Ćwiczenie 2: Wpływ czynników fizyko-chemicznych na mikroorganizmy

5. Skuteczność działania wybranych środków dezynfekcyjnych na bakterie Escherichia coli
i Serratia marcescens
środki dezynfekcyjne: 3% woda utleniona, 70% alkohol, 96 % alkohol, 2% sterinol, 1,5%
chloramina, 40% formalina
Studenci pracują w dwóch grupach: jedna bada wpływ środków dezynfekcyjnych na bakterie E.
coli, a druga na S. marcescens
a) na płytkę z podłożem LB wysiewamy murawą 0.1 ml hodowli bakteryjnej
b) krążek bibułowy nasączamy środkiem dezynfekcyjnym, a następnie posługując się pensetą
umieszczamy go na płytce. Na płytce należy ułożyć sześć krążków (odległość pomiędzy
poszczególnymi krążkami powinna wynosić nie mniej niż 2 cm)
c) płytki inkubujemy 24 godziny w temperaturze 30 (S. marcescens) i 37°C (E. coli)
d) określić w mm średnicę strefy zahamowania wzrostu bakterii wokół krążków i porównać
wrażliwość obu badanych gatunków bakterii na różne środki dezynfekcyjne.
Zagadnienia teoretyczne.
Metody sterylizacji. Mechanizm działania podwyższonej temperatury, promieniowania UV i promieniowania
jonizującego. Pojęcia: czas i punkt śmierci cieplnej. Dezynfekcja – przykłady środków dezynfekcyjnych i
sposób ich działania. Współczynnik fenolowy. Przykłady zastosowanie dezynfekcji. Czynniki
fizykochemiczne wpływające na wzrost mikroorganizmów. Pojęcia: czynnika ograniczającego, punkty
kardynalne (minimum, optimum, maksimum), czas śmierci cieplnej, punkt śmierci cieplnej. Warunki wzrostu
(stężenie jonów wodorowych, zakresy pH tolerowane lub preferowane przez mikroorganizmy (acidofile,
neutrofile, alkalifile), wpływ CO2, zawartość wody i ciśnienie osmotyczne, temperatura; napowietrzanie)