Biologické vlivy - Ústav imunologie
Biologické vlivy - Ústav imunologie
Biologické vlivy - Ústav imunologie
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Preanalytická Preanalytick fáze ze<br />
laboratorního laboratorn ho vyšet vy etřen ení<br />
• Anna Skalická<br />
• UK 2 LF a FN Motol, Praha<br />
1
• Zobrazovací techniky<br />
Laboratorní diagnostika<br />
• Analytické techniky-analyzuje biologický materiál pacientů<br />
• Výsledky analýz tvoří velmi důležitou součást diagnostiky, sledování<br />
účinků terapie a prevence chorobných stavů<br />
• Data z laboratoří tvoří až 80% veškerých diagnostických dat<br />
2
Kvalita laboratorního vyšetření<br />
• Znamená soulad požadavků s potřebami jejich uživatelů<br />
• Pouze kvalitní laboratorní vyšetření poskytují prospěch<br />
uživatelům<br />
• Uživatelem je pacient<br />
3
• Preanalytická část<br />
Laboratorní vyšetření<br />
• Analytická část – chyby při vlastní analýze vzorku<br />
• Postanalytická část – chyby při tisku a přenosu dat,<br />
přeslechnutí v telefonu<br />
4
Jednotlivé fáze<br />
• Preanalytická fáze příprava pacienta<br />
» odběr biologického vzorku<br />
» transport do laboratoře<br />
» identifikace zkumavky a žádanky<br />
» uchovávání vzorku před analýzou<br />
» příprava vzorku ke zpracování<br />
• Analytická fáze vlastní vyšetření v laboratoři<br />
• Postanalytická fáze výsledkové protokoly a jejich hodnocení<br />
5
Preanalytická fáze<br />
laboratorního vyšetření<br />
• Soubor všech postupů a operací, kterými projde vzorek<br />
analyzovaného materiálu od okamžiku, kdy je analýza<br />
požadována, do okamžiku, kdy je vzorek vložen do<br />
analytického měřícího systému.<br />
6
Osoba pacienta<br />
Bereme v úvahu<br />
• Faktory, které nelze ovlivnit, při hodnocení výsledku je třeba<br />
je znát<br />
• Faktory, které můžeme ovlivnit a tak eliminovat jejich účinek<br />
na vyšetření<br />
7
Faktory ovlivňující<br />
preanalytickou fázi<br />
• <strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
• faktory neovlivnitelné – pohlaví, rasa,věk,gravidita,<br />
nemoc,cyklické variace, biologický poločas stanovované látky<br />
• faktory ovlivnitelné - hmotnost organismu, životní styl, dietní návyky,<br />
vliv léků, zevní prostředí, operace<br />
8
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Pohlaví –<br />
před pubertou jsou minimální rozdíly mezi dívkami a chlapci.<br />
Všeobecně jsou u řady analytů o něco vyšší normální<br />
hodnoty u mužů.<br />
• Rozdílné referenční rozmezí u žen a mužů<br />
Nejznámější:<br />
- parametry červeného krevního obrazu, kreatininu<br />
9
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Biologický poločas stanovované látky<br />
• Příklady:<br />
Malnutrice – albumin dlouhý poločas rozpadu<br />
– prealbumin krátký poločas rozpadu<br />
Infarkt myokardu<br />
Hladiny léků<br />
10
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Rasa –<br />
různé rasy mají odlišné především některé metabolické cesty,<br />
ale také množství svalové hmoty<br />
11
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné - Rasa<br />
• Odlišná frekvence ve výskytu některých onemocnění<br />
• Rozdílné referenční hodnoty<br />
negroidní rasa –nižší hodnoty granulocytů, amylasy,<br />
kreatinkinázy<br />
• Liší se frekvencí genů – rozdílný výskyt dědičných<br />
metabolických poruch<br />
12
Krevní skupiny<br />
0 A B AB<br />
Jihoameričtí domorodci 100 % – – –<br />
Britové 46 % 42 % 9 % 3 %<br />
Irové 52 % 35 % 10 % 3 %<br />
Francouzi 43 % 45 % 9 % 3 %<br />
Vietnamci 45.0% 21.4% 29.1% 4.5%<br />
Australští domorodci 44.4% 55.6% – –<br />
Němci 42.8% 41.9% 11.0% 4.2%<br />
Bengálci 22.0% 24.0% 38.2% 15.7%<br />
Siamci 18.2% 54.6% 4.8% 12.4%<br />
13
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Věk<br />
hraje významnou roli ve správné interpretaci výsledků. Řada<br />
metabolických dějů je spojena s určitou fází vývoje<br />
organismu.<br />
Většinou v dětském věku je nižší horní hranice ref. rozmezí,<br />
není ale pravidlem / alk. fostatáza, anorganický fosfor/<br />
Zcela rozdílné jsou ref. rozmezí u novorozenců a malých dětí/<br />
imunoglobuliny/<br />
14
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Gravidita –<br />
změny analytů mohou být dány řadou mechanizmů, např.<br />
indukcí (ALP), zvýšením plazmatických transportních proteinů<br />
v plazmě (T4, Cu), zvýšením tělesného objemu (kreatininová<br />
clereance), relativním deficitem (Fe, feritin), zvýšením<br />
proteinů akutní fáze<br />
15
