DRI® Ethyl Glucuronide Assay - Fisher Scientific

DRI ® Ethyl Glucuronide Assay 

Catalog No.: 10011723 (18 mL Kit) 

10011297 (68 mL Kit) 

10011226 (500 mL Kit) 

Intended Use 

The DRI ® Ethyl Glucuronide Enzyme Immunoassay is intended for the qualitative and semi-quantitative 

determination of Ethyl Glucuronide in human urine at cutoffs of 500 and 1000 ng/mL. 

This assay provides only a preliminary analytical test result. A more specific alternative method 

must be used in order to obtain a confirmed analytical result. Gas Chromatography/Liquid 

chromatography mass spectrometry (GC/MS) and Liquid chromatography/tandem mass 

spectrometry (LC/MS/MS) are the preferred confirmatory methods. Clinical consideration and 

professional judgment should be applied to any drug of abuse test result, particularly when 

preliminary positive results are used. 

Summary and Explanation of the Test 

Ethyl Glucuronide (EtG) is a direct metabolite of ethanol, which is formed by enzymatic conjugation 

of ethanol with glucuronic acid. 1,2 Alcohol in urine is normally detected for only a few hours, whereas 

EtG can be detected up to several days even after complete elimination of alcohol from the body 3. 

Therefore, EtG can be a useful diagnostic biomarker for determining recent alcohol use and in monitoring 

abstinence in alcoholics in alcohol withdrawal treatment programs. 4-7 Ethanol can be produced in vitro 

due to fermentation of urine samples containing sugars (diabetes), bacteria or yeast when samples 

are exposed to warm temperatures 8 

. In such cases, EtG test can be used, as a confirmatory test to 

determine if the alcohol in the sample is due to consumption of alcohol or it is formed in vitro as a 

result of fermentation. Currently EtG is monitored by GC/MS and LC/MS/MS. 9-10 

The DRI ® Ethyl Glucuronide Assay is supplied as a liquid ready-to-use homogeneous enzyme 

immunoassay. The assay uses specific antibodies that can detect Ethyl Glucuronide without any 

significant cross-reactivity to other glucuronide compounds. The assay is based on competition between 

a drug labeled with glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), and free drug from the urine sample 

for a fixed amount of specific antibody binding sites. In the absence of free drug from the sample, the 

specific antibody binds the drug labeled with G6PDH and causes a decrease in enzyme activity. This 

phenomenon creates a direct relationship between the drug concentration in urine and enzyme activity. 

Active enzyme converts NAD to NADH resulting in an absorbance change that can be measured 

spectrophotometrically at 340 nm. 

Reagents 

Antibody/Substrate Reagent: Contains mouse monoclonal anti-Ethyl Glucuronide antibody, 

glucose-6-phosphate (G6P), and nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) in Tris buffer with sodium 

azide as a preservative. 

Enzyme Conjugate Reagent: Contains Ethyl Glucuronide derivative labeled with glucose-6phosphate 

dehydrogenase (G6PDH) in Tris buffer with sodium azide as a preservative. 

Additional Materials Required (sold separately): 

10011207, DRI ® Ethyl Glucuronide Negative Calibrator, 25 mL 

10011208, DRI ® Ethyl Glucuronide Calibrator 100 ng/mL, 10 mL 




10012135, DRI ® Ethyl Glucuronide 375 ng/mL Control, 25 mL 




Precautions and Warnings 

1. This test is for in vitro diagnostic use only. The reagents are harmful if swallowed. 

2. Reagents used in the assay components contain sodium azide, which may react with 

lead or copper plumbing to form potentially explosive metal azides. When disposing 

of such reagents, always flush with a large volume of water to prevent azide build up. 

3. Do not use reagents beyond their expiration dates. 

Reagent Preparation and Storage 

The reagents are ready-to-use; no additional preparation is required. Reagents should be stored 

refrigerated, 2° to 8°C. All assay components, opened or unopened, are stable until the expiration 

date indicated on their respective labels. Do not use the reagents beyond their expiration dates. 

Specimen Collection and Handling 

Collect urine specimens in plastic or glass containers. Fresh urine specimens are suggested. 

The Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs recommend that 

specimens that do not receive an initial test within 7 days of arrival at the laboratory should be 

placed into secure refrigeration units. Urine samples must be stored refrigerated at all times. 

Samples within a pH range of 4.5 to 11 are suitable for testing with this assay. 

An effort should be made to keep pipetted samples free of gross debris. Centrifuge highly turbid 

specimens before analysis. Adulteration of the urine samples may cause erroneous results. If 

adulteration is suspected, obtain another sample and forward both specimens to the laboratory for 

testing. Handle all urine specimens as if they were potentially infectious. 

Assay Procedure 

For In Vitro Diagnostic Use 

Clinical chemistry analyzers capable of maintaining a constant temperature, pipetting samples, 

mixing reagents, measuring enzymatic rates at 340 nm and timing the reaction accurately can be 

used to perform this immunoassay. 

Refer to specific application instructions for each analyzer for chemistry parameters before 

performing the assay. 

Quality Control and Calibration 

Good laboratory practice suggests the use of control specimens to ensure proper assay performance. 

Ensure that control results are within the established range, as determined by laboratory procedures 

and guidelines. If results fall outside of the established ranges, assay results are invalid. For 

qualitative analysis, use 500 ng/mL or 1000 ng/mL calibrator as cutoff level. For semi-quantitative 

analysis, use all calibrators. All QC requirements should be performed in conformance with local, 

state and/or federal regulations or accreditation requirements. 

Results and Expected Values 

Qualitative 

Either the 500 ng/mL or 1000 ng/mL calibrators can be used as a Cutoff reference for distinguishing 

“positive” from “negative” samples. A sample that exhibits a change in absorbance value (∆A) 

equal to or greater than that obtained with the cutoff calibrator is considered positive. A sample 

that exhibits a change in absorbance value (∆A) lower than that obtained with cutoff calibrator is 

considered negative. 

Semi-quantitative 

A rough estimate of Ethyl Glucuronide concentration in the samples can be obtained by running 

a standard curve with all calibrators and quantitating samples off the standard curve. When the 

concentration of EtG in the sample is greater than the highest calibrator, it may be diluted with the 

negative calibrator and retested. 

Reportable Range 

The DRI ® Ethyl Glucuronide Assay is designed for semi-quantitative use in the range between 100 

ng/mL, the lowest calibrator and 2000 ng/mL, the value of the high calibrator. 

Limitations 

1. A positive result using the DRI ® Ethyl Glucuronide Assay indicates only the 

presence of Ethyl Glucuronide and does not necessarily correlate with the extent of 

physiological and psychological effects. 

2. Performance characteristics for the DRI ® Ethyl Glucuronide Assay have not been 

established with body fluids other than human urine. 

3. This DRI ® Ethyl Glucuronide Assay was validated on analyzers utilizing an integral 

cell wash. If your analyzer does not have an integral cell wash, contact your local 

Thermo Fisher Scientific representative. 

4. Care should be taken when reporting results since there are many factors, e.g., 

fluid intake and other biologic factors, that may influence a urine test result. 

5. It is possible that substances other than those investigated in the specificity study may 

interfere with the test and cause false results. 

Typical Performance Characteristics 

Typical performance results obtained on the Hitachi 917 analyzer are shown below. The 

results obtained in your laboratory may differ from these data. For additional analyzer 

specific performance data, refer to the analyzer specific application sheet. 

Precision 

The DRI ® Ethyl Glucuronide controls (375, 625, 750, and 1250 ng/mL) and cutoff calibrators (500 and 

1000 ng/mL) were tested in qualitative (mA/min) and semi-quantitative (ng/mL) mode using a modified 

NCCLS protocol. Results presented below were generated by testing all samples in replicates of 6, 

twice per day for 10 days. 

Qualitative (mA/min) 

Calibrator/Control 500 ng/mL cutoff 

Within-run Precision Total Precision 

N=120 Mean SD %CV Mean SD %CV 

375 392 2.1 0.5 392 2.9 0.7 

500 417 2.1 0.5 417 3.1 0.7 

625 439 2.0 0.5 439 2.7 0.6

Qualitative (mA/min) 




750 461 2.4 0.5 461 3.4 0.7 

1000 494 2.7 0.6 494 3.4 0.7 

1250 524 2.7 0.5 524 3.8 0.7 

Semi-quantitative (ng/mL) 




375 373 11.3 3.0 373 18.1 4.9 

500 502 10.5 2.1 502 19.4 3.9 

625 623 13.2 2.1 623 22.3 3.6 

Semi-quantitative (ng/mL) 




750 756 16.9 2.2 756 31.2 4.1 

1000 993 21.1 2.1 993 34.3 3.5 

1250 1232 23.0 1.9 1232 43.5 3.5 

Cutoff Characterization-Spike Recovery 

Cutoff calibrators, 500 ng/mL and 1000 ng/mL and ±25% controls were prepared by spiking Ethyl 

Glucuronide into EtG free negative urine. The cutoff calibrator and controls were tested (n=21) in 

both the qualitative and semi-quantitative modes. The qualitative data were analyzed for precision 

and detection accuracy of controls and semi-quantitative data were analyzed for % recovery and 

precision. The results indicated that all four controls recovered accurately in qualitative mode, 

negative controls as negative (rate below the C/O calibrator rate) and positive controls as positive 

(rate above the C/O calibrator rate). In semi-quantitative mode controls were recovered within 

±10% from nominal values. The precision was

Linearity 

The assay linearity was determined by testing the dilution recovery of a series of Ethyl 

Glucuronide samples in the assay. A urine sample containing 2000 ng/mL Ethyl Glucuronide 

was serially diluted with EtG free urine at 25% increments from cutoff calibrators. These 

samples were tested in the assay in both the qualitative and semi-quantitative modes. All the 

samples were recovered within ±20% of expected values in the semi-quantitative mode and 

expected rate (mA/min) in qualitative mode indicating that the assay is linear up to 2000 ng/mL. 

Accuracy 

One hundred and eighty four samples were analyzed by DRI ® Ethyl Glucuronide Assay 

in both the qualitative and semi-quantitative modes and the results were compared to 

LC/MS/MS method. In both the qualitative and semi-quantitative modes, the positive 

sample agreement between the DRI ® EtG Assay and LC/MS/MS was 96%. The results 

obtained by both the qualitative and semi-quantitative modes are summarized below. 

Qualitative: Out of 184 samples, using 500 ng/mL cutoff, 94 samples were detected as positive 

and 85 samples as negative and at 1000 ng/mL cutoff 44 samples were detected as positive 

and 138 samples were detected as negative by both the immunoassay and LC/MS/MS. The 

overall concordance between the immunoassay and LC/MS/MS was 97%. There were five 

discordant samples at 500 ng/mL cutoff and two discordant samples at 1000 ng/mL cutoff. 

500 ng/mL C/O 1000 ng/mL C/O 

DRI ® EtG Assay DRI ® EtG Assay 

+ - + - 

+ 94 3* + 44 2 ♠ 

LC/MS/MS LC/MS/MS 

- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Two of the three samples were borderline negative by the immunoassay. 

One sample was borderline positive by LC/MS/MS. 

¥ Samples were borderline positive in the immunoassay. 

♠ Samples were borderline negative in the immunoassay. LC/MS/MS values 

were between 1000 and 1250 ng/mL. 

Semi-Quantitative: In semi-quantitative mode, samples with EtG concentration >500 ng/mL and 1000 

ng/mL were considered positive in the immunoassay. Out of 184 samples, 94 samples were detected 

as positive and 85 samples as negative by both the immunoassay and LC/MS/MS methods. 

LC/MS/MS 

DRI ® EtG Assay 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Samples were the same samples as in 500 ng/mL qualitative mode. 

¥ Samples were the same samples as in the 500 ng/mL qualitative mode. 

3 

References 

Manufacturer: 

Microgenics Corporation 

46360 Fremont Blvd. 

Fremont, CA 94538 USA 

US Toll Free: 1-800-232-3342 

Authorized 

Representative in E.U.: 

Microgenics GmbH 

Spitalhofstrasse 94 

D-94032 Passau Germany 

Tel: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Other countries: 

Please contact your local Microgenics representative. 

1. Ethyl Glucuronide: An unusual Ethanol Metabolite in Humans.Synthesis, Analytical Data, 

and Determination in Serum and Urine. Schmitt G., et al. Journal of Analytical Toxicology. 

1995, 19:91-94. 

2. Comparison of Urinary Excretion Characteristics of Ethanol and Ethyl Glucuronide. Dahl H., 

et al. Journal of Analytical Toxicology. 2002, 26:201-204. 

3. Ethyl Glucuronide- the direct ethanol metabolite on the threshold from science to routine 

use. Wurst FM et al. Addiction. 2003, 98 (S2) 51-61. 

4. Ethyl Glucuronide- A Biological Marker for recent alcohol consumption. Seidi S. et al. Addiction 

Biology. 2001, 6(3):205-212. 

5. Ethyl Glucuronide: A Biomarker to identify Alcohol use by Health Professionals Recovering 

from Substance use Disorders. Skipper G.E et al. Alcohol and Alcoholism, 2004, 39(5):445- 

449. 

6. Ethyl Glucuronide- A marker of Recent Alcohol Consumption with Clinical and Forensic 

Implications. Wurst FM et al. Alcohol. 2000, 20(2):111-116. 

7. Ethyl Glucuronide (EtG): A new marker to detect Alcohol use in recovering physicians., 

Skipper G.E., et al. Journal of Medical Licensure and Discipline. 2004, 90(2): 14-17. 

8. Production of urinary ethanol after sample collection. Saady, J.J., Poklis, A.and Dalton, H.P. 

(1993) Journal of Forensic Sciences 38, 1467-1471. 

9. Preliminary immunochemical test for the determination of Ethyl Glucuronide in serum 

and urine: Comparison of screening method results with Gas Chromatography- Mass 

spectrometry. Zimmer H., et al. Journal of Analytical Toxicology. 2002, 26:11-16. 

10. Confirmatory Analysis of Ethyl Glucuronide in urine by liquid chromatography/Elctrospray 

Ionization/Tandem Mass Spectrometry according to forensic guidelines. Weinmann W. et 

al. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 2004, 15(2):188-193.

DRI ® Ethylglucuronid-Assay 

Bestellnr.: 10011723 (18ml-Kit) 

10011297 (68ml-Kit) 

10011226 (500ml-Kit) 

Anwendungsbereich 

Der DRI ® Ethylglucuronid-Enzym-Immunassay ist für die qualitative and semiquantitative Bestimmung 

von Ethylglucuronid in Humanurin bei Cutoffs von 500 und 1000 ng/ml vorgesehen. 

Dieser Assay bietet ausschließlich ein vorläufiges Analyseergebnis. Zur Bestätigung der 

Analyseergebnisse muss eine spezifischere Alternativmethode angewendet werden. Die 

bevorzugten Bestätigungsmethoden sind Gaschromatographie/Flüssigkeitschromatographie- 

Massenspektrometrie (GC/MS) und Flüssigkeitschromatographie/Tandem-Massenspektrometrie 

(LC/MS/MS). Klinische Überlegungen und eine fachliche Beurteilung sollten bei allen 

Drogentestergebnissen berücksichtigt werden, insbesondere bei vorläufig positiven 

Ergebnissen. 

Zusammenfassung und Erklärung des Tests 

Ethylglucuronid (EtG) ist ein direkter Metabolit von Ethanol, der durch eine enzymatische Konjugation 

von Ethanol mit Glucuronsäure gebildet wird. 1,2 

Während Alkohol normalerweise nur wenige 

Stunden lang im Urin nachweisbar ist, kann EtG bis zu mehreren Tagen, sogar nach vollständiger 

Ausscheidung des Alkohols aus dem Körper, nachgewiesen werden. 3 

EtG kann deshalb als ein 

nützlicher diagnostischer Biomarker zur Feststellung von kürzlichem Alkoholkonsum und zur 

Überwachung von Abstinenz bei Alkoholikern während der Alkoholentzugsbehandlung dienen. 4-7 

Wenn 

die Proben höheren Temperaturen ausgesetzt sind, kann Ethanol in vitro durch die Fermentierung 

von Urinproben entstehen, die Zucker (Diabetes), Bakterien oder Hefe enthalten. 8 

Der EtG-Test kann 

in solchen Fällen als Bestätigungstest eingesetzt werden um nachzuweisen, ob der Alkohol in der 

Probe auf Alkoholkonsum zurückzuführen oder das Ergebnis von In-vitro-Fermentierung ist. EtG wird 

gegenwärtig durch GC/MS und LC/MS/MS überwacht. 9-10 

Der DRI ® Ethylglucunorid-Assay wird als flüssiger, gebrauchsfertiger, homogener Enzym-Immunassay 

geliefert. Der Assay verwendet spezifische Antikörper, die Ethylglucuronid ohne wesentliche 

Kreuzreaktivität mit anderen Glucuronidverbindungen nachweisen können. Der Assay beruht auf der 

Konkurrenz einer mit Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) markierten Droge und freier Droge 

in einer Urinprobe um eine bestimmte Menge spezifischer Antikörper-Bindungsstellen. Sollte keine 

freie Droge in der Probe vorhanden sein, bindet sich der spezifische Antikörper an die mit G6PDH 

markierte Droge und bewirkt eine Abnahme der Enzymaktivität. Durch dieses Phänomen entsteht 

eine direkte Beziehung zwischen Drogenkonzentration im Urin und Enzymaktivität. Das aktive Enzym 

wandelt NAD in NADH um, was eine Extinktionsänderung zur Folge hat, die spektrophotometrisch 

bei 340 nm gemessen werden kann. 

Reagenzien 

Antikörper/Substrat-Reagens: Enthält murine monoklonale Anti-Ethylglucuronid-Antikörper, 

Glukose-6-Phosphat (G6P) und Nikotinamidadenindinukleotid (NAD) in Tris-Puffer mit Natriumazid 

als Konservierungsmittel. 

Enzymkonjugat-Reagens: Enthält ein mit Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) markiertes 

Ethylglucuronid-Derivat in Tris-Puffer mit Natriumazid als Konservierungsmittel. 

Zusätzlich benötigte Materialien (separat verkauft): 

10011207, DRI ® Ethylglucuronid- Negativkalibrator, 25 ml 

10011208, DRI ® Ethylglucuronid-Kalibrator 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, DRI ® Ethylglucuronid 375 ng/ml Kontrolle, 25 ml 




Vorsichtsmaßnahmen und Warnhinweise 

1. Dieser Test dient nur zur In-vitro-Diagnostik. Die Reagenzien sind gesundheitsschädlich 

beim Verschlucken. 

