12.07.2015 Views

Immunoglobulin

Immunoglobulin

Immunoglobulin

SHOW MORE
SHOW LESS
  • No tags were found...

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

elativt kort livslängd, med en snabbt växande cancer cell. Resultatet blir en hybridcell somförökar sig snabbt och skapar en klon som producerar den antikropp man vill åt, i storakvantiteter. Monoklona antikroppar används ofta i laboratorium och i medicinska tester då deminskar bieffekterna som kan uppstå om man använder sig av polyklona antikroppar som ärantikroppar producerade av olika B-celler och är därmed olika i sin struktur. [1]Varje B-cell producerar antikroppar som är specifika, inte till en antigen utan till ett epitopsom är en liten del på detta antigen där antikroppen binder. Polyklona antikroppar binder tillmånga epitoper på ett antigen, medan monoklona enbart binder till en enda epitop. Nackdelenmed att använda monoklona antikroppar är att när man preparerar antikroppar kan vissabindningsförmågor blir fördärvade, om de monoklona antikropparna som man jobbar med ärkänsliga för detta kan de lätt bli oanvändbara då de bara binder till en epitop. Om man arbetarmed polyklona antikroppar kommer de fortfarande att vara användbara även om vissaepitopbindningstyper försvinner. [1]ELISAAnvänds för att undersöka om en viss substans är närvarande i ett prov. ELISAgår till på så sätt att man har ett enzym, som reagerar med ett färglöst substratför att bilda en färgad produkt, som är kovalent bunden till en specifikantikropp som känner igen antigenet man vill ha tag på. Om antigenet ärnärvarande i lösningen binder antikropp-enzym komplexet antigenen ochkatalyserar reaktionen som ger den färgade produkten. Närvaron av denfärgade produkten indikerar på närvaron av antigenen. Detta är ett snabbt ochlättanvändligt sätt att detektera olika substanser. Ett ELISA test kan upptäckaen substans även om mängden av det är mindre än ett nanogram (10 -9 g). IELISA kan man använda sig av både monoklona och polyklona antikroppar,men monoklona ger ett mer tillförlitligt resultat. ELISA test används vidundersökning om man har en HIV infektion i blodet.[5]Western Blot Används då man vill hitta ett protein som finns i liten mängd i en lösninginnehållande en massa andra proteiner, t.ex. i blodet. Western Blot går till på såsätt att man först applicerar provet på en SDS-polyacrylamid gel, sedan”blottar” man genom att överföra de denaturerade proteinerna till enpolymerplatta som gör proteinerna mer tillgängliga för antikroppen somspecifikt binder det protein man vill ha tag på. Antikropp-antigen komplexetidentifieras genom att tvätta plattan med en annan antikropp som känner igenden första antikroppen (t.ex. en antikropp från ett annan djur). Ett radioaktivtmärke på den andra antikroppen frambringar ett mörkt streck vid röntgenstrålning. Alternativt är den andra antikroppen bundet till ett enzym som ger enfärgad produkt (som ELISA test). Western Blotting gör det möjligt att hitta ettprotein i en komplex blandning och används t.ex. vid test för hepatit C. [5]

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!