Revista Periodontia dez 2011 - 2ª REV - 09-12-11 ... - Revista Sobrape

Braz J Periodontol - December 2011 - volume 21 - issue 04
AVALIAÇÃO DA FUNÇÃO HEPÁTICA DE RATAS DA
LINHAGEM LEWIS FRENTE A INGESTÃO DE ÁLCOOL
ASSOCIADA A PERIODONTITE INDUZIDA POR LIGADURA
Evaluation of liver function in wistarfemale lewis ahead of alcohol intake associated with ligatureinduced
periodontitis
Alessandra Nogueira Porto 1 , Tereza Delle Vedove Semenoff 1 , Fábio Luiz Miranda Pedro 1 , Álvaro Henrique Borges 1 , Christiane
Lima 2 , Alex Semenoff Segundo 1 .
1
Professor(a) Dr.(a) do Curso de Pós-Graduação da Universidade de Cuiabá – UNIC - MT.
2
Cirurgiã-dentista – Centro Universitário de Várzea Grande – UNIVAG - MT.
Recebimento: 28/05/11 - Correção: 25/07/11 - Aceite: 01/11/11
RESUMO
Objetivo: o presente estudo tem por objetivo avaliar a função hepática frente à ingestão de álcool associado com
a periodontite induzida por ligadura em ratas Lewis.
Materiais e Métodos: os 24 animais foram divididos nos grupos: álcool+ligadura-GA (n=8), ligadura-GL (n=8) e
controle negativo -GCN (n=8). Para a análise dos resultados foram adotados os parâmetros bioquímicos – aspartato
aminotransferase (AST\TGO) e transaminase glutâmica pirúvica (ALT\TGP). Os animais foram submetidos à ingestão de
solução alcoólica a 20%, ao longo de um período de 60 dias. Para o procedimento de indução da doença periodontal,
os animais do GA e GL receberam anestesia geral.
Resultados: os resultados do trabalho demonstraram ausência de diferença estatística (p>0,05) para as variáveis
AST\TGO e ALT\TGP paras os grupos GA, GL e GCN.
Conclusão: conclui-se que a ingestão de álcool na dosagem praticada, associado à periodontite induzida por
ligadura não modificou os exames de bioquímica AST\TGO e ALT\TGP em ratas Lewis.
UNITERMOS: alcoolismo, ratos endogâmicos Lewis, periodontite induzida. R Periodontia 2011; 21:76-79.
INTRODUÇÃO
A periodontite é uma doença multifatorial causada pela
presença de bactérias e seus produtos, associada à resposta
inflamatória das células de defesa do hospedeiro. 1
Existem vários fatores que podem influenciar a
progressão da doença periodontal, incluindo fatores
individuais, comportamentais, sistêmicos e genéticos.
Os fatores comportamentais incluem o fumo, fator sócio
econômico, nutricional, psicológico e consumo excessivo
de álcool. 2
O consumo do álcool na sociedade atual se tornou um
problema de Saúde Pública, pois é amplamente difundido na
população (40-50%), sendo que 10% dos homens e 3-5%
das mulheres se tornam alcoólatras. 3
O consumo excessivo e constante do álcool pode afetar
a defesa do hospedeiro causando infecções por bactérias
e aumentando a vulnerabilidade do hospedeiro. O efeito
sistêmico do álcool inclui a má nutrição, doenças hepáticas,
anemia, hipoglicemias entre outros. 4-5
Existem estudos que fazem ligação entre o uso abusivo
do álcool com as doenças que afetam o periodonto. 6-7
Apesar de ainda não existir uma ligação forte a exemplo
do uso do tabaco 8 e do desenvolvimento da diabetes 9 ,
a condução de estudos com modelos animais podem
auxiliar na elucidação de questões relacionadas aos efeitos
da ingestão de álcool associada à indução de doença
periodontal.
A alanina aminotransferase (ALT), também conhecida
como transaminase glutâmico pirúvica (TGP), é uma
enzima transaminase. A ALT é encontrada no plasma e em
vários tecidos corpóreos, mas é geralmente associada ao
fígado. Estas enzimas são liberadas no sangue em grandes
quantidades quando há dano à membrana do hepatócito,
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resultando em aumento da permeabilidade. Assim, a elevação
absoluta das aminotransferases tem grande significado
diagnóstico nas hepatopatias agudas. 10
O teste ALT geralmente é feito junto com outros
testes que verificam danos no fígado, incluindo aspartato
aminotransferase (AST), fosfatase alcalina, lactato
desidrogenase (LDH) e bilirrubina. Ambos os níveis de ALT
e AST são testes confiáveis para o fígado. TGP e TGO são
indicadores sensíveis de dano hepático em diferentes tipos
de doenças. A causa mais comum de moderadas elevações
destas enzimas é o fígado gorduroso (esteatose) e a causa
mais freqüente de fígado gorduroso é o abuso de álcool. 10
Diante desse contexto, o presente trabalho tem por
objetivo avaliar a função hepática através dos testes AST/TGO
e ALT/TGP frente à ingestão de álcool associado à periodontite
induzida por ligadura em ratas Lewis.
