Histologia Básica, Texto e Atlas - 12ª Edição - Junqueira & Carneiro

1 1 Métodos de Estudo em Histologia
cificamente a componentes das células e dos tecidos, tornando
possível assim a identificação desses componentes
por meio da fluorescência que eles irão emüir {ver, mais
adiante, seção Detecção de moléculas em cortes lristológicos
por meio de interações moleculares de alta afinidade).
""' Microscopia eletrônica
As microscopias eletrônicas de transmissão e de varredura
se baseiam na interação entre elétrons e componentes
dos tecidos.
• Microscopia eletrônica de transmissão
O microscópio eletrônico de transmissão (Figura l.7)
é um sistema de produção de imagens que teoricamente
possibilita altíssima resolução (O, 1 nm). Na prática, porém,
a resolução obtida pela maioria dos bons instrwnentos se
situa em torno de 3 nm, resolução que torna possível que
espécimes ampliados até cerca de 400 mil vezes sejam vistos
com detalhes. Infelizmente, este grande nível de ampliação
só pode ser usado para analisar partkulas ou moléculas
isoladas, pois cortes delgados de cél ulas e tecidos podem
ser observados com detalhes em aumentos de até cerca de
120 mil vezes.
' Para saber mais
Funcionamento do miaoscópio eletrônico
de transmissão
O funcionamento deste microscópio se baseia no seguinte princípio:
elétrons podem ser desviados por campos eletromagnéticos de maneira
semelhante ao desvio produzido na luz por lentes de vidro (refração).
Elétrons são liberados pelo aquecimento de um delicado filamento metálico
(chamado catodo, geralmente feito de tungstênio) em vácuo. Os
elétrons libertados no catodo são submetidos a uma diferença de voltagem
de 60 a 120 kV existente entre o catodo e o anodo, que é um prato
metálico com um orifício no centro (Rgura 1
.8). Dessa maneira. os elétrons
são atraídos pelo anodo e acelerados, alcançando altas 'll!locidades. Após
pa.ssarem pelo orificio do anodo, eles formam um feixe de elétrons que
percorre o tubo do microscópio. No tubo, o feixe de elétrons passa pelo
interior de bobinas elétricas que produzem um campo magnético e é
desviado de maneira análoga ao que acontece com um feixe luminoso em
lentes de vidro. Pur essa razão, as bobinas dos microscópios eletrônicos são
chamadas de lentes eletromagnéticas.
'
(.~.
Figura 1.7 Microscópio eletrônico de transmissão 906E. (Cortesia de Carl Zeiss.)
trons sejam captados por um detector para se observar uma
imagem. Esse detector pode ser uma placa fluorescente, um
negativo fotográfico ou uma câmera CCD. Como a imagem
no microscópio eletrônico de transmissão é produzida pelo
balanço da quantidade de elétrons que alcançaram o detector
e elétrons que foram retidos no tubo do microscópio, a ima-
Anodo
Bobina elétrica
3mm
Malha @' o . ••
de cobre
com três o
cortes O
........
Lente objetiva
1
•
Canhão
eletrônico
+--- Coluna
Porta-espécime
Janela de
vidro
A configuração do microscópio eletrônico é muito semelhante
à do microscópio de luz, embora geralmente o trajeto
dos elétrons ocorra de cima para baixo (Figura l.8). A
primeira lente é uma condensadora que focaliza o feixe de
elétrons no espécime. Ao atravessar o corte, alguns elétrons
interagem com átomos do espécime e continuam seus tra·
jetos em direção às outras lentes, enquanto outros elétrons
simplesmente cruzam o corte sem interagir com ele. Dos elétrons
que alcançam a lente objetiva, forma-se uma imagem
aumentada do objeto, a qual é projetada nas outras lentes
que, por sua vez, aumentam a imagem ainda mais. Como
nossa retina não é sensível a elétrons, é necessário que os elé-
Placa lluorescente-~-tt~
Filme fotográfico-----i~~~
Câmera CCD-------e:::::!9
Figura 1.8 Desenho esquemático de um microscópio elellônico de transmissão com
seus principais componentes.