Semeadura in vitro de Orquídeas para propagação massal

dividindo-os em fragmentos, e a conversão destes protocórmos em brotos com raízes (Teo,
1976-1978).
4. PRODUÇÃO DE PLANTAS LIVRES DE VÍRUS
Uma das condições necessárias para a propagação, é que as plântulas obtidas devem
estar livres de vírus. Para tanto, deve-se utilizar como explante um meristema de
aproximadamente 1mm de comprimento com dois primórdios foliares.
O vírus que se encontra com mais freqüência nas orquídeas é uma cepa
especializada do vírus do mosaico do tabaco (TMV-O), conhecido antes como vírus da
mancha anelada do Odontoglossum. Este vírus se transloca pela seiva e a contaminação se
dá pelas mãos ou algum objeto cortante. Produz mancha em forma de anel nas folhas de
Cattleya e também afeta a forma e a cor das flores em muitas outras orquídeas (Hakkaart &
Van Balen, 1980).
5. PROPAGAÇÃO POR CULTIVO DE MERISTEMAS
De acordo com Champagnat (1977), Rao (1977), e Fast (1980), deve-se utilizar
como material inicial, para cultivo de meristemas, brotos jovens em crescimento de 10-15
cm de comprimento que acabaram de desenvolver suas folhas. Qualquer resíduo de solo se
lava bem em água corrente, e se retiram as folhas de maneira que se possam ver as gemas
axilares. Banha-se o broto sem folhas em álcool (70% v/v), e depois se esteriliza durante 10
minutos em hipoclorito de sódio a 10% v/v. Preparam-se então as gemas axilares depois de
tê-las colocadas em água esterilizada para retirada dos resíduos de cloro. Esteriliza-se uma
vez mais (10 minutos em hipoclorito 3-10% (v/v), contendo Tween 20 ou 80), tornando-as
em água esterilizada. Cortam-se as bases das gemas menores e em câmara de fluxo laminar
se realiza a inoculação. No caso das gemas maiores se retiram algumas folhas para o
processo de inoculação propriamente dito. Passado algum tempo (6-10 semanas) formam-
se os primeiros corpos protocormicos. Ocorrendo isto, os protocórmos devem ser separados
e repicados. Atualmente se inoculam gemas maiores (com pelo menos 3-4 primórdios
foliares).
No caso de cultivo de meristemas de Cattleya, se produz muito mais rapidamente
uma coloração marrom nos tecidos lesionados; por esta razão se recomenda freqüentemente