Hibridação de ácidos nucleicos

Temperatura de desnaturação (Tm)
As bases dos ácidos nucleicos absorvem fortemente luz ultravioleta a 260 nm.
A absorção pelo DNA de cadeia dupla é consideravelmente menor do que pelos nucleótidos livres.
OD SS e OD DS indicam a
densidade óptica de DNA de
cadeia simples e de cadeia
dupla, respectivamente.
A Tm é uma medida útil da
estabilidade de um ácido nucleico de
cadeia dupla.
Corresponde ao ponto médio na
transição de densidade óptica da forma
de cadeia dupla para a forma de cadeia
simples.
As condições de hibridação são escolhidas de modo a promover a formação de heterodúplices,
sendo a temperatura de hibridação (65 a 68 0 C), em geral 25 0 C abaixo da Tm.