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné - Gravidita<br />
• Hormonální <strong>vlivy</strong> se uplatňují i u běžných<br />
metabolitů<br />
V posledním trimestru stoupá hladiny cholesterolu<br />
Klesá hladina hemoglobinu, což má za následek<br />
zvýšení glomerulární filtrace a tím klesá hladiny<br />
kreatininu a močoviny.<br />
16
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Nemoc<br />
Chybějí-li údaje o pacientovi, může se lékař setkat s výsledky,<br />
které jsou ovlivněny jinou současně probíhající chorobou<br />
Pozitivita uváděných testů může, při neznalosti základního<br />
onemocnění, vést k nesprávným závěrům<br />
Příklad: zvýšení CRP u pacienta s revmatoidní artritidou<br />
17
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
• Cyklické variace (cirkadiánní, cirkanuální, infradiánní,<br />
ultradiánní)<br />
1. Cirkadiánní variace – pravidelně se opakující jev s periodou<br />
24 hodin – kortizol<br />
2. Ultradiánní cykly – pravidelně se opakující jev s periodou<br />
mnohem kratší než 24 hodin – kortikosteroidy, inzulín<br />
18
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory neovlivnitelné<br />
3. Cirkanuální cykly – pravidelně se opakující jev s periodou<br />
cca 1 rok<br />
4. Infradiánní cykly – pravidelně se opakující jev s periodou<br />
delší než 24 hodin – menstruační cyklus s typickým<br />
ovlivněním hladin hormonů<br />
19
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Hmotnost organismu –<br />
s obezitou pozitivně koreluje např. koncentrace cholesterolu,<br />
triacylglycerolů, kyseliny močové, kortizolu...<br />
20
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Životní styl - tento faktor je nejvíce proměnný a může vést k<br />
mylné interpretaci nálezu při špatně provedené anamnéze<br />
• Fyzická zátěž- závisí na intenzitě a délce zátěže<br />
21
Fyzická zátěž<br />
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Akutní, silová, vyčerpávající<br />
• Vytrvalá zátěž<br />
Způsobuje změny některých analytů<br />
Příklad: snižuje ATP, inzulín, zvyšuje zvyšuje glukozu, laktát<br />
Po dlouhodobé námaze se zvyšují hladiny<br />
Na,K,Ca,ALP,AST,albuminu………<br />
22
Stravovací návyky<br />
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Většina vyšetření požaduje odběr nalačno. Nedodržení této<br />
podmínky vede ke změně koncentrace nebo aktivity<br />
měřených analytů.<br />
• Strava bohatá na tuky vede ke zvýšení triacylglycerolu a<br />
vzniká lipemické sérum<br />
23
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Stravovací návyky, lipemické sérum<br />
Mechanizmy interference lipémie jsou následující<br />
• Interference u spektrofotometrických stanoveních<br />
• Fyzikálně – chemické mechanizmy, projevují se u některých<br />
elektroforetických a imunochemických metod<br />
• Snížení koncentrace analytu ve vzorku redukcí objemu vody<br />
24
Stravovací návyky<br />
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Strava bohatá na bílkoviny<br />
Zvyšuje obsah analytů bílkovinné povahy / celková<br />
bílkovina, albumin, močovina, kys. močová<br />
Strava bohatá na cukry<br />
Zvyšuje v krvi hladinu glukózy i jiných analytů<br />
Sekundárním důsledkem vyplavení inzulínu je pokles<br />
koncentrace K + a fosfátů<br />
25
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Stravovací návyky<br />
Prodloužené lačnění až hladovění<br />
Zvyšuje se koncentrace volných mastných kyselin,<br />
kyseliny močové, alkalické fosfatázy.<br />
Při prodlouženém lačnění se močí vylučují ketolátky,<br />
ph moče se mění na alkalické<br />
Dehydratace<br />
Významně ovlivňuje výsledky stanovení analytů a<br />
ztěžuje samotný odběr krve<br />
U vegetariánů jsou velmi nízké hladiny cholesterolu a<br />
triacylglycerolů, naopak zvýšený bývá bilirubin.<br />
26
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Alkohol<br />
Změny obsahu analytů závisí na intenzitě a délce konzumace<br />
• akutní <strong>vlivy</strong> – snížení glukozy, změny parametrů ABR /<br />
metabolická acidóza/, zvýšení laktátu<br />
• Chronická konzumace vede k trvalému zvýšení GMT, AST,<br />
ALT, cholesterolu a triacylglycerolů<br />
27
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Abuzus léků - podávané léky mají vliv na biologické procesy,<br />
ale také vyvolávají fyzikálně chemické interference např. při<br />
imunochemických stanoveních<br />
• Léky mohou výrazně ovlivnit výsledky řady testů<br />
- specifickým účinkem na organizmus<br />
- interferencí při chemické analýze<br />
