Giuliana Piovesan Alves - IPD-Farma

PD&I
PESQUISA, DESENVOLVIMENTO
E INOVAÇÃO
LIPOSSOMAS:
PASSADO,
PRESENTE
E FUTURO

Área
Normal
Acesso,
Afinidade
Efeito: toxicidade?
ENCAPSULAÇÃO ATIVOS
Uso Ativos Livres Possíveis Vantagens do Uso
de Ativos em Veículos
Ambiente
Área
Alvo
Ativo Livre
Inativação ??
Não Acesso,
Não Afinidade
Efeito Limitado
Área
Normal
Ambiente
Ativo em Veículo
Efeito Limitado
Área
Alvo
Transporte Facilitado
Efeito

Histórico
LIPOSSOMAS
Foram descritos na década de 60 por Alec
Bangham: “Esférulas de Fosfolipídios”
Termo Lipossomas introduzido por Sessa
e Weissman – final década 60
Foram usados inicialmente em pesquisa
básica: como modelo de membrana celular
(mimetização celular)
São aplicados em diversas áreas:
cosmética, alimentícia, farmacêutica e
médica.

Cabeça Polar
Hidrofílica
Molécula
Anfifílica
Cauda Apolar
Hidrofóbica
LIPOSSOMAS
Zwitteriônico
(dipolar)
Ácido graxo
saturado
Ácido graxo
insaturado

LIPOSSOMAS
Moléculas Anfifílicas formam Estruturas Supramoleculares em Água
Fosfolipídios livres em água
Vesícula Multilamelar
bicamada plana
membrana (lamela)
Vesícula Esférica Unilamelar

LIPOSSOMAS
O que são lipossomas?
Anfifílicas Anfifílicas
Anfifílicas
Hidrofóbicas
Hidrofóbicas
Hidrofílicas
Hidrofílicas
Hidrofílicas

Endocitose
Fusão
LIPOSSOMAS
INTERAÇÃO COM CÉLULAS
Adsorção
Troca Lipídica

LIPOSSOMAS
Método de Bangham : Hidratação do
Filme Seco de Lipídios
1. Evaporação do solvente
2. Formação do filme lipídico
seco
3. Hidratação do filme - MLV
4. Uniformização de tamanhos -
SUV

Tipos
LIPOSSOMAS
MLV, OLV
LUV / SUV
MVV
Multi ou Oligolamelar Unilamelar Grande / Pequeno Multivesicular
Transição Fase
Temperatura Baixa
ORDEM
Temperatura Alta
DESORDEM

Encapsulação
LIPOSSOMAS
Hidrofílico
Proteção, Solubilização - 1ª geração
Alvo Específico - 2ª geração
Anfifílico
Hidrofóbico

LIPOSSOMAS
Direcionamento do Ativo
Inativo: lipossomas convencionais agrupam-se aos
tecidos específicos do sistema reticuloendotelial
Ativo: alteração da superfície dos lipossomas com
ligantes (anticorpos, enzimas, proteína A, açúcares)
Físico: lipossomas sensíveis a temperatura ou pH
Diretamente ao local

Definir Objetivo Objetivo Alcançado
Decidir
Compilar/Analisar
Resultados
Análise
LIPOSSOMAS
Resposta
Definir Formulação
Manipulação
Solução
Mental
Experimental

LIPOSSOMAS - PROCESSOS
• Simples
• Reprodutível
• Escalonável
• Controle tamanho lipossomas
• Boa relação custo/eficácia e custo/benefício
Produto estável e homogêneo

LIPOSSOMAS - DESAFIOS
Problemas: “Triple S”
. “Sterility”’
. “Stability”
. “Scale-Up”
Contornados através de
Novos Equipamentos
e Processos – Análise
Rigorosa caso a caso

1 o RELATO DO USO LIPOSSOMAS
P/ TRATAMENTO
• Paciente com Doença de Gaucher: deficiência em
glucocerebrosidase lisossomal hepatoesplenomegalia
• Administração glucocerebrosidase lipossomal através de injeções
iv por 13 meses em paciente esplenectomizado
• Redução tamanho fígado; melhora função RES
• Administração por 5 anos: estabilização do tamanho fígado e da
saúde em geral
Gregoriadis et al., The Lancet (1977) 116–117

