CEDIA® tacrolimusassay

More documents

Recommendations

Info

Monsters bereiden Opmerking: Volg de leverancierspecifieke instructies en aanbevelingen voor kalibrators en controles op de bijsluiter, indien inbegrepen. 1. Laat kalibrators, controles, en patiëntenmonsters op kamertemperatuur komen. 2. Meng de monsters (kalibrators, controles of patiëntenmonsters) goed door ze 15 à 20 minuten heen en weer te schudden. Monsterextractie Opmerking: Voordat u de patiëntresultaten met gebruik van de CEDIA tacrolimusassay produceert en verstrekt moet u zich vertrouwd maken met de extractieprocedure en controleren of de extractieoplossing niet is verstreken, dat wil zeggen, de oplossing wordt gebruikt binnen 2 weken na het constitueren. 1. Pipetteer precies 200 µl monster in een microcentrifugebuisje met ronde bodem. 2. Pipetteer precies 200 µl extractieoplossing in het microcentrifugebuisje. 3. Onmiddellijk 15 à 20 seconden vortexen met maximale snelheid. 4. Laat het microcentrifugebuisje 5 à 7 minuten staan bij kamertemperatuur. 5. Vijf minuten in een microcentrifuge bij 13.000 tpm (ongeveer 15.000-16.000 x g) centrifugeren. 6. Giet het supernatant uit in een monstercupje en voer de meting onmiddellijk uit. Opmerking: Hitachi analyzers Als de analyzer de barcode niet afleest, kan de cijferreeks op het barcode-etiket via het toetsenbord handmatig worden ingevoerd. De CEDIA tacrolimusassay is bestemd voor gebruik op geautomatiseerde analyzers. Toepassingsspecifieke prestatiegegevens zijn beschikbaar bij Microgenics Corporation. 17 Assayprocedure Kalibratie De CEDIA tacrolimusassay produceert een lineaire standaardcurve met gebruik van de juiste CEDIA tacrolimuskitkalibrators. Valideer alvorens patiëntenmonsters met de assay te analyseren, de assaykalibratie door commerciële controle(s) met vaste terugvindingsbereiken voor de CEDIA tacrolimusassay te testen. Opmerking: Elke kalibratorkit bevat kaarten met toegewezen waarden voor de kalibrator. Controleer alvorens een nieuwe kalibratorkit te gebruiken uw chemische parameters om u ervan te verzekeren dat de kalibratorconcentraties overeenkomen met de toegewezen waarden op de kaart. Kalibratiefrequentie Nieuwe kalibratie wordt aanbevolen • na verwisselen van reagensflesje • na verwisselen van kalibrator- of reagens(kit)batch • na maandelijks onderhoud van instrumenten • al naargelang nodig volgens kwaliteitscontroleprocedures Meetbereik Het meetbereik voor de CEDIA tacrolimusassay is 2,0 ng/ml tot 30 ng/ml tacrolimus. De minimale detecteerbare tacrolimusconcentratie in vol bloed voor de CEDIA tacrolimusassay is 2,0 ng/ml. Monsters buiten bereik Monsters met een kwantitatieve bepaling > 30 ng/ml tacrolimus kunnen worden gemeten als een tacrolimusconcentratie > 30 ng/ml of worden verdund (één deel oorspronkelijk monster met één deel lage kalibrator) en opnieuw met de assay worden geanalyseerd. De waarde die bij de opnieuw uitgevoerde assay wordt verkregen, moet als volgt worden afgeleid: werkelijke waarde = 2 x verdunde waarde Monsters met een resultaat onder de minimale detecteerbare concentratie van de assay moeten worden gemeten als < 2,0 ng/ml tacrolimus. Kwaliteitscontrole en kalibratie Elk laboratorium moet zijn eigen controlefrequentie bepalen. Volgens goede laboratoriumpraktijken is het raadzaam ten minste twee niveaus (d.w.z. lage en hoge medische beslissingspunten) kwaliteitscontrole te testen elke dag dat patiëntenmonsters met de assay worden geanalyseerd en elke keer dat een kalibratie wordt uitgevoerd. Controleer de controlewaarden op eventuele trends of verschuivingen. Als trends of verschuivingen worden gedetecteerd of als de controle niet wordt teruggevonden binnen het gespecificeerde bereik, neem dan alle operationele parameters door. Neem contact op met de technische ondersteuning van Microgenics voor verdere assistentie en aanbevelingen over geschikt