Klinický význam protilátek proti C1q složce komplementu
Klinický význam protilátek proti C1q složce komplementu
Klinický význam protilátek proti C1q složce komplementu
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<strong>Klinický</strong> <strong>význam</strong> <strong><strong>proti</strong>látek</strong><br />
<strong>proti</strong> <strong>C1q</strong> <strong>složce</strong> <strong>komplementu</strong><br />
Eliška Potluková<br />
3. Interní klinika VFN a 1. LF UK
1. Úvod<br />
1. <strong>C1q</strong>, <strong>C1q</strong> a apoptóza, <strong>C1q</strong> u SLE<br />
2. Anti-<strong>C1q</strong>, patogenita anti-<strong>C1q</strong><br />
3. Stanovení anti-<strong>C1q</strong><br />
2. Prevalence anti-<strong>C1q</strong> u různých<br />
onemocnění<br />
3. Anti-<strong>C1q</strong> u SLE<br />
4. Anti-<strong>C1q</strong> u AITD<br />
5. Závěr
klasická klasick cesta lektinová lektinov cesta alternativní alternativn cesta<br />
komplex antigen/<strong>proti</strong>látka<br />
antigen/<strong>proti</strong>l tka MBL aktivační aktiva povrch<br />
<strong>C1q</strong>,r,s <strong>C1q</strong>,r,s<br />
C4 + B<br />
C2 amplifika amplifikační<br />
P<br />
smy myčka ka D<br />
C3-konvert C3 konvertáza za<br />
aktivace C3<br />
vazba C3b na mikrob. povrch nebo imunokomplex<br />
C5-konvert C5 konvertáza za<br />
C5a<br />
vznik termináln termin lního ho lytického lytick o komplexu<br />
C5b-C6 C5b C6-C7 C7-C8 C8-C9 C9<br />
osmotická osmotick lýza ýza buňky bu ky
Biologické Biologick funkce <strong>komplementu</strong><br />
1. Opsonizace a fagocytóza fagocyt za<br />
2. Čištění organismu od imunokomplexů<br />
imunokomplex<br />
3. Indukce zánětu z tu anafylatoxiny stimulace žírných rných<br />
buněk bun k a neutrofilů neutrofil<br />
4. Buněč Buněčná<br />
lýza mikrobů, mikrob , zvláš zvláště<br />
opouzdřených<br />
opouzd ených<br />
5. Zesílen Zes lení specifické specifick imunitní imunitn odpovědi odpov di
C1 - komplex<br />
<strong>C1q</strong><br />
C1s<br />
• <strong>C1q</strong>, C1r, C1s<br />
• <strong>C1q</strong> velký glykoprotein, 410 kD,<br />
hexamer, globulární hlavice navázané<br />
na kolagenovitou část (trojitá<br />
šroubovice)<br />
• <strong>C1q</strong> se váže na C H2 domény IgG nebo<br />
C H3 domény IgM v imunokomplexech<br />
• C1r a C1s jsou proteázy<br />
C1r
<strong>C1q</strong> se globulární částí váže specificky na Fc<br />
oblast těžkých řetězců µa γ<br />
• Každá Fc oblast má jen jedno vazebné místo<br />
pro <strong>C1q</strong><br />
• Jedna molekula <strong>C1q</strong> se musí vázat na dva těžké<br />
řetězce Ig, aby byla aktivována <strong>C1q</strong> aktivují<br />
jen imunokomplexy navázané na multivalentní<br />
antigeny, ne volné Ab<br />
• IgM může vázat více molekul <strong>C1q</strong> = efektivnější<br />
„komplement-fixující“ <strong>proti</strong>látka než IgG
Funkce <strong>C1q</strong><br />
• Aktivace klasické cesty <strong>komplementu</strong><br />
• Úklid apoptotických tělísek, nekrotických částic a<br />
imunokomplexů z organismu – fagocytóza makrofágy<br />
• Spolu s dalšími specif. proteiny se váže na lupusové<br />
antigeny (dsDNA a nukleární proteiny) a aktivuje<br />
komplement. Tyto komplexy poté podporují rozpoznání a<br />