2. Die mit den Assay-Bestandteilen verwendeten Reagenzien enthalten Natriumazid, das 

mit Blei und Kupfer in Wasserrohren reagieren und dabei potenziell explosive Metallazide 

bilden kann. Bei der Entsorgung dieser Reagenzien immer mit viel Wasser nachspülen, 

um eine Ansammlung von Aziden zu verhindern. 

3. Die Reagenzien nicht über das Verfallsdatum hinaus verwenden. 

Zubereitung und Lagerung der Reagenzien 

Die Reagenzien sind gebrauchsfertig; eine weitere Zubereitung ist nicht erforderlich. Die Reagenzien 

sollten gekühlt bei 2 bis 8 °C aufbewahrt werden. Alle Assay-Bestandteile (geöffnet oder ungeöffnet) 

bleiben bis zum Verfallsdatum auf dem entsprechenden Etikett stabil. Die Reagenzien nicht über das 

Verfallsdatum hinaus verwenden. 

Probenentnahme und -handhabung 

Urinproben in Kunststoff- oder Glasbehältern sammeln. Es wird empfohlen, frische Urinproben zu 

verwenden. 

In den amerikanischen Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs wird 

empfohlen, Proben, die nicht innerhalb von 7 Tagen nach Eintreffen im Labor erstmals getestet 

werden, in gesicherten Kühleinheiten aufzubewahren. Urinproben müssen ständig gekühlt 

gelagert werden. 

Zum Testen mit diesem Assay sind Proben mit einem pH-Wert zwischen 4,5 und 11 geeignet. 

4 

In-vitro-Diagnostikum 

Pipettierte Proben sollten möglichst keine groben Verunreinigungen enthalten. Proben, die stark 

trübe sind, müssen vor der Analyse zentrifugiert werden. Die Verfälschung von Urinproben kann zu 

fehlerhaften Ergebnissen führen. Bei Verdacht auf Verfälschung sollte eine neue Urinprobe erhalten 

und beide Proben zur Analyse an das Labor weitergegeben werden. Alle Urinproben sind wie 

potenziell infektiöses Material zu behandeln. 

Durchführung des Assays 

Zur Durchführung dieses Immunassays können Analysegeräte für die klinische Chemie verwendet 

werden, die in der Lage sind, eine konstante Temperatur zu halten, Proben zu pipettieren, Reagenzien 

zu mischen, Enzymraten bei 340 nm zu messen und den Zeitverlauf der Reaktion genau zu 

bestimmen. 

Vor Durchführung des Assays die Angaben zu chemischen Parametern in den anwendungsspezifischen 

Anleitungen für jedes Analysegerät beachten. 

Qualitätskontrolle und Kalibrierung 

Es entspricht der guten Laborpraxis, Kontrollen zur Gewährleistung der ordnungsgemäßen Assay- 

Funktion einzusetzen. Sicher stellen, dass die Kontrollergebnisse in den durch Laborverfahren und 

-richtlinien festgelegten Bereich fallen. Der Test ist ungültig, wenn die Ergebnisse außerhalb des 

festgelegten Bereichs liegen. Zur qualitativen Analyse den Kalibrator mit 500 ng/ml oder 1000 ng/ml 

als Cutoff-Referenz verwenden. Zur semiquantitativen Analyse können alle Kalibratoren verwendet 

werden. Alle QK-Verfahren sollten entsprechend den örtlich gültigen Vorschriften und Gesetzen oder 

Akkreditierungsbestimmungen durchgeführt werden. 

Ergebnisse und erwartete Werte 

Qualitativ 

Zur Unterscheidung zwischen „positiven“ und „negativen“ Proben kann entweder der Kalibrator mit 

500 ng/ml oder der mit 1000 ng/ml als Cutoff-Referenz verwendet werden. Eine Probe gilt als positiv, 

wenn der Extinktionsunterschied (∆A) gleich dem oder größer als der mit dem Cutoff-Kalibrator 

erhaltene Wert ist. Eine Probe gilt als negativ, wenn der Extinktionsunterschied (∆A) niedriger als der 

mit dem Cutoff-Kalibrator erhaltene Wert ist. 

Semiquantitativ 

Die Ethylglucunorid-Konzentration in den Proben lässt sich grob abschätzen, indem mit allen 

Kalibratoren eine Standardkurve erstellt und die Proben anschließend relativ zur Standardkurve 

quantitativ bewertet werden. Wenn die EtG-Konzentration in der Probe größer als der höchste 

Kalibrator ist, kann sie mit dem Negativkalibrator verdünnt und erneut getestet werden. 

Ausgabebereich 

Der DRI ® Ethylglucuronid-Assay ist für die semiquantitative Verwendung im Bereich zwischen 

100 ng/ml, dem niedrigsten Kalibrator, und 2000 ng/ml, dem Wert des High-Kalibrators, angelegt. 

Einschränkungen 

1. Ein positives Ergebnis bei der Verwendung des DRI ® Ethylglucuronid-Assays zeigt 

lediglich die Präsenz von Ethylglucuronid an und korreliert nicht unbedingt mit dem 

Ausmaß physiologischer und psychologischer Wirkungen. 

2. Für andere Körperflüssigkeiten als Urin sind bisher keine Leistungsdaten für den DRI ® 

Ethylglucuronid-Assay erarbeitet worden. 

3. Dieser DRI ® Ethylglucuronid-Assay wurde auf Analysegeräten mit integrierter 

Zellwaschung validiert. Falls Ihr Analysegerät nicht mit einer integrierten Zellwaschung 

ausgestattet ist, wenden Sie sich an Ihre Vertretung von Thermo Fisher Scientific. 

4. Bei der Weitergabe von Ergebnissen ist vorsichtig vorzugehen, da Urintestergebnisse 

vielen Einflussfaktoren, wie z. B. Flüssigkeitsaufnahme und anderen biologischen 

Faktoren unterliegen. 

5. Es ist möglich, dass Substanzen, die nicht in der Spezifitätsstudie untersucht wurden, 

den Test stören und zu falschen Ergebnissen führen. 

Typische Leistungsdaten 

Typische, mit dem Hitachi 917 Analysegerät erhaltene Leistungsergebnisse sind unten aufgeführt. 

Möglicherweise unterscheiden sich die in Ihrem Labor erhaltenen Ergebnisse von diesen Daten. 

Weitere für das jeweilige Analysegerät spezifische Leistungsdaten sind dem Applikationsblatt des 

betreffenden Analysegerätes zu entnehmen. 

Präzision 

Die DRI ® Ethylglucunorid-Kontrollen (375, 625, 750 und 1250 ng/ml) und die Cutoff-Kalibratoren (500 

und 1000 ng/ml) wurden im qualitativen (mA/min) und semiquantitativen Modus (ng/ml) nach einem 

modifiziertem NCCLS-Protokoll untersucht. Die unten angegebenen Ergebnisse beruhen auf der 

Analyse aller Proben in Replikaten von jeweils 6 zweimal täglich für 10 Tage. 

Qualitativ (mA/min) 

Kalibrator/ 

Kontrolle 

Cutoff 500 ng/ml 

Intratestlaufpräzision Gesamtpräzision 

N=120 Mittelwert St.abw. VK (%) Mittelwert St.abw. VK (%) 

375 

500 

625 

392 

417 

439 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 

392 

417 

439 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6

Qualitativ (mA/min) 

Kalibrator/ 

Kontrolle 




750 

1000 

1250 

461 

494 

524 

Semiquantitativ (ng/ml) 

Kalibrator/ 

Kontrolle 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 

461 

494 

524 


3,4 

3,4 

3,8 


0,7 

0,7 

0,7 


375 

500 

625 

373 

502 

623 

Semiquantitativ (ng/ml) 

Kalibrator/ 

Kontrolle 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 

373 

502 

623 


18,1 

19,4 

22,3 


4,9 

3,9 

3,6 


750 

1000 

1250 

756 

993 

1232 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

756 

993 

1232 

Cutoff-Charakterisierung – Wiederfindung der Dotierung 

31,2 

34,3 

43,5 

Die Cutoff-Kalibratoren, 500 ng/ml und 1000 ng/ml, und ±25-%-Kontrollen wurden durch die 

Dotierung von EtG-freiem Negativ-Urin mit Ethylglucunorid zubereitet. Der Cutoff-Kalibrator und 

die Kontrollen wurden sowohl im qualitativen als auch im semiquantitativen Modus getestet (n=21). 

Die qualitativen Daten wurden auf Präzision und Nachweisgenauigkeit der Kontrollen, und die 

semiquantitativen Daten auf prozentuale Wiederfindung und Genauigkeit analysiert. Die Ergebnisse 

zeigten an, dass im qualitativen Modus alle vier Kontrollen richtig wiedergefunden wurden: 

Negativkontrollen als negativ (Rate unterhalb der Cutoff-Kalibratorrate) und Positivkontrollen als 

positiv (Rate oberhalb der Cutoff-Kalibratorrate). Im semiquantitativen Modus wurden die Kontrollen 

innerhalb von ±10 % der Nominalwerte wiedergefunden. Die Genauigkeit lag bei

Linearität 

Die Linearität des Assays wurde durch das Testen der Verdünnungswiederfindung einer Reihe von 

Ethylglucunorid-Proben im Assay bestimmt. Eine Urinprobe mit 2000 ng/ml Ethylglucuronid wurde mit EtGfreiem 

Urin aus Cutoff-Kalibratoren in 25%-Stufen seriell verdünnt. Diese Proben wurden im Assay sowohl 

im qualitativen als auch im semiquantitativen Modus getestet. Alle Proben wurden im semiquantitativen 

Modus innerhalb von ±20 % der erwarteten Werte und im qualitativen Modus innerhalb der erwarteten 

Rate (mA/min) wiedergefunden, was darauf hinweist, dass der Assay bis zu 2000 ng/ml linear verläuft. 

Genauigkeit 

Einhundertundvierundachtzig (184) Proben wurden mit dem DRI ® Ethylglucuronid-Assay sowohl 

im qualitativen als auch im semiquantitativen Modus analysiert und die Ergebnisse mit der LC/ 

MS/MS-Methode verglichen. Sowohl im qualitativen als auch im semiquantitativen Modus betrug 

die positive Probenübereinstimmung zwischen dem DRI ® EtG-Assay und LC/MS/MS 96 %. Die 

sowohl im qualitativen als auch im semiquantitativen Modus erzielten Ergebnisse sind nachstehend 

zusammengefasst. 

Qualitativ: Von 184 Proben wurden sowohl durch den Immunassay als auch durch LC/MS/MS bei 

einem Cutoff von 500 ng/ml 94 Proben als positiv und 85 Proben als negativ, und bei einem Cutoff von 

1000 ng/ml 44 Proben als positiv und 138 Proben als negativ nachgewiesen. Die Gesamtkonkordanz 

zwischen dem Immunassay und LC/MS/MS betrug 97 %. Es gab fünf diskordante Proben bei einem 

Cutoff von 500 ng/ml und zwei diskordante Proben bei einem Cutoff von 1000 ng/ml. 

Cutoff 500 ng/ml Cutoff 1000 ng/ml 

DRI ® EtG-Assay DRI ® EtG-Assay 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Zwei der drei Proben durch den Immunassay waren grenzwertig negativ. 

Eine Probe war durch LC/MS/MS grenzwertig positiv. 

¥ Im Immunassay waren Proben grenzwertig positiv. 

♠ Im Immunassay waren Proben grenzwertig negativ. LC/MS/MS-Werte lagen zwischen 

1000 und 1250 ng/ml. 

Semiquantitativ: Im semiquantitativen Modus wurden Proben mit einer EtG-Konzentration von 

>500 ng/ml und 1000 ng/ml im Immunassay als positiv bewertet. Von 184 Proben wurden sowohl 

durch die Immunassay- als auch durch die LC/MS/MS-Methoden 94 Proben als positiv und 85 

Proben als negativ nachgewiesen. 

LC/MS/MS 

DRI ® EtG-Assay 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Bei den Proben handelte es sich um dieselben Proben wie im qualitativen 

500-ng/ml-Modus. 

¥ Bei den Proben handelte es sich um dieselben Proben wie im qualitativen 

500-ng/ml-Modus. 

6 

Literatur 

Hersteller: 




Gebührenfreie Telefonnummer in den USA: 1-800-232-3342 

Bevollmächtigter in der EU: 



D-94032 Passau 

Tel: 0851 886 89 0 

Fax: 0851 886 89 10 

Andere Länder: 

Bitte wenden Sie sich an die zuständige Vertretung von Microgenics. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













Dosage DRI ® Éthylglucuronide 

Réf. 10011723 (Coffret de 18 ml) 

10011297 (Coffret de 68 ml) 

10011226 (Coffret de 500 ml) 

Application 

Le dosage immunoenzymatique DRI ® Éthylglucuronide est destiné à la détermination qualitative 

et semi-quantitative de l’éthylglucuronide dans l’urine humaine avec des seuils de 500 ng/ml et de 

1000 ng/ml. 

Ce dosage ne fournit qu’un résultat analytique préliminaire. Tout résultat positif devra 

être confirmé par une autre méthode plus spécifique. Les méthodes de validation par 

chromatographie en phase gazeuse/liquide couplée à la spectrométrie de masse (CG-SM) et 

par chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (CL- 

SM-SM) sont préférables. Les résultats d’un test de dépistage de toxicomanie doivent être 

interprétés en tenant compte du tableau clinique et de l’avis d’un professionnel, en particulier 

si des résultats positifs préliminaires sont utilisés. 

Résumé et description du test 

L’éthylglucuronide (EtG) est un métabolite direct de l’éthanol, qui est formé par conjugaison 

enzymatique de l’éthanol avec l’acide glucuronique. 1,2 

L’alcool dans l’urine n’est normalement détecté 

que pendant quelques heures, alors que l’éthylglucuronide peut être détecté même jusqu’à plusieurs 

jours après l’élimination complète de l’alcool par le corps. 3 

Par conséquent, l’éthylglucuronide peut 

être un biomarqueur diagnostique utile pour déterminer une consommation récente d’alcool et pour 

contrôler l’abstinence des alcooliques dans les programmes de sevrage alcoolique. 4-7 

L’éthanol 

peut être produit in vitro par la fermentation des échantillons d’urine contenant du sucre (diabète), 

des bactéries ou des levures lorsque les échantillons sont exposés à températures chaudes. 8 

Dans 

ces cas, le dosage de l’éthylglucuronide peut être utilisé comme analyse de confirmation afin de 

déterminer si l’alcool présent dans l’échantillon est dû à une consommation d’alcool ou s’il s’est 

formé in vitro suite à une fermentation. Actuellement, l’éthylglucuronide est déterminé par CG-SM 

et par CL-SM-SM. 9-10 

Le dosage DRI ® Éthylglucuronide est fourni sous forme de dosage immunoenzymatique en phase 

homogène liquide et prêt à l’emploi. Le dosage utilise des anticorps spécifiques qui peuvent détecter 

l’éthylglucuronide, sans réactivité croisée significative avec d’autres composés glucuronides. 

Le dosage est basé sur la compétition entre un médicament marqué à la glucose-6-phosphate 

déshydrogénase (G6PDH) et le médicament libre dans l’échantillon urinaire pour une quantité 

déterminée de sites de liaison de l’anticorps spécifique du médicament. En l’absence de médicament 

libre dans l’échantillon, l’anticorps spécifique lie le médicament marqué à la G6PDH et provoque 

une diminution de l’activité enzymatique. Ce phénomène engendre une relation directe entre la 

concentration du médicament présent dans l’échantillon urinaire et l’activité enzymatique. L’enzyme 

active convertit le NAD en NADH, ce qui entraîne un changement d’absorbance pouvant être mesuré 

par spectrophotométrie à 340 nm. 

Réactifs 

Réactif anticorps/substrat : Contient un anticorps monoclonal murin anti-éthylglucuronide, du 

glucose-6 phosphate (G6P) et du nicotinamide adénine dinucléotide (NAD) dans un tampon Tris 

avec de l’azide de sodium comme conservateur. 

Réactif conjugué enzymatique : Contient un dérivé de l’éthylglucuronide marqué à la glucose- 

6-phosphate déshydrogénase (G6PDH) en tampon Tris avec de l’azide de sodium comme 

conservateur. 

Matériel supplémentaire requis (vendu individuellement) : 

10011207, Calibrateur négatif DRI ® Éthylglucuronide, 25 ml 

10011208, Calibrateur DRI ® Éthylglucuronide (100 ng/ml), 10 ml 




10012135, Contrôle DRI ® Éthylglucuronide (375 ng/ml), 25 ml 




Mises en garde et avertissements 

1. Ce test est réservé à un usage diagnostique in vitro. Les réactifs sont nocifs par 

ingestion. 

2. Les réactifs utilisés dans ce dosage contiennent de l’azide de sodium, susceptible de 

réagir dans les canalisations en plomb ou en cuivre et de former des azides métalliques 

potentiellement explosifs. Lors de l’élimination de ces réactifs, toujours rincer à grande 

eau pour éviter l’accumulation d’azide. 

3. Ne pas utiliser les réactifs au-delà de leur date de péremption. 

Préparation et stockage des réactifs 

Les réactifs sont prêts à l’emploi ; aucune préparation supplémentaire n’est nécessaire. Les réactifs 

doivent être conservés réfrigérés (entre 2 °C et 8 °C). Tous les composants du dosage, ouverts ou 

non ouverts, restent stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur leur étiquette. Ne pas utiliser 

les réactifs au-delà de leur date de péremption. 

Prélèvement et manipulation des échantillons 

Collecter les échantillons urinaires dans des récipients en plastique ou en verre. Il est recommandé 

d’effectuer le dosage sur des échantillons d’urine frais. 

Les Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs recommandent que 

tout échantillon qui n’est pas initialement testé dans les 7 jours suivant son arrivée au laboratoire 

doit être conservé dans un réfrigérateur en milieu fermé. Les échantillons d’urine doivent être 

continuellement réfrigérés. 

Les échantillons dont la plage de pH se situe entre 4,5 et 11 conviennent pour ce dosage. 

7 

Pour usage diagnostique in vitro 

Les échantillons prélevés à la pipette ne doivent pas contenir de gros débris. Centrifuger les 

échantillons très troubles avant l’analyse. L’adultération des échantillons d’urine peut produire des 

résultats erronés. Si l’on soupçonne une adultération, recueillir un autre échantillon et les envoyer 

tous les deux au laboratoire aux fins d’analyse. Manipuler tous les échantillons urinaires comme 

s’ils étaient potentiellement infectieux. 