- Proto se doporučuje pokud to zdravotní stav pacienta dovolí<br />
před odběrem léky vynechat<br />
28
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
Vliv léků<br />
Léky ovlivní analýzu různě<br />
• Lék snižuje či zvyšuje hladinu sledované látky zvýšením či<br />
snížením její produkce v organizmu<br />
• Lék ovlivňuje rychlost metabolitu sledované látky nebo<br />
rychlost její eliminace<br />
• Lék interferuje s používanou chemickou či fyzikální metodou<br />
stanovení nebo interferuje svou barvou při fotometrii<br />
• Lék poškozuje některý orgán<br />
• U některých léků jsou možné všechny uvedené kombinace<br />
• Při posuzování možnosti ovlivnění výsledku lékem je třeba<br />
znát jeho složení.<br />
29
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Kouření<br />
Ovlivňuje řadu analytů.<br />
Zvyšuje hladinu glukózy, cholesterolu, triacylglycerolů,<br />
CEA…..<br />
Snižuje koncentraci imunoglobulinů, vitamínu B12<br />
30
<strong>Biologické</strong> <strong>vlivy</strong><br />
faktory ovlivnitelné<br />
• Zevní prostředí - nadmořská výška, teplota prostředí,<br />
geografická lokalizace nemalou měrou ovlivňuje koncentraci<br />
analytů<br />
Při déletrvajícím pobytu ve vysoké nadmořské výšce dochází<br />
k celkové adaptaci organizmu<br />
Zvyšují se erytrocyty, hemoglobin, hematokrit, CRP<br />
Snižuje se koncentrace kreatininu, transferinu<br />
31
Preanalytická fáze<br />
• Odběr, transport, identifikace vzorku a pacienta<br />
• Velká část preanalytické fáze je v rukou zdravotních<br />
sester<br />
32
Preanalytická fáze<br />
–příprava pacienta<br />
• Informovaný souhlas - Úmluva o biomedicíně<br />
(účinnost k 1.11.06)<br />
• Zajistí: poučení nemocného<br />
umožnění potřebné léčby a péče<br />
poskytnutí právní ochrany lékaře a zdrav. zařízení při<br />
případných forézních dopadech<br />
33
Preanalytická fáze<br />
• Informovaný souhlas<br />
–příprava pacienta<br />
dává pacientovi nejen práva, ale také povinnost →<br />
disciplinovanost pacienta<br />
34
Preanalytická fáze<br />
• Informovaný souhlas –<br />
–příprava pacienta<br />
odmítnutí zdravotní péče a negativní reverz<br />
pacient je partner a má právo volby<br />
35
Odběr biologického vzorku<br />
• Biologický vzorek – potenciálně infekční materiál, používaný<br />
k vyšetřování v klinických laboratořích pro účely diagnostiky,<br />
terapie a prevence<br />
• Krev – venózní<br />
kapilární<br />
36
Odběr venózní krve<br />
hlavní zásady před odběrem<br />
• Lačnit po dobu nejméně 10-12 hodin<br />
• Přijímat tekutiny v podobě čisté vody nesycené kysličníkem uhličitým,<br />
nesladké<br />
• Vyloučit alkohol a tabákové výrobky<br />
• Omezit tělesné aktivity na minimum.<br />
37
Odběr venózní krve<br />
hlavní zásady před odběrem<br />
• Vyvarovat se stresu.<br />
• Vyloučit, pokud může ovlivnit laboratorní vyšetření a pokud<br />
lze, medikamentózní terapii dle pokynu ošetřujícího lékaře.<br />
• Pokud lze, vyloučit odběr v době menstruačního krvácení.<br />
38
Odběr venózní krve<br />
hlavní zásady před odběrem<br />
• příprava příslušné dokumentace (žádanky)<br />
• příprava odběrových pomůcek<br />
• příprava příslušného druhu odběrových zkumavek s<br />
ohledem na požadované vyšetření<br />
• řádné označení zkumavek před provedením odběru<br />
39
Žádanky na vyšetření<br />
Žádanka musí obsahovat následující údaje<br />
• Jméno a příjmení pacienta<br />
• Rodné číslo pojištěnce, popř. náhradní číslo<br />
• Odebíraný materiál<br />
• Požadované vyšetření<br />
• Diagnózu<br />
• Pojišťovnu, případně způsob platby<br />
• Datum vystavení žádanky<br />
• Při statimovém nebo vitálním vyšetření čas odběru<br />
40
Žádanky na vyšetření<br />
• Razítko příslušného zdravotnického zařízení<br />
/ oddělení /, IČP<br />
• Čitelné jméno lékaře<br />
• Kontaktní telefonní spojení<br />
• Dodatečné údaje pro některá vyšetření/ množství sbírané<br />
moče, hmotnost a výška pacienta, délka těhotenství<br />
• Veškeré odchylky od běžných postupů<br />
41
Odběr venózní krve<br />
kontrola identifikace pacienta<br />
• ambulantní pacienti – na odběrovém pracovišti kontrola<br />
průkazu ZP<br />
• hospitalizovaní pacienti na lůžku – kontrola s ohledem na<br />
zdravotní stav<br />
• pacienti v bezvědomí – identifikaci pacienta provede<br />
zdravotnický personál (popř. blízká osoba)<br />
42
Odběr venózní krve<br />
poloha pacienta<br />
Některé analyty vykazují změny koncentrace nebo aktivity v<br />
závislosti na poloze pacienta při odběru.<br />
