50,0%40,0%30,0%20,0%10,0%0 1 2 3 4 5 6[ filtro accettore]COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

AnalisiDeterminazione di conservantiDeterminazione dei metalli pesanti in cosmetici e detergenti mediante ICP/MSDeterminazione di sostanze aromatizzanti allergeniche in cosmetici edetergenti mediante GC-MSDeterminazione dei filtri UV in cosmetici mediante HPLCDeterminazione Tinosorb M, Tinosorb S, OctiltriazoneDeterminazione del Pantenolo in cosmetici mediante HPLCDeterminazione dell’EDTA (acido etilendiamminicotetracetico) in cosmetici edetergenti mediante HPLCDeterminazione di alcuni coloranti su cosmetici mediante HPLCDeterminazione qualitativa di coloranti su cosmetici mediante TLC(Cromatografia su strato sottile)Determinazione quantitativa degli ftalati su cosmetici mediante GC-MSChallenge testCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Determinazione dei filtri UVmAU10007505002500mAU10007505002500mAU10007505002500mAU10007505002500DAD1 A, Sig=299,4 Ref=400,100 (GENNAI~1\FUV02_01\S_3.D)Area: 6737.262 4 6 8 10 12DAD1 B, Sig=285,4 Ref=400,100 (GENNAI~1\FUV02_01\S_3.D)3.0923.850Area: 2565.07Area: 8298.655.500Area: 3534.142 4 6 8 10 12DAD1 D, Sig=358,4 Ref=460,100 (GENNAI~1\FUV02_01\S_3.D)2 4 6 8 10 12DAD1 E, Sig=311,4 Ref=460,100 (GENNAI~1\FUV02_01\S_3.D)7.16710.899Area: 5665.652 4 6 8 10 127.767Area: 2038.439.84510.348Area: 6618.82Area: 5604.2411.85212.679Area: 1063.94Area: 847.501minminminminCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Determinazione dei conservantimAUDAD1 A, Sig=270,4 Ref=400,100 (CON16_10\15C_20.D)Area: 573.579Area: 629.52919.41425.678150100500minmAU150100500 10 20 30 40 50DAD1 B, Sig=295,4 Ref=400,100 (CON16_10\15C_20.D)Area: 1439.1812.877Area: 747.40222.1640minmAU1501005000 10 20 30 40 50DAD1 C, Sig=256,4 Ref=400,100 (CON16_10\15C_20.D)Area: 1499.59Area: 337.71Area: 2722.51Area: 1515.02Area: 1539.01Area: 1095.87Area: 1399.03Area: 1186.59Area: Area: 1130.55 1075.1618.79543.40411.42020.22321.64828.27934.43444.49245.24235.413min0 10 20 30 40 50COSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007

Determinazione dellaformaldeide totaleDAD1 A, Sig=345,8 Ref=460,100 (FOR09_10\S_05.D)mAU700600500400mAU25DAD1 A, Sig=345,8 Ref=460,100 (FOR09_10\S_05.D)3002001000mAU700Area: 79.01010 2 4 6 8 mAU10DAD1 A, Sig=345,8 Ref=460,100 (FOR09_10\BIANCO.D)6.90320151050-55 5.5 6 6.5 7 7.5DAD1 A, Sig=345,8 Ref=460,100 (FOR09_10\BIANCO.D)252015min6.903Area: 79.01016005004001050-55 5.5 6 6.5 7 7.56.901Area: 2.9516930020010006.901Area: 2.951690 2 4 6 8 10minCOSMETICI: STRATEGIE E METODOLOGIE DI TESTING IN CONFORMITA’ ALLE ULTIME RACCOMANDAZIONI EUROPEE –RESANA 19 ottobre 2007