controlemateriaal. Opmerking: Bepaal na verwisseling van de reagens(kit)batch de controledoelen en -bereiken opnieuw. Resultaten en verwachte waarden Zie de juiste gebruiksaanwijzing of het juiste analyzerspecifieke protocol voor informatie over de gedetailleerde berekening. Beperkingen – endogene stoffen Er zijn geen prestatiekenmerken voor de CEDIA tacrolimusassay vastgesteld voor andere lichaamsvloeistoffen dan menselijk vol bloed met EDTA. 2 Acceptatiecriteria: De prestaties worden aanvaardbaar geacht wanneer de terugvinding ±1,5 ng/ml tacrolimus is bij initiële concentraties < 10 ng/ml tacrolimus of ±10% van initiële concentraties > 10 ng/ml tacrolimus. Geelzucht: Geen significante interferentie door ongeconjugeerd bilirubine tot een concentratie van maximaal 60 mg/dl. Lipemie: Geen significante interferentie door triglyceriden tot een concentratie van maximaal 1500 mg/dl en door cholesterol tot maximaal 500 mg/dl. Totaal eiwit: Geen significante interferentie door albumine tot een concentratie van maximaal 12 g/dl en door -globuline tot maximaal 12 g/dl. Reumafactor: Geen significante interferentie door reumafactor tot een concentratie van maximaal 573 IU/ml. Hematocrietbereik: Er is geen significante interferentie wanneer het hematocriet tussen 15% en 60% bedraagt. EDTA-concentratie: Te testen volbloedmonsters moeten worden afgenomen in EDTAbuisjes (met lavendel stop). De EDTA-concentratie mag niet hoger zijn dan 4,5 mg/ ml; monsters afgenomen in buisjes met lavendel stop moeten tenminste 1/3 van het afnamebuisje beslaan zodat de EDTA-concentratie minder dan 4,5 mg/ml is. EDTAconcentraties van meer dan 4,5 mg/ml kunnen een effect hebben op de kwantitatieve bepaling. De incidentie van patiënten met antilichamen tegen E. coli -galactosidase is uiterst laag. Sommige monsters met dergelijke antilichamen kunnen echter verkeerdelijk hoge tacrolimusconcentraties produceren, die onverenigbaar zijn met het klinische profiel van de patiënt. Als u vermoedt dat dit het geval is, neem dan contact op met de technische ondersteuning van Microgenics voor assistentie. Zoals met elke assay die gebruikmaakt van muis-antilichamen bestaat de kans van interferentie door humane antimuis-antilichamen (HAMA) in het monster. Het is mogelijk dat monsters met dergelijke antilichamen verkeerdelijk hoge tacrolimusconcentraties produceren, die onverenigbaar zijn met het klinische profiel van de patiënt. Als u vermoedt dat dit het geval is, neem dan contact op met de technische ondersteuning van Microgenics voor assistentie. Beperkingen – effect van gelijktijdig toegediende geneesmiddelen op de tacrolimusconcentratie Tacrolimus wordt extensief gemetaboliseerd door het CYP3A4-iso-enzym in de darmen en de lever. Daarom kunnen de absorptie en de daaropvolgende eliminatie van de systemisch geabsorbeerde tacrolimus worden beïnvloed door geneesmiddelen die een effect op dit iso-enzym hebben. CYP3A4-remmers kunnen het tacrolimusmetabolisme verlagen en de tacrolimusconcentratie verhogen, terwijl CYP3A4-inductoren het tacrolimusmetabolisme kunnen verhogen en de tacrolimusconcentratie kunnen verlagen. Van de volgende geneesmiddelen is bekend dat ze een effect hebben op de tacrolimusconcentratie door de absorptie te verhogen en/of de klaring te verlagen. Deze lijst is niet definitief. 7 Geneesmiddelen die de tacrolimusconcentratie kunnen verhogen, zijn onder meer: Immunosuppressiva: ciclosporine Calciumkanaalblokkers: diltiazem, nicardipine, verapamil, nifedipine Antischimmelmiddelen: clotrimazol, fluconazol, ketoconazol, itraconazol Macrolide antibiotica: claritromycine, erytromycine, troleandomycine Gastro-intestinale prokinetische middelen: cisapride, metoclopramide Overige: bromocriptine, cimetidine, danazol, HIV-proteaseremmers (zoals ritonavir, indinavir), ethinylestradiol, methylprednisolon, omeprazol, nefazodon Geneesmiddelen die de tacrolimusconcentratie