Ve vzpřímené poloze stoupá hydrostatický tlak<br />
a dochází k přesunu vody a iontů z plazmy do<br />
intersticia.<br />
Koncentrace vysokomolekulárních látek, celá řada proteinů<br />
/ Ig,albuminu, CB/ a enzymů / ALP,AST/ je nižší, je-li<br />
pacient odebírán vleže.<br />
43
Odběr venózní krve<br />
poloha pacienta<br />
Pro zajištění standardních podmínek k odběru krve z<br />
loketní jamky je vhodné pro většinu analytů zajistit<br />
polohu vsedě po dobu 15 minut před odběrem.<br />
Delší interval se doporučuje u natriuretických peptidů<br />
/20-30 min./<br />
Pro vyšetření osy renin-angiotenzin – aldosteron je nutný<br />
odpočinek vleže bez jakékoliv změny před odběrem.<br />
44
Odběr venózní krve<br />
• nenásilné probuzení u pacientů na lůžku (vyloučení stresu)<br />
• ověření dodržení dietních omezení<br />
• příprava pacienta, seznámení s postupem odběru, zklidnění,<br />
atd.<br />
• zajištění správné polohy paže – vyloučit loketní flexi<br />
• aplikace turniketu – dodržování minimálně nutného času,<br />
odběr na laktát bez použití turniketu!<br />
45
Odběr venózní krve<br />
• posouzení kvality žilního systému – s ohledem na použití<br />
jehly správného průsvitu a místa vpichu<br />
• u hospitalizovaných pacientů se zavedenou infuzí – odběr z<br />
druhé ruky nebo z místa pod intravenózní linkou; nejlépe když<br />
není infuze<br />
46
Odběr venózní krve<br />
• použití jednorázových rukavic (pro každého pacienta nové)<br />
• dezinfekce místa vpichu, úplné osušení dezinfekčního<br />
prostředku – prevence hemolýzy<br />
• POZOR! Při odběru na hladinu alkoholu v krvi se nesmí<br />
použít dezinfekční prostředek, který obsahuje alkohol.<br />
• Je důležité zachování sterility, nelze se dotýkat<br />
předpokládaného místa vpichu.<br />
47
Odběr venózní krve<br />
• stabilizace polohy žíly palcem<br />
• zataženou rukou se nedoporučuje cvičení, zaťatá pěst se<br />
nedoporučuje, vede ke zvýšení hladin některých analytů<br />
• správná poloha jehly při vpichu - úhel mezi povrchem paže a<br />
stříkačkou má být cca 15 stupňů<br />
• uvolnění turniketu – v okamžiku, kdy se objeví krev v první<br />
zkumavce<br />
48
Příklady faktorů při odběru krve,<br />
které mohou ovlivnit výsledek<br />
- příliš těsně nebo příliš dlouho přiložené škrtidlo, cvičení paží<br />
…….. bílkoviny, enzymy, vápník, lipidy, Hb, krevní<br />
elementy,draslík<br />
- celková hypoxie …….. fosfor, LD<br />
- nedostatečná dezinfekce a vysušení dezinf. místa<br />
…….. K, fosfát, LD, ACP, AST,ALT, bilirubin<br />
- exogenní nečistoty,stopy infuzních roztoků, antiseptika<br />
…….. degradační produkty fibrinogenu, faktory krevní<br />
koagulace<br />
49
Doporučené pořadí odběrových<br />
zkumavek z jednoho vpichu<br />
• 1. odběr na hemokulturu (pokud se provádí) vždy jako první<br />
• 2. zkumavky bez přísad - červený nebo žlutý uzávěr<br />
• 3. zkumavky na hemokoagulaci - modrý uzávěr<br />
• 4. ostatní zkumavky s přísadami<br />
50
Odběr venózní krve<br />
• Odběry z centrálních katetru a kanyl – první odebraná<br />
zkumavka se do laboratoře neposílá (zlikviduje se)<br />
• Důležité: všechny zkumavky s přísadami bezprostředně po<br />
odběru promíchat pomalým opakovaným otáčením minimálně<br />
5 x<br />
NETŘEPAT!<br />
51
Odběr kapilární krve.<br />
• dostatečné prokrvení bříška prstu (teplá voda, zábal)<br />
• dostatečná desinfekce – zabránění následné infekci<br />
• oschnutí desinfekčního prostředku – prevence hemolýzy<br />
• výběr správné lancety s určenou hloubkou vpichu - hloubka<br />
vpichu nemá být vetší než 2 mm<br />
• odstranění první kapky krve - zabránění kontaminace<br />
tkáňovým mokem<br />
52
Odběr kapilární krve<br />
• vyloučit mačkání prstu –způsobuje zkreslení výsledku řady<br />
analytů<br />
• vyloučit stírání kapek krve o odběrovou nádobku – prevence<br />
hemolýzy a srážení krve<br />
• vyloučit vniknutí vzduchových bublin do kapiláry – vyloučení<br />
chyb při stanovení parametru ABR a okamžité (bez prodlevy)<br />
promíchání kapiláry pomocí ocelových drátku – prevence<br />
srážení<br />
53
Odběr kapilární krve<br />
• uzavření kapiláry – zabránění vniknutí vzduchu u kapilár na<br />
stanovení ABR<br />
• okamžité promíchání nádobek s přísadami u ostatních odběrů<br />
– prevence srážení krve<br />
• důkladné a správné označení odebraného materiálu<br />
• provádí kvalifikovaný personál v OC, ambulantním a<br />
lůžkovém zařízení<br />
54
Odběr moče<br />
• Moč na vyšetření chemicky a sedimentu<br />
vzorek 10 ml první ranní moče, střední proud<br />