interakce autoreaktivních B-lymfocytů s buňkami kostní<br />
dřeně Botto, Walport, Immunobiol 2002<br />
• Hraje roli v aktivaci a proliferaci T-lymfocytů, které<br />
exprimují <strong>C1q</strong>-receptor. <strong>C1q</strong> má antiproliferativní účinek<br />
Chen, J Immunol 1994
• <strong>C1q</strong> se specificky váže na apoptotická tělíska (Korb, J Immunol<br />
1997; Navratil,J Immunol 2001; Gaipl, Cell Death Differentiation 2001)<br />
• <strong>C1q</strong>-deficientní myši mají zvýšené množství apoptotických<br />
buněk v ledvinách (Botto, Nature Genetics 1998)<br />
• Makrofágy <strong>C1q</strong>-deficientních myší a lidí mají sníženou<br />
schopnost odstraňovat apoptotická tělíska in vitro (Taylor, J<br />
Exp Med 2000)<br />
• Odstraňování apoptotických buněk je zřejmě zprostředkováno<br />
<strong>C1q</strong> (Mevorach, J Exp Med 1998; Ogden J Exp Med 2001) a<br />
vázaným C3 (Mevorach, J Exp Med 1998)<br />
• <strong>C1q</strong>-deficience urychluje autoimunitní procesy u myší<br />
(Mitchell, J Immunol 2002)<br />
<strong>C1q</strong> a apoptóza
Buňka<br />
Apoptóza a <strong>C1q</strong><br />
Apoptóza<br />
<strong>C1q</strong><br />
Apoptotické tělísko<br />
- fosfolipidy<br />
- nukleoproteiny<br />
- dsDNA<br />
- spojující molekuly<br />
(<strong>C1q</strong>, lektiny, β2-GPI...)<br />
Makrofág<br />
Receptory
<strong>C1q</strong><br />
Fosfatidylserin, kardiolipin, jiné<br />
Přímá vazba na<br />
receptory<br />
Kontrolovaná aktivace<br />
<strong>komplementu</strong><br />
CR1 ? <strong>C1q</strong>Rp ? Calreticulin-CD91<br />
Makrofág<br />
Spojující molekuly<br />
DAF ↓<br />
MCP ↓<br />
CD59<br />
Vazba CRP
<strong>C1q</strong> v etiopatogenezi SLE - hypotéza<br />
Nedostatek <strong>C1q</strong> může vyvolat:<br />
– Defektní clearance apoptotických tělísek a<br />
nukleárních autoantigenů<br />
– Defektní clearance imunokomplexů<br />
– Únik autoreaktivních B-lymfocytů z negativní<br />
selekce<br />
<strong>C1q</strong> u SLE nefritidy: Pozitivně nabitá<br />
molekula <strong>C1q</strong> se váže na negativně nabitou<br />
GBMtvorba <strong>C1q</strong>/anti-<strong>C1q</strong> IC in situ,<br />
aktivace <strong>komplementu</strong>
Anti-<strong>C1q</strong> Anti <strong>C1q</strong> <strong>proti</strong>látky <strong>proti</strong>l tky<br />
Vysokoafinitní Vysokoafinitn <strong>proti</strong>látky <strong>proti</strong>l tky (IgG ( IgG a IgA) IgA)<br />
rozpoznávaj<br />
rozpozn vající kolagenovitou část st <strong>C1q</strong><br />
1971: první prvn zpráva zpr va o monomerní monomern vazbě vazb IgG na<br />
<strong>C1q</strong> u nemocných s hypokomplementémi<br />
hypokomplement mií<br />
(Agnello Agnello, , Clin Immunol Immunopathol 1971)<br />
1978: precipitace <strong>C1q</strong> monomerním monomern IgG u<br />
nemocných s HUVS<br />
1984: nález n lez anti-<strong>C1q</strong> anti <strong>C1q</strong> u SLE (Uwatoko Uwatoko, , Clin<br />
Immunopathol 1984)<br />
Clin Immunol
Patogenita anti-<strong>C1q</strong><br />
- Vazba anti-<strong>C1q</strong> anti <strong>C1q</strong> na <strong>C1q</strong> v tekuté tekut fázi zi velmi slabá, slab ,<br />
ale dosáhne dos hne vysoké vysok afinity v případ p padě konformační<br />