Procédure du dosage 

Pour réaliser ce dosage immunologique, utiliser un analyseur de chimie clinique qui soit capable 

de maintenir une température constante, de prélever des échantillons à la pipette, de mélanger les 

réactifs, de mesurer les taux enzymatiques à 340 nm et de minuter la réaction avec précision. 

Se référer aux directives d’utilisation spécifiques définissant les paramètres chimiques de l’analyseur 

avant de réaliser le dosage. 

Contrôle qualité et calibration 

Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent d’utiliser des échantillons de contrôle pour 

garantir des performances correctes du dosage. S’assurer que les résultats des contrôles se situent 

dans les plages établies définies par les procédures et les recommandations du laboratoire. Si les 

résultats se situent en dehors de la plage de valeurs établie, les résultats du dosage ne sont pas 

valides. Pour les analyses qualitatives, utiliser le calibrateur de 500 ng/ml ou de 1000 ng/ml comme 

valeur seuil. Pour les analyses semi-quantitatives, utiliser tous les calibrateurs. Tous les contrôles 

qualité doivent être réalisés conformément aux règlements locaux et nationaux ou aux exigences 

d’agrément. 

Résultats et valeurs attendues 

Détermination qualitative 

On peut utiliser le calibrateur de 500 ng/ml ou celui de 1000 ng/ml comme seuil de référence 

pour différencier les échantillons positifs des échantillons négatifs. Un échantillon qui présente 

un changement de valeur d’absorbance (∆A) égal ou supérieur à la valeur obtenue avec le 

calibrateur seuil est considéré comme positif. Un échantillon qui présente un changement de valeur 

d’absorbance (∆A) inférieur à la valeur obtenue avec le calibrateur seuil est considéré comme 

négatif. 

Détermination semi-quantitative 

On peut obtenir une estimation approximative de la concentration d’éthylglucuronide dans les 

échantillons en traçant une courbe de calibration avec tous les calibrateurs et en quantifiant 

les échantillons à partir de la courbe de calibration. Si la concentration d’éthylglucuronide d’un 

échantillon est supérieure à celle du calibrateur de concentration la plus élevée, il est possible de 

diluer l’échantillon avec le calibrateur négatif et de le tester à nouveau. 

Plage d’efficacité 

Le dosage DRI ® Éthylglucuronide est conçu pour une détermination semi-quantitative sur la 

plage allant de 100 ng/ml, le calibrateur de concentration la plus faible, à 2000 ng/ml, la valeur du 

calibrateur de concentration élevée. 

Limitations 

1. Un résultat positif avec le dosage DRI ® Éthylglucuronide indique uniquement la 

présence d’éthylglucuronide et n’est pas nécessairement en corrélation avec 

l’importance des effets physiologiques et psychologiques. 

2. Les performances du dosage DRI ® Éthylglucuronide n’ont pas été établies pour des 

liquides corporels autres que l’urine humaine. 

3. Le dosage DRI ® Éthylglucuronide a été validé sur les analyseurs comprenant un 

lavage de cellules intégral. Si l’analyseur utilisé ne comprend pas de lavage de cellules 

intégral, s’adresser au représentant local de Thermo Fisher Scientific. 

4. Prendre toutes les précautions nécessaires lors de l’expression des résultats car 

de nombreux facteurs tels que l’apport hydrique ou d’autres facteurs biologiques 

peuvent influencer le résultat d’un test urinaire. 

5. Il est possible que d’autres substances que celles recherchées dans l’étude de 

spécificité interfèrent avec le test et faussent les résultats. 

Performance caractéristique 

Les résultats de performance caractéristiques indiqués ci-dessous ont été obtenus avec un analyseur 

Hitachi 917. Les résultats obtenus dans votre laboratoire peuvent être différents de ces données. 

Pour consulter d’autres données de performance spécifiques à l’analyseur, se reporter à la fiche 

technique de ce dernier. 

Précision 

Les contrôles DRI ® Éthylglucuronide (375, 625, 750 et 1250 ng/ml) et les calibrateurs seuil (500 et 

1000 ng/ml) ont été testés en modes qualitatif (mA/min) et semi-quantitatif (ng/ml) selon un protocole 

modifié du NCCLS. Les résultats présentés ci-dessous ont été générés en analysant 6 répliques de 

tous les échantillons, deux fois par jour, pendant 10 jours. 

Détermination qualitative (mA/min) 

Calibrateur/contrôle Seuil 500 ng/ml 

N=120 Moyenne 

375 

500 

625 

392 

417 

439 

Précision intra-série Précision totale 

Écart- 

type 

2,1 

2,1 

2,0 

CV (%) Moyenne 

0,5 

0,5 

0,5 

392 

417 

439 

Écarttype 

2,9 

3,1 

2,7 

CV (%) 

0,7 

0,7 

0,6

Détermination qualitative (mA/min) 


N=120 Moyenne 

750 

1000 

1250 

461 

494 

524 


Écarttype 

2,4 

2,7 

2,7 

Détermination semi-quantitative (ng/ml) 


0,5 

0,6 

0,5 

461 

494 

524 


N=120 Moyenne 

375 

500 

625 

373 

502 

623 

Écarttype 

3,4 

3,4 

3,8 


Écarttype 

11,3 

10,5 

13,2 

Détermination semi-quantitative (ng/ml) 


3,0 

2,1 

2,1 

373 

502 

623 


N=120 Moyenne 

750 

1000 

1250 

756 

993 

1232 

Écarttype 

18,1 

19,4 

22,3 


Écarttype 

16,9 

21,1 

23,0 


2,2 

2,1 

1,9 

756 

993 

1232 

Caractérisation du seuil – Détection d’échantillons enrichis 

Écarttype 

31,2 

34,3 

43,5 

CV (%) 

0,7 

0,7 

0,7 

CV (%) 

4,9 

3,9 

3,6 

CV (%) 

Des calibrateurs seuils, de 500 ng/ml et de 1000 ng/ml, et des contrôles de ±25 % ont été 

préparés en enrichissant avec de l’éthylglucuronide des échantillons d’urine ne contenant pas 

d’éthylglucuronide. Le calibrateur seuil et les contrôles ont été analysés (n=21) en mode qualitatif et 

en mode semi-quantitatif. Les données qualitatives ont été analysées pour déterminer la précision 

et l’exactitude de la détection des contrôles et les données semi-quantitatives ont été analysées 

pour déterminer la précision et la détection en %. Les résultats ont indiqué que les quatre contrôles 

ont été détectés avec exactitude en mode qualitatif, les contrôles négatifs produisant un résultat 

négatif (valeur inférieure à celle du calibrateur seuil) et les contrôles positifs produisant un résultat 

positif (valeur supérieure à celle du calibrateur seuil). En mode semi-quantitatif, les contrôles ont été 

détectés avec des valeurs de ±10 % des valeurs nominales. La précision a produit un CV de moins 

de 1,0 % en mode qualitatif et un CV de moins de 5,0 % en mode semi-quantitatif. 

Interférence avec les substances endogènes 

Les interférences potentielles du pH et de substances physiologiques endogènes sur la détection de 

l’éthylglucuronide avec le dosage DRI ® Éthylglucuronide ont été évaluées en ajoutant des quantités 

connues de substances potentiellement interférentes dans les contrôles de ±25 % pour les deux 

seuils (500 ng/ml et 1000 ng/ml), puis en analysant les échantillons pour déterminer la détection 

de l’éthylglucuronide. Aucune interférence n’a été observée lors de l’ajout des composés suivants 

jusqu’aux concentrations indiquées ci-dessous. 

Substance interférente Concentration finale 

mg/dl 

Acétone 

Acide acétylsalicylique 

Acide ascorbique 

Acide oxalique 

Albumine sérique humaine 

Caféine 

Chlorure de sodium 

Créatinine 

Éthanol 

Galactose 

Glucose 

Hémoglobine 

Ibuprofène 

Paracétamol 

Riboflavine 

Urée 

pH 

1000 

10 

190 

30 

500 

10 

900 

400 

10 

10 

3000 

300 

10 

10 

3,75 

1000 

4,5-11,0 

4,1 

3,5 

3,5 

8 

Spécificité 

La réactivité croisée de composés apparentés de l’éthanol et de composés glucuronides présents 

couramment dans l’urine a été analysée avec le dosage en utilisant le calibrateur seuil de 500 ng/ml. 

Les solutions pouvant produire des réactions croisées ont été préparées en ajoutant une quantité 

connue de chaque composé à de l’urine ne contenant pas d’éthylglucuronide. Tous les composés 

ont produit des résultats négatifs aux concentrations indiquées dans le tableau ci-dessous. 

Composé Concentration (ng/ml) 

Acétaldéhyde 

Acide glucuronique 

Alprazolam glucuronide 

Buprénorphine glucuronide 

Butanol 

D-glucose 

Éthanol 

Éthylène glycol 

Hydroxycoumarine glucuronide 

Isopropanol 

Lorazepam glucuronide 

Méthanol 

Méthylglucuronide 

Morphine-3-glucuronide 


Norbuprénorphine glucuronide 

n-propanol 

Oxazépam glucuronide 

p-nitrophényl glucuronide 

Témazépam glucuronide 

Testostérone Glucuronide 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

100000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

5000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

10000 

La réactivité croisée de composés non structurellement apparentés a été analysée avec le 

dosage en utilisant le calibrateur seuil de 500 ng/ml. Tous les composés ont produit des résultats 

négatifs aux concentrations indiquées dans le tableau ci-dessous. 

Sensibilité 

6 acétyl morphine 

Acide acétylsalicylique 

Amitryptiline 

Amoxicilline 

Amphétamine 

Benzoylecgonine 

Caféine 

Carbamazépine 

Chlorpromazine 

Cimétidine 

Clomipramine 

Codéine 

Désipramine 

Dextrométhorphane 

Dihydrocodéine 

Doxépine 

Éphédrine 

Fentanyl 

Fluoxéthine 

Fluphénazine 

Héroïne 

Hydrocodone 

Hydromorphone 

Ibuprofène 

Imipramine 

Lévorphanone 

Maprotiline 

Mépéridine 

Méthadone 

Métronidazole 

Morphine 


Nalbuphine 

Naltrexone 

Norcodéine 

Normorphine 

Nortryptiline 

Oxazépam 

Oxycodone 

Paracétamol 

Phencyclidine 

Phénobarbital 

Ranitidine 

Sécobarbital 

Talwin 

Thébaïne 

Thioridazine 

Tramadol 

Composé Concentration (µg/ml) 

500 

500 

100 

100 

1000 

1000 

100 

500 

100 

500 

100 

1000 

1000 

200 

1000 

200 

2000 

200 

1000 

500 

1000 

200 

200 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

3000 

1000 

1000 

500 

500 

500 

500 

1000 

1000 

500 

1000 

500 

100 

500 

500 

La sensibilité du dosage a été évaluée à 15,3 ng/ml par l’EP Evaluator 7.0.

Linéarité 

La linéarité du dosage a été déterminée en analysant la détection de dilution d’une série d’échantillons 

d’éthylglucuronide avec le dosage. Des dilutions sérielles d’un échantillon d’urine contenant 

2000 ng/ml d’éthylglucuronide ont été réalisées avec de l’urine ne contenant pas d’éthylglucuronide 

à des incréments de 25 % des calibrateurs seuils. Ces échantillons ont été analysés avec le 

dosage en mode qualitatif et en mode semi-quantitatif. Tous les échantillons ont été détectés 

avec une valeur de ±20 % des valeurs attendues en mode semi-quantitatif et ±20 % des valeurs 

attendues (mA/min) en mode qualitatif, ce qui indique que le dosage est linéaire jusqu’à 2000 ng/ml. 

Exactitude 

Cent-quatre-vingt-quatre échantillons ont été analysés avec le dosage DRI ® Éthylglucuronide en mode 

qualitatif et en mode semi-quantitatif et les résultats ont été comparés à la méthode de CL-SM-SM. En 

mode qualitatif et en mode semi-quantitatif, la coïncidence des échantillons positifs entre le dosage 

DRI ® Éthylglucuronide et la méthode de CL-SM-SM était de 96 %. Les résultats obtenus en modes 

qualitatif et semi-quantitatif sont résumés ci-dessous. 

Détermination qualitative : Sur 184 échantillons, en utilisant un seuil de 500 ng/ml, 94 échantillons 

ont produit un résultat positif et 85 échantillons ont produit un résultat négatif et, avec un seuil de 

1000 ng/ml, 44 échantillons ont produit un résultat positif et 138 échantillons ont produit un résultat 

négatif aussi bien avec le dosage immunologique qu’avec la CL-SM-SM. Le taux de coïncidence 

globale entre le dosage immunologique et la CL-SM-SM était de 97 %. Cinq échantillons étaient 

discordants avec le seuil de 500 ng/ml et deux l’étaient avec le seuil de 1000 ng/ml. 

Seuil de 500 ng/ml Seuil de 1000 ng/ml 

Dosage DRI ® EtG Dosage DRI ® EtG 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 

CL-SM-SM CL-SM-SM 

- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Deux des trois échantillons ont produit un résultat négatif limite avec le dosage 

immunologique. 

Un échantillon a produit un résultat positif limite avec la CL-SM-SM. 

¥ Les échantillons ont produit un résultat positif limite avec le dosage immunologique. 

♠ Les échantillons ont produit un résultat négatif limite avec le dosage immunologique. 

Les valeurs de la CL-SM-SM étaient entre 1000 et 1250 ng/ml. 

Détermination semi-quantitative : En mode semi-quantitatif, les échantillons ayant une concentration 

en éthylglucuronide supérieure à 500 ng/ml et à 1000 ng/ml ont été considérés comme positifs avec 

le dosage immunologique. Sur 184 échantillons, 94 échantillons ont produit un résultat positif et 

85 échantillons ont produit un résultat négatif aussi bien avec le dosage immunologique qu’avec 

la CL-SM-SM. 

CL-SM-SM 

Dosage DRI ® EtG 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Les échantillons étaient les mêmes échantillons qu’en mode qualitatif avec un seuil 

de 500 ng/ml. 

¥ Les échantillons étaient les mêmes échantillons qu’en mode qualitatif avec un seuil 

de 500 ng/ml. 

9 

Bibliographie 

Fabricant : 



Fremont, CA 94538 États-Unis 

Numéro gratuit depuis les États-Unis : +1-800-232-3342 

Mandataire établi dans l’UE : 



D-94032 Passau, Allemagne 

Tél : +49 (0) 851 886 89 0 

Fax : +49 (0) 851 886 89 10 

Autres pays : 

Contacter le représentant local de Microgenics. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













Análisis de etil-glucurónido DRI ® 

N.° de catálogo: 10011723 (kit de 18 ml) 

10011297 (kit de 68 ml) 

10011226 (kit de 500 ml) 

Indicaciones 

El enzimoinmunoanálisis de etil-glucurónido DRI ® está indicado para la determinación cualitativa y 

semicuantitativa de etil-glucurónido en orina humana, con valores de cut-off de 500 y 1000 ng/ml. 

Este análisis sólo ofrece un resultado analítico preliminar. Para obtener un resultado 

analítico confirmado, debe emplearse un método alternativo más específico. Los métodos 

de confirmación recomendados son la técnica combinada de cromatografía de gases y 

espectrometría de masas con cromatografía líquida (GC/MS), y la de cromatografía líquida/ 

espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS). Al valorar resultados analíticos referentes 

a drogas, y sobre todo cuando se trata de resultados positivos preliminares, deben aplicarse 

consideraciones clínicas y el criterio profesional. 

Resumen y explicación del análisis 

El etil-glucurónido (EtG) es un metabolito directo del etanol, formado por conjugación enzimática del 

etanol con el ácido glucurónido. 1,2 Por lo general, solo se detecta alcohol en la orina durante algunas 

horas, mientras que el EtG puede detectarse hasta varios días después, incluso tras la eliminación 

total del alcohol del organismo. 3 Por tanto, el EtG puede ser un biomarcador de diagnóstico útil 

para determinar el uso reciente de alcohol y controlar la abstinencia en los programas de cura 

de deshabituación para personas alcohólicas. 4-7 Se puede producir etanol in vitro debido a la 

fermentación de las muestras de orina que contienen azúcares (de pacientes diabéticos), bacterias 

o levaduras, al exponer las muestras a temperaturas templadas. 8 

En esos casos, se puede utilizar la 

prueba de EtG como prueba de confirmación para determinar si el alcohol de la muestra se debe al 

consumo de alcohol o se formó in vitro como resultado de la fermentación. En la actualidad, el EtG 

se controla mediante GC/MS y LC/MS/MS. 9-10 

El análisis de etil-glucurónido DRI ® se suministra como un enzimoinmunoanálisis homogéneo líquido, 

listo para su uso. El análisis emplea anticuerpos específicos capaces de detectar el etil-glucurónido 

sin reactividad cruzada significativa con otros compuestos glucurónidos. El análisis se basa en la 

competición entre fármaco marcado con glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) y el fármaco 

libre de la muestra de orina por una cantidad fija de lugares de unión de anticuerpos específicos. 

Si la muestra no contiene fármaco libre, el anticuerpo específico se une al fármaco marcado con 

G6PDH, lo que provoca una disminución de la actividad enzimática. Este fenómeno crea una 

relación directa entre la concentración urinaria del fármaco y la actividad enzimática. La enzima 

activa convierte el NAD en NADH, lo que produce un cambio de absorbencia que puede medirse 

por espectrofotometría a 340 nm. 

Reactivos 

Reactivo de anticuerpo y sustrato: contiene anticuerpos monoclonales de ratón antietil-glucurónido, 

glucosa-6-fosfato (G6P) y nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) en trometamol (tampón Tris) con 

azida sódica como conservante. 

Reactivo de conjugado enzimático: contiene derivado de etil-glucurónido marcado con glucosa- 

6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) en trometamol con azida sódica como conservante. 

Material adicional requerido (se vende por separado): 

10011207, calibrador negativo de etil-glucurónido DRI ® , 25 ml 

10011208, calibrador de etil-glucurónido DRI ® 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, control de etil-glucurónido DRI ® 375 ng/ml, 25 ml 




Precauciones y advertencias 

1. Esta prueba es para uso diagnóstico in vitro solamente. Los reactivos son nocivos si 

se ingieren. 

2. Los reactivos empleados en los componentes del análisis contienen azida sódica, que 

puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuberías para formar azidas metálicas 

potencialmente explosivas. Al desechar dichos reactivos, debe enjuagarse siempre 

con abundante agua para evitar la acumulación de azidas. 