• Sběr moče za 24 hodin<br />
podrobný popis, edukace pacienta, důležitá zpětná vazba<br />
55
Sběr moče na stanovení<br />
mikroalbuminurie<br />
• Přes noc (po dobu 8 hod)<br />
• Pacient se přes den vyhne vetší fyzické námaze. Těsně před spaním<br />
se vymočí mimo sběrnou nádobu. Za 8 hodin od této doby se pacient<br />
hned po probuzení vymočí do sběrné nádoby. Sbírá se i moč při<br />
probuzení v noci, čas sběru za 8 hodin je nutno přesně dodržet. Objem<br />
moči je nutno změřit s přesností na ml, pokud pacient tuto možnost<br />
nemá, přinese do laboratoře celý nasbíraný objem.<br />
• Jedná se o velmi důležité vyšetření pro diabetiky<br />
56
Odběr biologického materiálu<br />
pro mikrobiologické vyšetření<br />
• Výtěry, stěry, sputum, bronchoalveolární laváž, stolice, moč,<br />
dialyzát, plodová voda, sperma, mozkomíšní mok, hnis z<br />
abscesů, hemokultivace.<br />
• V případe nemožnosti okamžitého transportu do laboratoře<br />
pečlivě dodržovat pokyny laboratoře, aby nedošlo ke<br />
znehodnocení biologického materiálu<br />
57
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• Děti jsou unikátní skupinou – nejsou pouhými zmenšeninami<br />
dospělých.<br />
• Referenční meze se liší od starších dětí a dospělých<br />
• Nejvíce je pediatrie charakterizována<br />
odlišnostmi danými růstem a<br />
vývojem kojenců.<br />
58
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
Tři základní okruhy problémů:<br />
1.-správný odběr pediatrických biologických vzorků<br />
2.-referenční meze pro dětský věk<br />
3.-výběr přístrojů a metod ke zpracování velmi malého<br />
množství biologického vzorku<br />
59
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• Odběr krve<br />
zajištění správného odběru je problémem speciálně u<br />
nedonošenců a novorozenců<br />
krev kapilární<br />
krev venózní<br />
60
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
Odběr kapilární krve – u mladších dětí a novorozenců je méně<br />
traumatizující odběr z prstu či patičky<br />
Postup –<br />
před vpichem kůži zahřát (průtok krve vzroste až 7x)<br />
použít jednorázové rukavice<br />
vpich nesmí být hlubší než 2,4 mm<br />
61
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• První kapka po vpichu – otřít (obsahuje tkáňovou tekutinu)<br />
• Po odběru nepoužívat adhezivní bandáže (náplast) pro<br />
vysokou citlivost kojenecké kůže<br />
• Rozdílné hodnoty koncentrace některých analytů v kapilární a<br />
venózní krvi (glc)<br />
62
• Odběr venózní krve<br />
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
-<br />
turniket aplikovat ve středu vzdálenosti mezi loktem a<br />
ramenem dítěte (stlačovat žílu, nikoli tepnu)<br />
- jehlu zavést v ose žíly, s kůží svírá úhel 15 stupňů<br />
63
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
- po vyjmutí jehly místo vpichu zatlačit sterilní bavlněnou gázou<br />
- v momentě kdy začne proudit krev uvolnit turniket<br />
64
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• Prostředí odběru – mimořádně důležité u dětských pacientů<br />
• Navodit příjemnou atmosféru (úprava místnosti, pracovníků)<br />
• Věnovat dostatek času uklidnění pacienta a k získání jeho<br />
důvěry<br />
• Vysvětlit, co bude následovat<br />
• Správně pacienta identifikovat!!!<br />
65
• Objem vzorku<br />
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• Analyzátory používají malé reakční objemy, přesto je velikost<br />
pediatrických vzorků primární záležitostí<br />
• Celkový krevní objem zdravého novorozence je 85 ml/kg<br />
• Dobrým plánováním požadovaných laboratorních testů se<br />
vyhneme nadměrným ztrátám krve (nozokomiální anémie)<br />
66
Odběr biologického vzorku v<br />
pediatrii<br />
• Doporučené maximální objemy vzorků krve vzhledem ke<br />
hmotnosti dětí<br />
67
Doporučené maximální objemy vzorků krve vzhledem ke<br />
hmotnosti dětí<br />
Hmotnost<br />
pacienta (kg)<br />
Maximum na 1<br />
odběr (ml)<br />
0,5 – 0,9 1 8<br />
0,9 – 1,8 1,5 12<br />
1,8 – 3,0 2,0 17<br />
3 - 4 2,5 23<br />
Maximum na 1<br />
měsíc (ml)<br />
68
Doporučené maximální objemy vzorků krve vzhledem ke<br />
hmotnosti dětí<br />
Hmotnost<br />
pacienta (kg)<br />
Maximum na 1<br />
odběr (ml)<br />
4 - 5 3,5 30<br />
5 - 7 5 40<br />
7 - 9 10 60<br />
9 - 11 10 70<br />
Maximum na 1<br />
měsíc (ml)<br />
69
Odběr biologického vzorku<br />
Odběr ostatního biologického materiálu<br />
• moč –nejčastěji první ranní moč, střední proud<br />
• stolice – nejčastěji vzorek velikosti lístkového oříšku z vnitřku<br />