konforma<br />
změny zm ny <strong>C1q</strong> ve vázan v zaném m stavu<br />
Patogenn Patogenní efekt anti-<strong>C1q</strong> anti <strong>C1q</strong> jen lokáln lok lně ve tkáních tk ch<br />
(ledviny)<br />
- Anti-<strong>C1q</strong> Anti <strong>C1q</strong> samy o sobě sob neaktivují neaktivuj komplement.<br />
Vazba na <strong>C1q</strong> však v ak ke zvýšen zvý ené aktivaci vést v st můž může<br />
e<br />
(↑ vazbu IgG, IgG,<br />
↑ produkci C3b …circulus circulus vitiosus) vitiosus<br />
- ↓ koncentrace <strong>C1q</strong> ↑ produkce ANA, anti-<br />
dsDNA<br />
- Negativní Negativn korelace s <strong>C1q</strong> antigenem a C4 v séru s ru
• Experimentální aplikace myších mAb <strong>proti</strong><br />
<strong>C1q</strong> způsobila komplementem<br />
zprostředkované poškození glomerulů u těch<br />
myší, které měly zvýšenou akumulaci <strong>C1q</strong> v<br />
glomerulu v důsledku uložených IC tvořených<br />
Ab <strong>proti</strong> glomerulárním antigenům<br />
Trouw et al., J Clin Invest 2004
Stanovení anti-<strong>C1q</strong><br />
• 70. léta: RIA – vazba IC a 7S reaktantů (později<br />
identifikovaných jako anti-<strong>C1q</strong> Ab) na <strong>C1q</strong>, který<br />
je fixován na solidní fázi<br />
• ELISA – stanovení anti-<strong>C1q</strong> pomocí buď celého<br />
<strong>C1q</strong>, nebo jeho kolagenní části<br />
(CIC se stanovují s pomocí globulární části<br />
molekuly <strong>C1q</strong>)<br />
• Jak zamezit interferenci s IC při stanovení anti-<br />
<strong>C1q</strong>?<br />
NaCl v inkubačním médiu >0,15 M
Komerčně dostupné ELISA kity<br />
• Bühlmann Lab. AG (Switzerland)<br />
• Orgentec<br />
– U nás v zastoupení firma Biovendor<br />
– Cut-off 15 U/ml (získaný z analýzy dat<br />
220 dárců krve)<br />
– Dražší, osvědčený<br />
–Cut-off 10 U/ml<br />
–Levnější
Prevalence anti-<strong>C1q</strong> anti <strong>C1q</strong> u systémových<br />
syst mových autoimunit<br />
Hypokomplementemická urtikariální vaskulitida<br />
Smíšené onemocnění pojiva (MCTD)<br />
100%<br />
94%<br />
SLE – v závislosti na přítomnosti nefritidy 20-98%<br />
Feltyho syndrom 76%<br />
Polyarteritis nodosa 27%<br />
Temporální arteritis 0%<br />
Revmatoidní artritida<br />
Revmatoidní vaskulitida<br />
Sjögrenův syndrom<br />
Běchtěrevova nemoc<br />
Systémová skleróza<br />
0-4%<br />
32%<br />
13%<br />
8%<br />
0-13%
Prevalence anti-<strong>C1q</strong> u nefropatií<br />
Membranoproliferativní<br />
glomerulonefritidy<br />
88%<br />
SLE nefritida 83-98%<br />
Jiné proliferativní glomerulonefritidy 0%<br />
Akutní poststreptokoková<br />
glomerulonefritida u dětí<br />
33%<br />
IgA nefropatie 0-13%
Prevalence anti-<strong>C1q</strong> u dalších onemocnění<br />
Dna 10%<br />
Hepatitida C 26%<br />
HIV/AIDS 13%<br />
Chronická lymfocytární<br />
tyreoiditida<br />
Gravesova-Basedowova<br />
tyreotoxikóza<br />
21%<br />
30%
Prevalence anti-<strong>C1q</strong> ve zdravé populaci<br />
Prevalence stoupá s věkem:<br />
40-50 let 4 %<br />
70-80 let 18%<br />
V naší studii: 72 dárců krve - 8%
Anti-<strong>C1q</strong> u SLE nefritidy<br />
Vynikající negativní prediktivní hodnota pro<br />
přítomnost aktivní proliferativní SLE nefritidy<br />