3. No utilice los reactivos después de su fecha de caducidad. 

Preparación y conservación de los reactivos 

Los reactivos están listos para su uso y no requieren ninguna preparación adicional. Los reactivos 

deben conservarse en refrigeración, entre 2 °C y 8 °C. Todos los componentes del análisis son estables 

hasta la fecha de caducidad indicada en sus etiquetas respectivas, independientemente de que se 

hayan abierto o no sus frascos. No utilice los reactivos después de su fecha de caducidad. 

Recogida y manipulación de muestras 

Obtenga muestras de orina en recipientes de plástico o cristal. Se recomienda emplear muestras 

de orina recién obtenidas. 

Las pautas indicadas en Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs 

recomiendan que las muestras que no se analicen en los 7 días posteriores a su llegada al 

laboratorio se conserven en unidades de refrigeración seguras. Las muestras de orina deben 

conservarse en refrigeración en todo momento. 

Las muestras con un pH entre 4,5 y 11 son adecuadas para analizarse con esta prueba. 

10 

Para uso diagnóstico In Vitro 

Debe hacerse todo lo posible para mantener las muestras pipeteadas libres de residuos 

macroscópicos. Centrifugue las muestras muy turbias antes del análisis. La adulteración de las 

muestras de orina puede afectar a los resultados de la prueba; si se sospecha que la muestra puede 

estar adulterada, obtenga otra muestra y envíe ambas al laboratorio para su análisis. Manipule 

todas las muestras de orina como si fueran potencialmente infecciosas. 

Procedimiento del análisis 

Para efectuar este inmunoanálisis, pueden utilizarse analizadores químicos clínicos capaces de 

mantener una temperatura constante, pipetear muestras, mezclar reactivos, medir velocidades 

enzimáticas a 340 nm y cronometrar la reacción de manera precisa. 

Consulte las instrucciones específicas para la aplicación de cada analizador para obtener los 

parámetros químicos antes de efectuar el análisis. 

Control de calidad y calibración 

Las prácticas correctas de laboratorio recomiendan emplear muestras de control para asegurar el 

buen funcionamiento del análisis. Asegúrese de que los resultados de los controles estén dentro 

del intervalo establecido según los procedimientos y las pautas del laboratorio. Si los resultados 

están fuera de los rangos establecidos, los resultados del análisis no son válidos. Para el análisis 

cualitativo, utilice los calibradores de 500 ng/ml o 1000 ng/ml como nivel de cut-off. Para el 

análisis semicuantitativo, utilice todos los calibradores. Todos los requisitos de control de calidad 

deben realizarse de acuerdo con las normas o los requisitos de acreditación locales, estatales o 

federales. 

Resultados y valores esperados 

Modo cualitativo 

Los calibradores de 500 ng/ml y 1000 ng/ml pueden utilizarse como referencia de cut-off para 

distinguir las muestras «positivas» de las «negativas». Las muestras cuyo valor de absorbencia 

(∆A) presente un cambio igual o mayor que el obtenido con el calibrador de cut-off se consideran 

positivas. Las muestras cuyo valor de absorbencia (∆A) presente un cambio menor que el obtenido 

con el calibrador de cut-off se consideran negativas. 

Modo semicuantitativo 

Para obtener una estimación aproximada de la concentración de etil-glucurónido en las muestras, 

puede trazarse una curva estándar con todos los calibradores y cuantificar las muestras a partir de 

dicha curva. Si la concentración de EtG en la muestra es mayor que la del calibrador más alto, se 

puede diluir la muestra con el calibrador negativo y analizarla de nuevo. 

Rango de resultados 

El análisis de etil-glucurónido DRI ® está diseñado para el uso semicuantitativo en un intervalo entre 

100 ng/ml, el calibrador más bajo, y 2000 ng/ml, el valor del calibrador más alto. 

Limitaciones 

1. Un resultado positivo con el análisis de etil-glucurónido DRI ® solo indica la presencia 

de etil-glucurónido y no se correlaciona necesariamente con el grado de efectos 

fisiológicos ni psicológicos. 

2. Las características de rendimiento del análisis de etil-glucurónido DRI ® solo se 

han determinado con orina humana, y no se han determinado con otros líquidos 

corporales. 

3. El análisis de etil-glucurónido DRI ® se validó en analizadores con lavado de pocillos 

incorporado. Si el analizador utilizado no tiene el lavado de pocillos incorporado, 

póngase en contacto con el representante local de Thermo Fisher Scientific. 

4. Al presentar resultados debe tenerse cuidado, ya que hay muchos factores que 

pueden influir en el resultado de los análisis de orina, como la ingestión de líquidos 

y otros factores biológicos. 

5. Es posible que otras sustancias aparte de las investigadas en el estudio de 

especificidad interfieran con la prueba y produzcan resultados falsos. 

Características típicas de rendimiento 

A continuación se muestran los resultados de rendimiento típicos obtenidos con el analizador Hitachi 

917. Los resultados obtenidos en su laboratorio pueden ser distintos a estos datos. Para obtener 

información sobre el rendimiento específico de otros analizadores, consulte la hoja de aplicaciones 

específica del analizador. 

Precisión 

Se analizaron los controles de etil-glucurónido DRI ® (375, 625, 750 y 1250 ng/ml) y los calibradores 

de cut-off (500 y 1000 ng/ml) en los modos cualitativo (mA/min) y semicuantitativo (ng/ml), mediante 

un protocolo del NCCLS modificado. Los resultados que se muestran a continuación se generaron 

analizando las muestras por sextuplicado, dos veces al día durante 10 días. 

Cualitativo (mA/min) 

Calibrador/Control Cut-off de 500 ng/ml 

N=120 

375 

500 

625 

Precisión intraserial Precisión total 

Media DE %CV Media DE %CV 

392 

417 

439 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 

392 

417 

439 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6

Cualitativo (mA/min) 


N=120 

750 

1000 

1250 

Semicuantitativo (ng/ml) 



461 

494 

524 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 

461 

494 

524 


N=120 

375 

500 

625 

Semicuantitativo (ng/ml) 

3,4 

3,4 

3,8 


0,7 

0,7 

0,7 


373 

502 

623 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 

373 

502 

623 


N=120 

750 

1000 

1250 

18,1 

19,4 

22,3 


4,9 

3,9 

3,6 


756 

993 

1232 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

756 

993 

1232 

31,2 

34,3 

43,5 

Caracterización del cut-off – recuperación de la cantidad añadida 

Se prepararon calibradores de cut-off de 500 ng/ml y 1000 ng/ml y controles de ±25% añadiendo 

etil-glucurónido a orina negativa sin EtG. El calibrador de cut-off y los controles se analizaron (n=21) 

tanto en el modo cualitativo como en el semicuantitativo. Se analizó la precisión y la exactitud de 

detección de los controles con los datos cualitativos, y el porcentaje de recuperación y la precisión 

con los datos semicuantitativos. Los resultados indican que los cuatro controles se recuperaron de 

forma exacta en el modo cualitativo: los controles negativos con resultados negativos (velocidad 

inferior a la del calibrador de cut-off) y los controles positivos con resultados positivos (velocidad 

superior a la del calibrador de cut-off). En el modo semicuantitativo, los controles se recuperaron 

con un margen de ±10% respecto a los valores nominales. La precisión fue < 1,0% CV en el modo 

cualitativo y < 5,0% CV en el modo semicuantitativo. 

Interferencia con sustancias endógenas 

Las interferencias potenciales del pH y de las sustancias fisiológicas endógenas sobre la 

recuperación del etil-glucurónido con el análisis de etil-glucurónido DRI ® se evaluaron añadiendo 

cantidades conocidas de sustancias potencialmente interferentes a los controles de ±25% para 

ambos cut-offs (500 ng/ml y 1000 ng/ml), y analizando las muestras para determinar la recuperación 

de etil-glucurónido. No se observaron interferencias debidas a la adición de los compuestos hasta 

las concentraciones máximas indicadas a continuación. 

Sustancia interferente Concentración final 

mg/dl 

Acetona 

Ácido acetilsalicílico 

Ácido ascórbico 

Ácido oxálico 

Albúmina sérica humana 

Cafeína 

Cloruro sódico 

Creatinina 

Etanol 

Galactosa 

Glucosa 

Hemoglobina 

Ibuprofeno 

Paracetamol 

Riboflavina 

Urea 

pH 

1000 

10 

190 

30 

500 

10 

900 

400 

10 

10 

3000 

300 

10 

10 

3,75 

1000 

4,5-11,0 

4,1 

3,5 

3,5 

11 

Especificidad 

Se evaluó la reactividad cruzada del profármaco etanol y los compuestos glucurónidos detectados 

habitualmente en la orina con el análisis, empleando el calibrador de cut-off de 500 ng/ml. Se 

prepararon soluciones de los reactivos cruzados, añadiendo cantidades conocidas de cada 

compuesto a orina sin etil-glucurónido. Todos los compuestos produjeron resultados negativos a 

las concentraciones indicadas en la tabla siguiente. 

Compuesto Conc. (ng/ml) 

Acetaldehído 

Ácido glucurónido 

Butanol 

D-Glucosa 

Etanol 

Etilenglicol 

Glucurónido de alprazolam 

Glucurónido de buprenorfina 

Glucurónido de hidroxicumarina 

Glucurónido de lorazepam 

Glucurónido de norbuprenorfina 

Glucurónido de oxazepam 

Glucurónido de termazepam 

Isopropanol 

Metanol 

Metil-glucurónido 

Morfina-3-glucurónido 


n-propanol 

p-nitrofenil glucurónido 

Testosterona Glucurónido 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

100,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

5,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

Se evaluó la reactividad cruzada de compuestos no relacionados estructuralmente con el análisis, 

utilizando el calibrador de cut-off de 500 ng/ml. Todos los compuestos produjeron resultados 

negativos a las concentraciones indicadas en la tabla siguiente. 

Sensibilidad 

6-acetilmorfina 


Amitriptilina 

Amoxicilina 

Anfetamina 

Benzoilecgonina 

Cafeína 

Carbamazepina 

Cimetidina 

Clomipramina 

Clorpromazina 

Codeína 

Desipramina 

Dextrometorfano 

Dihidrocodeína 

Doxepina 

Efedrina 

Fenciclidina 

Fenobarbital 

Fentanil 

Flufenazina 

Fluoxetina 

Heroína 

Hidrocodona 

Hidromorfona 

Ibuprofeno 

Imipramina 

Levorfanol 

Maprotilina 

Meperidina 

Metadona 

Metronidazol 

Morfina 


Nalbufina 

Naltrexona 

Norcodeína 

Normorfina 

Nortriptilina 

Oxazepam 

Oxicodona 

Paracetamol 

Ranitidina 

Secobarbital 

Talwin 

Tebaína 

Tioridazina 

Tramadol 

Compuesto Conc. (µg/ml) 

500 

500 

100 

100 

1000 

1000 

100 

500 

500 

100 

100 

1000 

1000 

200 

1000 

200 

2000 

1000 

1000 

200 

500 

1000 

1000 

200 

200 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

3000 

1000 

1000 

500 

500 

500 

500 

500 

1000 

500 

100 

500 

500 

La sensibilidad del análisis, determinada mediante el EP Evaluator 7.0, fue de 15,3 ng/ml.

Linealidad 

La linealidad del análisis se determinó analizando la recuperación de la dilución de una serie de 

muestras de etil-glucurónido en el análisis. Se realizó una dilución seriada de una muestra de orina 

que contenía 2000 ng/ml de etil-glucurónido con orina sin EtG en incrementos del 25% respecto 

a los calibradores de cut-off. Estas muestras se analizaron tanto en el modo cualitativo como 

en el modo semicuantitativo del análisis. Todas las muestras se recuperaron con un margen de 

±20% respecto a los valores esperados en el modo semicuantitativo y con la velocidad esperada 

(mA/min) en el modo cualitativo, lo que indica que el análisis es lineal hasta los 2000 ng/ml. 

Exactitud 

Se analizaron 184 muestras con el análisis de etil-glucurónido DRI ® en los modos cualitativo y 

semicuantitativo, y se compararon los resultados con los obtenidos con el método de LC/MS/MS. En 

ambos modos, la concordancia de las muestras positivas con el análisis de EtG DRI ® y con el método 

de LC/MS/MS fue del 96%. Los resultados obtenidos con los modos cualitativo y semicuantitativo 

se resumen a continuación. 

Modo cualitativo: Con el cut-off de 500 ng/ml, 94 de las 184 muestras se detectaron como positivas 

y 85 como negativas; con el cut-off de 1000 ng/ml, se detectaron 44 muestras como positivas y 138 

como negativas tanto con el inmunoanálisis como con el método de LC/MS/MS. La concordancia 

global entre el inmunoanálisis y el método de LC/MS/MS fue del 97%. Hubo cinco muestras 

discordantes con el cut-off de 500 ng/ml y dos con el cut-off de 1000 ng/ml. 

Cut-off 500 ng/ml Cut-off 1000 ng/ml 

Análisis de EtG DRI ® Análisis de EtG DRI ® 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Dos de las tres muestras fueron negativas en el límite con el inmunoanálisis. 

Una de las muestras fue positiva en el límite con el método de LC/MS/MS. 

¥ Las muestras fueron positivas en el límite con el inmunoanálisis. 

♠ Las muestras fueron negativas en el límite con el inmunoanálisis. Los valores con el 

método de LC/MS/MS estuvieron entre 1000 y 1250 ng/ml. 

Semicuantitativo: En el modo semicuantitativo, las muestras con concentraciones de EtG 

>500 ng/ml y 1000 ng/ml se consideraron positivas en el inmunoanálisis. De las 184 muestras, 

94 se detectaron como positivas y 85 como negativas tanto con el inmunoanálisis como con los 

métodos de LC/MS/MS. 

LC/MS/MS 

Análisis de EtG DRI ® 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Se utilizaron las mismas muestras que en el modo cualitativo con 500 ng/ml. 

¥ Se utilizaron las mismas muestras que en el modo cualitativo con 500 ng/ml. 

12 

Bibliografía 

Fabricante: 



Fremont, CA 94538 EE.UU. 

Número gratuito en EE.UU.: 1-800-232-3342 

Representante 

autorizado en la UE: 



D-94032 Passau - Alemania 

Tel: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Otros países: 

Póngase en contacto con su representante local de Microgenics. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













Dosaggio DRI ® per glucuronide di etile 

N. di catalogo: 10011723 (kit da 18 ml) 

10011297 (kit da 68 ml) 

10011226 (kit da 500 ml) 

Uso previsto 

L’ immunodosaggio enzimatico DRI ® per glucuronide di etile deve essere usato per la determinazione 

qualitativa e semi quantitativa del glucuronide di etile nell’urina umana a valori limite di 500 e 

1000 ng/ml. 

Questo dosaggio fornisce unicamente un risultato analitico preliminare. Per ottenere un 

risultato analitico di conferma, è necessario utilizzare un metodo alternativo più specifico. I 

metodi di conferma migliori sono la gascromatografia e cromatografia liquida accoppiata alla 

spettrometria di massa (GC/MS) e la cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di 

massa tandem (LC/MS/MS). Qualsiasi risultato di analisi riguardante sostanze stupefacenti, 

soprattutto nel caso di un risultato preliminare positivo, va trattato con la considerazione 

clinica e la discrezione professionale opportune. 

Sommario e spiegazione del test 

Il glucuronide di etile (EtG) è un metabolita diretto dell’etanolo che si forma tramite la coniugazione 

enzimatica di etanolo con l’acido glucuronico. 1,2 La presenza di alcol nelle urine normalmente 

viene rilevata solo per alcune ore mentre la presenza di EtG può essere rilevata fino a diversi giorni 

dall’eliminazione completa di alcol dal corpo. 3 Pertanto, l’EtG è un biomarcatore diagnostico utile 

per rilevare un uso recente di alcol e monitorare l’astinenza negli alcolizzati che partecipano a un 

programma di disintossicazione dall’alcol. 4-7 L’etanolo può essere prodotto in vitro a causa della 

fermentazione dei campioni di urina che contengono zucchero (in caso di diabetici), batteri o fermenti 

quando i campioni vengono esposti a temperature alte. 8 

In tali casi, il test dell’EtG può essere usato 

come test di conferma per determinare se la presenza di alcol nel campione è dovuta a consumo 

di alcol o è il risultato della fermentazione in vitro. Attualmente l’EtG viene monitorato con GC/MS 

e LC/MS/MS. 9-10 

Il dosaggio DRI ® per il glucuronide di etile viene fornito come immunodosaggio enzimatico omogeneo 

in forma liquida pronto per l’uso. Il dosaggio utilizza anticorpi specifici che sono in grado di rilevare 

il glucuronide di etile senza alcuna reattività crociata significativa con altri composti di glucuronide. 

Il dosaggio si basa sulla competizione della sostanza marcata con enzima glucosio-6-fosfato 

deidrogenasi (G6PDH) con la sostanza di interesse contenuta nel campione di urina per un numero fisso 

di siti di legame anticorpale specifico. In assenza di sostanza di interesse nel campione, l’anticorpo 

specifico si lega alla sostanza marcata con enzima G6PDH e provoca una riduzione dell’attività 

enzimatica. Questo fenomeno crea una relazione diretta tra la concentrazione della sostanza di 

interesse nel campione di urina e l’attività enzimatica. L’enzima attivo converte il NAD in NADH 

con una conseguente variazione di assorbanza che può essere misurata spettrofotometricamente 

a 340 nm. 

Reagenti 

Reagente anticorpo/substrato: Contiene anticorpi monoclonali murini anti-glucuronide di etile, 

glucosio-6-fosfato (G6P) e nicotinamide adenina dinucleotide (NAD) in tampone Tris con sodio 

azide come conservante. 

Reagente coniugato enzimatico: Contiene derivato di glucuronide di etile marcato con glucosio-6fosfato 

deidrogenasi (G6PDH) in tampone Tris con sodio azide come conservante. 

Ulteriori materiali necessari (venduti separatamente) 

10011207, Calibratore negativo DRI ® per glucuronide di etile, 25 ml 

10011208, Calibratore DRI ® per glucuronide di etile, 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, Controllo DRI ® per glucuronide di etile, 375 ng/ml, 25 ml 




Avvertenze e precauzioni 

1. Il presente test è esclusivamente per uso diagnostico in vitro. I reagenti sono nocivi se 

ingeriti. 

2. I reagenti del dosaggio contengono sodio azide, che può reagire con il rame o il piombo 

delle tubature di scarico generando azidi metalliche potenzialmente esplosive. Per lo 

smaltimento dei reagenti, usare abbondanti quantità di acqua per evitare l’accumulo 

di azidi metallici. 

