Ročenka 2001 - vúkoz - Výzkumný ústav Silva Taroucy pro krajinu a ...

Využití DNA polymorfismu k určení genetické diverzity rodu topol (Populus) a dub
(Quercus) pro řešení strategie konzervace in situ a reintrodukce ohrožených druhů
Na základě analýzy mikrosatelitových lokusů je sledována genetická diverzita
populace topolu černého v Pomoraví a v potomstvu z kontrolovaného křížení některých
těchto jedinců. Cílem práce je určení minimální velikosti životaschopné populace pro
reintrodukci topolu černého. Stejnou metodou bude určena populační struktura 3 přirozených
populací agregátu dubu zimního (Quercus dalechampii, Q. polycarpa a Q. petraea) v NP
Podyjí, úkolem je ověřit možnost použít mikrosatelitové markery pro odlišení těchto blízce
příbuzných druhů.
V roce 2001 bylo nakříženo 19 kombinací výběrových stromů. DNA byla izolována u
142 jedinců. Byla provedena analýza 11 mikrosatelitů u 64 výběrových stromů a 8–9
mikrosatelitů u 150 kříženců. U kříženců byly sledovány znaky, které charakterizují fitness
(výška, průměr kmínku a klíčivost semen). U dubu byly provedeny metodické pokusy.
(M. Pospíšková, V. Benetka, I. Bartáková)
Ex situ konzervace ohrožených taxonů rostlin s využitím techniky in vitro
Byly vypracovány standardní podmínky generativního in vitro množení pro ohrožený
druh terestrické orchideje Platanthera bifolia (čeleď Orchidaceae). Byl zjištěn neprůkazný
vliv světelné periody na tvorbu protokormů. Po 18 týdnech kultivace byla v přítomnosti
auxinů (2,4-D nebo IBA) průkazně stimulována tvorba prvního pravého listu a kořene. Po 13
měsících kultivace byly semenáče převedeny do nesterilních podmínek ex vitro. Nebyl zjištěn
vliv složení substrátu a způsobu aklimatizace (baňka/vlhký perlit) na procento uchycených a
rostoucích jedinců P. bifolia. U Amygdalus nana byla iniciována organogeneze z meristémů
vzrostných vrcholů, u Cerasus fruticosa z intaktních embryí na ½ MS živných médiích
s obsahem benzyladeninu (BA) a kyseliny indolylmáselné (IBA). Přítomnost auxinu IBA
v multiplikačním médiu měla statisticky neprůkazný vliv na počet výhonů, ale průkazně
pozitivní vliv na jejich délku. U druhu Daphne cneorum měl benzyladenin (BA) průkazně
vyšší stimulační efekt na multiplikaci výhonů než cytokinin zeatin. Byla provedena výsadba
rostlin D. cneorum, získaných z explantátových kultur na genofondové plochy. Byl zjištěn
pozitivní vliv vyšší koncentrace sacharózy na procenta klíčivosti u sterilních výsevů
Pulsatilla sp. U druhu Tofieldia calyculata měla redukce listů negativní vliv na
životaschopnost explantátů.
(H. Vejsadová, J. Šedivá)
Využití metod in vitro v procesu genetické transformace rostlin
U rostlin Rhododendron catawbiense cv. Grandiflorum byly studovány podmínky
indukce a vývoje embryogenní nebo organogenní masy a tvorby výhonů. Bylo zjištěno, že
k indukci embryogenní masy je nezbytná přítomnost cytokininu thidiazuronu (TDZ)
v koncentraci 11,4 µM při plném zásobení MS solemi a 3,5% koncentraci sacharózy. Adice
cytokininu zeatinu (4,6 µM) v koncentraci 11,4 µM statisticky významně zvýšila počet
indukovaných listových explantátů o 30 %. Průkazně nejvyšší počet výhonů byl u
regenerantů dosažen v přítomnosti thidiazuronu. Pokud bylo použito živné médium s ½
koncentrací MS solí a 6% sacharózou, byla v přítomnosti TDZ, zeatinu a auxinu 2,4-D
indukována organogeneze. Průkazně nejvyšší počet pupenů byl zjištěn u explantátů, které
byly kultivovány při koncentraci 13,6 µM TDZ. U chryzantémy Dendranthema grandiflorum
17