LIPOSSOMAS COMERCIAIS
Conhecimento de 1 os humanos tratados com
lipossomas comerciais (injetável)
Daunoxome e Ambisome
Doxil

LIPOSSOMAS COMERCIAIS
Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação
Anfotericina B / Ambisome
Doxorrubicina / Doxil (USA) e
Caelyx (outros países)
Infecção Fúngica;
Leishmaniose
Sarcoma de Kaposi
Câncer de Ovário
Câncer de Mama
1990 (Europa); 1997
2000
1995
1999
1999 (EUA) 2003
Daunorrubicina / Daunoxome Sarcoma de Kaposi 1996
Citarabina (Cytosine
Arabinoside) / DepoCyt
Meningite Linfomatosa
Meningite Neoplásica
1999
Fase IV

LIPOSSOMAS COMERCIAIS
Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação
Doxorrubicina / Myocet Câncer Mama Metástico 2000 (Europa)
Degeneração Macular
Verteporfina / Visudyne Miopia Patológica
Histoplasmose Ocular
Sulfato de Morfina / DepoDur
Dor Pós-Cirúrgica
(epidural)
2000
2001
2004

LIPOSSOMAS – FASE III/IV
Ativo Indicação Fase Clínica
Cisplatina Câncer de Pulmão Fase III
Citarabina (Cytosine
Arabinoside)
Meningite Neoplásica Fase IV
Lurtotecan Câncer de Ovário Fase III

LIPOSSOMAS – FASE I/II
Ativo Indicação Fase Clínica
Vincristine Linfoma Não-Hodgin Fase II
Paclitaxel Tumor Sólido Avançado Fase I/II
Aroplatina Câncer Fase I/II
Atra – IV
Interleukina 2
Linfoma Células-T
Não-Hodgin
Estimulante Imunológico
usado com Vacina Câncer
Pulmão
Fase II
Fase II
Prostraglandina E-1 Doença Arterial Periférica Fase II

LIPOSSOMAS – FASE I/II
Ativo Indicação Fase Clínica
Mitoxantrona Câncer Avançado Fase I/II
Cisplatina (Stealth) Câncer Avançado Fase I/II
Oxaliplatina Câncer Colo Retal Fase II
Topotecan Câncer Avançado Fase I/II
Paclitaxel
Paclitaxel
Câncer Pulmão, Mama e
Ovário
Câncer Próstata e
Pâncreas
Fase I/II
Fase II
Vinorelbina Câncer Avançado Fase I

LIPOSSOMAS CONVENCIONAIS
Direcionamento Passivo – Sistema Imunológico

LIPOSSOMAS CONVENCIONAIS

AMBISOME ®
Anfotericina B Lipossomal – 50 mg/frasco
• Administração iv
• Pó Liófilo
• Após reconstituição com água: dispersão lipossomal amarela e
translucente
• Excipientes: HSPC, DSPG, Colesterol, Sacarose, Succinato
Dissódico Hexahidratado, Alfa-Tocoferol
• pH 5,5

AMBISOME ®
• Utilizado em pacientes com intolerância à terapia com Anf B
convencional ou em: idosos, pacientes com AIDS, em tratamento
quimioterápico
• Diminui toxicidade
• Não diminui eficácia fármaco contra o fungo

DAUNOXOME ®
Daunorrubicina Lipossomal – 50 mg, 2 mg/mL
• Sarcoma de Kaposi em estado avançado - HIV
• Administração iv
• Dispersão Lipossomal vermelha e translucente – SUV, D médio 45 nm
• Excipientes: DSPC, Colesterol, Sacarose, Glicina, Cloreto de Cálcio
• pH 4,9 – 6,0

DEPOCYT ®
Citarabina Lipossomal – 50 mg/ frasco (5 mL)
• Meningite Linfomatosa
• Administração Intratecal (normal/e a cd 2 semanas: 82 h)
• MVV: Suspensão Branca Estéril
• Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína
• pH: 5,5 – 8,5
Vesículas não concêntricas, cada uma
com um cerne aquoso interno que
encapsula a solução com o ativo,
circundada por uma bicamada lipídica.