stolice<br />
• mozkomíšní mok – k odběru má kompetenci lékař<br />
• další tělní tekutiny - synoviální tekutina, výpotky do tělních<br />
dutin, sliny, vzorky tkání<br />
70
Identifikace biologického<br />
Vyhláška č. 195/2005 Sb. – citace<br />
vzorku a žádanky<br />
Jméno, příjmení, rodné číslo nebo datum narození osoby, které<br />
RČ nebylo přiděleno,. Adresu místa pobytu vyšetřované osoby v<br />
ČR, identifikační číslo zdravotnického zařízení a jeho adresu,<br />
Jmenovku, podpis a telefonní číslo lékaře žádajícího vyšetření<br />
<strong>Biologické</strong>ho materiálu, název zdravotní pojišťovny, druh<br />
Materiálu, datum a hodinu odběru.<br />
Datum prvních příznaků infekčních onemocnění, druh antibiotické<br />
terapie a její začátek, klinickou diagnózu a požadovaný druh vyšetření.<br />
71
Identifikace biologického<br />
vzorku a žádanky<br />
• Identifikace odběrové nádobky – nejsou nutná všechna data,<br />
která jsou vyžadována na žádance o laboratorní vyšetření<br />
biologického materiálu.<br />
• Povinné je jméno, rodné číslo a oddělení<br />
• Je podstatná jednoznačná identifikace pacienta, od kterého<br />
byl vzorek odebrán.<br />
72
Zkumavky se separačními<br />
• Uzavřený odběrový systém<br />
gely<br />
• Zkumavky se separačními gely – docilují významně vyšších<br />
hodnot stability u analytů, jejichž koncentrace je významně<br />
ovlivňována stykem séra s krevními elementy<br />
• Jejich používání podléhá řadě omezení<br />
73
Nejčastější chyby<br />
při odběru krve<br />
• Dlouhodobé stažení paže turniketem / více jak jedna minuta/<br />
nebo intenzivní cvičení paží<br />
• Nedostatečné prokrvení místa odběru při odběru kapilární<br />
krve<br />
• Znečištění jehly nebo pokožky dezinfekčními prostředky<br />
• Použití jehly s nevhodným průsvitem /příliš tenké/<br />
• Použití nevhodné lancety pro kapilární odběr – neoptimální<br />
hloubka vpichu<br />
74
Nejčastější chyby<br />
při odběru krve<br />
• Prudké třepání odebrané krve ve zkumavce<br />
• Odběr ze stejné ruky nebo nevhodného místa při zavedené<br />
infuzi<br />
• Nedodržení dietních omezení před odběrem / na žádance<br />
vyznačíme „po jídle“<br />
• Užívání léků – vyznačit jaké léky nebyly vysazeny<br />
• Neúplné naplnění zkumavky s aditivy – nedodržení poměru<br />
aditivum x krev<br />
• Uskladnění plné krve v lednici bezprostředně po odběru<br />
75
Nejčastější chyby<br />
při odběru krve<br />
• Nasátí vzduchových bublin při odběru do kapiláry<br />
• Stírání kapek krve o hranu nádobky při kapilárním odběru<br />
• První kapka krve při kapilárním odběru byla použita<br />
• Nedostatečné promíchání krve ve zkumavce, kapiláře,<br />
nádobce s protisrážlivým činidlem nebo promíchání s větší<br />
časovou prodlevou<br />
76
Bezpečnost práce<br />
Všechny typy vzorku biologického materiálu jsou<br />
potenciálně infekční.<br />
Pracujeme s nimi opatrně, aby byla zajištěna bezpečnost<br />
ošetřujícího personálu, sester i laborantů.<br />
Pokud dojde k jakémukoliv znečištění či potřísnění tímto<br />
materiálem je třeba taková místa vyčistit a dezinfikovat<br />
patřičnými desinfekčními roztoky.<br />
77
Zkumavky s antikoagulačními<br />
činidli<br />
• Heparin se užívá jako sodná, draselná, lithná nebo amonná<br />
sůl, a tak může stanovení těchto analytů ovlivnit.<br />
• EDTA má malý vliv na laboratorní testy kromě některých<br />
metod stanovení železa a vápníku.<br />
• Fluorid sodný se využívá jako stabilizační činidlo ke<br />
stanovení glukózy.<br />
• Citrát sodný není vhodný ke stanovení vápníku.<br />
78
Laboratorní příručky<br />
• Povinnost ošetřujícího personálu sledovat laboratorní příručky<br />
konkrétní laboratoře<br />
• Povinnost laboratoře udržovat aktuální informace a<br />
přístupnost laboratorních příruček na netu<br />
79
Laboratorní příručky<br />
• Národní akreditační standardy klinických laboratoří<br />
vypracované v rámci Národního programu kvality zdravotní<br />
péče v MZ ČR.<br />
• Jejich obsah je dán normou<br />
ČSN ISO 15189: 2004<br />
80
Laboratorní příručky<br />
• Název standardu<br />
• A-01 laboratorní příručka<br />
• Abstrakt<br />
• Je vypracována a řízena pro zabezpečení správné<br />
komunikace mezi laboratořemi a uživateli jejich služeb<br />
• Typ standardu<br />
• Strukturální<br />
81
Laboratorní příručky<br />
Měřitelné prvky:<br />
• Vedení zdravotnického zařízení je odpovědné za vypracování<br />
Laboratorní příručky v požadované jednotné struktuře a<br />
obsahu podle závazné struktury specifikované v Národním<br />