3. Non usare i reagenti dopo la data di scadenza. 

Preparazione e conservazione dei reagenti 

I reagenti sono pronti per l’uso: non è richiesta un’ulteriore preparazione. I reagenti vanno conservati 

in frigorifero a 2-8 °C. Tutti i componenti del dosaggio, chiusi o aperti, sono stabili fino alla data di 

scadenza indicata sulle rispettive etichette. Non usare i reagenti scaduti. 

Raccolta e trattamento del campione 

Raccogliere i campioni di urina in recipienti di vetro o plastica. Sono preferibili campioni di urina 

fresca. 

Ai sensi del Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs (direttive 

riguardanti i programmi per i test antidroga negli ambiti professionali federali), i campioni non 

analizzati entro 7 giorni dal loro arrivo al laboratorio vanno conservati in frigoriferi di sicurezza. 

Conservare sempre i campioni di urina in frigorifero. 

I campioni con un pH da 4,5 a 11 sono adatti per essere analizzati con questo dosaggio. 

13 

Per uso diagnostico in vitro 

È necessario fare il possibile per mantenere i campioni pipettati privi di residui solidi. Prima 

dell’analisi, i campioni eccessivamente torbidi vanno centrifugati. L’adulterazione dei campioni di 

urina può dare luogo a risultati errati. Se si sospetta adulterazione, ottenere un altro campione e 

inviare entrambi i campioni al laboratorio per l’analisi. Manipolare tutti i campioni di urina come 

se fossero potenzialmente infettivi. 

Procedura di analisi 

Per eseguire il presente immunodosaggio è possibile utilizzare gli analizzatori chimico-clinici in grado 

di mantenere una temperatura costante, pipettare i campioni, miscelare i reagenti, misurare i tassi 

enzimatici a 340 nm e regolare con precisione i tempi di reazione. 

Prima di eseguire l’analisi, consultare le istruzioni applicative specifiche di ciascun analizzatore per 

ottenere i parametri chimici. 

Controllo di qualità e calibrazione 

Una buona prassi di laboratorio prevede l’analisi di campioni di controllo allo scopo di garantire le 

corrette prestazioni del dosaggio. Accertarsi che i risultati dei controlli rientrino nel range stabilito, 

secondo quanto determinato dalle procedure di laboratorio e dalle linee guida. In caso contrario, i 

risultati del dosaggio non sono validi. Per le analisi qualitative, come riferimento per valore limite, 

usare il calibratore da 500 ng/ml o 1000 ng/ml. Per le analisi semiquantitative usare tutti i tipi di 

calibratore. Tutte le procedure di controllo della qualità devono essere svolte in ottemperanza alle 

norme in vigore o ai requisiti per l’accreditamento. 

Risultati e valori attesi 

Qualitativa 

Il calibratore da 500 ng/ml o quello da 1000 ng/ml può essere usato come riferimento per valore limite 

per distinguere i campioni “positivi” da quelli “negativi”. Un campione con una variazione del valore 

di assorbanza (∆A) uguale o maggiore rispetto a quello ottenuto dal calibratore per il valore limite è 

considerato positivo. Un campione con una variazione del valore di assorbanza (∆A) minore rispetto 

a quello ottenuto dal calibratore per valore limite è considerato negativo. 

Semiquantitativa 

Una stima approssimativa della concentrazione di glucuronide di etile nei campioni può essere 

ottenuta tracciando una curva standard con tutti i calibratori ed effettuando la quantitazione dei 

campioni su di essa. Quando la concentrazione di EtG nel campione è maggiore di quella del 

calibratore più alto, è possibile diluire il campione con il calibratore negativo e sottoporlo nuovamente 

ad analisi. 

Range refertabile 

Il dosaggio DRI ® per il glucuronide di etile è previsto per l’uso in analisi semiquantitative nel range 

tra 100 ng/ml, il calibratore più basso, e 2000 ng/ml, il valore del calibratore alto. 

Limitazioni 

1. Un risultato positivo del dosaggio DRI ® per glucuronide di etile indica solo la presenza 

di glucuronide di etile e non si correla necessariamente alla portata degli effetti 

fisiologici e psicologici. 

2. Le prestazioni del dosaggio DRI ® per il glucuronide di etile non sono state stabilite 

con fluidi corporei diversi dall’urina umana. 

3. Il presente dosaggio DRI ® per il glucuronide di etile è stato convalidato su 

analizzatori dotati di una stazione di lavaggio cellulare incorporata. Se l’analizzatore 

in dotazione non dispone di una stazione di lavaggio cellulare incorporata, rivolgersi 

al rappresentante Thermo Fisher Scientific di zona. 

4. Esercitare l’opportuna cautela nella refertazione dei risultati poiché molti sono i fattori 

che possono influire sul risultato di un’analisi dell’urina, come ad esempio la quantità 

di liquidi assunta e altri fattori di ordine biologico. 

5. È possibile che altre sostanze diverse da quelle considerate nello studio di specificità 

possano interferire con l’analisi e dare luogo a risultati falsi. 

Caratteristiche di rendimento del test tipiche 

Le caratteristiche di rendimento del test tipiche ottenibili mediante l’analizzatore Hitachi 917 sono 

riportate qui di seguito. I valori ottenuti nei diversi laboratori possono essere differenti da quelli riportati 

in questa sede. Per ulteriori dati relativi alle prestazioni specifiche degli analizzatori, consultare il foglio 

delle applicazioni relativo all’analizzatore in questione. 

Precisione 

I controlli DRI ® per il glucuronide di etile (da 375, 625, 750 e 1250 ng/ml) e i calibratori per valore 

limite (da 500 e 1000 ng/ml) sono stati analizzati in modalità qualitativa (mA/min) e semiquantitativa 

(ng/ml) usando un protocollo NCCLS modificato. I risultati presentati di seguito sono stati generati 

testando tutti i campioni in replicati di 6, due volte al giorno per 10 giorni. 

Qualitativa (mA/min) 

Calibratore/controllo Valore limite di 500 ng/ml 

N=120 

375 

500 

625 

Precisione intra-analisi Precisione totale 

Media DS CV (%) Media DS CV (%) 

392 

417 

439 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 

392 

417 

439 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6

Qualitativa (mA/min) 


N=120 

750 

1000 

1250 

Semiquantitativa (ng/ml) 



461 

494 

524 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 

461 

494 

524 


N=120 

375 

500 

625 

Semiquantitativa (ng/ml) 

3,4 

3,4 

3,8 


0,7 

0,7 

0,7 


373 

502 

623 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 

373 

502 

623 


N=120 

750 

1000 

1250 

18,1 

19,4 

22,3 


4,9 

3,9 

3,6 


756 

993 

1232 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

756 

993 

1232 

Caratterizzazione del valore limite – Recupero aggiunto 

31,2 

34,3 

43,5 

Sono stati preparati dei calibratori per il valore limite, 500 ng/ml e 1000 ng/ml e controlli ±25% 

aggiungendo glucuronide di etile nell’urina negativa priva di Etg. Il calibratore per il valore limite e i 

controlli sono stati analizzati (n=21) sia in modalità qualitativa sia in modalità semiquantitativa. I dati 

qualitativi sono stati analizzati per motivi di precisione e di accuratezza del rilevamento dei controlli 

e i dati semiquantitativi sono stati analizzati per la % di recupero e precisione. I risultati hanno 

indicato che tutti e quattro i controlli sono stati recuperati accuratamente in modalità qualitativa, i 

controlli negativi come negativi (tasso inferiore al tasso del calibratore dei valori limite) e i controlli 

positivi come positivi (tasso superiore al tasso del calibratore dei valori limite). I controlli in modalità 

semiquantitativa sono stati recuperati entro ±10% dei valori nominali. La precisione è stata

Linearità 

La linearità del dosaggio è stata determinata analizzando il recupero della diluizione di una serie di campioni 

di glucuronide di etile nel dosaggio. Un campione di urina contenente 2000 ng/ml di glucuronide di etile 

è stato diluito in serie con urina priva di EtG a incrementi del 25% dai calibratori del valore limite. Questi 

campioni sono stati esaminati nel dosaggio sia in modalità qualitativa sia in modalità semiquantitativa. 

Tutti i campioni sono stati recuperati entro il ±20% dei valori attesi in modalità semiquantitativa e in 

velocità attesa (mA/min) in modalità qualitativa il che indica che il dosaggio è lineare fino a 2000 ng/ml. 

Accuratezza 

Con il dosaggio DRI ® per glucuronide sono stati analizzati centottantaquattro campioni in modalità 

sia qualitativa sia semiquantitativa ed i risultati sono stati confrontati al metodo di LC/MS/MS. In 

modalità qualitativa e semiquantitativa, l’accordo del campione positivo tra il dosaggio DRI ® EtG e il 

metodo di LC/MS/MS era del 96%. I risultati ottenuti con la modalità qualitativa e semiquantitativa 

sono riassunti sotto. 

Qualitativa - Su 184 campioni, usando il valore limite di 500 ng/ml, 94 campioni sono stati rilevati 

positivi e 85 campioni negativi e al valore limite di 1000 ng/ml 44 campioni sono stati rilevati positivi 

e 138 campioni negativi sia con l’immunodosaggio sia con il metodo di LC/MS/MS. La concordanza 

complessiva tra l’immunodosaggio e il metodo di LC/MS/MS era del 97%. Cinque campioni erano 

discordanti al valore limite di 500 ng/ml e due campioni discordanti al valore limite di 1000 ng/ml. 

Valore limite di 500 ng/ml Valore limite di 1000 ng/ml 

Dosaggio DRI ® per EtG Dosaggio DRI ® per EtG 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Due dei tre campioni erano al limite del negativo secondo l’immunodosaggio. 

Un campione era al limite del positivo secondo il metodo di LC/MS/MS. 

¥ Campioni al limite del positivo secondo l’immunodosaggio. 

♠ Campioni al limite del negativo secondo l’immunodosaggio. I valori del metodo di 

LC/MS/MS erano tra 1000 e 1250 ng/ml. 

Semiquantitativa In modalità semiquantitativa, i campioni con concentrazioni di EtG >500 ng/mL e 

1000 ng/mL sono stati considerati positivi secondo l’immunodosaggio. Su 184 campioni, 94 sono stati 

rilevati positivi e 85 negativi sia secondo l’immunodosaggio sia secondo il metodo di LC/MS/MS. 

LC/MS/MS 

Dosaggio DRI ® per EtG 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* I campioni erano gli stessi campioni del metodo qualitativo di 500 ng/ml. 

¥ I campioni erano gli stessi campioni del metodo qualitativo di 500 ng/ml. 

15 

Bibliografia 

Produttore: 




Numero verde all’interno degli USA: 1-800-232-3342 

Rappresentante autorizzato per l’UE: 



D-94032 Passau, Germania 

Tel: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Negli altri Paesi: 

consultare il rappresentante Microgenics di zona. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













Ensaio de EtG DRI ® 

N.º de catálogo: 10011723 (kit de 18 ml) 

10011297 (kit de 68 ml) 

10011226 (kit de 500 ml) 

Aplicação 

O imunoensaio enzimático de etil-glucoronido DRI ® destina-se à determinação qualitativa e 

semiquantitativa de etil-glucoronido na urina humana em cutoffs de 500 e 1000 ng/ml. 

O ensaio permite apenas a obtenção de um resultado de teste analítico preliminar. É necessário 

utilizar um método alternativo mais específico para obter um resultado analítico confirmado. 

A cromatografia gasosa/cromatografia líquida - espectrometria de massa (GC/MS) e a 

espectrometria líquida/espectrometria de massa em tandem (LC/MS/MS) são os métodos de 

confirmação preferidos. Qualquer resultado de teste que envolva o uso de estupefacientes 

deverá ser alvo de consideração clínica e de avaliação profissional, sobretudo quando são 

usados resultados preliminares positivos. 

Resumo e explicação do teste 

O etil-glucoronido (EtG) é um metabolito directo do etanol, que se forma pela conjugação enzimática 

de etanol com ácido glucurónico. 1,2 O álcool na urina é geralmente detectado durante apenas 

algumas horas, enquanto o EtG pode ser detectado até vários dias, mesmo após a eliminação total 

do álcool do organismo. 3 Por conseguinte, o EtG pode ser um útil biomarcador de diagnóstico para 

a determinação de consumo recente de álcool e para a monitorização de abstinência em alcoólicos 

sujeitos a programas de tratamento para a abstinência alcoólica. 4-7 O etanol pode ser produzido 

in vitro pela fermentação de amostras de urina que contenham açúcares (diabetes), bactérias ou 

leveduras, quando as amostras são expostas a temperaturas elevadas. 8 

Nestes casos, o teste de 

EtG pode ser utilizado como um teste de confirmação para determinar se o álcool da amostra se 

deve a consumo de álcool ou se foi formado in vitro em resultado de fermentação. Actualmente, o 

EtG é monitorizado pelos métodos GC/MS e LC/MS/MS. 9-10 

O ensaio de etil-glucoronido DRI ® é fornecido como um imunoensaio enzimático homogéneo líquido 

pronto a utilizar. O ensaio utiliza anticorpos específicos que podem detectar etil-glucoronido sem 

qualquer reacção cruzada significativa com outros compostos de glucoronido. O ensaio baseiase 

na competição entre um fármaco marcado com glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) e 

um fármaco livre da amostra de urina para uma quantidade fixa de locais de ligação a anticorpos 

específicos. Na ausência de fármaco livre na amostra, o anticorpo específico liga-se ao fármaco 

marcado com G6PDH e provoca uma diminuição da actividade enzimática. Este fenómeno estabelece 

uma relação directa entre a concentração de fármaco na urina e a actividade enzimática. A enzima 

activa converte o NAD em NADH, provocando uma alteração da absorvância que pode ser avaliada 

espectrofotometricamente a 340 nm. 

Reagentes 

Reagente de anticorpo/substrato: Contém anticorpo anti-etil-glucoronido monoclonal de rato, 

glucose-6-fosfato (G6P), e nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) em tampão Tris com azida de 

sódio como conservante. 

Reagente de conjugado enzimático: Contém derivado de etil-glucoronido marcado com glucose- 

6-fosfato desidrogenase (G6PDH) em tampão Tris com azida de sódio como conservante. 

Materiais adicionais necessários (vendidos separadamente): 

10011207, calibrador negativo de etil-glucoronido DRI ® , 25 ml 

10011208, calibrador de etil-glucoronido DRI ® 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, controlo de etil-glucoronido DRI ® 375 ng/ml, 25 ml 




Precauções e advertências 

1. Este teste destina-se exclusivamente a diagnóstico in vitro. Os reagentes são nocivos 

por ingestão. 

2. Os reagentes utilizados nos componentes do ensaio contêm azida de sódio, que 

pode reagir com as canalizações de chumbo ou cobre, formando azidas metálicas 

potencialmente explosivas. Quando eliminar estes reagentes, irrigue sempre com um 

grande volume de água de forma a impedir a acumulação das azidas. 

3. Não utilize reagentes depois da data de validade indicada. 

Preparação e conservação dos reagentes 

Os reagentes estão prontos a utilizar; não é necessária qualquer preparação adicional. Os reagentes 

devem ser conservados entre 2 e 8 °C. Todos os componentes do ensaio, abertos ou por abrir, são 

estáveis até à data de validade indicada nos respectivos rótulos. Não utilize os reagentes depois 

da data de validade indicada. 

Colheita e manipulação de amostras 

Proceda à colheita de amostras de urina em recipientes de plástico ou de vidro. Recomendam-se 

amostras de urina recentes. 

As Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs (normas federais norteamericanas 

obrigatórias para programas de análises de drogas no local de trabalho) recomendam 

que as amostras que não sejam testadas no prazo de 7 dias após a chegada ao laboratório sejam 

conservadas em unidades de refrigeração acondicionadas. As amostras de urina devem ser 

conservadas refrigeradas em todas as circunstâncias. 

As amostras com um limite de pH entre 4,5 e 11 são adequadas para teste neste ensaio. 

16 

Para utilização em diagnóstico in vitro 

Devem encetar-se todos os esforços para manter as amostras pipetadas sem resíduos grosseiros. 

Centrifugue as amostras altamente turvas antes da análise. A adulteração das amostras de urina 

pode provocar resultados errados. Caso haja suspeita de adulteração, obtenha outra amostra e 

envie ambas as amostras para testar no laboratório. Trate todas as amostras de urina como 

potencialmente infecciosas. 

Procedimento do ensaio 

Para a realização deste imunoensaio podem ser utilizados analisadores de química clínica que 

permitam a manutenção de uma temperatura constante, a pipetagem de amostras, a mistura 

dos reagentes, a medição das velocidades enzimáticas a 340 nm e a temporização rigorosa da 

reacção. 

Antes de realizar o ensaio, consulte as instruções específicas da aplicação de cada analisador para 

conhecer os parâmetros químicos. 

Controlo de qualidade e calibração 

As boas práticas laboratoriais sugerem a utilização de amostras de controlo para garantir o 

desempenho adequado do ensaio. Certifique-se de que os resultados de controlo se encontram 

dentro do intervalo estabelecido, conforme determinado pelos procedimentos e directrizes do 

laboratório. Se os resultados estiverem fora dos intervalos estabelecidos, os resultados do ensaio 

são inválidos. Para a análise qualitativa, utilize um calibrador de 500 ng/ml ou 1000 ng/ml como 

nível de cutoff. Para a análise semiquantitativa, utilize todos os calibradores. Todos os requisitos de 

CQ devem ser realizados em conformidade com as regulamentações locais, estatais e/ou federais 

ou os requisitos de acreditação. 

Resultados e valores esperados 

Qualitativo 

Os calibradores de 500 ng/ml ou de 1000 ng/ml podem ser utilizados como referência de cutoff para 

distinguir entre amostras “positivas” e “negativas”. Uma amostra que apresente uma alteração do 

valor de absorvância (∆A) igual ou superior ao valor obtido com calibrador de cutoff é considerada 

positiva. Uma amostra que apresente uma alteração do valor de absorvância (∆A) inferior ao valor 

obtido com o calibrador de cutoff é considerada negativa. 

Semiquantitativo 

É possível obter-se uma estimativa aproximada da concentração de fármaco nas amostras através 

da utilização de uma curva-padrão utilizando todos os calibradores e quantificando amostras 

retiradas desta curva. Quando a concentração de EtG na amostra for superior ao calibrador mais 

elevado, a amostra pode ser diluída com o calibrador negativo e testada novamente. 

Intervalo reportável 

O ensaio de etil-glucoronido DRI ® foi concebido para utilização semiquantitativa no intervalo entre 

100 ng/ml, o calibrador mais baixo, e 2000 ng/ml, o valor do calibrador mais alto. 

Limitações 

1. Um resultado positivo utilizando o ensaio de etil-glucoronido DRI ® é indicativo 

apenas da presença de etil-glucoronido e não se correlaciona necessariamente com 

a extensão dos efeitos fisiológicos e psicológicos. 

