Aspergillus Gracilis Bainier var. Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e ...

ASPERGILLUS GRACILIS Bainier VAR. SARTORYI
(BIOURGE) BATISTA, LIMA E VITAL N. VAR. - SUA
IMPORTANCIA FILOGENI~TICA
A. CHAVES BATISTA, 1)
0SWALDO GON~ALVES DE LIMA ~ 2)
A~BISO FE~ANDES VITAL 3).
UNIVERSIDADE DO RECIFE --INSTITUTO DE
MICOLOGIA Publifacdo no 4 ~)
(Corn 15 figuras)
0 fungo em apr~qo apareceu-nos como contaminante de cuttura
de Candida stellatoidea Jones e Martin, despertando a nossa aten~o
pela morfologia de seus conidioforos, em parte de Aspergillus e em
parte de Penicillium.
Examinado detidamente, permitiu-nos reconhecer que a aparente
confus~o das suas caracteristicas era urea constante especifica e
n~o urea simples varia~o, induzida por fatores do meio, como se
poderia imaginar, e, muito menos, o produto da associa~o, num
cultivo, de dois fungos distintos.
A an~lise taxon6mica revelou-nos tratar-se, pot seu turno, de
urn Aspergillus, do grupo ,,glaucus", na sdrie ,,restrictus", de T~toM
e RAPER (1945).
A s6rie ,,restrictus" que compreende as f6rmas intermedi~rias
entre os grupos de A. glaucus e A. /umigatus, -- Intermediate
Forms -- de TI~OM e CI~u~ClL (1926), reune, de modo paralelo a
todos os Aspergillus de aparelho conidial semelhante a Penicillium,
ou seja o grupo de A. peuicilloides de G. SMITH (1931), tendo
A. restHctus Smith como tipo.
O conceito de TI~OM e RAPER ao erigir a s6rie ,,restrictus" foi o
de que essa sdrie abrangeria os fungos de restricto desenvolvimento
cultural e conidios equinulados ou espinescentes, em longas cadeias,
1) Chefe do Instituto de Micologia;
2) Diretor do Instiiuto de Antibi6ticos e Prof. de Microbiologia da Escola de
Quimica;
3) Assistente micologista do Instituto de ~iicologia -- (Todos da Universidade
do Recife).
4) Os autores declinam o seu agradecimento ao Dr. HERALDO DA SILVA MAIA,
Assisterlte micologista e D. MARILE~E MARANI~20 MOnEIRA, Auxiliar~T6cnico, do
Instituto de Micologia, pela colaboracgo que lhes prestaram, durante a realizacg~o
do presente trabalho.

90 A. CHAVES BATISTA E COLL.
compactas, aproximados aos do grupo A. glaucus. D~sse rnodo, a
simples semelhan~a do aparelho conidial, das chamadas f6rmas
intermedi~rias, corn A. gIaucus, os levou, a THOM e RAPER, ~t nova
s6rie ,,restrictus" estimando-a como integrada por elementos anor-
mais de A. glaucus, sere tomar em considera~o o marcante relevo
que tais formas exibem em rela~o a Penicillium, como se verifica
de suas palavras ,,the important relationship indicated by the
structure of the conidial apparatus is not with Penicillium but
with the A. glaucus group of which these forms appear to be merely
reduced members."
Essa conceitua~o, pordm, pondo por terra os Microas~Sergillus
de WEI~MER e o grupo A. penicilloides de SMITH, ao nosso ver, n~o
pode ser tomada como definitiva.
Faltamdhe os limites naturals necess~rios para urea base nomen-
clatural s61ida, desprezada, como foi, a caracteristica fundamental
da morfologia dos conidioforos, e contestada a sua profunda
similitude para corn Penicillium.
0 comodismo didgttico que preocupou aos autores citados, na
cria~o de s6rie ,,restrictus" ter~i de ceder terreno ~ evid4ncia dos
fatos, restringindo-se mais ainda o grupo artificial de A. glaucus, e
situando-se, ent~o, a sdrie de A. restrictus como intermedi~ria entre
os g~neros Aspergillus e Penicillium, atd que novos estudos digam
da conveni6ncia ou n~o de se restaurar Microaspergitlus, como ponte
entre ~sses dois g6neros.
No caso presente, o A. gracilis sartoryi n. var. afigura-se-nos como
de extraordin~ria import~ncia, podendo mesmo ocupar a posi~o
de elemento de transi~o filogen6tica entre Aspergillus e Penicilliurn,
uma vez que a morfologia de sua frutifica~o conidial apresenta
caracteres d~sses dois g6neros. Fig. 1-b-c.
O alicerce da taxonomia micoldgica repousando ainda ern grande
parte, classicamente, no estudo da morfologia das estruturas
vegetativas e de reprodu~o dos fungos, refor~a-se para a diferen-
ciag~o das esp~cies de Aspergillus e Penicillium no estudo do seu
comportamento cultural em diferentes meios de laborat6rio,
enquanto n~o se faz sensivel a contribuig~o da Genetica, no es-
clarecimento da potencialidade cromoz6mica dos organismos
pertencentes a 6sses generos.
Assim, levando em conta o tipo dos conidioforos que se erguem
do substrato, corn a presenga de celula p6 (foot cell) Fig. l-a,
pr6prios de Aspergillus, e os conidioforos que se definem s6bre
cord6es micelianos aereos, (ropes), com vesfculas disfargadas em
simples dilatagSes e esterigmas inseridos ao modo das frutificagSes
monoverticiladas de Penicillium, ou ainda proliferantes, corn a
produgfio de novasrpseudo-vesiculas, mantendo, o aspecto germ das
ramificag6es de Penicillium, n~o podemos deixar ~ margem, em
fung~o embora que s6mente da morfologia, fisse car&ter de conex~o
entre os dois generos Aspergillus e Penicillium que o A. gracilis
sartoryi n. vat. bern representa.