DEPODUR ®
Sulfato de Morfina Lipossomal – 10 mg/mL (2 mL)
• Dor Pós-Cirurgia
• Dor Pós-Cirurgia
• Liberação prolongada por 48 horas
• Administração Epidural
• MVV: Suspensão Branca Estéril
• Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína e Tricaprilina
• pH: 5,0 – 8,0

VISUDYNE ®
Verteporfina Pó Liófilo – 15 mg / frasco
• Degeneração Macular, Miopia Patológica, Histoplasmose Ocular
• Administração iv
• Verteporfina é ativada por luz: mistura 1:1 de 2 isômeros (I e II)
• Terapia fotodinâmica: Laser de baixa energia
• Liofilizado verde escuro
• Após reconstituição com 7 mL de água: 2 mg/mL (7,5 mL)
• Excipientes: DMPC, EPG, Ascorbil Palmitato, Hidroxitolueno Butilado,
Lactose

LIPOSSOMAS STEALTH

LIPOSSOMAS STEALTH

DOXIL ®
Doxorrubicina Lipossomal – 2 mg/mL
• Sarcoma de Kaposi, Câncer de Ovário e de Mama
• Administração iv (normalmente a cd 4 semanas)
• Lipossomas “Stealth”: Liberação prolongada (metoxiPEG) – 55 h
• Dispersão lipossomal estéril vermelha translucente (SUV)
• + 90% Doxorrubicina encapsulada
• Excipientes: HSPC, DSPE-MPEG, Colesterol, Sulfato de Amônia,
Histidina, Sacarose
• pH 6,5

LIPOSSOMAS ELÁSTICOS

FLEX POWER ®
Salicilato de Trolamina 10%
• Tecnologia Flex-
• Tecnologia Flex-
Somes
• Usado p/ artrite,
tendinite e dor nas
costas, ombros,
pescoço, joelho,
tornozelo...

VIROSSOMAS
www.crucell.com

Vacina Hepatite A
EPAXAL ®
• Primeiro produto baseado na Tecnologia Virossomas
• Sem alumínio: maior tolerabilidade
• Induz a formação de anticorpos nos 10 primeiros dias
• Após segunda dose: proteção por 20 anos
• Registro em + de 40 países
• Em 2008 lançamento Epaxal Junior

Vacina Influenza
INFLEXAL ®
• Tecnologia Virossomas
• Introduzida em 1997
• Registro em 43 países
• Única vacina que pode ser usada para todas faixas etárias (a
partir 6 meses)

LIPOSSOMAS CATIÔNICOS
CATIÔNICOS
Aplicações:
Médico-farmacêuticas
(vacina- terapia gênica)

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Lipossoma
Catiônico
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Lipossoma
Catiônico
LIPOSSOMAS / DNA
Desidratação
Rehidratação controlada +
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DNA
Plasmídeo
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Lipossomas
Catiônicos
Multilamelares
Rosada, Torre et al., 2008
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DNA
plasmídeo
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Rehidratação controlada
Complexação
Eletrostática
Condições
-Desidratação
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Lipossoma catiônico
encapsulando DNA
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controladas+
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Complexo
DNA/Lipossoma
Catiônico
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(600 nm)
(250 nm)

• Lipossomas Polimerizados:
administração oral
LIPOSSOMAS
Perspectivas Futuras
• Lipossomas Magnéticos: direciona/o
por campo magnético

LIPOSSOMAS
Perspectivas Futuras
• Lipossomas com
microbolhas + ultrassom:
- potencial p/ tratamento trombose
- potencial p/ entrega ativos
• Lipossomas com
microbolhas + temperatura:
potencial p/ tratamento
não-invasivo tumor cérebro

LIPOSSOMAS
Terapia Gênica:
Introdução de material genético exógeno nas células alvo
com o objetivo de corrigir ou eliminar a nível molecular as
causas de patologias que envolvam fatores genéticos
Cura completa após única administração e sem
efeitos adversos
small interfering RNA
Uso Lipossomas como Vetor
Catiônicos Sensíveis ao pH