2. As características de desempenho do ensaio de etil-glucoronido DRI ® não foram 

estabelecidas com fluidos corporais para além da urina humana. 

3. Este ensaio de etil-glucoronido DRI ® foi validado em analisadores utilizando uma 

lavagem de células integral. Se o seu analisador não dispuser de uma lavagem de 

células integral, contacte o seu representante local da Thermo Fisher Scientific. 

4. Deve ter cuidado ao apresentar resultados visto existirem vários factores, p. ex., 

ingestão de líquidos e outros efeitos biológicos, que podem influenciar o resultado 

do teste de urina. 

5. É possível que outras substâncias, para além das investigadas no estudo de 

especificidade, possam interferir com o teste e provocar resultados falsos. 

Características de desempenho típicas 

Os dados do desempenho típico, obtidos no analisador Hitachi 917, são apresentados abaixo. 

Os resultados obtidos no seu laboratório poderão ser diferentes. Para obter mais dados sobre o 

desempenho específico do analisador, consulte a folha da aplicação específica do analisador. 

Precisão 

Os controlos de etil-glucoronido DRI ® (375, 625, 750 e 1250 ng/ml) e os calibradores de cutoff (500 

e 1000 ng/ml) foram testados no modo qualitativo (mA/min) e semiquantitativo (ng/ml) utilizando um 

protocolo do NCCLS modificado. Os resultados apresentados abaixo foram conseguidos através de 

testes a todas as amostras em replicados de 6, duas vezes por dia, durante 10 dias. 

Qualitativo (mA/min) 

Calibrador/Controlo Cutoff de 500 ng/ml 

N=120 

375 

500 

625 

Precisão no mesmo ciclo Precisão total 

Média DP CV% Média DP CV% 

392 

417 

439 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 

392 

417 

439 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6

Qualitativo (mA/min) 


N=120 

750 

1000 

1250 

Semiquantitativo (ng/ml) 



461 

494 

524 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 

461 

494 

524 


N=120 

375 

500 

625 

Semiquantitativo (ng/ml) 

3,4 

3,4 

3,8 


0,7 

0,7 

0,7 


373 

502 

623 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 

373 

502 

623 


N=120 

750 

1000 

1250 

18,1 

19,4 

22,3 


4,9 

3,9 

3,6 


756 

993 

1232 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

756 

993 

1232 

31,2 

34,3 

43,5 

Caracterização de cutoff — recuperação da concentração adicionada 

Os calibradores de cutoff, 500 ng/ml e 1000 ng/ml, e os controlos ±25% foram preparados através 

da adição de etil-glucoronido a urina negativa sem EtG. O calibrador de cutoff e os controlos foram 

testados (n = 21) nos modos qualitativo e semiquantitativo. Os dados qualitativos foram analisados 

quanto à precisão e à exactidão da detecção dos controlos e os dados semiquantitativos foram 

analisados quanto à percentagem de recuperação e à precisão. Os resultados indicaram que os 

quatro controlos foram recuperados com exactidão no modo qualitativo, os controlos negativos 

foram negativos (taxa inferior à taxa do calibrador C/O) e os controlos positivos foram positivos 

(taxa superior à taxa do calibrador C/O). No modo semiquantitativo, os controlos foram recuperados 

dentro de ±10% dos valores nominais. A precisão foi < 1,0% CV no modo qualitativo e < 5,0% CV 

no modo semiquantitativo. 

Interferência com substâncias endógenas 

A potencial interferência do pH e de substâncias fisiológicas endógenas na recuperação de etilglucoronido 

utilizando o ensaio de etil-glucoronido DRI ® foi avaliada adicionando quantidades 

conhecidas de substâncias que potencialmente interferem nos controlos ±25% para ambos 

os cutoffs, 500 ng/ml e 1000 ng/ml, e através do teste às amostras para recuperação de 

etil-glucoronido. Não se observou qualquer interferência pela adição de compostos até às 

concentrações abaixo indicadas. 

Substância que interfere Concentração final 

mg/dl 

Acetaminofeno 

Acetona 


Ácido ascórbico 

Ácido oxálico 

Albumina sérica humana 

Cafeína 

Cloreto de sódio 

Creatinina 

Etanol 

Galactose 

Glucose 

Hemoglobina 

Ibuprofeno 

Riboflavina 

Ureia 

pH 

10 

1000 

10 

190 

30 

500 

10 

900 

400 

10 

10 

3000 

300 

10 

3,75 

1000 

4,5-11,0 

4,1 

3,5 

3,5 

17 

Especificidade 

A reacção cruzada do composto-mãe etanol e de compostos de glucoronido, habitualmente 

encontrados na urina, foi testada no ensaio utilizando um calibrador de cutoff de 500 ng/ml. As 

soluções usadas no teste de reacção cruzada foram preparadas adicionando uma quantidade 

conhecida de cada composto à urina sem etil-glucoronido. Todos os compostos apresentaram um 

resultado negativo às concentrações discriminadas na tabela abaixo. 

Composto Conc. (ng/ml) 

Acetaldeído 

Ácido glucurónico 

Alprazolam glucoronido 

Buprenorfina glucoronido 

Butanol 

D-glucose 

Etanol 

Etilenoglicol 

Glucoronido de hidroxicumarina 

Glucoronido de lorazepam 

Glucoronido de norbuprenorfina 

Glucoronido de oxazepam 

Glucoronido de termazepam 

Isopropanol 

Metanol 

Metil-glucoronido 

Morfina-3-glucoronido 


n-propanol 

p-nitrofenil-glucoronido 

Testosterona Glucoronido 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

100,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

5,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

10,000 

A reacção cruzada de compostos estruturalmente não relacionados foi testada no ensaio 

utilizando o calibrador de 500 ng/ml como calibrador de cutoff. Todos os compostos 

apresentaram um resultado negativo às concentrações discriminadas na tabela abaixo. 

Sensibilidade 

6-acetilmorfina 

Acetaminofeno 


Amitriptilina 

Amoxicilina 

Anfetamina 

Benzoilecgonina 

Cafeína 

Carbamazepina 

Cimetidina 

Clomipramina 

Clorpromazina 

Codeína 

Desipramina 

Dextrometorfano 

Diidrocodeína 

Doxepina 

Efedrina 

Fenciclidina 

Fenobarbital 

Fentanil 

Flufenazina 

Fluoxetina 

Heroína 

Hidrocodona 

Hidromorfona 

Ibuprofeno 

Imipramina 

Levorfanol 

Maprotilina 

Meperidina 

Metadona 

Metronidazol 

Morfina 


Nalbufina 

Naltrexona 

Norcodeína 

Normorfina 

Nortriptilina 

Oxazepam 

Oxicodona 

Ranitidina 

Secobarbital 

Taluína 

Tebaína 

Tioridazina 

Tramadol 

Composto Conc. (µg/ml) 

500 

500 

500 

100 

100 

1000 

1000 

100 

500 

500 

100 

100 

1000 

1000 

200 

1000 

200 

2000 

1000 

1000 

200 

500 

1000 

1000 

200 

200 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

500 

1000 

1000 

1000 

3000 

1000 

1000 

500 

500 

500 

500 

1000 

500 

100 

500 

500 

A sensibilidade do ensaio conforme avaliada pelo EP Evaluator 7.0 foi de 15,3 ng/ml.

Linearidade 

A linearidade do ensaio foi determinada através de testes à recuperação de diluição de uma 

série de amostras de etil-glucoronido no ensaio. Uma amostra de urina contendo 2000 ng/ml de 

etil-glucoronido foi diluída em série com urina sem EtG a incrementos de 25% dos calibradores 

de cutoff. Estas amostras foram testadas no ensaio nos modos qualitativo e semiquantitativo. 

Todas as amostras foram recuperadas em ±20% dos valores esperados no modo semiquantitativo 

e a taxa esperada (mA/min) no modo qualitativo indicou que o ensaio é linear até 2000 ng/ml. 

Exactidão 

Foram analisadas cento e oitenta e quatro amostras com o ensaio de etil-glucoronido DRI ® nos modos 

qualitativo e semiquantitativo e os resultados foram comparados com os métodos de LC/MS/MS. Em 

ambos os modos qualitativo e semiquantitativo, a concordância da amostra positiva entre o ensaio 

de EtG DRI ® e os métodos de LC/MS/MS foi de 96%. Os resultados obtidos por ambos os modos 

qualitativo e semiquantitativo são resumidos de seguida. 

Qualitativa: Das 184 amostras, usando um cutoff de 500 ng/ml, foram detectadas 94 amostras 

positivas e 85 amostras negativas, e usando um cutoff de 1000 ng/ml, foram detectadas 44 amostras 

positivas e 138 amostras negativas pelo imunoensaio e os métodos de LC/MS/MS. A concordância 

global entre o imunoensaio e os métodos LC/MS/MS foi de 97%. Registaram-se cinco amostras 

discordantes no cutoff de 500 ng/ml e duas amostras discordantes no cutoff de 1000 ng/ml. 

500 ng/ml C/O 1000 ng/ml C/O 

Ensaio de EtG DRI ® Ensaio de EtG DRI ® 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Duas de três amostras foram consideradas negativas no limiar pelo imunoensaio. 

Uma amostra foi considerada positiva no limiar pelos métodos LC/MS/MS. 

¥ As amostras foram consideradas positivas no limiar no imunoensaio. 

♠ As amostras foram consideradas negativas no limiar no imunoensaio. Os valores nos 

métodos de LC/MS/MS situaram-se entre 1000 e 1250 ng/ml. 

Semiquantitativo: No modo semiquantitativo, as amostras com uma concentração de EtG 

> 500 ng/ml e 1000 ng/ml foram consideradas positivas no imunoensaio. Das 184 amostras, foram 

detectadas 94 amostras positivas e 85 amostras negativas pelo imunoensaio e pelos métodos de 

LC/MS/MS. 

LC/MS/MS 

Ensaio de EtG DRI ® 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* As amostras foram as mesmas utilizadas no modo qualitativo de 500 ng/ml. 

¥ As amostras foram as mesmas utilizadas no modo qualitativo de 500 ng/ml. 

18 

Referências 

Fabricante: 



Fremont, CA 94538 E.U.A. 

Número grátis nos EUA: 1-800-232-3342 

Representante Autorizado na U.E.: 



D-94032 Passau Alemanha 

Tel.: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Outros países: 

Por favor, contacte o seu representante local da Microgenics. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













DRI ® -analys för etylglukuronid 

Beställningsnr: 10011723 (18 mL sats) 

10011297 (68 mL sats) 

10011226 (500 mL sats) 

Avsedd användning 

DRI ® -enzymimmunoanalysen för etylglukuronid är avsedd för kvalitativt och semikvantitativt 

fastställande av etylglukuronid i humanurin vid brytpunkterna 500 samt 1000 ng/mL. 

Analysen ger endast ett preliminärt analytiskt testresultat. En mer specifik alternativ metod 

måste användas för att få ett bekräftat analytiskt resultat. Gaskromatografi-/vätskekromatografimasspektrometri 

(GC/MS) och vätskekromatografi/tandemmasspektrometri (LC/MS/MS) 

föredras som bekräftelsemetoder. Kliniska beaktanden och professionell bedömning ska 

användas vid alla drogmissbrukstestresultat, särskilt vid användning av preliminärt positiva 

resultat. 

Sammanfattning och förklaring av testet 

Etylglukuronid (EtG) är en direkt metabolit från etanol som bildas via enzymatisk konjugation av etanol 

med glukuronsyra. 1,2 

Alkohol i urinen detekteras vanligtvis bara under några timmar, medan EtG kan 

detekteras upp till flera dagar efter det att alkoholen t.o.m. eliminerats helt från kroppen. 3 

Därför kan 

EtG vara en användbar diagnostisk biomarkör för att fastställa nyligt alkoholintag samt för att övervaka 

alkoholisters avhållsamhet vid behandling för alkoholavvänjning. 4-7 

Etanol kan framställas in vitro via 

jäsning av urinprover som innehåller socker (diabetes), bakterier eller jäst när proverna exponeras 

för varma temperaturer. 8 

I sådana fall kan EtG-testet användas för att bekräfta om alkoholen i provet 

kommer från alkoholkonsumtion eller har bildats in vitro som resultat av jäsning. EtG övervakas för 

närvarande med GC/MS och LC/MS/MS. 9-10 

DRI ® -analysen för etylglukuronid levereras som en flytande homogen enzymimmunoanalys som är 

färdig att användas. Analysen använder specifika antikroppar som kan detektera etylglukuronid utan 

betydande korsreaktivitet med andra glukuronidföreningar. Analysen baseras på konkurrens mellan 

en drog som märkts med glukos-6-fosfat-dehydrogenas (G6PDH) samt fria droger från urinprovet för 

en bestämd mängd bindningsområden med specifika antikroppar. Vid brist på fria droger från provet 

binder den specifika antikroppen den G6PDH-märkta drogen och orsakar därmed en minskning 

i enzymaktivitet. Detta fenomen skapar en direkt relation mellan urinens drogkoncentration och 

enzymaktiviteten. Aktiva enzymer omvandlar NAD till NADH, vilket resulterar i en absorbansförändring 

som kan mätas med spektrofotometri vid 340 nm. 

Reagens 

Antikropps-/substratreagens: Innehåller monoklonala musantikroppar mot etylglukuronid, glukos- 

6-fosfat (G6P) samt nikotin-amidadenin-dinukleotid (NAD) i Tris-buffert, med natriumazid som 

konserveringsmedel. 

Enzymkonjugatreagens: Innehåller derivat av etylglukuronid som märkts med glukos-6-fosfatdehydrogenas 

(G6PDH) i Tris-buffert, med natriumazid som konserveringsmedel. 

Ytterligare material som krävs (säljs separat): 

10011207, DRI ® negativ kalibrator för etylglukuronid, 25 mL 

10011208, DRI ® 100 ng/mL kalibrator för etylglukuronid, 10 mL 

10011210, DRI ® 500 ng/mL kalibrator för etylglukuronid, 10 mL 

10011212, DRI ® 1 000 ng/mL kalibrator för etylglukuronid, 10 mL 

10011213, DRI ® 2 000 ng/mL kalibrator för etylglukuronid, 10 mL 

10012135, DRI ® 375 ng/mL kontroll för etylglukuronid, 25 mL 



10012138, DRI ® 1 250 ng/mL kontroll för etylglukuronid, 25 mL 

Försiktighetsåtgärder och varningar 

1. Detta test är endast för diagnostisk användning in vitro. Reagenserna är farliga vid 

förtäring. 

2. Reagenserna som används i analyskomponenterna innehåller natriumazid, vilket kan 

reagera med bly- och kopparrör så att eventuellt explosiva metallazider bildas. Spola 

alltid med rikliga mängder vatten vid kassering av sådana reagenser för att förhindra 

att azid ansamlas. 

3. Använd inte reagenserna efter respektive utgångsdatum. 

Beredning och lagring av reagens 

Reagenserna är färdiga att användas; ingen ytterligare beredning krävs. Reagenserna ska förvaras 

i kylskåp, i 2 till 8 °C. Samtliga analyskomponenter, oavsett om de har öppnats eller inte, förblir 

stabila fram till det utgångsdatum som står på respektive etikett. Använd inte reagenserna efter 

respektive utgångsdatum. 

Provtagning och -hantering 

Urinprover ska tas i plast- eller glasbehållare. Vi rekommenderar att färska urinprover används. 

Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs (Obligatoriska riktlinjer för 

federala drogtestningsprogram för arbetsplatser) rekommenderar att prover som inte underkastas 

ett initialt test inom 7 dagar efter ankomsten till laboratoriet ska placeras i säkra kylenheter. 

Urinprover bör alltid förvaras i kylskåp. 

Prover med 4,5-11 i pH-värde är lämpade för test med denna analys. 

Försök hålla pipettprover fria från grovt skräp. Prover som är mycket grumliga ska centrifugeras före 

analys. Utspädda urinprover kan orsaka felaktiga resultat. Om ni misstänker att provet har spätts 

ut ska ett annat prov användas. Skicka båda proverna till laboratoriet för analys. Hantera alla 

urinprover som potentiellt smittsamma substanser. 

19 

Analysprocedur 

För diagnostisk användning in vitro 

Kemianalysatorer, som klarar att hålla en konstant temperatur, pipettprover, reagensblandningar, 

mätning av enzymatiska värden vid 340 nm och exakt tidsbestämning av reaktionen, kan användas 

till att genomföra denna analys. 

Se de särskilda tillämpningsanvisningarna för varje analysator för kemiparametrar innan analysen 

utförs. 

Kvalitetskontroll och kalibrering 

Enligt god laboratoriepraxis ska kontrollprover användas för att säkerställa lämplig analysprestanda. 

Säkerställ att kontrollresultaten ligger inom etablerat område, som har fastställts med laboratoriets 

procedurer och riktlinjer. Om resultaten ligger utanför etablerat område är analysresultaten ogiltiga. 

För kvalitativ analys ska 500 ng/mL- eller 1 000 ng/mL-kalibratorn användas som brytpunkt. För 

semikvantitativ analys ska samtliga kalibratorer användas. Alla kvalitetskontrollkrav bör uppfyllas i 

enlighet med lokala, regionala och/eller nationella föreskrifter eller auktoriseringskrav. 

Resultat och förväntade värden 

Kvalitativ 

Använd antingen 500 ng/mL- eller 1 000 ng/mL-kalibratorn som brytpunktsreferens för att särskilja 

”positiva” och ”negativa” prover. Ett prov som uppvisar en förändring i absorbansvärde (∆A) som 

är lika med eller överstiger vad som erhålls med brytpunktskalibratorn anses vara positivt. Ett 

prov som uppvisar en förändring i absorbansvärde (∆A) som understiger vad som erhålls med 

brytpunktskalibratorn anses vara negativt. 

Semikvantitativ 

Du kan få en ungefärlig beräkning av etylglukuronidkoncentrationen i proverna genom att köra 

en standardkurva med alla kalibratorer, och kvantifiera proverna med standardkurvan som 

utgångspunkt. När EtG-koncentrationen överstiger koncentrationen för den högsta kalibratorn kan 

provet spädas ut med negativ kalibrator och testas om. 

Rapporterbart område 

DRI ® -analysen för etylglukuronid har utformats för semikvantitativ användning i området mellan 

100 ng/mL (lägsta kalibratorn) och 2 000 ng/mL (värdet för högsta kalibratorn). 