standardu<br />
• Laboratorní příručka je součástí řízené dokumentace<br />
zdravotnického zařízení<br />
• Vedení zdravotnického zařízení je zodpovědné za pravidelné<br />
revize Lab. příručky zohledňující požadavky uživatelů na<br />
obsah příručky a služby poskytované laboratořemi<br />
• Vedení zdravotnického zařízení je odpovědné za dostupnost<br />
příručky všem uživatelům laboratorních služeb<br />
82
Laboratorní příručka-vzor<br />
LABORATORNÍ PŘÍRUČKA<br />
PŘEHLED LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ, REFERENČNÍCH<br />
MEZÍ A DOPORUČENÍ<br />
FAKULTNÍ NEMOCNICE V MOTOLE<br />
ÚSTAV KLINICKÉ BIOCHEMIE A PATOBIOCHEMIE<br />
AKTUALIZOVÁNO K 15.1.2008<br />
83
Laboratorní příručka-vzor<br />
• Obsah<br />
• 1. Úvod....................................................... 7<br />
• 2. Informace o laboratoři............................ 8<br />
• 2.1 Identifikace laboratoře a důležité údaje... 8<br />
• 2.2 Základní informace o laboratoři............................. 8<br />
• 2.3 Zaměření laboratoře, úroveň a stav akreditace<br />
pracoviště.........<br />
• 2.4 Organizace laboratoře......................................... 9<br />
• 2.5 Spektrum nabízených služeb............................... 10<br />
• 3. Manuál pro odběry primárních vzorků................. 10<br />
• 3.1 Základní informace........................................... 10<br />
• 3.2 Požadavkové listy (žádanky)..................... 11<br />
84
Chyby ve zdravotnictví<br />
• Zdravotní péče představuje značné riziko pro<br />
pacienty (osmé největší ze všech pracovních<br />
lidských činností)<br />
• Asi 10% pacientů je v jejím průběhu více nebo<br />
méně poškozeno<br />
• Jde o celosvětový problém<br />
85
Chyby při laboratorním<br />
vyšetřování<br />
• Nejvíce chyb-asi 60% z „laboratorních chyb“ vzniká<br />
při preanalytické fázi<br />
• Nejčastěji jde o<br />
• hemolýzu<br />
• chybné odběrové nádobky<br />
• chybnou identifikaci pacienta<br />
86
Chyby v preanalytické preanalytick fázi zi<br />
Preanal.fáze<br />
mimo laboratoř<br />
20 %<br />
Preanal.fáze v<br />
laboratoři<br />
37 %<br />
VÝBĚR<br />
ODBĚR<br />
ALIKVOTACE<br />
TRANSPORT<br />
REGISTRACE<br />
ODSTŘEDĚNÍ<br />
DISTRIBUCE
Četnost preanalytických chyb<br />
• Hemolýza 39-69%<br />
• Sražená krev 5-12%<br />
• Špatný odběr 9-21%<br />
• Špatná odběrová nádobka 5-13%<br />
• Chybná identifikace 1-2%<br />
88
Hemolýza<br />
Hemolýzu definujeme jako rozpad erytrocytů, který vede k vylití<br />
jejich obsahu, krevního barviva do plasmy/ séra.<br />
Hemolýza<br />
• Mechanická – silné třepání zkumavky, centrifugace při<br />
vysokých otáčkách, nevhodný transport<br />
• Osmotická – mokrá zkumavka<br />
• Tepelná – krev je vystavena mrazu či naopak vysoké teplotě<br />
• Chemická – dezinfekční prostředek rozruší membránu ery<br />
89
Chyby vedoucí k hemolýze<br />
vzorku<br />
• Použití vlhké odběrové soupravy<br />
• Znečištění jehly nebo pokožky stopami dezinfekčního roztoku<br />
• Použití příliš úzké jehly<br />
• Prudké vystřikování krve ze stříkačky do zkumavky<br />
• Stékání krve po povrchu kůže a pak teprve do zkumavky<br />
90
Chyby vedoucí k hemolýze<br />
vzorku<br />
• Prudké třepání krve ve zkumavce<br />
• Uskladnění plné krve v lednici<br />
• Použití nesprávné koncentrace protisrážlivého činidla<br />
• Prodloužení doby mezi odběrem a dodáním do laboratoře<br />
91
Management risika<br />
• Znamená redukci chyb na nejmenší možnou míru<br />
• Je to povinnost zdravotníků k pacientům<br />
= redukce chyb<br />
• Je to součást koncepce kvality poskytnuté zdravotní péče<br />
• Jde o součást akreditačního procesu zdravotnického zařízení<br />
• Největším rizikem při laboratorním vyšetření je preanalytická fáze<br />
92
Transport biologického vzorku<br />
• Vzorek chráníme před mrazem, vysokou teplotou,<br />
světlem, s krví netřepeme.<br />
• Transport krve musí být dostatečně rychlý, aby se včas oddělilo<br />
sérum od krvinek. Pro stanovení K +, do 1 hod pro ostatní do 2 hod.<br />
• Doba transportu a speciální požadavky se musí řídit pokyny<br />
laboratoří<br />
• Krev je nutné transportovat v uzavřených nádobkách<br />
93
Transport biologického vzorku<br />
Dlouhé stání plné krve při pokojové teplotě je nepřípustné<br />
Transport musí být šetrný, při adekvátní teplotě a světelných<br />
podmínkách<br />
Pokud je transport rychlý, dostačuje pokojová teplota, není-li<br />
určeno jinak<br />
Nesmí dojít ke zmrznutí vzorku / hemolýza/<br />
94
Transport biologického<br />