kunnen verlagen, zijn onder meer: Anti-epileptica: carbamazepine, fenobarbital, fenytoïne Antibiotica: rifampicine, rifabutine Kruidenpreparaten:: Sint-Janskruid Beperkingen – verschillen en variatie tussen assays Verschillende immunoassays kunnen variabele resultaten voor hetzelfde monster opleveren als gevolg van assayspecifieke variaties in de kruisreactiviteit van metabolieten. Patiënten met verminderde klaring vertonen wellicht de meeste variatie. Voor deze patiënten kan het gebruik van deze assay worden ondersteund met een chromatografische methode die meer specifiek is voor de stamverbinding. Gezien de potentiële spreiding over de vergelijking van de CEDIA tacrolimusassay en LC/MS voor de detectie van tacrolimus in vol bloed, is het belangrijk dat elk laboratorium zijn eigen therapeutische bereik vaststelt. Verwachte waarden Het aanbevolen bereik van de tacrolimusconcentratie in vol bloed voor het effectieve postoperatieve management van patiënten met een allogeen nier- en/of levertransplantaat, is 5 ng/ml tot 20 ng/ml met gebruik van LC/MS. 11-14 Het optimale therapeutische bereik voor tacrolimus in vol bloed is niet vastgesteld met deze assay. De medische toestand van de patiënt nu en in het verleden, de individuele verschillen in gevoeligheid voor de immunosuppressiva en toxische effecten van tacrolimus, de gelijktijdige toediening van andere immunosuppressiva, de tijd na de transplantatie en een aantal andere factoren kunnen ertoe leiden dat de vereiste optimale tacrolimusconcentratie in het bloed varieert. Individuele tacrolimusconcentraties mogen niet worden gebruikt als enig criterium voor het maken van veranderingen in een behandelschema. Gezien de heterogeniteit van de klinische toestand van de patiënt moeten artsen een beoogd therapeutisch managementbereik bepalen op basis van hun eigen ervaring en de klinische eisen van elke patiënt. Daarnaast kan de tacrolimusconcentratie variëren naar gelang de gebruikte methode. Omrekeningsfactoren mogen niet worden gebruikt om waarden voor individuele patiënten te voorspellen voor de ene methode met gebruik van het resultaat van een tweede methode. Bovendien moet de tacrolimusconcentratie voor individuele patiënten worden bepaald met gebruik van een enkele, consistente methode om
verstorende effecten in verband met kruisreactiviteit en herkenning van metabolieten te minimaliseren. Specifieke prestatiekenmerken De typische prestatiegegevens die voor de CEDIA tacrolimusassay zijn verkregen, staan hieronder. 17 Tenzij anders vermeld zijn alle assays uitgevoerd in overeenstemming met de hierin verstrekte assayprocedure met gebruik van de Hitachi 917 analyzer. In individuele laboratoria verkregen resultaten kunnen afwijken van deze gegevens. Zie voor aanvullende analyzerspecifieke prestatiegegevens het analyzerspecifieke toepassingsprotocol of bel de technische ondersteuning van Microgenics voor assistentie. Precisie Studies van de intra- en interassayprecisie (reproduceerbaarheidsonderzoek) zijn uitgevoerd met gebruik van volbloedpatiëntenmonsters en gespikete monsters. Resultaten voor intra-assay- en totale assayprecisie (bepaald door 21 individuele runs in 11 dagen, zoals beschreven in een NCCLS-gemodificeerd replicatie-experiment, EP5-A) zijn als volgt: Intra-assay- en totale assayprecisie (reproduceerbaarheid) Intra Totaal Monster n Gem SD VC% SD VC% Patiënt 1 126 6,30 0,43 6,80 0,49 7,80 Patiënt 2 126 9,23 0,43 4,68 0,56 6,06 Patiënt 3 126 15,18 0,47 3,12 0,65 4,26 Spike 1 126 5,33 0,32 5,97 0,48 8,90 Spike 2 126 10,54 0,35 3,28 0,49 4,69 Spike 3 126 21,01 0,43 2,04 0,72 3,40 Lineariteit Voor het bepalen van assaylineariteit is een volbloedmonster gespiket met hoge tacrolimus verdund met een tacrolimusvrij bloedmonster om een reeks monsters over het dynamische bereik van de assay te verkrijgen. Het terugvindingspercentage is bepaald door de waargenomen