ASPERGILLUS GRACtLIS BAINIER 91
Achamos mesmo, ante os resultados de seu cultivo, adiante
expostos, que 6sse fungo, filogeneticamente, merece urea considera-
~o t6da especial.
Fig. I
ASP~GILLUS GP~CILIS BAINIER VAR. SAR-
TORYI (BIOURGE) BATISTA, LIMA E VITAL.
~)"foo$ cell" e "rizoides";b) conidio-
foro simples, com eSterigTmas lembrsn-
do PenieilllLxm monovertlcilado; c ) co-
nidioforo de ves{c&la ramificada e 9
¢uJos ramos se origlnar~o novas ves~-
¢ulas.
Fig. I.
Outrossim, a nfio forma~o de cleistotecios e ascosporos, e a
aus.6ncia de esclerocios que acompanham as culturas dos fungos da
serle ,,restrictus" e em particular de A. gracilis sartoryi, ressaltam

92 A. CHAVES BATISTA ]~ COLL.
Fig. 2. Aspergillus Gracilis Bainier Var. Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Col6nia s6bre Czapek neutro, aos 10 dias. Orig.
Fig. 3. Aspergillus Gracilis Bainier Vat. Sartovyi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Conidioforos simp]es, desenvolvidos perpendicularmente s6bre cord~o miceliano
trope) e ¢adeias compactas de conidios. Orig. 400 ×.

ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER 93
um est~dio incompleto, que se distingue do grupo de A. glaucus,
geralmente produtor de corpos frutigenos, de natureza sexuada.
Descri~fio
O fungo Aspergillus gracilis Bainier var. sartoryi que ora des-
crevemos apresenta, do ponto de vista da taxonomia, os caracteres
gerais que demarcam a espfieie A. gracilis, e as particularidades que
delimitariam A. sartoryi Biourge, que, apesar de como tal denomina-
do, n~o alcan~ou validade, por falta de publica~o adequada,
conforme o prescrevem as regras do Cddigo InternacionaI de Nomen-
clatura Botfi.nica.
Distanciando-se o nosso fungo de A. gracilis peta estrutura do
epispdrio e maior tamanho dos seus conidios poderiamos revalidar a
espficie A. sartoryi ou descrev6-1o como esp6cie nova; preferimos,
entretanto, reunir o epiteto sarloryi ao nome esp6dfico de A.
gracilis, para designa-lo, simplesmente, como urea variedade, numa
homenagem a BIOURGE.
No meio de Czapek-agar, ~ temperatura ambiente (26--28 ° C) e
aos 11--12 dias, as col6nias revelam-se de lento crescimento,
alcangando de I3--16 rams de di~metro e 1--1,5 mms de Mtura;
s~o arredondadas, de bordos inteiros ou arborescentes, um tanto
mucoides, planas e ent~o de colora~o inicial branco-cinza e depois
verde cinza corn a 5rea central densa, de micetio aereo branco,
contrastante, aveludadas, ou se mostram convolutas, ondeadas, de
firme textura miceliana, flocosas em parte ou no todo, e de tonali-
dade branca, corn orta estreita verde-cinza, Fig. 2; o micelio sub-
merso ao redor das col6nias, origina como que um halo de 1--2 rams
de di~metro; exsudato ausente; odor indistinto ou ausente; reverso,
de cotora~o azul-cinza ou incolor.
Conidioforos de dois tipos: simples e de vesiculas ramificadas.
Os conidioforos simples levantam-se do substrato, corn celula p6
(foot cell) diferen~ada, ou se constituem a partir de hifas aereas e
cordSes micelianos (ropes), no sentido perpendicular a 6stes, Fig. 3,
apresentando-se septados, de membrana lisa, corn o ~pice clavado
ou c6nico, e alcan~ando a extens~o de 22,5--110 #, progressivamente
dilatados da base para o fipice, onde o di~metro varfa de 6---12,5 #.
Os conidioforos de vesleulas ramificadas geralmente originam-se
do substrato, corn ,,foot cell" ou corn ,,rizoides" 101--276 # de
extens~o (ramo prim~rio) e o ~pice compSe urea vesicula globosa
ou elaviforme, 10--19¢, de di~metro da quaI proliferam novos
eonidioforos, pseudo-conidioforos, de base estreitada e ~pice alar-
gado em vesfcula elaviforme, Fig. 4 e Fig. 5; frequentemente, dessas
novas veslculas formam-se novos pseudo-conidioforos, 62--287 ×
6--17# que d~o dilata~Ses vesiculares por seu turno tamb6m
origin~rias de novos pseudo-conidioforos, de 62--295 × 6--17/~,
perfazendo assim um total de tr6s expans5es de conidioforos e tr6s
vesiculas Fig. 6 e Fig. 7; eertas linhagens ainda produzem uma

94 A. CHAVES BATISTA E COLL.
• ig. 4
AS~GILLU$ GRACILIS BAINIER VAR. SAETORYI (BIOURGE)
BATISTA, LIMA E VITAL.
Fig. 4.
Fig. 5,
"x
d*
Fig. 5 ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER ~AR. SAR~QRYI
(BIOURGZ) BATISTA, LIMA E VITAL.
©

ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER 95
quarta extens~o de pseudo-conidioforos encimados tamb6m por
vesiculas.
Os conidioforos simptes s~o abundantes na superflcie do meio de
CzAPEI~ enquanto que os conidioforos ramificados se apresentam
imersos no meio de cultura, ~t maneira decumbente, e escassos ou
bastante numerosos, Fig. 10.
Nas vesiculas dos conidioforos simples inserem-se esterigmas
lageniformes, em uma flnica sdrie, em nflmero de 3 ou em grande
quantidade, e sdmente na porg~o mais apical das vesicutas, atingindo
de 6--9 × 2,5---4 #.
t~ comum tambdm o conidioforo depois de entumecer o £pice, na
constru~o de vesicula, dar lugar ao crescimento de longos e dis-
formes esterigmas, assemelhados as ramifica~Ses monoverticiladas
de Penicillium, os quais, entretanto conservam-se est6reis, sere
produzir conidios, Fig. 8 e Fig. 9; em outros conidioforos, pordm,
alguns d6sses esterigmas comp6em novas vesiculas.
Nos conidioforos de vesiculas ramificadas s6 as vesiculas dos
filtimos pseudo-conidioforos possuem esterigmas, ali~s corn as
mesmas caracteristicas dos esterigmas das veslculas dos conidio-
foros simples; as demais n~o os t6m.
Nas vesiculas livres, de ramos secund~rios, os esterigmas suportam
curtas cadeias de conidios -- Fig. 11, enquanto que as vesiculas
livres de ramos terci~rios e quatern~rios exibem esterigmas corn um
s6 conidio ou estereis.
Dos esterigmas dos conidioforos simples partem colunas com-
pactas de conidios, que variam de 90--281 × 17--28 #, Fig. 12.
Os conidios s~o em fdrma de barril, de tonatidade verde-cinza,
5--7,5 × 4--5/~, de epispdrio liso quando jovens, e espinescente
maturidade, ligados uns aos outros por conectivos pouco evidentes,
Fig. 13.
No meio de SABOUmaUD ,,Difco" as col6nias s~o mais ampliadas
do que s6bre CZAPEK agar chegando a 21 mms de dfftmetro, aos
6 dias e ~ temperatura ambiente; s~o ondeadas, brancas at6 o 13 °
dia, mas em vez de flocosas, mostram-se de aspecto fasciculado,
corn abundantes cord6es micelianos (ropes) ~ superficie; o micelio,
submerso ~ bern mais reduzido do que em CzaPJ~, Fig. 14 e Fig. 15,
inodoras, sere exsudato, de reverso branco-cinza; a 37 ° C o cresci-
mento 6 paralisado.
Na superficie das col6nias encontram-se conidioforos simples ao
passo que, imersos no meio de cultura se acham, abundantemente,
conidioforos de vesiculas ramificadas e at6 cordSes micelianos dos
quais se originam conidioforos simples, no sentido perpendicular.
S6bre papel de filtro assentado na superficie do meio de SABOU-
RAUD, em placas de PETRI, segundo a t6cnica de t~'LEMMING, as
culturas desenvolvem-se corn certa intensidade, chegando a 20 mms
de di~metro, planas ou enrugadas, de colora~o branco-creme;
tais col6nias produzem, indistintamente, tanto s6bre o papel, como
entre o papel e o meio de cultivo, conidioforos simples e conidioforos