materiálu v ledové tříšti<br />
Některé odběry vyžadují transport v ledové tříšti, např. amoniak,<br />
renin, kalcitonin, homocystein<br />
Proto pozor :<br />
Vložení do ledové tříště nelze provést ihned po odběru, ale až po<br />
ochlazení krve na pokojovou teplotu, cca za 10 -15 minut po<br />
odběru, jinak dojde k hemolýze.<br />
Materiál pak co nejrychleji dopravit do laboratoře<br />
95
Uchovávání vzorků<br />
Podmínky uchovávání vzorků mají stejně jako jeho transport vliv<br />
na stabilitu vzorků.<br />
Většina vyšetření se provádí z krevního séra. Není-li provedeno<br />
vyšetření ihned, obvykle stačí uchovat sérum v ledničce a to v<br />
dobře uzavřené zkumavce, aby nedocházelo k zahuštění<br />
vzorku.<br />
Většina analytů, včetně enzymů je stabilní řadu dní.<br />
Pro delší skladování se uchovává sérum zmražené.<br />
96
Přijetí vzorku laboratoří<br />
• POVINNOST LABORATOŘE POUŽÍVAT ŘÁDNÉHO<br />
VZORKU<br />
• Realizace práva pacienta na řádný vzorek<br />
• Organizace poskytující zdravotnickou péči jsou<br />
povinné provádět management rizika<br />
• nepřetržitě zlepšovat kvalitu svých služeb<br />
• ochraňovat bezpečnost svých pacientů<br />
• zajišťovat vysoký standard péče<br />
97
Důvody odmítnutí vzorku<br />
- neoznačený či nečitelně označený vzorek<br />
- neúplná data (požadavky VZP)<br />
- neshoda mezi žádankou a vzorkem<br />
- riziko kontaminace vzorku - poškozená nádoba<br />
- kontaminace žádanky materiálem<br />
- nesprávný materiál<br />
- doba mezi odběrem a dodáním přesahuje stabilitu<br />
98
Důvody odmítnutí vzorku<br />
• Postup při nesprávné identifikaci biologického materiálu<br />
• Postup při nesprávné identifikaci žádanky<br />
• Chybí označení požadovaného vyšetření<br />
99
Odmítnutí vzorku<br />
• provedeno podle pravidel je důležitým nástrojem regulace kvality<br />
preanalytického procesu a zajištění kvality péče o pacienta<br />
100
Separace<br />
oddělení krevních elementů<br />
• Pro oddělení krevních elementů od séra je vhodná<br />
centrifugace při 3000 otáčkách po dobu 10 minut.<br />
• Delší doba centrifugace nebo zvýšení otáček vede k<br />
hemolýze.<br />
• Plazma nebo sérum by mělo být odděleno od buněk, není-li<br />
určeno jinak, do dvou hodin po odběru<br />
• Předčasné oddělení séra od krevních elementů (dříve než za<br />
20 minut) vede k dodatečné tvorbě fibrinu a dochází tak k<br />
pocentrifugační koagulaci<br />
101
Jak dosáhnout minimalizace<br />
preanalytických změn<br />
• Kurzy pro výcvik a výuku odběrového personálu<br />
• Databáze laboratorních příruček ve všech klinických laboratoří<br />
• Přístup kliniků k těmto informacím<br />
• Audity dodržování zásad preanalytické fáze v laboratořích, na<br />
klinických odděleních, v ambulancích a ordinacích<br />
102
Jak dosáhnout minimalizace<br />
preanalytických změn<br />
• Používání primárních vzorků<br />
• Zodpovědnost laboratoře za POCT<br />
• Standardizace transportu vzorku do laboratoří<br />
• Dodržování pravidel preanalytické fáze pomocí SOP<br />
103
Zajištění kvality preanalytiky<br />
ze strany laboratoře<br />
• Dokumentace (součást akreditačních procesů)<br />
• Automatizace preanalytické fáze (přístrojové vybavení,<br />
logistika)<br />
• Informační technologie (počítače -laboratorní a<br />
nemocniční informační systémy)<br />
Vstup<br />
Čárové<br />
kódy<br />
Centrifugace<br />
Odvíčkování<br />
Výstup 1<br />
Výstup<br />
2<br />
(možnost)<br />
104
• Znalost pravidel<br />
• Jejich dodržování<br />
• Spolupráce s laboratoří<br />
• Soustředění na zájmy pacientů<br />
Zajištění kvality preanalytiky<br />
ze strany klinik a ambulancí<br />
105
Klíčové body zajištění kvality<br />
preanalytiky<br />
• Informace z laboratoří -Laboratorní příručka<br />
• Dodržování pravidel<br />
• Spolupráce<br />
-shrnutí<br />
106
Zajištění kvality preanalytiky<br />
ze strany<br />
vrcholového managementu<br />
• Organizace a koordinace managementu risika zdravotní péče<br />
107
Shrnutí<br />
• Pravidla všech postupů a operací preanalytické<br />
fáze laboratorního vyšetření jsou laboratořemi<br />
přesně definována a popsána v laboratorní<br />
příručce a jsou pro žadatele o vyšetření závazná.<br />
108
Shrnutí<br />
• Klienti využívající služeb klinických laboratoří jsou<br />
povinni v zájmu správného provedení laboratorního<br />
vyšetření tato pravidla znát a dodržovat je.<br />
109
Závěrem<br />
• PÉČE O PACIENTA JE TÝMOVÁ PRÁCE<br />
• TÝM JE TAK SILNÝ<br />
JAK SILNÝ JE JEHO<br />
NEJSLABŠÍ ČLÁNEK.<br />
110