Begränsningar 

1. Ett positivt resultat med DRI ® -analysen för etylglukuronid indikerar endast förekomst 

av etylglukuronid, och medför inte nödvändigtvis någon korrelation med omfattningen 

av fysiologiska och psykologiska effekter. 

2. Prestandaegenskaperna för DRI ® -analysen för etylglukuronid har inte etablerats för 

andra kroppsvätskor än humanurin. 

3. Denna DRI ® -analys för etylglukuronid har bekräftats på analysatorer med integrerad 

celltvätt. Om den analysator som du använder inte omfattar integrerad celltvätt ska 

du kontakta en lokal Thermo Fisher Scientific-representant. 

4. Var försiktig vid rapport av resultat, eftersom många faktorer, t.ex. vätskeintag och 

övriga biologiska faktorer, kan påverka ett urinprovsresultat. 

5. Det kan hända att andra substanser än de som undersöks i specificitetsanalysen stör 

testet och orsakar falska resultat. 

Typiska prestandaegenskaper 

Typiska prestandadata som erhållits med analysatorn Hitachi 917 visas nedan. De resultat som erhålls 

i ditt laboratorium kan skilja sig från dessa data. Se tillämpningsbladet för den särskilda analysatorn 

för ytterligare analysatorspecifika prestandadata. 

Precision 

DRI ® -kontrollerna (375, 625, 750 och 1 250 ng/mL) samt -brytpunktskalibratorerna (500 and 

1000 ng/mL) för etylglukuronid har testats i kvalitativt (mA/min) och semikvantitativt (ng/mL) läge 

med modifierat NCCLS-protokoll. Nedanstående resultat framställdes genom test av samtliga prover 

i 6 replikat två gånger om dagen i 10 dagar. 

Kvalitativ (mA/min) 

Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

375 

500 

625 

Medelvärde 

392 

417 

439 

500 ng/mL brytpunkt 

Inomserieprecision Total precision 

Standardavvikelse 

(SD) 

2,1 

2,1 

2,0 

% variationskoefficient 

(CV) 

0,5 

0,5 

0,5 

Medelvärde 

392 

417 

439 


(SD) 

2,9 

3,1 

2,7 


(CV) 

0,7 

0,7 

0,6


Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

750 

1 000 

1 250 

Medelvärde 

461 

494 

524 

Semikvantitativ (ng/mL) 

Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

375 

500 

625 

Medelvärde 

373 

502 

623 

Semikvantitativ (ng/mL) 

Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

750 

1 000 

1 250 

Medelvärde 

756 

993 

1 232 




(SD) 

2,4 

2,7 

2,7 


(CV) 

0,5 

0,6 

0,5 

Medelvärde 

461 

494 

524 



(SD) 

3,4 

3,4 

3,8 



(SD) 

11,3 

10,5 

13,2 


(CV) 

3,0 

2,1 

2,1 

Medelvärde 

373 

502 

623 



(SD) 

18,1 

19,4 

22,3 



(SD) 

16,9 

21,1 

23,0 


(CV) 

2,2 

2,1 

1,9 

Brytpunktskännetecken – tillsatsåterhämtning 

Medelvärde 

756 

993 

1 232 


(SD) 

31,2 

34,3 

43,5 


(CV) 

0,7 

0,7 

0,7 


(CV) 

4,9 

3,9 

3,6 


(CV) 

Brytpunktskalibratorerna, 500 ng/mL och 1 000 ng/mL, samt ±25 %-kontrollerna bereddes 

genom att etylglukuronid tillsattes i EtG-fritt negativt urin. Brytpunktskalibratorn och kontrollerna 

testades (n=21) både i kvalitativa och semikvantitativa lägen. Kvalitativa data analyserades för 

kontrollernas noggrannhet i precision och detektering, och semikvantatitativa data analyserades för 

%-återhämtning och -precision. Resultaten indikerade att samtliga fyra kontroller uppvisade precis 

återhämtning i kvalitativt läge, negativa kontroller var negativa (värden under brytpunktskalibratorn) 

och positiva kontroller var positiva (värden över brytpunktskalibratorn). I semikvantitativt läge 

uppvisade kontrollerna återhämtning inom ±10 % från nominella värden. Precisionen var

Linjäritet 

Analysens linjäritet fastställdes genom test av utspädningsåterhämtningen för en rad 

etylglukuronidprover i analysen. Ett urinprov med 2 000 ng/mL etylglukuronid genomgick 

seriell utspädning med EtG-fritt urin i 25 %-intervaller från brytpunktskalibratorer. Dessa 

prover testades med analysen i både kvalitativa och semikvantitativa lägen. Samtliga prover 

genomgick återhämtning inom ±20 % av förväntade värden i semikvantitativt läge samt förväntat 

värde (mA/min) i kvalitativt läge, vilket indikerade att analysen är linjär upp till 2 000 ng/mL. 

Noggrannhet 

Etthundraåttiofyra prover analyserades med DRI ® -analysen för etylglukuronid i både kvalitativa 

och semikvantitativa lägen, och resultaten jämfördes med LC/MS/MS-metoden. I både kvalitativa 

och semikvantitativa lägen var överensstämmelsen mellan positiva prover i DRI ® -analys för EtG 

och LC/MS/MS 96 %. Resultaten som erhölls med både kvalitativa och semikvantitativa lägen 

sammanfattas nedan. 

Kvalitativa: Av 184 prover detekterades 94 prover som positiva och 85 prover som negativa med 

500 ng/mL-brytpunkten, medan 44 prover detekterades som positiva och 138 prover detekterades 

som negativa med 1 000 ng/mL-brytpunkten, med både immunoanalysen och LC/MS/MS. Den 

generella överensstämmelsen mellan immunoanalysen och LC/MS/MS var 97 %. Det fanns fem ej 

överensstämmande prover vid 500 ng/mL-brytpunkten och två ej överensstämmande prover vid 

1 000 ng/mL-brytpunkten. 

500 ng/mL brytpunkt 1 000 ng/mL brytpunkt 

DRI ® -analys för EtG DRI ® -analys för EtG 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* Två av de tre proverna var negativa gränsfall i immunoanalysen. 

Ett prov var positivt gränsfall i LC/MS/MS. 

¥ Proverna var positiva gränsfall i immunoanalysen. 

♠ Proverna var negativa gränsfall i immunoanalysen. LC/MS/MS-värdena var mellan 

1 000 och 1 250 ng/mL. 

Semikvantitativ: I semikvantitativt läge ansågs prover med EtG-koncentration >500 ng/mL och 

1 000 ng/mL vara positiva i immunoanalysen. Av 184 prover detekterades 94 prover som positiva 

och 85 prover som negativa med både immunoanalysen och LC/MS/MS. 

LC/MS/MS 

DRI ® -analys för EtG 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Dessa prover var samma prover som i kvalitativt läge med 500 ng/mL-brytpunkten. 

¥ Dessa prover var samma prover som i kvalitativt läge med 500 ng/mL-brytpunkten. 

21 

Referenser 

Tillverkare: 




Kostnadsfritt inom USA: 1-800-232-3342 

Auktoriserad 

representant inom EU: 



D-94032 Passau Tyskland 

Tfn: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Andra länder: 

Kontakta din lokala Microgenics-representant. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













DRI ® ethylglucuronid-analyse 

Katalognr.: 10011723 (18 ml kit) 

10011297 (68 ml kit) 

10011226 (500 ml kit) 

Tilsigtet anvendelse 

DRI ® ethylglucuronid-enzymimmunanalyse er beregnet til kvalitativ og semi-kvantitativ bestemmelse 

af ethylglucuronid i human urin ved cutoff-værdier på 500 og 1000 ng/ml. 

Denne analyse giver kun et præliminært analytisk testresultat. Der skal anvendes en mere 

specifik, alternativ metode for at opnå et dokumenteret, analytisk resultat. De foretrukne 

konfirmatoriske metoder er gaskromatografi/flydende kromatografi-massespektometri (GC/MS) 

og flydende kromatografi/tandem- massespektrometri (LC/MS/MS). Der skal udvises klinisk 

omtanke og professionel vurdering ved ethvert testresultat til påvisning af misbrug af stoffet, 

især når der anvendes præliminære positive resultater. 

Opsummering og forklaring af testen 

Ethylglucoronid (EtG) er en direkte metabolit af ethanol, som dannes ved den enzymatiske konjugation 

af ethanol med glucuronsyre. 1,2 

Alkohol i urin kan normalt kun påvises i et par timer, hvorimod EtG 

kan påvises i op til flere dage, selv efter fuldstændig eliminering af alkohol fra kroppen. 3 

EtG kan 

derfor være nyttig som en diagnostisk biomarkør til bestemmelse af nylig alkoholindtagelse og til 

monitorering af abstinens hos alkoholikere, der deltager i alkoholbehandlingsprogrammer. 4-7 

Ethanol 

kan produceres in vitro pga. fermentation af urinprøver, der indeholder sukker (diabetes), bakterier 

eller gær, når prøverne eksponeres for varme temperaturer. 8 

I sådanne tilfælde kan EtG-testen 

anvendes som en konfirmatorisk test til at bestemme, om alkoholen i prøven skyldes indtagelse af 

alkohol, eller den dannes in vitro som et resultat af fermentation. EtG monitoreres på det nuværende 

tidspunkt af GC/MS og LC/MS/MS. 9-10 

DRI ® ethylglucoronid-analysen leveres som en flydende, homogen, brugsklar enzymanalyse. Analysen 

bruger specifikke antistoffer, som kan påvise ethylglucuronid uden nogen signifikant krydsreaktivitet 

med andre glucuronidstoffer. Analysen er baseret på konkurrence mellem et medikament mærket 

med glucose-6-fosfatdehydrogenase (G6PDH) og frit medikament fra urinprøven for en fast mængde 

af specifikke antistofbindingssteder. Ved fraværet af frit medikament fra prøven binder det specifikke 

antistof medikamentet mærket med G6PDH og forårsager et fald i enzymaktiviteten. Dette fænomen 

skaber et direkte forhold mellem medikamentkoncentrationen i urin og enzymaktiviteten. Aktivt 

enzym omdanner NAD til NADH, hvilket resulterer i en absorbansændring, som kan måles med 

spektrofotometer ved 340 nm. 

Reagenser 

Antistof-/Substratreagens: Indeholder monoklonalt anti-ethylglucuronid-antistof fra mus, 

glucose-6-fosfat (G6P) og nicotinamid-adenindinukleotid (NAD) i Tris-buffer med natriumazid som 

konserveringsmiddel. 

Enzymkonjugatreagens: Indeholder ethylglucuronid-derivat mærket med glucose-6fosfatdehydrogenase 

(G6PDH) i Tris-buffer med natriumazid som konserveringsmiddel. 

Nødvendige ekstra materialer (sælges separat): 

10011207, DRI ® ethylglucuronid-negativ kalibrator, 25 ml 

10011208, DRI ® ethylglucuronid-kalibrator 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, DRI ® ethylglucuronid 375 ng/ml kontrol, 25 ml 




Forholdsregler og advarsler 

1. Denne test er kun til in vitro diagnostisk anvendelse. Reagenserne er skadelige ved 

indtagelse. 

2. Reagenserne anvendt i analysekomponenterne indeholder natriumazid, som kan reagere 

med bly- og kobberrør og danne potentielt eksplosive metalazider. Ved bortskaffelse 

af sådanne reagenser skylles med rigelige mængder vand for at undgå aflejring af 

azider. 

3. Reagenser må ikke anvendes efter udløbsdatoerne er overskredet. 

Reagensforberedelse og opbevaring 

Reagenserne er klar til brug. Ingen yderligere forberedelse er nødvendig. Reagenserne bør opbevares 

i køleskab ved 2-8 °C. Alle analysekomponenter, i åben eller uåben stand, er holdbare indtil 

udløbsdatoen, som er angivet på deres respektive etiketter. Reagenserne må ikke anvendes efter 

deres udløbsdatoer er overskredet. 

Prøvetagning og -håndtering 

Indsaml urinprøver i plast- eller glasbeholdere. Det foreslås at anvende friske urinprøver. 

Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs (Obligatoriske retningslinjer 

for stoftest på offentlige arbejdspladser) anbefaler, at prøver, der ikke testes inden for 7 dage efter 

modtagelse på laboratoriet, bør placeres i sikrede køleskabe. Urinprøver skal altid opbevares i 

køleskabet. 

Prøver, hvor pH-værdien er inden for 4,5 og 11, er egnede til testning med denne analyse. 

22 

Til in vitro diagnostisk anvendelse 

Der skal tages tiltag til at holde de pipetterede prøver fri for groft snavs. Centrifuger stærkt uklare 

prøver før analysen. Forfalskning af urinprøverne kan give fejlagtige resultater. Hvis der er mistanke 

om forfalskning, skal der opnås en anden prøve, og begge prøver skal fremsendes til laboratoriet 

mhp. testning. Håndter alle urinprøver, som om de var smitsomme. 

Analyseprocedure 

Til denne immunanalyse kan der anvendes kliniske kemianalysatorer, der er i stand til at bibeholde en 

konstant temperatur, pipettere prøver, blande reagenser, måle hastigheden af enzymatiske reaktioner 

ved 340 nm og indstille reaktionerne præcist. 

Se de specifikke anvendelsesinstruktioner for hver analysator vedrørende kemiparametrene, inden 

analysen foretages. 

Kvalitetskontrol og kalibrering 

God laboratoriepraksis foreslår brug af kontrolprøver til at sikre korrekt analysepræstation. Sørg for, 

at kontrolresultaterne er inden for det fastlagte værdiområde, som fastlagt af laboratorieprocedurer 

og retningslinjer. Hvis resultaterne falder uden for de fastlagte værdiområder, er analyseresultaterne 

ugyldige. Brug 500 ng/ml eller 1000 ng/ml kalibrator som cutoff-niveau ved kvalitativ analyse. Brug 

alle kalibratorer ved semi-kvantitativ analyse. Alle kvalitetskontrolkrav bør udføres i overensstemmelse 

med lokale og/eller nationale regler eller akkrediteringskrav. 

Resultater og forventede værdier 

Kvalitative analyser 

Der kan anvendes enten 500 ng/ml eller 1000 ng/ml kalibratorer som en cutoff-reference til at skelne 

“positive” prøver fra “negative” prøver. En prøve, som viser en ændring i absorbansværdi (∆A), der 

er lig med eller større end den værdi, der blev opnået med cutoff-kalibratoren, anses som positiv. 

En prøve, som viser en ændring i absorbansværdi (∆A), der er lavere end den værdi, der blev opnået 

med cutoff-kalibratoren, anses som negativ. 

Semi-kvantitative analyser 

Der kan opnås en grov vurdering af ethylglucuronid-koncentrationen i prøverne ved at køre en 

standardkurve med alle kalibratorer og ved at mængdebestemme prøverne fra standardkurven. Når 

koncentrationen af EtG i prøven er større end den højeste kalibrator, kan prøven fortyndes med den 

negative kalibrator og testes igen. 

Rapporterbart område 

DRI ® ethyl glucuronid-analysen er beregnet til semi-kvantitativ anvendelse i området mellem 

100 ng/ml, den laveste kalibrator, og 2000 ng/ml, værdien af den højeste kalibrator. 

Begrænsninger 

1. Et positivt resultat med anvendelse af DRI ® ethylglucuronid-analysen angiver kun 

tilstedeværelsen af ethylglucuronid, og korrelerer ikke nødvendigvis med omfanget 

af fysiologiske og psykologiske virkninger. 

2. Præstationskarakteristika for DRI ® ethylglucuronid-analysen er ikke fastlagt med 

andre legemsvæsker end human urin. 

3. Denne DRI ® ethylglucuronid-analyse blev valideret på analysatorer, der anvender en 

integreret celleskylning. Hvis din analysator ikke har en integreret celleskylning, skal 

du kontakte den lokale repræsentant for Thermo Fischer Scientific. 

4. Der skal udvises forsigtighed ved rapportering af resultater, da der er mange faktorer, 

fx væskeindtagelse og andre biologiske faktorer, som kan påvirke resultatet af en 

urinprøve. 

5. Det er muligt, at andre stoffer end dem, der undersøges i den specifikke undersøgelse, 

kan påvirke testen og give falske resultater. 

Typiske præstationskarakteristika 

Typiske præstationsresultater opnået på Hitachi 917-analysatoren er angivet nedenfor. De resultater, 

der opnås på de enkelte laboratorier, kan afvige fra disse data. Der henvises til det analysatorspecifikke 

anvendelsesskema for yderligere præstatationsdata specifikke for analysatoren. 

Præcision 

DRI ® ethylglucuronid-kontrollerne (375, 625, 750 og 1250 ng/ml) og cutoff-kalibratorerne (500 og 

1000 ng/ml) blev testet i kvalitativ (mA/min) og semi-kvantitativ (ng/ml) tilstand vha. en modificeret 

NCCLS-protokol. Resultaterne, der præsenteres herunder, blev genereret ved testning af alle prøver 

i replikater på 6, to gange dagligt i 10 dage. 


Kalibrator/kontrol 500 ng/ml cutoff 

N=120 

375 

500 

625 

Præcision inden for analyse Total præcision 

Gennemsnitsværdi 

392 

417 

439 

SD % CV 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 


392 

417 

439 

SD % CV 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6



N=120 

750 

1000 

1250 

Semi-kvantitativ (ng/ml) 



SD % CV 

461 

494 

524 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 


SD % CV 

461 

494 

524 


N=120 

375 

500 

625 

Semi-kvantitativ (ng/ml) 

3,4 

3,4 

3,8 



373 

502 

623 

SD % CV 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 


373 

502 

623 


N=120 

750 

1000 

1250 

0,7 

0,7 

0,7 

SD % CV 

18,1 

19,4 

22,3 



756 

993 

1232 

SD % CV 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

Cutoff-karakterisering – Tilsætningsgenfinding 


756 

993 

1232 

4,9 

3,9 

3,6 

SD % CV 

31,2 

34,3 

43,5 

Cutoff-kalibratorer, 500 ng/ml og 1000 ng/ml og ±25 % kontroller blev forberedt ved at tilsætte 

ethylglucuronid i EtG-fri negativ urin. Cutoff-kalibratoren og kontrollerne blev testet (n=21) i 

både kvalitative og semi-kvantitative tilstande. De kvalitative data blev analyseret for præcision 

og detektionsnøjagtighed for kontroller og semi-kvantitative data blev analyseret for procentvis 

genfinding og præcision. Resultaterne indikerede, at alle fire kontroller genfandtes nøjagtigt i 

kvalitativ tilstand, negative kontroller som negative (raten under C/O kalibratorraten) og positive 

kontroller som positive (rate over C/O kalibratorraten). I semi-kvantitativ tilstand genfandtes 

kontrollerne inden for ±10 % fra nominelle værdier. Præcisionen var

Linearitet 

Analysens linearitet blev bestemt ved at teste fortyndingsgenfindingen af en serie ethylglucuronid-prøver 

i analysen. En urinprøve med 2000 ng/ml ethylglucuronid blev serielt fortyndet med EtG-fri urin ved 25 % 

trin fra cutoff-kalibratorer. Disse prøver blev testet i analysen i både den kvalitative og den semi-kvantitative 

tilstand. Alle prøverne genfandtes inden for ±20 % af forventede værdier i den semi-kvantitative tilstand 

og forventet rate (mA/min) i kvalitativ tilstand, hvilket indikerer, at analysen er lineær op til 2000 ng/ml. 