tacrolimusconcentratie door de verwachte concentratie te delen. De verwachte concentraties zijn bepaald door de geteste hoge concentratie te vermenigvuldigen met een verdunningsfactor. Terugvinding % hoog monster 100 80 60 40 20 0 Verwachte waarde (ng/ml) 28,9 23,1 17,3 11,5 5,8 0,0 Waargenomen waarde (ng/ml) 28,9 23,9 18,1 12,4 6,1 0,0 Terugvinding (%) 100,0 103,4 104,7 107,7 106,2 -- Om de terugvinding van de CEDIA tacrolimusassay te bepalen, is tacrolimus toegevoegd aan normale, tacrolimusvrije volbloedmonsters en aan patiëntenmonsters met tacrolimus. Er zijn duplicaten van elk monster met de assay geanalyseerd. Het terugvindingspercentage is bepaald door de waargenomen dosis van elk monster te delen door de verwachte concentratie van toegevoegd tacrolimus plus het oorspronkelijke in de monsters aanwezig tacrolimus. Monster A Monster B Monster C Monster D Specificiteit n 20 20 20 20 Verwachte waarde (ng/ml) 5,0 10,0 15,0 25,0 Waargenomen waarde (ng/ml) 5,1 9,6 15,8 25,3 Terugvinding (%) 101,0 96,5 105,2 101,2 Monsters met tacrolimusmetabolieten zijn toegevoegd aan volbloedmonsters met ongeveer 12 ng/ml tacrolimus. Monsters zijn getest door de assay en de resultaten zijn vergeleken met een metabolietvrije controle. De kruisreactiviteit van de metabolieten is berekend volgens de formule: gemeten concentratie - controleconcentratie toegevoegde metabolietconcentratie x 100% 3 De resultaten staan in de tabel hieronder. Kruisreactiviteit met tacrolimusmetabolieten Verwachte Tacrolimusmetabolieten conc (ng/ml) M-1, 13-O-demethyl 20 M-2, 31-O-demethyl 20 M-3, 15-O-demethyl 20 M-4, 12-hydroxyl NB M-5, 15,31-O-didemethyl NB M-6,13,31-O-didemethyl 20 ND – niet detecteerbaar NB – materiaal niet beschikbaar Waargenomen conc (ng/ml) 7,5 0,9 0,9 NB NB 0,6 Kruisreactiviteit (%) 37,7 ND ND NB NB ND Tegelijk toegediende immunosuppressiva zijn toegevoegd aan volbloedmonsters met ongeveer 15 ng/ml tacrolimus en getest op kruisreactiviteit. De resultaten staan in de tabel hieronder. nr. 1 2 3 4 5 6 Tegelijk toegediende immunosuppressiva Ciclosporine Sirolimus Mycofenolzuur Prednison Hydrocortisol Prednisolon Geteste concentratie (ng/ml) 10.000 30 100.000 100.000 100.000 100.000 Kruisreactiviteit (%) De volgende verbindingen zijn toegevoegd aan tacrolimusvrije volbloedmonsters en geanalyseerd op kruisreactiviteit met gebruik van de CEDIA tacrolimusassay. Zoals uit de onderstaande tabel blijkt, is er geen kruisreactiviteit waargenomen voor alle verbindingen bij de geteste concentratie. Kruisreactiviteit met gewone geneesmiddelen Verbinding Acykloguanosin Amikacin Ampicillin Atenolol Azatioprin Cimetidin Digitoksin Digoksin Disopyramid Erytromycin Fenobarbitol Fenytoin Flukonazol Furosemid Ganciklovir Gentamicin Hydroklortiazid Ibuprofen Itrakonazol Kanamycin A Kanamycin B Karbamazepin Ketokonazol Kinidin Kloramfenikol Lidokain Metoklopramid Metylprednisolon Morfinsulfat MPA-glukuronid N-acetylprokainam Naproksen Nifedipin Paracetamol Penicillin Prazosin Primidon Prokainamid Propanolol Rifampcin Salisylsyre Spektinomycin Streptomycinsulfat Teofyllin Tobramycin Triametren Valproatsyre Vankomycin Varapamil Geteste concentratie (ng/ml) 100 000 100 000 100 000 40 000 100 000 100 000 10 000 10 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 40 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 40 000 60 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 100 000 Gemeten concentratie (ng/ml) -0,5 0,8 0,8 -0,6 0,6 0,1 -0,2 0,0 0,7 0,3 -2,0 -2,1 0,6 -0,6 -0,4 0,1 -0,5 -0,6 0,0 0,1 -0,1 0,6 -0,2 0,0 0,4 0,3 0,0 -0,8 -0,6 -1,3 -1,5 0,7 -0,2 0,8 -1,6 0,1 -0,3 0,2 0,2 -0,7 -1,2 -1,3 -0,5 -1,2 -2,2 -1,4 -2,0 -2,0 -1,7 0,0 0,7 0,0 0,0 0,0 0,0 Kruisreactiviteit (%) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
Page 1: CEDIA ® tacrolimusassay : 10008656

CEDIA® tacrolimusassay

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?