96 A, CHAVES BATISTA E COLL.
de vesiculas ramificadas; algumas linhagens entretanto formam
preferentemente os conidioforos de vesiculas ramificadas entre o
papel e o meio de cultura.
No meio de batata-dextrose-agar as col6nias s~o planas, velutinas,
quase sem desenvolvimento de micelio adreo, e permanecem de
colora~o verde-cinza.
Os conidioforos simples n~o se distinguem daqueles que se for-
mare s6bre Czapek-agar.
Os de vesiculas ramificadas, originando-se tamb~m s6bre ,,foot
cell", ou s6bre ,,rizoides" apresentam o ramo prim~irio mais longo e
mais estreito, 146--300 × 8,5-:-11 #; os ramos secund~rios variam
de 62--135 × 8,5--11 #; nXo assinalamos ramifica§6es terci~rias e
quatern~rias has culturas s6bre batata-dextrose-agar.
Em regra os conidioforos simples se acham na superficie das
co16nias eos conidioforos de vesiculas ramificadas est~o imersos no
meio de cuttivo.
As cadeias conidiais oscilam entre 45--140 × 17,5--25 # e os
conidios, individualmente, revetam-se de menor tamanho, 5--6,5 ×
3--4/~.
O fungo em aprecia~o apresenta clamidosporos globosos ou
ovoides, intercalares, em rosario ou isolados, em todos os meios de
cultura e ~ medida de seu envelhecimento.
N~o desenvolve esclerocios hem constitui cleistotecios.
Isolado como contaminante de cultura no laborat6rio.
Leg. A. Fernandes Vital, 8/11/195¢.
Typo, no 246, no Instituto de Micologia, da Universidade do
Recife.
Aspergillus gracilis Bainier var. sartoryi (Biourge) Bafista, Lima
e Vital.
Coloniae in agaro Czapekii neutro multo restrictae, 18--16 mm
diam., in Sabouraudii dextrosi celeriter crescentes, planae, albido-
cinereae, dein viridae -- cinereae et area centrali denso-/loccosae,
aIbidae, vel convolutae, corrugata comflositae, albae et margine viridae
in agaro Sabouraudii [asciculatae; mycelio submerso in halo margi-
nato," sporulatione media; exsudato hullo, reverso incolorato vel
caeruleo-cinereo, in agaro Sabouraudii dextrosi incolorato vel albo-
cinerae, inodora: conidiophoris simpliees et conidiophoris vesicula
ramosis gerentes.
In agaro Czapekii conidiophoris simpliees cure ,,/oot cell", plerum-
que ex hyphis repentibus orientibus membrana Iaevis, septatis, ad
apicem clavatis vel conicis, 22,5--110 × 6--12,5 # super[iciali.
Conidiophoris vesicula ramosis immersis cure ,,rhizoidis" vel
,,loot cell" sed distinctis in ramis,, prima ramis 101--276 x 10--19;
vesicula globosa vel clavi/ormia, ramosa; secundarius ramis 62--.287
× 6--17 # et vesicula clavi/ormia ipse proli/erantibus," tertius ramis
62--295 × 6--17 # et vesicula clavata vel globosa; ramo quarto taro,"
sterigmatibus in eonidiophoris simplicis lageni/ormibus, 3 vel

ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER 97
Fig. 6. Aspergillus Gracitis Bainier Vat. Sartoryi (Biourge) atista, Lima e Vital.
Vesicula ramificada, corn esterigmas transformados em pseudo-conidioforos que
dAo novas veslculas. Orig. 400 ×.
Fig. 7. Aspergillus Gracilis Bainier Vat. Savloryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Conidioforo (ramo prim~rio) vesicula ramosa e pseudo conidioforo (ramos secund~-
rios e terciarios), os dltimos tendo veslculas Ierteis, corn esterigmas normais onde se
insere um s6 conidio. Orig. 200 ×.

A. CHAVES BATISTA E COLL. 98
Fig. 8. Aspergillus Gracilis Bainier Vat, Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Conidioforo com esterigmas uniseriados assemelhando-se 5~ ramificag~o mono-
verticiIada de Pe¢¢icillium. Orig. 430 ×.
Fig. 9. dspergillus Gracilis Bainier Vat. Sa~4oryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Detalhe da inserq~o de esterigmas aaaormais no terco apical da ves~cula, Foto-micro
obtida corn filtro vermelho. Orig. 430 ×.

ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER 99
Fig. 10. Aspergillus Gracilis Bainier Va~. Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Outro aspecto dos conidioforos de veslculas rami~icadas, formados Ila intimidade do
meio de Czapek, inteiramente imersos. Orig. 200 ×.
Fig. 1I. Aspergillus Gracilis t3ainier Va~. Sartoryi (]Biourge) Batista, Lima e Vital.
Aspecto de conidioforos de veslculas ramificad&s, notando-se os ramos primanos e os
ramos secund~rios, ~stes corn as vesiculas sustentando curtas cadeias de conidios.
Orig. 200 ×.

100 A, CHAViES }3ATISTA E COLL.
Fig. 12. Aspergitl,us Gracilis Bainier Vat. Sartoryi (Biourge) Bafis£a, Lima e Vital.
Cadeias conidiais compact:as, como verdadeiras colunas, desenvoIvidas s6bre
conidioioros simples, no meio de Czapek. Orig. 200 ×.
Fig. 13,
Detalhe
Aspergillus Gracilis Bainier Var. Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
da constitui~Ao das colunas de conidios, s6bre conidioforos simples.
Orig. 400 ×.

ASPERGILLUS GRACILIS BAINIER 101
Fig. 14. Aspevgillus Gracilis Bainier Vat. Savloryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
CoI6nias em Sabouraud-dextrose, aos 7 dias. Orig.
Fig. 15. A spevgillus Gracilis Bainier vaf. Sartoryi (Biourge) Batista, Lima e Vital.
Detathe da superflcie da cultura, em Sabouraud-dextrose, aos 7 dias. Orig.

102 A. CHAVES BATISTA ]~ COLL.
numerosis, 6--9 × 2,5--4 it; in vesicula ramosis sterigmatibus solum
in suprema, dense con/ertis, cure uno soIum conidiis; in sterigmatibus
conidiophoris simplicis, conidiis in cadusi, viride-cinereis, 5--7,5 ×
4--5 tt, conspicuae spinescentis, in catenis tongis, 90--281 × 17--28#
saepe spissus parallelibus.
Contaminatione in laboratorio, Recife, Brasil.
Leg. A. F. Vital, S/11/1954. Typus, 246, Instituto de Micologia,
Universidade do Recife.
Prov. Pernambuci, Brasiliae, Amer., Austr.
Summary
We deal with a new variety of Aspergillus which we call Asper-
gillus gracilis Bainier var. sartoryi (Biourge) Batista, Lima and
Vital.
This variety appears to be very important under the phylogenetic
point of view, apparently being an intermediate form between
Aspergillus and Penicillium.
Its morphology resembles A. gracilis but the conidia characte-
ristics are distinct; we took the epithet sartoryi from A. sartoryi
Biourge which was not described by the respective author.
We suggest, too, the transfer of the series A. restrictus, where
we put our new variety, from the group A. glaucus, to become in-
dependant, as a connective series in the phylogenetic development
between Aspergitlus and Penicillium, since the type of the series
and the other elements that it embraces does not produce sclerotia
or cleistothecia and the conidial apparatus offers curious similarity
to Penicillium. Besides, some fungi of the series grow well in
certain culture media, in complete discordance with the members of
the group A. glaucus.
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