MATERIAIS E MÉTODOS
Neste estudo foram utilizadas 24 ratas da linhagem
Lewis, com dois meses de idade. As mesmas passaram por
uma adaptação ao novo ambiente durante uma semana,
os animais foram mantidos em caixas moradia (polietileno
16x40x30) em número de quatro, com ração padronizada
e água ad libitum, sob ciclo claro/escuro de 12 horas,
temperatura controlada a 24° C e umidade + 50%. O
experimento foi aprovado e registrado pela Comissão de
Ética na experimentação animal, com número de protocolo
CEP/UNIC 0307/32.
Grupos Experimentais
Inicialmente, os animais foram divididos aleatoriamente
(por auxiliar técnico) em 3 grupos experimentais, descritos a
seguir:
Grupo GA: álcool+ ligadura (n=8),
Grupo GL: ligadura (n=8),
Grupo GCN: controle negativo (n=8).
Durante todo o experimento os animais do grupo GA
foram expostos a ingestão de álcool a 20% (v/v), portanto
não recebendo em nenhum momento água ad libitum. No
dia seguinte ao início do experimento, os animais do grupo
GA e do grupo GL, passaram pelo processo de indução
de doença periodontal experimental, receberam anestesia
geral através da administração intramuscular de 0,1 mL de
cloridrato de quetamina (Dopalen, Agribrands. Saúde Animal,
Paulínia, SP, Brasil) associado a 0,05 mL de cloridrato de
xylazina (Rompun, Bayer. Saúde Animal, São Paulo, SP. Brasil)
por cada 100 gramas de peso corporal. Após anestesia, um
fio de sutura estéril número 4 (Ethicon, Johnson e Johnson,
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São Paulo, Brasil) foi inserido no sulco gengival do segundo
molar superior direito. Foram realizados cortes histológicos
seguindo o longo eixo dos dentes no sentido mesio-distal,
que possibilitou constatar que a metodologia proposta para
desenvolvimento da doença periodontal foi eficiente.
Os animais do grupo GCN não receberam nenhum tipo
de intervenção, mas foram mantidos juntos em caixa moradia
durante todo o experimento.
Após 60 dias foi realizada a eutanásia dos animais por
excesso de anestésico, em ato contínuo incisou-se a pele e
barreira abdominal para obter acesso à cavidade abdominal.
Os órgãos internos foram deslocados, de modo a possibilitar
a visualização da veia cava posterior. Coletou-se o sangue
por punção da veia com agulha 25x7 (sistema Vacutainer -
Becton Dickinson, Plymouth, UK) em tubos de cinco mL com
o anticoagulante EDTA - ácido etileno diaminotetracético -
homogeneizando-se cuidadosamente a amostra. Depois da
centrifugação do plasma sanguíneo a 3000 RPM, durante
10 minutos, analisou-se o AST\TGO - mg/dL - e ALT\TGP -
mg/dL. Para a dosagem dos exames utilizou-se o método
fotocolorimétrico por espectrofotômetro (Femto 700S, São
Paulo, SP) sendo feita a calibração do equipamento com
solução padrão - Bioclin – Quibasa, Belo Horizonte, MG,
Brasil. Houve um treinamento prévio desde a coleta do sangue
até o processamento bioquímico das amostras.
Salienta-se que os animais do GCN foram utilizados
como referência para efeitos de comparação de resultados.
O teste estatístico escolhido foi Análise de Variância
(ANOVA) de uma via com análise Pós-Hoc (teste de
Bonferroni). O erro alfa estabelecido para essa análise foi de
5%.
RESULTADOS
Os resultados do estudo demonstraram uma ausência
de diferenças estatísticas entre os grupos envolvidos (GA, GL,
GCN) para os parâmetros bioquímicos AST\TGO mg/dL e
ALT\TGP mg/dL (p>0,05), conforme apresentado na Tabela
1. Durante o processamento bioquímico uma amostra do
grupo GL AST/TGO foi perdida.
DISCUSSÃO
A relação entre o álcool como um fator de risco à doença
periodontal vem sendo estudada recentemente. Em trabalhos
observacionais verificou-se a relação positiva entre estas duas
patologias 4-11 , contudo mesmo em uma revisão sistematizada
sobre o assunto, observa-se a necessidade de um cuidado
na ligação entre as duas doenças, além da necessidade da
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Tabela 1
Média e desvio padrão da concentração sanguínea de AST/TGO e ALS/TGP
Grupos N Média ± p
GL 8 57,75 18,63 0,201
AST/TGO GA 8 47,41 5,63 0,453
GCN 8 50,63 5,14 0,845
GL 7 137,04 63,30 0,984
ALS/TGP GA 8 131,38 49,18 0,767
GCN 8 160,2 76,42 0,646
Teste estatístico de Bonferroni e Bonferroni p 0.05) for the variables AST \ AST and ALT \ TGP paras the
GA, GL and GCN.
Conclusion: We conclude that alcohol intake at a dose
practiced, associated with ligature-induced periodontitis did
not modify the biochemical tests AST \ AST and ALT \ TGP
Lewis in rats.
UNITERMS: alcoholism, inbred lewis rats, ligature induced
periodontitis.
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Endereço para correspondência:
Alessandra Nogueira Porto
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