Koncentrace anti-<strong>C1q</strong> se zvýší několik týdnů až 6<br />
měsíců před vznikem aktivní SLE nefritidy<br />
Negativita anti-<strong>C1q</strong> téměř vylučuje vznik nefritidy v<br />
příštích 6 měsících (sensitivita 95%)<br />
Trendelenburg, Arthritis Rheum 1996
Naše studie (Basel, Lausanne, Madrid,<br />
Paříž, Praha):<br />
38 nemocných s aktivní SLE nefritidou, 36<br />
proliferativní typ<br />
Renální biopsie v době odběru anti-<strong>C1q</strong><br />
Trendelenburg , Nephrol Dial Transplant 2006
Koncentrace anti-<strong>C1q</strong> u SLE o<strong>proti</strong> kontrolám
Koncentrace anti-<strong>C1q</strong> <strong><strong>proti</strong>látek</strong> u různých tříd SLE nefritidy
ROC křivka anti-<strong>C1q</strong> <strong><strong>proti</strong>látek</strong> v rozlišení mezi<br />
aktivní a neaktivní/nepřítomnou SLE nefritidou
Pokles koncentrace anti-<strong>C1q</strong> po léčbě
Anti-<strong>C1q</strong> u autoimunitních tyreopatií<br />
První nález zvýšené prevalence anti-<strong>C1q</strong><br />
u orgánově specifického onemocnění<br />
Gravesova-Basedowova tyreotoxikóza: 7/23<br />
(30%) pozitivních<br />
Chronická lymfocytární tyreoiditida:<br />
11/52 (22%) pozitivních<br />
Potluková 2007, submitted
Koncentrace anti-<strong>C1q</strong> u autoimunitních tyreopatií<br />
Anti-<strong>C1q</strong> in U/ml<br />
200<br />
150<br />
100<br />
50<br />
50<br />
40<br />
30<br />
20<br />
10<br />
0<br />
p
Chronická lymf.<br />
tyreoiditida<br />
Gravesova-<br />
Basedowova<br />
tyreotoxikóza<br />
Uzlová přestavba<br />
štítné žlázy<br />
Anti-<strong>C1q</strong> <strong>proti</strong>látky korelují s parametry funkce štítné<br />
žlázy u autoimunitních tyreopatií<br />
TSH FT4 FT3 TPOAb TgAb TRAb<br />
r = 0.29;<br />
P < 0.05<br />
r = -0.43;<br />
P < 0.05<br />
N/s<br />
r = 0.44;<br />
P < 0.05<br />
N/s<br />
(P = 0.08)<br />
r = 0.47;<br />
P < 0.05<br />
N/s<br />
(P = 0.07)<br />
r = 0.36,<br />
P < 0.005<br />
N/s N/s N/s<br />
N/s N/s N/s N/s N/s -<br />
Kontroly N/s N/s N/s N/s N/s -<br />
-
Závěr 1<br />
• Anti-<strong>C1q</strong> <strong>proti</strong>látky jsou klinicky <strong>význam</strong>ným<br />
markerem proliferativní SLE nefritidy, kde mají<br />
i patogenní roli. Jejich nepřítomnost tuto<br />
diagnózu prakticky vylučuje – a to i pro dalších 6<br />
měsíců.<br />
• S léčbou jejich koncentrace klesá.<br />
• Jsou vhodné k monitoringu úspěšnosti<br />
imunosupresivní léčby SLE nefritidy.
Závěr 2<br />
• Anti-<strong>C1q</strong> <strong>proti</strong>látky se vyskytují u řady<br />
systémových autoimunitních a některých<br />
infekčních onemocnění<br />
• Byly nalezeny i u autoimunitních tyreopatií,<br />
u kterých korelují s funkcí štítné žlázy.<br />
• Vyskytují se i u zdravé populace, kde<br />
zřejmě nemají klinický <strong>význam</strong>.
Poděkování<br />
• Marten Trendelenburg, Laboratoř klinické<br />
imunologie, Basilejská univerzita, Švýcarsko<br />
• Petra Šandová, Laboratoř klinické imunologie VFN,<br />
Praha<br />
• Jan Jiskra, Zdeňka Límanová, Daniel Smutek,<br />
3. interní klinika VFN a 1. LF UK<br />
• Eva Jančová, Klinika nefrologie VFN a 1. LF UK<br />
Vám za pozornost.
Change language