Nøjagtighed 

184 prøver blev analyseret med DRI ® ethylglucuronid-analysen i både den kvalitative og den 

semi-kvantitative tilstand, og resultaterne blev sammenlignet med LC/MS/MS-metoden. I både 

den kvalitative og semi-kvantitative tilstand var den positive prøveoverensstemmelse mellem DRI ® 

EtG-analysen og LC/MS/MS 96 %. De resultater, der blev opnået med både den kvalitative og semikvantitative 

tilstand opsummeres herunder. 

Kvalitative analyser: Ud af 184 prøver med anvendelse af en cutoff på 500 ng/ml blev 94 prøver 

påvist som positive og 85 prøver som negative, og ved en cutoff på 1000 ng/ml blev 44 prøver 

påvist som positive og 138 prøver blev påvist som negative af både immunanalysen og LC/MS/MS. 

Den samlede overensstemmelse mellem immunanalysen og LC/MS/MS var 97 %. Der var fem 

uoverensstemmende prøver ved en cutoff på 500 ng/ml og to uoverensstemmende prøver ved en 

cutoff på 1000 ng/ml. 

500 ng/ml cutoff 1000 ng/ml cutoff 

DRI ® EtG-analyse DRI ® EtG-analyse 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* To af de tre prøver var grænsenegative med immunanalysen. 

En prøve var grænsepositiv ved LC/MS/MS. 

¥ Prøver var grænsepositive i immunanalysen. 

♠ Prøver var grænsenegative i immunanalysen. LC/MS/MS-værdier lå mellem 1000 og 

1250 ng/ml. 

Semi-kvantitativ: I semi-kvantitativ tilstand blev prøver med EtG-koncentration >500 ng/ml og 1000 

ng/ml anset som positive i immunanalysen. Ud af 184 prøver blev 94 prøver påvist som positive og 

85 prøver som negative af både immunanalyse- og LC/MS/MS-metoderne. 

LC/MS/MS 

DRI ® EtG-analyse 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Prøverne var de samme prøver som i den 500 ng/ml kvalitative tilstand. 

¥ Prøverne var de samme prøver som i den 500 ng/ml kvalitative tilstand. 

24 

Litteratur 

Producent: 




Frikald i USA: 1-800-232-3342 

Autoriseret repræsentant i EU: 



D-94032 Passau, Tyskland 

Tlf: +49 (0) 851 886 89 0 

Fax: +49 (0) 851 886 89 10 

Andre lande: 

Kontakt den lokale repræsentant for Microgenics. 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













DRI ® etylglukuronid-assay 

Katalognr.: 10011723 (18 ml sett) 

10011297 (68 ml sett) 

10011226 (500 ml sett) 

Tiltenkt bruk 

DRI ® etylglukuronidenzym-immunoassayet er beregnet for kvalitativ og semikvantitativ bestemmelse 

av etylglukuronid i human urin ved grenseverdier på 500 og 1000 ng/ml. 

Dette assayet gir kun et foreløpig analytisk testresultat. Det må anvendes en mer 

spesifikk alternativ metode for å oppnå et bekreftet analytisk resultat. Gasskromatografi/ 

væskekromatografi-massespektrometri (GC/MS) og væskekromatografi/tandem 

massespektrometri (LC/MS/MS) er de foretrukne bekreftelsesmetodene. Klinisk vurdering og 

profesjonell dømmekraft bør anvendes ved ethvert resultat av tester for misbruk av narkotika, 

spesielt når foreløpige positive resultater blir brukt. 

Sammendrag og forklaring av testen 

Etylglukuronid (EtG) er en direkte metabolitt av etanol, som dannes ved enzymatisk konjugasjon av 

etanol med glukuronidsyre. 1,2 Alkohol i urinen detekteres vanligvis bare i noen få timer, mens EtG 

kan detekteres i opp til flere dager, til og med etter at alkoholen har blitt fullstendig eliminert fra 

kroppen. 3 

EtG kan derfor være en nyttig diagnostisk biomarkør for å fastslå nylig bruk av alkohol 

og for å overvåke avholdenhet hos alkoholikere som gjennomgår behandlingsprogrammer for 

alkoholabstinens. 4-7 

Etanol kan produseres in vitro på grunn av fermentering av urinprøver som 

inneholder sukker (diabetes), bakterier eller gjær når prøvene eksponeres i varme temperaturer. 8 

EtG-testen kan i slike tilfeller brukes som en bekreftelsestest for å fastslå om alkoholen i prøven er 

grunnet alkoholforbruk eller om det har dannet seg in vitro som et resultat av fermentering. For tiden 

kontrolleres EtG via GC/MS og LC/MS/MS. 9-10 

DRI ® etylglukuronid-assayet leveres som et klar-til-bruk, flytende homogent enzym-immunoassay. 

Assayet bruker spesifikke antistoffer som kan detektere etylglukuronid uten signifikant kryssreaktivitet 

med andre glukuronidforbindelser. Assayet er basert på konkurranse mellom et legemiddel merket 

med glukose-6-fosfatdehydrogenase (G6PDH) og fritt (ubundet) legemiddel fra urinprøven for en 

fast mengde med spesifikke antistoff-bindingssteder. Ved fravær av fritt legemiddel fra prøven, 

bindes det spesifikke antistoffet med legemiddelet merket med G6PDH og forårsaker en reduksjon 

i enzymaktiviteten. Dette fenomenet skaper et direkte forhold mellom legemiddelkonsentrasjonen 

i urinen og enzymaktiviteten. Det aktive enzymet forvandler NAD til NADH og dette resulterer i en 

absorbansendring som kan måles spektrofotometrisk ved 340 nm. 

Reagenser 

Antistoff/substratreagens: Inneholder musmonoklonalt anti-etylglukuronid-antistoff, glukose- 

6-fosfat (G6P) og nikotinamid adenin dinukleotid (NAD) i Tris-buffer med natriumazid som 

konserveringsmiddel. 

Enzymkonjugat-reagens: Inneholder etylglukuronid-derivat merket med glukose-6fosfatdehydrogenase 

(G6PDH) i Tris-buffer med natriumazid som konserveringsmiddel. 

Ytterligere nødvendige materialer (solgt separat): 

10011207, DRI ® etylglukuronid negativ-kalibrator, 25 ml 

10011208, DRI ® etylglukuronid-kalibrator 100 ng/ml, 10 ml 




10012135, DRI ® etylglukuronid 375 ng/ml-kontroll, 25 ml 




Forholdsregler og advarsler 

1. Denne testen er kun for in vitro-diagnostisk bruk. Reagensene er skadelige ved 

svelging. 

2. Reagensene anvendt i assayets komponenter inneholder natriumazid, noe som kan 

reagere med bly- eller kobberrør og danne potensielt eksplosive metallazider. Skyll 

alltid med store mengder vann for å unngå oppsamling av azid når du kaster slike 

reagenser. 

3. Ikke bruk reagensene etter utløpsdatoen. 

Forberedelse og oppbevaring av reagens 

Reagensene er klare til bruk; det kreves ingen ytterligere tilberedelse. Reagensene bør oppbevares 

avkjølt ved 2 °C til 8 °C. Alle assaykomponenter, åpnet eller uåpnet, er stabile inntil utløpsdatoen 

angitt på deres etiketter. Ikke bruk reagensene etter utløpsdatoen. 

Innsamling og håndtering av prøver 

Samle inn urinprøver i plast- eller glassbeholdere. Det oppfordres til å bruke friske urinprøver. 

Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs (Påbudte retningslinjer for 

føderal narkotikatestingsprogrammer på arbeidsplassen) anbefaler at prøver som ikke får en første 

test innen 7 dager etter ankomst til laboratoriet, bør plasseres i sikre kjøleenheter. Urinprøver må 

oppbevares avkjølt til enhver tid. 

Prøver innenfor et pH-område mellom 4,5 og 11 er egnet for testing med dette assayet. 

Bestreb deg på å holde pipetterte prøver fri for rusk. Sentrifugér meget grumsete prøver før 

analysering. Oppblandete urinprøver kan forårsake feilaktige resultater. Hvis det er mistanke om 

oppblanding, skaff en ny prøve og send begge prøvene til laboratoriet for testing. Håndter alle 

urinprøver som potensielt smittefarlige. 

25 

Assayprosedyre 

Til in vitro-diagnostisk bruk 

Kliniske kjemianalysatorer som er i stand til å opprettholde en konstant temperatur, pipettere prøver, 

blande reagenser, måle enzymatiske hastigheter ved 340 nm og tidsberegne reaksjonen nøyaktig 

kan brukes til å utføre dette immunoassayet. 

Se spesifikke anvendelsesanvisninger for hver analysator for kjemiparametrer før assayet utføres. 

Kvalitetskontroll og kalibrering 

I henhold til god laboratoriepraksis bør det brukes kontrollprøver for å sikre tilfredsstillende assayytelse. 

Sørg for at kontrollresultatene er innen etablert verdiområde, i henhold til laboratorieprosedyrer 

og -retningslinjer. Hvis resultatene faller utenfor de etablerte verdiområdene, er assayresultatene 

ugyldige. For kvalitativ analyse, bruk en 500 ng/ml eller 1000 ng/ml-kalibrator som grenseverdinivå. 

For semikvantitativ analyse, bruk alle kalibratorene. Alle kvalitetskontrollkrav (QC) bør utføres 

i samsvar med lokale og/eller nasjonale forskrifter eller godkjennelseskrav. 

Resultater og forventede verdier 

Kvalitativ 

Kalibratorene for enten 500 ng/ml eller 1000 ng/ml, kan brukes som grenseverdi-referanse 

for å skjelne “positive” fra “negative” prøver. En prøve som viser en endring i absorbansverdi 

(∆A) tilsvarende eller større enn verdien oppnådd med grenseverdikalibratoren vurderes som 

positiv. En prøve som viser en endring i absorbansverdi (∆A) lavere enn verdien oppnådd med 

grenseverdikalibratoren vurderes som negativ. 

Semikvantitativ 

Det kan oppnås et omtrentlig estimat av etylglukuronidkonsentrasjon i prøvene ved å kjøre en 

standardkurve med alle kalibratorer og kvantitere prøvene fra verdiene på standardkurven. Når 

EtG-konsentrasjonen i prøven er større enn den høyeste kalibratoren, kan den fortynnes med den 

negative kalibratoren og testes på nytt. 

Rapporterbart verdiområde 

DRI ® etylglukuronid-assayet er fremstilt for semikvantitativt bruk i verdiområdet mellom 100 ng/ml, 

den laveste kalibratoren, og 2000 ng/ml, verdien for den høyeste kalibratoren. 

Begrensninger 

1. Et positivt resultat ved bruk av DRI ® etylglukuronid-assayet angir bare tilstedeværelse 

av etylglukuronid og korrelerer ikke nødvendigvis med graden av fysiologiske og 

psykologiske effekter. 

2. Ytelsesegenskaper for DRI ® etylglukuronid-assayet har ikke blitt etablert med andre 

kroppsvæsker enn human urin. 

3. Dette DRI ® etylglukuronid-assayet ble validert på analysatorer som benytter en integral 

cellevask. Hvis din analysator ikke har en integral cellevask, ta kontakt med din lokale 

Thermo Fisher Scientific-representant. 

4. Utvis forsiktighet når resultatene rapporteres, da det er mange faktorer, 

f.eks. væskeinntak og andre biologiske faktorer som kan ha innflytelse på et 

urintestresultat. 

5. Det er mulig at andre stoffer enn de som forskes i spesifisitetsstudien kan interferere 

med testen og forårsake falske resultater. 

Typiske ytelsesegenskaper 

Typiske ytelsesresultater oppnådd på Hitachi 917-analysatoren vises nedenfor. Resultatene som ble 

oppnådd i ditt laboratorium kan være forskjellige fra disse data. For ytterligere ytelsesdata for den 

spesifikke analysatoren, se den spesifikke analysatorens anvendelsesark. 

Presisjon 

DRI ® etylglukuronid-kontrollene (375, 625, 750 og 1250 ng/ml) og grenseverdikalibratorene (500 og 

1000 ng/ml) ble testet i kvalitativ (mA/min) og semikvantitativ (ng/ml) modus ved bruk av en modifisert 

NCCLS-protokoll. Resultatene oppført nedenfor ble generert ved å teste alle prøvene i 6 replikater 

to ganger daglig i 10 dager. 


Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

375 

500 

625 

Gjennomsnittlig 

392 

417 

439 

500 ng/ml-grenseverdi 

Intraassay-presisjon Totalpresisjon 

SD % CV 

2,1 

2,1 

2,0 

0,5 

0,5 

0,5 


392 

417 

439 

SD % CV 

2,9 

3,1 

2,7 

0,7 

0,7 

0,6


Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

750 

1000 

1250 


461 

494 

524 

Semikvantitativ (ng/ml) 

Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

375 

500 

625 


373 

502 

623 

Semikvantitativ (ng/ml) 

Kalibrator/ 

kontroll 

N=120 

750 

1000 

1250 


756 

993 

1232 



SD % CV 

2,4 

2,7 

2,7 

0,5 

0,6 

0,5 


461 

494 

524 


SD % CV 

3,4 

3,4 

3,8 


SD % CV 

11,3 

10,5 

13,2 

3,0 

2,1 

2,1 


373 

502 

623 


0,7 

0,7 

0,7 

SD % CV 

18,1 

19,4 

22,3 


SD % CV 

16,9 

21,1 

23,0 

2,2 

2,1 

1,9 

Grenseverdiegenskaper - tilsetningsgjenfinning 


756 

993 

1232 

4,9 

3,9 

3,6 

SD % CV 

31,2 

34,3 

43,5 

500 ng/ml og 1000 ng/ml grenseverdikalibratorer og ±25 % kontroller ble tilberedt ved å tilsette 

etylglukuronid i EtG-fri negativ urin. Grenseverdikalibratoren og kontrollene ble testet (n=21) i 

både kvalitative og semikvantitative moduser. De kvalitative dataene ble analysert for kontrollenes 

presisjon og deteksjonsnøyaktighet og de semikvantitative dataene ble analysert for gjenfinnings- og 

presisjonsprosentdel. Resultatene indikerte at alle fire kontroller ble nøyaktig gjenfunnet i kvalitativ 

modus, negative kontroller som negative (verdi under verdien for grenseverdikalibratoren) og positive 

kontroller som positive (verdi over verdien for grenseverdikalibratoren). I semikvantitativ modus ble 

kontrollene gjenfunnet innen ±10 % av den nominelle verdien. Presisjonen var

Linearitet 

Assay-lineariteten ble bestemt ved å teste fortynnelsesgjenfinningen av en rekke etylglukuronidprøver 

i assayet. En urinprøve inneholdende 2000 ng/ml etylglukuronid ble fortynnet i rekkefølge med EtG-fri 

urin trinnvis i 25 % inkrementer fra grenseverdikalibratorer. Disse prøvene ble testet i assayet i både 

kvalitative og semikvantitative moduser. Alle prøvene ble gjenfunnet innen ±20 % av forventede 

verdier i semikvantitativ modus og forventet verdi (mA/min) i kvalitativ modus. Dette indikerer at 

assayet er lineært opp til 2000 ng/ml. 

Nøyaktighet 

184 prøver ble analysert i DRI ® etylglukuronid-assayet både i kvalitative og semikvantitative moduser 

og resultatene ble sammenlignet med LC/MS/MS-metoden. I både kvalitativ og semikvantitativ modus, 

var enigheten mellom DRI ® EtG-assay og LC/MS/MS 96 % for de positive prøvene. Resultatene 

oppnådd av både de kvalitative og semikvantitative modusene oppsummeres nedenfor. 

Kvalitativ: Ut av 184 prøver med en grenseverdi på 500 ng/ml, ble 94 prøver detektert som 

positive og 85 prøver som negative, og med en grenseverdi på 1000 ng/ml, ble 44 prøver detektert 

som positive og 138 prøver detektert som negative av både immunoassayet og LC/MS/MS. 

Den totale overensstemmelsen mellom immunoassayet og LC/MS/MS var 97 %. Det fantes fem 

uoverensstemmende prøver ved 500 ng/ml-grenseverdien og to uoverensstemmende prøver ved 

1000 ng/ml-grenseverdien. 

500 ng/ml grenseverdi 1000 ng/ml grenseverdi 

DRI ® EtG-assay DRI ® EtG-assay 

+ - + - 

+ 94 3 * + 44 2 ♠ 


- 2 ¥ 85 - 0 138 

* To av de tre prøvene var grenselinje-negative i immunoassayet. En prøve var 

grenselinje-positiv i LC/MS/MS. 

¥ Prøvene var grenselinje-positive i immunoassayet. 

♠ Prøvene var grenselinje-negative i immunoassayet. LC/MS/MS-verdiene var mellom 

1000 og 1250 ng/ml. 

Semikvantitativ: I semikvantitativ modus, var prøvene med EtG-konsentrasjon >500 ng/ml og 

1000 ng/ml vurdert positive i immunoassayet. Ut av 184 prøver, ble 94 prøver detektert som positive 

og 85 prøver som negative av både immunoassay- og LC/MS/MS-metodene. 

LC/MS/MS 

DRI ® EtG-assay 

+ - 

+ 94 3* 

- 2 ¥ 85 

* Prøvene var de samme prøvene som i 500 ng/ml kvalitativ modus. 

¥ Prøvene var de samme prøvene som i 500 ng/ml kvalitativ modus. 

27 

Henvisninger 



1995, 19:91-94. 






Biology. 2001, 6(3):205-212. 



449. 













Produsent: 




Grønt nummer USA: 1-800-232-3342 

Autorisert representant i EU: 



D-94032 Passau, Tyskland 

Tlf: +49 (0) 851 886 89 0 

Faks: +49 (0) 851 886 89 10 

Andre land: 

Ta kontakt med din lokale Microgenics-representant. 

28 

10011227-R0

DRI® Ethyl Glucuronide Assay - Fisher Scientific

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?